Что такое посев на хеликобактер

Патогенная бактерия хеликобактер пилори (Н. pylori) вызывает следующие заболевания:

• хронические гастриты — воспаление слизистой оболочки желудка
• хронические дуодениты — воспаление 12-ти перстстной кишки
• язвенную болезнь желудка (в 70% случаев) и двенадцатиперстной кишки (в 90% случаев)
• хеликобактериозы
• pак желудка
• лимфому желудка

Инфицированы 70% населения, каждый третий!

Постоянное присутствие микроорганизма в желудке сопровождается следующими симптомами:

• боль в области желудка после еды или перед приемом пищи
• периодическая тошнота и даже рвота
• чувство тяжести в желудке
• изжога и привкус кислого во рту
• неприятный запах изо рта
• вздутие кишечника

Данные симптомы не просто снижают качество жизни, заставляют принимать длительное время медикаменты, но и могут привести к раку желудка!

Поэтому правильная диагностика текущей инфекции H.pylori крайне важна!

Бактериологический посев на хеликобактер пилори — это

надежный метод выявления H.pylori в желудке, один из видов инвазивной диагностики.

Для получения материала пациенту проводят фиброгастроскопию — глотается зонд. Во время осмотра слизистой оболочки желудка и 12-ти перстной кишки врач специальными щипцами берет несколько (не менее 5-ти) образцов ткани, каждый из которых помещают в стерильную пробирку с транспортной средой и отправляют в лабораторию. Дальнейшие исследования проводятся в микробиологической лаборатории.

Бак. посев рекомендован

• для подбора наиболее эффективного лечения хеликобактерной инфекции

Бактериологический посев назначаются

• для диагностики острой хеликобактерной инфекции
• определить чувствительность возбудителя к антибактериальным препаратам при безуспешности проведенного ранее лечения

Подготовка пациента к эндоскопии и бак. посеву на хеликобактер пилори

• за 2 недели до не принимать препараты висмута (Де-Нол, Улькавис), ингибиторы протоновой помпы (омепразол, пантопразол, лансопразол), антибиотики (любые)
• за 48 часов не принимать блокаторы H2-гистаминовых рецепторов (фамотидин, ранитидин), за 12 часов — антациды
• не пить алкоголь за 3 дня и не курить за 8 часов до исследования
• в клинику необходимо прийти в утренние часы, натщесерце — после 8 часов без пищи, разрешено пить воду не позднее 1 часа до эндоскопии

Нормальный результат бактериологического посева на хеликобактер пилори

• отрицательно — рост H.pylori на питательных средах не выявлен

Материал для бактериологического посева

• биоптат слизистой оболочки желудка

Материал должен быть сразу же отправлен в микробиологическую лабораторию для немедленного посева с соблюдением условий транспортировки.

Условия культивирования хеликобактер пилори

• микроаэробная атмосфера — концентрация кислорода 3-7%, 5-10% углекислого газа, 0-10% водорода
• кислотность 6-7
• селективные и неселективные питательные среды содержащие кровь (7-10%), циклодекстрин B или яичный желток

Хеликобактер пилори растет на питательных средах медленно, 3-6 дней (до 12-ти). На 7% лизированном кровяном агаре колонии мелкие — 0,5-2 мм, круглые, без гемолиза, полупрозрачные с легким желтоватым оттенком. На кровяном агаре полупрозрачные с бледно-серым оттенком от 0,5 до 1 мм.

Микроскопия колоний H.pylori

• в очень молодых культурах H. pylori выглядят как практически прямые палочки
• спустя 3-5 дней инкубации бактерии становятся плеоморфными, неправильной изогнутой формы, некоторые U-образны
• в старых культурах хеликобактер пилори приобретает дегенеративную коккоидную форму, плохо окрашивается по Грамму

Подтверждает принадлежность к виду хеликобактер пилори резко положительная реакция на уреазу (++++) и положительная на каталазу и оксидазы.

При необходимости исследуют чувствительность к антибиотикам.

В статье представлены результаты бактериологического тестирования 48 штаммов Helicobacter pylori (H. pylori), выделенных от пациентов в Санкт-Петербурге. Антибиотикорезистентность штаммов H. pylori оценивали методом серийных разведений. Среди анализируемы

The article describes the results of bacteriologic testing of 48 Helicobacter pylori (H. pylori) strains taken from the patients in Saint-Petersburg. Antibiotic resistance of H. pylori strains was evaluated by serial breeding method. Among the analysed isolates, 42,5% were resistant to metronidazole, 27,1% — to levofloxacin, 25% — to clarithromycin, 6,3% — to amoxicillin. All the tested strains were sensitive to tetracycline.

Эрадикация H. pylori у инфицированных пациентов, страдающих хроническим гастритом, язвенной болезнью, функциональной диспепсией и другими H. pylori-ассоциированными заболеваниями, является основной стратегией предотвращения развития некардиального рака желудка [1]. В любой клинической ситуации, при которой врач сомневается в необходимости диагностировать инфекцию H. pylori и провести уничтожение микроорганизма, дополнительным и крайне актуальным аргументом в пользу этих мероприятий должен стать профилактический эффект эрадикации относительно возникновения рака желудка, особенно у пациентов с отягощенным наследственным анамнезом [2].

Целью данной работы было получение данных о состоянии первичной антибиотикорезистентности штаммов H. pylori, выделенных от пациентов в Санкт-Петербурге.

Исследование по протоколу SHELF проводилось в Санкт-Петербурге с мая 2013 по июнь 2014 года. Одобрение было получено в центральном и локальном научном этическом комитете в соответствии с принципами Хельсинкской декларации. В исследовании использовались гастробиоптаты пациентов, соответствующих следующим критериям.

Критерии исключения:

1) пациенты, ранее получавшие антимикробную терапию для эрадикации H. pylori;
2) пациенты, получавшие антибиотики из группы макролидов в течение одного года, предшествовавшего данному исследованию;
3) пациенты, участвующие в любых других клинических исследованиях;
4) пациенты, получавшие ингибиторы протонного насоса и препараты висмута в течение двух недель, предшествовавших данному исследованию;
5) больные, принимающие антибактериальную терапию на момент забора материала.

Критерии включения:

1) мужчины и женщины в возрасте от 18 до 65 лет;
2) пациенты с инфекцией H. pylori, подтвержденной быстрым уреазным тестом гастробиоптата, полученного при проведении эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС);
3) решение врача в рамках рутинной клинической практики и диагноза пациента провести ЭГДС с забором биоптата.

В качестве основы питательной среды для выделения и культивирования H. pylori использовался колумбийский агар. Каждый образец биопсии высевался параллельно на две чашки Петри с агаром, содержащим антибиотики в следующих концентрациях: ванкомицин в концентрации 6 мкг/мл, триметоприм, в концентрации 2 мкг/мл (растворяли в спирте) и амфотерицин В (или налидиксовую кислоту) в концентрации 2–10 мкг/мл.

Инкубация посевов осуществлялась в микроаэрофильных условиях при содержании кислорода около 5%. Для этих целей использовались анаэростаты системы GasPac100 c газогенерирующими пакетами типа GasPak (BBL CampyPak Plus Microaerophilic System envelopes with Palladium Catalyst).

На кровяной питательной среде на 5–7 сутки H. pylori формировал мелкие, круглые, гладкие, прозрачные, влажные колонии диаметром около 1 мм. Колонии H. pylori, полученные в результате первичного посева биопсийного материала, использовали для приготовления мазков, окраски их по Граму и постановки уреазного теста.

Решение вопроса о принадлежности выделенной культуры к роду Helicobacter выносили на основании характерной морфологии выделенных колоний, а также набора тестов: морфологии культуры в мазке, окрашенном по Граму, и наличии характерных биохимических свойств (способности к продукции уреазы). Типичные клетки H. pylori при микроскопии имели вид тонких изогнутых нежно-розовых палочек.

Антибиотикорезистентность выделенных штаммов H. pylori изучали, используя метод серийных разведений, который основан на регистрации ингибиции роста микроорганизма на питательном агаре, содержащем определенные концентрации антибиотика. Определяли чувствительность штаммов H. pylori к кларитромицину, амоксициллину, левофлоксацину, метронидазолу и тетрациклину. Рабочие концентрации исследуемых антибактериальных препаратах в агаре были следующими:

• амоксициллин — 0,25; 0,12; 0,06 мкг/мл;
• кларитромицин — 1,0; 0,5; 0,25; 0,12 мкг/мл;
• левофлоксацин — 2,0; 1,0; 0,5 мкг/мл;
• метронидазол — 16; 8; 4 мкг/мл;
• тетрациклин — 2,0; 1,0; 0,5 мкг/мл.

Среды и растворы антибактериальных препаратов готовили непосредственно перед использованием.

На чашки Петри с ростом H. pylori добавляли по 1–2 мл стерильного физиологического раствора и снимали бактериальную массу. Инокулюм наносили бактериологической петлей на поверхность чашки Петри с селективной кровяной средой с определенной концентрацией антибиотика, равномерно распределяя по поверхности. Затем чашки Петри помещали в анаэростат и инкубировали при температуре 37 °С в течение 3–5 суток. После окончания инкубации отмечали чашку с концентрацией антибактериального препарата, вызывающей полное подавление роста микробов. Контроль чистоты роста культуры оценивали по посеву на чашку Петри с селективной кровяной средой без добавления антибиотиков.

Данный метод позволил подразделить штаммы H. pylori на чувствительные и устойчивые [9]. Критерии распределения штаммов по степени чувствительности приведены в табл. 1.

На каждого пациента, гастробиоптат которого использовался в исследовании, заполнялась индивидуальная регистрационная карта (ИРК), которая дублировалась в базе данных Microsoft Access Database и содержала демографические, анамнестические данные, результаты проведенных исследований.

Статистический анализ выполнялся с помощью программного пакета IBM® SPSS® Statistics, версия 21.0.

Демографические и анамнестические показатели анализировались с помощью методов описательной статистики. Для дихотомических показателей резистентности были представлены 95% доверительные интервалы для долей резистентности к тому или иному антибиотику. Подобный статистический анализ проводился в отношении выявления наличия H. pylori и выявления резистентности к антибиотикам.

В исследовании использовались гастробиоптаты 109 пациентов в возрасте от 18 до 64 лет. Возраст, пол и диагноз пациентов представлены в табл. 2.

У пациентов были диагностированы различные заболевания, ассоциированные с H. pylori. Наиболее частой нозологией являлся хронический гастрит — 78,9% (n = 86). Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки (ДПК) диагностирована у 20,2% (n = 22), а язвенная болезнь желудка — у 0,9% (n = 1).

Инфицирование H. pylori было подтверждено у всех пациентов уреазным тестом. Бактериологическим методом микроорганизм выделен лишь у 56 пациентов, что составило 51,4% (95% ДИ: 42,0%, 60,8%). Такой процент отражает технические трудности, связанные с транспортировкой и культивированием микроаэрофильного микроорганизма.

Чувствительность H. pylori к антимикробным препаратам удалось определить у 48 выделенных штаммов. Из-за скудного роста культуры в 8 случаях оценить антибиотикограмму было невозможно.

Таким образом, в анализ резистентности были включены 48 штаммов хеликобактера, выделенных от 48 пациентов. Среди анализируемых изолятов H. pylori штаммов, 17 (42,5%) были резистентны к метронидазолу, 13 (27,1%) — к левофлоксацину, 12 (25%) — к кларитромицину. Кроме того, было выявлено 3 (6,3%) штамма, устойчивых к амоксициллину. Все тестируемые штаммы были чувствительны к тетрациклину. В случаях выявления резистентности к трем и более группам антимикробных препаратов, штамм хеликобактера относили к полирезистентным. В ходе исследования 5 (11,1%) микроорганизмов были полирезистентными (табл. 3).

Двойная резистентность к кларитромицину и метронидазолу обнаружена у 2 (4,4%) изолятов, метронидазолу и левофлоксацину — у 4 (8,3%) микроорганизмов. Все штаммы, резистентные к амоксициллину, были устойчивы к кларитромицину.

Частота встречаемости резистентных штаммов отличалась среди мужчин и женщин, однако данный факт сложно интерпретировать из-за малой выборки (табл. 4).

При анализе частоты резистентности к кларитромицину выявлены различия по нозологиям. Так, у 14 пациентов, страдающих язвенной болезнью, было 5 (35,7%) случаев выделения штаммов H. pylori, резистентных к кларитромицину. В то же время у 34 больных, у которых был диагностирован только хронический гастрит, частота выделения резистентных штаммов к кларитромицину была ниже — 7 (20,6%). Однако этот факт сложно интерпретировать из-за ограниченного числа наблюдений.

Согласно Маастрихтским рекомендациям IV пересмотра, уровень резистентности H. pylori к кларитромицину в популяции является определяющим фактором при выборе схемы эрадикации [10]. Подобно другим патогенам, хеликобактер имеет региональные особенности резистентности. Резистентность напрямую коррелирует с частотой назначения антимикробных препаратов и утвержденными протоколами выбора антибиотиков [11]. Невозможно экстраполировать данные о резистентности, выявленные в одной стране, на другую, в силу значительных региональных различий чувствительности микроорганизмов. Так, резистентность к кларитромицину в Нидерландах составляет всего 5,6%, тогда как резистентность H. pylori к данному антибиотику в Австрии достигает 35,4% [11]. Уровень устойчивости к метронидазолу в Пекине составил 63,9%, а на Юго-Восточном побережье Китая — 95,4% [16, 17]. Для анализа антибиотикорезистентности H. pylori в мире нами были отобраны наиболее масштабные исследования, проводимые с 2000 по 2013 год. Проанализировано 13 исследований, из которых 3 европейских, 5 азиатских, 2 африканских и 3 американских. Более подробно уровень резистентности к антибиотикам H. pylori в различных странах приведен в табл. 5.

При анализе результатов исследований по антибиотикорезистентности H. pylori на территории России обращает на себя внимание рост уровня резистентности H. pylori к кларитромицину. Так, в 1996 г. в г. Москве не было выявлено резистентных штаммов к кларитромицину. Уже в 1999 г. уровень резистентности H. pylori к кларитромицину составил 17,1%, в 2000 г. 16,6%, в 2001 г. 13,8%, а в 2005 г. уже 19,3% [24, 25]. При интерпретации показателей резистентности важно учитывать методику определения чувствительности. Так, при использовании только генотипического метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) возможны сложности в интерпретации результатов. Примером могут служить данные, полученные в Санкт-Петербурге — 39–40% резистентных штаммов по данным ПЦР [26, 27]. В то же время резистентность к кларитромицину при оценке дискодиффузионным методом, который тоже имеет определенные ограничения, составила всего 7,7% [28].

Наибольшую информативность представляют данные о резистентности, полученные методом серийных разведений. На основании тестирования 133 штаммов методом серийных разведений сделан вывод о низкой резистентности в Смоленске в 2010 г. [29]. В нашем исследовании, при использовании сходной технологии тестирования, резистентность составила 25%, что еще раз иллюстрирует межрегиональные различия чувствительности микроорганизмов.

Фенотипический метод определения чувствительности к антибиотикам рекомендован Институтом по клиническим и лабораторным стандартам (CLSI), EUCAST, а также Маастрихтским соглашением IV пересмотра в качестве основного метода определения чувствительности H. pylori к кларитромицину [38]. Культуральный метод является высокоспецифичным тестом, однако характеризуется низкой чувствительностью [39]. Определение чувствительности H. pylori к антибиотикам в нашей стране сопряжено с рядом трудностей. Успех бактериологического выделения H. pylori во многом связан с правильностью отбора биопсийных образцов и соблюдением условий транспортировки материала в лабораторию. Хеликобактер является труднокультивируемым микроорганизмом, что требует не только навыков работы с его чистой культурой, но и четкого соблюдения методики разведения рабочих концентраций исследуемых антибактериальных препаратов. Учитывая объективные сложности, описанные выше, становится понятным отсутствие широко представленных данных об истинном состоянии антибиотикорезистентности в различных регионах нашей страны. Большинство исследователей в своих суждениях об антибиотикорезистентности H. pylori опираются на метод ПЦР как единственную доступную альтернативу бактериологическому методу, который позволяет определить генетические мутации H. pylori и прогнозировать фенотипическую резистентность [7].

Такая стратегия была использована нами для лечения пациентов, гастробиоптаты которых использовались в данном исследовании. Применение стандартной тройной терапии с двойной дозой ингибиторов протонного насоса, усиленной препаратом висмута трикалия дицитрата, привело к уничтожению H. pylori у 93,2% пациентов, несмотря на выявленную высокую резистентность к кларитромицину [44].

На основании проведенного бактериологического исследования антибиотикорезистентности штаммов H. pylori можно сделать следующие выводы и рекомендации:

Полученные данные о резистентности H. pylori в Санкт-Петербурге делают актуальным использование всех возможностей для повышения эффективности стандартного подхода: двойные дозы ингибиторов протонного насоса, увеличение длительности с 7 до 10–14 дней, добавление препаратов висмута и пробиотиков, поиск новых стратегий эрадикации.

Литература

За остальным списком литературы ? обращайтесь в редакцию.

В. И. Симаненков* , 1 , доктор медицинских наук, профессор
Н. В. Захарова*, доктор медицинских наук, профессор
А. Б. Жебрун**, доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН
А. В. Сварваль**, кандидат медицинских наук
И. В. Савилова*
Р. С. Ферман**

* ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И. И. Мечникова, Санкт-Петербург
** НИИ ЭиМ им. Пастера, Санкт-Петербург

Проблемы с желудком доставляют огромный дискомфорт и подчас мешают вести привычный образ жизни. Боли в области живота, тошнота, отрыжка, тяжесть в желудке способны разрушить любые планы и надолго выбить из колеи. Ситуация серьезно осложняется, если такие явления обретают хронический характер. В чем может крыться причина желудочных расстройств и как ее устранить? Давайте в этом разберемся.

Что такое хеликобактер пилори и зачем нужен анализ

Очень часто проблемы с желудком вызывает коварная бактерия — хеликобактер пилори ( Helicobacter pylori ). Она имеет спиралевидную форму, является патогенной бактерией-паразитом, производит множество токсинов, поражающих слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки — именно в этих органах она обитает. Хеликобактер пилори приводит к воспалительным процессам, таким как гастрит, язва и ряду других, появление которых еще не так давно объясняли генетической предрасположенностью и нарушением здорового питания. Доказано, что в ряде случаев гастрит и язва вызваны именно инфицированием этой бактерией. То есть этими заболеваниями, оказывается, можно так же легко заразиться, как и гриппом.

Причем если большинство бактерий гибнет в кислой желудочной среде, то хеликобактер пилори в ней очень даже жизнеспособна. Она легко приспосабливается к агрессивной среде и без особого труда передвигается по стенкам внутренних органов благодаря специальным жгутикам на ее поверхности.

В России распространенность бактерии очень велика — в разных регионах инфицировано от 70 до 90% населения, что значительно выше показателей Европы и США. Это объясняется сравнительно низким уровнем жизни большинства россиян, как следствие — пренебрежение правилами гигиены, проживание в антисанитарных условиях. В Москве, как наиболее развитом городе России, количество инфицированных не превышает 60% (речь идет о зарегистрированных гражданах).

Как правило, поводом для назначения анализа на хеликобактер пилори становятся следующие симптомы:

• Боли в желудке после приема пищи.
• Частая отрыжка.
• Повторяющаяся изжога.
• Затруднение во время глотания пищи.
• Метеоризм и урчание в животе.
• Тошнота и рвота.
• Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
• Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
• Появление крови во время рвоты и дефекации.

Разумеется, перечисленные симптомы вовсе не указывают на инфекцию. Подтвердить или опровергнуть ее присутствие может только лабораторный анализ.

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Точность результатов исследования зависит не только от лаборатории, но и от соблюдения ряда простых правил подготовки к анализу.

Кал собирают в специальный контейнер, купленный в аптеке. Если контейнер будет заполнен на 1/3, этого будет достаточно для анализа. Ни в коем случае нельзя брать кал из унитаза — в биоматериал могут попасть дезинфицирующие средства. Доставить материал в лабораторию для анализа нужно как можно быстрее. Максимальное время его хранения — 10–12 часов при температуре +2…-8 градусов Цельсия.

Накануне анализа следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от алкоголя и жирной пищи. Кровь берут из вены натощак в утренние часы. Сама по себе процедура достаточно безболезненна и длится всего несколько минут. Однако пациенты по-разному ее переносят. Поэтому если организм ослаблен, то сразу после забора крови рекомендуется выпить сладкий чай или съесть кусочек черного шоколада — это поможет избежать головокружения. Чтобы не образовалась гематома на месте ввода иглы, после процедуры руку нужно несколько минут подержать согнутой в локте.

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

• Иммуноферментный анализ. Результаты анализа на антитела готовятся в течение одного дня, не считая дня сдачи анализа. При необходимости возможна срочная подготовка результатов, она займет всего 2–3 часа. В разных лабораториях могут использоваться разные единицы измерения. Одна из наиболее распространенных — Ед/мл.

Результаты трактуются следующим образом:

>1,1 Ед/мл
Высокий риск развития язвенной болезни или язвенная болезнь; высокий риск развития рака желудка.

0,9–1,1 Ед/мл
Рекомендуется повторный анализ через две недели.

Бак­те­рия хе­ли­ко­бак­тер пи­ло­ри — свое­об­раз­ная тем­ная ло­шад­ка, на се­год­няш­ний день ма­ло изу­чен­ная и тем — бо­лее опас­ная. До сих пор оста­ет­ся мно­жест­во от­кры­тых во­про­сов: по­че­му не­ко­то­рые ин­фи­ци­ро­ван­ные лю­ди за­бо­ле­ва­ют яз­вой или гаст­ри­том, а дру­гие — нет; на­сколь­ко при­сут­ст­вие этой бак­те­рии в ор­га­низ­ме уве­ли­чи­ва­ет риск раз­ви­тия ра­ка же­луд­ка? Оче­вид­на не­об­хо­ди­мость раз­ра­бот­ки вак­ци­ны для про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ции, по­иск ан­ти­био­ти­ков на­прав­лен­но­го дейст­вия, уби­ва­ю­щих бак­те­рию, — ведь у не­ко­то­рых лю­дей раз­ви­ва­ет­ся ре­зис­тент­ность к су­щест­ву­ю­щим ви­дам те­ра­пии. Единст­вен­ное, что мы мо­жем на­вер­ня­ка сде­лать во бла­го сво­е­му здо­ровью, — сдать про­фи­лак­ти­чес­кий ана­лиз.

Анализ на Хеликобактер (Helicobacter pylori) назначается при наличии симптомов хронического гастрита и язвы желудка, поскольку именно эта бактерия является возбудителем данных заболеваний. Что это такое, в каких случаях следует проводить исследование, как расшифровывать результаты и как лечить инфекцию?

Анализы на Хеликобактер

Существует несколько способов диагностики HP-инфекции (сокращение НР от Helicobacter pylori), они имеют разную достоверность и отличаются по времени и стоимости проведения. Какой из методов быстрее и дешевле, а какой точнее покажет результат?

Методы лабораторной диагностики инфекции хеликобактер пилори делятся на инвазивные и неинвазивные. Инвазивные предполагают проведение эндоскопии с взятием биоматериала (биопсия) и последующим цитологическим исследованием.

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить фрагменты ДНК возбудителя хеликобактериоза. В качестве исследуемого биоматериала используют каловые массы. В ходе анализа из биоматериала выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно дублируется на специальном устройстве – амплификаторе. Когда количество ДНК оказывается достаточным для дальнейшей детекции, выясняют, обнаружен ли в пробе геномный фрагмент, характерный для Helicobacter pylori. Положительный результат означает наличие хеликобактерной инфекции. Анализ на ПЦР позволяет подтвердить присутствие чужеродного микроорганизма в организме с точностью до 90-95%. В норме генетический материал Helicobacter pylori в исследуемом материале не обнаруживается.

Иммунологические методы не определяют возбудителя напрямую, а выявляют антитела к характерным для него антигенам.

Инфекцию, вызванную Helicobacter pylori, связывают с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка (аденокарциномой, В-клеточной лимфомой).

Основным методом анализа крови на антитела является иммуноферментный анализ (ИФА) – количественное определение уровня антител классов IgA, IgM и IgG к Helicobacter pylori. ИФА также позволяет оценить эффективность терапии инфекции. Так, выработка антитела IgM к Helicobacter pylori – маркер острой стадии процесса. Через несколько недель после первичного инфицирования IgM исчезают. При прогрессировании заболевания и переходе его в хроническую форму обнаруживаются антитела класса IgA, затем IgG. Высокий уровень их концентрации сохраняются в крови в течение длительного времени. Чувствительность метода составляет 87-98%.

Иммуноблотинг существенно уступает другим иммунологическим методам как по стоимости, так и по трудоемкости выполнения анализа, однако только с его помощью можно, имея лишь сыворотку крови больного, получить данные о свойствах штамма Helicobacter pylori (на основании того, продуцирует ли он специфические антигены CagA и VacA).

Дыхательный тест – определение в выдыхаемом пациентом воздухе продуктов гидролиза мочевины уреазой Н.pylori. Исследование основано на способности бактерии продуцировать гидролитический фермент уреазу. В пищеварительном тракте уреаза разлагает мочевину до углекислого газа и аммиака. Углекислый газ транспортируется в легкие и выделяется с воздухом в процессе дыхания, его количество фиксируется специальным прибором для уреазного анализа. Дыхательные тесты на хеликобактер подразделяют на углеродные и аммиачные.

Микробиологические и бактериологические методы используются реже, так как для их проведения нужно больше времени. Они предполагают бактериологический посев кала, выделение культуры возбудителя и определение его чувствительности к антибиотикам. В ходе исследования кал помещают в ростовую среду, благоприятную для выращивания колоний хеликобактера. Спустя определенный срок культуру изучают под микроскопом, отмечая количество колоний и их свойства.

Основные признаки, которые могут указывать на инфицирование Хеликобактер пилори, являются типичными симптомами заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Решение о выборе метода принимает лечащий врач. При выявлении у пациента НР-инфекции может быть целесообразным обследование членов семьи больного.

Подготовка к анализу

Для сдачи анализа на Хеликобактер не требуется специальной подготовки, но важно соблюсти общие правила, так как только правильно собранный материал гарантирует достоверность результата. Как правило, все анализы сдаются натощак, то есть после как минимум восьми часов воздержания от пищи. Перед исследованием следует исключить прием алкоголя, курение, употребление жирной и жареной пищи. При самостоятельном сборе материала, например, для анализа кала, важно избегать его загрязнения, так как любые посторонние включения (например, моющие средства, которыми чистился унитаз или подкладное судно) могут исказить результат.

Важное правило при сдаче анализов: в течение месяца перед забором материала пациент не должен принимать антибиотики и препараты, стимулирующие перистальтику желудка.

Как происходит расшифровка результатов

Хеликобактер пилори и ее особенности

До 70-х годов прошлого века считалось, что любые бактерии, попадающие в желудок, гибнут под воздействием соляной кислоты, лизоцима и иммуноглобулина. В 1989 г. исследователи сумели выделить в чистом виде и культивировать спиралевидный микроорганизм со слизистой оболочки желудка больного, страдающего гастритом – бактерию Helicobacter pylori.

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

Заражение бактерией обычно происходит при контакте с грязными поверхностями, через слюну, воздушно-капельным способом, в результате контакта с инфицированным больным, несоблюдения правил личной гигиены, употребления в пищу недостаточно чистых овощей и фруктов, воды из загрязненных источников.

После попадания в организм бактерия передвигается по слизистой оболочке желудка с помощью жгутиков и закрепляется на его стенках. Микроорганизм вырабатывает вещества, разрушающие клетки эпителия слизистой оболочки желудка, выделяет токсины, вызывающие иммунные заболевания. Пытаясь защититься от паразитирующего микроорганизма, желудок увеличивает секрецию соляной кислоты и веществ, разрушающих его стенки. Однако бактерия способна длительное время выживать в кислой среде благодаря выделяемому ею ферменту – уреазе, которая защищает микроорганизм от воздействия желудочного сока.

Появление клинических симптомов зависит от состояния иммунитета. Среди инфицированных людей встречается и бессимптомное носительство, так как микроб способен к длительному паразитированию без выраженных клинических проявлений и конфликтов с иммунной системой хозяина. В этом случае бактерия принимает неактивную форму, увеличивая активность при появлении благоприятных для нее условий. Однако даже в неактивном состоянии патогенный микроорганизм способен вызывать повреждение стенок желудка и двенадцатиперстной кишки. Развивающиеся воспалительные изменения способны привести к атрофии слизистой оболочки и развитию злокачественных новообразований.

Инфекцию, вызванную Helicobacter pylori, связывают с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка (аденокарциномой, В-клеточной лимфомой).

Симптомы инфекции Helicobacter pylori

Основные признаки, которые могут указывать на инфицирование Хеликобактер пилори, являются типичными симптомами заболеваний желудочно-кишечного тракта:

• боли в эпигастральной области;
• неприятный запах изо рта;
• кислая отрыжка;
• изжога, тошнота, рвота;
• потеря аппетита;
• чувство тяжести после приема пищи;
• повышенное газообразование;
• длительные запоры или жидкий стул, а также их чередование.

Видео с YouTube по теме статьи: