Методы лабораторной диагностики гонококковых инфекций

Возбудителем гонореи является Neisseria gonorrhoeaе, вызывающая острые и хронические воспалительные поражения мочеполовых органов, слизистой оболочки ротоглотки и конъюнктивы глаза.

Материалом для исследования является гнойное отделяемое мочеполовых органов, прямой кишки или конъюнктивы глаз (при бленорее), суставной и перитонеальный экссудат. Строго регламентированными методами лабораторной диагностики гонореи являются микроскопическое и бактериологическое (культуральное) исследование. Методы микробиологической диагностики гонореи отражены в схеме 18 .

Схема 18. Методы микробиологической диагностики гонореи

Микроскопический метод заключается в исследовании мазков из исследуемого материала, окрашенных по Граму и метиленовым синим. При окрашивании препаратов на гонорею используют модификацию метода Грама (краситель генциан-виолет заменяют кристал-виолетом, а вместо фуксина применяют нейтральный красный; промывку препарата осуществляют после каждого этапа окраски). В мазках при острой гонорее обнаруживают большое количество полиморфноядерных лейкоцитов, внутри и вне которых расположены бобовидные грамотрицательные диплококки; сопутствующая микрофлора либо минимальна, либо отсутствует вовсе (рис. 25). При хронической гонорее в ряде случаев типичный гонококк в мазках не выявляется, либо выглядит нетипично в виде мелких пылевидных или крупных шарообразных образований, нередко 2 клетки гонококка располагаются под углом друг к другу, при этом обнаруживается обильная сопутствующая микрофлора, лейкоциты, эпителиальные и другие клетки. В качестве экспресс-метода диагностики может использоваться ИФМ.

Рис. 25. Возбудитель гонореи(Neisseria gonorrhoeaе) в мазках из уретры больного острой гонореей. Внутри и внеклеточно расположенные грамотрцательные диплококки, обилие лейкоцитов.

Бактериологический метод.Гонококк отличается высокой чувствительностью к различным неблагоприятным факторам, поэтому культуральное исследование необходимо проводить сразу после отбора материала. Посев производят на специальные питательные среды. Основой этих сред является МПА из кроличьего мяса с добавлением дрожжевого аутолизата, гидролизата казеина или гемогидрализата и сыворотки крупного рогатого скота. Асцитическая жидкость и яичный желток в качестве добавок к среде для культивирования гонококка в настоящее время не применяются. Второй тип питательных сред является селективным и включает в свой состав, помимо вышеуказанных компонентов, антибиотики (полимиксин, линкомицин, а для диагностики фарингеальной гонореи – оротовую кислоту). Посевы выращивают при 37 0 С в течение 24-72 часов в атмосфере с повышенным содержанием СО₂. Колонии гонококков круглые, прозрачные, в виде капелек росы. Типичные для гонококков ко­лонии пересевают в пробирки со средой для культивирования гонококка для получения чистых культур, которые идентифицируют по морфологическим и сахаролитическим свойствам на средах "пестрого" ряда (полужид­кий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микро­тест-систем. В мазках из чистых культур гонококки располагаются не попарно, а отдельно. В биохимическом отношении гонококки малоактивны и ферментируют только глюкозу с обра­зованием кислоты, вырабатывают оксидазу. Для выявления оксидазы применяют пробу с 1% водным раствором диметилпарафенилендиамина или диэтилпарафенилендиамина, которые окрашивают колонии гонококка сначала в розовый, затем в красный, а через несколько минут – в черный цвет. Исследуют также чувствительность гонококков к антибиотикам и его бета-лактамазную активность.

Серологический метод (определение антител к гонококку в крови пациентов с помощью РСК и ИФА) не является строго регламентированным, не представляет диагностической ценности, не является методом контроля эффективности проводимого лечения и в реальной практике в настоящее время не используется.

Генодиагностика. Направлена на обнаружение специфических фрагментов ДНК гонококка с помощью ПЦР и может быть использована в качестве дополнительного высокоинформативного метода диагностики гонореи.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

[youtube.player]

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к грамотрицательным кокам, встречающимся преимущественно парами. Бактерия вызывает триппер (гонорею). Это инфекционный процесс с преимущественным поражением слизистых оболочек мочеполового аппарата.

В редких случаях становится причиной бленнореи – гнойного патологического процесса соединительной оболочки глазного яблока. Диагностика гонококков требуется пациентам после незащищенной сексуальной близости с малознакомым партнером. Либо при подозрениях на инфицирование (иногда патологический возбудитель передается через полотенце или мочалку).

Лабораторная диагностика гонококков состоит из:

• микроскопического метода (окраска двух мазков)
• бактериологического (посев на питательные среды)
• реакции Борде-Жангу (серология)
• ПЦР

Свойства гонококка Neisseria gonorrhoeae

Гонококки – разновидность грамотрицательных диплококков, относятся к роду Neisseria. Для гонококков характерна высокая выживаемость в условиях организма. Вне приемлемой среды обитания для жизнедеятельности (во внешней среде) бактерии гибнут.

Также это происходит в результате высыхания субстрата при температуре от 40 градусов. Быстро погибают под воздействием антисептических и антибактериальных растворов, солей серебра и в мыльной воде.

Как выглядят гонококки?

Две половинки парной бактерии схожи на кофейные зерна, соприкасающиеся друг с другом вогнутой стороной. Под угрозой гибели (к примеру, на фоне антибиотикотерапии) трансформируются в L-форму.

Методы лабораторной диагностики

Инкубационный период длится от 3 до 7-ми дней с момента инфицирования. Дальнейшая клиника проявляется острыми симптомами. Это слизистые, с примесями гноя выделения из половых путей, чувство жжения, болезненность в уретре, в особенности при опорожнении мочевого пузыря).

Либо болезнь принимает бессимптомное течение. Анализ на гонококки Нейссера проводится различными способами.

Наиболее информативным считается ПЦР, так как позволяет обнаружить ДНК-возбудителя уже в первые несколько дней после проникновения бактериального агента в организм. У женщин в несколько раз чаще гонококковая инфекция имеет хроническую форму, при которой симптомы отсутствуют.

Возможность выявить гонококки в мазке ПЦР можно через 2-3 дня после сексуального контакта с зараженным партнером. Также применяются другие методы исследования, не менее информативные и позволяющие дополнительно определить чувствительность бактерий к антибиотику.

Микроскопический (бактериоскопический) метод

Анализ на гонококки проводится с использованием микроскопа и методики окраски двух мазков – по Грамму и с применением 1% жидкого раствора метиленового синего и 1% Эозина.

Для исследования наибольшую ценность представляют патологические жидкости. Забор которых производится из мочеиспускательного канала, влагалища, ануса, глотки или крови.

Метод Грамма

Обнаружить гонококки можно с помощью двойной окраски с применением двух красителей.

Первый – основной, второй считается дополнительным. Помимо красителей используется спирт и различные кислоты. Их действие заключается в обесцвечивании бактериального агента. Для выявления возбудителя гонореи применяются анилиновые красители (кристаллвиолет, метиловый фиолетовый) и дополнительные.

После обесцвечивания грамотрицательных диплококков используется фуксин. Он придает гонококкам красный окрас, определяющего идентифицирующего наличие гонококка.

Ход исследования:

1. Биоматериал наносят на предметное стекло тонким слоем
2. Следующий этап – сушка
3. Проводится окраска анилиновыми красителями, промывка водой и использование раствора Люголя
4. После высыхания материал фиксируется – необходимо для того, чтобы бактериальные клетки остались на поверхности стекла и не смылись. Для фиксации применяют один из двух методов – облучение бактериального агента высокими температурами либо применение специальных препаратов, приводящих к коагуляции цитоплазмы
5. Далее стекло промывают и дополнительно применяют контрастные краски, после чего бактерии выделяются красным либо розовым цветом, после чего их легко обнаружить

Применение метиленового синего в микроскопическом исследовании

Взятый биоматериал наносится на предметное стекло и фиксируется 96 % этанолом либо над спиртовой горелкой. После полного высыхания мазка выполняется его окрас 1% р-ром метиленовой синьки. Спустя 1 минуту предметное стекло промывают в проточной воде комнатной температуры, подсушивают и помещают под микроскоп для изучения.

Анализ мазка на гонококк позволяет отличить патологическую микрофлору, которая принимает выраженный синий окрас (может иметь различные оттенки). Под микроскопом отличаются бактерии, размещенные парно, их бобовидная форма.

Характерной особенностью остро протекающего инфекционного заболевания является месторасположение возбудителя. То есть внутри гранулоцитарных лейкоцитов, которые выявляются в больших количествах на эпителии и в слизистой.

Для хронического течения характерно отсутствие гонококков при данном исследовании. В единичных случаях бактериальный агент идентифицируется, но в нетипичном для него виде.

Гонококки представлены мелкими или крупными шарообразной формы формированиями. Также выявляется другая патологическая флора, клетки эпителия и белые кровяные клетки (лейкоциты).

Бактериологический способ

Бактериологический или культуральный метод – производится посев биоматериала больного на питательные среды с белками, имеющими нативную пространственную структуру, сыворотку.

Чаще применяются безасцитные питательные среды. Основой которых является мясопентонный агар (производится из мяса кроликов или бычьих сердец). По результатам посевов на гонококки определяется не только возбудитель инфекции, но и его чувствительность к антибиотикам.

Точность и достоверность исследования во многом зависит от правильности сбора биоматериала. Важно использовать стерильные емкости и соблюдать правила подготовки к сбору анализа.

Сдача крови производится медицинским работником в условиях лаборатории.

Мочу пациенты собирают самостоятельно, используя для этого стерильную емкость.

Доставка биоматериала должна быть быстрой.

Мазки из половых путей или уретры выполняются в лаборатории и сразу наносятся на питательные среды. Очень важно провести диагностику до начала приема антибактериальных средств. В противном случае результативность проведенного анализа дает недостоверные результаты.

Если обследование назначается для контроля проведенной терапии, следует выждать не менее 10-ти дней после приема последней дозы антибиотика. При острой необходимости анализ проводится раньше.

Для исследования, отделяемого из половых путей у женщин производится забор материала через две недели после окончания менструации. За несколько часов запрещается опорожнение мочевого пузыря.

Мужчинам перед сдачей выделяемой слизи на анализ следует удержаться от посещения туалета в течение 4-5 часов.

Через сколько времени будет готов результат?

Культуральный метод занимает от 4-х дней. Все зависит от исследуемого материала – исследование каловых масс занимает от 3-4 дней до недели.

Соскоб из уретры будет готов в течение 7-ми дней, кровь – через 10. Несмотря на длительность диагностики, предварительные результаты анализа озвучиваются на 3-ий день.

Что показывает бактериологическая диагностика?

Расшифровка исследования включает информацию о наличии бактериального агента, а также о его концентрации. Определение количества присутствующей патологической микрофлоры имеет большое значение.

Выделяют 4 степени роста гонококков:

• 1 степень (отсутствует рост бактерий на твердой среде, на жидкой – незначительный рост)
• 2 степень (рост до 10 колоний)
• 3-я (рост от 10 до 100 колоний)
• 4-я (больше 100 колоний)

Первые две степени не являются этиологическими факторами развития болезни.

В данном случае говорят о загрязненности исследуемого биоматериала. Последние две степени (3 и 4) говорят о том, что присутствующие микроорганизмы стали причиной развития инфекционных процессов.

Окончательная расшифровка (подсчет колоний КОЕ/мл) имеет следующий вид:

• 102 – 103/мл – 1 колония
• 104/мл – 0т 2 до 5 колоний
• 105/мл – от 6 до 15 колоний
• 106/мл и более – от 16 колоний

Диагностика имеет весомое значение для контроля проводимой антибиотикотерапии и позволяет оценить ее эффективность.

Серологический метод

Методика основывается на иммунологической реакции выявления антител (Реакция Борде-Жангу) в плазме крови больного с подозрением на заражение гонококковой инфекцией. Зачастую используется для диагностики бессимптомных форм патологии.

В современной исследовательской практике серологический метод мало информативен. Не применяется для контролирования состояния после медикаментозной терапии.

Диагностика методом ПЦР

Определение гонококков при анализе ПЦР наиболее точный метод. Позволяет уже в впервые дни после заражения идентифицировать бактериального возбудителя.

Для получения максимально верных результатов огромное значение имеет подготовка:

• исключить сексуальный контакт за сутки
• после приема антибиотиков должно пройти не менее 7-ми дней
• перед взятием мазка запрещается посещение туалета за 2-3 часа
• не проводится у женщин вовремя месячных

Для диагностики триппера производится забор материала из мочеиспускательного или цервикального канала, можно использовать мочу.

Если в исследуемом биоматериала обнаруживают ДНК гонококков – это говорит о наличии гонореи. Информативность диагностики составляет 98%. Анализ проводится в течение 1-3 дней, что зависит от оснащенности лаборатории и квалификации специалистов.

Основным преимуществом исследования на гонококки является возможность выявления бактериального возбудителя даже при условии его минимальной концентрации в мазке (моче). В лабораторных условиях производится размножение генов возбудителя.

Клонирование ДНК участка, даже если он единичный, позволяет выявить всю имеющуюся патологическую флору в материале. Так, в большинстве случаев исследование на гонококки определяет одновременно диплококков и трихомонад, которые также передаются при половом акте.

Анализ ПЦР высоко информативен на ранних стадиях. Поэтому диагностика рекомендуется пациентам при частой смене половых партнерах или случайной сексуальной связи, в первые дни после интимной связи. Проведенная терапия на начальных стадиях болезни предотвращает развитие неприятных симптомов и возможные осложнения.

Расшифровка анализа ПЦР на гонококки выглядит следующим образом:

• высокий уровень лейкоцитов (свыше 10-ти говорит о присутствии воспалительного очага, свыше 20 – острое воспаление)
• повышенная концентрация клеток эпителия (более 10 в поле зрения)
• наличие грамотрицательных кокков, характерной формы

О чем говорит отсутствие гонококковой инфекции в исследуемом материале?

Если в ходе обследования с применением одного из методов в мазке не были обнаружены гонококки? Это говорит о том, что пациент полностью здоров. Либо о том, что в исследуемом материале, взятом из половых путей или уретры, бактерия отсутствует, но может быть обнаружена в других частях тела.

Для подтверждения диагностики выполняется забор материала из ротовой полости, прямой кишки или конъюнктивы глазного яблока. Если симптоматические проявления локализуются вне половой системы, а присутствие гонококков исключено, выполняются другие методы обследования для идентификации возбудителя патологии.

Диагностика после проведенного лечения

При обнаружении гонококковой инфекции лечащий врач-венеролог назначает комплексное лечение. Его основой является антибиотикотерапия.

Так как бактерии быстро адаптируются к пенициллинам, применяются препараты цефалоспоринового ряда. Чаще назначается Цефтриаксон для инъекций либо перорально Цефиксим.

Длительность лечения составляет 10-14 дней. Спустя 2-3 суток после приема последней дозы исследуют мазок из урогенитального тракта на выявление гонококков. Отрицательные результаты говорят о правильно проведенном лечении.

Диагностика после лечения также проводится второй раз через две недели. Отсутствие бактериального возбудителя означает полное выздоровление, больного снимают с учета у венеролога. Обследованию подлежат все половые партнеры.

Как подготовиться к диагностике гонококков?

Для предотвращения получения в ходе диагностики ложноположительных результатов перед взятием материала пациентам необходимо как следует подготовиться.

Соблюдение подготовительного этапа одинаково требуется представителям женского и мужского пола.

Подготовка

Этап подготовки включает:

• Исключение сексуальной близости за трое суток до забора материала
• Прекращение медикаментозной терапии, не только антибактериальных средств, но и других лекарственных групп, в частности химический средств контарацепции (спермициды). При невозможности прекращения приема некоторых препаратов пациент заранее сообщает об этом врачу
• Исключается использование влагалищных суппозиториев, кремов и спреев
• Исключается спринцевание за 3 дня до процедуры
• Гигиена половых органов выполняется накануне вечером, в утро забора мазка и взятия крови подмывание запрещается
• Опорожнение мочевого пузыря производится за 3 часа до исследования. При наличии незначительного количества бактериальных возбудителей существует вероятность вымывания некоторой части совместно с мочой и получение ложноотрицательных результатов
• У женщин манипуляция проводится за 4-5 дней до начала предполагаемых месячных либо спустя несколько дней по завершению. В острых случаях проводится не зависимо от менструального кровотечения

Анализ мазка на выявление гонококка Нейссера выполняется перед началом медикаментозного лечения и несколько раз после окончания.

Методику исследования выбирает лечащий врач, который занимается расшифровкой результатов и разработкой схемы лечения. Самостоятельный прием антибактериальных средств на фоне возникшей клинической картины искажает результаты обследования.

При подозрении на гонорею обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

[youtube.player]

Лабораторная диагностика гонореи проводится при помощи бактериоскопического и бактериологического анализа, реже используется серологический и иммуноферментный метод.

Гонорея – инфекционное заболевание, возбудителем которого является гонококк. Впервые гонококки были описаны немецким дерматовенерологом Альбертом Нейссером. Отсюда возбудители гонореи получили название Neisseria gonorrhoeae.

Морфология

Гонококки являются диплококками бобовидной формы и внешне напоминают кофейные зерна. Гонококки - грамотрицательные бактерии, при окрашивании по методу Грама они приобретают красный цвет. Под воздействием внешней среды (химических препаратов, лекарств) гонококки могут менять размеры и форму, становиться грамположительными. Способность гонококков менять свойства часто осложняет диагностику гонореи.

Гонококки хорошо размножаются в жидких питательных средах и на плотных средах с рH от 7,2 до7,4 единиц, содержащих нативный человеческий белок (асцитную жидкость, кровь, сыворотку крови). Культивирование гонококков происходит при температуре 37 градусов Цельсия в атмосфере, содержащей 3 – 5 % углекислого газа. При дальнейшем культивировании потребность в углекислом газе отпадает.

Во внешней среде гонококки малоустойчивы. На них пагубно влияет повышение и понижение температуры, высыхание, прямые солнечные лучи. Бактерии погибают при самых малых концентрациях дезинфицирующих средств. Но во влажной среде, например, в гное, на грязном белье они могут сохранять свою жизнеспособность до 24 часов.

Диагностика гонореи

Своевременная диагностика венерического заболевания позволяет остановить распространение инфекции по организму и безотлагательно начать лечение. В России порядок проведения диагностики гонореи регламентирован приказом Министерства здравоохранения РФ от 20.08.2003 № 415 и заключается в обязательном осуществлении бактериоскопического исследования с последующим бактериологическим подтверждением, которые помогают быстро определить наличие инфекции.

Отдел новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера для проведения бактериоскопического исследования выпускает наборы реагентов для окраски по Граму в трёх разных вариантах.

1. В состав комплекта № 1 входит фуксин Циля, окрашивающий гонококки в розовый цвет.
2. В комплекте № 2 фуксин Циля заменен на водный раствор нейтрального красного, в результате чего грамотрицательные бактерии приобретают ярко-оранжевый цвет и хорошо видны на контрасте с фиолетовой окраской грамположительных бактерий.
3. Наибольшую контрастность получают при применении комплекта № 3, в котором используются в качестве красителей бриллиантовый зеленый и сафранин. Грамположительные микроорганизмы приобретают зеленый цвет, а грамотрицательные – красный.

Бактериоскопический метод имеет следующие недостатки:

1. необходима высокая концентрация бактерий в исследуемом материале, не менее 10 9 КОЕ/мл, в противном случае гонококки могут быть не выявлены;
2. при ошибках в технике окрашивания бактерии могут повести себя нетипичным образом и окраситься в другие цвета;
3. гонококки полиморфны – они могут менять размеры и окраску под воздействием различных препаратов.

Для эффективной диагностики гонореи бактериоскопический анализ дополняют бактериологическим анализом, при котором исследуемый материал высевают на питательные среды для получения чистых культур возбудителя.

Селективный компонент в виде комплекса антибиотиков подавляет рост посторонней микрофлоры. Благодаря селективному компоненту на питательной среде, выпускаемой Отделом новых технологий, образуются только колонии гонококков, которые очень легко визуально обнаружить.

Бактериологическое исследование завершают проведением бактериоскопии мазков, приготовленных из выросших колоний. Также для контроля морфологии возбудителя проводят тесты для обнаружения цитохромоксидазы (оксидазный тест) и бета-лактомазы – ферментов, продуцируемых гоноккоками.

Также мы предлагаем наборы реагентов для экспресс-определения бета-лактамазы, продуцируемой гонококками. Обнаружение в исследуемом материале бета-лактамазы свидетельствует о резистентности выделенных гонококков к пенициллинам, к цефалоспоринам.

Преимущества препаратов для диагностики гонореи, выпускаемых Отделом новых технологий ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера:

1. мы на протяжении многих лет проводим исследования в области диагностики заболевания;
2. мы выпускаем полный спектр препаратов для выявления гонококковой инфекции;
3. мы внесли качественные изменения в состав препаратов, чтобы уменьшить риск ошибки при диагностировании;
4. наши селективные питательные среды для диагностики гонореи не имеют аналогов в России и стоят дешевле зарубежных препаратов.

[youtube.player]

Гонококковая инфекция (ГИ, гонорея), которую относят к ИППП, вызывается Neisseria gonorrhoeae – грамотрицательной бактерией, принадлежащей семейству Neisseriaceae, роду Neisseria. N.gonorrhoeae, как и C.trachomatis, имеет высокую тропность к цилиндрическому эпителию, поэтому поражает цервикальный канал, эндометрий, маточные трубы, уретру. Неосложненная ГИ у мужчин протекает чаще всего в форме острого гнойного или гнойно-слизистого уретрита, у женщин цервицита с гнойно-слизистыми выделениями. При аногенитальных и орогенитальных контактах возможно развитие проктита или фарингита. Симптомы и проявления ГИ, за небольшим исключением, неспецифичны, для постановки диагноза ГИ необходимы лабораторные исследования для выявления патогена. У мужчин до 15% случаев ГИ может протекать без клинической симптоматики, а у 5–10% не сопровождаться и лабораторными признаками уретрита, у женщин доля бессимптомных форм может достигать 45–55%. Как при манифестных, так и при малосимптомных формах ГИ при отсутствии лечения высок риск развития осложнений. У мужчин осложнениями ГИ являются стриктуры уретры, простатит, орхоэпидидимит; у женщин – эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, пельвиоперитонит, тубоовариальный абсцесс, внематочная беременность, трубное бесплодие.

Показания к обследованию. У мужчин: симптомы и клинические проявления уретрита, эпидидимита, эпидидимоорхита или простатита; у лиц, практикующих аногенитальные контакты – проктита; при физикальном осмотре – наличие выделений из уретры, особенно гнойного характера.

У женщин: симптомы воспалительного процесса в нижних отделах урогенитального тракта и органов малого таза, боли в низу живота, патологические выделения из влагалища; наличие слизистых или гнойно-слизисто выделений из цервикального канала, отечность и признаки воспаления шейки матки; нарушение менструального цикла; болезненность при половых контактах; подготовка к хирургическому вмешательству на органах малого таза; подготовка к беременности; бесплодие.

У лиц обоего пола без симптомов и признаков воспалительного процесса урогенитального тракта: наличие перечисленных выше симптомов и признаков или установленная ГИ у полового партнера; в возрастной группе до 25 лет – многочисленные половые партнеры или половые контакты с новым половым партнером без барьерной контрацепции.

Дифференциальная диагностика. Хламидийная инфекция, урогенитальный трихомониаз, инфекция, вызванная M.genitalium.

Этиологическая диагностика включает визуальное обнаружение гонококков методами микроскопии, выделение культуры гонококка, выявление ДНК и РНК N.gonorrhoeae.

Материал для исследований

• Мазки/соскобы со слизистых оболочек цервикального канала и уретры женщин – микроскопическое исследование, выделение культуры гонококков, выявление ДНК, РНК N.gonorrhoeae;
• мазки (соскобы) со слизистой влагалища – выявление ДНК, РНК N.gonorrhoeae;
• мазки (соскобы) со слизистой прямой кишки – выделение культуры гонококков;
• мазки (соскобы) со слизистой ротоглотки – выделение культуры гонококков;
• моча (первая порция) мужчин – выявление ДНК, РНК N.gonorrhoeae.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для визуального выявления гонококков фиксированный мазок, окрашенный метиленовым синим или по Граму, исследуют с использованием световой микроскопии для выявления диплококков (грам-отрицательных) внутри полиморфноядерных лейкоцитов. Диагностическая чувствительность метода отличается при диагностике гонококковой инфекции у мужчин и женщин: у мужчин при острой форме инфекции она составляет 90–95%, у женщин не превышает 50% при острой форме, при торпидном течении инфекционного процесса – 10–25%.

Культуральное исследование включает выделение культуры нейссерий и подтверждение принадлежности выделенной культуры к виду Neisseria gonorrhoeae. Посев осуществляется на плотные питательные среды. После получения колоний проводится видовая идентификация нейссерий по набору биохимических тестов. Этиологический диагноз считается установленным только после подтверждения принадлежности выросших колоний нейссерий к виду N.gonorrhoeae.

Для выявления ДНК N.gonorrhoeae в РФ используют ПЦР с различными вариантами детекции продуктов реакции и метод выявления РНК на основе реакции НАСБА. Диагностическая чувствительность для диагностики ГИ метода ПЦР находится в пределах 95–98%, метода НАСБА достигает 98%, специфичность составляет 96–98% и до 100% для методов ПЦР и НАСБА, соответственно.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Микроскопическое исследование препаратов с окраской по Граму используют для лабораторного подтверждения наличия воспалительного процесса (повышенное содержание ПМЯЛ) у пациентов с симптомами и клиническими проявлениями урогенитальной инфекции. Кроме того указанный метод микроскопии является наиболее быстрым и информативным методом диагностики гонореи у мужчин с симптомами воспалительного процесса. У мужчин без клинических проявлений инфекционно-воспалительного процесса урогенитального тракта метод имеет низкую чувствительность. У женщин даже с признаками инфекционно-воспалительного процесса микроскопическое исследование препаратов с окраской по Граму не рекомендуется рассматривать как метод диагностики гонореи из-за его низкой информативности. Метод не показан и для диагностики ГИ экстрагенитальной локализации.

Культуральное исследование рекомендуется проводить во всех случаях диагностики ГИ, когда для этого имеется возможность (стандартизованные питательные среды, условия для транспортировки биологического материала, обеспечивающие сохранение жизнеспособности гонококков). При отсутствии ответа на проведенное лечение рекомендуется определение чувствительности к антибактериальным препаратам.

В настоящее время выявление ДНК N.gonorrhoeae методом ПЦР рассматривают как оптимальное исследование для скрининга пациентов обоего пола, показано его применение и для оценки результатов лечения. При использовании метода ПЦР с учетом скорости элиминации ДНК N.gonorrhoeae контроль лечения необходимо проводить не ранее 2–3 недель. РНК возбудителя является более ранним маркером ответа на терапию, поэтому при использовании метода НАСБА можно оценивать эффективность лечения через 1–2 недели после окончания курса.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Наличие диплококков внутри полиморфноядерных лейкоцитов является высокоспецифичным признаком ГИ, однако при оценке результатов выявления N.gonorrhoeae с использованием микроскопии следует учитывать, что в данном случае определяется морфотип микроорганизма, который свойственен всем предcтавителям рода Neisseriaceae. Неоднократно описаны случаи уретрита, вызванного N.meningitides с микроскопической картиной аналогичной гонорее. В связи с этим для окончательного подтверждения диагноза ГИ необходимо подтверждение результатов микроскопии культуральными методами или выявлением ДНК N.gonorrhoeae. У женщин с острой формой инфекции даже при повышенном содержании лейкоцитов в мазке в большинстве случаев названный признак ГИ отсутствует.

Положительный результат культурального исследования, проведенного с видовой идентификацией возбудителя, является наиболее объективным доказательством инфекции и не требует дополнительного подтверждения. Однако отрицательный результат может означать как отсутствие возбудителя, так неоптимальные условия его транспортировки и/или культивирования.

При обнаружении ДНК N.gonorrhoeae в образцах из урогенитального тракта у пациентов с клиническими проявлениями урогенитальной инфекции и наличии факторов, способствующих инфицированию, дополнительного исследования не требуется и диагноз ГИ считается установленным, за исключением случаев обследования несовершеннолетних или лиц, подвергшихся сексуальному насилию. В таких случаях согласно, существующим нормативным документам, диагноз гонококковой инфекции правомочен только на основании результатов культурального исследования. При обнаружении ДНК N.gonorrhoeae, но отсутствии субъективных и объективных признаков инфекционно-воспалительного процесса и факторов риска, или при исследовании биологического материал из экстрагенитальных локализаций, для подтверждения диагноза рекомендуется провести исследование для обнаружения РНК N.gonorrhoeae методом НАСБА. Наличие ДНК и РНК возбудителя является объективным лабораторным признаком инфекции.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

[youtube.player]