Выявление гепатита с эколаб
3.1. Лабораторная диагностика гепатита C проводится серологическим и молекулярно-биологическим методами исследования.
3.2. Серологическим методом в сыворотке крови определяют наличие anti-HCV IgG. Для подтверждения положительного результата обязательным является определение антител к индивидуальным белкам вируса гепатита C (core, NS3, NS4, NS5).
3.3. Выявление иммуноглобулинов класса M к вирусу гепатита C в качестве маркера острой инфекции неинформативно, поскольку антитела данного класса могут отсутствовать при острой форме заболевания и обнаруживаться при ХГС.
3.4. Молекулярно-биологическим методом в сыворотке крови определяют РНК вируса гепатита C.
3.5. У лиц с иммунодефицитом (больные онкологическими заболеваниями, пациенты на гемодиализе, пациенты, находящиеся на лечении иммунодепрессантами и другие), а также в раннем периоде ОГС (до 12 недель после заражения) anti-HCV IgG могут отсутствовать. В данных группах пациентов диагностика гепатита C проводится с помощью одновременного выявления anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C.
3.6. Контингенты, подлежащие обязательному обследованию на наличие anti-HCV IgG, приведены в приложении 1к настоящим санитарным правилам.
3.7. Лица, у которых выявлены anti-HCV IgG, подлежат обследованию на наличие РНК вируса гепатита C.
3.8. Контингенты, подлежащие обязательному обследованию на наличие anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C приведены в приложении 2к настоящим санитарным правилам.
3.9. Диагноз ОГС или ХГС подтверждается только при выявлении в сыворотке (плазме) крови РНК вируса гепатита C с учетом данных эпидемиологического анамнеза и результатов клинико-лабораторных исследований (активность аланин- и аспартатаминотрансферазы, концентрация билирубина, определение размеров печени и другие).
3.10. Подтверждение диагноза должно проводиться в сроки, не превышающие 14 суток, для обеспечения своевременного проведения профилактических, противоэпидемических и лечебных мероприятий.
3.11. Лица с anti-HCV IgG в сыворотке (плазме) крови при отсутствии у них РНК вируса гепатита C подлежат динамическому наблюдению в течение 2 лет и обследованию на наличие anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C не реже одного раза в 6 месяцев.
3.12. Диагностика гепатита C у детей в возрасте до 12 месяцев, рожденных от инфицированных вирусом гепатита C матерей, проводится в соответствии с пунктом 7.6настоящих санитарных правил.
3.13. Выявление в сыворотке (плазме) крови anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C серологическими и молекулярно-биологическими методами исследования проводится в соответствии с действующими нормативными и методическими документами.
3.14. Экспресс-тесты, основанные на определении антител к вирусу гепатита C в слюне (соскоб со слизистой десен), сыворотке, плазме или цельной крови человека, могут применяться в клинической практике для быстрого ориентировочного обследования и принятия своевременных решений в экстренных ситуациях.
В медицинских организациях исследование на наличие антител к вирусу гепатита C с применением экспресс-тестов должно сопровождаться обязательным дополнительным исследованием сыворотки (плазмы) крови пациента на наличие anti-HCV IgG, а при необходимости — одновременным обследованием на наличие anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C классическими серологическими и молекулярно-биологическими методами. Выдача заключения о наличии или отсутствии антител к вирусу гепатита C только по результатам экспресс-теста не допускается.
Области применения экспресс-тестов включают следующие, но не ограничиваются ими:
— трансплантология — перед забором донорского материала;
— донорство — обследование крови, в случае экстренного переливания препаратов крови и отсутствия обследованной на антитела к вирусу гепатита C донорской крови;
— приемное отделение медицинской организации — при поступлении пациента для экстренных медицинских вмешательств.
3.15. Для выявления маркеров инфицирования вирусом гепатита C должны использоваться диагностические препараты, разрешенные к применению на территории Российской Федерации в установленном порядке.
3.16. В документе, выдаваемом лабораторией по результатам исследования на anti-HCV IgG и РНК вируса гепатита C, в обязательном порядке указывается наименование тест-системы, с помощью которой проводилось данное исследование.
Описание
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/09794 от 30.12.10. г. ИФА -ВГС комплект №3
Комплект № 3 для подтверждения наличия антител к антигенам вируса гепатита С
Подтверждение наличия выявленных при скрининге антител классов G и M к отдельным антигенам ВГС в сыворотке (плазме) крови и препаратах крови человека, методом непрямого иммуноферментного анализа (ИФА) на твердофазном носителе.
Базовый вариант комплекта включает:
| Иммуносорбент | рекомбинантные антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3, NS4, NS5) областями генома ВГС, сорбированные двумя группами – core-антиген и NS (NS3+ NS4 + NS5) в лунках стрипов полистироловых планшетов с плоским дном для ИФА по 6 стрипов, по краю стрипов нанесена маркировка в виде полос: на стрипах с core-Ag – красного цвета, на стрипах с NS-Ag – синего цвета.
Стрипы упакованы раздельно в пакеты из пленки полиэтиленовой. | core – 6 стр.
NS – 6 стр. |
| Контрольный положительный образец (К + ) | инактивированный; прозрачная или со слабой опалесценцией жидкость малинового цвета | 1 фл. (0,5 мл) |
| Контрольный отрицательный образец (К – ) | инактивированный; прозрачная или со слабой опалесценцией жидкость синего цвета | 1 фл. (1,0 мл) |
| Конъюгат | антитела диагностические против IgG и IgM человека с пероксидазой хрена; прозрачная жидкость красного цвета | 1 фл. (1,0 мл) |
| 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином [ФСБ-Т(х25)] | прозрачная или слегка опалесцирующая, бесцветная, пенящаяся жидкость; возможно выпадение осадка солей, растворяющегося при температуре 37 ºС в течение 30 мин | 1 фл. (40 мл) |
| Раствор для разведения образцов (РРО) | опалесцирующая жидкость сине-фиолетового или красного цвета, допускается выпадение незначительного осадка | 1 фл. (12 мл)
1фл. (6,0 мл) |
| Раствор для разведения конъюгата (РРК) | опалесцирующая жидкость, бесцветная или с желтоватым оттенком, допускается выпадение незначительного осадка | 1 фл. (13 мл) |
| Цитратный буферный раствор с перекисью водорода (ЦБР) | прозрачная, бесцветная жидкость | 1 фл. (13 мл) |
| Хромоген (ТМБ) | раствор тетраметилбензидина; прозрачная жидкость, бесцветная или с желтоватым оттенком или розового цвета | 1 фл. (1,3 мл) |
| Стоп-реагент | прозрачная, бесцветная жидкость | 1 фл. (12,5 мл) |
Примечания. 1. Набор включает все реагенты, необходимые для постановки ИФА, кроме очищенной (дистиллированной или деионизированной) воды.
Набор может быть дополнительно укомплектован:
вспомогательными пластиковыми емкостями (4 шт.);
одноразовыми наконечниками для автоматических пипеток (16 шт.);
клейкой пленкой для планшетов (4 шт.).
Компоненты набора упакованы в коробку, в коробку вложена инструкция по применению.
По желанию потребителя базовая комплектация набора (число индивидуальных упаковок с реагентами и их объемы) может быть изменена.
Базовый вариант комплекта рассчитан на исследование 48 образцов, включая контрольные (на контрольные образцы используется 6 лунок – по 3 лунки на стрип).
Предусмотрена возможность проведения раздельных исследований с использованием необходимого количества стрипов:
| Кол-во стрипов
одной группы/всего | 1/2 | 2/4 | 3/6 | 4/8 | 5/10 | 6/12 |
| Число исследуемых образцов | 1-5 | 6-13 | 14-21 | 22-29 | 30-37 | 38-45 |
Основой тест-системы являются раздельно иммобилизованные на поверхности лунок антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3, NS4,NS5) областями генома ВГС.
Тест-система выявляет антитела к разным антигенам ВГС в сыворотке (плазме) крови человека вследствие их взаимодействия с антигенами, иммобилизованными на поверхности лунок планшета. Образующиеся комплексы антиген-антитело обнаруживаются с помощью конъюгата – антител против иммуноглобулинов человека, связанных с пероксидазой хрена.
Диагностическая специфичность и чувствительность 100 % при проверке на сыворотках стандартной панели ОСО 42-28-310-02П.
ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Образцы до исследования могут храниться при температуре от 2 до 8 о С до 7 сут.; более длительное хранение (до трех месяцев) – при температуре не выше минус 20 о С. Повторное замораживание образцов не допускается.
Образцы, содержащие частицы фибрина или иные видимые глазом примеси, перед исследованием осветлить центрифугированием (10-15 мин при 2500-3000 об/мин).
Для исследования образцов иммуноглобулинов человека исходные растворы развести ФСБ-Т в соотношении 1:10, лиофильно высушенные препараты крови предварительно восстановить согласно инструкции по их применению, затем развести ФСБ-Т в соотношении 1:10.
Для исключения ложноположительных результатов не рекомендуется анализировать сыворотки с микробным проростом, гемолизом, повышенным содержанием липидов.
Потенциальный риск применения набора – класс 3 (Приказ МЗ РФ №4н от 6 июня 2012 г.).
С контрольными и исследуемыми образцами необходимо обращаться как с потенциально инфицированным материалом.
Стоп-реагент при попадании на незащищенную кожу и слизистые может вызывать химические ожоги. В случае попадания на кожу – немедленно промойте пораженный участок водой.
- Оборудование, материалы и реагенты
Дозаторы пипеточные (пипетки полуавтоматические одно- и многоканальные переменного объема) для внесения реагентов в лунки планшета с погрешностью дозирования не более 5 % с наконечниками полипропиленовыми одноразовыми.
Ручные, или автоматические промыватели, или восьми- и двенадцатиканальные пипеточные дозаторы для промывания лунок планшета.
Спектрофотометр вертикального сканирования для измерения оптической плотности в лунках планшета при 450 нм и/или в двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620-650 нм.
Центрифуга лабораторная на 2,5-3,0 тыс. об/мин, термостат на 37 о С, холодильник бытовой, фильтровальная бумага.
Вода очищенная (дистиллированная или деионизированная).
70 %-ный раствор спирта этилового или растворы иных дезинфектантов, разрешенных к применению СП 1.32322-08.
Все реагенты до начала анализа должны быть выдержаны не менее 30 мин при температуре от 18 до 25 о С. Иммуносорбент выдерживать в упакованном виде, для того чтобы избежать конденсации влаги внутри лунок.
2.1. Приготовление раствора для отмывки планшетов (ФСБ-Т)
При выпадении осадка солей в ФСБ-Т(х25) его необходимо прогреть перед разведением в термостате при 37ºС до полного растворения осадка.
ФСБ-Т(х25) развести водой очищенной в 25 раз, используя объемы концентрата и воды очищенной, указанные в табл. 1 для заданного числа стрипов
| Кол-во стрипов | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| ФСБ-Т(х25), мл | 7 | 13 | 20 | 27 | 33 | 40 |
| Вода очищ., мл | до 175 | до 325 | до 500 | до 675 | до 825 | до 1000 |
Раствор хранить при температуре от 2 до 8 о С не более 14 сут.
Раствор готовить за 10-20 мин до внесения в лунки планшета.
Конъюгат развести в РРК, используя объемы конъюгата и РРК, указанные в табл. 2 для заданного числа стрипов. Необходимый объем РРК перенести в одноразовую емкость и добавить конъюгат в указанном количестве, тщательно перемешать.
| Кол-во стрипов | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| РРК, мл | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| Конъюгат, мкл |
Объем конъюгата, вносимый в РРК; указывается для каждой серии тест-системы.
Стабильность рабочего разведения конъюгата при температуре от 18 до 25 о С не более 6 ч.
Готовить непосредственно перед использованием, избегая попадания прямых солнечных лучей.
ТМБ развести в ЦБР, используя объемы ТМБ и ЦБР, указанные в табл. 3 для заданного числа стрипов. Необходимый объем ЦБР перенести в одноразовую емкость и добавить ТМБ в указанном количестве, тщательно перемешать.
| Кол-во стрипов | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| ЦБР, мл | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| ТМБ, мкл | 200 | 400 | 600 | 800 | 1000 | 1200 |
Стабильность раствора хромогена при температуре от 18 до 25 о С не более 6 ч. в защищенном от света месте.
Примечание: Посуду и наконечники пипеток, контактировавшие с раствором хромогена, отмывать без применения синтетических моющих средств.
РРО перед использованием необходимо тщательно перемешать из-за возможного выпадения осадка. Иммуносорбент, К + , К – , стоп-реагент готовы к использованию.
После вскрытия упаковок неиспользованные реагенты допускается хранить в плотно закрытых упаковках при температуре от 2 до 8 о С до истечения срока годности.
- Проведение ИФА
3.1. Извлечь из упаковки рамку планшета и необходимое число стрипов каждой группы. Неиспользованные стрипы допускается хранить в плотно закрытом пакете с влагопоглотителем при температуре от 2 до 8 о С до истечения срока годности.
Расположить стрипы в рамке, чередуя стрипы с core-антигеном и NS-антигеном в соответствии со схемой постановки.
| core | NS | core | NS | core | NS | core | NS | core | NS | core | NS | |
| A | К+ | К+ | №6 | №6 | №14 | №14 | №22 | №22 | №30 | №30 | №38 | №38 |
| B | К- | К- | №7 | №7 | №15 | №15 | №23 | №23 | №31 | №31 | №39 | №39 |
| C | К- | К- | №8 | №8 | №16 | №16 | №24 | №24 | №32 | №32 | №40 | №40 |
| D | №1 | №1 | №9 | №9 | №17 | №17 | №25 | №25 | №33 | №33 | №41 | №41 |
| E | №2 | №2 | №10 | №10 | №18 | №18 | №26 | №26 | №34 | №34 | №42 | №42 |
| F | №3 | №3 | №11 | №11 | №19 | №19 | №27 | №27 | №35 | №35 | №43 | №43 |
| H | №4 | №4 | №12 | №12 | №20 | №20 | №28 | №28 | №36 | №36 | №44 | №44 |
| G | №5 | №5 | №13 | №13 | №21 | №21 | №29 | №29 | №37 | №37 | №45 | №45 |
3.2. В каждую лунку внести по 80 мкл (или 30 мкл) РРО.
3.3 В одну лунку (напр., А) стрипа с каждой группой антигенов внести 20 мкл (или 70 мкл) К + , в две лунки (напр., В и С) – по 20 мкл (или 70 мкл) К – , в остальные лунки – по 20 мкл (или 70 мкл) исследуемых образцов, , т.е. в соответствии с внесенным объемом РРО (п.1.3.2), затем тщательно перемешать пипетированием (не менее 3 раз) или на шейкере на малой скорости в течение 30 с (100об/мин), цвет РРО при этом должен измениться с сине-фиолетового на зеленый или с красного на желтый.
процедура 1 – 30 мин при 37 о С на шейкере (500 об/мин);
процедура 2 – 1 ч при 37 о С в термостате.
3.5. По окончании инкубации аспирировать содержимое лунок и промыть лунки планшета четыре раза, добавляя в каждую лунку не менее 400 мкл рабочего промывочного раствора. Время между заполнением и аспирацией (замачивание) должно быть не менее 30 сек.
Необходимо следить за полной аспирацией после каждого цикла отмывки (остаточный объем в лунках не должен превышать 10 мкл).
Полностью удалить влагу из лунок, перевернув планшет на сухую чистую фильтровальную бумагу.
Сохранность иммуносорбента между операциями 15 минут.
3.6. Перемешать рабочий раствор конъюгата и внести его по 100 мкл в каждую лунку. Планшет закрыть крышкой и выдержать в течение 30 мин в термостате при температуре 37 о С.
3.8. В каждую лунку внести по 100 мкл свежеприготовленного раствора хромогена, выдержать 30 мин при температуре от 18 до 25 о С в защищенном от света месте (планшет не закрывать) или в термостате при температуре 37 о С в течение 20 мин. (планшет закрыть чистой защитной пленкой).
3.9. В каждую лунку (в той же последовательности, в которой вносился раствор хромогена) внести по 100 мкл стоп-реагента и через 2-3 мин, но не позднее чем через 10 мин, учесть результаты.
Результаты ИФА учитывать при соблюдении следующих условий:
оптическая плотность в лунках с К + (ОПК+) – не менее 0,5;
оптическая плотность в лунках с К – (ОПК-) – не более 0,25.
В противном случае исследование повторить
Для каждой группы антигенов рассчитать критическое значение ОП (ОПкрит) по формуле:
где ОПК-ср – значение ОП в лунках с К – соответствующего стрипа.
Результаты учитывать по каждой группе антигенов отдельно.
Образец учитывать как отрицательный (не содержащий антител к ВГС), если значение ОП в лунке с ним ниже ОПКрит для каждой группы антигенов.
Образец учитывать как положительный (содержащий антитела к ВГС), если значение ОП в лунке с ним выше или равно ОПкрит по обоим группам антигенов или только по группе структурных антигенов (core) ВГС.
Для интерпретации результатов исследования сывороток можно использовать коэффициент позитивности (КП), который рассчитывается для каждого антигена по формуле:
Если КП больше 1, исследуемый образец расценивать как положительный. Результат анализа считать отрицательным при КП меньше 1 и неопределенным при КП≥1.
Срок годности набора – 1 год. Набор с истекшим сроком годности применению не подлежит.
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 о С в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.
Набор транспортируют при температуре от 2 до 8 о С. Замораживание не допускается. Допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 о С в течение 10 сут.
ИФА -ВГС комплект №3
Для учреждений здравоохранения.
ИФА -ВГС комплект №3
СВОДНАЯ ТАБЛИЦА ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ РЕАГЕНТОВ
| Кол-во стрипов | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| ФСБ-Т | ||||||
| ФСБ-Т(х25), мл | 7 | 13 | 20 | 27 | 33 | 40 |
| Вода очищ., мл | до 175 | до 325 | до 500 | до 675 | до 825 | до 1000 |
| Рабочий раствор конъюгата | ||||||
| РРК, мл | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| Конъюгат, мкл | ||||||
| Рабочий раствор хромогена | ||||||
| ЦБР, мл | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 |
| ТМБ, мкл | 200 | 400 | 600 | 800 | 1000 | 1200 |
Объем конъюгата, вносимый в РРК; указывается для каждой серии тест-системы.
Потребность в интерпретации лабораторных тестов при вирусных гепатитах больше, чем при других инфекционных заболеваниях, потому что многочисленные тесты, назначаемые при подозрении на вирусный гепатит, предназначены для решения различных задач.
Врачами СИТИЛАБ подготовлены информационные материалы по лабораторным тестам при вирусных гепатитах в помощь специалистам.
Вирус гепатита А (HAV), семейство Picornaviridae, родHepatoviridae
Распространён по всему миру, самая низкая заболеваемость в Северной и Центральной Европе
Почти всегда фекально-оральным путём через загрязненную пищу. Например, в мидиях вирус может сохраниться в течение многих месяцев. Из-за гигиенических мер профилактики новые случаи инфекции стали редкими в Северной Европе. Встречающиеся случаи - чаще привозные.
Всегда острый гепатит, часто проходящий незамеченным у детей, живущих в эндемичных районах. У взрослых течение болезни более тяжёлое, в редких случаях приводит к печеночной недостаточности. Никогда не переходит в хроническую форму и никогда не вызывает цирроз печени. Вирус выделяется с калом.
Медицинский персонал, сантехники, рабочие водоканала, наркоманы, и т.д. Жители эндемичных районов, особенно старшего возраста, путешественники. Инфицирование HCV-положительных пациентов вирусом гепатита А может привести к тяжёлой форме заболевания.
При активной иммунизации длительно сохраняется иммунитет (10 лет). Иммунизация может быть проведена даже перед поездкой. Возможна также пассивная иммунизация в случае контакта с зараженными людьми.
Диагностика гепатита А
05.05.020 АТ к вирусу гепатита А (anti-HAV) (суммарн.)
Определяются антитела классов IgG и IgM. Скрининговый тест при подозрении на новую или прошлую инфекцию. В начале заболевания может быть отрицательным. Тест может также использоваться для оценки напряжённости иммунитета перед прививкой.
05.05.010 АТ к вирусу гепатита АIgM (колич.)
Положительный в случае новой инфекции. Следует отметить, что тест может быть положительным в течение двух лет после перенесенного гепатита A. Антитела к HAV класса IgM могут быть положительными в течение короткого времени после прививки. В редких случаях, например инфекция вирусом Эпштейна-Барр, тест может быть сомнительным или слабо положительным.
06.01.015 Вирус гепатита А (HAV) ПЦР
При гепатите А РНК вируса может определяться в крови.
Вирус гепатита В (HBV), ДНК-содержащий вирус, семействоHepadnaviridae, род Orthohepadnaviridae.
Распространён по всему миру, самая высокая заболеваемость в Юго-восточной Азии и Африке. Распространённость в Центральной Европе - 1-2%. В России больны хроническим гепатитом В около 8 млн. человек.
HBV наиболее часто передается при половых контактах. Возможна вертикальная передача плоду при родах, через кровь от больного (переливание крови, препаратов крови; татуировки; пирсинг; повреждения кожи). HBV может обнаруживаться во всех жидкостях организма. Самая высокая концентрация вируса определяется в крови (до 1000 блн. инфекционных частиц/мл). Попадание в кровь приблизительно 10 вирусов достаточно для инфицирования.
2 - 3 месяца, в единичных случаях до 1 года.
HBV может вызывать как острый так и хронический гепатит. Клиническое течение острого гепатита может быть различным от инапарантной формы (носительство) до молниеносного течения. Приблизительно у 10 % инфицированных гепатит В протекает в хронической форме, выделяют хроническую инфекцию без клинической активности и хронический гепатит В. Приблизительно у 10 % больных хроническим гепатитом В развивается цирроз печени. Кроме того, больные хроническим гепатитом В имеют высокий риск развития гепатоцеллюлярной карциномы.
Медицинский персонал, лица перенёсшие переливание крови, реципиенты органов и тканей, диализные больные, лица имеющие контакты с больными гепатитом В, новорождённые, рожденные от больных матерей, жители домов инвалидов и престарелых.
Иммунизация, является успешной, если титр антител кHBsAg 100 мМЕ/мл или больше спустя 4-8 недель после третьей прививки. В этом случае, иммунитет к заболеванию может сохраняться достаточно долго (по крайней мере, 10 лет). Лицам, у которых после 3-х должным образом проведённых прививок через 8 недель титр антител к HBsAgне повысился, необходимо провести повторную вакцинацию (другой вакциной или большими дозами). Все новорождённые и подростки между 12 и 14 годами должны быть привиты, также как и лица, входящие в группу риска. До проведения вакцинации необходимо провести исследование на антитела к HBsAg, если титр антител меньше 10 мМЕ/мл, то необходима срочная вакцинация.
Диагностика гепатита В
При гепатите В возможно определение антител, антигенов и ДНК вируса.
05.05.030 Антиген "s" вируса гепатита В (HBsAg)
Поверхностный белок вируса гепатита В, обнаруживается в сыворотке в трех различных формах: на поверхности неповрежденных инфекционных частиц, или как свободный протеин (нитевидный или сферический). Основной маркер острого и хронического гепатита В. В большинстве случаев HBsAg обнаруживается уже в инкубационном периоде и при остром течении гепатита выявляется в крови в течение 5 - 6 месяцев. Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В дольше 6 месяцев после начала заболевания свидетельствует о возможной хронизации процесса. Возможно пожизненное носительство HBsAg. Из-за наличия различных форм HBsAg в сыворотке, при его обнаружении невозможно дифференцировать заболевание и HBsAg-носительство. Для этого необходимо провести дополнительные исследования (определение ДНК вируса гепатита В, HBeAg и антител к HBeAg).
05.05.035 Подтверждающий тест на антиген "s" вируса гепатита В (HBsAg)
Методы иммуноферментного анализа, применяемые для определения HBsAg в сыворотке крови, являются скрининговыми, и в очень редких случаях могут давать ложноположительные результаты. Поэтому в случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности специалисты лаборатории ставят подтверждающий тест - повторное исследование сыворотки крови пациента с иммуноингибированием и разведением. Исследование проводится для подтверждения положительного результата исследования на HBsAg.
05.05.040 АТ к антигену "s" вируса гепатита В (anti-HBsAg) (колич.)
Показатель наличия иммунитета к вирусу гепатита В, проводиться перед вакцинацией и через 4 - 8 недель после вакцинации для контроля за эффективностью вакцинации.
05.05.055 АТ к сердцевине вируса гепатита В (anti-HBc) IgM
Антитела к HBcAg класса IgM выявляются в сыворотке при остром гепатите и реактивации хронического гепатита. При молниеносной форме течения заболевания, только этот тест может давать положительный результат.
05.05.060 АТ к сердцевине вируса гепатита В (anti-HBc) IgG
Определение антител к НBcAg класса IgG применяют в целях диагностики текущего или перенесенного в прошлом гепатита В. Однако наличие антител не дает возможности дифференцировать острую, хроническую или перенесенную в прошлом инфекцию.
05.05.070 Антиген "e" вируса гепатита В (HBeAg)
HBeAg - маркер активной репликации вируса гепатита B. HBеAg является продуктом распада сердцевинного антигена вируса гепатита В (НBсAg)
05.05.080 АТ к антигену "e" вируса гепатита В (anti-HBeAg)
Является показателем начала сероконверсии, свидетельствует о прекращении репликации вируса. Однако обнаружение антител к HBeAg не всегда является показателем отсутствия инфекционности. Иногда возможно появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, т.е. вирус данный антиген синтезировать не способен или синтезирует в малых количествах, при этом, хотя в крови обнаруживаются антитела к HBeAg, высокая репликативная активность вируса сохраняется.
06.01.020 Вирус гепатита В качественно (ПЦР)
Определяется ДНК вируса гепатита В в крови. При положительном результате исследования необходимо провести количественное исследование.
06.01.025 Вирус гепатита В количественно (ПЦР)
Определяется количество копий ДНК вируса гепатитаB в 1 мл крови (вирусная нагрузка). Исследование проводится для контроля за эффективностью лечения.
РНК-содержащий вирус, семейство Flaviviridae. В настоящее время выделяют 8 генотипов (1-7, 10) с многочисленными подгруппами.
Распространён повсеместно, наиболее высокая заболеваемость в Южной Азии, Египте и Центральной Африке. По данным Robert-Koch-Institute (RKI) гепатит С является причиной, 20 % острых гепатитов, больше чем 40 % всех случаев цирроза печени, 70-85 % хронических гепатитов, и 60 % всех опухолей печени.
Как и при гепатите В заражение происходит при переливании крови и продуктов крови. Передача инфекции половым путём, не играет значительной роли; перинатальная передача низка (4 %). Возможно заражение при инъекциях, аутогемотерапии, через инструменты стоматолога, при эндоскопии и т.д.
6 - 12 недель, иногда до 1 года
Острый гепатит С часто имеет умеренное клиническое течение и остается незамеченным, у 85% заболевших развивается хронический гепатит и у 20% больных хроническим гепатитом развивается цирроз печени. Характерной особенностью клинического течения заболевания является небольшое увеличение активности трансаминаз, которое часто не связывают с возможностью вирусного гепатита. Это приводит к поздней диагностике заболевания.
Медицинский персонал, лица после переливания крови, диализные пациенты, дети, рождённые от матерей больных гепатитом С.
В настоящее время вакцин нет
Диагностика гепатита С
05.05.085 АТ к вирусу гепатита С (anti-HCV) (суммарн.)
Антитела к HCV обычно определяются спустя 6-8 недель после инфицирования. В единичных случаях позже. Отрицательный результат не исключает недавно приобретенную инфекцию HCV. Положительный результат может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите С. Данное исследование не позволяет различить острый и хронический гепатит, а также стадию выздоровления после гепатита С. Антитела к HCV необходимо определять у всех пациентов с незначительным повышением активности трансаминаз и у людей, относящихся к группе риска
05.05.095 Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С.
Определение суммарных антител к вирусу гепатита С является скрининговым тестом для диагностики заболевания. В случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности используют подтверждающий тест - определение широкого спектра антител к белкам специфичным для вируса гепатита С (сore, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5) в сыворотке крови больного. Исследование считается положительным, если выявляются антитела к 2 или более белкам вируса гепатита С. Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С используют для подтверждения специфичности скринингового метода.
05.05.090 АТ к вирусу гепатита С (anti-HCV) IgM
Положительный результат может свидетельствовать об остром гепатите С или обострении хронического гепатита С. Отрицательный результат свидетельствует о том, что гепатит С не выявлен (при отрицательном результате исследования суммарных антител к гепатиту С), или у пациента хронический гепатит С вне обострения (при положительном результате исследования суммарных антител).
06.01.030 Вирус гепатита С (HCV) качественно (ПЦР)
Определяется РНК вируса гепатита С в крови. Положительный результат свидетельствует о репликации вируса. При положительном результате должно проводиться количественное исследование, чтобы определить степень виремии. Метод выбора - так называемый "Real time" ПЦР. РНК вируса необходимо определять в случае положительного результата исследования на антитела, кроме того, и при отрицательном результате, если подозревается гепатит С (особенно в случае диализных пациентов). Исследование на РНК вируса гепатита С показано для новорожденных, рождённых от матерей больных гепатитом С. Так как у новорожденных в крови могут определяться материнские антитела, по этой причине обнаружение антител к HCV не может использоваться у этой категории пациентов.
06.01.035 Вирус гепатита С (HCV) количественно (ПЦР)
Исследование проводится для определения вирусной нагрузки.
06.01.040 Вирус гепатита С (HCV) (типирование, 5 типов)
Определяется генотип вируса для выбора схемы лечения. В настоящее время в лабораторной практике определяется 5 генотипов.
Дефектный РНК-содержащий вирус. Для репликации необходим вирус гепатита В. Обнаруживается только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В.
Низкий уровень заболеваемости в Северной Европе; более высокий в Средиземноморских странах и в странах Черноморского региона; высокая заболеваемость в Центральной Африке и Южной Америке.
Как и гепатит B парентеральным путем, при переливании зараженной крови, или при сексуальных контактах.
Несколько недель или месяцев
В случае коинфекции (одновременное заражение гепатитомB и гепатитом D) - острый гепатит с очень тяжёлым клиническим течением, часто наблюдается высокая смертность. В случае суперинфекции (заражение вирусом гепатита D HBV-положительных пациентов) развивается хронический гепатит с более тяжёлым течением, чем просто хронический гепатит B.
Такие же, как и для гепатита B, и лица, проживающие в эндемичных областях
В настоящее время вакцин против гепатита D нет, но иммунизация против гепатита B защищает от инфицирования
Диагностика гепатита D
05.05.100 АТ к вирусу гепатита DIgM
05.05.110 АТ к вирусу гепатита D(anti-HDV) (суммарн.)
Определяются IgG и IgM антитела. Скрининговое исследование, назначается, если подозревается новая или хроническая инфекция. Антитела к HDVобнаруживаются спустя 1 - 2 недели после появления клинических признаков заболевания
06.01.045 Вирус гепатита D (HDV) (ПЦР)
РНК к вирусу гепатита D обнаруживается в крови при появлении клинических признаков заболевания. Как правило, результат исследования на ДНК вируса гепатита В в этот период отрицательный.
РНК-содержащий вирус семейства Caliciviridae
Высокая заболеваемость встречается в Центральной Америке, Южной Азии, и в некоторых регионах Африки
Как и у гепатита А - фекально-оральный
Острый гепатит, который никогда не переходит в хроническую форму. У беременных женщин может развиться тяжёлый гепатит с молниеносной формой клинического течения с высокой летальностью.
Жители эндемичных районов, путешественники
Вакцин в настоящее время нет
Диагностика гепатита Е
05.05.115 АТ к вирусу гепатита ЕIgM
Обнаружение антител класса IgM к вирусу гепатита Е свидетельствует об острой стадии гепатита Е. Антитела к вирусу гепатита Е IgM выявляются в крови после появления желтухи. Чувствительность данного исследования по данным литературы составляет более 93%. Отрицательный результат исследования не исключает инфицирования вирусом гепатита Е. Показания к назначению исследования: наличие клинической картины заболевания или лабораторных данных (повышение АЛТ, АСТ, билирубина), обследование в эндемичных районах.
05.05.120 АТ к вирусу гепатита ЕIgG
Антитела класса IgG к вирусу гепатита Е появляются в период разгара заболевания. Антитела класса IgGмогут исчезать после перенесенного заболевания в течение 6 месяцев, но у некоторых лиц могут определяться в крови до 6 - 8 лет и более. Показания к назначению исследования: диагностика гепатита Е, проведение эпидемиологических исследований.
Читайте также: