Набор для диагностики бруцеллеза овец

Набор компонентов для диагностики бруцеллеза животных в РА, РСК, РДСК

Набор состоит из следующих компонентов:

- антиген бруцеллезный единый для РА, РСК, РДСК - взвесь инактивированных бруцелл вида abortus - 4 флакона по 20 см 3 или 8 флаконов по10 см 3 ;

- сыворотка бруцеллезная сухая - сыворотка крови быков (волов), гипериммунизированных культурой бруцелл вида abortus - 2 флакона по 2 см 3 ;

- сыворотка крови крупного рогатого негативная сухая - 2 флакона по2 см 3 .

По внешнему виду компоненты Набора представляют собой:

- антиген - непрозрачную жидкость серо-белого цвета, с выпадающим при хранении осадком микробных клеток, гомогенизирующимся при встряхивании;

- сыворотки бруцеллезная и негативная сухие - пористую массу бежевого цвета с желтоватым оттенком полностью растворяющуюся в дистиллированной воде в течение 5 минут с образованием прозрачной жидкости светло-желтого цвета без механической примеси, хлопьев, плесени.

Главным источником заражения является больное животное, которое передает возбудителя при случке. Отличительными признаками данного заболевания (у мужских особей) считается появление припухлости мошонки, наличие воспалительных процессов в семенниках и придатках (эпидидимит, орхит). При пальпации у животных обнаруживается увеличение одного или обоих семенников, хвоста или головки придатка семенника, при этом в пораженных участках повышается температура. Животное ощущает болезненность.

В некоторых случаях можно наблюдать увеличение семенников до больших размеров; встречается и ярко выраженная асимметрия. При хроническом течении заболевания случается разрастание фиброзной ткани, что приводит к сращению придатка с семенником и общей влагалищной оболочкой. Также происходит увеличение объема придатков (или одного придатка), которые к тому же становятся бугристыми и уплотненными.

Пробирка Эппендорф-предназначена для хранения, транспортирования и центрифугирования микро-проб в научно-исследовательских лабораториях. Пробирка Эппендорфа представляет собой градуированную микро-центрифужную пробирку с защёлкивающейся крышкой.

Тупфер-тубстр - стерильный зонд-тампон сохраняющий стерильность в пробирке - предназначен для взятия образцов биологического, цитологического материала с неповрежденной кожи и открытых поверхностей тела и их последующей, безопасной транспортировки в лабораторию для анализа.

- дезинфицирующие средства; - крафт пакеты; - индикаторы; - журналы; - медицинские расходные материалы. Отгружаем от любой суммы. Работаем со всеми Транспортными компаниями.

Столик-тележка медицинский BLQ-008 Столик манипуляционный МСК 548 Шкаф мед.2-х створч.ШМ-02-МСК 647-02 стекло/металл 700х320х1650 Облучатель-рециркулятор "Дезар-4 " Передвижной Стул для персонала (экокожа) Тумба подкатная ТТП-Л-01 "Лавкор" на колесах Кушетка медицинская смотровая КМС-01-МСК Шкаф мед.2-х створч.ШМ-04-МСК 647-01 металл/металл 700х320х1650 Банкетка МСК-208 (со спинкой 1500х500х830)

Медицинская и лабораторная мебель в Калуге. Стул винилис кожа ( светлый ) Стол врача Стул со спинкой газ-лифт Кушетка КМС-01-МСК -203 Тумба подкатная Шкаф для одежды Шкаф д/документов Столик инструментальный 3-полки Столик пеленальный Ширма 2-х секционная б/к Ростомер Весы ВМЭН- 200 Кровать функциональная двухсекционная КФ2-01-МСК

Аквадистиллятор ДЭ-4М Электрический дистиллятор , производительность 4 литра в час, потребляемая мощность: 3 кВт, тэны из нержавеющей стали

Защита от пыли, дыма, туманов. Облегченный корпус полумаски Гипоаллергенный материал Широкий угол обзора Возможность многоразового применения Респиратор предназначен для защиты органов дыхания от аэрозолей. Обеспечивает защиту FFP2 R D

Сорбит 99% 0,05 кг Бромтимоловый синий Бромфеноловый пурпурный (красный) чда 0,01 кг Глицерин имп. 99,5% 0,2 кг Глюкоза кристаллическая Железо хлорное 3-х хлористое 6-водн. ч 0,1 кг Крезоловый красный чда 0.01 кг Метиленовый синий,ч Метиловый красный Мочевина чда Натрий сернистокислый б/в чда Натрий серноватистокислый 5-водн. чда 0,1 кг Натрий фосфорнокислый 2зам 12-в чда 1кг Натрий хлористый хч 1 кг Натрий гидроокись чда Феноловый красный Фуксин кислый 0,05кг Калия теллурит 2% р-р (10 * 5 мл)

Дельвотест 25 определений "Delvotest SP mini" Преми-тест 25 определений

Респиратор 3М 8101. Степень защиты FFP1

4-сенсор - фосенсор для экспресс-метода выявления нескольких видов антибиотиков (бета-лактамов, тетрациклина, стрептомицина и левомицетина) а натуральном, сухом и пастеризованном молоке.

ВСЭ для экспертизы молока и молочныъх продуктов Набор ВСЭ для экспертизы мяса Набор ВСЭ для экспертизы меда Набор ВСЭ для экспертизы рыбы Набор ВСЭ для экспертизы раст. масел Набор ВСЭ для определения нитратов

Медсервис Калуга - это надежность и качество продукции для Вас! Быстрая и качественная работа с гарантией - вот наш девиз!Вы останетесь довольны сотрудничеством с нами.

Питательные среды и химические реактивы для лаборатории.

Стандарт-титр Серной кислоты 0,1 Н Стандарт-титр натрий гидроокись 0,1Н Стандарт-титр натрий серноватистокислый 0,1Н Метиловый красный Эриохром черный Т 0,05 кг Бромкрезоловый зеленый (синий) чда 0,05 кг Аммоний хлористый хч Натрий хлористый хч

Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
Курьерская доставка (7 дней)
Самовывоз из московского офиса
Почта РФ

Заменяет Наставление по диагностике бруцеллеза животных (редакция 1982 года) Пунктов, касающихся диагностики инфекционного эпидимита баранов

Документ действует в части не противоречащей законодательству РФ и носит рекомендательный характер.

Дата введения	01.02.2020
Добавлен в базу	01.01.2018
Актуализация	01.02.2020

13.11.1991	Утвержден	Главное управление ветеринарии Минсельхоза СССР
Разработан	КазНИВИ
Разработан	ВНИИБТЖ
Разработан	ВГНКИ
Разработан	ВИЭВ

ВтГ’ИНА1Ч1ЫИ ИИ с профилактической целью также в молодом возрасте (4-6 месяцев). Эта мора особенно полезна в зонах, где 4-5 лет назад или в настоящее время наряду с ИЭ регистрируется и бруцеллез, так как будут про-филактировагься сразу две инфекция.

диагностика и пражштикл

ИНОЕКЦИОННОГО ОПИДИДИМИТА БАРАНОВ Рекомендации

Вздактор Б. В. Стрибук Художественный редактор В.Е.Сафронов Технический редактор Н.И.Анищенко Корректор T.U. Немцева

Редшщио1шо--лолд1рафическое объединение СО ВАСХНИЛ,ротапринт 633128, Новосибирская область

Хах)актористика возбудителя. Возбудитель ИЭ по морфало-пы"

и многим свойствам сходен с другими видами бруцелл.

Сущос^вуот мнение, что это сильно изменявшийся варл-aj(T (к -форма) возбудителя обычного бруцеллеза овец,утративший п процессе эволюции характерный для типичных ( :н!м>м) бруцелл поверхностный лавопочисахуридн.чй (ЛИС) amv.roH и б значительной стопины вирулентное тъ.

Исто’яIаки возбудителя и пути распространена. Осн о t лшм истом;ikkom Hj .ovIb являются больные бараны.

Наиболее частый путь заноса возбудителя в ранее ньлучиые хозяйства (формы, отары) - ввоз шн]ю1ировон1!их льготных, чаще всего молодых племенных баранов, лрисб)>е

тынных в неблагополучном хозяйство.

Наибольшую опасность в распрострононми ИО представ* .jt инфицированная спорма, полученная от больных бароног на племирсдирннтиях (станциях искусственного осеменения).

Iuiomi. спермы возбудитель ИЭ монет отдаляться m организмы с >?пчой, калом и другими экскрементами и инфицировать помпу, корм и воду, о т/mo предметы уходе за г.нвот-и|ям, кормушкь, подстилку и друзме ооъоиты ишшней среда. Зедшоики 1Д01ЮПНХ овец происходит но только половым, по и a r>iMQjiriPHfw нуг^м. >■ также через слизистые оболочки гчаз, ПО.: Г Вий милости к кожным покров

Наибольшее раопросгранение инфекции среди баранов наблюдается в период естественного осеменения, когда бараны используются для так называемого докрытая.

Привэдсм два наиболее типичных примера.

В колхозе им. Ленина Кыринского района бараны (производители я пробники) перед случкой были исследованы .дважды - в шоно и сентябре 1976 г. Оба раза серологические реакции были отрицательными. При исследовании после осеменения в ноябре 1976 г. выделен один баран-производитель с положительной РДСК* в феврале 1977 г. - уже 5 баронов.

В колхозе им. Лазо Приаргунского района бараны перед случкой также имели отрицательные реакции, После осеменена в январе 1977 г. обнаружены по одной положительной и сомнительной реакции в РДСК, а в марта 1977 г. положительные реакции были уже у 35 животных.

Из этих примеров видно, что существенную роль в распространении возбудителя играют овцематки, которые являются связующим свеном в передаче Br.ovic от больных баранов здоровым. При этом они заражают не только баранов_г но и молодняк.

При активно протекающем инфекционном процессе у живот ных через 7-Х? дней после заражения появляются в крови специфические антитела и через 30-45 дней начинает развиваться аллергическое состояние. Сроки развития и последовательность проявления серологических и аллергических реакций могут сильно варьировать. У части инфицированных животных (10-20#) и более иамунореакции могут временно или постоянно отсутствовать.

Обследование 2000 баранов из хозяйотв, неблагополучных по ИЗ, показало у них клинические признаки, свойственные хроническому твчешш инфекционного процессе. При пальпации часто обнаруживаются уплотнения (узлы) в придатках я теле семенников. Хвост придатка иногда бывает увеличен в 1,5-3 раза; нередко встречается атрофия семекиысов,тогда они, как правило, сильно уменьшены и почтя неподвижны.Увеличение размеров мошонки, свойственное острому воспалительному процессу, встречается редко. В этом случае кока мошонки напряжена и болезненна, тестякулы почти не прощупываются из-за отечности тканей и скапливающегося экссудата; у некоторых баранов на мошонке образуются гнойные озищи.

Овцематки и молодняк более устойчивы к заболеванию,чем взрослые бараны. У большинства овцематок инфекционный процесс протекает скрыто (латентно) без выраженных сероаллергических реакций и клинических признаков. Однако у 9-382 овцематок после заражения может развиваться ярко вирапенный инфекционный процесс, сопровождающийся появлением в сыворотке кротзя специфических антител в высоких титрах и развитием аллергического состояния, а в некоторых случаях абортами и ровдением слабых, нежизнеспособных ягнят. В производственных условиях массовые аборты, как правиле,но наблюдаются, но в отдельных отарах ь скотный период сбор-тируют до 15-202 овцематок. Единичные случаи абортов бывают почти во всех неблагополучных по ИЭ отара.

Важной особенностью возбудктеля, попавшего в оргаяяз,? овцематки, является его сравнительно быстрая ь -трансформация, то есть переход к н - в Ь-форму и, как следствие, потеря обычной антигенной специфичности. Поэтому почти у всех зараженных овцематок (91-992; РДСК со стандартным оьисным антигеном бывает стрнцоюльной. Сроки прсби-вания таких измененных форм в организме инфицированных животных не ограничиваются сезоном осеменения, а гораздо продолжительнее - до года и более. Некоторые овцематки остаются носителями их, пг Bce'i вероятности, в течение всо:: лет производственного испатьзования.

Молодняк инфицируется чаще прк внутриутробном развитии в оргышзые больной матери и в первые месяцы жизни при сосении инфицированного молока. Однако заболевание у

них развивается в большинстве случаев только при достижении половой зрелости. До случной камлании обычно никаких нп иммунологических, ни клянжчоских признаков болезни у них нет. Именно с таким молодняком, у которого инфекция протекает окрито (латентно), занооится, как правило, возбудитель болезни в благополучные хозяйства и стада.

Диагностика. Диагноз заболевания, вызванного Br.ovis, устанавливают на основании результатов клинических, серологических, аллергических и бактериологических исследований с учетом епизоотологических и патолого-анатомических данных.

Клиническое обследование животных. Клиническому обследованию в начале подвергают взрослых баранов, которые использовались для естественного осеменения овцематок. Цри осмотре обращают вниманий на их общее состояний и состояние наружных половых органов: семенников, придатков. Животных, у которых обнаружены патологические изменения(увеличение, уменьшение, уплотнение семенников и придатков), характерные для инфекционного зпидилимита, изолируют и затем от них берут кровь для оерологячоокого исследования. Одновременно кровь берут и от всей группы (отары) баранов, в которой обнаружены животные, подозреваете в заболевании инфекционным эпидидимитом.

При установлении диагноза на ИЭ все поголовье хозяйства (фермы) исследуют комплексно, включая серологический и клин:гческий методы.

Серологический метод основан на выявлении в сыворотке крови исследуемых животных специфических к Br.ovia антител, и поэтому он особенно эффективен в начальных стадиях инфекционного процесса, когда идет активный синтез иммуноглобулинов.

Изучение диагностической эффективности реакции длительного связывания комплекта (РДСК) показало, что эта реакция очень специфична и позволяет своевременно установить наличие и степень распространения инфекции в отарах. Вместе с этим был выявлен и ряд ее иедоотатков. Установлено, что позитивная РДСК в отдельный сроки после заражения может "выпадать", то есть показания ее но строго постоянны. При повторных исследованиях, црозеденных через Г-34) месяцев, позитивные реакции могут исчезать у

пятой части естественно инфицированных баранов. Отрицательную ТОК имеют до 15-2056 баранов, являющихся носителями. Br.ovie и имеющих клинически траленные признаки эпидидямита.

Особенно неудовлетворительные результаты РДСК дает при исследовании овцематок из неблагополучных по ИЭ отар и молодняка. Это связано, с одной стороны, с особенностями инфекционного процесса у этих групп овец, с другой - с изменчивостью антигенных свойств возбудителя. Иногда эффективность ИЮК пропорциональна чувствительности применяемого R -антигена.

В отдельных случаях при исследовании снБоротки крови овец неблагополучных только по ИЭ отар могут быть получены положительные результаты в РА и РСК оо стандартным бруцеллезным 3 -антигеном. Это отмечается там, где в ОКОТНЫЙ период было много абортов. У абортировавших овцематок РА обычно бывает положительной при разведении сыворотки 1:50-1:100 и с оценкой реакция в 2 и 3 креста. Следует учитывать и возможность получить положительные РДСК с овисным антигеном при исследования овец в отарах, благополучных по ИЭ, но неблагополучных по бруцеллезу. Она определяется очень близким антигенным родством бруцелл ввдов о via и meiitenaia и образованием среди последних R3- и я -форм клеток (колоний).

Учитывая возможность таких перекрестных положительных реакций, первичный диатаоэ на ИЭ необходимо подтверждать выделением культур возбудителя на питательных средах и идентификацией их по общепринятой схеме.

Аллергический метод также применим для диагностики ИЭ, Установлено, что у баранов, зараженных бруцаллаыи о via , развивается аллергическое состояние, которое можно выявить пальпебральной и внутрикожной пробами. Аллергическое состояние наблюдается у значительной частя баранов, не имеющих серологических и клинических признаков болезни. Аллергия у многих развивается во 2-3-й мвояц после заражения и сохраняется у некоторых животных в течение 2 лет.

Степень аллергазшш организма овец находится в прямой зависимости от свойств возбудителя: долее вирулентные культуры Сруцелл вида о vie вызывают, соответственно, я более выраженную реакцию.

В зависимости от активности течения и степени распространения инфекции аллергической пробой дополнительно к РДСК и клиническому обследованию выявляется от 2 до 29% инфицированных баранов. Эта проба эффективна и при исследовании овцематок. Вели в РДСК выявляются только единицы реагирующих положительно овцематок, то аллергической пробой - 6-385С от количества исследованных животных. Особенно хорошие результаты дает эта пробе в длительно существующих очагах, где преобладает хроническая форма инфекции.

При изыскании аллергенов, пригодных для практического приме но идя, были испытаны бруцеллин ВИЭВ, бруцеллизат. а также аллергены, изготовленные из Br.ovia , Лучшие результаты получены при использовании ввдоспецифического аллергена - бруцеллоовина. При этом установлено, что пальпебральная проба более пригодна для аллергической диагностики ИЗ, чем ваутрикожная, в области подхвостовой складки. Эффективность первой пробы по сравнению со второй выше в 2-S раз.

Удовлетворительные результаты были получены и с бру-целлином ШЭВ, на который реагировало 63-77/С всех животных имеющих серологические реакции и клинические признаки СЫфЭКЦПИ Br.ovie.

Применение пальпебральной пробы бруцеллином в неблагополучных по ИЭ хозяйствах позволяет иногда выделять в 1,5-2 раза больше инфицированных свец, чем РДСК и клиническим методом. Введение этого препарата и учет реакция осуществляются так же, как при диагностике бруцеллеза, вызванного бруцеллемя ВЧДа molitensis.

Ириченекне аллергической пробы, в том числе и бруцелл*-.-ном ВИЗЬ. на^бедое цслесообрсзно орк широком распространения ИЭ и в отарах- со см&саиной инфекцией СИЗ и бруцачлеэ), когда одновременно можно выявить лквотаых, зараженных Вг. ovig a Br.iaeliter.sis , а также при контрольных профилактических исследованиях овзц благополучных хозяйств зоны, надсдяцейсй под угрозой заноса везбудктеля ИЭ v. бруцеллезе

Бактериологическая диагностика включает 3 основных этапа: бяптериоскопию мазков из патологического материала, выдел энив чистой культуры возбудителя на питательных средах я, при необходимости, постановку биологической пробы на лабораторных животных. Этот метод применим и для исследований прижизненной и посмертной диагностики ИЗ.Для бактериологического исследования от животного нужно брать в первую очередь пробы органов (2,0x2,5 см) и димфатичеокяе узлы, имеющие видимые патологические изменения. Для взятия материала проводят либо специальный у о ой животных, либо кастрацию я взятие от баранов только сегоякинов и придатков, имеющих выраженные патололгческке изменения. При хронически протекающей инфекции возбудитель в 7O-I0C# случаев находится именно в этих органах. Дня прижизненной диагностики у барвнов удобным объектом исследования является и эякулят (сперма). При убое баранов дополнительно берут предстательные жэлезы, лимфатические узлы (срашше, паховые, тазовые, брыжеечные, предлопаточные, заглоточные, средостенные), кусочяя селезенки, печени, легких и почки.

От овцематок для исследования берут абортированные плоды, плодные оболочки (плаценту) и зеделенкч из плодных путей, а при убое - взмеыэшше участки матки, вымени, селезенки, печени, легких, почни и лимфатические узлы.

Если в точение суток взятой материал невозможно доставить в лабораторию,его консервируют стэрилъным ЗС5?-ы раствором химически чистого глицерина (1:5). Црц отсутствии этого консерванта материал замораживают в бытовом холодильнике или (в зимнее время) при минусовой естественной TOimeiWType. Такой материал .<ригодон для бэктериилох'ычэо-когс исследования в ючение 3-5 суток. В лабораторию отправляется с нарочным и с подробной аопэочедытедьной справкой.

]>зому принимают фиолетовый и темно-синий цвета. Измененные клетки бруцелл даже в одном мазке часто бывают разнородны по форме, размерам и окраоке, что связано с различной степенью дефектности их клеточной оболочки. Встречаются также культуры в виде классических L-форм со всеми присущими им свойствами. Восстановить типичную морфологию и окраску измененных культур в некоторых случаях удается лишь путем многократных пересевов на полужидкие и плотные сывороточные среды или пассирования через организм морской свинки.

Бруцеллы вида о vis очень слабо или совсем не растут на питательных средах, применяемых для культивирования других видов. Поэтому для их выращивания рекомендуется применять плотные и полужидкие агаровые среды с добавлением 10-20% сыворотки крупного рогатого скота или амино-иептида. Хорошие результаты дает сухая среда - эритрит агаре. Выращивание культур возбудителя проводят в гкси-каторе при концентрации углекислоты 10-15%, для создания которой можно исиользовать бикарбонат натрия и раствори соляной а серной кислот. На X л воздуха требуется 0,48 г бикарбоната натрия и 5 мл 25%-го раствора серной кислоты или 0,4 г бикарбоната натрия я 0,35 мл концентрированной соляной кислоты. Удовлетворительные результаты дает сжигание в зкоякаторе ватного тампона, пропитанного спиртом. При отсутствии эксикатора ватные пробки можно заливать парафином или заменять резиновыми пробками. Посевы выдергивают б термостате при 37

38°С в течение 30 дней.

Серологическую идентификацию выделенных от овец культур бручол* вида о vis проводят обычно путем 2-кратного внутривенного введения 2-3 кроликам 2 мл взвеси этих культур в концентрации 3-4 млрд м.т. в I мл с интервалом 7-8 дней и последующего исследования гтериммунной сыворот ки в РДСК со стендартным овиеным антигеном. Сыворотку кровь исследуют через 1J-1? дней после повторного введения культуры. Появление положительных РДСК при исследования кроличьих оывороток с овясннм антигеном свидетельствует о принадлежиосте изучаемой культуру к возбудителю ИЭ.

Могут выделяться измененные варианты ьозоудателя, вызывающие з организме кроликов антитела, которые яелякггся гетерогенными и не улавливаются в РДСК биофзбричгнм R -ан-

Лекарственная форма

рег. №: ПВР-1-9.9/02606 от 30.08.10

Форма выпуска, состав и упаковка

Набор предназначен для исследования 50 проб сыворотки крови собак в реакции агглютинации (РА) и реакции иммунодиффузии в агаровом геле (РИД).

В состав набора входят:

— антиген R-бруцеллезный для РА - гомогенная взвесь бруцелл в карбонатно-бикарбонатном буферном растворе, инактивированных нагреванием и фенолом. Представляет собой жидкость непрозрачную, серо-белого цвета; при хранении допускается просветление жидкости с образованием осадка микробных клеток, который легко гомогенизируется при встряхивании.

— сыворотка R-бруцеллезная для РА - гипериммунная сыворотка крови кроликов, консервированная борной кислотой. Представляет собой жидкость светло-желтого цвета, прозрачную, слегка опалесцирующую.

— антиген R-бруцеллезный для РИД - ультразвуковой дезинтеграт бруцелл в фосфатно-буферном растворе, консервированный формалином. Представляет собой бесцветную жидкость, прозрачную, слегка опалесцирующую.

— сыворотка R-бруцеллезная для РИД - гипериммунная сыворотка крови кроликов, консервированная борной кислотой. Представляет собой жидкость светло-желтого цвета, прозрачную или слегка опалесцирующую.

— сыворотка негативная - сыворотка крови кроликов или крупного рогатого скота, консервированная борной кислотой. Представляет собой жидкость светло-желтого цвета, прозрачную или слегка опалесцирующую.

Вспомогательные вещества: натрия хлорид, агар.

Компоненты набора расфасованы в стеклянные флаконы вместимостью 10 и 20 мл, укупоренные резиновыми пробками, укрепленными металлическими колпачками:
— антиген R-бруцеллезный для РА по 9 мл - 4 фл.;
— сыворотка R-бруцеллезная для РА по 1 мл - 1 фл.;
— антиген R-бруцеллезный для РИД по 3 мл - 1 фл.;
— антиген R-бруцеллезный для РИД по 2.5 мл - 1 фл.;
— сыворотка негативная по 6 мл - 1 фл.;
— натрия хлорид по 12 г - 1 фл.;
— агар по 12 г - 1 фл.
На флаконы наклеены этикетки с указанием организации-производителя, наименования компонента, количества компонента во флаконе (мл, г), рабочего разведения антигена для РА, титра R - бруцеллезной сыворотки в РА, окончания срока годности (мес., год). Компоненты набора упакованы в картонные коробки с перегородками, обеспечивающими их целостность.

На коробки наклеены этикетки с указанием организации-производителя, ее товарного знака, адреса и телефона, наименований набора и входящих в него компонентов, количества (г), рабочего разведения антигена для РА, титра R-бруцеллезной сыворотки для РА, номера серии набора, даты изготовления (мес., год), срока годности (мес.), условий хранения, регистрационного номера, штрихового года (при наличии), знака соответствия, обозначения настоящего стандарта, надписи "Для животных". В каждую коробку вложена инструкция по применению набора.

Свидетельство о регистрации № ПВР-1-9.9/02606 от 30.08.10

Фармакологические (биологические) свойства и эффекты

Препарат для диагностики бруцеллеза собак.

R-бруцеллезные антигены для реакции агглютинации (РА) и реакции иммунодиффузии (РИД) взаимодействуют соответственно с бруцеллезными R-агглютининами и R-преципитинами, представленными иммуноглобулинами классов М и G и содержащимися в сыворотке крови собак, инфицированных культурами Вrucella canis, с формированием агглютината и преципитата.

Показания к применению препарата НАБОР КОМПОНЕНТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА СОБАК, ВЫЗЫВАЕМОГО BRUCELLA CANIS, В РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ И ИММУНОДИФФУЗИИ В АГАРОВОМ ГЕЛЕ

Исследование в РА и РИД сыворотки крови:

— всех племенных собак перед плановой вязкой;

— всех племенных собак с 2-месячного возраста, в течение не более 30 дней перед участием в выставках, продажей, ввозом и вывозом из страны;

— собак, контактировавших с больными бруцеллезом животными;

— собак с нарушением функции органов воспроизводства и опорно-двигательного аппарата;

— сук в случае аборта, рождения мертвого или нежизнеспособного приплода.

Порядок применения

Получение сыворотки крови

Кровь по 7-10 мл берут у собак из поверхностных вен (головной предплечья или латеральной подколенной голени) стерильными инъекционными иглами без шприца в сухие стерильные пробирки. Пробирки с кровью нумеруют, составляют их опись и выдерживают при температуре 37-38°С в течение 30 мин или при комнатной температуре в течение 1.5-2 ч. Свернувшуюся кровь отделяют от стенок пробирки стальной спицей и выдерживают при 4-10°С в течение 3-4 ч. Сыворотку крови с эритроцитами сливают в сухие пробирки, выдерживают при 4-10°С в течение 10-12 ч, отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие пробирки.

При взятии крови необходимо соблюдать меры, предупреждающие возможную контаминацию бруцеллами объектов внешней среды.

Сыворотку крови исследуют в свежем виде или консервированную из расчета:

— 0.05 мл (1 капля) 5%-ного раствора фенола на 1 мл сыворотки;

— 4% сухой борной кислоты к объему сыворотки.

Не консервированная сыворотка пригодна для исследования в течение 6 сут со дня взятия крови при условии ее хранения при 4-10°С, консервированная - в течение 30 сут, замороженная - в течение 3 сут после однократного оттаивания.

Мутные, проросшие и гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.

Постановка реакции агглютинации

Реакцию ставят в объеме 1.0 мл. Сыворотку крови собак исследуют в разведениях 1:50, 1:100, 1:200 и 1:400 (конечные разведения после внесения антигена). Исходное разведение 1:25 готовят путем внесения 0.05 мл сыворотки в пробирки с 1.2 мл 0.5%-ного фенолизированного физиологического раствора (или 0.1 мл сыворотки + 2.4 мл физиологического раствора). Одновременно с испытуемыми сыворотками готовят аналогичные разведения R-бруцеллезной и негативной сыворотки. Для приготовления разведений сыворотки крови в пробирки третьего, четвертого и пятого рядов вносят по 0.5 мл фенолизированного физиологического раствора. Из пробирок первого ряда по 0.5 мл сыворотки в разведении 1:25 переносят в пробирки второго и третьего ряда. После пипетирования по 0.5 мл сыворотки в разведении 1:50 из пробирок третьего ряда переносят в пробирки 4 ряда, после выполнения аналогичной операции по 0.5 мл сыворотки в разведении 1:100 из пробирок четвертого ряда переносят в пробирки 5 ряда. После пипетирования по 0.5 мл сыворотки из пробирок 5 ряда удаляют.

Антиген в рабочем разведении 1:10 в 0.5%-ном фенолизированном физиологическом растворе вносят во все пробирки с приготовленными разведениями сыворотки, за исключением пробирок первого ряда.

В отдельную пробирку вносят 0.5 мл физиологического раствора и 0.5 мл антигена в рабочем разведении (контроль антигена на спонтанную агглютинацию).

Штативы с пробирками встряхивают для смешивания компонентов реакции и помещают в термостат при температуре 37-38°С на 16-18 ч, затем выдерживают при комнатной температуре 1 ч и проводят учет реакции.

Допускается постановка реакции в двух разведениях 1:50 и 1:100. При получении положительного результата в РА, проводят исследование таких сывороток в четырех разведениях 1:50,1:100,1:200 и 1:400. Одновременно в таких же разведениях ставят контроль с негативной и R-бруцеллезной сыворотками для РА, а также контроль антигена.

Результаты реакции агглютинации в каждой пробирке учитывают визуально, определяя степень просветления жидкости, внешний вид агглютината (при его наличии) или антигена на дне пробирки и во взвеси после встряхивания пробирки. Следует учитывать, что агглютинат, сформировавшийся при взаимодействии R-бруцеллезного антигена с гомологичными антителами контрольной бруцеллезной сыворотки или сыворотки крови больного животного, легко разбивается при резком встряхивании пробирки с компонентами реакции. Поэтому, при учете результатов реакции в руку одновременно берут 2-4 пробирки и, слегка, постукивая по каждой из них пальцем другой руки, в области дна, поднимают агглютинат.

Реакцию оценивают в крестах:

++++ (4 креста) - полное просветление жидкости при наличии хорошо выраженного осадка в виде "зонтика" на дне пробирки. При легком встряхивании "зонтик" разбивается на крупные хлопья, жидкость остается прозрачной, 100%-ная агглютинация антигена;

+++ (3 креста) - полное просветление жидкости, "зонтик" на дне пробирки хорошо выражен. При встряхивании осадок разбивается на мелкие хлопья, жидкость слегка опалесцирует, 75%-ная агглютинация антигена;

++ (2 креста) - частичное просветление жидкости, "зонтик" выражен. При легком встряхивании "зонтик" разбивается на мелкие хлопья, со дна пробирки поднимается небольшое количество не связавшегося антигена. Жидкость опалесцирует, 50%-ная агглютинация антигена.

+ (1 крест) - частичное просветление жидкости, осадок в виде "зонтика" слабо выражен; при встряхивании жидкость остается мутной с небольшим количеством мелких хлопьев, 25%-ная агглютинация антигена;

- (минус) - отсутствие или частичное просветление жидкости. Осадок антигена в виде "зонтика" отсутствует или в небольшом количестве лежит на дне пробирки в виде "пуговицы". При встряхивании - поднимается в виде "косички", легко разбивается, образуя гомогенную взвесь, 0%-ная агглютинация антигена.

Постановка реакции иммунодиффузии

Приготовление 0.85%-ного раствора хлорида натрия.

Навеску хлорида натрия растворяют в необходимом количестве дистиллированной воды (например, 0.85 г хлорида натрия растворяют в 100 мл).

Приготовление 0.8%-ного раствора агара .

Оставшийся агар хранят при температуре 2-10°С в течение 14 сут.

Пробы сыворотки крови от собак, предназначенные для исследования в РИД, отбирают, консервируют и хранят тем же способом и в тех же условиях, что для исследования в РА.

Для постановки реакции иммунодиффузии используют чашки Петри разного размера. Для исследования до 4 проб - диаметром 40 мм, для исследования 5-40 проб - диаметром 90 мм.

В центральную лунку геля агара вносят 20 мкл антигена, в периферические - по 40 мкл исследуемых проб сыворотки крови.

В каждой чашке ставят контроль антигена с негативной и R-бруцеллезной сывороткой для РИД.

Внутрь крышки каждой чашки вкладывают фильтровальной бумагу, вырезанную по размеру ее наружного диаметра, которую увлажняют 0.5%-ным фенолизированным физиологическим раствором. Чашку плотно прикрывают крышкой и оставляют при 18-24°С.

Учет результатов реакции проводят визуально в косом проходящем свете с помощью осветителя ОИ-19 или аналогичного через 24 и 48 ч после постановки реакции.

Линия преципитации между лунками с антигеном и исследуемой сывороткой, сформировавшаяся через 24 или 48 ч, свидетельствует о положительной реакции.

Диагностическая оценка результатов исследования

При титре РА не ниже 1:100 с оценкой 2 креста и выше и (или) при положительной РИД собак считают больными бруцеллезом, вызываемым Вrucella canis.

При титре РА 1:50 с оценкой 2 креста и выше и отрицательной РИД собак считают сомнительно реагирующими на бруцеллез и исследуют повторно через 15 и 30 дней в РА и РИД с R-бруцеллезными антигенами.

В случае получения двух подряд сомнительных результатов в РА с интервалом не менее 30 дней при отрицательных результатах тестирования в РИД, заболевание животных бруцеллезом исключают.

Особые указания и меры личной профилактики

При работе с Набором следует соблюдать правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами для животных.

Компоненты набора во флаконах без маркировки, с трещинами, нарушением укупорки, содержащие посторонние примеси, плесень и не разбивающиеся при встряхивании конгломераты, с истекшим сроком годности, подвергшиеся замораживанию выбраковывают, обеззараживают путем кипячения в течение 15 мин и утилизируют.

Условия хранения НАБОР КОМПОНЕНТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА СОБАК, ВЫЗЫВАЕМОГО BRUCELLA CANIS, В РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ И ИММУНОДИФФУЗИИ В АГАРОВОМ ГЕЛЕ

Набор следует хранить в сухом, темном, недоступном для детей месте при температуре от 2° до 10°С.

Читайте также: