Герпесвирусная инфекция у коров
Мищенко B.A., Думова B.B., Мищенко А.В. ФГБУ "ВНИИЗЖ", г. Владимир
Черных О.Ю. Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория, г. Кропоткин
Шевченко А.А. Кубанский госагроуниверситет, г. Краснодар
Герпесвирусы, обладающие сложной уникальной структурой, широко распространены в природе. Практически все высшие эукариоты могут быть инфицированы герпесвирусами. Уникальность герпесвирусов в том, что они могут оставаться в латентном состоянии в хозяине, в котором они размножаются. Геном герпесвируса может встраиваться в геном клетки хозяина и длительное время персистировать. При разнообразных стрессах герпесвирусы могут реактивироваться с последующей экскрецией вируса во внешнюю среду.
В настоящее время описано более 80 герпесвирусов. Наиболее широкое распространение имеет инфекционный ринотра-хеит. Вирус ИРТ изолировали и от других видов животных: оленей, лосей, буйволов, антилоп, диких и домашних свиней. Значение этих животных в экологии вируса ИРТ окончательно не выяснено. Методами молекулярной биологии показано существование ряда антигенных вариантов вируса ИРТ.
В последнее время появилось много сообщений о регистрации инфекции крупного рогатого скота, вызываемой герпесвирусом типа 4.
Все герпесвирусы типа 4 близки по молекулярной структуре генома, имеют между собой антигенные связи, относятся к подсемейству гаммагерпесвирусов рода Rhadinovirus [1].
Впервые этот возбудитель был выделен в Венгрии в 1963 год от телёнка с клинической картиной заболевания органов дыхания и кератоконьюктивитом. Указанный штамм был назван Мовар 33/63 [2]. С 1987 года все подобные штаммы были объединены под названием герпесвирус 4 типа.
В последующем, международный комитет по таксономии вирусов (ICTV) официально принял название возбудителя "герпесвирус КРС 4 типа" [1].
Герпесвирусы КРС 4 типа были выделены от животных с поражением органов пищеварения, дыхания и воспроизводства. Доказана инфицированность животных во многих странах мира, в том числе: Венгрии, Италии, Бельгии, Японии, Израиле, США, Индии, Кении, России, Египте, Швейцарии [2, 3, 6, 7, 8, 9, 17].
Герпесвирус 4 типа был выделен из патологического материала от коров с нарушениями функции воспроизводства (аборты, мертворождения, заболевания молочной железы) и от молодняка с поражениями органов дыхания и пищеварения. Также вирус был выделен из тканей абортированных плодов и выделений из влагалища у коров с метритом и при гибели плода [3, 10, 14, 19].
Американские исследователи выделили герпесвирус 4 типа от коров с нарушениями репродуктивной функции (аборты, метриты) (34%) от молодняка с поражениями органов дыхания (34%), от молодняка с нарушением пищеварительной функции (29%) и от коров с заболеванием молочной железы (3%) [8]. При обследовании 5 молочных ферм в штате Джорджия у 15 молочных коров после родов зарегистрированы гнойные язвенные эндометриты, вызванные герпесвирусом 4 типа крупного рогатого скота. Вирусные частицы размером 70-95 нм были обнаружены в эпителиальных и эндотелиальных клетках матки с помощью электронной микроскопии. Наличие герпесвиру-са 4 типа было подтверждено с помощью метода флюоресцирующих антител, выделения возбудителя, индикации геномаполугнездовой ПЦР и электронно-микроскопического исследования культурной жидкости [10].
Бельгийские учёные [5] выделили герпесвирус 4 типа от крупного рогатого скота с различными заболеваниями, в том числе: коньюктивиты, риниты, трахеиты, пневмонии, орхиты, эпидимиты, вагиниты, метриты, аборты, бугорчатка, пустулёзные дерматиты молочной железы, гастроэнтериты. У крупного рогатого скота и кроликов вирус поражает мононуклеарные клетки и лимфоидные органы, также у крупного рогатого скота вирус может пребывать в латентном состоянии в нервной системе. Для серодиагностики использовали ИФА и МФА.
Герпесвирус 4 типа был выделен от молочных коров с поражением кожи на дистальных участках конечностей [4].
Герпесвирус типа 4 КРС выделяли от животных с различными клиническими признаками в том числе: коньюктивиты, пневмонии, метриты, кожные поражения, язвы на вымени, энтериты, поражения мочевого пузыря и рубца. Вирус выделяли и от клинически здорового скота. Вирус персистирует в лимфоидных органах, мононуклеарных клетках крови и клетках нервной системы [11].
Зимой 1994 года в одной из провинций Италии в стаде из 120 коров было зарегистрировано заболевание, проявляющееся дерматитами конечностей. За 3 месяца переболело около 20% коров, в тоже время нетели и телята не болели. На конечностях отмечали эрозии, язвы, часто с грануломатозной пролиферацией, алопеции, сосудистые валики. Из проб патологического материала от 12 коров в первично трипсинизированной культуре клеток почки эмбриона коровы (ПЭК) в первом пассаже было выявлено три цитопатогенных агента. Цитопатическое действие проявлялось через 3-4 дня в виде округления клеток. Обнаружены внутриядерные включения по типу телец Каудри, окрашиваемые гематоксилином. При электронной микроскопии было установлено, что выделенные изоляты по морфологии относятся к герпесвирусам. Доказано, что изолированный патоген является ДНК-содержащим вирусом, чувствительным к рН 3,0, инак-тивируется эфиром (20%), хлороформом (10%), при температуре 50°С за 30 минут. Вирус в культуре клеток формирует бляшки размером 0,5 - 1,0 мм. При идентификации в перекрёстной реакции нейтрализации с кроличьими гипериммунными сыворотками показано, что выделенный вирус гомологичен штамму Movar 33/63 АТСС герпесвируса 4 типа крупного рогатого скота [4].
Изучено 5 штаммов герпесвируса КРС типа 4, из которых три были изолированы от коров с маммилитом и два от коров с респираторными заболеваниями из носовых смывов, лёгких, селезенки, лимфоузлов и мозга [12].
В Израиле инфекция герпесвирусом 4 типа крупного рогатого скота широко распространена и служит причиной спорадических абортов и послеродового вульвовагинита.
В Венгрии герпесвирус 4 типа был обнаружен в 6 из 33 исследованных плацент, взятых на фермах от абортировавших коров. Возбудитель локализовался в эпителиальных клетках, макрофагах и лимфоузлах. В присутствии простагландинов Е2 репликация патогенов в макрофагах усиливается [3, 13].
При обследовании коров с субклиническими маститами герпесвирус 4 типа обнаружен у 50% животных [14].
В Японии на одной из ферм была зарегистрирована вспышка контагиозного мастита, вызванного герпесвирусом 4 типа. Вирус был обнаружен в вымени, лимфатических узлах, лейкоцитах, нервной ткани. Многие инфицированные коровы оставались клинически здоровыми [6].
Из проб патологического материала от клинического здорового африканского буйвола (буффало) из Кении герпесвирус 4 типа был изолирован в культурах клеток МДВК и ERL американского бизона, индийского зебу (Bosindicus, больного пневмонией барана, из фетальной сыворотки крупного рогатого скота [1, 15].
При исследовании в ПЦР лимфатических узлов оленей (Carpeduscapreolus, Crevuselaphus, Damadama), муфлонов, овец и коз венгерские учёные обнаружили герпесвирускрупного рогатого скота 1, 2 и 4 типов [1].
Неожиданными и чрезвычайно важными являются сообщения о выделении герпесвирусакрупного рогатого скота 4 типа от клинически здоровых котят и львов [1, 16, 17, 19].
Известно, что возбудители, относящиеся к роду Phadinovirus, обладают тропизмом к Т-лимфоцитам и латенции. Возбудитель размножается в клетках иммунной, респираторной, пищеварительной и мочеполовой систем. У животных, инфицированных герпесвирусом 4 типа, отмечается иммунодефицитное состояние.
Превалентность инфекции герпесвируса 4 типа в разных странах разная, наиболее высокая (93,6%) у клинически здоровых африканских буйволов [17].
В результате исследований, проведённых в штате Миннесота, установлено, что у 17% клинически здорового поголовья крупного рогатого скота выявились антитела к герпесвирусу 4 типа. Антитела к данному возбудителю обнаруживались и в торакальной жидкости абортированных плодов [18].
У коров с поражениями органов воспроизводства антитела обнаруживались значительно чаще, чем на фермах с клинически здоровым поголовьем крупного рогатого скота [8, 18].
В западной Германии антитела к герпесвирусу 4 типа выявлены в 18,4% исследованных проб сывороток крупного рогатого скота, в Италии - в сыворотках из 50% стад [5]. В результате проведённых в 1987 году исследований сывороток крови крупного рогатого скота из Бельгии антитела к герпесвирусу 4 типа были обнаружены в 22,4% проб. При исследовании 221 сывороток от абортированных коров из провинции Пьеж (Бельгия) антитела к герпесвирусу 4 типа были установлены в 17,2% проб. Из 261 сывороток от клинически здоровых (контрольных) коров антитела к герпесвирусу 4 типа выявлены в 10% проб [19].
Лабораторная диагностика герпесвирусной инфекции 4 типа основана на обнаружении фрагмента гена, кодирующего фермент тимидинкиназу полимеразной ценной реакцией (ПЦР) и выявлении вирусоспецифических антител в ИФА и МФА.
Выделение герпесвируса 4 типа в культуре клеток весьма затруднительно, поскольку возбудитель имеет длительный цикл репродукции. Средств специфической профилактики указанной инфекции до настоящего времени не разработано.
Всё вышеизложенное свидетельствует о необходимости учёта герпесвируса 4 типа при выяснении этиологии заболеваний крупного рогатого скота и при неадекватном иммунном ответе на вакцину.
Список литературы
- Инфекционная патология // Под редакцией А.Я. Самуй-ленко и соавт./ - М.:ИКЦ "Академкнига", 2006, Т 1, 633-758.
- Мищенко В.А., Ярёменко Н.А., Сухарев О.Н., Ручнов Ю.Е. Экологические особенности герпесвирусов КРС // Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных/- Воронеж, 1999. - с. 125-126.
- Bartha A., Juhasz M., Libermann H. Isolation of a bovine herpesvirus from calves with respiratory disease and keratocojunctivitis // Acta vet. Acad. Sci. Hung., 1966,16, 357-358.
- Cavirani S., Martelli P., Cabassi C.S., et al. Isolation of bovine herpes virus (BHV - 4) from dairy cows with digital dermatitis // Proc XIX World Buiatric Congress, Edinburg, 1996, 121.
- Cavirani D.G., Santen S., van Flamraini V. Potential secondary pathogenic rolefor bovine herpesvirus - 4 //1. Clin. Microbiol., 2005, 43, 7, 3421 - 3426.
- Czaplicki Y., Thiry E. An association exists between bovine Herpesvirus-4 seropositivity and abortion in cows // Prev. Vet. Med., 1998, 3, 235 - 240.
- Deim Z., Szeredi L., Tompo V., Egyed L. Detection of bovine herpesvirus 4 in aborted bovine placentas // Microb. Pathol, 2006, 41, 4-5,144-148.
- Dewais B.Gillet L., Gerdesl, Taracho E . et al. Antibodies against bovine herpes 4 are highly prevalent in wild African buffaloes throughout eastern and southern Africa // Vet. Microbiol., 2005,110, 209-220.
- Evermannj.F., Mueller G.M., Dilbeck P.M. Clinical and Diagnostic implications of bovid herpesvirus type 4 (bovine cytomegalovirus) infections // Amer. Assn. Vet. Lab. Dignost., 1984,125 - 136.
- Fridgar O., Stram V. Bovine herpesvirus - 4 in Israel diary cattle isolation PCR and serology // Israel j. Vet., Med., 2006, 61, 2.
- Van OptenboschЕ.,Wellemans G., Ooms A.A., et alBHV - 4 (bovine herpes virus 4) related disorders in Belgiam cattle: a study of twoproblems herds // Vet. Res. Commun, 1988, 12, 347 - 353.
- Lin T.M., Shi G - V., Tsai С - F. et al., Susceptibly of endothelial cells to bovine herpesvirus type (BHV - 4) // Y. Virol. Meth., 1997, 63, 219 - 225
- Mohamty S.B., Hullseth B. Other Herpesviruses // Virus infections of ruminants, 1990,151-157
- Wellenberg G.Y., van der Poel W.H., Van der Vorst T. Y. et al. Bovine herpesvirus 4 in bovine clinical inastitis // Vet. Rec, 2000, 147, 8, 222 - 225
- NaeemК.,Goval S., Werdin R. Prevalence of bovine herpesvirus - 4 and itsantibody in cattle in Minnesota // Am. Y. Vet. Res., 1989, 50,1931 - 1935*
- Thiry E., Bubbot M., Pastoret P.P. Bovine herpesvirus - 4 (BHV - 4) infectionsin cattle // Wittman G (ed) herpessvims diseases of cattle, horses and pigs. Kluwer,Norwell, 1989, 96-115.
- Markine - Gorianoff N., Minner F., De Faysk., et al. Herpesvirus - 4 cattle // Ann. Med. Vet., 2003,147, 215 - 247
- Wellbernger G.Y., Bruschke C.G., Wisselink H.I., Simultaneous intramamaliary and intranasal inoculation of lactating cows with bovine herpesvirus - 4 induce subclinical mastitis // Vet. Microbiol., 2002, 86,1-2, 115-129
- Izumi V., Tsuduki S., Murakami K. et al. Characterization of bovine herpesvirus type 4 isolated from cattle with mastitis and subclinical infection by the virus among cattle //1. Vet. Med. Sci., 2006, 68 /2,189-193
- Frazier K., Pence M., Mauel M., Liggett A. et al. Endometritis in postparturient cattle associated with bovine herpesvirus - 4 infection: 15 cases //1. Vet. Diagn. Invest, 2001,13,502-508
- Moreno-Lopez I., Goltz M., RehbindezС et al. A bovine herpesvirus (BHV - 4) as a passenger virus in ethmoidaltumours in Indian cattle // Zentbl. Vet med., 13, 1989,36,481-486
- Kruger I.M., Venta P.I., Swenson C.L. et al. Prevalence of bovine herpesvirus - 4 infection in cats in central Michigan //1. Vet. Intern Med., 2000,145, 93 - 59712. Castrucci G., Frigeri F., Ferrari N et al. A stady of some biological properties of Bovid herpesvirus 4
- Egued L .,Ballagi - pordany A., Barths A. et al. Studies of in vivo bovine herpesvirus type 4 in the natural host // J. Clin. Microbiol., 1996, 34, 5, 1091 -1095
- Egyed L., Kluge I., Barta A. Historical studies of bovine herpesvirus type 4 infection in non-ruminant species // Vet. Microbiol., 1997, 51, 283 - 289
- Goyal S.M., NaeemК . Bovid herpesvirus - 4: a review // Vet. Bulletin, 1992, 62, 3,181-201
Герпесвирусы, обладающие сложной уникальной структурой, широко распространены в природе. Их уникальность в том, что они могут оставаться в латентном состоянии в хозяине, в котором они размножаются. В настоящее время описано более 80 герпесвиру-сов.
Герпесвирусы КРС 4 типа были выделены от животных с поражением органов пищеварения, дыхания и воспроизводства. Доказана инфицированность животных во многих странах мира, в том числе: Венгрии, Италии, Бельгии, Японии, Израиле, США, Индии, Кении, России, Египте, Швейцарии.
Герпесвирус 4 типа был выделен из патологического материала от коров с нарушениями функции воспроизводства (аборты, мертворождения, заболевания молочной железы), от молодняка с поражениями органов дыхания и пищеварения, из тканей абортированных плодов и выделений из влагалища у коров с метритом, от крупного рогатого скота с различными заболеваниями, в том числе: коньюктивиты, риниты, трахеиты, пневмонии, орхиты, эпидимиты, вагиниты, метриты, аборты, бугорчатка, пустулёзные дерматиты молочной железы, гастроэнтериты. Также, данный вирус инфицирует кроликов, поражая мононуклеарные клетки и лимфоидные органы.
Таким образом, необходимо проводить учёт герпесвируса 4 типа при выяснении этиологии заболеваний крупного рогатого скота и при неадекватном иммунном ответе на вакцину.
Ключевые слова: герпесвирус, крупный рогатый скот, штамм, патологический материал, клинические признаки, вспышка, иммунный ответ, вакцина.
Сведения об авторах
Шевченко Александр Алексеевич, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии, ФГБОУ ВПО "Кубанский государственный аграрный университет"; 350044, Краснодар, ул. Калинина, 13; 8 (918) 15494-61; [email protected].
ECOLOGICAL FEATURES OF BOVINE HERPESVIRUS TYPE 4
Mishchenko V.A., Mishchenko A.V., Dumova V.V., Shevchenko A.A., Chernykh O.Yu.
Infection of animals in many countries, including Hungary, Italy, Belgium, Japan, Israel, U.S., India, Kenya, Russia, Egypt, Switzerland is proved.
Keywords: herpesvirus, large-horned cattle, strain, pathological material, clinical signs, outbreak, immune response, vaccine.
ГЕРПЕСВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
В последнее время появилось много сообщений о регистрации инфекции крупного рогатого скота, вызываемой герпесвирусом типа 4.
Впервые возбудитель был выделен в Венгрии в 1963 год от телёнка с клинической картиной заболевания органов дыхания и кератоконьюктивитом. Указанный штамм был назван Мовар 33/63 .С 1987 года все подобные штаммы были объединены под названием герпесвирус 4 типа.
В Венгрии герпесвирус 4 типа был обнаружен в шести из 33 исследованных плацент, взятых на фермах от абортировавших коров. Возбудитель локализовался в эпителиальных клетках, макрофагах и лимфоузлах. В присутствии простагландинов Е2 репликация патогенов в макрофагах усиливается [5,2].
В Японии на одной из ферм была зарегистрирована вспышка контагиозного мастита, вызванного герпесвирусом 4 типа. Вирус был обнаружен в вымени, лимфатических узлах, лейкоцитах, нервной ткани. Многие инфицированные коровы оставались клинически здоровыми [3].
Согласно литературным данным, герпесвирусы КРС не имеют четкого таксономического положения. Идентичные герпесподобные вирусы были выделены от коров, больных лимфосаркомой, однако этиологическая роль их в появлении лимфосарком и герпетического маммиллита не выяснена [5].
Возбудитель размножается в клетках иммунной, респираторной, пищеварительной и мочеполовой систем. У животных, инфицированных герпесвирусом 4 типа, отмечается иммунодефицитное состояние.
Однако имеется сообщение, что телята, зараженные экспериментально, не дают положительных серологических реакций. Попытку получить антисыворотку к штамму DN-599 на кроликов, цыплят, козах телят и крысах оказались безуспешными даже при использования концентрированного вируса с адьювантом.
Выделение герпесвируса 4 типа в культуре клеток весьма затруднительно, поскольку возбудитель имеет длительный цикл репродукции [1].
Источники и пути передачи инфекции в деталях не изучены. Предполагают, что, помимо прямого контакта больных и здоровых животных, в передаче инфекции принимают участие мухи. Вирус персистирует в лимфоидных органах, мононуклеарных клетках крови и клетках нервной системы.
Гемагглютинирующей активностью вирусы герпеса КРС не обладают. У больных животных вирус выделяется с истечениями из носа в течение 10 дней, в смывах из глаз в течение 3 дней, из легких, бронхов и трахеи - в различные сроки [1,4].
В западной Германии антитела к герпесвирусу 4 типа выявлены в 18,4% исследованных проб сывороток крупного рогатого скота, в Италии - в сыворотках из 50% стад . В результате проведённых в 1987 году исследований сывороток крови крупного рогатого скота из Бельгии антитела к герпесвирусу 4 типа были обнаружены в 22,4% проб. При исследовании 221 сывороток от абортированных коров из провинции Пьеж (Бельгия) антитела к герпесвирусу 4 типа были установлены в 17,2% проб.
Лабораторная диагностика герпесвирусной инфекции 4 типа основана на обнаружении фрагмента гена, кодирующего фермент тимидинкиназу полимеразной ценной реакцией (ПЦР) и выявлении вирусоспецифических антител в ИФА и МФА [1].
В настоящее время отрицательной чертой является не изученность устойчивость к физико-химическим воздействиям, антигенной структуры; источники и пути передачи инфекции в деталях не изучены, а также иммунитет и специфическая профилактика до сих пор не разработана.
Таким образом, герпесвирусы обладают сложной уникальной структурой. Уникальность герпесвирусов в том, что они могут оставаться в латентном состоянии в хозяине. Геном герпесвируса может встраиваться в геном клетки хозяина и длительное время персистировать.
Вышеизложенные данные говорят о необходимости учёта герпесвируса 4 типа при выяснении этиологии заболеваний крупного рогатого скота и при неадекватном иммунном ответе на вакцину.
Библиографический список
1. Сюрин, В.Н. Частная ветеринарная вирусология [Текст]: учебное пособие / В.Н. Сюрин. – М.: Колосс, 1979. - 472 с.
2. Сюрин, В.Н. Ветеринарная вирусология [Текст]: учебное пособие / В.Н.Сюрин, Р.В.Белоусова, Н.В. Фомина // 2-е изд., перераб. и доп.-М.: Агропромиздат,1991. - 261 с.
3. Bartha, A.В. Isolation of a bovine herpesvirus from calves with respiratory disease and keratocojunctivitis [Техt]: Acta vet. Acad. Sci. Hung., 1966. - №16. - p. 357-358.
Источники и пути передачи. Предполагают, что, помимо прямого контакта больных и здоровых животных, в передаче инфекции принимают участие мухи.
Спектр патогенности в естественных условиях. Штаммы герпесподобных вирусов, выделенные в 1969 г. от коров, больных лимфосаркомой, непатогенны для морских свинок, кроликов, мышей, хомячков и телят. Патогенность шт. СТ-66 изучена на телятах. Вирулентный шт. Neethling, выращенный в культуре клеток почек ягнят и телят, патогенен для жирафов и антилоп и непатогенен для буйволов и черных антилоп гну. Вспышку болезни со значительным летальным исходом среди буйволов наблюдали в декабре 1969 г. в Национальном парке Танзании и в прилегающих районах Кении. От заболевших животных выделили при заражении культуры клеток почки и тестикул теленка шт. ВА вируса типа Allerton. При исследовании 17 видов диких животных в Танзании, Кении, Уганде обнаружили АТ у всех буйволов старше 2-х лет, у многих жирафов, гиппопотамов, сернобыков, у нескольких антилоп канна, чернопятнистых и лесных гну. В некоторых районах этих стран инфициро- ванность домашнего КРС старше 2-х лет достигала 85-95%; титры АТ были ниже, чем у буйволов. Клинически болезнь у домашних животных не проявлялась. У овец и коз АТ встречаются редко. Очевидно, вирус Allerton широко распространен среди буйволов, но инфекция протекает легко.
Диагноз основан на результатах лабораторного исследования. Для выделения вируса берут смывы из носа и заражают культуру клеток почки эмбриона КРС. Выделенный вирус идентифицируют в PH в культуре клеток с иммунными специфическими сыворотками к вирусам герпеса КРС (ИРТ, герпеса типа Allerton, ЗКЛ и др.).
При изучении способов трансмиссии овечьего герпесвируса 2-го типа (OHV-2) среди взрослых овец отмечено: прямое заражение через лейкоциты или периферическую кровь от OHV-2-положительных овец и возможность горизонтальной передачи путем непосредственного контакта с OHV-2-положительными овцами. Введение серонегативным овцам лейкоцитов зараженных овец в течение 20 недель после инокуляции к заболеванию не приводит, однако две из пяти овец, получивших цельную кровь, через 7 и 8 недель были PCR-положительными. В группе из 20 взрослых овец, находившихся вместе с зараженными, через 12 месяцев все были PCR-положительными. Таким образом, взрослые овцы обладают чувствительностью к OHV-2; кровь от зараженных животных способна передавать инфекцию.
В Бразилии проведены исследования чувствительности овец к вирусу герпеса. Показано, что у них инфекция бычьим герпесвирусом 5-го типа может протекать в острой и латентной форме. При интранозальном заражении у ягнят на 15 суток наблюдался ринит. У одного животного наблюдали прогрессирующие признаки поражения ЦНС. Вирус выделен из различных отделов головного мозга. Там же наблюдали выраженные воспалительные изменения. У ягнят, зараженных интраназально двумя южноамериканскими изолятами БГВ-5 вирус накапливался до 7,1 lg ТЦИДэо/мл, который держался в течение 15 дней с признаками ринита, четыре ягненка, находящиеся в контакте с зараженными животными оказались инфицированными и в течение 7 дней выделяли вирус. Клинические признаки состояли из: тремора мышц морды, скрежетания зубов, интерсаливации, нарушения координации боковых сгибаний шеи и головы, движений по кругу, слабости конечностей и Х-образной постановки ног. Вирус обнаружен в передних и задних частях головного мозга в дорзо - и вентро-латеральном участках кортикального слоя мозжечка, варолиевом мосту, среднем мозге. С помощью гибридизации вирусная ДНК обнаружена в нейронах и астроцитах переднего и вентролатерального участках коры головного мозга.
Отмечены гистологические изменения с признаками негнойного менингита вокруг кровеносных сосудов и очагового глиоза, некроза нейронов и внутриядерных включений в передней части головного мозга, вентро-латеральном кортикальном слое и среднем мозге. После обработки ягнят дексаметазоном на 50-й день после заражения наблюдали реактивацию латентной инфекции с выделением вируса у 13 из 16 (81 %) ягнят. Сообщения о наличии антител к БГВ-5 у овец были подтверждены данными результатами, свидетельствующими о высокой восприимчивости овец к БГВ-5. Предполагается возможность распространения данной инфекции в естественных условиях.
В 10 из 226 образцов сыворотки клинически здоровых бизонов (Bison bison) из Северной Дакоты, Миннесоты, Канзаса и Манитобы с использованием EL1SA выявили антитела к герпесвирусу типа 2 овец (OHV). С помощью ПЦР на ДНК серопозитив-ных образцов выявили фрагмент длиной 238 т. п.н. Нуклеотидная последовательность ОНVиз ПЦР-позитивных образцов на 82,8--95,4 % гомологична опубликованной последовательности OHV.
Геном герпесвируса коровьих антилоп (семейство Gammaherpesvirinae, род Rhadinovirus) типа 1 штамм С500 клонирован и полностью секвенирован. Область L-ДНК генома герпесвируса коровьих антилоп состоит из 130608 п. н. и имеет низкое содержание ГЦ (46,17 %) и пониженную частоту динуклеотидов. L-ДНК этого вируса фланкирована 20--25 повторами ДНК длиной 1113--1118 п. н. с высоким содержанием ГЦ (71,83 %). L-ДНК содержит 70 открытых рамок считывания (ОРС), 61 из которых гомологична другим герпесвирусам.
Обследовано 72 слона (15 африканских и 57 азиатских слонов); из взятых 130 тестируемых проб 20 оказались положительными на эндотелиотропный вирус слонов (EEHV) -- все у азиатских слонов.
Герпесвирусные инфекции фатальные для африканских и азиатских слонов, значительно расширяются в зоопарках США и Европы. Эндотелиотропный вирус герпеса вызывает быстро прогрессирующую и тяжелую болезнь, которая делает безуспешными любые терапевтические воздействия и приводит к гибели, особенно молодых азиатских слонов. Поскольку попытки культивирования и выделения вирусов неудачны, чаще используют молекулярнобиологические приемы диагностики в сочетании с общими методами патологии, вирусологии и электронной микроскопии. Описан случай с 11-летним слоном, родившимся в зоопарке Хьюстона (Техас) и попавшим в ноябре 1997 г. в Берлинский зоопарк, где он адаптировался без каких-либо проблем. В ноябре 1998 г. он покрыл несколько раз 3- слоних, а в августе того же года пал с признаками острого заболевания. При вскрытии обнаружили поражения эндотелия. В основном кровоизлияния в нескольких серозных и слизистых оболочках, в правом предсердии и других частях миокарда. Обнаружили также язвы во всем пищеварительном тракте. Путем молекулярнобиологических исследований установили, что инфекция была вызвана вирусом герпеса слонов.
Недавно установленны два эндотелиотропных герпесвируса, вызывающих смертность слонов: один герпесвирус смертельный для азиатских слонов, другой -- для африканских слонов. Высоко смертельное геморрагическое заболевание было идентифицировано у 10 молодых азиатских и африканских слонов в зоопарках Северной Америки. У пораженных слонов имелись ультраструктурные доказательства герпесо-подобных вирусных частиц в эндотелиальных клетках сердца, печени, языка. Наличие двух новых герпесвирусов, связанных с заболеванием слонов Азии и Африки, было подтверждено в ПЦР, комбинированной с молекулярным секвенированием. ДНК-изолят от здоровых африканских слонов с наружными герпетическими поражениями имел последовательности, идентичные герпетические последовательности в ДНК-изоляте больных слонов Азии. Предполагается, что гибель азиатских слонов была следствием перекрестной инфекции с герпесвирусом, который обычно находится в латентном состоянии у слонов Африки.
В первичной культуре клеток легких барсука обнаружен ЦПЭ. При электронно-микроскопическом изучении обнаружены вирусоподобные частицы с морфологией, характерной для семейства герпесвирусов. Клонированы и секвенированы гены гликопротеина В герпесвирусов кенгуру (ГВК) типов 1 и 2. Филогенетическая реконструкция, основанная на аминокислотных последовательностях гликопротеина В показали, что ГВК-1 и ГВК-2 наиболее близкородственны подсемейству Alphaherpesvirinae, в котором они наиболее близки к герпесвирусам, заражающим млекопитающих. Эти данные не согласуются с теорией коэволюции, предложенной для других альфагерпесвирусов, хозяевами которых являются млекопитающие.
Герпесвирус взрослых, фенотипически здоровых устриц Crassostrea gigas выявляли в ПЦР, иммунохимическими методами и гибридизацией in situ (ISH), Герпесвирус - ную ДНК выявили в 93,3 и 86,6 % из проанализированных особей (30 устриц), тогда как поликлональные антитела выявили вирусные белки в 76,6 % случаев. Предполагается, что герпесвирус с высокой частотой инфицирует устриц и может длительное время персистировать в них. Идентификация вирусной ДНК в гонадах указывает на возможность вертикальной передачи вируса.
Герпесвирус угрей (HVAnguillae) был диагносцирован многократно на 14 аквафер-мах Нидерландов. Преобладающими симптомами были апатия, геморрагия и повреждения кожи, плавников, жабр, бледная печень и смертность до 10 %. Часто недоброкачественная вода индуцировала HVA или температура воды больше или меньше 23 "С. HVA был изолирован на клетках почек угря, ЕК-1, изучен в электронном микроскопе и фрагменты его ДНК анализировались в ПЦР. Все нидерландские изоляты были сходны. Обнаружены небольшие различия с японскими изолятами. В 1993--1995 гг. у японских угрей, с герпесвирусной болезнью жабр, разводимых при 25 "С наблюдалась массовая смертность. У больных рыб наблюдалась геморрагия, закупорка внутрижаберных волокон, разрушение верхушек пораженных волокон с некрозом и воспалением в центральной соединительной ткани и центральном синусе. Внутри инфицированных фиброцитов при электронной микроскопии обнаружены герпес-вирусные частицы. Для изоляции вируса использовались 4 клеточные линии. Изолят идентифицирован как Herpesvirus anguillae (тест нейтрализации) и был патогенным.
Герпесвирус белого осетра типа 2 (WSHV-2) встречается чаще и вызывает большие потери культивируемой молоди, чем герпесвирус типа 1 (WSHV-1). Оба вируса сходны морфологически и оба поражают наружный покров рыб. Имеются ясные отличия этих двух вирусов, что показано секвенированием ДНК. Анализ последовательностей указывает на родство с а-агерпесвирусами, найденными в хозяевах, обитающих в водной среде. Разработана типоспецифическая ПЦР для быстрого, специфического и чувствительного диагноза WSHV-1 и WSHV-2 белого осетра.
Герпесвирус кои (KHV) может вызывать значительную смертность среди культивируемых обыкновенных карпов и декоративных карпов-кои. При температуре воды 23 °С наблюдалась высокая смертность рыб, пораженных герпесвирусами (95,2 %). Смертность снижалась при 18 °С и отсутствовала при 13 °С. Описывается аналогичная вспышка вирусного заболевания, вызванная герпесвирусом кои (KHV) и сопровождающаяся массовой смертностью обыкновенного карпа и карпа-кои в Европе, США и Израиле в 1998 г. Начиная с этого времени, наблюдаются вспышки данного заболевания среди карпа и кои в Германии и некоторых других европейских странах, особенно в летнее время. В 1998 г. в Израиле была зарегистрирована вспышка заболевания среды культивируемого декоративного карпа кои, сопровождавшаяся высокой смертностью. Основным признаком заболевания был некроз жабр. Заболевание сходной этологии наблюдалось среди декоративных карпов также в Германии, Нидерландах, Бельгии, Великобритании и США В 2000 г. из заболевших кои в США и Израиле был выделен герпесвирус (кои герпесвирус, KHV). Сравнение клинической картины заболевания кои в различных странах, а также выделение изолятов вируса свидетельствует, что данное заболевание вызывается одним и тем же герпесвирусом.
Для герпесвирусной инфекции черепах характерны респираторные клинические проявления. Поражения обычно затрагивают респираторный, ротоглоточный и кишечный тракт, сопровождаясь также кожными и окулярными поражениями. У морских черепах герпесвирусная инфекция приводит часто к системным поражениям органов, таких как печень и селезенка. Описан случай ассоциированного с герпесвиру-сом многоочагового некротического гепатита взрослой самки. При этом отсутствовали признаки поражения респираторного тракта, ротовой полости или других органов. Полагают существование отличающихся по патогенности и органотропности изолятов герпесвирусов. Возникающий при адаптации и транспортировке стресс может вызывать иммуносупрессию, активирующиую вирусную инфекцию.
Читайте также: