Латекс тест на волчанку

Influenza A+B One-step Assay (20 tests) виробництва NovaMed, Ізраїль

В наявності.

Латекс-тесты. “Филисит-Диагностика”, Украина

Латекс-тесты, ДАС, Молдова

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ НАБОРЫ ДЛЯ КЛИНИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИИ, производство ДАС, Молдова

Латекс-тесты. “Филисит-Диагностика”, Украина

Латекс-тесты, ДАС, Молдова

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ НАБОРЫ ДЛЯ КЛИНИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИИ, производство ДАС, Молдова

Комплексное исследование аутоантител, относящихся к иммунологическим критериям системной красной волчанки (АНА, анти-dsDNAи антител к кардиолипину), которое используется для диагностики этого заболевания.

Серологическая диагностика СКВ;

аутоантитела при СКВ.

Serologic Tests, SLE;

Immunological Criteria, SLE.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Системная красная волчанка (СКВ) – аутоиммунное заболевание, характеризующееся разнообразными клиническими проявлениями и широким спектром аутоантител. Наибольшее клиническое значение имеют следующие виды антител:

Антинуклеарный фактор (АНФ, другое название: антинуклеарные антитела, АНА) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. АНА обнаруживаются у 98 % пациентов с СКВ. Такая высокая чувствительность означает, что отрицательный результат исследования исключает диагноз "СКВ". Эти антитела, однако, не специфичны для СКВ: они также выявляются в крови пациентов с другими заболеваниями (другие заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит, первичный билиарный цирроз, некоторые злокачественные новообразования). Существует несколько способов определения АНА в крови. Метод непрямой реакции флюоресценции (РНИФ) с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2 позволяет определить титр и тип свечения. Наиболее характерны для СКВ гомогенный, периферический (краевой) и крапчатый (гранулярный) типы свечения.
Анитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA) – аутоантитела, направленные против собственной двуспиральной ДНК. Они являются разновидностью АНА. Анти-dsDNA обнаруживаются приблизительно у 70 % пациентов с СКВ. Хотя чувствительность анти-dsDNAв отношении СКВ ниже, чем у АНА, их специфичность достигает 100 %. Такая высокая чувствительность означает, что положительный результат теста подтверждает диагноз "СКВ".
Антифосфолипидные антитела – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против фосфолипидов и связанных с ними молекул. В эту группу входят антитела к кардиолипину, бета-2-гликопротеину, аннексину V, фосфатидил-протромбину и другие. 5-70 % пациентов с СКВ имеют антифосфолипидные антитела. Наиболее часто выявляемым видом антифосфолипидных антител являются антикардиолипиновые антитела (АКА). АКА направлены против одного из фосфолипидов мембраны митохондрий, называемого кардиолипином (известно, что АКА направлены не на сам фосфолипид, а на плазменный аполипопротеин, ассоциированный с кардиолипином).

Диагностика СКВ достаточно трудна и носит комплексный характер. Иммунологические нарушения – это характерная черта этого заболевания, и лабораторные исследования являются частью диагностического алгоритма. Во избежание ошибок врачу (и пациенту) необходимо понимать, какова роль лабораторных анализов в диагностике этого заболевания и как правильно интерпретировать их результаты.

Ранее к диагностическим критериям СКВ относили LE-клетки и стойкие ложноположительные серологические тесты на сифилис. С развитием методов лабораторной диагностики и более полным пониманием патогенеза СКВ диагностические критерии менялись. В настоящее время для диагностики СКВ наиболее часто ориентируются на классификационные критерии Американского колледжа ревматологии (ACR) 1997 г. Они включают в себя клинические признаки, показатели крови и иммунологические нарушения (всего 11 критериев). При выявлении у пациента 4 и более критериев ACR диагноз "СКВ" считается вероятным. К иммунологическим критериям ACRотносятся:

Наличие антител к двуспиральной ДНК (анти-dsDNA), антител к антигену Smith (анти-Sm) или антифосфолипидных антител (включая антикардиолипиновые антитела IgG и IgM, волчаночный антикоагулянт и ложноположительные реакции на сифилис) – 1 балл. Видно, что в классификации ACR все три вида аутоантител объединены в один критерий.
Наличие антинуклеарных антител АНА – 1 балл. Более высокий титр (более 1:160) более специфичен для СКВ.

В 2012 г. эти критерии были пересмотрены с учетом новых представлений о СКВ, результатом чего стали классификационные критерии СКВ SLICC. Интерпретация иммунологических нарушений при СКВ подверглась значительным изменениям.К иммунологическим критериям SLICCотносятся:

Наличие АНА в титре, превышающем референсное значение лаборатории – 1 балл;
Наличие анти-dsDNA в титре, превышающем референсное значение лаборатории, или при использовании ИФА (ELISA) – в два раза превышающем лабораторное значение – 1 балл;
Наличие анти-Sm – 1 балл;
Наличие антифосфолипидных антител, включая антикардиолипиновые антитела IgG, IgM и IgA в высоком и среднем титре, волчаночный антикоагулянт, ложноположительный результат антикардиолипинового теста/микрореакции преципитации на сифилис, антител к бета-2-гликопротеину IgG, IgM и IgA) – 1 балл;
Снижение уровня комплемента (C3,C4 или C50) – 1 балл;
Положительный результат прямого теста Кумбса (при отсутствии гемолитической анемии) – 1 балл.

При выявлении у пациента 4 и более критериев SLICC (при этом обязательно наличие одного клинического и одного иммунологического критерия) диагноз "СКВ" считается вероятным. Видно, что критерий АНА остался неизменным, в то время как анти-dsDNA, анти-Smи антифосфолипидные антитела были разделены на самостоятельные критерии. Кроме того:

(1) рекомендован более строгий подход к интерпретации результата анализа на анти-dsDNA при использовании метода ИФА (титр должен быть в два раза больше референсного значения);

(2) антикардиолипиновые антитела в низком титре более не принимаются во внимание;

(3) добавлен класс IgA антикардиолипиновых антител и антител к бета-2-гликопротеину;

(4) добавлены дополнительные критерии (снижение уровня комплемента, антител к бета-2-гликопротеину и пр.).

В данное комплексное исследование вошли наиболее частовстречающиеся аутоантитела при СКВ (АНА, анти-dsDNA и антикардиолипиновые антитела). Хотя эти три вида антител по-прежнему остаются важными критериями, появляются новые критерии, которые могут быть полезны для диагностики СКВ. Поэтому в некоторых случаях этот комплексный анализ дополняют другими лабораторными тестами. Следует еще раз подчеркнуть, что, хотя лабораторные тесты играют огромную роль в диагностике СКВ, их следует оценивать только в комплексе с клиническими данными.

Для чего используется исследование?

Для диагностики системной красной волчанки.

Когда назначается исследование?

При наличии симптомов системной красной волчанки: лихорадки, поражения кожи (эритема-бабочка, дискоидные и другие высыпания на коже лица, предплечий, груди), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек;
при наличии типичных для СКВ изменений в клиническом анализе крови: гемолитической анемии, лейкопении или лимфопении, тромбоцитопении.

Что означают результаты?

1. Антинуклеарный фактор

Титр: Что может влиять на результат?

Время, прошедшее с начала болезни;
активность болезни.

Результат анализа следует оценивать вместе с данными дополнительных лабораторных и инструментальных исследований;
для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту.

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, ревматолог.

Литература

Petri Met al. Derivation and validation of the Systemic Lupus International Collaborating Clinics classification criteria for systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 2012 Aug;64(8):2677-86. doi: 10.1002/art.34473.
Gibson K, Goodemote P, Johnson S. FPIN’s clinical inquiries: antibody testing for systemic lupus erythematosus. Am Fam Physician. 2011 Dec 15;84(12):1407-9.
Yu C, Gershwin ME, Chang C. Diagnostic criteria for systemic lupus erythematosus: a critical review. J Autoimmun. 2014 Feb-Mar;48-49:10-3.
Gill JM, Quisel AM, Rocca PV, Walters DT. Diagnosis of systemic lupus erythematosus. Am Fam Physician. 2003 Dec 1;68(11):2179-86.

Показания к применению

Выявление и определение концентрации РФ в сыворотке крови человека для диагностики ревматоидного артрита, изучения динамики болезни и контроля проводимой терапии.

Действующее вещество

Лекарственная форма

набор диагностический многокомпонентный

Противопоказания

Как применять: дозировка и курс лечения

Отбор и хранение образцов

Использовать свежую свободную от примесей сыворотку крови.

Хранить образцы не более 72 часов при 2-8°С. Длительное хранение допускается в замороженном виде при температуре не выше минус 20°С. Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.

Исследуемая сыворотка или плазма должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц. При необходимости отцентрифугировать недостаточно прозрачные образцы перед анализом. Использование гемолизированных образцов не допускается.

Подготовка реагентов и материалов

Выдержать все компоненты диагностикума и исследуемые образцы не менее 15 мин при комнатной температуре.

Жидкие контрольные сыворотки и глицин-фосфатный буферный раствор готовы к применению.

Подготовить дополнительное оборудование:

- пластину стеклянную, или тестовый слайд;

- микропипетки автоматические или пипетки-мешалки пластиковые (на 50 мкл);

- палочки стеклянные или пипетки-мешалки пластиковые;

- планшет для серологических исследований;

- часы или таймер.

1) Все компоненты диагностикума содержат в качестве консерванта токсичное вещество - азид натрия; при использовании диагностикума необходимо соблюдать правила безопасной работы с токсичными материалами.

2) При работе с исследуемыми образцами сыворотки необходимо обращаться как с потенциально инфицированными материалами.

Нанести на стеклянную пластину (в первую ячейку тестового слайда) 50 мкл К+, рядом, с интервалом 3 см (или в соседнюю ячейку слайда) - 50 мкл К-. На оставшееся место (в свободные ячейки) с аналогичным интервалом нанести по 50 мкл исследуемых образцов. Исследуемую сыворотку не разводить!

Легким встряхиванием флакона перемешать ДРФ-латекс и добавить по 50 мкл в каждую ячейку с образцом. Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) тщательно перемешать каждую каплю, распределив реакционную смесь на площади диаметром около 2 см (по всей площади ячейки). Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).

Покачивать пластину (слайд) вручную или на механическом ротаторе в течение 2 минут, после чего сразу произвести учет результатов реакции.

В лунках планшета приготовить следующие разведения исследуемого образца в глицин-солевом буфере: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 и 1:64.

Нанести по 50 мкл каждого разведения исследуемого образца, а также по 50 мкл К+ и К- на стеклянную пластину с интервалом 3 см (или в соответствующие ячейки слайда).

Легким встряхиванием флакона перемешать РФ-латексный реагент и добавить по 50 мкл в каждую ячейку с разведением исследуемого образца и с контрольными образцами, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.

Покачивать пластину (слайд) вручную или на механическом ротаторе в течение 2 минут, после чего произвести учет результатов реакции.

Учет результатов проводить визуально на темном фоне при хорошем освещении.

Учет реакции позднее 2 мин после ее начала может дать искаженные результаты за счет неспецифической агглютинации частиц.

Положительной РАЛ считается наличие агглютинации латекса (появление зернистости или различимых частиц).

Отрицательной РАЛ считается отсутствие агглютинации (сохранение равномерно мутного фона).

Результаты реакции с исследуемыми образцами учитываются только при положительной реакции с К+ и отрицательной реакции с К-.

Положительная реакция в качественном определении свидетельствует о наличии РФ в образце в концентрации не менее 8 МЕ/мл..

Отрицательная реакция в качественном определении свидетельствует, что концентрация РФ находится в норме.

Все образцы, давшие положительную реакцию, подлежат дополнительному исследованию для определения концентрации РФ.

Минимальная концентрация РФ, при которой наблюдается положительная реакция, составляет 8 МЕ/мл. Величина, обратная максимальному разведению, давшему положительную реакцию, является титром РФ.

Таким образом, концентрация РФ в исходном образце сыворотки (плазмы) крови рассчитывается по формуле:

Концентрация РФ(МЕ/мл) = 8(МЕ/мл) х Титр Пример: макс, разведение = 1:32; титр = 32; концентрация РФ(МЕ/мл) = 8x32 = 256.

Концентрация РФ при ревматоидном артрите коррелирует с активностью процесса, что делает этот показатель полезным для установления стадии и прогноза течения заболевания. Исследование образцов, отобранных повторно через определенные периоды времени, можно применять для наблюдения за результатами лечения.

В высоких концентрациях РФ характерен для ревматоидного артрита. Указанием на возможное наличие его активной формы служит уровень РФ в сыворотке или плазме крови от 120 МЕ/мл и выше. РФ может выявляться также (в основном в более низких титрах) при некоторых других заболеваниях, таких как системная красная волчанка, болезнь Шегрена, бактериальный эндокардит, ряде хронических инфекционных процессов и у отдельных здоровых людей. В то же время отрицательная реакция на РФ не может исключить наличие у пациента ревматоидного артрита.

Фармакологическое действие

Диагностикум латексный для определения ревматоидного фактора жидкий (РФ-латекс-тест) представляет собой 1,5 % суспензию монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованным на поверхности его частиц иммуноглобулином сыворотки крови человека. Суспензия белого цвета, при хранении разделяется на белый осадок, легко разбивающийся при встряхивании, и прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость.

Диагностикум выпускается в комплекте с глицин-солевым буферным раствором (БР) - прозрачная бесцветная жидкость, положительной контрольной сывороткой (К+) и отрицательной контрольной сывороткой (К-) - прозрачные или желтоватого цвета жидкости.

Принцип работы РФ-латекс-теста основан на взаимодействии ревматоидного фактора (РФ), представляющего собой аутоантитела к Fc-фрагменту иммуноглобулина G человека, с IgG, находящимся на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.

Чувствительность диагностикума позволяет обнаруживать ревматоидный фактор в концентрации 8 международных единиц (МЕ)/мл в неразведенной сыворотке крови человека.

Латексная агглютинация

Наборы для идентификации и дифференциации микроорганизмов из клинического материала или из чистой культуры методом латексной агглютинации.

Выпускаются в двух форматах:

1) Жидкие

Латексный реагент представлен в жидкой форме, хранение при + 2-8° С 1 год

Латексный реагент нанесен на реакционную карточку и лиофилизирован, хранение при + 2-25° С до 2 лет

Артикул

Название (русское/английское)

Фасовка

Описание

Бактериальный менингит

Набор Wellcogen на менингококковые инфекции/Wellcogen Bacterial Antigen Kit

Быстрый тест для прямого определения антигенов в жидкостях тела методом латексной агглютинации (цереброспинальной жидкости, сыворотке, моче, крови, культуре с питательной среды):

- Streptococcus гр. B

- H. influenzae тип b

- N. meningitidis групп A, C, Y, W135

- N. meningitides гр. B/E.coli K1.

Время реакции – 3 минуты
Чувствительность – 97% *
Специфичность – более 98%
В состав набора входят все необходимые компоненты

*для Н. influenzae тип b

Набор Wellcogen для определения H. influenzae b/Wellcogen Haemophilus influenzae b Test Kit

Прямое определение антигенов в жидкостях тела (цереброспинальной жидкости, сыворотке, моче, крови, культуре с питательной среды)

Набор Wellcogen для определения N. meningitidis A, C, Y, W 135/Wellcogen Neisseria meningitidis A, C, Y, W135 Test Kit

Набор Wellcogen для определения N. meningitidis B/E. coli K1/Wellcogen Neisseria meningitidis B/E. coli K1

Набор Wellcogen для определения стрептококков группы B/Wellcogen Strep B Rapid Latex Agglutination Test

Набор Wellcogen для определения Streptococcus pneumoniaе/Wellcogen Streptococcus pneumoniae Test Kit

Streptococcus

Набор для диагностики стрептококков групп A, B, C, D, F и G /PathoDxtra Strep Grouping Kit

Быстрый тест для дифференциации групп стрептококков A, B, C, D, F и G по Лансфильду с первичных чашек с культурой.

Мгновенная экстракция без инкубации для восстановления
Работа напрямую с колониями, без разведения в пробирках
Сокращение времени проявления результатов
Не требует дополнительных реагентов
Идентификация всех клинически значимых стрептококков, включая группу D
Возможность дополнить набор наиболее расходуемыми реагентами

Набор для диагностики стрептококков групп A/PathoDxtra Strep Group A Latex