Антитела к миелопероксидазе при васкулите

Общая информация об исследовании

Миелопероксидаза – это фермент нейтрофилов ("белых" кровяных клеток), необходимый для уничтожения микроорганизмов.

Антитела к миелопероксидазе (анти-МРО) относятся к группе антинейтрофильных антител (ANCA, от англ. antineutrophil cytoplasmic antibodies), направленных против различных компонентов нейтрофилов. В эту группу также входят антитела к протеиназе-3 нейтрофилов. ANCA наиболее часто встречаются у пациентов с системными васкулитами, поражающими микрососуды (ANCA-ассоциированные васкулиты: болезнь Вегенера, синдром Чарга – Стросс, микроскопический полиангиит и др.). Считается, что анти-МРО более характерны для синдрома Чарга – Стросс и микроскопического полиангиита, что может быть использовано для дифференциальной диагностики ANCA-васкулитов. До сих пор остается не вполне ясным, являются ли анти-МРО причиной васкулита или же они появляются вторично, в ответ на повреждение сосудистой стенки. Эти антитела ассоциированы с преимущественным поражением почек.

АнтиМРО обнаруживаются в 50 % случаев микроскопического полиангиита и 70-80 % случаев синдрома Чарга – Стросс. Оба заболевания являются системными васкулитами, характеризуются вовлечением кожи, суставов, почек, желудочно-кишечного тракта и периферических нервов и проявляются лихорадкой, потерей веса и немотивированной слабостью. Особенностью микроскопического полиангиита является то, что при этом заболевании практически никогда не поражается легочная ткань. И наоборот, синдром Чарга – Стросс включает в себя атопическую астму. Несмотря на наличие особенностей клинической картины микроскопического полиангиита и синдрома Чарга – Стросс, эти заболевания иногда довольно трудно дифференцировать с гранулематозом Вегенера, особенно если биопсия оказывается неинформативной. В этом случае определение антител к миелопероксидазе является дополнительным тестом, позволяющим поставить диагноз. Дифференциальная диагностика может быть произведена на том основании, что анти-МРО более характерны для микроскопического полиангиита, а антитела к протеиназе-3 – для гранулематоза Вегенера. Следует, однако, отметить, что это разделение не абсолютно. Так, большинство пациентов с гранулематозом Вегенера, в крови которых не удается обнаружить антитела к протеиназе-3, имеют анти-МРО. Анализ на анти-МРО обладает наибольшей чувствительностью (80 %) в отношении одной из форм быстропрогрессирующего гломерулонефрита.

Когда кровь пациентов с анти-МРО исследуется с помощью непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), выявляется специфический тип свечения (перинуклеарный). Антитела с таким типом называют p-ANCA (от англ. perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibody). Так как этот тип свечения в основном выявляют при наличии в крови анти-МРО, нередко p-ANCA используют в качестве синонима антител к миелопероксидазе. Это, однако, не совсем верно. Антитела р-ANCA – более широкое понятие, включающее в себя наряду с анти-МРО антитела к другим компонентом цитоплазматических гранул нейтрофилов (эластазе, катепсину, лактоферрину). Некоторые p-ANCA обнаруживаются при неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, первичном склерозирующем холангите, ревматоидном артрите и других заболеваниях, но вовсе не характерны для васкулита. По этой причине при диагностике васкулита РНИФ не может заменить анализа на анти-МРО и получение перинуклеарного типа свечения в РНИФ (p-ANCA) всегда дополняется исследованием на антитела к миелопероксидазе с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) или комплексным исследованием нескольких антинейтрофильных антител (панель антител).

Хотя ИФА обладает достаточно высокой чувствительностью, для максимально точного результата рекомендуется комбинация двух тестов (анализ на p-ANCA в РНИФ и на антитела к миелопероксидазе с помощью ИФА).

Уровень анти-МРО остается достаточно высоким даже при достижении клинической ремиссии и не отражает активности заболевания. Это особенно характерно для лекарственного васкулита, при котором результат анализа может оставаться положительным в течение нескольких лет после отмены препарата. В связи с этим анализ не используют для контроля за лечением.

Как правило, пациенты с васкулитом подвержены одному или нескольким рецидивам заболевания после курса иммуносупрессивной терапии. Показано, что обнаружение анти-МРО – это более благоприятный прогностический признак, чем обнаружение антител к протеиназе-3. Наличие анти-МРО ассоциировано с меньшей частотой рецидивов и более быстрым ответом на терапию.

Специфичность анализа в отношении микроваскулита составляет около 80 %. Антитела к миелопероксидазе также обнаруживаются при некоторых других заболеваниях, таких как системная красная волчанка, интерстициальный гломерулонефрит, саркоидоз. Так как исследование не является строго специфичным для какого-либо конкретного заболевания, результат анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для дифференциальной диагностики системных васкулитов, а также составления их прогноза.

Когда назначается исследование?

При симптомах системного васкулита: лихорадке, потере веса, немотивированной слабости, кожных высыпаниях, синдроме Рейно, носовых кровотечениях, кашле с отхождением кровавой мокроты, гематурии, гипертензии, головной боли, очаговой неврологической симптоматики, эпилепсии и др.
При получении перинуклеарного типа свечения (p-ANCA) в реакции непрямой иммунофлюоресцеции (РНИФ).

Антитела к миелопероксидазе – специфические иммуноглобулины, взаимодействующие с бактерицидным ферментом нейтрофилов. Определение анти-МПО в крови используется для раннего выявления и дифференциации системных васкулитов, диагностики гломерулонефрита и острой почечной недостаточности. Кровь для исследования забирается из вены. Уровень АТ определяется с помощью иммуноферментного анализа. Границы нормальных значений – 0-20 отн. ед/мл. Сроки готовности результата составляют 6-8 рабочих дней.

Миелопероксидаза – белок, расположенный в лизосомах белых кровяных клеток. Функционально она относится к ферментам, в присутствии перекиси водорода окисляет анионы хлора. Образующийся гипохлорит оказывает неспецифическое бактерицидное действие. Антитела к миелопероксидазе (анти-МПО, anti-MPO) вырабатываются иммунной системой, обнаруживаются в крови при системных васкулитах преимущественно с поражением почек. Роль АТ в патогенетическом механизме не установлена. Анализ на определение анти-МПО обладает высокой чувствительностью, низкая специфичность требует учета клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Показания

Тест на анти-МПО показан при системных васкулитах. Он назначается в комплексе с исследованием других антинейтрофильных АТ в следующих случаях:

Диагностика микроскопического полиангиита, его дифференциация с синдромом Чарга-Стросса, гранулематозом Вегенера. Заболевание сопровождается поражением мелких сосудов, кожи, легких, суставов, почек. Анализ назначается при характерных симптомах: кожных петехиальных высыпаниях, артралгиях, общей слабости, отеках, кашле, одышке, болях в грудной клетке. При постановке диагноза учитывается результат теста на АТ к протеиназе-3. Для микроскопического полиангиита характерно преобладание anti-MPO.
Диагностика синдрома Чарга-Стросса, его различение с микроскопическим полиангиитом, гранулематозом Вегенера. При данном синдроме поражаются легкие, сердце, желудочно-кишечный тракт, нервная система, кожа, суставы. На начальных этапах характерны затяжные риниты, синуситы, бронхиты, проявляющиеся респираторными симптомами (кашлем, воспалением слизистых, отделением слизи, заложенностью носа). Позже присоединяются кожные высыпания, нарушения тактильной чувствительности, тошнота, рвота, боли в животе. В результатах исследования антинейтрофильных антител характерно повышение уровня анти-МПО, показатель АТ к протеиназе 3 часто остается нормальным.
Прогноз рецидивов системных васкулитов. Исследование с определенной периодичностью назначается пациентам с установленным диагнозом. Выявление anti-MPO рассматривается как благоприятный признак по сравнению с обнаружением АТ к протеиназе 3, указывает на меньшую вероятность возникновения рецидива.
Определение быстропрогрессирующего гломерулонефрита, острой почечной недостаточности при системных васкулитах. Поражение почек в 80-90% случаев сопровождается повышенным уровнем антител к миелопероксидазе.

Подготовка к анализу

Кровь для исследования забирается из вены. Подготовка к процедуре сдачи биоматериала носит рекомендательный характер:

Перерыв после приема пищи – не менее 4 часов. Разрешено пить чистую негазированную воду.
Отказ от алкогольных напитков, тяжелых физических нагрузок – за сутки до процедуры.
Отказ от курения, умеренной физической активности, избегание воздействия стрессовых факторов – за 30 минут до сдачи крови.
Физиотерапевтические процедуры, инструментальные обследования – после сдачи биоматериала.
На консультации с врачом стоит обсудить необходимость временной отмены принимаемых лекарств.

Кровь забирается методом пункции из локтевой вены. Хранится и транспортируется в герметичной пробирке. В лаборатории биоматериал помещают в центрифугу, происходит разделение плазмы и форменных элементов. Из жидкой части удаляют фибриноген. Полученную сыворотку подвергают иммуноферментному анализу. Процедура исследования занимает до 8 рабочих дней.

Нормальные значения

Границы нормы не зависят от возраста и пола пациента. Референсные значения теста на антитела к миелопероксидазе – 0-20 отн. ед/мл. Нормальный результат интерпретируется с учетом замечаний:

Повышение значения

Количество антител к миелопероксидазе увеличивается при воспалении сосудов, поражении почечных клубочков. Повышение показателя исследования определяется при следующих заболеваниях:

Системные васкулиты. Появление АТ характерно для патологий, затрагивающих мелкие сосуды, таких как микроскопический полиангиит, синдром Чарга-Стросса, гранулематоз Вегенера.
Гломерулонефриты. Повышенный показатель определяется при малоиммунном полулунном гломерулонефрите, интерстициальном (лекарственном) гломерулонефрите.
Аутоиммунные и инфекционные заболевания: саркоидоз, синдром Гудпасчера, СКВ, ревматоидный артрит, ПСХ, болезнь Берже, болезнь Крона, вирусные гепатиты. Уровень анти-МПО может быть повышенным, но не является диагностически значимым признаком.

Лечение отклонений от нормы

Анализ на антитела к миелопероксидазе – чувствительный метод для дифференциальной диагностики и составления прогноза течения системных васкулитов. Для интерпретации полученных данных нужно обратиться к ревматологу, дерматовенерологу, пульмонологу. Результаты позволяют врачу правильно определить заболевание, оценить вовлеченность почек в патологический процесс, подобрать адекватное лечение.

Вход на сайт

где сдать анализ крови на тест анализы спб СПб инвитро Петербург Питер на целиакию аутоиммунные заболевания аутоантитела онкогенетика онкогены онкоген аутоиммунная диагностика Лапин autoimmun антиядерные лабораторная антинуклеарный фактор антинуклеарные антитела HEp-2 тип волчанка свечения амилоидоз склеродермия иммуноблот ревматоидный цитруллиновый расшифровка экстрагируемые скрининг заболевания смешанное системная СКВ артрит дсДНК CCP ССР АЦЦП саркоидоз антинейтрофильные криоглобулины гранулематозные АНФ АНЦА ANCA ENA иммунофиксация васкулиты Крона целиакия аутоиммунный печени язвенный колит глиадину трансглутаминазе стероидпродуцируюшим Вегенера яичника эндокринопатии пузырные пузырчатка пемфигоид рассеянный склероз миастения миелина белок олигоклональный изоэлектрофокусирования IgG IgA IgM легкие цепи полиневрит ганглиозидам полимиозит парапротеин миелома неоптерин островковые GAD антимитохондриальные гладкие скелетные мышцы ASCA колит антигену фосфолипидный синдром кардиолипину фосфолипидам гликопротеину нуклеосомам SSA SSB RNP Sm CENT Scl Jo-1 АМА антикератиновые антиперинуклеарный MCV LKM-1 рецептору иммунофлюоресценция ИФА иммунологическая лаборатория университет санкт-петербург павлова Чардж-Стросса полиангиит микрокристаллические первичный билиарный цирроз трансглутаминаза трансглютаминаза критерии ревматоидного артрита 2010 года СПб Питер Петербург нейрогенетика BRCA NRAS KRAS BRAF HER2 MSI PCA3 тест мутации

Что ищут на нашем сайте:

01 02 03 150, Антитела к тромбоцитам, болезнь крона, кальпротектин, ANA, антитела к антигенам миелина нРИФ, 01 02 15 260, анца, скрининг миеломной, AHa screen, изофермент, Антитела класса igG к цитомегаловир, анитела к хгч, lga к sa, аутоимунное бесплодие, антинуклеарный фактор на клеточно, Кал на эластаза, квантифероновый, как узнать цену исследования и как, соединительный ткани, иммунология.

Диагностика васкулитов и поражения почек, Антитела к цитоплазме нейтрофилов

Васкулиты представляют собой широкий спектр заболеваний имеющих разнообразную природу. Среди них первичные васкулиты имеют аутоиммунную этиологию, а другие процессы являются вторичными по отношению к опухолям, инфекциям и коагулопатиям.

На основании классификации Чаппелл Хилл 1994 г. прервичные васкулиты делят по калибру пораженных сосудов и механизму иммунологического поражения. Васкулиты крупных сосудов (аортоартериит, височный артериит, узелковый периартериит) связаны с поражением эндотелия. Этот процесс сопровождается появлением антител к эндотелию и выбросом цитокинов, приводящих к выраженному острофазовому ответу, в том числе увеличению СОЭ и СРБ. По выраженности острофазовый ответ при системных васкулитах похож на сепсис.

Гранулематозные васкулиты, такие как с-м Вегенера, сопровождаются появлением антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA), которые реагируют с белками азурофильных гранул цитоплазмы нейтрофилов. Некоторые бактериальные агенты (стафилококки), производящие суперантигены, могут играть роль в индукции аутоиммунных ответов. Воспаление приводит к экспрессии антигенов антинейтрофильных антител на поверхности лейкоцитов и эндотелия. Взаимодействие антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) с мишенями приводит к преждевременной дегрануляции нейтрофилов при их трансэндотелиальной миграции и образованию воспалительной гранулемы. Существует ряд исследованных антигенов антинейтрофильных антител, из которых важнейшими являются протеиназа-3 (ПР-3 или PR-3) и миелопероксидаза (МПО или MPO). При воспалительных заболеваниях кишечника антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA) направлены против плохо изученных антигенов.

Поражения мельчайших сосудов или капилляриты (с-м Шонлейн-Геноха, криоглобулинемия) возникают под воздействием циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК),которые представлены полимерными иммуноглобулинами и недостаточно растворимы. Так, резкое снижение растворимости ЦИК при криоглобулинемии на фоне охлаждения является причиной кожной пурпуры, артралгий, полиневрита и гломерулонефрита. При капилляритах целесообразно исследовать белки комплемента и антитела к ним. Биопсия кожи, при капилляритах позволяет обнаружить специфические отложения иммуноглобулинов в стенках мелких сосудах.

Тест 01.02.15.395 Антитела к эндотелиальным клеткам (HUVEC)

Антигенные мишени антиэндотелиальных антител невозможно очистить или синтезировать, поэтому основным методом выявления данных аутоантител является нРИФ на клетках эндотелия пуповины человека (HUVEC). Исследуется титр антител и у 70% больных с васкулитами крупных и средних сосудов отмечается положительный результат обнаружения антител. Антитела к эндотелию могут иметь перекрестную реакцию с антикардиолипиновыми антителами.

Тест 01.02.15.010 Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА или ANCA)

Основной тест для выявления антинейтрофильных антител является нРИФ с исследованием титра и типа свечения цитоплазмы клетки. Выделяют два основных типа свечения антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA) – цитоплазматический (характерный для с-ма Вегенера) и перинуклеарный (характерный для других васкулитов и воспалительных заболеваний кишечника). Для описания типов свечения антител к нейтрофилов обычно используются сокращения – цАНЦА и пАНЦА. Кроме того, при выявлении антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) могут быть обнаружены антитела против ядер нейтрофилов или редкий тип свечения хАНЦА. При обнаружении положительного результата обнаружения АНЦА необходимо определить антигенную специфичность антител. Целесообразно выявлять АНЦА совместно с АНФ ( тест 01.02.15.035 ), так как последние могут маскировать АНЦА, а также АНФ, АНЦА и РФ в качестве скрининга васкулитов и ревматической патологии ( тест 01.02.15.020 ).

Тест 01.02.15.140 Антитела к протеиназе 3 (ПР3 или PR-3),

Тест 01.02.15.135 Антитела к миелопероксидазе (МПО или MPO),

Тест 01.02.15.415 Антитела к антигенам антинейтрофильных антител (6 антигенов)

В азурофильных гранулах цитоплазмы нейтрофилов находится ряд белков, которые осуществляют микробицидные и бактерицидные функции этих клеток. Антитела к ним играют большое значение в диагностике васкулитов, поражений печени и заболеваний кишечника.

Уважаемые пациенты! Каталог анализов в настоящее время находится в стадии наполнения информацией и содержит в себе далеко не все выполняемые нашим центром исследования. Филиалами Центра эндокринологии проводится более 700 видов лабораторных анализов. С их полным списком Вы можете ознакомиться здесь.

Пожалуйста, уточняйте информацию о стоимости услуг и подготовке к анализам по телефонам (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. При сдаче анализов крови, пожалуйста, учитывайте стоимость забора биоматериала.

Готово к оформлению: 0 анализов

Антитела к миелопероксидазе (МРО, анти-МРО) представляют собой аутоантитела, которые направленны против энзима миелопероксидазы нейтрофилов. Антитела служат клинико-лабораторным маркером системных васкулитов, исследуются с целью их диагностики, а также прогноза.

Миелопероксидаза представляет собой фермент (энзим) нейтрофилов (одна из фракций "белых" кровяных клеток), который необходим для уничтожения микроорганизмов.

Антитела к миелопероксидазе (или анти-МРО) принадлежат к группе так называемых антинейтрофильных антител (или ANCA, от английского antineutrophil cytoplasmic antibodies), которые ориентированы против различных составных компонентов нейтрофилов. К этой группе также относятся антитела в отношении протеиназы-3 нейтрофилов. Антинейтрофильные антитела наиболее часто регистрируются у лиц, страдающих системными васкулитами, поражающими мелкие сосуды (например синдром Чарга-Стросса, болезнь Вегенера, микроскопический полиангиит и другие). Принято полагать, что антитела к миелопероксидазе более типичны для синдрома Чарга-Стросса, а также микроскопического полиангиита, и это может быть использовано при дифференциальной диагностике ANCA-ассоциированных васкулитов. На сегодняшний день до конца непонятно, являются ли МРО причиной, вызывающей развитие васкулита, или антитела появляются вторично, как ответ на повреждение стенки сосудов. Эти антитела связаны с преимущественным поражением ткани почек.

50% всех случаев микроскопического полиангиита, а также 70-80% - синдрома Чарга-Стросса сопровождаются появлением анти-МРО. Обе патологии относятся к системным васкулитам; отмечается поражение кожи, почек, суставов, органов пищеварительной системы, периферических нервов, повышение температуры тела, снижение массы тела, общая слабость. При микроскопическом полиангиите практически никогда не затрагивается легочная ткань, тогда как при синдроме Чарга-Стросса отмечается наличие атопической астмы. При наличии особенностей клинического проявления этих заболеваний их, тем не менее, иногда сравнительно трудно разграничить с гранулематозом Вегенера, в особенности если проведенная биопсия оказывается неинформативной. Исследование антител к миелопероксидазе служит в таких случаях дополнительным методом, который дает возможность установить диагноз. Разграничение может быть проведено на основании того, что антитела к миелопероксидазе более типичны для микроскопического полиангиита, в то время как антитела к протеиназе-3 более характерны для гранулематоза Вегенера. Тем не менее, следует отметить, что такое разделение не является абсолютным. Так, например, у большинства лиц с гранулематозом Вегенера, у которых в крови не удается выявить антитела к протеиназе-3, обнаруживаются анти-МРО. Исследование на антитела к миелопероксидазе обладает наибольшей чувствительностью (до 80%) касательно одной из разновидностей быстропрогрессирующего гломерулонефрита.

При исследовании крови лиц с антителами к миелопероксидазе с помощью так называемой непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) определяется специфический тип свечения (так называемый перинуклеарный). Антитела, имеющие такой тип свечения, обозначают как p-ANCA (от английского сочетания perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibody). Поскольку этот тип свечения обнаруживают, главным образом, в случае присутствия в крови антител к миелопероксидазе, нередко p-ANCA используются как синоним антител к миелопероксидазе, что, однако, не совсем корректно. P-ANCA обозначает более широкое понятие, которое, наряду с анти-МРО, включает в себя также и антитела к иным компонентам гранул цитоплазмы нейтрофилов (например эластазе, лактоферрину, катепсину). Ряд p-ANCA выявляются в случае болезни Крона, неспецифического язвенного колита, при ревматоидном артрите, первичном склерозирующем холангите и некоторых других патологиях, однако совсем не типичны для васкулита. В силу этого реакция непрямой иммунофлюоресценции при диагностике васкулита не является заменой исследованию на антитела к миелопероксидазе и выявление перинуклеарного типа свечения (p-ANCA) должно всегда дополняться поиском антител к миелопероксидазе посредством иммуноферментного анализа или же комплексным исследованием ряда антинейтрофильных антител.

Хотя ИФА (иммуноферментный анализ) и обладает сравнительно высокой чувствительностью, тем не менее, с целью получения максимально точного результата исследования рекомендуется сочетание двух методов исследования, а именно анализ на pANCA с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции и исследование на наличие антител к миелопероксидазе посредством иммуноферментного анализа.

Концентрация антител к миелопероксидазе сохраняется сравнительно высокой даже в случае достижения клинической ремиссии, не отражая активности заболевания. Этот феномен особенно показателен при лекарственном васкулите, когда результат исследования может оставаться положительным на протяжении нескольких лет после того, как препарат был отменен. В связи с такими нюансами исследование не применяется для контроля проводимого лечения.

Как правило, у лиц, страдающих васкулитом, отмечаются один или несколько рецидивов болезни после курса проведенной иммуносупрессивной терапии. Так, показано, что детекция анти-МРО является более благоприятным в прогностическом плане признаком, нежели обнаружение антител в отношении протеиназы-3. Присутствие анти-МРО сочетается с меньшей встречаемостью рецидивов, а также с более быстрым ответом при проведении лечения.

Специфичность исследования применительно к микроваскулиту составляет порядка 80%. Антитела к миелопероксидазе обнаруживаются также и при ряде других патологий, как, например, интерстициальный гломерулонефрит, системная красная волчанка, саркоидоз. Поскольку исследование не строго специфично для определенного конкретного заболевания, его результат необходимо трактовать с учетом дополнительных данных, которые могут быть получены при сборе анамнеза, а также при применении других лабораторных и инструментальных методов исследования.

За 30 минут до взятия крови прекращается курение.

Приведены лишь некоторые процессы, состояния и заболевания, при которых целесообразно назначение данного анализа.

Исследование на антитела к миелопероксидазе может проводиться при признаках системного васкулита: потере веса, повышении температуры тела, немотивированной общей слабости, появлении кожной сыпи, носовых кровотечениях, синдроме Рейно, кашле с кровавой мокротой, повышении артериального давления, появлении крови в моче, головных болях, очаговой неврологической симптоматике и ряде других; при получении так называемого перинуклеарного типа свечения (или p-ANCA) при РНИФ (реакции непрямой иммунофлюоресценции).

Интерпретация результатов

Ниже приведены лишь некоторые возможные процессы, состояния и заболевания, при которых обнаруживаются антитела к миелопероксидазе. Следует помнить, что результат исследования может не всегда являться достаточно специфичным и достаточным критерием для формирования заключения. Представленная информация никоим образом не служит целям самодиагностики и самолечения. Окончательный диагноз устанавливается только врачом при сочетании полученных данных с результатами других методов исследования.

Возможные причины пониженного уровня анти-МРО: понижение содержания диагностического значения не имеет.

Возможные причины повышенного уровня анти-МРО: синдром Чарга-Стросса; микроскопичексий полиангиит; гранулематоз Вегенера; малоиммунный полулунный гломерулонефрит; интерстициальный (лекарственный) гломерулонефрит; IgA-нефропатия; синдром Гудпасчера; саркоидоз; ревматоидный артрит; системная красная волчанка; синдром Фелти; первичный склерозирующий холангит; болезнь Крона; неспецифический язвенный колит; вирусные инфекции (в частности хронический вирусный гепатит).

Факторы, которые могут оказывать влияние на результаты исследования

Антитела к миелопероксидазе более часто выявляются у женщин, страдающих васкулитом, нежели у мужчин.

Результат проведенного теста может оставаться положительным на протяжении длительного времени после того, как была достигнута клиническая ремиссия.

Важные замечания

Данное исследование не применяется с целью контроля за проводимым лечением.

Истории пациентов
Видеоотзывы: опыт обращения в Северо-Западный центр эндокринологии

Лабораторное обследование больных системными васкулитами включает определение аутоантител, компонентов системы комплемента, клеточных иммунологических реакций, показателей активации эндотелия и острофазового ответа организма.

Для идентификации инфекционных агентов, ассоциирующихся с развитием васкулитов, проводят бактериологические и серологические тесты.

Основным методом определения антинейтрофильных цитоплазматических антител (АНЦА) является метод реакции непрямой иммунофлюоресценции (НРИФ) с использованием фиксированных спиртом нейтрофилов [A.Wiik, 1989], с помощью которого выявляются два основных типа аутоантител: классические цитоплазматические АНЦА (к-АНЦА) и перинуклеарные (п-АНЦА).

В некоторых случаях обнаруживается атипичное диффузное свечение нейтрофилов (а-АНЦА). В последнее время для определения антинейтрофильных цитоплазматических антител вместо НРИФ применяют проточную цитофлюориметрию.

к-АНЦА дают гранулярную цитоплазматическую флюоресценцию с большей интенсивностью по направлению к ядру нейтрофилов, чем к периферии. Кроме того, они реагируют с цитоплазмой моноцитов, но не эозинофилов, лимфоцитов или НЕр-2 клеток, которые используются для определения антинуклеарного фактора (АНФ), и обычно специфичны в отношении ПР-3.

п-АНЦА вызывают перинуклеарное свечение нейтрофилов и некоторых моноцитов и наиболее часто реагируют с миелопероксидазой. Этот тип свечения является как бы артефактом, обусловленным спиртовой фиксацией нейтрофилов. Обработка их спиртом позволяет зафиксировать клетки на поверхности стекла и увеличивает проницаемость клеточной мембраны для молекул Ig, но приводит к растворению липидной мембраны.

В результате этого содержимое цитоплазмы нейтрофилов распределяется вокруг них. Катионные молекулы (лизоцим, миелопероксидаза, эластаза, катепсин G и лактоферрин) могут связываться с отрицательно заряженными компонентами ядра собственных и близлежащих клеток и давать свечение, напоминающее АНФ. Вот почему при определении п-АНЦА необходима постановка соответствующих контролей с лимфоцитами донора или НЕр-2 клетками.

О наличии п-АНЦА можно судить только в том случае, если сыворотки реагируют только с нейтрофилами (или моноцитами) или если титр антител, реагирующих с полиморфно-ядерными лейкоцитами, в 2 раза выше, чем у антител, связывающихся с лимфоцитами. Для исключения перераспределения катионных антигенов предлагается фиксировать клетки формальдегидом, но это приводит к увеличению аутофлюоресценции и к потере ими некоторых антигенных детерминант.

Однако, хотя результаты определения АНЦА методом непрямой иммунофлюоресценции и иммунофермеитный метод (ИФМ) нередко совпадают, последний требует стандартизации [E.Hagen, 1993]. У части больных с к-АНЦА, по данным иммунофлюоресценции, в сыворотках обнаруживаются антитела к миелопероксидазе, и, наоборот, в сыворотках, в которых выявляются только антитела к миелопероксидазе, иногда идентифицируются не п-АНЦА, а к-АНЦА [M.Segelmark et al.,1994; J.Jennings et al.,1994].

Данные, касающиеся распространенности и типов антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека, суммированы в таблицах 5.1 и 5.2.

Таблица 5.1. Частота (%) обнаружения АНЦА при заболеваниях человека (C.G.M.Kallenberg et al.,1995; W.L.Gross,1995)

Заболевание	Тип антител
Заболевание	к-АНЦА (или а-ПР-3)	п-АНЦА (или а-МПО)
Гранулематоз Вегенера	80	20
Классический узелковый полиартериит	10	20
Микроскопический полиангиит	50	50
Синдром Чарга—Стросса	10	70
Болезнь Кавасаки	0	6-91
Полиангиитный перекрестный синдром	40	20
Системная красная волчанка (СКВ)	0	4
Смешанное заболевание соединительной ткани	0	0
Системная склеродермия	0	0
Полимиозит/дерматомиозит	0	10
Ревматоидный артрит	0	3-40
Ревматоидный васкулит	0	50-75
Синдром Фелти	0	21-100
Болезнь Стилла	0	23
Синдром Шегрена	0	27
Синдром Рейтера	0	0
Реактивный артрит	0	0
Анкилоизирующий спондилоартрит	0	0
Псориатический артрит	0	0

Таблица 5.2. Тип антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека

Заболевание	Тип свечения	ПР-3	МПО	ЛФ	h-lamp-2	Кат-G	ББП	ЛЗ	р- ГН	Эластаза	Неизвестен
Микроскопический полиангиит	К	+	++
Гранулематоз	К	+++	+
Вегенера
Геморрагический васкулит	К	+
Синдром Чарга—Стросса	К и П	+	++	+
Болезнь Кавасаки	К и П	+	+
Гигантоклеточный артериит	П	+
Классический узелковый полиартериит (УП)	К и П	+	+
Лекарственный васкулит	П	+
Быстропрогрессирующий гранулематоз	П и А	+	+	+
Синдром Гудпасчера	К и П	+	+
Ревматоидный артрит (РА)	А	+	+	+
Синдром Фелти	А	+	+
Ревматоидный васкулит	П	+
СКВ	А	+	+	+
Воспалительные заболевания кишечника, ВИЧ	А	+	+	+	+

Классические антинейтрофильные цитоплазматические антитела

к-АНЦА (а-ПР-3) наиболее часто обнаруживаются при гранулематозе Вегенера, реже они выявляются у больных с другими формами системных васкулитов, которые по характеру клинико-лабораторных проявлений напоминают это заболевание (микроскопический полиангиит (МПА) и синдром Чарга—Стросса) [W.Gross et al.,1993] (табл. 5.1).

Они практически не встречаются при гигантоклеточном артериите (ГКА) и артериите Такаясу [А.А.Баранов,1998; X.Bosch et al.,1991; P.Dagenais et al.,1993; T.Baranger et al.,1994], болезни Кавасаки [LRider et al.,1993], классическом УП [S.Hauschild et al.,1994], геморрагическом васкулите [N.Ronda et al.,1994], кожном лейкоцитокластическом васкулите [B.Nolle et al.,1989], криоглобулинемическом васкулите и болезни Бехчета [B.Nolle et al.,1989; M.Hamza et al.,1990].

Использование определения к-АНЦА в качестве скринингового теста позволяет увеличить выявляемость гранулематоза Вегенера, особенно на ранней стадии болезни, у больных с лимитированной и атипичной формами заболевания или перекрестными ангиитными синдромами.

Серия исследований посвящена оценке чувствительности и специфичности к-АНЦА для диагностики гранулематоза Вегенера. Установлено, что их специфичность при гранулематозе Вегенера очень высока и приближается к 100% [J.Cohen Tervaert et al, 1989; B.Nolle et al., 1989; G.Kerr et al., 1993; J.Rao et al, 1995]. Например, G.Kerr и соавт.(1993), обследовав 112 больных с различными системными васкулитами (артериит Такаясу, УП, синдромом Чарга—Стросса, геморрагический васкулит и др.), кожными васкулитами, гранулематозными (лимфоматоидный гранулематоз, саркоидоз, туберкулез) и аутоиммунными заболеваниями (системная красная волчанка, полимиозит) и с другими воспалительными болезнями внутренних органов, обнаружили к-АНЦА только у 5 больных.

По данным ретроспективного исследования, чувствительность к-АНЦА в активную фазу гранулематоза Вегенера составляет 88%) [G.Kerr et al.,1993]. При лимитированной форме заболевания она равна 92%, а при генерализованной — 85%>. В период ремиссии чувствительность к-АНЦА снижается до 43%, составляя 37%) при лимитированной и 46% при генерализованной формах.

Результаты других авторов также свидетельствуют о низкой (28%) чувствительности к-АНЦА в отношении диагностики гранулематоза Вегенера [J.Rao et al.,1995]. Это частично связано с тем, что к-АНЦА редко выявляются при обострении заболевания, а у больных с частичной ремиссией они присутствуют в низких титрах. [B.Nolle et al.,1989; E.Petterson et al., 1992].

Результаты, касающиеся клинического значения определения к-АНЦА в динамике, также противоречивы. По данным одних исследователей, повышение уровня к-АНЦА у больных в стадии ремиссии является фактором риска развития обострения [C.Stegemann et al.,1994], а динамика их титра на фоне цитотоксической терапии позволяет дифференцировать обострение самого заболевания от интеркуррентной инфекции [B.Nolle et al.,1989; J.Cohen Tervaert et al.,1989; E.Petterson et al.,1992].

С другой стороны, корреляция между изменением титров к-АНЦА и клинико-лабораторных показателей наблюдается всего в 64% случаев [G.Kerr et al.,1993]. Увеличение титров антител предшествует клиническому обострению только у 24% больных, находившихся до этого в ремиссии или имевших низкую активность заболевания.

к-АНЦА редко обнаруживаются при инфекционных заболеваниях [W.Schmitt et al.,1991; A.Adebajo et al.,1993]. Тем не менее увеличение их титров при некоторых инфекциях, например при инфекционном эндокардите, может отражать развитие вторичного васкулита [J.Wagner et al.,1991; J.Duran et al.,1994].

Интересные результаты были получены при изучении антинейтрофильных цитоплазматических антител у больных с амебиозным поражением печени, при котором 75% АНЦА-позитивных сывороток реагировали с ПР-3 [D.Pudifin et al.,1994]. При этом заболевании морфология тканевого повреждения (дегрануляция нейтрофилов, васкулит) напоминает таковое при гранулематозе Вегенера.

Полагают, что антинейтрофильные цитоплазматические антитела могут перекрестно реагировать с антигенами Entamoeba histolytica или этот микроорганизм способен вызывать высвобождение ферментов из нейтрофилов и таким образом индуцировать синтез аутоантител.

С помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции и ИФМ с иммобилизованным на твердой фазе нефракционированным экстрактом цитоплазмы нейтрофилов мы определяли АНЦА у 36 больных гранулематозом Вегенера и 10 больных МПА [В.А.Тищенко и соавт.,1995]. В группу сравнения вошли 68 больных, 44 — с системными васкулитами (13 — с узелковым полиартериитом, 30 — с артериитом Такаясу, 1 — с гангренесцирующей гранулемой носа), 13 — с СКВ, из них 8 с АФС, и 11 — с гломерулонефритами.

Результаты, касающиеся частоты обнаружения и уровня антинейтрофильных цитоплазматических антител, представлены в таблице 5.3.

Таблица 5.3. Частота обнаружения антинейтрофильных цитоплазматических антител у больных гранулематоэом Вегенера, микроскопическим полиангиитом, другими сосудистыми заболеваниями и у доноров

S.Kuster и соавт.(1992) при изучении 44 больных системной красной волчанкой, включая 33 с поражением почек, не обнаружили к-АНЦА ни в одном случае, однако выявили п-АНЦА у подавляющего большинства (90,1%) пациентов. У 25% больных были обнаружены а-МПО в низком титре, чаще при васкулите кожи и гломерулонефрите.

R.Pauzner и соавт.(1994) идентифицировали антинейтрофильные цитоплазматические антитела у 35% из 114 больных СКВ, в том числе в 24,5% случаев — п-АНЦА и в 10,5% — к-АНЦА. Присутствие этих антител не коррелировало с активностью СКВ (индекс SLEDAI), наличием у больных васкулита, поражения почек или ЦНС.

По нашим данным, п-АНЦА обнаруживались почти у половины (47,7%) из 44 обследованных мужчин с системной красной волчанкой, преимущественно при остром течении заболевания. Однако их присутствие в сыворотке крови не коррелировало с клинико-лабораторными особенностями болезни, включая воспалительную активность, оцениваемую по общепринятым критериям и индексам SLAM и SLEDAI [А.А.Барандв,1998].

L.Nassberger и соавт.(1990) исследовали а-МПО и антитела к эластазе у 102 больных СКВ, включая 16 больных волчаночным нефритом и 6 больных с волчанкой, индуцированной гидралазином. У 21% больных в сыворотках присутствовали а-МПО, но какой-либо корреляции между ними и клиническими и иммунологическими особенностями заболевания отмечено не было. Антитела к эластазе выявлялись у 3 из 4 больных с поражением ЦНС. При гидралазиновой волчанке встречались оба типа аутоантител.

Другие авторы также отмечают присутствие а-МПО изотипов IgG и IgM у большинства больных СКВ или нефритом, развившихся при приеме гидралазина [L.Nassberger et al.,1991;G.Cambridge et al.,1994].

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела при других ревматических заболеваниях

Имеются сообщения о наличии АНЦА при системной склеродермии. E.Endo и соавт.(1994) при этом заболевании обнаружили п-АНЦА в НРИФ у 6 из 100 больных. Сыворотки всех АНЦА-положительных больных реагировали с а-гранулами нейтрофилов и миелопероксидазой. У больных с п-АНЦА отмечено быстрое ухудшение функции почек с развитием почечной недостаточности, а у двух из них — легочные геморрагии.

Р.Т.Алекперов и соавт. (1998) при обследовании 73 больных с системной склеродермией выявили АНЦА у 31 (42,5%) из них. В большинстве случаев (24 человека) обнаружены п-АНЦА. У 4 встречались к-АНЦА и у 3 одновременно п-АНЦА и к-АНЦА. В группе АНЦА-позитивных больных наблюдалось достоверно более высокое содержание СРБ, чем у остальных. Титр антинейтрофильных цитоплазматических антител коррелировал с титром РФ и активностью комплемента. Не выявлено различий в продолжительности и характере течения болезни между двумя группами больных.

Нами при обследовании 15 женщин с первичным синдромом Шегрена п-АНЦА в реакции непрямой иммунофлюоресценции были выявлены только в 1 (6,7%) случае. Основные клинико-лабораторные проявления заболевания у этой больной не отличались от других пациентов. Следует отметить, что эти аутоантитела не присутствовали в сыворотках крови у больных, имеющих кожный криоглобулинемический васкулит, что согласуется и с данными других авторов [W.L.Gross et al.,1995; A.G.Tzioufas et al.,1996].

Насонов Е.Л., Баранов А.А., Шилкина Н.П.

Читайте также: