Иммунохроматографический экспресс-тест на туляремию
Диагностические препараты, тест-системы, используемые при проведении лабораторной диагностики туляремии
Наименование препарата или тест-системы
Номер регистрационного удостоверения
Набор реагентов. Иммуноглобулины диагностические флюоресцирующие туляремийные сухие
Филиал "Медгамал" ФГБУ
"НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи"
123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18
Тел.: (499)193-30-50; 190-44-59
Набор реагентов. Альбумин бычий или бараний, меченный родамином, сухой
Филиал "Медгамал" ФГБУ "НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи" Минздравсоцразвития России
123098, г. Москва,
Тел.: (499)193-30-50; 190-44-59
Набор реагентов. Тест-система диагностическая для выявления возбудителя туляремии в иммуноферментном анализе (ИФА) "ИФА-Тул-СтавНИПЧИ"
355035, г. Ставрополь, ул. Советская, 13
Тел./факс: (6522) 26-03-12
Набор реагентов для иммунохроматографического экспресс-выявления и идентификации возбудителя туляремии (ИХ-тест F. Tularensis)
142279, Московская область, Серпуховский район, п. Оболенск
Тел./факс: (4967) 36-00-10
Аллерген туляремийный жидкий (Тулярин), суспензия для накожного скарификационного нанесения
ФГУП "НПО "Микроген"
127473, г. Москва, 2-й Волконский пер., 10, тел. 495,790-77-73,
644080, Омск, пр. Мира, 7
Предприятие по производству бактерийных препаратов тел. (3812) 65-14-63
Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровяно-капельной реакции агглютинации
ФГУП "НПО "Микроген" 127473, г. Москва, 2-й Волконский пер., 10,
644080, Омск, пр. Мира, 7
Предприятие по производству бактерийных препаратов тел. (3812) 65-14-63
Незарегистрированные и разрабатываемые препараты
(используются лабораториями территориального и регионального уровней только после регистрации)
Сыворотка диагностическая туляремийная сухая для РА, лиофилизат для микробиологических целей
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Тел./факс: (3952) 22-01-40
Набор реагентов для определения возбудителя туляремии Francisella tularensis в реакции латекс-агглютинации
Прошел приемочно-технические испытания в аккредитованном Росздравнадзором испытательном центре
142279, Московская область, Серпуховский район, п. Оболенск
Тел./факс: (4967) 36-00-10
Набор реагентов. Тест-система иммуно-ферментная магноиммуносорбентная для выявления возбудителя туляремии моноклональная
Прошел приемочно-технические испытания в аккредитованном Росздравнадзором испытательном центре
142279, Московская область, Серпуховский район, п. Оболенск
Тел./факс: (4967) 36-00-10,
ФКУЗ СтавНИПЧИ 355035, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15
Тел./факс: (8652) 26-40-39
Иммуномагнитная латексная тест-система на туляремию
Прошла приемочно-технические испытания в аккредитованном Росздравнадзором испытательном центре
ФБУН ГНЦ ПМБ 142279, Московская область, Серпуховский район, п. Оболенск
Тел./факс: (4967) 36-00-10
Диагностикум туляремийный цветной сухой для РА и МРА
664047, г. Иркутск, ул. Трилиссера, 78
Тел./факс: (3952) 22-01-35
Диагностикум эритроцитарный туляремийный антигенный жидкий
ФКУЗ СтавНИПЧИ 355035, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15
Тел./факс: (8652) 26-40-39
Диагностикум эритроцитарный туляремийный иммуноглобулиновый жидкий
355035, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15
Тел./факс: (8652) 26-40-39
Тест-система для выявления ДНК Francisella tularensis методом полимеразной цепной реакции (ГенТул)
ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб" 410005, г. Саратов, ул. Университетская, д. 46
Тел.: (8452) 26-21-31
Факс: (8452) 51-52-12
Набор реагентов для выявления ДНК Francisella tularensis методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени (Ген Francisella tularensis - РГФ)
ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"
410005, г. Саратов, ул. Университетская, д. 46
Тел.: (8452) 26-21-31
Факс: (8452) 51-52-12
Набор реагентов для выявления ДНК Francisella tularensis методом полимеразной цепной реакции с электрофоретическим учетом результатов (Ген Francisella tularensis - РЭФ)
ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"
410005, г. Саратов, ул. Университетская, д. 46
Тел.: (8452) 26-21-31
Факс: (8452) 51-52-12
Тест-система для одновременной детекции ДНК возбудителей сибирской язвы, чумы, туляремии методом мультиплексной полимеразной цепной реакции
ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб" 410005, г. Саратов, ул. Университетская, д. 46
Тел.: (8452) 26-21-31
Факс: (8452) 51-52-12
Тест-система для детекции и характеристики возбудителя туляремии методом мультиплексной полимеразной реакции
ФКУЗ РосНИПЧИ "Микроб"
410005, г. Саратов, ул. Университетская, д. 46
Тел.: (8452) 26-21-31
Факс: (8452) 51-52-12
| > Химические реактивы, используемые при проведении лабораторной диагностики туляремии |
| Содержание Методические указания МУК 4.2.2939-11 "Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий. |
Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
. Rely® H. Pylori Bacterium Rapid Test качественно обнаруживает бактерию H. Pylori в цельной крови, сыворотке или плазме в течение 10 минут. Экспресс-тест RELY® H. pylori от EKF Diagnostics помогает свести к минимуму использование .
. RELY Mono быстро и надежно обнаруживает инфекционный мононуклеоз. Rely® Mono Rapid Test - это простой, быстрый и экономичный тест на инфекционный мононуклеоз, иногда называемый мононуклеоз или железистая лихорадка. Раннее .
. Fassisi Giardia - это иммунохроматографический экспресс-тест, который выявляет поверхностные антигены кист и трофоцитов Giardia. Тест обнаруживает болезнетворные микроорганизмы в течение нескольких минут. Кроме того, Fassisi GiarDia может .
. Fassisi BoDia - это иммунохроматографический экспресс-тест, который проверяет фекалии телят одновременно на наличие четырех возбудителей диареи: ротавируса, коронавируса, кишечной палочки K99 и криптопридии, чтобы можно было легко обнаружить, .
. Fassisi Bovine lgG является надежным методом проверки успешности пассивного переноса бычьих пигментов от матери животного к скоту. Тест может быть использован с сывороткой, плазмой и цельной кровью и может быть использован непосредственно .
. Экспресс-тестирование ProDetectTM Fluid A/B & RSV позволяет качественно обнаружить наличие респираторного синцициального вируса, антигенов гриппа А и В в образцах носоглоточного тампона или аспирата носа и получить результаты в течение 15 минут. .
. Antigen Rapid Test - это быстрый иммунохроматографический тест для визуального скрининга антигена денге NS1 в цельной крови, сыворотке или плазме человека, который помогает в диагностике инфекции денге. ProDetectTM Dengue .
. Быстрый иммунохроматографический тест ProDetectTM Dengue IgG/IgM - это быстрый иммунохроматографический тест для визуального скрининга антител денге IgG/IgM в цельной крови, сыворотке или плазме человека, который помогает в диагностике .
. Быстрый тест на качественное обнаружение антител IgG и IgM до 2019-nCov в образцах "Целая кровь" с палочкой пальца человека. Только для профессиональной диагностики в пробирке. Кассета для экспресс-тестирования IgG/IgM 2019-nCOV представляет .
. (Тест на котинин) (Код продукта: DCT-114). Быстрый тест для качественного определения Котинина (метаболита никотина) с помощью мочи. Только для определения статуса курильщика. Не предназначен для диагностического медицинского использования. .
. Кассета быстрого теста Legionella pneumophila Rapid Test Cassette (Моча) является диагностическим тестом in vitro, основанным на иммунохроматографическом анализе. Предназначен для обнаружения растворимого антигена из .
. Комплект для анализа на антитела Treponema Pallidum (TP) Коллоидным методом золота Основываясь на на нанометрической коллоидной иммунной хроматографии золота, наборы используют метод двойного антигена сэндвич для обнаружения антител .
. Основываясь на на нанометрической коллоидной иммунной хроматографии золота, наборы используют метод двойного антигена сэндвич для обнаружения вируса иммунодефицита человека Антитела в образцах сыворотки или плазмы крови Простота эксплуатации, .
. Набор для анализа на антитела вируса гепатита С (ВГС) Коллоидным методом золота Основываясь на на нанометрической коллоидной иммунной хроматографии золота, наборы используют метод двойного антигена сэндвич для обнаружения антител вируса .
. Oral-AQ доказал свою надежность из года в год с момента своего дебюта более десяти лет назад. Благодаря своему эффективному дизайну, Oral-AQ способен показать результаты за 5-10 минут, и поставляется со встроенным стаканом для удержания .
. Oral-AQ 5 - это устройство быстрого скрининга для выявления множества наркотиков, содержащихся в человеческой слюне, с хорошо сбалансированным низким отсечением Амфетамины 50 [нг/мл] Опиаты* 25 [нг/мл] Кокаин / Бензоилэкгонин 25 [нг/мл] Метамфетамин .
. ToxWipe™-Oral 6+ - это устройство быстрого скрининга для обнаружения множества наркотических веществ в человеческой слюне с хорошо сбалансированными низкими отсечениями и доступными опциями. Выбирайте между версиями бензодиазепинов или .
. Тест на собачью аллергию Набор MyCare для лечения аллергии состоит из быстрых и простых тестов, которые с помощью капли крови отпечатка пальца приводят к обнаружению специальных IgE антител против эпителия и шерсти собаки Отрицательный .
. Кассета DOA Кассета-1 для испытания лекарственных средств для мочи Instant-View® Benzodiazepine Анализ мочи на содержание бензодиазепинов Instant-View® Benzodiazepine наркотиков представляет собой одноэтапный тест бокового потока, предназначенный .
Что представляет собой иммунохроматографический анализ (ИХА)? Разберемся подробнее в этом вопросе.
ИХА – иммунохимический способ анализа, который основан на методе тонкослойной хроматографии. Он включает реакцию между соответствующим антителом и антигеном в биологических материалах. Осуществляется посредством особых тест-полосок, тест-кассет или панелей. ИХА – это экспресс-тест.
Сущность данного метода исследования
Действие его основывается на том, что при погружении в биологическую жидкость (либо другой жидкий образец) теста она начинает двигаться вдоль полоски по методу тонкослойной хроматографии. Движутся вместе с ней нанесенные на нее специфические меченые антитела, которые связываются аффинно с анализируемым компонентом.
Различаются два формата анализа: прямой и конкурентный метод.
Прямой метод
В формате сэндвичного (прямого) иммунохроматографического анализа крови используется конъюгат антитела-метки, который наносится для конъюгата на мембрану. Иммобилизованные антитела на полоске, обладающие конкретным аналитом, на контрольной линии – антитела антивидовые, специфические к антителам первичным.
Прямой ИХА применяется для определения возбудителей инфекционных патологий, вирусов – высокомолекулярных соединений, включая разные гормоны, ВИЧ.
Конкурентный метод исследования
Способ конкурентного иммунохроматографического анализа применяется для установления низкомолекулярных соединений. Основан он на конкуренции иммобилизованного конъюгата аналит и аналита: носитель-белок за ограниченное число центров связывания периферических антител, которые содержатся в конъюгате Ат-метка. Когда наносится образец, содержащий аналит, то последний связывается на мембране с конъюгатом с конъюгатом Ат-метка. Иммунокомплекс в дальнейшем проходит через тестовую зону, в которой иммобилизуется конъюгат аналит, то есть белок-носитель.
С этим конъюгатом не может связаться иммунокомплекс из-за стерических сложностей: низкомолекулярные соединения чаще всего обладают одной антигенной детерминантой, таким образом, у иммуноглобулинов есть один центр связи с антигеном, который уже занят до этого аналитом. Иммунный комплекс впоследствии связывается антивидовыми иммуноглобулинами, которые находятся на контрольной линии. Если в тестовой области отсутствует окрашенная полоса и есть окраска в контрольной зоне, это говорит о том, что содержание определяемого компонента в исследуемом образце выше порогового значения для такого теста. Если в аналите отсутствует анализируемое вещество в образце, то происходит связь конъюгата Ат-метка с конъюгатом Аг: носитель-белок, иммобилизованный в области тестовой линии. Ат-метка свободный конъюгат попадает в сферу контрольной линии, где связывается с антивидовыми антителами. Если есть две окрашенные линии (контрольная и тестовая), то можно говорить об отрицательном результате теста.
Метод конкурентного ИХА применяется для определения низкомолекулярных соединений, включая тканевые экстракты.
Преимущество такого способа – легкость и быстрота использования, возможность применения неприборных методов ИХА с оценкой результата визуально. Не требуется дополнительное оборудование, и анализ может провести человек без медицинского образования в любое время.
Какие применяются метки в ИХА?
В иммунохроматографическом анализе в качестве меток применяются разные частицы и вещества.
- Красители (частицы крашеного латекса, или наночастицы углерода, или коллоидного золота). Такой вариант позволяет визуально отслеживать результат или определить колориметрическим прибором. Применение красящих меток, которые присоединяются к носителю, позволяет делать мультианализ, где разноцветные линии соответствуют разным аналитам. Используемой меткой чаще всего выступают наночастицы золота коллоидного.
- Связанные ковалентно с латексными частицами биолюминесцентные, фосфоресцентные и флуоресцентные метки. Применяются лишь в приборных способах ИХА, в которых регистрируется результат особым ридером. Наиболее распространенными являются флуоресцентные метки.
- Парамагнитные метки, закрепленные на латексных частицах. Метод применяется в ИХА с использованием приборов, которые регистрируют силу магнитного поля.
- Липосомы, используемые в качестве носителей разных меток (электроактивных, ферментативных, флуоресцентных, красящих и т. д.) Это новое направление среди разновидностей анализа.
- Ферментные метки, применяемые по принципу ИФА. Регистрация реакции проводится посредством окрашивания субстратов. В итоге получается визуальный результат, либо считывается ридером.
Преимущества данного метода исследования
Главными преимуществами применения метода иммунохроматографического анализа становятся:
- Удобство и простота – позволяет получить результат (первичное представление и анализ причины болезни) без специальных навыков и оборудования.
- Надежность – достоверность тестов достигает 99,8 %, каждый тест при этом имеет внутренний встроенный контроль.
- Анонимность – это особенно важно при определении болезней, передаваемых половым путем, прочих инфекционных болезней, а также установлении употребления наркотических веществ.
- Экономичность – приобрести тест может каждый, экономится время на проведение анализа.
- Независимость – не нуждается в предварительной консультации и рецепте врача.
Тест на наркотики как проводится: особенности и недостатки ИХА-метода
Самой популярной услугой становится анализ мочи на наркотики посредством метода иммунохроматографического анализа. Это позволяет исследовать мочу на 14 видов нарковеществ.
Иммунохроматографический анализ на наркотики также считается экспресс-методом диагностики. Результат теста можно узнать спустя 15 минут. Для проведения данного исследования используют особые тест-полоски, которые пропитаны веществами-индикаторами. Если в моче имеются следы наркотического вещества, цвет полоски меняется. Основной недостаток такого анализа – невозможность определить, какова концентрация вещества и степень наркотического опьянения, таким образом, результаты иммунохроматографического анализа в качестве доказательства в суде использовать не получится.
Каков результат такого анализа?
Если на индикаторах появились две розовые полосы, то делается заключение, что в моче не содержится наркотик, или же его концентрация недостаточна для определения иммунохроматографическим методом. При возникновении одной розовой полосы можно говорить о наличии наркотического вещества: марихуаны, производных эфедрона, опиатов, производных барбитуровой кислоты, амфетаминов, кокаина, фенциклидина, бензодиазепинов, экстази.
Какие можно сделать выводы?
Иммунохроматографический анализ (экспресс-тест) является эффективным средством диагностики, он позволяет визуально на протяжении нескольких минут выявить и оценить концентрацию антигенов, гормонов, антител и других диагностически важных компонентов в человеческом организме. Экспресс-тесты имеют высокую степень точности и чувствительности, обнаруживается более ста видов болезней, а также весь спектр наркотических веществ, и достоверность анализа очень высокая.
- Форма выпуска: набор / 10 исследований
- Назначение: тест иммунохроматографический для выявления антигенов ротавируса в кале
Инструкция по применению
Тест иммунохроматографический для выявления ротавируса в кале
Регистрационное удостоверение: №ФСР 2012/13624 от 29.06.2012
Ротавирус вызывает гастроэнтерит у детей и подростков, реже – у взрослых. Ротавирус передается фекально-оральным путем. Основные симптомы вирусного гастроэнтерита – водянистая диарея, рвота, головная боль, повышение температуры, боли в желудке. Как правило, симптомы проявляются на 1-2 день после инфицирования и продолжаются 3 дня.
Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце ротавируса он вступает в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против ротавируса, меченными окрашенными частицами, и продолжает движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса.
В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале ротавируса.
В том случае, если в анализируемом образце присутствует ротавирус, на тест-полоске образуются две параллельные окрашенные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце ротавируса на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.
- контейнеры для сбора образцов кала;
- одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
- часы или таймер.
Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.
Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в первые 1-2 дня после появления симптомов, т.к. спустя 5-7 дней после инфицирования количество ротавируса значительно уменьшается.
Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже.
Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.
Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.
1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца. Для этого ввести стержень в 2 разные зоны образца, собрав примерно 100 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 100 мкл с помощью пипетки. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).
2. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).
3. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.
6. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.
Мифы о вакцинации
В последние годы в мире складывается неоднозначное отношение к прививкам. Несмотря на то, что поголовная вакцинация против некоторых заболеваний привела к практически полному их исчезновению, ряды противников обязательных прививок растут. Этому способствует широкое распространение заблуждений, касающихся вакцинации.
Неизвестная инфекция — главная опасность
Кишечные инфекции, вал клещевых энцефалитов и южные инфекции, привезенные россиянами из отпусков,— таковы медицинские итоги лета.
Один из самых именитых инфекционистов России академик Виктор Малеев рассказал о наших самых маленьких, но от этого не менее опасных врагах.
Прививки для детей от рождения до 7 лет: рекомендации на 2017 год
Национальный календарь профилактических прививок включает в себя далеко не самый полный перечень вакцин, существующих в мире. При его составлении учитывается великое множество факторов, и далеко не последнюю роль.
Антипрививочники меняют свои убеждения
Большая часть студентов-антипрививочников, интервьюировавших людей с заболеваниями, которые можно было предупредить вакцинацией, изменила свою позицию на провакцинаторскую. В целом, 75% учащихся, выступавших против прививок, поменяли свое отношение к вакцинации, причем 50% полностью перешли в лагерь ее сторонников.
Комплексный ответ простуде и гриппу
С наступлением холодного сезона ежегодно повышается заболеваемость острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ), гриппом и другими инфекциями дыхательных путей, на пике холодов приобретая масштабы эпидемии.
Иммунохроматографический анализ (ИХА) — это иммунохимиче- ский метод анализа, основанный на принципе тонкослойной хроматографии и включающий реакцию между антигеном и соответствующим ему антителом в биологических материалах. В зависимости от типа используемой метки и условий постановки теста иммунный анализ обозначается как иммуноферментный (ИФА), радиоиммунный (РИА), иммунофлуоресцентный и др. [1] Особенно важно, что он дает возможность выявить компоненты в низких и очень низких концентрациях. Ученые добились максимального упрощения процедуры проведения ряда диагностических анализов, которые в состоянии провести даже человек, не обладающий высоким уровнем требуемых специальных знаний, — для этого разработаны специальные диагностические экспресс-тесты.
Экспресс-тесты обычно представляют собой пропитанные соответствующими реактивами полоски бумаги или другого материала и могут выпускаться также размещенными в пластиковых панелях или кассетах (рис. 8.14). Такие полоски после нанесения на них капли жидкого субстрата (крови, мочи или водной вытяжки (смыва) с исследуемого объекта, окрашиваются, сигнализируя о наличии гемоглобина (наличие крови), следов спермы, возбудителя заболевания.
Рис. 8.14. Пластиковая кассета с углублением для помещения на тест-полоску капли испытуемого образца и окном для прочтения
Полезны тест-полоски и в тех случаях, когда проверяется подозрение на употребление человеком наркотиков.
В основе действия тест-полосок лежит, в частности, иммунофер- ментный метод анализа. На полоски нанесены специальные антитела к диагностируемому объекту (наркотикам, вирусам, бактериям). Принцип действия состоит в том, что при погружении тест-полоски в биологическую жидкость (или другой жидкий образец) она начинает мигрировать вдоль полоски по принципу тонкослойной хроматографии. Вместе с ней движутся нанесенные на нижнюю часть тест-по- лоски меченые специфические антитела, которые связываются с анализируемым веществом (рис. 8.15).
Если в крови или моче находится сам выявляемый объект, происходит реакция и полоска окрашивается: на ней появляется один или несколько поперечных штрихов, значение которых расшифровывается в соответствии с прилагаемой к тест-набору инструкцией. Метод нашел широкое применение в судебно-биологических исследованиях благодаря относительной простоте и высокой чувствительности.
В медицинских целях также используют тест-полоски для массовой диагностики инфекционных заболеваний, для выявления беременности и более десятка болезней. Среди них сахарный диабет, гонорея, хламидиоз, сифилис, ВИЧ, гепатит, туберкулез, язва желудка, микроинфаркт, рак предстательной железы. Конечно, такое исследование следует считать предварительным; тест-полоски не столь точны, как лабораторные анализы, проводимые в стационарных условиях. Но все равно они способны диагностировать с 80% достоверностью. А если результат повторного анализа дублирует первоначальный, то ему вполне можно доверять.
Уникальные достоинства метода состоят в быстроте (результаты готовы уже через 2 минуты) и легкости применения тест-полосок, его характеризует высокая воспроизводимость получаемых данных при
Рис. 8.15. Схема работы тест-полоски (Lateral_Flow_Assay.jpg)
повторном тестировании (достоверность результатов). Кроме того, следует отметить возможность использования неприборных форматов ИХА с визуальной оценкой полученного результата. В этом случае не требуется использование сложного оборудования и анализ может быть проведен неспециалистом в любых условиях, в том числе полевых.
По сравнению с другими методами иммунный метод анализа менее трудоемок и, поскольку менее продолжителен по времени, удобен для выполнения большого числа однотипных анализов. Здесь сочетается уникальная специфичность иммунохимического анализа с высокой чувствительностью определения метки. Чувствительность метода (под чувствительностью подразумевают минимальное выявляемое количество исследуемого вещества) очень высока. В отдельных случаях метод позволяет выявлять в образце единичные молекулы. Средняя же его чувствительность (10 -9 —10 -12 моль) сопоставима с чувствительностью газожидкостной хроматографии. Существуют также приборные полуколичественные и количественные форматы иммунного анализа.
Рассмотрим применение экспресс-тестов.
Тест на гемоглобин (на наличие крови) (например, фирмы SERATEC(r) HemDirect) применяется в судебной медицине для быстрого обнаружения следов крови человека. Метод обнаружения основан на подтверждении наличия гемоглобина человека (ИНЬ) в исследуемой пробе путем иммунохимической реакции.
Для проведения теста нужно взять небольшое количество пробного материала и поместить в пробирку с 1 мл физиологического раствора — 0,9% водный раствор хлорида натрия (NaCl). Пробирку основательно взбалтывают, добиваясь частичного растворения пробного материала в растворе. Затем используют жидкую часть препарата.
О положительном результате тестирования позволяет говорить появление особой полосы результата, легко определяемой визуальным способом. Использование теста на практике не требует каких-либо подготовительных навыков. Тест может быть проведен непосредственно на месте преступления.
Пример определения замытых следов крови на сиденье автотранспортного средства.
Нити увлажненной марли, которой протерли место на сиденье, проверяемое на наличие крови, помещали в пластиковую пробирку с буферным раствором. Пробирку взбалтывали для экстрагирования пробного материала в растворе. Перед проведением теста устанавливали температуру кассеты и пробы на уровне комнатной. Затем добавляли три капли исследуемой пробы в округлое углубление на кассете. Результаты теста на гемоглобин человека оценивали после 5 минут.
В окне результатов на кассете наблюдали появление двух красноватых полос: одна в области контроля (С), другая в области результата теста (Т), свидетельствующая о наличии гемоглобина человека в исследуемой пробе. Таким образом, в следах с сиденья автомашины выявлена кровь человека.
Отрицательный результат (гемоглобин человека не обнаружен или его концентрация ниже минимального уровня диапазона измерения) — появление одной красноватой полосы в области контроля (С); отсутствие полосы в области результата теста (Т) означает отрицательный результат. В этом случае можно с большой вероятностью исключить присутствие гемоглобина человека крови в пробном материале.
ВИЧ. Тест-полоски на ВИЧ появились сравнительно недавно и очень помогли многим пациентам. По самым разным причинам люди всячески стараются не афишировать подобные анализы. А тест-полоски наилучшим образом гарантируют их анонимность. Для анализа на ВИЧ подходит кровь, плазма, сыворотка и даже слюна. Тест позволяет выявить болезнь очень рано, а значит, своевременно начать лечение.
Принцип метода и общая схема проведения анализа. Метод ИХА основан на протекании иммунной реакции антиген-антитело при движении тестируемого образца жидкости по полоске и визуальном детектировании образования окрашенных зон в различных участках полоски (тестовой и контрольной зонах).
В тест-зоне полоски иммобилизованы искусственные антигены (подобные анализируемым веществам). Антитела к ним, связанные с красителем, нанесены на полоску у линии погружения ее в исследуемый образец биожидкости. При погружении тест-полоски в жидкость последняя начинает мигрировать по принципу тонкослойной хроматографии. Вместе с жидкостью движутся антитела. Если в образце нет исследуемого токсичного вещества — антигена, то антитела доходят до вторичных (фиксированных) антигенов, связываются с ними, образуя окрашивание в тест-зоне. Если же исследуемый антиген присутствует в биожидкости, он связывает антитела у линии погружения в образец и окрашивание в тест-зоне не наблюдается. Отсутствие или появление окрашивания в тест-зоне говорит о положительном или отрицательном результате анализа соответственно (рис. 8.16). Образование окраски в контрольной зоне должно быть всегда и служит
Рис. 8.16. Оценка результатов реакции (оцениваются визуально в течение 5—10 минут)
Чувствительность метода ИХА к некоторым наркотическим средствам, психотропным веществам и психоактивным лекарственным средствам
Читайте также: