Определение хеликобактерной инфекции на газоанализаторе breathld

ГАЗОАНАЛИЗАТОР ВЫДЫХАЕМОГО ВОЗДУХА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНФИЦИРОВАНИЯ БАКТЕРИЕЙ HELICOBACTER PYLORI

А.В. Буданов, А.В. Голиков,

А.Л. Есипов, канд. техн. наук А.В. Козлов,

Известно наличие корреляции между Helicobacter pylori (HP) и поражениями верхнего пищеварительного тракта, так как бактерия локализована в этой области в большом количестве у пациентов с раком желудка, дуоденальным раком и хроническими гастритами [1].

В настоящее время существуют методы (связанные с использованием биоптата – культивирование бактерий, быстрый уреазный тест; серологические методы; дыхательные тесты) 3, позволяющие проводить как качественное определение инфицирования HP, так и количественно оценивать степень инфицирования пациента. Значительная часть из них являются инвазивными и требуют использования дорогостоящего, сложного с точки зрения обслуживания и пробоподготовки оборудования. Поэтому перспективным направлением являются развитие подходов и разработка приборов, реализующих неинвазавные методы диагностики хеликобактериоза. При реализации прибора, достоинствами которого будут портативность, простота обслуживания, удобство мониторирования групп пациентов, открывается возможность проведения экспресс-анализов в больницах, поликлиниках, в частной практике.

В рамках решения этой проблемы разработан прибор, позволяющий получать показатель инфицированности пациента HP неинвазивным методом. Образцы выдыхаемого пациентом воздуха прокачиваются через датчик с помощью микрокомпрессора (МКС). Принцип действия прибора основан на определении продукции аммиака до и после принятия нагрузки (водного раствора карбамида (ВРК) нормального изотопного состава). При этом учитывается базальный уровень (БУ) концентрации газа, зависящий от индивидуальных особенностей пациента (кислотность среды желудка, объём лёгких, курение, употребление алкоголя и демографические признаки). Алгоритм программы обработки данных, реализованной в микропроцессоре (МП) газоанализатора, учитывает базальную концентрацию, специфичную для каждого пациента, что значительно повышает точность диагностирования. Обработка получаемых данных проводится в режиме реального времени. Прибор снабжён звуковой и визуальной индикацией последовательности операций с пробой и пациентом. Точность результатов, получаемых неинвазивными методами, также зависит от влажности выдыхаемого воздуха и попадания в измерительное устройство (датчик) слюны, что нередко приводит к его неработоспособности. Система пробоподвода предлагаемого прибора снабжена схемой защиты от подобных воздействий. Благодаря этому значительно повышена надёжность и точность измерений [5].

Апробация прибора проведена на 54 пациентах в возрасте от 4 до 18 лет и 15 взрослых (возраст от 20 до 47 лет). В качестве референс-методов использованы дыхательный "Хелик-Тест", гастроэнтероскопия, посевы и быстрый уреазный тест.

Сравнительный анализ основан на сопоставлении данных разработанного прибора и "Хелик-Теста" – широко применяемого в настоящее время неинвазивного метода. При этом использовался двухходовой МКС, что позволило проводить параллельное обследование пациента двумя устройствами.

Исследование, проводимое с помощью "Хелик-Теста", подразделяется на два этапа. На первом этапе, занимающем около 5 мин., определяется БУ. Перед началом второго этапа пациенту подают нагрузку в виде ВРК. Этот этап занимает от 7 до 12 мин. Таким образом, без учёта времени на подготовку ВРК обследование длится 12-17 мин. По окончании каждого из этапов линейкой измеряется длина части индикаторной трубки (ИТ) с сорбентом, изменившим свой цвет. Фиксируются значения l1 и l2 соответственно для первого и второго этапов. Диагностическую значимость имеет величина приращения Dl = l2 – l1. При попадании в ИТ большого количества конденсата и/или незначительного количества слюны сорбент меняет свой цвет, что приводит к срыву исследования. Повторное обследование можно проводить не ранее чем через 30 мин, когда реакция в полости желудка закончится.

Обследования пациента с использованием разработанного газоанализатора проводятся по следующей схеме. Пациенту после приема нагрузки перорально подается пробозаборный капилляр. Выдыхаемый воздух с помощью МКС прокачивается через систему пробоподвода, что позволяет пациенту спокойно дышать. Обследование занимает не более 10 минут. Сигнал с выхода датчика S1 фиксируется в памяти МП. После воздействия нагрузки на пациента фиксируется сигнал S2. Диагностическую значимость имеет разность сигналов DS = S2 – S1. Таким образом, обследование, проводимое с помощью газоанализатора, проходит в один этап и занимает на 40% меньше времени, чем обследование с помощью "Хелик-Теста". Другим преимуществом газоанализатора является то, что влага выдыхаемого воздуха и слюна собираются в процессе процедуры в коллекторе [5]. При этом соединительный капилляр даже при случаях гиперсаливации оставался практически чистым (без конденсата).

Для количественного сравнения данных "Хелик-Теста" и газоанализатора использовался критерий Колмогорова [6]. Графики сравниваемых зависимостей приведены на рисунке. При анализе экспериментальных зависимостей не учитывались обследования, не удавшиеся в результате порчи ИТ из-за попадания в них слюны пациента и/или конденсата, в то время как газоанализатор оставался работоспособным. Полученный результат показал согласование распределений на уровне значимости b= 5%.

Результаты количественного сравнения данных "Хелик-Теста" и газоанализатора позволяют сделать вывод о том, что возможность определения инфицированности пациента HP подтверждена на опыте. На основании проведенных исследований показано, что результатом работы является прибор, позволяющий не более чем за 10 мин определить наличие инфекции HP у испытуемого. Разработан и апробирован неинвазивный способ определения инфицированности пациента HP. Время исследования по сравнению с наиболее быстрым из применяемых в настоящее время методов ("Хелик-Тест") сокращается на 40%, при этом увеличивается достоверность диагностирования.

1. Marshall; Barry J. et al. Lancet 1: 1311-1314, 1984.

2. U.S. Pat. No. 5,542,419. A61B 005/08 Moulton-Barret, et al. Noninvasive method to detect gastric Helicobacter pylori. August 6, 1996.

3. U.S. Pat. No. 6,172,215. C07H 021/04 Keshi, et al. Probes for detecting and identifying Helicobacter pylori. January 9, 2001.

4. U.S. Pat. No. 6,186,958. A61B 005/08. Katzman, et al. Breath test analyzer. February 13, 2001.

5. Козлов А.В., Голиков А.В., Есипов А.Л., Буданов А.В., Энберт Е.Ю. Устройство для определения показателя инфицированности пациента бактерией Helicobacter pylori и системы пробоподвода к нему //Решение о выдаче патента РФ № 2003108028/20 (008990) от 26.03.2 003, МПК7 A 61 B 5/00, G 01 N 33/497.

6. А. Д. Бродский, В. Л. Кан. Краткий справочник по математической обработке результатов измерений. Москва: Государственное издательство стандартов, 1960.

[youtube.player]

Если человека регулярно беспокоит изжога, тошнота, отрыжка, боли в животе и быстрое насыщение после трапезы, то с большой долей вероятности может оказаться, что у него хеликобактерная инфекция, которая, в свою очередь, является виновником появления гастрита и язвенной болезни желудка.

Особенности хеликобактерии

Хеликобактер пилори имеет ряд особенностей. Во-первых, эта бактерия достаточно успешно выдерживает кислую среду в желудке. Большинство других вирусов и бактерий гибнет в желудке благодаря высокой кислотности, однако хеликобактерия имеет механизмы защиты. Только попав в желудок, она с помощью жгутиков перемещается к слизи, находящейся на стенках желудка. Вместе с тем бактерия увеличивает секрецию аммиака, который и нейтрализует вокруг нее кислую среду. То есть хеликобактер пилори прикрепляется к стенкам желудка и может оставаться в этом безопасном месте на протяжении десятилетий.

Во-вторых, бактерия способна провоцировать большинство заболеваний желудка и кишечника. Размножаясь, она разрушает клетки желудка. А выделение ею вредных веществ и токсинов приводит к хроническим воспалениям и гастриту. В желудке и двенадцатиперстной кишке появляются эрозии и язвы, значительно возрастает риск развития рака желудка.

В-третьих, хеликобактерная инфекция полностью излечивается специализированной терапией.

Причины возникновения инфекции

Хеликобактер пилори нежизнеспособна на воздухе, быстро погибает. Передаваться она может через слюну при контакте больного и здорового человека. Наиболее частым путем передачи бактерии является общее использование средств личной гигиены, посудных принадлежностей. Также передача возможна при поцелуе. Поэтому, если хеликобактерная инфекция имеется у одного члена семьи, в группу риска попадают все остальные.

Симптомы инфекции

Признаки хеликобактерной инфекции, как правило, неспецифичны. То есть на основании того или иного симптома нельзя твердо поставить диагноз. Также и отсутствие симптомов не говорит о том, что инфекции нет. Но у подавляющего большинства пациентов прослеживались следующие признаки: дискомфорт и повторяющиеся боли в желудке, которые, как правило, приходят на голодный желудок и исчезают после приема пищи. Это может быть свидетельством наличия на стенках желудка язв, которые образовались в процессе жизнедеятельности бактерии.

Также у заболевших людей наблюдается изжога, усиливающаяся со временем, частая отрыжка, вздутие живота, тяжесть в желудке, тошнота, рвота, плохая переварваемость мясной пищи, быстрое насыщение или, наоборот, чувство голода, которое не проходит даже после обильной еды.

Диагностика хеликобактерной инфекции с использованием биопсийного материала

Если у человека имеется язвенная болезнь, хронический гастрит, или он обнаружил у себя симптомы хеликобактерной инфекции, то в обязательном порядке должны быть проведены специальные исследования. На основании забора и анализа биопсийного материала существует несколько исследований.

1. Быстрый уреазный тест. Небольшой кусочек слизистой опускается в среду с мочевиной и определенным индикатором. Если имеется хеликобактерная инфекция, то бактерия с помощью уреазы начинает расщеплять мочевину, следовательно, изменяется кислотность среды, что и показывает измененный цвет индикатора. Данная методика является простой, недорогой и очень показательной.

2. Микроскопия. Взятые кусочки слизистой рассматривают под микроскопом. Если бактерий много, то их можно увидеть через увеличительные линзы. Этот метод не самый информативный, так как не позволяет выявить инфекцию при малом количестве бактерий, а также определить их вид.

3. Посев биоматериала на питательную среду. Хеликобактерия растет в малокислородной среде, богатой азотом. Для создания таких условий требуется дорогостоящее оборудование и время. Продолжительность исследования составляет до 8 дней. Однако именно эта методика дает абсолютно верный результат и позволяет установить не только штамм бактерии, но и ее чувствительность к определенным группам антибиотиков.

4. Иммуногистохимия. Кусочки слизистой обрабатывают специальными антителами, специфичными к бактерии, что и позволяет ее увидеть. Также эффективный метод, определяет хеликобактерию даже при небольшом ее количестве.

Анализ крови на хеликобактерию

В анализе крови можно обнаружить антитела к бактерии. Появляются они через 1-2 месяца после заражения. Однако даже после положительного лечения антитела способны сохраняться в крови на срок до 1 года, поэтому для контроля эффективности лечения этот метод не используют.

Дыхательный тест на инфекцию

Перед проведением дыхательного уреазного теста пациенту запрещается курить, принимать спиртные напитки, антибиотики, препараты для желудка. Тест проводится натощак, при этом пациент дышит в специальную трубочку. Вначале идет забор образца выдыхаемого воздуха, после чего человеку предлагают выпить раствор карбамида с меченным углеродом. Спустя 15-20 минут снова берут на исследование выдыхаемый воздух. Суть теста в том, что хеликобактерия расщепляет карбамид, а уголь выделяется легкими во время дыхания, особая система фиксирует его концентрацию.

Метод достаточно прост и эффективен, но является дорогостоящим. В странах Европы его используют и для контроля терапии.

Анализ кала на хеликобактер пилори

Для проведения процедуры необходима только небольшая проба кала пациента, которую исследуют на наличие частей бактерии. Данный анализ успешно используется и для выявления самой хеликобактерной инфекции, и для проверки эффективности лечения.

Лечение

Лечение хеликобактерной инфекции предполагает комплексную терапию, которая направлена на уничтожение бактерии в желудке. Избавление от самой хеликобактер пилори является непременным условием для того, чтобы началось заживление язв и эрозий на слизистой желудка.

Лечение инфекции проводится антибиотиками и другими лекарственными средствами, регулирующими уровень кислотности в желудке.

Схема лечения представляет собой тройную схему эрадикации, то есть включает в себя три лекарства, которые нужно принимать совместно. Как правило, двумя из них являются антибиотики и третье - ингибитор протонной помпы. В настоящее время существуют и схемы лечения из 4 лекарств: два из них - по-прежнему антибиотики, одно снижает выработку желудочного сока и последнее - препарат висмута.

Курс лечения длится от 10 до 14 дней. О том, чем лечить хеликобактерную инфекцию и какую схему использовать, необходимо обязательно проконсультироваться с врачом.

Профилактика заболевания

Для того чтобы не заразиться хеликобактерной инфекцией, необходимо соблюдать элементарные правила гигиены. Это включает в себя мытье рук перед едой, использование личной посуды и средств гигиены. В случае обнаружения у одного из членов семьи хеликобактерии, все остальные должны также обязательно сдать анализы.

Итак, заболевания, которые может вызывать хеликобактерия, серьезны, начиная от гастрита и язвы и заканчивая раком желудка. Так как симптомы хеликобактерной инфекции не специфичны и могут быть вовремя не обнаружены, следует огромное внимание уделить профилактике заболевания, а также делать профилактические обследования по назначению врача.

[youtube.player]

Проблемы с желудком доставляют огромный дискомфорт и подчас мешают вести привычный образ жизни. Боли в области живота, тошнота, отрыжка, тяжесть в желудке способны разрушить любые планы и надолго выбить из колеи. Ситуация серьезно осложняется, если такие явления обретают хронический характер. В чем может крыться причина желудочных расстройств и как ее устранить? Давайте в этом разберемся.

Что такое хеликобактер пилори и зачем нужен анализ

Очень часто проблемы с желудком вызывает коварная бактерия — хеликобактер пилори ( Helicobacter pylori ). Она имеет спиралевидную форму, является патогенной бактерией-паразитом, производит множество токсинов, поражающих слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки — именно в этих органах она обитает. Хеликобактер пилори приводит к воспалительным процессам, таким как гастрит, язва и ряду других, появление которых еще не так давно объясняли генетической предрасположенностью и нарушением здорового питания. Доказано, что в ряде случаев гастрит и язва вызваны именно инфицированием этой бактерией. То есть этими заболеваниями, оказывается, можно так же легко заразиться, как и гриппом.

Причем если большинство бактерий гибнет в кислой желудочной среде, то хеликобактер пилори в ней очень даже жизнеспособна. Она легко приспосабливается к агрессивной среде и без особого труда передвигается по стенкам внутренних органов благодаря специальным жгутикам на ее поверхности.

В России распространенность бактерии очень велика — в разных регионах инфицировано от 70 до 90% населения, что значительно выше показателей Европы и США. Это объясняется сравнительно низким уровнем жизни большинства россиян, как следствие — пренебрежение правилами гигиены, проживание в антисанитарных условиях. В Москве, как наиболее развитом городе России, количество инфицированных не превышает 60% (речь идет о зарегистрированных гражданах).

Как правило, поводом для назначения анализа на хеликобактер пилори становятся следующие симптомы:

• Боли в желудке после приема пищи.
• Частая отрыжка.
• Повторяющаяся изжога.
• Затруднение во время глотания пищи.
• Метеоризм и урчание в животе.
• Тошнота и рвота.
• Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
• Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
• Появление крови во время рвоты и дефекации.

Разумеется, перечисленные симптомы вовсе не указывают на инфекцию. Подтвердить или опровергнуть ее присутствие может только лабораторный анализ.

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Точность результатов исследования зависит не только от лаборатории, но и от соблюдения ряда простых правил подготовки к анализу.

Кал собирают в специальный контейнер, купленный в аптеке. Если контейнер будет заполнен на 1/3, этого будет достаточно для анализа. Ни в коем случае нельзя брать кал из унитаза — в биоматериал могут попасть дезинфицирующие средства. Доставить материал в лабораторию для анализа нужно как можно быстрее. Максимальное время его хранения — 10–12 часов при температуре +2…-8 градусов Цельсия.

Накануне анализа следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от алкоголя и жирной пищи. Кровь берут из вены натощак в утренние часы. Сама по себе процедура достаточно безболезненна и длится всего несколько минут. Однако пациенты по-разному ее переносят. Поэтому если организм ослаблен, то сразу после забора крови рекомендуется выпить сладкий чай или съесть кусочек черного шоколада — это поможет избежать головокружения. Чтобы не образовалась гематома на месте ввода иглы, после процедуры руку нужно несколько минут подержать согнутой в локте.

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

• Иммуноферментный анализ. Результаты анализа на антитела готовятся в течение одного дня, не считая дня сдачи анализа. При необходимости возможна срочная подготовка результатов, она займет всего 2–3 часа. В разных лабораториях могут использоваться разные единицы измерения. Одна из наиболее распространенных — Ед/мл.

Результаты трактуются следующим образом:

>1,1 Ед/мл
Высокий риск развития язвенной болезни или язвенная болезнь; высокий риск развития рака желудка.

0,9–1,1 Ед/мл
Рекомендуется повторный анализ через две недели.

Бак­те­рия хе­ли­ко­бак­тер пи­ло­ри — свое­об­раз­ная тем­ная ло­шад­ка, на се­год­няш­ний день ма­ло изу­чен­ная и тем — бо­лее опас­ная. До сих пор оста­ет­ся мно­жест­во от­кры­тых во­про­сов: по­че­му не­ко­то­рые ин­фи­ци­ро­ван­ные лю­ди за­бо­ле­ва­ют яз­вой или гаст­ри­том, а дру­гие — нет; на­сколь­ко при­сут­ст­вие этой бак­те­рии в ор­га­низ­ме уве­ли­чи­ва­ет риск раз­ви­тия ра­ка же­луд­ка? Оче­вид­на не­об­хо­ди­мость раз­ра­бот­ки вак­ци­ны для про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ции, по­иск ан­ти­био­ти­ков на­прав­лен­но­го дейст­вия, уби­ва­ю­щих бак­те­рию, — ведь у не­ко­то­рых лю­дей раз­ви­ва­ет­ся ре­зис­тент­ность к су­щест­ву­ю­щим ви­дам те­ра­пии. Единст­вен­ное, что мы мо­жем на­вер­ня­ка сде­лать во бла­го сво­е­му здо­ровью, — сдать про­фи­лак­ти­чес­кий ана­лиз.

[youtube.player]

Бактерии Helicobacter pylori повреждают поверхностный эпителий желудка и вызывают воспаление. Чаще всего обнаруживаются у пациентов с язвенной болезнью желудка (в 60-80 % случаев) и двенадцатиперстной кишки (90-100 % случаев).В настоящее время диагностика хеликобактериоза не представляет трудностей.

Чтобы выявить инфицирование бактериями, нужно сдать анализ крови из вены или пробы выдыхаемого воздуха (аэротест). В период обострения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки назначается гастроскопия (ФГДС), при проведении которой врач-эндоскопист может взять участок слизистой (биоптат) для экспресс-теста или морфологического исследования на наличие Helicobacter pylori.

Методы диагностики

• доступен всем пациентам;
• не сопровождается выраженным дискомфортом и стрессом при проведении процедуры (инъекционный метод забора крови);
• прием лекарственных препаратов, применяемых для лечения заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки, не оказывает влияние на результат исследования.

Процедура забора крови проводится утром натощак.

• За сутки до исследования из рациона исключается жирная пища.
• Курение прекращают за 8 часов до анализа.

Забор крови производится путем венепункции. Материал отбирают в стерильную вакуумную пробирку с активатором свертывания для быстрого отделения сыворотки. Кровь доставляется в лабораторию в течение 2 часов. Микропробирки с сывороткой разрешается хранить в холодильнике при температуре 2-8 °С или в морозильной камере при -20 °С до 10 суток.

Для выявления бактерий применяется иммуноферментный анализ – ИФА. Это лабораторный метод предполагает исследование сыворотки крови. Путем химических реакций врачи определяют наличие в ней антител – специфических белков иммунологической природы, выделяющихся при воздействии на организм человека различных антигенов, не знакомых ему (чужеродных бактерий, вирусов, грибов, токсинов, аллергенов и т. д.). Helicobacter pylori является инфекционным возбудителем гастропатологии. При попадании в желудочно-кишечный тракт он активирует систему иммунитета и вызывает выработку антител – иммуноглобулинов (Ig). ИФА помогает диагностировать наличие или отсутствие данной инфекции.

Бывают ситуации, когда обнаруженные антитела в сыворотке крови является ложноположительным результатом. Это может быть связано с длительным циркулированием в плазме иммуноглобулинов после уничтожения бактерий вследствие эрадикационной терапии. Антитела присутствуют в крови в течение месяца после лечения, а у некоторых остаются пожизненно. В другом случае все наоборот. Инфицирование есть, а антитела в сыворотке крови не определяются (ложноотрицательный результат). Это может быть связано с ранним периодом после заражения. Антитела не успевают выработаться из-за слабого иммунного ответа. Чтобы избежать неточностей в результатах, необходимо дополнительно исследовать фракции иммуноглобулинов 3 видов: M, G, A.

Характеристики специфических белков крови:

Существует качественное и количественное определение антител к Helicobacter pylori. В первом случае диагностируют наличие специфических иммуноглобулинов, а во втором их концентрацию. При качественном анализе определяются суммарные антитела (IgM, IgG, IgA). При количественном исследовании используют нормы содержания специфических белков в крови.

У каждой лаборатории свои референсные значения, применяемые для определенного вида реактивов.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественный анализ на антитела к Helicobacter pylori	Отрицательный (отсутствие антител)	Положительный (наличие антител)
Количественный анализ на антитела к Helicobacter pylori:	Нормальные референсные значения	Превышение показателей
IgM	Отрицательный (значения IgM в пределах нормы)

При нормальных показателях IgG и IgA инфицирования нет Положительный (референсные значения превышают норму)

Определяется сразу после заражения хеликобактериозом (выявляется в течение 3-4 недель от контакта с возбудителем)

• IgG

Отрицательный

IgG может быть ложноотрицательным в течение 3-4 недель после заражения (IgM положительный) Положительный

Инфицирование Helicobacter pylori

Может превышать норму в течение месяца после эрадикационной терапии

• IgA

Отрицательный

Может быть ложноотрицательным в ранний период после контакта с возбудителем (в течение 2-3 недель от момента заражения) Положительный

Чем выше концентрация IgA в сыворотке крови, тем активнее протекает воспалительный процесс

Возможны сомнительные результаты исследования. В таких случаях анализ на антитела к Helicobacter pylori повторяют через 2-3 недели.

• помогает выявить даже низкие концентрации возбудителя;
• безопасный метод, не сопровождается радиоактивной нагрузкой на пациента (при использовании тестовых растворов мочевины, меченой нерадиоактивными изотопами);
• оценивается процент бактерий на всей поверхности слизистой желудка;
• удобен для пациентов (неинвазивный метод);
• дыхательный уреазный тест с раствором карбамида разрешен беременным и младенцам;
• является точным диагностическим исследованием.

1. Дыхательный уреазный тест проводится натощак. Перед исследованием с утра можно почистить зубы без применения ополаскивателей и освежителей для полости рта. Не рекомендуется использовать жевательные резинки.
2. Накануне забора проб разрешен легкий ужин. С 22 часов вечера и до начала процедуры есть нельзя, питье отменяют за час до исследования.
   
3. За 2-3 дня до аэротеста запрещен прием алкоголя (пары алкоголя искажают результаты проб). Также на этот период исключаются продукты, вызывающие метеоризм (капуста, бобовые, чеснок, яблоки, грибы, черный хлеб и другие).
4. Курение прекращают за 8 часов до начала процедуры.
5. За 2 недели до исследования отменяют препараты висмута (“Де-нол”, “Викалин”, “Викаир”), ингибиторы протонной помпы (“Омез”, “Нольпаза”, “Нексиум” и другие). Данные средства угнетают активность уреазы.
6. За неделю до проведения теста прекращают прием нестероидных противовоспалительных и антибактериальных препаратов.
7. За 2 дня до процедуры исключаются лекарственные средства из группы блокаторов Н₂ – гистаминовых рецепторов (“Гистодил”, “Примамет”, “Ранитидин”, “Фамотидин” и другие).
8. Разрешены препараты, снижающие избыточную продукцию соляной кислоты желудком (антациды – “Алмагель”, “Фосфалюгель”, “Маалокс”, “Гевискон” и т. д.).

Специфичность метода

Дыхательный уреазный тест на Helicobacter pylori связан с особенностями жизнедеятельности бактерии. Возбудитель в процессе своего существования выделяет защитный фермент – уреазу. Это биологически активное соединение помогает микроорганизму справляться с агрессивным воздействием соляной кислоты, выделяемой в составе желудочного сока. В процессе пищеварения уреаза расщепляет продукт метаболизма белков – мочевину. В результате образуется аммиак и углекислота. Эта химическая реакция стала основой для аэротеста. При дыхании пациента можно измерить концентрацию углекислого газа в выдыхаемом воздухе.

• Аэротест с применением тестового раствора или драже мочевины, меченой радиоактивным углеродом ( 14 С). Данный метод применяется редко из-за лучевой нагрузки на организм человека.

Пациент дышит через специальную трубку, находящуюся глубоко в ротовой полости. Дыхание должно быть ровным и спокойным. Трубка подсоединяется к специальному газовому спектрометру, замеряющему процент меченого углекислого газа в выдыхаемом воздухе. В начале процедуры берут 2 фоновые пробы аэротеста. Затем пациенту дают выпить тестовый раствор или проглотить специальное драже с мочевиной, меченой радиоактивным изотопом. Через каждые 15 минут (в течение часа) осуществляют забор дополнительных 4 проб выдыхаемого воздуха. Не допустимо попадание слюны в трубку, результат исследования может стать недостоверным. В этом случае пробу придется повторить через 40-60 минут после предыдущей. Чтобы избежать неприятной ситуации, трубку во время процедуры необходимо периодически вынимать, а слюну сглатывать.

• Дыхательный уреазный тест с применением стабильного раствора мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом ( 13 С). Данный метод является “золотым стандартом” в диагностике хеликобактериоза (подробнее о методе см. здесь).

Во время исследования осуществляют забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Процедура проводится на голодный желудок, в положении сидя. Пациент делает глубокий вдох и на несколько секунд задерживает дыхание. Затем выдыхает в герметичный одноразовый пакет, который сразу же плотно закрывают. Пациенту дают выпить тестовый раствор мочевины, меченой нерадиоактивным изотопом. Через полчаса осуществляют повторный забор выдыхаемого воздуха. С помощью масс-спектрометра измеряют концентрацию углекислоты в выдыхаемом воздухе. Полученные результаты сравнивают и делают выводы о наличии инфицирования.

• Аэротест с применением раствора мочевины (карбамида). Данная методика не является максимально точной. Рекомендуется для диагностики хеликобактериоза у беременных женщин и маленьких детей.

Методика схожа с предыдущим тестом. У пациента делают забор 2 проб выдыхаемого воздуха. Измеряют концентрацию углекислого газа до и после применения тестового раствора карбамида.

Вид исследования	Норма	Патология
Качественное определение уреазной активности Helicobacter pylori	Отрицательный аэротест

Инфицирования нет или полное излечение после эрадикационной терапии Положительный аэротест

Инфицирование Helicobacter pylori Количественное определение уреазной активности Helicobacter pylori (по процентному содержанию изотопа в выдыхаемом воздухе) Менее 1%

Хеликобактериоза нет

• 1-3,4% – легкое инфицирование Helicobacter pylori
• 3,5-6,4% – среднетяжелый воспалительный процесс
• 6,5-9,4% – тяжелое инфицирование
• Более 9,5% – крайне тяжелая степень хеликобактериоза

Во время проведения гастроскопии (ФГДС) врач-эндоскопист берет кусочек слизистой из любого отдела желудка. Биоптат помещают на реагентную тест-полоску, обработанную раствором мочевины. Под действием фермента уреазы, выделяемой бактериями Helicobacter pylori, происходит ощелачивание среды. Мочевина расщепляется. Вследствие этого индикаторная полоска меняет свою окраску – с желтой на малиновую. Тест считается положительным. От скорости изменения цвета реагента зависит выраженность воспалительного процесса и концентрация возбудителя в биоптате.

Оценка полученного результата:

• Helicobacter pylori (+) – слабое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение суток).
• Helicobacter pylori (++) – умеренный инфекционный процесс (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение 2-3 часов).
• Helicobacter pylori (+++) – тяжелое инфицирование (реагентная тест-полоска изменила свой цвет в течение одного часа).

• наиболее точный метод диагностики Helicobacter pylori (специфичность до 100%);
• исключает возможность ложноположительных результатов, подтверждает наличие инфекции.

1. 
   Процедура ФГДС предусматривает 3-х дневную диету с исключением продуктов, раздражающих пищеварительный тракт (нельзя жареные, копченые, соленые, жирные и острые блюда).
2. Запрещаются газированные напитки, кофе, алкоголь.
3. Диета бесшлаковая на основе легкоусвояемого меню (каши на воде, отварное мясо, йогурты, овощные салаты и т. д.). Последний прием пищи за 12 часов до проведения ФГДС.
4. За 3 часа до начала исследования необходимо отказаться от сигарет.
5. Нельзя принимать лекарства перед эндоскопической процедурой.
6. Прием жидкости прекращают за 1-2 часа до начала исследования.
7. Не разрешается перед процедурой чистить зубы, применять ополаскиватели или освежители для полости рта, а также жевательные резинки.
8. Гастроскопия проводится на голодный желудок.

ФГДС сопровождается введением специального зонда в желудок. Процедура неприятна из-за диспепсических проявлений. Во время проглатывания зонда происходит раздражение рецепторов ротоглотки, и пациент испытывает чувство тошноты и рвотные позывы. Длительность процедуры обычно не превышает 10-15 минут. За это время специалист осматривает слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки, выявляет очаги воспаления (эрозии, язвы, дефекты и т. д.) и проводит забор материала для последующего морфологического исследования.

Для бактериологического посева биоптата на питательную среду потребуется не менее 5 образцов тканей. Их помещают в стерильные пробирки с транспортным раствором. Затем доставляют в бактериологическую лабораторию. Helicobacter pylori выращивают на питательных средах в течение 3-6 дней, иногда дольше (до 12 суток).

Гистологическое исследование мазков-отпечатков, полученных из биоптатов слизистой желудка, является “золотым стандартом” среди инвазивных методов диагностики хеликобактериоза. Участки тканей при ФГДС берут с неповрежденного эпителия (исключают эрозивно-язвенные дефекты). Helicobacter pylori живет на здоровой слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Затем полученные мазки-отпечатки окрашивают (по Романовскому-Гимзе, по Граму или другими красителями). Производят микроскопию. Бактерии обнаруживаются в желудочной слизи, располагаются свободно. Helicobacter pylori имеет характерные для него изогнутые формы: спиралевидную, в виде буквы “S” или распахнутых крыльев птицы.

Вид исследования	Норма	Патология
Бактериологический посев биоптата на Helicobacter pylori	Отрицательный

(рост бактерий не обнаружен) Положительный

(на питательной среде выросли культуры Helicobacter pylori) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (качественный анализ) Отрицательный

(бактерии в мазке отсутствуют) Положительный (обнаружена одна или большее количество бактерий при микроскопии) Гистологическое исследование биоптата на Helicobacter pylori (количественный анализ) Отрицательный (0 бактерий в мазке, инфицирования нет) 3 степени распространения возбудителя (микроскопия на увеличении в 360 раз):

• Слабая обсемененность Helicobacter pylori (+) – в поле зрения не более 20 бактерий
• Умеренная обсемененность Helicobacter pylori (++) – в поле зрения от 20 до 50 микроорганизмов
• Высокая обсемененность Helicobacter pylori (+++) – в поле зрения более 50 микробных тел

Резюме

Таким образом, существует 2 точных диагностических метода выявления хеликобактериоза. Они являются “золотым стандартом” в современной гастроэнтерологии. Первый метод – неинвазивный: дыхательный уреазный тест с раствором мочевины, меченой нерадиоактивным углеродом; второй – инвазивный: ФГДС с биопсией и последующим гистологическим изучением образцов тканей.

Для подтверждения инфицирования Helicobacter pylori требуется не менее 2 различных исследований. Диагноз ставят на основании клинической симптоматики и результатов, полученных в процессе лабораторных и эндоскопических мероприятий.

[youtube.player]