Выявления антигена вируса гриппа

Выявление вируса гриппа серотипов А и В (Influenza virus A/B), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (РНК) вируса в образце биоматериала.

Синонимы английские

Influenza serotypes A/B, RNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки) и носа, мокроту.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
• Не принимать пищу, не пить и не полоскать горло в течение 2-3 часов до исследования.
• За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) и носа не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не закапывать капли/спреи в нос, не жевать жевательную резинку, не курить. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.

Общая информация об исследовании

Influenza virus – это оболочечный вирус, характеризующийся наличием сегментированного негативного РНК-генома и нуклеокапсида в форме спирали. Он относится к семейству Orthomixoviridae. На основании структурных различий нуклеопротеида выделяют 3 серотипа Influenza: A, B и С. Серотип A встречается как людей, так и у животных, в то время как варианты B и C поражают преимущественно людей. Именно серотип А ответственен за подавляющее большинство случаев сезонных (эпидемических) и пандемических вспышек гриппа.

Идентификация вируса гриппа должна быть осуществлена в кратчайшие сроки, что связано с высокой заразностью этого заболевания. Кроме того, эффективность противовирусных препаратов максимальна при их назначении в первые 48 часов после инфицирования, что также диктует необходимость своевременной постановки окончательного диагноза. Среди многих "быстрых" диагностических тестов особое место занимает полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в мокроте) фрагменты генетического материала (РНК) возбудителя инфекции. Благодаря высокой чувствительности и специфичности метода, а также возможности получить результат в наболее короткие сроки, РТ-ПЦР заменила другие, применяемые ранее, методы диагностики гриппа: выделение вируса в культуре клеток, а также серологические исследования и иммуноферментный анализ.

Многие прямые лабораторные тесты, разработанные для идентификации Influenza, основаны на выявлении белковых компонентов наружной оболочки вируса: гемагглютинина (H) и нейраминидазы (N). Эти белки являются основными факторами, определяющими степень болезнетворности вируса, а также используются для диагностики и классификации выявляемого вируса гриппа. Они обладают выраженной изменчивостью (известно 16 разновидностей N и 9 разновидностей H серотипа Influenza A) (чем вызваны ежегодные сезонные вспышки гриппа), а также создает определенные трудности при идентификации вируса гриппа с помощью этих методов. Структурное разнообразие антигенов H и N приводит к тому, что чувствительность большинства прямых лабораторных тестов (таких как прямая иммунофлюоресценция и ELISA) составляет около 65-75 %. Исследование РТ-ПЦР основано на выявлении консервативной последовательности ДНК, общей для разных штаммов вируса гриппа серотипов А и В, что обуславливает максимальную чувствительность этого теста (98-100 %).

В отличие от других тестов, чувствительность исследования РТ-ПЦР практически не изменяется при взятии материала на фоне начатой терапии противовирусными препаратами. Это связано с тем, что в реакции выявляется не сам вирусный агент, а фрагмент вирусной ДНК. По этой же причине положительный результат исследования не всегда указывает на наличие живого вируса (репликацию) и не всегда означает, что пациент остается заразным для окружающих.

В отличие от других лабораторных тестов (в первую очередь, экспресс-тестов для определения антигена вируса гриппа), результат РТ-ПЦР в меньшей степени зависит от распространенности гриппа среди населения. РТ-ПЦР характеризуется редкими ложноположительными и ложноотрицательными результатами как во время эпидемии, так и в период низкой заболеваемости гриппом.

Идентификация вируса гриппа с помощью РТ-ПЦР возможна в течение более длительного времени от начала заболевания по сравнению с большинством других тестов. Тем не менее взятие отделяемого носо/ротоглотки для исследования с помощью РТ-ПЦР должно быть произведено не позднее чем через 72-96 часов (оптимально в первые 48-72 часа). Это связано с тем, что интенсивная репликация Influenza при поражении верхних дыхательных путей происходит в течение первых 4 суток заболевания. У пациентов с вовлечением нижних отделов дыхательных путей вирусная нагрузка сохраняется высокой более длительный период. Исследование отделяемого носоглотки и мокроты дает лучшие результаты по сравнению с исследованием отделяемого ротоглотки.

При обследовании пациента с клиническими признаками Influenza-ассоциированной инфекции верхних дыхательных путей следует выполнить анализ отделяемого носо/ротоглотки. При обследовании пациента с признаками Influenza-ассоциированной инфекции нижних дыхательных путей анализ мазков из зева и носа необходимо дополнить исследованием мокроты. Исследование мокроты также должно быть осуществлено при отрицательном результате, который дал анализ отделяемого верхних дыхательных путей у пациента с клиническими признаками гриппа. Следует повторить РТ-ПЦР при отрицательном результате исследования мокроты у пациента с клиническими признаками Influenza-ассоциированной инфекции нижних дыхательных путей.

Для более точной диагностики Influenza рекомендуется сочетание РТ-ПЦР с дополнительными общеклиническими исследованиями. Кроме того, необходимо исключить бактериальную суперинфекцию.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

• острой респираторной вирусной инфекции (внезапное острое начало болезни, лихорадка, боль в горле, боль в мышцах, головная боль, светобоязнь, сухой кашель, боль в грудной клетке, одышка);
• острой энцефалопатии в период эпидемии гриппа (судороги, атаксия, нарушение сознания).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

Причины отрицательного результата:

• отсутствие Influenza-ассоциированной инфекции.



• Положительный результат исследования не означает, что пациент остается заразным для окружающих.
• Анализ не позволяет выявлять Influenza серотипа С.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, врач общей практики, анестезиолог-реаниматолог.

Литература

• Kamps B. S, Hoffmann C, Preiser W. Influenza Report 2006 / B. S. Kamps, С. Hoffmann, W. Preiser W. – Flying Publisher, 2006.
• Wang R, Taubenberger JK. Methods for molecular surveillance of influenza. Expert Rev Anti Infect Ther. 2010 May;8(5):517-27.
• Schuchat A, Bell BP, Redd SC. The science behind preparing and responding to pandemic influenza: the lessons and limits of science. Clin Infect Dis. 2011 Jan 1;52 Suppl 1:S8-12.
• Pregliasco F, Mensi C, Camorali L, Anselmi G. Comparison of RT-PCR with other diagnostic assays for rapid detection of influenza viruses. J Med Virol. 1998 Oct;56(2):168-73.
• WHO Global Influenza Surveillance Network. Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza. – World Health Organization, 2011.

Вирус гриппа (Myxovirus influenzae) — РНК-содержащий вирус, принадлежит к семейству ортомиксовирусов (Orthomyxoviridae). В настоящее время выявлено более 2000 вариантов вируса гриппа, различающихся между собой антигенными свойствами внутренних белков, что определяет принадлежность вируса гриппа к типу А, В или С. Вирус гриппа А открыт в 1933 г. Смитом, Эндрюсом

Вирус гриппа B не вызывает пандемий и обычно являются причиной локальных вспышек, более ограниченных эпидемий, по сравнению с гриппом типа А. Вспышки гриппа типа В могут совпадать с таковыми гриппа типа А или предшествовать ему. Вирусы гриппа В циркулируют только в человеческой популяции (чаще вызывая заболевание у детей).

Вирус гриппа C мало изучен. Известно, что в отличие от вирусов А и В, он не вызывает эпидемий и не приводит к серьезным последствиям. Является причиной спорадических заболеваний, в основном у детей. Инфицирует только человека.

Строение и функции

Вирус гриппа имеет близкую к сферической форму и диаметр частиц 80-120 нм. Некоторые штаммы вирусов имеют форму палочек, а иногда и нитей различной длины (филаментозная форма). Вирусные частицы состоят из 0,8-1,1% РНК, 70-75% белка, 20-24% липидов и 5-8% углеводов. Вирион состоит из белковой оболочки, которая образована ворсинками длиной 10-12 нм, внутри которой находится генетическая информация: молекулы рибонуклеиновой кислоты (РНК), кодирующие 7 структурных белков. Из них четыре основных вирус-специфичных антигена: нуклеопротеид (RNP), матриксный белок (М1, М2), гемагглютинин (Н) и нейраминидаза (N) (рис. 1)

Рис. 1. Структура вируса гриппа.

Нуклеопротеид, тесно связанный с РНК-геномом, и матриксный белок, выстилающий изнутри липидную мембрану, — внутренние стабильные и типоспецифичные (S) антигены. Нуклеопротеиды типов А, B и C отличаются, что позволяет их детектировать. Гемагглютинин (Н) и нейраминидаза (N) — поверхностные антигены оболочки (V-антигены) — подвержены значительным изменениям.

Вирус репродуцируется в ядре и цитоплазме: нуклеопротеид формируется в ядре, нуклеокапсид собирается в цитоплазме, вирусная частица формируется полностью в процессе отпочкования и отделения от цитоплазматической мембраны клетки-хозяина.

Вирус гриппа малоустойчив во внешней среде. В воздухе помещений он погибает в течение нескольких часов, при 60°С — через 4–5 мин. Однако месяцами сохраняется в высушенном состоянии при —20° и —70°С. Чувствителен к хлорамину, формалину, эфиру, действию ультрафиолетовых лучей, ультразвуку и нагреванию.

Диагностика вирусов гриппа на сегодняшний день включает в себя иммунохимические методы и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Широко применяется прямой и непрямой метод иммунофлюоресценции (выявление антигенов возбудителя в биологическом материале). Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявить антигены вирусов гриппа А и В с помощью моноклинальных антител к белкам соответствующих возбудителей в сэндвич-варианте. ПЦР применяется для экспресс-диагностики гриппа.

Серологическая диагностика гриппа базируется на выявлении возрастания титра противогриппозных антител в динамике заболевания или на определении специфичных иммуноглобулинов класса М. Для данного вида диагностики гриппа чаще применяют реакцию торможения гемагглютинации (РТГА). РТГА-тест позволяет определить тип и подтип вируса ввиду различия между V-антигенами вирусов гриппа. Реакция основана на том, что вирус гриппа способен агглютинировать человеческие или куриные эритроциты, а специфичные антитела ингибируют этот процесс. Реакция связывания комплемента (РСК) служит выявлению различия между S-антигенами и позволяет узнать тип вируса, вызвавшего инфекцию (А или В).

Среди других рекомендованных для ретроспективной диагностики методов можно отметить реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА), метод дифференцированного определения антител с помощью редуцирующих веществ, реакцию определения антител к нейраминидазе (РИНА) и другие (иммунодиффузные, иммуноэнзимные и радиоиммунные методы).

Вирус - доклеточная форма живой материи.

Отсутствием клеточной стенки

Наличием одной нуклеиновой кислоты (РНК либо ДНК)

Абсолютный паразит (эндоцитобионт)

Часто, осложнение в виде оппортунистических процессов

Реакция крови в виде лейкопении, вторичный иммунодефицит

Нечувствительность к антибактериальной терапии.

ГРИПП (Cемейство – Ortomyxoviridae)

Острая вирусная респираторная инфекция.

Периодически распространяется в виде эпидемий и пандемий. Историческая справка:

Характеризуется явлениями общей интоксикации, лихорадкой, поражением ВДП, нервной и сердечно-сосудистой систем.

Строение вириона вируса гриппа типа А

Он имеет сферическую форму , размер 80-120 нанометров.

Сложный РНК-содержащий вирус, состоящий из центральной части генома (сердцевины) и суперкапсида.

Геном вируса – спираль, однонитчтая, фрагментированная минус-РНК, состоящая из 8 сегментов, которые кодируют 10 вирусных белков. Фрагменты РНК имеют общую белковую оболочку, которая объединяет их, образуя рибонуклеопротеид (RNP).

Вокруг RNP находится слой матриксного белка (М-слой), придающий вириону прочность.

Поверх М-слоя, прилегая к нему, расположен суперкапсид – липопротеиновая оболочка клеточного происхождения со встроенными вирусоспецифическими гликопротеинами гемагглютинином (Н), названным по способности агглютинировать эритроциты, и нейраминидазой (N), фермент, выступающими над поверхностью вириона в виде множества шипиков.

Гемагглютинин обеспечивает способность вируса присоединяться к клетке. Нейраминидаза отвечает, во-первых, за способность вирусной частицы проникать в клетку-хозяина, и, во-вторых, за способность вирусных частиц выходить из клетки после размножения.

Нуклеопротеид (также называемый S-антигеном) постоянен по своей структуре и определяет тип вируса (А, В или С). Поверхностные антигены (гемагглютинин и нейраминидаза V-антигены), напротив, изменчивы и определяют разные штаммы одного типа вируса.

Антигены вируса гриппа

Внутренние антигены (S- антиген) – это антигены белков нуклеокапсида и матриксного белка (NP-белком и М-белком) типоспецифические антигены Отличаются стабильностью, являются типоспецифичными, и не дают перекрестных реакций.

NP- белок связывает Со и определяется РСК

Поверхностные антигены (V-антигены) – являются протективными антигенами – это антигены поверхностных гликопротеинов – гемааглютинина (H-антиген) и нейраминидазы (N-антиген). АНТ к этим АНГ обладают вируснейтрализующим свойством. Исследуют в РТГА (АНГв+Эр+АНТв).

Поверхностные АНГ отличаются многообразием и изменчивостью ( 15 вариантов H-антигенов, 10 N-антигенов). Для вируса гриппа человека характерны гемагглютинины H1, H2, H3 и нейраминидазы N1 и N2. Различные варианты сочетания H- и N-антигенов определяют подтипы вируса типа А, напр. A/H1N1/, A/H2N2/ и A/H3N2.

Антигенная изменчивость обуславливается 2 процессами:

Дрейф антигенов - незначительные изменения в структуре H-N-антигенов за счет точечных мутаций в генах, которые их кодируют. В результате образуются измененные сероварианты (штаммы) того же подтипа.

Шифт антигенов – полное замещение участка генома, кодирующего синтез H– и N-антигенов , приводящее к образованию нового подтипа вируса гриппа.

Эпидемиология

Грипп:

Механизм передачи – аэрогенный

Путь передачи – воздушно-капельный

Интенсивная репродукция вирусов происходит в ВДП, поэтому короткий инкубационный период – от нескольких часов до 2-х дней

Способность к антигенной изменчивости - дрейфу и шифту.

Эпидемическое распространение заболевания – повсеместно.

Пик заболеваемости нарастает в осенне-зимний период

Репродукция вируса гриппа

Адсорбция вирусов на чувствительных клетках

Проникновение вирионов в клетку

Транспортировка вируса к ядру клетки и дальнейшая депротеинизация

Экспрессия вирусного генома и синтез компонентов вириона

Формирование вирионов и их выход из клетки

Цикл репродукции вируса гриппа продолжается 6-8 часов. Зараженная клетка погибает не сразу и может продуцировать несколько тысяч вирионов.

Патогенез

Вирус гриппа избирательно поражает эпителий респираторного тракта (преимущественно трахеи). Размножаясь в клетках цилиндрического эпителия, вызывает их дегенеративные изменения, используя содержимое эпителиальных клеток для построения новых вирусных частиц. Массированный выход зрелых вирусных частиц нередко сопровождается гибелью эпителиальных клеток, а некроз эпителия и связанное с этим разрушение естественного защитного барьера приводит к вирусемии. Токсины вируса гриппа вместе с продуктами распада эпителиальных клеток оказывают токсическое действие на сердечно-сосудистую, нервную (центральную и вегетативную) и другие системы организма. Гриппозная инфекция приводит к подавлению иммунитета, а при внедрении вторичной бактериальной флоры через некротизированную поверхность слизистой оболочки дыхательных путей могут возникнуть различные осложнения.

В патогенезе гриппа выделяют пять основных фаз патологического процесса:

репродукция вируса в клетках дыхательных путей;

вирусемия, токсические и токсико-аллергические реакции;

поражение дыхательных путей с преимущественной локализацией процесса в каком-либо отделе дыхательного тракта;

возможные бактериальные осложнения со стороны дыхательных путей и других систем организма;

обратное развитие патологического процесса.

В основе поражения различных органов и систем при гриппе ведущую роль играют циркуляторные расстройства, причиной которых являются нарушения тонуса, эластичности и проницаемости сосудистой стенки, прежде всего капилляров. Повышение проницаемости сосудистой стенки приводит к нарушению микроциркуляции и возникновению геморрагического синдрома (носовые кровотечения, кровохарканья, а при тяжелом течении - кровоизлияния в вещество и оболочки головного мозга, в альвеолы, что проявляется синдромом инфекционно-токсической энцефалопатии или геморрагическим токсическим отеком легких).

Грипп обусловливает снижение иммунологической реактивности. Это приводит к обострению различных хронических заболеваний, а также к возникновению вторичных бактериальных осложнений. Наиболее частое и серьезное осложнение гриппа - острая пневмония. В настоящее время общепризнано, что пневмония при гриппе носит смешанный вирусно-бактериальный характер вне зависимости от сроков ее возникновения.

Клинические формы гриппа

Средняя степень тяжести

Крайне тяжелая (гипертоксическая) степень

Средняя степень тяжести

Крайне тяжелая (гипертоксическая) степень

Иммунитет

Постоянно действующие факторы неспецифической защиты (клеточные и гуморальные): выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, альфа-интерферон, секреторные IgA.

Факторы индуцированные вирусом (неспецифические - повышение Т тела, и специфические)

Стойкий постинфекционный клеточный и гуморальный иммунитет, который отличается своей узкой типо-, подтипо-, варианто специфичностью и направлен против сероварианта (штамма) вируса гриппа, вызвавшего определенное заболевание.

Поэтому противогриппозный иммунитет является подтипо- и штаммоспецифичным.

Микробиологическая диагностика базируется:

Выделение и идентификация вируса

Определение вирусных АНГ в клетках больного

Поиск вирусоспецифических АНТ в сыворотке больного.

Материал для исследования: носоглоточное отделяемое, мазки – отпечатки со слизистой носа, постмортальное исследование аутопсий

Лабораторная диагностика гриппа – раннюю и ретроспективную – проводят для подтверждения клинического диагноза, дифференциации гриппа от ОРВИ другой этиологии и для эпидемиологических целей.

Ранняя диагностика: в первые 3 дня и не позднее 5-го дня болезни обнаруживают АНГ вирусов гриппа с помощью экспресс методов Исследуемый материал : слизь из носовых ходов и носоглотки, взятая тампонами, путем смывов, методом мазков-отпечатков со слизистой нижних носовых раковин, а также секционный материал после их специальной обработки.

Экспресс-диагностика: 2-5 часов, чаще РИФ (прямой и непрямой). Специфические АНГ вируса гриппа и внутриклеточные включения выявляют по их яркому изумрудно-зеленому свечению в участках цитоплазмы и ядра инфицированных эпителиальных клеток.

Вирусологический метод

Выделение вируса на куриных эмбрионах:

Проводят комбинированное заражение исследуемым материалом 10-11 дневных эмбрионов в амниотическую и аллантоисную полости. После 3 дней инкубации при t 35С проверяют присутствие вирусов в амниотической и аллантоисной жидкости с помощью РГА с эритроцитами кур, морской свинки или человека, устанавливают титр вируса.

Далее проводится серологическая идентификация выделенного вируса с помощью РСК для определения типовой принадлежности вируса (А, В или С) и РТГА для установления подтипа или штамма вируса гриппа. Реакции ставят с соответствующими диагностическими сыворотками.

Выделение вирусов в культурах клеток

Осуществляется путем заражения нескольких типов культур клеток, чаще используются первичные культуры почек человека и некоторых животных. Клеточные культуры инкубируют в течение недели при Т-33С , ежедневно регистрируя изменения монослоя клеток с целью выявления ЦПД (РТГА, РГА, ИФ-метод). Далее вируссодержащей культуральной жидкостью заражают куриные эмбрионы, получают алантоисную жидкость с высоким содержанием вирусов, и проводят идентификацию выделенного вируса.

Ретроспективная диагностика гриппа (серологическое исследование)

Серологическое исследование парных сывороток, взятых в начале заболевания и через 7-14 дней. Повышение титра специфических АНТ в течение заболевание не менее, чем в 4 раза (у детей младшего возраста – в 2 раза) позволяют установить точную этиологию гриппа.

Цельновирусные вакцины (1-го поколения) – инактивированные и живые.

Расщепленные – сплит вакцины (2-го поколения), содержат внутренние и наружные АНГ вирусов гриппа и не содержат липидов, удаленных после обработки вирионов растворителями или детергентами.

Субъединичные вакцины (3-го поколения) являются наиболее очищенными, содержат наружные H- и N-антигены вирусов гриппа

Ее проводят во время эпидемического подъема заболеваемости. Различают плановую профилактику, организуемую в детских учреждениях, рабочих коллективах и очаговую в семьях гриппозных больных. Для экстренной профилактики применяют противовирусные препараты, иногда проводят иммуноглобулинпрофилактику.

Для лечения гриппа применяют противовирусные препараты:

Препарата интерферона (вирус гриппа А + антитоксическое действие при гриппе В)

Ремантадин (вирус гриппа А +В) ингибирует синтез М-белка, что приводит к нарушению цикла репродукции и препятствует формированию полноценных вирионов.

Арбидол и амиксин, являются индукторами интерферонов и иммуномодуляторами, которые воздействуют на все типы вирусоа гриппа

При тяжелых формах гриппа в первые 3 дня болезни показано введение противогриппозного иммуноглобулина.

Симптоматическое лечение. При наличии бактериальных осложнений назначают антибиотики и сульфаниламиды.

Инфекций

Возбудители острых респираторных вирусных

15. Из инфекционной больницы в патологоанатомическое отделение доставили труп внезапно умершего человека с клиническим диагнозом "грипп". Какие исследования необходимо провести для подтверждения диагноза?

+Выделение и идентификацию вируса гриппа.

Выявление внутриклеточных включений при световой микроскопии.

Выявление высоких титров антител в реакции торможения гемагглютинации.

Электронно-микроскопическое выявление вируса.

Выявление антител в реакции связывания комплемента.

16. Для предупреждения сезонного подъема заболеваемости гриппом в учебных заведениях была проведена активная иммунизация детей и подростков. Какой препарат был применен для иммунизации?

+Инактивированная (убитая) вакцина.

Нормальный человеческий иммуноглобулин.

17. По результатам вирусоскопии клеточного монослоя, который был инфицирован материалом от больного, врач поставил диагноз "респираторно-синцитиальная вирусная инфекция". Какое изменение в культуре клеток вызвал этот вирус?

+Образование многоядерных клеток.

Полную деструкцию клеточного монослоя.

Образование телец Бáбеша-Нéгри.

18. В вирусологической лаборатории проведено заражение куриных эмбрионов смывом из носоглотки больного острой респираторной инфекцией. Вирусолог выделил вирус, вызвавший агглютинацию 1% взвеси куриных эритроцитов. Какой вирус выделил вирусолог?

Вирус респираторно-синцитиальной инфекции.

+РТГадс (реакцию торможения гемадсорбции).

РТГА (реакцию торможения гемагглютинации).

20. В детском саду эпидемиолог зарегистрировал вспышку острой респираторной инфекции. Для подтверждения диагноза "грипп" вирусолог провел экспресс-диагностику, основанную на выявлении в исследуемом материале (в смыве из носоглотки) специфического вирусного антигена. Какую реакцию применил вирусолог?

Реакцию связывания комплемента.

21. Серологическая диагностика гриппа предусматривает выявление увеличения титра антител против возбудителя при исследовании парных сывороток крови больного. Во сколько раз должен возрасти титр антител, чтобы результат можно было считать достоверным?

+В 4 и больше раз.

22. Вирус гриппа содержит внутренние антигены: нуклеопротеидные (NP), полимеразные (P1, P2, P3), матриксный белок (М) и внешние антигены - гемагглютинин (Н) и нейраминидазу (N). Каким антигенам принадлежит основная роль в создании противогриппозного иммунитета?

+Гемагглютинину и нейраминидазе.

23. Для вирусологической диагностики гриппа используют 10-дневные куриные эмбрионы. Какую модель необходимо использовать для культивирования вирусов парагриппа?

24. Для диагностики какого заболевания целесообразно использовать РТГА?

Простого герпеса I типа.

25. В лабораторию доставлены мазки-отпечатки из носовой полости больного с подозрением на грипп. Какое исследование должен провести вирусолог для идентификации вируса?

Реакцию непрямой гемагглютинации.

Реакцию связывания комплемента.

26. В городе эпидемия гриппа. Какой препарат Вы порекомендуете людям для неспецифической профилактики заболевания?

27. Для эффективной вакцинации населения против гриппа необходимо предположить вероятный вирус, который станет причиной эпидемии. Как правило, возбудителем является тот подсеротип вируса, против которого у значительной части населения отсутствуют антитела. Какую реакцию целесообразно поставить для выявления антител в сыворотке людей?

+Реакцию торможения гемагглютинации.

Реакцию непрямой гемагглютинации.

Реакцию нейтрализации цитопатического действия.

Реакцию связывания комплемента.

28. В вирусологической лаборатории была проведена идентификация вируса гриппа. Для этого культуру вируса после накопления смешали в двух рядах пробирок с куриными эритроцитами. В первый ряд добавили диагностическую сыворотку типа А (наблюдали образование агглютината в виде "перевернутого зонтика"до титра сыворотки), во второй – типа В (наблюдали образование агглютината в виде "пуговицы"). Тип вируса был определен как тип В. Какая серологическая реакция была использована для идентификации вируса?

29. Заражение куриных эмбрионов является основным методом накопления вируса гриппа. Что предварительно добавляют к исследуемому материалу (смыву из носоглотки) перед введением материала в куриный эмбрион?

+Стрептомицин и пенициллин.

30. По данным анамнеза и клиническим данным, врач больному с симптомами острого респираторного заболевания поставил диагноз "грипп". К какому семейству относятся вирусы гриппа?

31. В инфекционную больницу поступил больной с признаками пневмонии. Признаки заболевания проявились на 6-й день заболевания гриппом. Какое исследование с наибольшей достоверностью подтвердит гриппозную этиологию пневмонии?

+Выявление антигенов вируса гриппа в мокроте методом ИФА.

Исследование парных сывороток.

Заражение куриных эмбрионов.

Иммунолюминесцентное исследование мазков-отпечатков из носовых ходов.

Выявление антител против гемагглютининов вируса гриппа.

32. В отделении новорожденных резко возросла заболеваемость детей ОРВИ. Какой препарат необходимо назначить детям для лечения?

Гриппозную субъединичную вакцину.

Гриппозную вакцину для перорального введения.

33. В родильном доме у новорожденных эпидемиолог зарегистрировал вспышку респираторной вирусной инфекции. При вирусологическом исследовании было установлено, что вирус не культивируется в куриных эмбрионах, а на перевиваемых культурах клеток характеризуется цитопатическим действием с образованием симпластов и округлых клеток с отростками. Какой возбудитель вероятнее всего стал причиной вспышки?

34. Вирусолог инфицировал культуру клеток материалом, содержащим вирусы. Какой вирус можно выявить при помощи реакции гемадсорбции?

+Вирус гриппа типа А.

Вирус полиомиелита I типа.

Вирус полиомиелита II типа.

Вирус полиомиелита III типа.

Вирус гепатита А.

35. 2-летнему ребенку врач поставил диагноз "острая бронхопневмония". В выделениях из бронхов вирусолог выявил большие многоядерные клетки. Какой возбудитель вызвал заболевание?

36. В вирусологическую лабораторию доставлен патологический материал (слизь из носовых ходов), взятый у больного с предварительным диагнозом "грипп". Какая реакция экспресс-метода даст возможность выявить в исследуемом материале специфический вирусный антиген?

+Прямая и непрямая РИФ.

Прямой и непрямой ИФА.

37. В связи с приближением эпидемии гриппа районный эпидемиолог составляет заявку на профилактические препараты. Какой из препаратов будет способствовать формированию активного специфического иммунитета и является наименее реактогенным для организма человека?

Живая (аттенуированная) вакцина.

Донорский γ (гамма) - глобулин.

38. С какой особенностью вируса связана высокая изменчивость вируса гриппа типа А и реализуется через механизм "шифт"?

+Вирус имеет фрагментированный геном.

Вирус имеет РНК минус-типа.

Вирус может вызвать заболевание как у человека, так и у животного.

В состав вириона входят липиды и углеводы.

Вирус имеет однонитевую РНК.

39. В отделении для новорожденных резко возросла заболеваемость детей ОРВИ, которые вызваны различными видами вирусов. Для предупреждения распространения инфекции рекомендовано назначить человеческий лейкоцитарный интерферон. Каким путем его вводят?

40. После осмотра ребенка на вторые сутки от начала заболевания врач поставил больному предварительный диагноз "респираторно-синцитиальная инфекция". Какое лабораторное исследование может подтвердить диагноз у данного ребенка в первые дни пребывания его в стационаре?

+Выявление антигенов вируса РС-инфекции в отделяемом из носоглотки.

Серологическое обследование (четырехкратное нарастание титра антител).

Выявление IgА – антител в отделяемом из носоглотки.

Выявление IgМ – антител в отделяемом из носоглотки.

Высокие титры антител в сыворотке пациента к антигенам вируса РС-инфекции.

41. Ребенок жалуется на резкий сухой ("лающий") кашель, насморк и повышенную температуру. Врач поставил предварительный диагноз "парагриппозная инфекция". Какой результат лабораторного исследования может подтвердить диагноз у пациента?

+Выявление гемадсорбирующего агента при заражении культуры клeток носоглоточным смывом.

Выявление в сыворотке крови антител к антигенам вирусов парагриппа.

Гибель мышей при заражении носоглоточным смывом.

Выявление сферических вирионов при электронной микроскопии.

Образование бляшек под агаровым покрытием при заражении культуры клеток носоглоточным смывом.

42. Вирус птичьего гриппа может вызвать массовое заболевание людей во всех странах мира. В этом случае речь пойдет о:

43. Пациент жалуется на головную боль, общую слабость, кашель, повышение температуры тела. Врач поставил клинический диагноз "ОРВИ". Какой из перечисленных вирусов может быть возбудителем этого заболевания?

Вирус респираторно-синцитиальной инфекции.

+Любой из перечисленных.

44. Семейный врач для профилактики гриппа порекомендовал пациентам прием интерферона. Какой механизм действия этого препарата?

+Блокирует инициацию трансляции и разрушает вирусоспецифическую иРНК.

Нарушает процесс образования новых вирусов.

Тормозит выход вирусов из клетки.

Блокирует "раздевание" вируса.

Блокирует адсорбцию вируса на рецепторах клетки.

45. В вирусологическую лабораторию доставлен материал от больного с диагнозом "ОРВИ". С какой целью проводят типирование вирусов, выделенных из материала от больного?

+Для этиологической диагностики вирусной инфекции.

Для изучения биологических свойств вирусов.

Для изучения физико-химических свойств вирусов.

Для разработки способов неспецифической профилактики.

Для изучения резистентности вирусов к действию факторов внешней среды.

46. Врач больному поставил предварительный диагноз "грипп" и материал, взятый от больного, направил на исследование. При вирусологическом исследовании материала вирусолог поставил реакцию гемадсорбции. Для выявления каких вирусов может быть использована эта реакция?

+Вирусов, имеющих на своей поверхности гемагглютинин.

Всех простых вирусов.

Всех сложных вирусов.

47. На промышленном предприятии провели немедленную профилактику гриппа типа А. Какой противовирусный препарат был использован с этой целью?

48. У 7-летней пациентки педиатр диагностировал парамиксовирусную инфекцию. Как проявляется цитопатическое действие этого вируса?

Образованием внутриядерных включений.

Образованием телец Бáбеша-Нéгри.

Образованием включений Лúпшютца.

49. У больного с подозрением на грипп из носоглоточных смывов вирусолог выделил вирус, обладающий гемагглютинирующими свойствами. Какую серологическую реакцию необходимо поставить для идентификации вируса?

+Реакцию торможения гемагглютинации.

50. В городе эпидемия гриппа. Какой препарат Вы порекомендуете пациентам для неспецифической профилактики заболевания?

51. Для лабораторного подтверждения диагноза "острая респираторная вирусная инфекция" врач решил применить серологический метод диагностики. Когда необходимо взять материал у пациента для данного метода диагностики?

+В начале заболевания (как можно раньше) и через 2-3 недели.

В начале заболевания, как можно раньше.

В конце заболевания, в период угасания клинических симптомов.

На пике заболевания, в момент проявления всех клинических симптомов.

В момент максимального подъема температуры.

52. У больного ребенка врач диагностировал воспаление подъязычных и подчелюстных слюнных желез. Какой патологический материал необходимо взять у пациента для подтверждения диагноза "эпидемический паротит"?

53. При клиническом обследовании пациента педиатр отметил незначительное повышение температуры, увеличение околоушных слюнных желез. Из слюны больного вирусолог выделил вирус, который репродуцировался в куриных эмбрионах, обладал гемагглютинирующими свойствами и вызывал образование симпластов в культуре клеток. Какие еще органы могут быть поражены этой инфекцией?

54. В материале от больного вирусолог выявил РНК-вирусы кори. Какой фермент необходим для увеличения количества молекул вирусной РНК?

55. Ребенок, посещающий детский сад, заболел корью. Известно, что корь имеет 100% контагиозность. Какой препарат для профилактики врач назначит детям, контактировавшим с больным ребенком?

+γ (гамма) - глобулин всем детям.

γ (гамма) - глобулин детям, которые не были привиты против кори.

Достаточно ограничиться наблюдением за контактными детьми.

Коревую вакцину всем детям.

Коревую вакцину детям, которые не были привиты.

56. В детском саду проведена плановая вакцинация детей против кори. При помощи какого метода можно проверить формирование поствакцинального иммунитета?

Метода экспресс - диагностики (ИФА).

Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет