Вирус вакцина из штамма h

СОСТАВ И ФОРМА ВЫПУСКА
Изготовлена из вируссодержащей экстраэмбриональной жидкости СПФ-куриных эмбрионов, инфицированных вирусом болезни Ньюкасла с добавлением в качестве стабилизатора обезжиренного молока. В одной иммунизирующей (назальной) дозе содержится не менее 10 6,7 ЭИД ₅₀ вакцинного вируса. Препарат по внешнему виду представляет собой сухую пористую белую массу с однородной и мелкозернистой структурой, хорошо растворимую в воде без образования хлопьев и осадка. Выпускается в стеклянных ампулах и флаконах, содержащих от 50 до 6000 назальных доз, которые упаковывают в пластиковые коробки.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
У птиц, привитых вакциной, формируется иммунитет к возбудителю болезни Ньюкасла через 6-8 суток после иммунизации, напряженность которого должна составлять не менее 3 месяцев. Вакцина лечебными свойствами не обладает.

ПОКАЗАНИЯ
Для профилактики болезни Ньюкасла птиц в благополучных и неблагополучных хозяйствах различного направления выращивания.

ДОЗЫ И СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
Вакцину применяют птице интраназально (окулярно), перорально, методом мелкодисперсного (аэрозольно) и крупнокапельного распыления (спрей-методом). Вакцинации полежит клинически здоровая птица, независимо от ее возраста, породы, продуктивности (яйценоскости) и периода линьки. За 3-4 дня до вакцинации и в течение 5 дней после нее исключают дачу птице антибиотиков, сульфаниламидных и нитрофурановых препаратов. Оптимальные сроки вакцинации определяют по результатам РТГА или ИФА, исследуя не менее 25 проб сывороток крови от птиц, находящихся в птичнике (зале). Первое серологическое исследование проводят у цыплят в 7-10-суточном возрасте. Птицу вакцинируют, если в 20% и более проб сыворотки крови титр антигемагглютинов в РТГА будет ниже 1:8 или в ИФА — меньше двух минимальных положительных значений, установленных инструкцией по применению используемого диагностического набора. Если в 80% и более проб сывороток крови титр материнских антител к вирусу болезни Ньюкасла в РТГА 1:8 и выше, а в ИФА — больше двух минимальных значений, то птицу исследуют повторно через каждые 3-5 дней и при напряженности иммунитета менее 80% птицу прививают. Ревакцинацию цыплятпроводят, если более чем в 20 % проб сыворотки крови титр антител в РТГА меньше 3 log ₂ (1:8) или в ИФА — меньше двух минимальных положительных значений, предусмотренных инструкцией по применению используемого диагностического набора. При использовании интраназального или интраокулярного метода введения вакцину разводят из расчета на 1 иммунизирующую дозу препарата 0,1 мл стерильного 0,9% физиологического раствора (рН 7,2-7,4). Разведенную вакцину закапывают глазной пипеткой в ноздрю в объеме 0,1 мл (по 2 капли), другую при этом закрывают пальцем, чем достигается более глубокое проникновение вакцины в носовую полость. В случае закупорки носовой щели вакцину в том же объеме можно нанести на конъюнктиву глаза. После интраокулярного введения голову птицы держат в горизонтальном положении в течение 1-2 секунд. При использовании энтерального метода (выпаивание с водой) необходимо использовать свежую, чистую, свободную от ионов железа и хлора, охлажденную до комнатной температуры питьевую воду. За сутки до применения вакцины определяют объем воды, выпиваемой птицей в течение 1-1,5 ч. и рассчитывают ее объем на все прививаемое поголовье. Птиц вакцинируют из расчета 10 иммунизирующих (назальных) доз на голову. Требуемое количество доз вакцины, соответствующее числу цыплят прививаемой партии, разводят в установленном объеме воды и разливают в заранее вымытые без применения дезсредств поилки. Количество поилок должно обеспечивать свободный доступ к препарату всего иммунизируемого поголовья. При иммунизации птиц мясного направления объем воды для растворения вакцины необходимо увеличить на 50%. Для предотвращения потери активности вакцинного штамма, в воду, предназначенную для разведения вакцины, добавляют один из следующих стабилизаторов: 5% (по весу) сухого обезжиренного молока, 25% (по объёму) пастеризованного молока (обрата), 2,5% (по весу) пептона ГОСТ 13805-70, 2,5% ферментативного гидролизата мышечного сухого (ФГМ-С) – ТУ 46-12-20-80. Перед вакцинацией птицу выдерживают без воды и корма в течение 2-4 ч. Дача корма и воды птице разрешается через 1,5-2 ч. после вакцинации. При применении аэрозольного метода используются специальные генераторы, создающие мелкодисперсный аэрозоль. При аэрозольном методе иммунизации рабочее разведение препарата определяют по формуле: P.р. = (C х V х T х A)/D, где Р.р. — рабочее разведение вакцины; С — концентрация аэрозоля вируса (в мг/л) в помещении, величина, которой составляет: 0,1 — в недостаточно герметизированных птичниках (щели в окнах и дверях, небольшая тяга через приточную вентиляцию) и 0,2 — в удовлетворительно герметизированных помещениях (щели в окнах, недостаточно подогнанные окна, двери, люки вентиляционных шахт), 0,3 — в хорошо герметизированных условиях (тщательно подогнанные окна, двери, люки вентиляционных шахт, отсутствие щелей). В плохо герметизированных птичниках аэрозольную вакцинацию не проводят. V — легочной объем, л/мин. Его рассчитывают по формуле: V = 0,78 х m – 16/1000, где 0,78 см 3 /мин. на 1 г — объем дыхания, приходящийся на 1 г массы птицы; m — средняя масса птицы (среднюю массу определяют взвешиванием 30 птиц, взятых из отдельных мест птичников), г; 16 — постоянный коэффициент; 1000 — перевод см 3 в литры. Далее по 1 первой формуле: Т — время воздействия аэрозоля на птиц, которое не должно превышать 20 минут. Экспозиция иммунизации отсчитывается через 2-3 мин. с начала работы аэрозольных генераторов. В жаркие дни иммунизацию птиц проводят в ранние утренние часы при температуре воздуха в птичнике не более 20-22 ºС, а экспозицию сокращают до 10 мин., уменьшая при этом степень разведение вакцины в 2 раза; А — инфекционная активность вакцинного вируса (lg ЭИД ₅₀ /см 3 ), которая должна быть определена предварительно перед проведением иммунизации и пересчитана в lg ЭИД ₅₀ /мг; D — иммунизирующая доза штамма Ла-Сота составляет для цыплят в возрасте до 30 суток — 600 ЭИД ₅₀ , для птиц старше месячного возраста: 1000-1200 ЭИД ₅₀ . Пример: инфекционная активность вируса 9,0 lg ЭИД ₅₀ /см 3 или 6,0 lg ЭИД ₅₀ /мг (1.000.000 ЭИД ₅₀ /мг). Концентрация аэрозоля в птичнике 0,1 мг/л. Экспозиция: 20 мин. Легочный объем — 0,2 л/мин. Доза вируса для цыплят старше 30-суточного возраста: 1000 ЭИД ₅₀ . Р. р. = 0,1 х 0,2 х 20 х 1000000/1000 = 400, т. е. 1 см 3 вакцинного вируса необходимо развести 1:400. Общий объем лиофилизированного вируса, который необходимо взять для приготовления рабочего разведения в конкретном птичнике определяют, исходя из его объема (см 3 ) и рабочего разведения вируса. Пример: объем птичника 5000 м 3 , рабочее разведение вируса 1:400. Расход рабочего разведения вируса составляет 1 см 3 на 1 м 3 птичника. Таким образом, для данного птичника потребуется 5250 см 3 рабочего разведения вируса (5000 + 5% на остаток в генераторе аэрозолей). Количество лиофилизированного вируса составит 13,1 см 3 (5250:400). Для приготовления рабочего разведения, берут вакцину не менее чем из трех ампул или флаконов, взятых из разных коробок (даже, если по расчету требуется один флакон или ампула), но используют то количество вируса, которое требуется для распыления в птичнике данного объема. Вакцину растворяют в чистой дистиллированной или кипяченой, охлажденной до комнатной температуры воде с 5% (по весу) пастеризованного сухого обезжиренного молока или 10% (по объему) химически чистого глицерина. Аэрозольную вакцинацию проводят с помощью генераторов аэрозолей, которые заправляют приготовленным разведением вируса посредством мерного цилиндра. Размещение генераторов и режим работы определяют в соответствии с руководством (наставлением) по их эксплуатации. До подключения генератора аэрозолей к источнику сжатого воздуха поднимают брудера, закрывают окна, двери и вентиляционные люки, продувают шланги, выключают приточно-вытяжную вентиляцию. Время с момента выключения приточной и вытяжной вентиляции до начала работы генераторов не должно превышать 5 мин. По истечении времени вакцинации генераторы аэрозолей выключают, птичники проветривают (открывают люки вентиляционных систем, а в теплое время года — еще окна, двери и включают приточно-вытяжную вентиляцию). Входить в птичник можно не ранее, чем через 10 мин. от начала проветривания. Метод крупнодисперсного распыления вакцины (спрей-метод) рекомендуется при угрозе раннего инфицирования поголовья вирусом болезни Ньюкасла. Цыплят иммунизируют, начиная с суточного возраста, независимо от уровня материнских антител. Вакцину растворяют в чистой прохладной воде, свободной от ионов железа и хлора из расчета 1000 доз препарата на 0,25-0,5 л воды. Вакцинацию проводят при помощи специальных распылителей, генерирующих монодисперсные частицы диаметром 0,2-0,3 мм. Для исключения погрешностей в иммунизации рекомендуется предварительно определить производительность используемого распылителя путем разбрызгивания расчетного количества чистой воды без вакцины. В птичнике уменьшают яркость освещения, что успокаивает птицу и способствует ее скучиванию, отключают систему вентиляции. Цыплят суточного возраста помещают в спрей-кабины или ящики, которые плотно устанавливают в один ряд. Вакцину разбрызгивают над соответствующим количеством цыплят с расстояния 30-40 см. Показателем правильно проведенной иммунизации является равномерное увлажнение перьевого покрова у цыплят. Включают систему вентиляции и восстанавливают уровень освещения через 30 мин. после окончания иммунизации. Следует избегать нарушений схем проведения вакцинации, поскольку это может привести к снижению эффективности иммунопрофилактики против болезни Ньюкасла. В случае пропуска очередного введения вакцины необходимо провести иммунизацию как можно скорее.

ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ
В случаях передозировки вакцины, применяемой аэрозольным методом, на 4-5 день у молодняка могут наблюдаться недомогание, одышка, снижение аппетита, может увеличиваться падеж. Эти явления исчезают к 10-12 дню после вакцинации. У взрослых птиц поствакцинальная реакция, как правило, не проявляется.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ
Не допускается вакцинация больной, подозрительной в заболевании и истощенной птицы. Не следует проводить вакцинацию совместно с другими живыми иммунобиологическими препаратами (кроме спрей-вакцинации совместно с вакциной против инфекционного бронхита кур), а также иммунизацию цыплят другими вакцинами в течение 7 суток после очередной прививки.

ОСОБЫЕ УКАЗАНИЯ
Продукция, полученная от вакцинированных птиц, реализуется без каких-либо ограничений. Белковые компоненты вакцины особенно при аэрозольном применении обладают индивидуальным аллергизирующим действием, поэтому лица, участвующие в проведении вакцинации, должны использовать спецодежду (резиновые сапоги, халат, брюки, головной убор и резиновые перчатки), а также очки закрытого типа. К участию в проведении вакцинации не допускаются лица с признаками респираторных, желудочно-кишечных, кожных и аллергических заболеваний. Во время вакцинации запрещается принимать пищу, пить и курить. После работы следует принять душ, тщательно вымыть руки с мылом и переодеться. При попадании вакцины на кожу и слизистые оболочки, их рекомендуется промыть большим количеством водопроводной воды. В случае разлива вакцины, участок пола или почвы в этом месте заливают 5% раствором хлорамина или едкого натрия.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
В сухом, темном, недоступном для детей и животных месте, в упаковке производителя. Отдельно от пищевых продуктов и кормов при температуре от 4 до 8 ºС. Срок годности — 12 месяцев. Флаконы или ампулы с вакциной без этикеток, с истекшим сроком годности, с нарушением целостности, с измененным цветом и консистенцией содержимого, с наличием посторонних примесей, а также остатки вакцины, не использованные в течение 4 часов после вскрытия, подлежат выбраковке и кипячению в течение 30 минут или обработке 2% раствором щелочи, или 5% раствором хлорамина (1:1) в течение 30 минут с последующей утилизацией.

по применению вирусвакцины против ньюкаслской болезни

I. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

По внешнему виду вакцина представляет собой сухую пористую белую массу однородной, мелкозернистой структуры, хорошо растворимую в воде без образования хлопьев и осадка.

Вакцина расфасована во флаконы (ампулы) по 0,5 - 4,0 см3 (50,назальных доз) соответствующей вместимости. Флаконы укупорены резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками, ампулы герметично запаяны под вакуумом.

3. Флаконы (ампулы) упакованы в полистироловые блистеры или картонные коробки с наличием гнёзд или перегородок, обеспечивающих их неподвижность и целостность.

В каждый блистер (коробку) с вакциной должна быть вложена инструкция по применению вакцины.

Срок годности вакцины - 12 месяцев с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности вакцина к применению не пригодна.

4. Вакцину хранят и транспортируют в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей месте при температуре от 4°С до 8°С.

5. Вакцину следует хранить в местах, недоступных для детей.

6. Флаконы (ампулы) с вакциной без этикеток, с истекшим сроком годности, с нарушением целостности или герметичности укупорки, с изменённым цветом и консистенцией содержимого, с наличием посторонних примесей, а также остатки вакцины, не использованной в течение 4 ч после вскрытия флаконов (ампул), подлежат выбраковке и обеззараживанию путём кипячения в течение 30 мин. или обработке 2% раствором щелочи или 5% раствором хлорамина в течение 30 мин.

Утилизация обеззараженной вакцины не требует соблюдения специальных мер предосторожности.

II. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

7. Вакцина вызывает формирование иммунного ответа к возбудителю ньюкаслской болезни через 6-8 суток после применения, который сохраняется в течение 3 мес.

В одной иммунизирующей (назальной) дозе содержится не менее 106,7 ЭИД50 вакцинного вируса.

Вакцина лечебными свойствами не обладает.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ

Вакцинации подлежит птица, независимо от её возраста, породы, продуктивности и периода линьки.

9. Не допускается вакцинация больной, подозрительной в заболевании и истощенной птицы.

10. Вакцину применяют: интраназально (интраокулярно), энтерально, аэрозольно и методом крупнодисперсного распыления (спрей-методом).

Оптимальные сроки вакцинации определяют по результатам РТГА или ИФА, исследуя не менее 25 проб сывороток крови от птиц, находящейся в птичнике (зале).

Первое серологическое исследование проводят у цыплят в 7-10 суточном возрасте. Птицу вакцинируют, если в 20% и более проб сыворотки крови титр антигемагглютинов в РТГА ниже 1:8 или ИФА меньше двух минимальных положительных значений, установленных инструкцией по применению используемого диагностического набора. Если в 80 % и более проб сывороток крови титр материнских антител к вирусу НБ в РТГА 1:8 и выше, а в ИФА – больше двух минимальных значений – птицу исследуют повторно через каждые 3-5 дней и при напряжённости иммунитета менее 80% птицу прививают.

Ревакцинацию цыплят осуществляют, если более чем в 20 % проб сыворотки крови титр антител в РТГА меньше 3 log2 (1:8) или в ИФА – меньше двух минимальных положительных значений, предусмотренных инструкцией по применению используемого диагностического набора.

Интраназальный (интраокулярный) метод

Вакцину разводят из расчета: на 1 иммунизирующую дозу препарата 0,1 см3 стерильного 0,9% физиологического раствора (рН 7,2-7,4). Разведённую вакцину закапывают глазной пипеткой в ноздрю в объёме 0,1 см3 (2 капли), другую при этом закрывают пальцем, чем достигается более глубокое проникновение препарата в носовую полость. В случае закупорки носовой щели вакцину в том же объёме наносят на конъюнктиву глаза. После интраокулярного введения голову цыпленка держат в горизонтальном положении в течение 1-2 секунд.

Для подготовки и применения вакцины необходимо использовать свежую, чистую, свободную от ионов железа и хлора, охлаждённую до комнатной температуры питьевую воду.

За сутки до применения вакцины определяют объём воды, выпиваемой птицей в течение 1-1,5 ч и рассчитывают её объём на всё прививаемое поголовье.

Птиц вакцинируют из расчёта 10 иммунизирующих (назальных) доз на голову.

Требуемое количество доз вакцины, соответствующее числу цыплят прививаемой партии, разводят в установленном объёме воды и разливают в заранее вымытые без применения дезсредств поилки.

Количество поилок должно обеспечивать свободный доступ к препарату всего иммунизируемого поголовья.

При иммунизации птиц мясного направления объём воды для растворения вакцины необходимо увеличить на 50%.

Для предотвращения потери активности вакцинного вируса в воду, предназначенную для разведения вакцины, целесообразно добавить один из следующих стабилизаторов: 5% (по весу) сухого обезжиренного молока, 25% (по объёму) пастеризованного молока (обрата), 2,5% (по весу) пептона ГОСТ , 2,5% ферментативного гидролизата мышечного сухого (ФГМ-С) – ТУ .

Перед вакцинацией птицу выдерживают без воды и корма в течение 2-4 ч.

Дача корма и воды птице разрешается через 1,5 – 2 ч после вакцинации.

Аэрозольную вакцинацию проводят под руководством врача, освоившего этот метод, используя генераторы, создающие мелкодисперсный аэрозоль.

При аэрозольном методе иммунизации рабочее разведение препарата определяют по формуле:

Р. р. - рабочее разведение вакцины;

С - концентрация аэрозоля вируса (мг/л) в помещении, величина, которой составляет: 0,1 - в недостаточно герметизированных птичниках (щели в окнах и дверях, небольшая тяга через приточную вентиляцию) и 0,2 - в удовлетворительно герметизированных помещениях (щели в окнах, недостаточно подогнанные окна, двери, люки вентиляционных шахт); 0,3 – в хорошо герметизированных условиях (тщательно подогнанные окна, двери, люки вентиляционных шахт, отсутствие щелей). В плохо герметизированных птичниках аэрозольную вакцинацию проводить запрещается.

V - лёгочной объём, л/мин, который рассчитывают по формуле:

0,78 см3/мин г - объём дыхания, приходящийся на 1 г массы птицы;

m - средняя масса птицы (среднюю массу определяют взвешиванием 30 птиц, взятых из отдельных мест птичников), г;

16 - постоянный коэффициент;

1000 - перевод см3 в л.;

Т - время воздействия аэрозоля на птиц, которое не должно превышать 20 минут. Экспозиция иммунизации отсчитывается через 2-3 мин с начала работы генераторов аэрозолей. В жаркие дни иммунизацию птиц проводят в ранние утренние часы при температуре воздуха в птичнике не более 20 – 22ºС и экспозицию сокращают до 10 минут, уменьшая при этом степень разведение вакцины в 2 раза;

А - инфекционная активность вакцинного вируса (lg ЭИД50/см3), которая должна быть определена предварительно перед проведением иммунизации и пересчитана в lg ЭИД50/мг;

Инфекционная активность вируса 9,0 lg ЭИД50/см3 или 6,0 lg ЭИД50/мг (1.000.000 ЭИД50/мг);

Концентрация аэрозоля в птичнике 0,1 мг/л. Экспозиция – 20 мин. Лёгочный объём – 0,2 л/мин. Доза вируса для цыплят старше 30-суточного возраста – 1000 ЭИД50.

Р. р. = 0,1 · 0,2 ·20 ·1000000 = 400,

Т. е. 1 см3 вакцинного вируса необходимо развести 1:400.

Общий объём лиофилизированного вируса, который необходимо взять для приготовления рабочего разведения в конкретном птичнике определяют, исходя из его объёма (см3) и рабочего разведения вируса.

Пример: объём птичника 5000 м3, рабочее разведение вируса 1:400.

Расход рабочего разведения вируса составляет 1 см3 на 1 м3 птичника.

Таким образом, для данного птичника потребуется 5250 см3 рабочего разведения вируса (5000 + 5 % на остаток в генераторе аэрозолей). Количество лиофилизированного вируса составит 13,1 см3 (5250:400).

Для приготовления рабочего разведения, берут вакцину не менее чем из трёх ампул (флаконов), взятых из разных коробок (даже, если по расчету требуется один флакон (ампула), но используют то количество вируса, которое требуется для распыления в птичнике данного объёма.

Вакцину растворяют в чистой дистиллированной или кипяченой, охлажденной до комнатной температуры, воде с 5 % (по весу) пастеризованного сухого обезжиренного молока или 10 % (по объёму) химически чистого глицерина.

Аэрозольную вакцинацию проводят с помощью генераторов аэрозолей, которые заправляют приготовленным разведением вируса посредством мерного цилиндра.

Размещение генераторов и режим работы определяют в соответствии с руководством (наставлением) по их эксплуатации.

До подключения генератора аэрозолей к источнику сжатого воздуха поднимают брудера, закрывают окна, двери и вентиляционные люки, продувают шланги, выключают приточно-вытяжную вентиляцию.

Время с момента выключения приточной и вытяжной вентиляции до начала работы генераторов не должно превышать 5 минут.

По истечении времени вакцинации генераторы аэрозолей выключают, птичники проветривают (открывают люки вентиляционных систем, а в теплое время года - также окна и двери и включают приточно-вытяжную вентиляцию).

Входить в птичник можно не ранее, чем через 10 мин от начала проветривания.

Метод крупнодисперсного распыления вакцины (спрей - метод)

Метод крупнодисперсного распыления вакцины рекомендуется при угрозе раннего инфицирования поголовья вирусом НБ. Цыплят иммунизируют, начиная с суточного возраста независимо от уровня материнских антител.

Вакцину растворяют в чистой прохладной воде, свободной от ионов железа и хлора из расчета 1000 доз препарата на 0,25-0,5 л воды.

Вакцинацию проводят при помощи специальных распылителей, генерирующих монодисперсные частицы диаметром 0,2-0,3 мм.

Для исключения погрешностей в иммунизации рекомендуется предварительно определить производительность используемого распылителя путём разбрызгивания расчетного количества чистой воды без вакцины.

В птичнике уменьшают яркость освещения, что успокаивает птицу и способствует её скучиванию и отключают систему вентиляции. Цыплят суточного возраста помещают в спрей - кабины или ящики, которые плотно устанавливают в один ряд. Вакцину разбрызгивают над соответствующим количеством цыплят с расстояния 30-40 см. Показателем правильно проведённой иммунизации является равномерное увлажнение перьевого покрова цыплят.

Включают систему вентиляции и восстанавливают уровень освещения через 30 мин после окончания иммунизации.

11. При передозировке вакцины, применяемой аэрозольным методом, на 4-5 день у молодняка могут наблюдаться недомогание, одышка, снижение аппетита, несколько увеличивается падеж. Эти явления исчезают к 10-12 дню после вакцинации. У взрослых птиц поствакцинальная реакция, как правило, не проявляется.

При интраназальном (интраокулярном), энтеральном применении вакцины и спрей-методе в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений не наблюдается.

12. Особенностей действия препарата при первом его применении или ревакцинации не установлено.

13. Следует избегать нарушений схем проведения вакцинации, поскольку это может привести к снижению эффективности иммунопрофилактики ньюкаслской болезни. В случае пропуска очередного введения вакцины не6обходимо провести иммунизацию как можно скорее.

14. При применении вакцины в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений и осложнений как правило не отмечается.

16. Продукты убоя, яйцо и мясо от вакцинированной птицы реализуют без ограничения независимо от сроков вакцинации.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

17. При проведении вакцинации необходимо соблюдать общие правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами ветеринарного назначения.

18. Белковые компоненты вакцины особенно при аэрозольном применении обладают индивидуальным аллергизирующим действием, поэтому сотрудники, осуществляющие вакцинацию, должны быть в комбинезонах или халатах, сапогах, колпаках или косынках, а также иметь защитные очки, резиновые перчатки и марлевые повязки. На рабочем месте запрещается принимать пищу, пить и курить. После работы следует принять душ, тщательно вымыть руки с мылом, переодеться. В местах работы должна быть аптечка первой доврачебной помощи.

К участию в проведении вакцинации не допускаются лица с признаками респираторных, желудочно-кишечных, кожных и аллергических заболеваний.

19. При попадании вакцины на кожу и слизистые оболочки рекомендуется промыть это место большим количеством водопроводной воды. В случае разлива вакцины, заражённый участок пола или почвы заливают 5% раствором хлорамина или 2% раствором едкого натрия.

Часто говорят, что специалисты предсказывают или пытаются угадать штаммы гриппа на следующий сезон. Это не так. Реальность одновременно проще и сложнее. Разберемся.

Под эгидой ВОЗ существует так называемая Global Influenza Surveillance and Response System (GISRS). В эту систему входят 143 National Influenza Centers (NICs) в 113 странах. Они каждый год анализируют двести-триста тысяч образцов от людей с респираторными инфекциями. Из них несколько тысяч образцов идут на более детальный анализ в один из шести WHO Collaborative Centers (CCs), расположенных в США, Китае, Австралии, Англии, Японии.

1. Первичная диагностика
Первым делом NICs делают ПЦР-анализ на присутствие в образце вируса гриппа. Понятно, что далеко не каждая респираторная инфекция является гриппом, см. мой старый пост Думаете у вас грипп?
По Штатам картинка получается примерно вот такая:

2. Выделение вируса и первичный анализ
Если ПЦР анализ дает положительный результат на вирус гриппа, то центр пытается выделить вирус, либо выращивая его в яйцах, либо в клеточной культуре. Для дальнейшего анализа вируса нужно вырастить его в некотором количестве. Это непростой процесс и из многих образцов выделить вирус не удается.

Для "птичьего гриппа" гриппа делается исключение. Он считается особо-опасным патогеном и поэтому его выделять и выращивать можно только в специальных центрах, NICs его не выращивают.

ВОЗ бесплатно предоставляет каждому центру набор антител, который можно использовать для того, чтобы определить к какому типу относится выделенный вирус (А или B), и если это А, то определяются варианты гемагглютинина (HA) и нейраминидазы (NA).

Лирическое отступление: Иногда приходится видеть (особенно разные безграмотные антивакцинаторы к этому склонны), что люди совершенно неправильно понимают систематизацию вирусов. Они считают, что сочетание H1N1 или H5N1 совершенно однозначно определяют вирус. Поэтому для них звучит странно "новый H5N1 вирус" - какой же он новый, если H5N1 был описан еще 40 лет назад? Между тем H1 или H5 означают лишь принадлежность одного гена в вирусе к определенному семейству. Внутри семейства H1 выделяется десяток геногрупп (и время от времени появляются новые). Внутри каждой геногруппы (например 6) выделяются под-геногруппы (6А, 6B, 6C. ). Внутри каждой под-геногруппы существует постоянно-меняющееся разнообразие вирусов. Практически каждый штамм уникален и отличается от других штаммов. Различия между штаммами небольшие, между под-группами побольше, между группами еще больше, а между семействами самые большие. Поэтому вирус вполне может быть H1, но при этом совершенно новым. В дополнение к этому, помимо генов H и N, у гриппа есть еще пять генов, которые в данной классификации даже не упоминаются.

Протипировав выращенные вирусы, NICs отбирают образцы для того, чтобы послать их в WHO CCs. Отбирают их по двум критериям - центры стараются, во-первых, выбрать вирусы наиболее "типичные" для их местности, а во-вторых, наиболее "необычные" - которые плохо реагируют с присланными от ВОЗ антителами, что говорит о том, что в ВОЗ этих вирусов скорее всего еще нет.

Следующие стадии проходят в WHO CCs.

3. Получение сыворотки в хорьках
Хорьки легко заражаются гриппом и хорошо вырабатывают к нему антитела. Настолько хорошо, что для этого анализа хорьков приходится выращивать в супер-стерильных условиях BSL3 (иначе они подхватывают дикий грипп). Хорьков заражают присланными штаммами гриппа и потом берут из них сыворотку крови. По этой сыворотке мы можем судить насколько "похожи" друг на друга два варианта вируса гриппа. Если антитела из хорька, зараженного вирусом А, хорошо реагируют с вирусом Б, то эти два вируса иммунологически очень похожи друг на друга. Если плохо - то они сильно друг от друга отличаются. Если вирусы антигенно похожи друг на друга, то вакцина против одного из них с большой вероятностью защитит и от другого.

Таким образом можно не только сравнить друг с другом штаммы из свежих образцов, но и посмотреть насколько свежие штаммы похожи на штаммы из прошлых лет и на штаммы из прошлых вакцин.

Получающийся набор попарных сравнений существует в N-мерном пространстве, но для наглядности и с некоторым упрощением его можно показать на двумерном графике, например вот так:

Эту карты антигенности можно использовать для подбора штамма для вакцины. Общий принцип таков, что мы хотим выбрать штаммы, которые находятся как можно ближе к центру распределения, потому что иммунный ответ на них даст защиту против наибольшего количества других штаммов. Но при этом нужно учитывать и другие факторы, о которых сейчас и пойдет речь.

4. Генетический анализ
Схожесть двух штаммов по вызываемому иммунному ответу не обязательно означает близкую родственность штаммов, а большие различия не обязательно означают что штаммы давно имели общего предка. Для того, чтобы лучше понимать, что именно происходит в популяции вирусов гриппа, часть штаммов секвинируют и строят филогенетические деревья. В идеале антигенная карта должна хорошо согласовываться с филогенетическим деревом. Если есть серьезные расхождения, например, если окажется, что какой-то штамм антигенно близок к другим штаммам, но генетически сильно от них отличается, то ему следует уделить особое внимание. Он может повести себя не так, как штаммы окружающие его на антигенной карте и антигенно быстро измениться в сторону от остальных.

5. Анализ человеческой сыворотки
Принцип антигенного анализа, описанный выше для сывороток хорьков, можно применить и к человеческим образцам сыворотки. WHO CC собирают образцы сыворотки крови от взрослых и от детей, привитых прошлыми вакцинами, а также от переболевших гриппом в прошлые года. Сделав анализ на реакцию этой сыворотки с новыми штаммами гриппа, можно определить насколько эти люди будут защищены от новых штаммов. Влияние этой информации на выбор штамма для новой вакцины двоякое. С одной стороны, если мы видим, что вакцина использованная в предыдущем году хорошо защищает от штаммов этого года, то можно опять выбрать этот же штамм. С другой стороны, можно считать, что большая доля популяции уже и так защищена от части циркулирующих штаммов и отдать предпочтение отличающемуся штамму, который даст защиту от штаммов, от которых предыдущая вакцина не защищает. Я не уверен, какой из этих факторов важнее, и думаю, что однозначного ответа тут нет. Все зависит от конкретных обстоятельств и от мнений конкретных экспертов.

Все вышеперечисленные данные собираются круглый год. В феврале эксперты ВОЗ рассматривают все собранные данные и на их основании выбирают штаммы для вакцины. Выбор штамма это не попытка предсказать будущее - на сегодняшний день у нас нет моделей, которые бы даже грубо могли бы предсказать какие штаммы будут ходить в популяции через 8-10 месяцев. В лучшем случае это линейная апроксимация по последним данным, и в этом смысле этот процесс гораздо проще "предсказания". Но при этом, как должно быть ясно из описанного выше, выбор штаммов для вакцины основан не просто на распространенности штаммов, но и на анализе антигенной схожести или отличия между штаммами и вакцинами, и этот аспект делает всю процедуру намного сложнее, чем "предсказание" того, какие штаммы будут циркулировать.