Бактериологические исследования при гнойно септических
Гнойно-септические заболевания – группа недугов, которые провоцируют патогенные бактерии. Неприятная симптоматика чаще всего развивается на фоне ослабленного иммунитета пациента. При попадании в организм бактерии начинают стремительно размножаться. В результате у больного развиваются признаки воспаления, требуется немедленная медицинская помощь. Гнойно-септические инфекции в хирургии занимают особое место. Большая часть экстренных пациентов обращается за помощью именно с такими заболеваниями.
Грамположительные бактерии
Гнойно-септическая инфекция – это большая группа патогенных микроорганизмов, которые в норме могут присутствовать в теле любого человека. Неприятная симптоматика развивается тогда, когда патогенная микрофлора начинает стремительно размножаться на фоне снижения иммунитета пациента.
Наиболее распространенными являются стафилококки. Это условно-патогенные микробы, которые могут вызывать септические, респираторные и кишечные заболевания. Стафилококковой инфекцией могут поражаться любые органы и ткани при снижении защитных сил. Инфекция чаще всего протекает в виде местного гнойного воспалительного процесса. При попадании патогенного микроба в ЖКТ проявляются симптомы отравления. Может приводить к развитию неприятных осложнений стафилококк. Что это за болезнь? По сути, это целый спектр недугов. Стафилококк может вызывать сепсис с повышенным риском летального исхода. Поэтому при появлении любых неприятных симптомов необходимо обращаться за помощью.
Стрептококки – это также потенциально патогенные микроорганизмы, которые могут стремительно размножаться в условиях сниженного иммунитета. Особенно хорошо они растут при повышенном уровне глюкозы в крови. От стрептококковой пневмонии нередко страдают пациенты с сахарным диабетом. Источником инфекции чаще всего выступает больной человек. Однако тесный контакт еще не значит, что придется столкнуться с неприятными симптомами. Большое значение имеет иммунитет.
При стафилококковой инфекции также могут поражаться любые органы и ткани. Нередко на фоне инфицирования развивается сепсис.
Энтерококки – это бактерии, которые относятся к разряду грамположительных. По физиологическим характеристикам они очень схожи со стрептококками. Нередко энтерококки провоцируют заболевания мочевыводящих путей (цистит, уретрит), бактериальный эндокардит. Хотя в норме энтерококки даже полезны. Они принимают участие в поддержании нормальной микрофлоры кишечника, подавляют деятельность других патогенных микроорганизмов.
Грамотрицательные бактерии
Сальмонеллы – это опасные микроорганизмы. Именно они выступают в роли возбудителя брюшного тифа. Это род неспороносных бактерий, имеющих форму палочек. Эти организмы являются грамотрицательными. При попадании в организм человека они вызывают опасные симптомы. Несвоевременно оказанная помощь может привести к смерти пациента.
Множество грамотрицательных бактерий может продолжительное время существовать в организме человека, не давая о себе знать. Любой удар по иммунитету – отличная возможность для условно-патогенной микрофлоры. Такие бактерии начинают стремительно размножаться при переохлаждении, стрессовой ситуации, эмоциональном перенапряжении, переутомлении и т. д.
Существует множество подвидов грамотрицательных бактерий. Основные возбудители ГСИ были рассмотрены выше. Реже встречаются следующие микроорганизмы: псевдомонады, спирохеты, бруцеллы, франциселлы и т. д. Они могут нарушать работу желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой и дыхательной систем. Наиболее опасными являются грамотрицательные палочки и кокки, хламидии, хеликобактерии.
ГСИ окружают человека повсюду. Обезопасить себя от развития опасных заболеваний помогут простые меры профилактики, которые будут описаны ниже.
Лабораторная диагностика
Квалифицированный специалист при появлении у пациента неприятных симптомов может поставить предварительный диагноз. Однако начать терапию не удастся до тех пор, пока не будет выявлен возбудитель, которым спровоцирован патологический процесс. Методы диагностики инфекции существуют разные. При выявлении гнойного воспаления обязательно проводится микробиологическое исследование. Это нужно для того, чтобы определить чувствительность патогенной микрофлоры к выбранному антибиотику. Диагностика проводится с помощью реакции иммунофлюоресценции.
Особым образом проводится забор биологического материала для проведения исследования при гнойных инфекциях кожных покровов. Все манипуляции выполняются в условиях полной стерильности во время операции или оперативного вмешательства. Кожа вокруг пораженной поверхности обрабатывается антисептиком. Из основного очага поражения отбирается отделяемое с помощью шприца.
При подозрении на стрептококковую пневмонию проводится бактериологическое исследование бронхиального секрета. Бактериальный посев при этом важно проводить еще до начала терапии с использованием антибиотиков. Разовая порция мокроты собирается в утреннее время натощак.
Определить, есть ли в организме инфекция, поможет также экспресс-тест на стрептококк. Исследование может быть назначено, если у пациента появился упадок сил, больной часто жалуются на головокружения. От стрептококковой инфекции часто страдают дети дошкольного возраста. Микробиологическое исследование может проводиться, если ребенок страдает от ОРЗ больше пяти раз в год.
Тест на стрептококк выполняется очень просто. Все манипуляции могут проводиться в амбулаторных условиях прямо в кабинете врача. Все, что нужно сделать, - это взять мазок со слизистой рта пациента. Биологический материал далее исследуется в лабораторных условиях с использованием специальных реактивов.
Исследования при заболеваниях ЖКТ
Боли в животе, тошнота, нарушение аппетита – эти симптомы могут свидетельствовать о присутствии инфекции в организме. Чаще всего пациентам в первую очередь назначаются общие анализы мочи, крови и кала. Если уровень условно-патогенных микроорганизмов превышен, это удастся выяснить.
Менингит, хронический гастрит, эндокардит – при всех этих патологиях содержание энтерококка в кале будет превышено. В этом случае актуальным будет лечение с использование антибиотиков. Нередко проблемы выявляются у малышей грудного возраста, которые употребляют искусственное питание.
При кишечных инфекциях выделение возбудителя производится из рвотных и каловых масс. В некоторых случаях бактерии удается выявить в воде, которую используют для промывания желудка. Идентификацию возбудителя удается провести благодаря посеву на питательные среды.
Факторы передачи гнойно-септической инфекции
Условно-патогенная микрофлора в норме присутствует в организме любого человека. Если у одного члена семьи присутствуют симптомы инфекционного процесса, это не значит, что заболеют и остальные. Однако тесный контакт с больным рекомендуется ограничить. Помещение, где находиться пациент, рекомендуется чаще проветривать.
Гораздо больше риск заразиться при внутриполиклиническом инфицировании. Ведущий путь передачи – контактный. Это руки медицинского персонала, текстильные изделия, предметы обстановки. В связи с этим особое внимание уделяется санитарно-гигиеническим мероприятиям. Медицинский персонал должен соблюдать правила личной гигиены – мыть руки с мылом и обрабатывать их антисептиком после контакта с каждым новым пациентом. Важно также исключить занос инфекции в стационар. После приема пациента клеенка на кушетке обрабатывается дезинфицирующим раствором.
Гнойно-септические инфекции (ГСИ) легко передаются контактным способом. В группу риска попадают пациенты с ослабленным иммунитетом, которые находятся в условиях госпиталя. Поэтому особое внимание уделяется чистоте рук медицинского персонала. Гигиенические процедуры необходимо проводить до и после любых манипуляций с больным. Дополнительно следует использовать специальные стерильные перчатки.
Как остановить распространение гнойно-септической инфекции? Гигиенические требования медицинским персоналом должны соблюдаться обязательно. В этом случае удастся значительно сократить стремительное распространение патогенной микрофлоры.
Стрептококковые инфекции
Это целая группа заболеваний, которые развиваются вследствие стремительного размножения стрептококковой флоры. Эти патологии очень опасны своими осложнениями. Минус в том, что стрептококки устойчивы к окружающей среде. Эти микроорганизмы без проблем могут существовать при пониженных и высоких температурах. Погибают они в горячей среде лишь через 30 минут. Под действием химических дезинфекторов (антисептиков) стрептококки погибают лишь через 15 минут.
Носителем стрептококковой инфекции является больной человек. Патогенная микрофлора передается воздушно-капельным путем. Больной выделяет бактерии при кашле, чиханье. Заразиться можно даже во время разговора с переносчиком инфекции. Наиболее заразными являются пациенты, у которых поражены верхние дыхательные пути. Легко заразиться можно ангиной, скарлатиной. При этом на расстоянии более трех метров патогенная микрофлора передаваться уже не будет. Поэтому ограничение контакта с пораженным человеком – лучшая мера профилактики. На пациента можно надеть специальную стерильную маску.
Значительно повышается риск развития гнойных осложнений у пациентов с ожогами, ранениями. Стрептококковая инфекция нередко развивается у больных после операций. Поэтому в условиях стационара особенно важно соблюдать все гигиенические нормы. В группу риска попадают также беременные женщины и новорожденные из-за ослабленного иммунитета.
Стрептококк может проявляться по-разному. Гнойно-септические инфекции часто встречаются на верхних дыхательных путях, слуховом аппарате. Особенно часто такие заболевания встречаются в педиатрии. Дети могут страдать от гнойного отита, гайморита, ангины. Особого внимания заслуживает стрептодермия. При этом заболевании клинические проявления стрептококковой инфекции наблюдаются на коже пациента в виде везикул, пятен, гнойных элементов.
При отсутствии качественного лечения патогенная микрофлора начинает стремительно развиваться на внутренних органах. Особую опасность для жизни представляет стрептококковая пневмония. В этом случае инфекция поражает слизистую оболочку легких. Заболевание может быть следствием недолеченной ОРВИ. Особенно часто с такой патологией встречаются пациенты осенью или весной. В сырой среде патогенные микроорганизмы размножаются быстрее.
Клинически стрептококковая пневмония проявляется сильным кашлем, симптомами общей интоксикации организма, болью в груди. Во время кашля выделяется мокрота с гнойным содержимым. Заболевание может стать причиной серьезных осложнений, угрожающих жизни больного. Поэтому за медицинской помощью необходимо обращаться незамедлительно.
Стафилококковая инфекция
Что это за болезнь - стафилококк? По сути, это не само заболевание, а условно-патогенная микрофлора, провоцирующая развитие неприютных симптомов. Чаще всего стафилококк является причиной развития гнойных поражений кожи. Фурункулез – распространенное заболевание, при котором воспаляется волосяной фолликул, а также окружающая ткань. Заболевание чаще развивается у пациентов, не соблюдающих гигиенические нормы. Также в группу риска попадают ослабленные люди, перенесшие другие опасные заболевания. Фурункулез может развиваться на фоне гриппа, ОРЗ.
Снижение иммунитета может быть обусловлено также хроническими заболеваниями, эндокринными нарушениями, продолжительной гормональной терапией и т. д. Проникновение патогенной микрофлоры в волосяной мешочек может быть вызвано механическим повреждением кожных покровов. В связи с этим любую рану важно правильно обработать антисептиком. Повышается риск развития стафилококковой инфекции на кожи у пациентов с гипергидрозом (повышенным потоотделением). Спровоцировать инфицирование могут и другие дерматологические патологии – экземы, псориаз, дерматит.
В некоторых случаях наличие инфекции в организме может никак не проявляться. Выявить стафилококк в крови удается во время очередного профилактического обследования. Такая ситуация является потенциально опасной и оставлять без внимания ее нельзя. С током крови патогенная микрофлора может распространяться по всему организму. Возрастает риск обширного заражения – сепсиса. При значительном снижении иммунитета инфекция может поражать мозговые оболочки. Менингит – опасное заболевание, которое часто заканчивается летальным исходом.
Стафилококковую инфекцию в запущенной стадии не всегда удается быстро вывести из организма. Антибиотики подбираются с учетом чувствительности патогенной микрофлоры. В некоторых случаях приходится менять препарат по несколько раз, а само лечение длится месяцами.
Брюшной тиф
Это острая кишечная инфекция, которая приводит к развитию опасных симптомов. Поражаются преимущественно лимфатическая система и кишечник. Возбудителем брюшного тифа выступает сальмонелла. Патогенная микрофлора может сохранять жизнеспособность в окружающей среде несколько месяцев. Благоприятной средой для размножения сальмонеллы являются некоторые пищевые продукты – молоко, яйца, мясной фарш. Эта патогенная грамотрицательная палочка легко переносит замораживание. А вот химическая и термическая обработка действует губительно на бактерии.
Как и в случае с другими гнойно-септическими инфекциями, выделение возбудителя происходит с мочой и калом. Источником тифа является больной человек. Выделение возбудителя в окружающую среду происходит уже в конце инкубационного периода, когда у самого пациента еще нет неприятных симптомов. В редких случаях заболевание приобретает хронический характер. При этом человек будет распространять инфекцию на протяжении всей жизни.
Легко передаются в бытовой среде гнойно-септические инфекции. Гигиенические требования следует соблюдать обязательно. Путь заражения сальмонеллой – водный и пищевой. Так, после каждого посещения туалета необходимо тщательно мыть руки с мылом. Заражение может происходить также при употреблении воды, загрязненной фекалиями (речки, озера, другие водоемы). В летне-осенний период отмечается пик заболеваемости.
Инкубационный период недуга не превышает двух недель. Первые неприятные симптомы могут появиться уже через пять дней после заражения. У больного появляется лихорадка, симптомы общей интоксикации организма. Но общим ухудшением самочувствия гнойно-септические инфекции не ограничиваются. Тиф сопровождается побледнением кожных покровов, высыпаниями. У пациента появляются проблемы с дефекацией, внутренние органы увеличиваются.
Брюшной тиф опасен своими осложнениями. У некоторых пациентов наблюдаются кишечные кровотечения, развивается острая анемия. Больной даже с незначительными проявлениями тифа обязательно подлежит госпитализации. Терапия проводится с использованием антибиотиков. Параллельно может быть назначена вакцинация.
Энтерококковая инфекция
Существует более 15 различных видов энтерококков. Эти микроорганизмы не всегда приводят к развитию неприятных симптомов. Однако их уровень в организме следует контролировать. Если выявлены энтерококки в кале, может быть назначено дополнительное обследование. Нередко повышение показателей наблюдается у детей дошкольного возраста. Такая ситуация может быть обусловлена снижением защитных сил организма на фоне переохлаждения, приема лекарственных препаратов. Значительное увеличение числа энтерококков в организме может стать причиной таких заболеваний, как цистит, менингит, отит, гастрит и т. д.
Анализ кала – не единственная методика определения того или иного расстройства. Дополнительно исследуют мочу и кровь пациента. Могут использоваться также инструментальные методики.
Чтобы начать адекватную терапии, изначально необходимо определить вид энтерококка, которым спровоцировано заболевание. Медикамент подбирают с учетом чувствительности микрофлоры, а также индивидуальных особенностей организма пациента, обязательно учитывается возраст.
Профилактика гнойно-септических инфекций
Развитие любых заболеваний легче не допустить, нежели потом проводить терапию. Общая характеристика гнойно-септических инфекций показывает, что пути передачи патогенной микрофлоры могут быть разными. Это и воздушно-капельный путь, и тесный контакт, и кровь. Чтобы исключить развитие эпидемий, должна проводиться как индивидуальная, так и общая профилактика.
Индивидуальная профилактика заключается в ведении здорового образа жизни. Человеку следует укреплять защитные силы организма – правильно питаться, больше времени проводить на свежем воздухе, полноценно отдыхать, отказаться от вредных привычек. Важное значение имеет соблюдение правил личной гигиены и своевременная влажная уборка помещения, в котором большую часть времени проводит человек.
Общественная профилактика включает создание условий, при которых коллективы могут полноценно выполнять свою деятельность. На заводах, в учебных учреждениях, в офисах могут выполнять иммунопрофилактические прививки. При выявлении одного зараженного объявляется карантин, позволяющий ограничить распространение инфекции. Риск развития эпидемий будет снижен, если простые меры профилактики будут соблюдать абсолютно все.
Использование: медицина, иммунология , диагностика сепсиса, остеомиелита и других гнойно-септических заболеваний. Сущность изобретения: кровь смешивают со специфической сывороткой, содержащей антитела против микробов возбудителя гнойных заболеваний, инкубируют в течение 2 ч, центрифугируют, в полученном супернатанте определяют содержание калия и при повышении его концентрации на 7% и более по сравнению с контролем диагносцируют гнойно-септическое заболевание. 2 табл.
РЕСПУБЛИК (sI)s G 01 N 33/549
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) Ф(Й. @ЩИ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4797467/13 (22) 15.01.90 (46) 30,06.93. Бюл. М 24 (71) Киргизский государственный медицинский институт (72) В.Л.Морозов, M,А.Сабодаха и Д.А.Адамбеков (56) Справочник Ilo микробиологическим и вирусологическим методам исследования/Под ред, М.О.Биргера. M.: Медицина, 1982, с. 251. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГНОЙНОСЕПТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии. и может быть использовано в клинической диагностике сепсиса, остеомиелита и других гнойно-септических заболеваний.
Цель изобретения — ускорение способа.
Это выполняется тем, что кровь смешивают со специфической сывороткой, содержащей антитела против микробов возбудителя гнойных заболеваний, инкубируют в течение 2 ч, центрифугируют, в полученном супернатанте определяют содержание калия и при повышении его концентрации на 7 и более по сравнению с контролем диагносцируют гнойно-септическое заболевание.
В отличие от известного способа диагностики путем бактериологического длительного метода исследования предложенный способ является иммунохимическим и основан на взаимодействии микробных антигенов с антителами сыворотки на поверхности клеток крови, отража„,« Ы„„1824583 А1 (57) Использование: медицина, иммунология, диагностика сепсиса, остеомиелита и других гнойно-септических заболеваний, Сущность изобретения: кровь смешивают со специфической сывороткой, содержащей антитела против микробов возбудителя гнойных заболеваний, инкубируют в течение 2 ч, центрифугируют, в полученном супернатанте определяют содержание калия и при повышении его концентрации на 7ф, и более по сравнению с контролем диагносцируют гнойно-септическое заболевание, 2 табл..ющее специфический иммунологический механизм процессов антиген-антитело с высвобождением иэ разрушенных клеток внутриклеточного микроэлемента.
Это позволяет. сократить время диагностики и повысить точность способа.
Способ осуществляют следующим образом: 0,08 мл крови иэ пальца смешивают с
0,02 мл антимикробной сыворотки, разведенной на 5 цитрате натрия в титре, определенном опытным путем, Например, для антистафилококковой сыворотки — титр
Параллельно проводят контрольную пробу: 0,08 мл крови смешивают с 0,02 мл
50 цитрата натрия. Кровь инкубируют 2 часа при 37 С, Во все пробирки добавляют по
0,9 мл изотонического раствора хлористого натрия, смесь взбалтывают и центрифугируют 10 мин, при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость отсасывают и определяют в ней содержание ионов калия пламенной фото1824583
К вЂ”. 100, Таблица 1
Титрование антистафилококковой сыворотки оротньг звед
31,3 метрией или другим чувствительным способом, Результат рассчитывают по формуле где О - содержание калия в опытной пробе:
К вЂ” содержание калия в контрольной пробе.
При значениях результата 7 )(, и выше диагносцируюг гнойно-септическое заболевание.
Способ исг1ытан при диагностике гнойно-септических заболеваний с подтвержденной бактериологически стафилококковой этиологией
В табл, 2 приведены результаты испи тания метода. Для сопоставления метод выполнялся с антигенами стафилококка и кишечной палочки, а также с антисывороткой против кишечной палочки, В результате выявлено, что разница в пределах интервала между средними минимальными и максимальными значениями показателей повреждения клеток при сепсисе и остеомиелите и средними значениями показателей повреждения клеток здоровых людей равна при сепсисе: (14,36 — 4,41) — (2,40 + 0,80)6,75 при остеомиелите; (14,07 — 5,69) — (2,40—
При округлении этих величин = 77,, При испытании данного метода положительные результаты были получены у 7 из 10 больных сепсисом (70 ), Рекция была положительной также у половины больных острым гематогенным остеомиелитом. У здоровых доноров реакция была положительной у 2 иэ 18 человек (11) ). При применении антисыворотки против кишечной палочки получены более низкие значения, что свидетельствует о возможности ориентированного выявления этиологии заболевания.
Пример. Больная Б., 14 лет, поступила в хирургическое отделение 30.09.89 r, с диatнозом: сепсис. Кровь взята на анализ
01,10.89 r, Из крови выявлен Staphylococcus
aureus, По 0,08 мл крови из пальца смешали с
0,02 мл aHтистафилококковой сыворотки, разведенной на 5, цитра е натрия в титре
1;100. Для контроля 0,08 мл крови смешали с 0,0? мл 5;ь цитрата натрия. Инкубирование опытной и кон троя .Itot проб проводили при 37"С в течение 2 часов, 3 1ем B обе пробирки добавили по 0,9 мл изотоническо;о раствора хлористо èo: атрия, смесь взболтали и отцентрифу ; ".>ttaли 10 мин при скорости 1500 об, мин Р надосадочной ,r
1-> кидкосги с помотцью tïtaìottttîto фотоме1ра определили содег;жание ионов калия.
Результаты илам.:ьног; фа1ометрии; контрольнач проба 17,5 опытная пробa — 19,5
?0 показатель повреждения клеток—
Таким образом, вссь процесс постановки реакции и учет полученных данных занимает около 3-х часов, Это сокращает сроки постановки диагноза на 4 суток по сравнению с известным способом лабораторной диагностики гнойно-септических заболеваний, так как отпадает необходимость в посеве крови на питательные среды, получении чистой культуры и ее идентификации Крома тото, ynpощастся:.роведение исследования и умен; шг ютс ° финансовые затраты на один анализ
Формула и.. обретения
Способ дии но."гики гнойно-септических заболеваний пу-ем исследования крови, о .; и ч а ю шийся тем, что исследуемую кровь смешивают со специфической сыво40 роткой. содержащей антитела против возбудителя гнойного заболевания, инкубируют в течение 2 ч, центрифугируют. в полученном супернатанте определяют содержание калия и при превышении et o концентрации на
45 7 ) и более по сравнению с контролем диагносцируют гнойно-септическое заболевание.
П р и м е ч а н и е: 1- результаты пламенной фотометрии, 2- показатель повреждения клеток() Таблица 2
Результаты ускоренного метода диагностики гнойно-септического состояния стафилоккоковой этиологии
Антизшерихи- Антиген кишечозная сыво- ной палочки отка
Бактериологическое исследование – способ проверки биоматериала на наличие
возбудителя инфекционного заболевания. Метод бакпосева позволяет выявить и идентифицировать патогенный микроорганизм даже при относительно малых его концентрациях в тканях. Для этого исследуемые образцы высевают на питательные среды и культивируют для получения визуально видимых колоний возбудителя. Полученные штаммы бактерий типируют и проверяют на устойчивость к антибиотикам.
На заметку! Бактериологические методы исследования уступают по точности иммуноферментному анализу (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР), но в отличие от них, с высокой точностью определяют степень чувствительности выделенных штаммов бактерий к группам антибиотиков. Полученный результат позволяет подобрать максимально эффективное лечение и скорректировать дозы лекарств.
Процедура занимает несколько суток (48-72 часа).
В каких случаях используют бактериологический метод
Исследование проводят для диагностики инфекционных заболеваний с хроническим (реже – острым) течением. Локализация и степень поражения может быть различной. Общие примеры:
- ЗППП и инфекции мочевыделительной системы – хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз и др.;
- кишечные инфекции – дизентерия, брюшной тиф, сальмонеллез;
- хронические поражения органов дыхательной системы – синуситы, тонзиллиты, бронхиты, пневмонии;
- гнойные процессы различной локализации, в том числе гнойничковые поражения кожи. В данном случае определение чувствительности микроорганизма к антибиотикам особенно актуально;
- дисбактериоз слизистых структур – кишечника, половых органов, ротовой полости. Методика позволяет не только выявить патогенных и условно-патогенных возбудителей, но и сделать заключение о составе здоровой микрофлоры;
- сепсис – общее заражение крови.
Последовательность действий и особенности методики
Для проведения бактериологического исследования необходимо выполнить сбор материала и культивировать его на питательных средах с последующей микроскопией полученных штаммов и проверкой чувствительности к антибиотикам.
Биоматериалом для исследования могут служить кровь, моча, ликвор, мокрота, сперма, кал, мазки из глотки, влагалища, уретры, любые другие ткани и жидкости из области инфекционного процесса. Образцы собирают в асептических условиях, помещают в стерильную посуду и в течение 2-х часов доставляют в лабораторию. При необходимости пробы хранят при пониженных температурах.
Культивирование проводят с применением механических или биологических методов. Механический подход с использованием стандартных искусственных сред – наиболее распространенный. В данном случае для высевания образцов используют жидкие и твердые питательные составы. Наиболее распространенные – агар, мясо-пептонный бульон.
Посев материала производят с помощью специальной петли или пастеровской пипетки, растирая полученный образец по поверхности или вводя его в толщу питательной среды. Выделение бактерий производят из чистых культур, которые получают повторным посевом ранее выращенных колоний на новую среду.
Биологические методы подразумевают использование специальных питательных сред, которые учитывают особенности микроорганизма, в частности, чувствительность к некоторым химическим веществам, в том числе антибиотикам. В некоторых случаях применяют метод заражения лабораторных животных или тканевых культур с отслеживанием патологических изменений. Такой подход актуален при крайне незначительном накоплении микроба в тканях человека – в этом случае его выделение посевом на питательных средах не дает результата.
Основной метод бактериологической диагностики – бактериоскопия. Она подразумевает визуальную оценку параметров микроорганизма под микроскопом. Для этого используют фиксированные и нефиксированные препараты.
Нефиксированные препараты позволяют исследовать живые образцы бактерий. Основные методы:
- раздавленная капля – образец придавливают между предметным и покровным стеклами;
- висячая капля – образец помещают в лунку на предметном стекле и герметично накрывают покровным.В качестве среды используют изотонический раствор или расплавленный агар. Методика позволяет наблюдать за живыми микроорганизмами в течение нескольких дней.
Фиксированные препараты используют для окрашивания с подробным изучением морфологических и некоторых биохимических параметров патогенов. Каплю бактериального состава размазывают по предметному стеклу и фиксируют пламенем горелки или специальными химическими составами.
Для определения свойств бактериальных препаратов используют ряд общих и специфических методик:
- микроскопия – определение формы, размеров, окрашивания по Граму;
- биохимические методы – исследование ферментативной способности микроорганизма к расщеплению тех или иных углеводов, аминокислот, метаболитов, в том числе способность к гемолизу, фибринолизу при попадании в кровь живых существ;
- серологические методы идентификации – реакции агглютинации под воздействием специфической сыворотки и другие антигенные свойства;
- биологические методы – заражение лабораторных ждивотных с проверкой патогенности и токсигенности взятых образцов, их устойчивости к антибиотикам.
Только совокупный анализ результатов всех методов диагностики – микроскопических, биохимических, серологических, биологических – дает объективный результат для вынесения точного диагноза.
Расшифровка результатов
Стандартный результат сводится к двум пунктам анализа:
- качественный анализ с определением факта наличия/отсутствия определенного возбудителя;
- количественный анализ с указанием числа микроорганизмов на единицу объема – выражают в КОЕ (колониеобразующие единицы). Чем выше этот показатель, тем сильнее бактериальное поражение организма данным возбудителем.
Внимание! Отрицательный результат является относительным и показывает отсутствие патогенных организмов лишь в отдельно взятой порции материала. Для большей объективности данных требуется повторное обследование.
Дополнительно указывают чувствительность микроорганизмов к основным классам антибактериальных средств – пенициллинам, тетрациклинам, цефалоспоринам, макролидам. Чем выше показатель чувствительности, тем успешнее будет лечение данным антибиотиком.
Читайте также: