Микробиологическая диагностика хламидийной инфекции

Таксономия: порядок Chlamydiales, семейство Chlamydaceae, род Chlamydia. Род представлен видами С.trachomatis, C.psittaci,C.pneumoniae.

Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами. Заболевания, вызываемые C. trachomatis u C. pneumoniae, — антропонозы. Орнитоз, возбудителем которого являет­ся С. psittaci, — зооантропонозная инфекция.

2 формы существования: элементарные тельца (неактивные инфекционные частицы, вне клетки); ретикулярные тельца (внутри клеток, вегетативная форма).

Культивирование:Можно размножать только в живых клетках. В желточном мешке развивающихся куриных эмбрионов, организ­ме чувствительных животных и в культуре кле­ток

Ферментативная активность: небольшая. Ферментируют пировиноградную кис­лоту, синтезируют липиды. Не способны синтезировать высокоэнергетические соединения.

Антигенная структура: Ан­тигены трех типов: родоспецифический термостабильный липополисахарид (в клеточной стенке). Выявля­ют с помощью РСК; видоспецифический антиген белковой природы (в наружной мембране). Обнаруживают с помощью РИФ; вариантоспецифический антиген белко­вой природы.

Факторы патогенности.С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец. Хламидии образуют эндотоксин. У некоторых хламидий обна­ружен белок теплового шока, способный вызывать аутоиммунные реакции.

Резистентность.Высокаяк различным факторам внешней среды. Устойчивы к низким температурам, высушиванию. Чувствительны к нагреванию.

С. trachomatis -возбудитель забо­леваний мочеполовой системы, глаз и респи­раторного тракта человека.

Трахома— хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся пораже­нием конъюнктивы и роговицы глаз. Антропоноз. Передается контактно- бытовым путем.

Патогенез: поражает сли­зистую оболочку глаз. Он проникает в эпителий конъюнктивы и роговицы, где размножается, разрушая клетки. Развивается фолликулярный кератоконъюнктивит.

Диагностика: исследование соскоба с конъюнкти­вы. В пораженных клетках при окраске по Романовскому—Гимзе обнаруживают цитоплазматические включения фиолетового цвета, расположенные около ядра — тельца Провачека. Для выявления специфического хламидийного антигена в пораженных клетках применяют также РИФ и ИФА. Иногда при­бегают к культивированию хламидий трахомы на куриных эмбрионах или культуре клеток.

Лечение: антибиотики (тетра­циклин) и иммуностимуляторы (интерферон).

Урогенитальный хламидиоз— заболевание, передающееся половым путем. Это — острое/хро­ническое инфекционное заболевание, ко­торое характеризуется преимущественным поражением мочеполового тракта.

Заражение че­ловека происходит через слизистые оболочки половых путей. Основной механизм зараже­ния — контактный, путь передачи — по­ловой.

Иммунитет: клеточный, с сыворотке инфицированных – специфические антитела. После перенесенного заболевания - не формируется.

Диагностика: При забо­леваниях глаз применяют бактериоскопический метод — в соскобах с эпителия конъюнктивы выявляют внутриклеточные включения. Для выявления антигена хламидии в пора­женных клетках применяют РИФ. При поражении мочеполового тракта может быть применен биологический метод, основанный на заражении ис­следуемым материалом (соскобы эпителия из уретры, влагалища) культуры клеток.

Постановка РИФ, ИФА позволяют обнаружить антигены хламидии в исследуемом материале. Серологический метод - для обнаружения IgM против С. trachomatis при диагностике пневмонии новорожденных.

Лечение.антибиоти­ки (азитромицин из группы макролидов), иммуномодуляторы, эубиотики.

Профилактика.Только неспецифическая (лечение больных), соблюдение личной гигиены.

Венерическая лимфогранулема— заболева­ние, передающееся половым путем, характеризуется поражением половых орга­нов и регионарных лимфоузлов. Механизм заражения — контакт­ный, путь передачи — половой.

Иммунитет: стойкий, клеточный и гуморальный иммунитет.

Диагностика:Материал для исследования - гной, биоптат из пораженных лимфоузлов, сыворот­ка крови. Бактериоскопический метод, биологический (культивирование в желточном мешке куриного эмбриона), серологический (РСК с парными сыворотками положительна) и аллергологический (внутрикожная проба с аллергеном хламидии) методы.

Лечение.Антибиотики — макролиды и тетрациклины.

Профилактика:Неспецифическая.

С. pneumoniae - возбудитель респира­торного хламидиоза, вызывает острые и хронические бронхиты и пневмонии. Антропоноз. Заражение – воздушно-капельным путем. Попадают в легкие через верхние дыхательные пути. Вызывают воспаление.

Диагностика: постановка РСК для обнаружения специ­фических антител (серологический метод). При первичном заражении учитывают обнаружение IgM. Применяют также РИФ для обнаружения хламидийного антигена и ПЦР.

Лечение: Проводят с помощью антибиоти­ков (тетрациклины и макролиды).

С. psittaci - возбудитель орнитоза — острого инфекционного заболевания, которое характеризуется пора­жением легких, нервной системы и паренхиматозных органов (печени, селе­зенки) и интоксикацией.

Зооантропоноз. Источники инфекции – птицы. Механизм заражения – аэрогенный, путь передачи – воздушно- капельный. Возбудитель – через слиз. оболочки дыхат. путей, в эпителий бронхов, альвеол, размножается, воспаление.

Диагностика:Материа­л для исследования - кровь, мокрота больного, сыворотка крови для серологического исследования.

Применяют биологический метод — куль­тивирование хламидий в желточном мешке куриного эмбриона, в культуре клеток. Серологический метод. Применяют РСК, РПГА, ИФА, ис­пользуя парные сыворотки крови больного. Внутрикожная аллергическая проба с орнитином.

Лечение: антибиотики (тетрациклины, макролиды).

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

ХЛАМИДИИ– облигатные паразитические бактерии, сходны по хим составу с гр–. Полностью зависят отхозяина, т.к. не способ­ны синтезировать АТФ. В цикле размноже­ния происходит смена 2 разных по морфологии и биологическим свойствам форм (элементарное и ретикулярное тельца). Имеют широкий спектр хозяев в основном – птицы и млекопитающие. Заболевания у человека вызывают хламидий двух видов Chlamydia psittaci и С.trachomatis.

С.psittaci – возбудитель орнитоза. ИСТОЧНИК – птицы (около 140 видов). У большинства птиц орнитоз протекает как латентная инфекция. В птицеводческих хозяйствах → заражение обслуживающего персонала.

Патогенез и иммунитет.Проникают воздушно-капельным путем, поражаютэпителия слизистой дыхательных путей и регионарных лимфоузлов. После разрушения зараженных→ в кровь → в парен­химатозные органы. Влимфоидной ткани могут длительно сохраняться и вызывать рецидивы.

В течение заболевания развивается ГЗТ. Образуются АТ, но они не обеспечивают невосприимчивость к повторному заболеванию. Отсутствие гуморальной защиты и аллергия замедленного типа способствуют возникновению рецидивов.

Диагностика.Выделение возбудителя из крови возможно в первые 2–3 нед болезни. Материалом заражают белых мышей в мозг или куриные эмбрионы в желточный мешок. Вмозга или желточного мешка обнаруживают включения, которые выявляют иммунофлюоресцентным или иммуноферментным методами.

Серодиагностику проводят в РСК, РТГА, ИФА с использо­ванием соответствующих АГ из возбудителя. Аллерги­ческое состояние – внутрикожные пробы со специфическим аллергеном.

Профилактика и лечение.Для лечения и экстренной профилактики – тетрациклиновые АБ.

С. trachomatis – патогенный для человека вид, делится на 15 сероваров: L-1, L-2, L-3являются возбудителями пахового лимфогранулематоза;А, Ва, В и С — трахомы; остальные,от D до К– уретрит и заболевания глаз. Резервуар – человек. Ж!! в естественных условиях не вос­приимчивы. Передача – при прямом контакте и через зараженные предметы.

ПАХОВЫЙ ЛГМ – венерическая болезнь, распространена в странах с тропическим и субтропическим климатом. Х-ся цикличностью течения, выделяют 3 периода:Первичный – через 1,5-2 нед после зара­жения, на месте внедрения возникает единичный пузырёк → эрозия и язва.Вторичный– генерали­зация процесса, атретичный – формируется фистульно-спаечный процесс промежности.

Заболевание сопровождается аллергией (выявляется внутрикожной реакцией с аллергеном из хламидий). После перенесенного заболевания формируется напряженный ИММУНИТЕТ.

ДИАГНОСТИКА – микроскопия мазков-отпечатков содержимого лимфати­ческих узлов. Выделение возбудителя производится при посеве материала в культуры клеток. Для серодиагностики используется РСК и ИФ.

Специфическая профилактика отсутствует.

ТРАХОМА– хрон инфекционное заболевание, х-ся поражениемконъюнктивы глаза. При этом в цитоплазме хламидий образуют включения. Обнаружение в соскобах конъюнктивы этих включений имеет диагностическое значение.

Для лечения применяют АБ тетрациклинового ряда. Без лечения → потеря зрения.

КОНЪЮНКТИВИТ НОВОРОЖДЕННЫХ– инфекционное заболевание новорожденных. Ребенок заражается в родовых путях больной матери. Помимо конъюнктивита могут возникнуть пневмония или гастроэнтерит. Хламидийным конъюнктивитом могут болеть взрослые люди при заражении во время купания в инфицированных водоемах.

УРЕТРИТ– венерическое заболева­ние, занимает по частоте возникновения второе место после гонореи. При данном заболевании хламидии поражают цилин­дрический эпителий уретры. М.б. причиной выкидышей, бесплодия.

БОЛЕЗНЬ РЕЙТЕРА– тяжелый системный хламидиоз, развивается после острой инфекции мочеполовых органов или кишечника у лиц с дефектами иммунной системы. Клинически проявляется триадой:уретрит, конъюнктивит, артрит.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопиче­ского исследования мазков, окрашенных краской Романов­ского–Гимзы. Наличие в элементарных телец розового цвета, ретикулярных телец голубовато-синего цвета – положительный диагноз. Также используют иммунофлюоресцентный метод с моноклональными АТ.

Для серодиагностики применяют реакцию ИФА, РСК. Достоверным является 4-кратное нарастание титра антител во 2-й пробе сыворотки крови. Выделение хламидий производится редко. Для этого заражают патологическим материалом клеточные культуры.

ХЛАМИДИОЗЫ - разнообразные по патогенезу и клиническим проявлениям распространенные заболевания человека и животных.

Хламидии - грамотрицательные бактерии с облигатным внутриклеточным паразитизмом. Биологическое своеобразие хламидий, выражающееся в энергозависимом паразитизме и уникальном цикле развития, определяет самостоятельное положение этих микроорганизмов в системе прокариотов.

Хламидии выделены в отдельный порядок Chlamydiales, включающий одно семейство Chlamydiaceae, содержащее один род Chlamydia, состоящий из 3 видов: C. trachomatis, C. psittaci, C. pneumoniae.

Вид C. trachomatis - микроорганизмы, вызывающие заболевания, главным образом, у человека (антропонозные хламидиозы). Они обусловливают разнообразную патологию урогенитального тракта, глаз и связанную с ней хламидийную инфекцию иной локализации.

Вид С. psittaci - включает микроорганизмы, первично поражающие животных. У человека они могут вызвать зоонозные хламидиозы (орнитоз, генерализованные инфекции, связанные с сельскохозяйственными и домашними животными).

Вид C. pneumoniae - включает микроорганизмы, вызывающие респираторную патологию, передающуюся от человека к человеку. Возбудитель недостаточно изучен.

Хламидии имеют две стадии жизненного цикла: одна - инфекционная стадия, элементарного тельца (ЭТ). Эта форма приспособлена к внеклеточному существованию; другая - ретикулярное тельце (РТ) - внутриклеточная практически неинфекционная стадия, лабильна, обладает выраженной метаболической активностью. ЭТ имеют размеры 0,3 мкм, содержат нуклеоид, в клеточной стенке имеется слой - аналог пептидогликана грам/- бактерий. Эта форма проникает в клетку при фагоцитозе. Из поверхностных мембран клетки хозяина вокруг этой маленькой частицы образуется вакуоль и ЭТ превращается в крупное ретикулярное тельце (диаметр 0,5-1 мкм). Внутри образованной вакуоли РТ многократно делится. В конечном счете вся эта вакуоль через 8-12 циклов деления заполняется этими частицами и превращается во включение (микроколонию). На последней операции образуется ЭТ нового поколения. Затем мембрана, ограничивающая микроколонию, повреждается и хламидии выходят в цитоплазму и далее за пределы клетки. Помимо ЭТ и РТ имеются промежуточные или переходные формы хламидий, которые образуются на двух стадиях цикла развития, на ранней при преобразовании ЭТ в РТ и на поздней - РТ в ЭТ.

Хламидии чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда, макролидам (эрит-ромицин, рифампицин).

Хламидии имеют сложную антигенную структуру. Выделяют три основных антигенных комплекса. Родоспецифический термостабильный, липополисахаридный комплекс, характерный для представителей рода, видоспецифические и типоспецифические термолабильные белковые фракции. Видоспецифический антиген определяет принадлежность штаммов к соответствующему виду. Типоспецифические антигены позволяют дифференцировать различные серовары (серотипы) хламидий внутри вида.

Вид C. psitacci объединяет возбудителей болезней птиц: орнитоз и пситаккоз (инфи-цировано до 140 видов птиц) и некоторых млекопитающих (экзогенные аборты, пневмонии и др.). Возбудитель передается человеку от птиц и животных, вызывает разнообразную форму патологии (поражения легких, заболевания нервной системы, гепатолиенальный синдром). Среди генерализованных форм летальность достигает 20%.

Вид C. trachomatis имеет наибольшую социально-медицинскую значимость. Он весьма неоднороден и представлен 15 серотипами, относящимися к 3 биоварам.

Биовар 1 - возбудитель трахомы, известный с древности. Это хронический кератоконьюнктивит, протекающий с воспалением коньюнктивы и роговицы, образованием рубцов и слепотой. До настоящего времени в ряде стран трахома интенсивно распространена. На территории бывшего союза ликвидирована в 60-е годы. В мире поражено трахомой 400 млн. человек.

Биовар 2 - возбудитель венерической лимфогранулемы. Заболевание передается половым путем. Развивается гнойный паховый лимфаденит. Активно циркулирует в Юго-Восточной Азии. Выделяется и у нас (завозные случаи).

Проблема заболеваний мочеполовых органов, вызываемых C. trachomatis за последние десятилетия приобрела чрезвычайно важное значение, что связано с высоким распространением данного вида инфекции и значительным числом развивающихся после нее осложнений. Крайне высок удельный вес хламидиозных уретритов и цервицитов среди таковых другой природы, а также различных форм восходящей генитальной хламидийной инфекции. Так, восходящая инфекция C. trachomatis может приводить к развитию эндометрита.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

1. Бактериоскопический метод - выявление хламидий, их морфологических структур и антигенов в пораженных клетках (клиническом материале).

Материал - соскобные препараты с доступных исследованию слизистых оболочек мочеполового тракта ( уретра, шейка матки и т.п.) и других органов (конъюнктива, прямая кишка и пр.) при экстрагенитальных формах. Из материала готовят мазки, которые окрашивают по Романовскому-Гимзе. Цитоплазматические включения хламидий (тельца Гальберштедтера-Провачека) содержат или крупные ретикулярные тельца или мелкие элементарные тельца. По цвету и внутренней структуре отличаются от ядра клетки и цитоплазмы. Метод характеризуется сравнительно низкой чувствительностью, позволяет диагностировать 10-20% случаев урогенитальной инфекции; при хламидийной патологии глаз чувствительность 90-100%.

Применение люминисцирующих поликлональных и моноклональных антител для выявления антигенов хламидий в цитоплазматических включениях в соскобных препаратах урогенитального тракта значительно увеличивает чувствительность и специфичность метода. Используется как прямой, так и непрямой иммунофлуоресцентный метод. При люминесцентной микроскопии антигены хламидий выявляют на красном или оранжевом фоне (при контрастировании синькой Эванса или родамином) цитоплазмы эпителиальных клеток в виде внутриклеточных включений ярко-зеленого цвета. По информативности и чувствительности уступает только бактериологическому методу.

При диагностике орнитоза и других зоонозных хламидиозов бактериоскопический метод не применяется.

2. Бактериологический метод. Выделение хламидий из инфекционного материала проводится заражением куриных эмбрионов, лабораторных животных или клеточных культур с последующей индикацией возбудителя. Материал тот же, что и при бактериоскопии. При орнитозе - кровь или мокрота. Кровь из вены (не менее 5 мл) исследуют в первые 7-10 дней заболевания, мокроту - до 14 дня заболевания. Для удаления сопутствующей микрофлоры добавляют антибиотики, не действующие на хламидии. (стрептомицин, нистатин, гентамицин). При заражении куриного эмбриона исследуемый материал вводят в желточный мешок 6-7 суточного развивающегося эмбриона. Обычно заражают 8-10 эмбрионов на 1 исследуемую пробу. При отсутствии специфической гибели эмбрионов спустя 4-10 суток после заражения под контролем бактериоскопии делают до 3 слепых пассажей.

Идентификация. Первичную идентификацию хламидий проводят на основании обнаружения типичных цитоплазматических включений, содержащих элементарные, ретикулярные тельца, и выявлении в их составе родоспецифического антигена (мазки-отпечатки из желточных мешков куриных эмбрионов - окраска по Маккиавелло, прямая и непрямая РИФ). При выделении хламидий в культурах клеток (HeLa), идентификация основана на выявлении в зараженных клетках типичных цитоплазматических включений (микроскопия с окраской по Гимзе), и родоспецифического антигена (РИФ). Оценку заражения клеток проводят через 48 - 72 часа.

При диагностике орнитоза кроме культур клеток можно заражать лабораторных животных в мозг или внутрибрюшинно.

3. Серологический метод. Антитела выявляют в сыворотке крови (исследуют 2-3 раза с интервалом 10-14 дней) и секретах половых органов. Используют для диагностики РСК, РПГА, РИФ, ИФА. Диагностически значимыми являются титры 1:32-1:64 при урогенитальных хламидиозах, 1:160 - при генерализованных инфекциях. Наиболее достоверным является нарастание титра антител в 4 и более раза. Специфические Ig M и Ig A обнаруживаются в секретах половых желез в титрах >1:8, Ig G - >1:256.

4. Кожно-аллергическая проба. Используется при диагностике орнитоза с орнитозным аллергеном. Внутрикожная проба становится положительной с первых дней заболевания у 87-95% больных, сохраняясь до года и более.

МИКОПЛАЗМЫ. МИКОПЛАЗМОЗЫ

В настоящее время описано свыше 100 видов М., отнесенных к трем порядкам. Наибольшее значение в патологии человека имеют М. семейства Micoplasmataceae. В состав этого семейства входят 2 рода:

1. Mycoplasma (более 70 видов);

2. Ureoplasma (2 вида).

Среди микоплазм имеются как свободноживущие (сапрофиты), так и поражающие млекопитающих, птиц, насекомых, а также растения. Размер М. 0,15 - 0,3 мкм. Они полностью лишены клеточной стенки и ее дериватов. Однако они способны размножаться на бесклеточных питательных средах, где образуют характерные колонии.

Клетки М. полиморфные - шарообразные, мелко зернистые, звездчатые, нитевидные. Размножение - бинарное деление, возможна фрагментация нитей, почкование. Имеются микоплазмы, обладающие скользящей подвижностью (подобно амебе), некоторые обладают жгутиками.

М. окружена 3-хслойной липопротеиновой мембраной, которая состоит из стериновых липидов, что отличает их от других прокариотов и сближает с эукариотами. Отсюда потребность микоплазм в стироле для роста и синтеза мембран. ЦПМ выполняет одновременно функции клеточной стенки и собственно мембраны и несет ряд важнейших физиологических функций: регулирует процессы метаболизма, энергетический обмен, рецепцию токсинов, обеспечивает адсорбцию эритроцитов, сперматозоидов, эпителиальных и др. клеток.

Отсутствие клеточной стенки определяет отличительные свойства микоплазм: чрезвычайную пластичность, полиморфизм, чувствительность к лизису под влиянием осмотического шока, алкоголя, детергентов, фильтруемость через мембранные фильтры, устойчивость к антибактериальным препаратам, действующим на клеточную стенку.

На агаризованных питательных средах М. образуют небольшие колонии похожие на яичницу-глазунью (10-200 мкм) в зависимости от вида.

Недостаток белков - ферментов ограничивает число метаболических путей, поэтому микоплазмы крайне чувствительны к питательным средам, в состав которых обязательно должны входить: пуриновые и пиримидиновые основания, аминокислоты, витамины, липиды, в том числе стероиды.

Паразитируя в организме хозяина, они потребляют эти вещества непосредственно из тканей организма-хозяина.

Заболевания, вызываемые микоплазмами - микоплазмозы относятся к одним из наиболее часто встречающихся заболеваний. Это ОРЗ до 10% всех случаев (основные возбудители M. pneumoniae и M. hominis); пневмонии - около 20% всех пневмоний (M. pneumoniae, hoominis); внереспираторные проявления респираторного микоплазмоза: миокардиты, перикардиты, неврологические проявления (неврит, менингоэнцефалит и др.), нефрит, отит, синусит.

Урогенитальные микоплазмозы занимают значительное место среди болезней, передающихся половым путем. Основные возбудители: М. hominis, M. genitalium, M. fermentans. Микоплазменная инфекция у мужчин может быть причиной уретритов, простатитов, у женщин - вагинитов, цевицитов, осложнений беременности (самопроизвольные выкидыши, преждевременные роды, послеродовой сепсис). С микоплазменной инфекцией многие связывают нарушение репродуктивной функции мужчин и женщин.

ОБЩАЯ И ЧАСТНАЯ ВИРУСОЛОГИЯ

Экспресс-тесты.В основе экспресс-тестов (рис.2) диагностики лежит метод иммунной хроматографии. Чувствительность данных тестов варьирует в пределах 20-50%.

Рис. 2 Экспресс-тест для диагностики хламидиоза

Бактериоскопический метод. Чувствительность данного метода применительно к обнаружению хламидий невысока, и составляет лишь 15-30%.

Серологические методы - РСК, ИФА, РИФ.

Молекулярно-биологические методы – полимеразная цепная реакция (ПЦР), лигазная цепная реакция (ЛЦР), метод ДНК-зондов и транскрипционной амплификации (ТА).

Систематическое положение микоплазм согласно классификации Берджи, 2001	Микоплазмы
Домен	BACTERIA
Тип	TENERICUTES
Класс	MOLLICUTES
Порядок	MYCOPLASMATALES
Семейство	Mycoplasmataceae
Род	Mycoplasma	Ureaplasma
Вид	M. gallisepticum, M. hominis, M. genitalium, M.haemofelis, M. hyopneumoniae, M. laboratorium, M. ovipneumoniae, M. pneumoniae	U. canigenitalium, U. cati, U. diversum, U. felinum, U. gallorale, U. loridis, U. parvum, U. urealyticum

Микоплазма (Mycoplasma) -- род мелких аспорогенных, не имеющих ригидной клеточной стенки грам- хемоорганотрофных аэробных или анаэробных организмов из семейства Mycoplasmataceae.

Отличительные черты микоплазм:

1. Отсутствует клеточная стенка, микоплазмыне способны синтезировать её компоненты. Функции клеточной стенки у микоплазм выполняет трёхслойная цитоплазматическая мембрана, богатая холестерином, который сообщает ей некоторую ригидность, поэтому микоплазмы устойчивы к осмотическому лизису, что отличает их от дефектных по клеточной стенке форм – сферопластов и протопластов.

2. Из-за отсутствия формообразующего каркаса – клеточной стенки, микоплазмы плеоморфны и могут образовывать кокковидные, нитевидные, шаровидные, ветвящиеся формы, что обусловило их название от греч. mykes, гриб, + plasma, нечто имеющее форму.

3. Микоплазмы не способны к образованию холестерина и получают его из животных тканей или питательных сред. Для культивирования микоплазм нужны питательные среды, содержащие холестерин (желточные среды).

5. M.genitalium— это самая мелкая из известных на сегодняшний день бактерий; ее геном составляет 580 т.п.о.

6. Микоплазмы считаются поверхностными паразитами клеток слизистых оболочек. Их часто рассматривают как оптимальных паразитов, так как вызываемые ими инфекции редко приводят к летальному исходу.

7. Микоплазмы размножаются бинарным делением, способны к почкованию и сегментации. По Граму окрашиваются отрицательно, но лучшие результаты даёт окраска по Романовскому-Гимзе.

Биологические свойства.

Микоплазмы растут на питательных средах богатых стеролами, жирными кислотами, являются факультативными анаэробами, не способны к синтезу пептидогликана, в связи с чем устойчивы к бета-лактамным препаратам, в т.ч. к пенициллину.

В организме человека они прикрепляются к мембране клетки, выделяя продукты метаболизма и токсические субстанции, они нарушают функции клетки, приводят к развитию воспаления (мембранные паразиты). Рост микоплазм подавляют тетрациклины, макролиды; не действуют антибиотики, подавляющие синтез клеточной стенки (бета-лактамы), а также рифампицин, налидиксовая кислота.

Микоплазмы имеют адгезины, ответственные за прикрепление к клеткам хозяина. Некоторые компоненты микоплазменной клетки могут действовать как суперантигены, и в литературе описано несколько случаев аутоиммунных реакций. Микоплазмы имеют факторы ускользания от действия иммунной системы. Микоплазмы способны проникать в клетки хозяина и вызывать слияние клеток, апоптоз.

РЕСПИРАТОРНЫЕ МИКОПЛАЗМЫ

Мicoplasma pneumoniae имеют типичную морфологию микоплазм. На питательных средах дают видимый рост на 5-10-е сутки. Для формирования характерных колоний типа глазуньи необходимо несколько пересевов. У М. pneumoniae выявлен группоспецифический антиген.

Основные факторы патогенности:

Адгезины–поверхностные белки обусловливают взаимодействие с гликопротеиновыми рецепторами, содержащими нейраминовую кислоту, на поверхности клетки хозяина, что имеет ведущее значение в развитии начальной фазы инфекционного процесса.

Эндотоксин-проявляет пирогенный эффект, вызывает тромбогеморрагические поражения, коллапс и отёк лёгких.

Гемолизины и экзотоксины - .вызывают блокаду мукоцилиарного транспорта, а затем и гибель эпителия воздухоносных путей.

Перекрёстно реагирующие антигены приводят к аутоиммунным поражениям (артритаи и кожнымпоражениям) и ускользанию от действия иммунной системы.

Мелкие размеры способствуют проникновению через ГЭБ с развитием менингита.

Механизм передачи. Аэрозольный. Эпидемическое распространение часто получают в закрытых коллективах – домах престарелых, домах инвалидов, детских домах.

Приводят к развитию респираторного микоплазмоза:1) в виде ограниченной инфекции верхних дыхательных путей; 2) в виде пневмонии.

Микоплазменные пневмонии носят обычно очаговый характер, реже — сегментарные, долевые. Обычно имеют субклиническое течение и переносятся на ногах. Внереспираторные проявления микоплазменной пневмонии включают гемолитическую анемию, менингиты, мио- и эндокардиты, реактивные артриты и др.

Микробиологическая диагностика. Применяют бактериологические и серологические методы.

Материал для исследований — слизь из глотки, мокрота, плевральный выпот, биоптаты легочной ткани.

Антигены М. pneumoniae в исследуемом материале выявляют с помощью РИФ, РПГА, ИФА и др. Выделение возбудителя микоплазменной пневмонии проводят посевом на питательные среды.

Лечение.Антибиотикотерапиямакролидами и тетрациклинами. Средства специфической профилактики микоплазменной пневмонии находятся на стадии разработки.

УРОГЕНИТАЛЬНЫЕ МИКОПЛАЗМЫ

M.genitalium рассматриваются как патогенные микроорганизмы. Другие виды микоплазм (M.hominis, M.fermentans, U.urealyticum) относятся к условно-патогенным. M.hominis и U.urealyticum присутствуют в уретре, влагалище, прямой кишке у 20–75% здоровых людей. Обязательному лечению подлежит урогенитальная микоплазменная инфекция, вызванная M.genitalium, другими же видами микоплазм – при наличие показаний.

Пути инфицирования. Генитальные микоплазмы передаются при половом контакте, при прохождении плода через половые пути матери.

M. hominis, U.urealyticum, М. genitalium вызывают:

1. Микоплазмозы (уреаплазмоз) – воспалительные заболевания органов мочеполовой системы у мужчин и женщин;

2. Патологию беременности, плода и новорожденного: неразвивающаяся беременность, выкидыши, преждевременные роды, раннее излитие околоплодных вод, лихорадку во время родов и в послеродовой период у матерей. При интранатальном заражении могут приводить к поражениям глаз, у новорожденных девочек может развиться микоплазмоз органов мочеполовой системы. У новорожденных детей M.hominis u U.urealyticum могут быть выделены из полости рта, носа, глотки, гениталий, мочи, причем у девочек чаще, чем у мальчиков. Колонизация мочеполовых путей у детей транзиторна и исчезает довольно быстро, но у 5–20% она сохраняется и в пубертатном возрасте.

3. Изменения в структуре сперматозоидов, приводя к мужскому бесплодию (уреаплазмы прикрепляются к головке сперматозоида в средней его части, что может снижать их подвижность и фертильность);

4. Женское бесплодие.

M. hominis обычно вызывает: 1) бактериальный вагиноз в ассоциации с другими микроорганизмами гарднереллами, превотеллами; 2) воспалительные заболевания органов малого таза.

U.urealyticum обычно вызывает: 1) осложнения беременности (аборты, мертворождения и рождения детей с низкой массой тела) и инфекцию у новорожденных; 2) уретрит у мужчин (негонококковый уретрит); 3) уреаплазменный простатиты.

M.genitalium— вызывет ИПП: уретрит, цервицит, эндометрит, воспалительные заболевания органов малого таза. M. genitalium открыт позднее, чем остальные генитальные микоплазмы, — в 1981 году, изучен хуже, чем другие генитальные микоплазмы из-за трудности выращивания на питательных средах. Данные об этиологической роли этого микроорганизма в развитии воспалительных заболеваний урогенитального тракта как женщин, так и мужчин стали накапливаться в связи использованием ПЦР.

Микробиологическая диагностика. Классический метод выявления генитальных микоплазм— культуральный метод. Этот метод дает возможность оценить количество микоплазм, которые содержатся в исследуемом материале. Многие исследователи используют количественные критерии в диагностике, полагая, что концентрация уреаплазм более 10 4 КОЕ/мл имеет диагностическое значение, в то время как более низкие концентрации не должны учитываться, поскольку в таких количествах микоплазмы/уреаплазмы могут находиться у здоровых людей

ПЦР и ПЦР в реальном времени позволяют выявлять ДНК микоплазм, использование ПЦР в реальном времени предпочтительнее, так как позволяет определять концентрацию микоплазм или уреаплазм в материале.