Пцр на бруцеллез отрицательно
Серологические реакции и аллергическая проба являются общедоступными методами и применяются для диагностики бруцеллеза наряду с бактериологическим и биологическим методами.
В случае малой обсемененности пробы и отрицательных результатов, полученных при посеве исследуемого материала на питательные среды и заражении лабораторных животных, серологический метод может быть единственным, позволяющим диагностировать бруцеллез. В зависимости от целей исследования используют те или иные серологические методы.
При проведении эпидемиологического исследования бруцеллеза в очагах применяют 1.реакцию агглютинации пластинчатую (Хеддльсона) и 2.Объемную (Райта), а так же реакции Кумбса, РСК, РДСК, РПГА, кожную аллергическую пробу, иммуноферментный анализ (ИФА). Перед профилактической вакцинацией населения можно ограничиться постановкой пластинчатой реакции агглютинации (Хеддльсона) и кожной аллергической пробы.\
Реакция Райта (Реакция агглютинации с бруцеллезным антигеном в пробирках )
Реакция Райта проводится в пробирках в объеме 1 мл с разведениями сыворотки 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800 и единым бруцеллезным диагностикумом. Последний представляет собой взвесь убитых нагреванием и фенолом бруцелл. Для пробирочной реакции диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физраствором. Методика разведения сыворотки обычна для пробирочной реакции агглютинации. Пробирки встряхивают, ставят в термостат при температуре 37° до следующего дня. Учет реакции проводят обычным способом или по 50% агглютинации (2+) в сравнении со стандартом мутности. Серийные титры 50% агглютинации 1:50, 1:100, 1:200, 1:400,1:800 свидетельствуют о том, что в 1 мл исследуемой сыворотки содержится соответственно 50, 100, 200, 400, 800 МЕ антител. Выраженность реакции больного оценивают по следующей схеме: титр 1:50 оценивается как сомнительный, 1:100 – слабо положительный, 1:200 и 1:400 – положительный, 1:800 – резко положительный.
При остром бруцеллезе реакция Райта положительна у больных в титре 1:200-1:800, тогда как при хроническом бруцеллезе – в титре 1:50-1:100. В то же время обострение хронического бруцеллеза сопровождается повышением титра 1:200-1:400.
Иногда резко выраженная реакция Райта наблюдается у больных со слабо выраженными клиническими проявлениями бруцеллеза.
Напечатать перед райта
Серологическая реакция агглютинации на стекле (реакция Хеддльсона)
Реакция Хеддльсона (пластинчатая – применяют на стекле) чувствительна, но менее специфична, дает возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни, быстро получить ответ. На большое (9х12см) хорошо обезжиренное сухое стекло на расстоянии 3-4 см друг от друга микропипеткой наносят исследуемую сыворотку в дозах 0,04, 0,02, 0,01 мл (опытные капли) и 0,02 мл (контрольная капля). К трем первым каплям сыворотки добавляют по 0,03 мл единого неразведенного диагностикумума, к последней – 0,03 мл физраствора. Максимальный срок наблюдения – 8 минут. Учет осуществляют невооруженным глазом по 4+ системе. При положительной реакции в опытных каплях появляются хлопья и жидкость становится более или менее прозрачной. Агглютинацию во всех трех дозах 4+ принимают за резко положительный результат, в первой и второй дозах – за положительный результат, только в первой дозе – сомнительный результат, отсутствие агглютинации во всех дозах – отрицательный результат.
Реакция Кумбса либо антиглобулиновый тест.
Его проводит для обнаружения антител, которые атакуют эритроциты.
Для обнаружения бруцеллеза используется прямая реакция. Эта реакция различает антитела, которые напрямую связаны с эритроцитами. Если антиглобулиновый тест показывает отрицательный результат – значит кровь чистая, и антител нет. Положительный результат означает появление антител, которые активно борются с эритроцитами.
ПЦР-диагностика основывается, на обнаружении ДНК-цепей бруцелл из биологического материла пациента. Для этого материал обеззараживают, прибавляя метиолят натрия концентрацией 0,01% с дальнейшим прогреванием в течение получаса. Когда завершится инкубирование в лизирующем растворе, который содержит, все необходимые реагенты для экстракции ДНК при поддерживании температуры в 66С на протяжении 10-15 минут биологическая ткань обезвреживается.
Этот анализ обладает положительной чертой в том плане, что можно использовать абсолютно любую биологическую ткань пациента.
Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.
У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.
Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.
В норме антитела к возбудителю бруцеллёза в крови отсутствуют. Диагностический титр при реакции агглютинации - 1:160 и выше.
Возбудители бруцеллёза - бруцеллы, мелкие неподвижные грамотрицательные бактерии. При постановке диагноза бруцеллёза полученные клинико-эпидемиологические данные необходимо подтверждать лабораторно. С этой целью используют бактериологический и серологический методы исследования. При остром бруцеллёзе положительный результат исследования гемокультуры получают в 10-30% случаев (в 62-90%, если возбудитель - Brucella melitensis, в 5-15%, если - Brucella abortus). Культура ликвора бывает положительной у 45% пациентов с менингитом. При посевах крови, костного мозга, мочи культуру бруцелл можно получить через 5-10 сут, а в части случаев - через 20-30 сут. В связи с этим для диагностики бруцеллёза широкое распространение получили серологические методы.
Самым надёжным серологическим тестом определения антител к возбудителю бруцеллёза в сыворотке крои служит стандартный тест пробирочной агглютинации (реакция Райта), с помощью него определяют содержание антител, реагирующих главным образом с липополисахаридными антигенами бруцелл. Увеличение титров антител в 4 раза и более в пробах сыворотки крови, полученных с интервалом 1-4 нед, позволяет идентифицировать этиологический фактор заболевания. У большинства больных титры специфических антител повышаются на 3-5-й день от начала заболевания. Достоверным считают титр антител не менее 1:160 с последующим его нарастанием. Повышенный титр антител выявляют у 97% больных в первые 3 нед заболевания. Наиболее высокий титр антител отмечают обычно через 1-2 мес от начала заболевания, в дальнейшем он начинает быстро снижаться. Стандартный тест пробирочной агглютинации выявляет антитела к B. abortus, B. suis, B. melitensis, но не к B. canis. Повышенный титр антител может сохраняться у 5-7% пациентов в течение 2 лет после перенесённой инфекции. Поэтому реакцию Райта нельзя использовать для дифференциальной диагностики бруцеллёза с другими инфекционными заболеваниями при наличии в анамнезе бруцеллёза в течение 2 последних лет. Причиной ложноположительных результатов могут быть проведение кожной пробы на бруцеллёз, вакцинация против холеры, а также инфекции, вызванные холерным вибрионом, иерсиниями, Francisella tularensis. В части случаев возможны ложноотрицательные результаты реакции агглютинации у больных бруцеллёзом, что объясняется эффектом прозоны, или так называемым блокированием антител. При хронических локализованных формах бруцеллёза титры могут быть отрицательными или ниже 1:160. На фоне проводимого лечения титры антител класса IgG быстро снижаются и в течение года приближаются к нулю. При рецидивах уровень антител IgG снова повышается. Наличие однократного повышения титра антител IgG более 1:160 - надёжное объективное указание на текущую или недавно перенесённую инфекцию. После лечения и выписки больного из стационара рекомендуют проведение серологических исследований в течение первого года через 1, 2, 3, 6, 9 и 12 мес, а в течение второго года - ежеквартально.
РПГА более чувствительна и специфична для обнаружения бруцеллёзных антител в сыворотке крови. Нередко гемагглютинины выявляют в тех случаях, когда реакция агглютинации даёт отрицательный или сомнительный результат.
РСК позволяет выявлять комплементсвязывающие антитела к бруцеллам, появляющиеся в крови позже агглютининов. Максимальные титры антител в РСК регистрируют к 4-му месяцу заболевания, в дальнейшем их титр снижается, но в небольшом количестве их обнаруживают в течение 1 года. Существенных преимуществ РСК по сравнению с реакцией агглютинации не имеет.
| Инфекционные болезни Форумы: Часто задаваемые вопросы, ВИЧ-инфекция, Гепатиты, Грипп - Новый грипп A/H1N1/2009, Паразитарные заболевания, Туберкулез, Форум для врачей-инфекционистов |
| Поиск по форуму |
| Расширенный поиск |
| Найти все сообщения с благодарностями |
| Поиск по дневникам |
| Расширенный поиск |
| К странице. |
Добрый день!
3 года назад установлен диагноз - первично Хронический бруцеллез.
(только на основании Реакции Райта и Хендельсона)
Лечение антибиотиками и вакциной привело только к ухудшению состояния. По дополнительным результатам обследования имею следющие результаты ( представлены в таблице).
Обращаю Ваше внимание на ПЦР - оно то положительно (в течении года)
то отрицательно (в течении года).
Изначально РПГА было +. Уже 2 года - минус.
Помогите разобраться,
1) У меня бруцеллез - есть?
2) Если нет, то что бы Вы предположили?
Краткая история болезни
Личные данные:
Возраст - 30 лет, пол - женский, рост - 167см, вес - 49кг, русская, образование - высшее, профессия - дизайнер.
Живу в городе (Екатеринбург), последний раз в сельской местности была 12 лет назад.(Южный урал, Башкирия)
С 14 лет установлен Синдром Жильбера, но боли в печени никогда не беспокоили.
Чувствовала себя абсолютно здоровым человеком, вела активный образ жизни.
_____________________________________________
Начало заболевания - Декабрь 2001 года.
_____________________________________________
Эпидемиологический анамнез:
Начало заболевания приходится на время,
когда я и еще 10 человек работали в необорудованном подвальном помещении.
Видели мышей. Продукты и сменная одежда хранились в этом же подвале.
Несмотря на декабрь в подвале было тепло и влажно, пол - земля. Кроме этого всем дружным коллективом
накануне заболевания ели шашлыки собственного приготовления (говядина).
Кроме меня, из всего коллектива работавших в подвале и евших шашлык, никто не заболел.
Клещи - не кусали.
Контакты с животными - кошка, домашняя, на улицу не ходила никогда.
Первые признаки заболевания:
На взъёме правой стопы, около голеностопного сустава появился маленький прыщик, как след от укуса.
Одновременно, или несколько дней спустя появилось чувство "горения пяток", ступи горели и чесались,
а прыщик начал увеличиваться в размерах и расплываться в бугорок. Кроме "горения" и чесания ступней
"горела" спина, появилась ломота в мышцах, чувство жара, потливость, слабость.
Незначительно (до 1 см) увеличелись шейные, подмышечные и паховые лимфоузлы.
Температура около 38 держалась дней 5, затем стала держаться на отметке 37,3 - 37,5 до сегодняшнего времени.
Постепенно появлялись всё новые и новые симптомы. Состояние стабильно ухудшалось без периодов улучшения.
Примерно через месяц с начала заболевания, на фоне общей слабости, потливости, и субфибрилитета
начались поблемы с кишечником. А именно:
-чувство "жжения", пекущей боли в глубине прямой кишки (как раскалённые угли)
-нарушение пищеварения (газообрзование, метеоризм, чередующиеся запоры с диареями,
в стуле - непереваренная пища, слизь, комки фибрина, специфический "кислый" запах)
В области паха и ануса появились два зудящих пятна, неправильной формы, которые покрывались корочкой,
затем корочка трескалась, шелушилась, появлялось скудное жидкое отделяемое.
Дерматолог определил - аллергический дерматоз.
Ректороманоскопия, Колоноскопия - слизистая розовая, признаков воспаления нет.
Ирригоскопия - патологии не обнаружено.
Анализ на дисбактериоз - норма.
Далее внезапно появляется цистит, со всеми симптомами - резь, жжение, боли.
И такая-же "пекущая" боль в районе мочевого пузыря.
Многочисленные посевы и анализы патогенной и условнопатогенной флоры не обнаруживало.
Цистоскопия - признаки шеечного цистита. Анализы мочи в норме.
Несколько позже цистита такая-же интенсивная пекущая боль появилась в правом яичнике.
Диагноз - правосторонний сальпингоофорит.
Следом за сальпингоофоритом появилась киста бартолиниевой железы (справа)
на фоне полового покоя. Киста не нагнаивалась, но на коже в этой области так-же
появился аллергический дерматоз.
Первичный прыщик - бугорок на стопе стал размером с рубль, периодами краснел-синел-шелушился,
не чесался.
Кроме этих жалоб со стороны органов дополнительно беспокоило (и беспокоит)
-Периодическая боль в области печени и поджелудочной железы
-Кожный зуд (икроножные мышцы, руки)
-Ломота, тянущая боль в мышцах и сухожилиях (особено спины и икроножных)
-Подёргивание мышц (кратковременное, похоже на судороги) Бывает на икроножных мышцах, бывает на руках,
бывает что-то типа нервного тика на лице.
-Прогрессирующая мышечная слабость, стало тяжело даже кружку с водой держать на весу.
-Хруст в суставах
-Язык обложен толстым жёлтым налётом
-Вообще цвет кожи стал каким-то жёлто-зеленым
-Потливость, сильные головные боли (надбровные дуги и затылок)
-Вообще тело как-то трясётся, просто мелкой дрожъю, особенно при незначительной физической нагрузке или движении
-Слабость, сонливость
-Заеды (трещины) в углах губ, кожа с губ перодически "облазит", волосы выпадают клочъями, точки на ногтях (ну это мелочи)
По моим субъективным ощущениям, инфекция поднималась снизу-вверх по правой стороне тела.
__________________________________________________ ________________________
Таково было состояние на декабрь 2003г. С начала заболевания прошло 2 года.
За первые полгода болезни вес тела уменьшился на 6 кг.
__________________________________________________ ________________________
За эти 2 года, всеми возможными методами (посевы, серология) были исключены следующие заболевания:
-Известные кишечные патогены (Сальмонеллы, Шигеллы, Ешерихии, Иерсинии, Кампилобактер)
-Гельминты, на которые возможно обследование (т.е кроме "экзотических"), серология и микроскопия.
(Описторхи, лямблии, амёбы, цепни, токсокары, трихинеллы)
-Грибковые поражения (посевы со слизистых)
-Малярия
-Туберкулёз
-Токсоплазмоз
-ЗППП и Венерология (Хламидии, микоплазмы, уреоплазмы, сифилисы, гонореи и т.д)
-ВИЧ
-Онкология (Лимогранулематоз)
-Исключены Волчанка, Ревматоидный артрит, сахарный диабет.
-Хрониосепсис (посевы крови на стерильность)
-Гепатиты А, В, С, Д
-Вирусы герпеса
Данные анализов:
-Исследование на дисбактериоз - норма
---Общий анализ крови:
Эритроциты - 3,96
Гемоглобин - 133
Цветной показатель - 1,0
Лейкоциты - 4,7
Базофиллы - 1
Эозинофиллы - 7
Нейтрофиллы - палоч. - 1, сегмент. - 48
Лимфоциты - 38
Моноциты - 7
РОЭ - 3
---Биохимия крови:
Билирубин общий - 32
Билирубин прямой - 9,9
Глюкоза - 4,8
Общий белок - 71,5
Альбумин - 46
АСТ - 22
АЛТ- 13
ГГТП - 17
Щелочная фосфотаза - 78
А-амилаза - 38
Мочевина - 3,4
Мочевая кислота - 225
Креатинин - 84
ЛДГ - 273
Калий - 3,38
Натрий - 145
Кальций общий - 2,43
Железо - 18,1
ОЖСС - 74
Общий холестерин - 4,14
Альфа - холестерин - 1,32
Холестерин ЛПНП - 2,49
Триглицериды - 0,73
СРБ - отр.
Серомукоид - 180
Ревматоидный фактор - отр.
---Анализ мочи:
Единичные лейкоциты, единичный плоский эпителий, слизь (+++)
---Иммунограмма:
Клеточный иммунитет активен, отмечается увеличение кол-ва IgM.
---УЗИ органов брюшной полости
-Уплотнение чашечно-лоханочной системы почек, признаки хр. пиелонефрита.
Незначительное увеличение правого яичника. Незначительно увеличены печень и селезёнка.
-Лёгкие и бронхи - без патологий
-Ренгенография суставов - Деформирующий остеоартроз коленных суставов 2 ст.
-УЗИ и допплерография сердца - без патологий
-Лимфатические узлы - до 1см увеличены паховые и заднечелюстные
-Ректороманоскопия - признаков воспаления нет.
-Цистоскопия - признаки воспаления, гиперемированная слизистая в шеечном отделе.
-Посев крови на стерильность - норма
Урологи и гинекологи назначали следующие антибиотики:
-5-НОК
-Фурагин
-Метронидазол
-Клиндамицин
-Ципрофлоксацин
В стандартных терапевтических дозах на 14 дней. Улучшения ни со стороны ПМС, ни со стороны ЖКТ,
ни в общем состоянии не наступило.
Диагноз 1 инфекц. отделения областного инфекционного центра:
Субфибрилитет неясного генеза.
Выявление возбудителей бруцеллёза (Brucella spp), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в моче, синовиальной жидкости, грудном молоке или образце ткани.
Бруцелла, возбудитель бруцеллёза, ундулирующей лихорадки, септицемии Брюса.
Синонимы английские
Brucella spp, DNA [Polymerase chain reaction] (urine, synovial fluid, breast milk, tissue sample), B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат, грудное молоко, первую порцию утренней мочи, синовиальную жидкость.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Подготовки не требуется.
Общая информация об исследовании
Brucella spp – это грамотрицательные аэробные коккобациллы, являющиеся внутриклеточными паразитами человека и животных и вызывающие бруцеллёз. Они попадают в организм при употреблении сырого козьего молока и при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных (как у ветеринаров, работников мясной промышленности, сотрудников микробиологических лабораторий). Наибольшее значение в клинике инфекционных болезней человека имеет 4 вида Brucella: B. melitensis, B. abortus, B. suis и B. canis, при этом на долю B. melitensis приходится подавляющее большинство случаев заражения. Бруцеллёз, вызванный различными видами Brucella, протекает и лечится одинаково, поэтому с клинической точки зрения нет необходимости определять видовую принадлежность возбудителя.
Бруцеллёз представляет собой системный инфекционный процесс, при котором поражаются практически все органы. Наиболее часто микроорганизм удаётся обнаружить в крови, однако другие биологические среды (моча, синовиальная жидкость) и фрагменты тканей (биоптат) также могут быть использованы для диагностики бруцеллёза. Несмотря на то что бруцеллёз считается зоонозной инфекцией, описаны случаи передачи микроорганизма от человека к человеку, в том числе случаи заражения младенцев при употреблении грудного молока больной матери. Его могут исследовать на бруцеллёз, чтобы установить источник заражения и не допустить реинфекции.
Диагностика бруцеллёза – достаточно сложная задача. Заболевание не имеет каких-либо специфических признаков, а также может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме. Поэтому диагностика основана на лабораторном выявлении микроорганизма. Существует несколько способов идентификации Brucella: посев на питательную среду, серологические методы и исследование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий обнаруживать в биологическом материале (например, в моче) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Для диагностики бруцеллёза исследование с помощью ПЦР используют сравнительно недавно, однако, благодаря его преимуществам, метод находит всё большее применение в клинической практике.
ПЦР основана на выявлении уникального для представителей рода Brucella фрагмента ДНК (гена bcsp31) и поэтому характеризуется очень высокой специфичностью. Для сравнения: большинство серологических методов выявляют антитела к общему для многих микроорганизмов липоолигосахариду, и их результаты могут быть ложноположительными при наличии инфекции Yersinia enterocolitica O:9, Salmonella urbana group N, Francisellatularensis, EscherichiacoliO:157, Stenotrophomonas maltophilia и некоторых других микроорганизмов.
Благодаря высокой специфичности положительный результат исследования с помощью ПЦР у пациента с признаками заболевания позволяет подтвердить диагноз. С другой стороны, случайно выявленный положительный результат у пациента без каких-либо жалоб и симптомов требует дальнейшего, более полного клинического и лабораторного обследования.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики остросептической, хронической и локализованных форм бруцеллёза, а также рецидива заболевания.
Когда назначается исследование?
- При симптомах бруцеллёза (остросептической формы): высокой лихорадке с температурой 39-40 °С и выше (особенно при колебаниях температуры), ознобе, потливости, слабости, миалгии, артралгии или артрите.
- При обследовании пациента с изолированным поражением мочеполовой системы и суставов при наличии в анамнезе указаний на употребление сырого козьего молока, особенно в эндемичных по бруцеллёзу районах, и профессиональных особенностей (как у ветеринаров, работников молочной и мясной промышленности).
- При подозрении на бруцеллёз у новорождённого.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
- бруцеллёз;
- туберкулёз с поражением костно-суставной системы.
Причины отрицательного результата:
- отсутствие бруцеллёза;
- неправильное взятие биоматериала на исследование.
Что может влиять на результат?
- Туберкулёз костно-суставной системы может приводить к ложноположительному результату.
- Применение доксициклина, рифампицина, ципрофлоксацина и других фторхинолонов способствует ложноотрицательному результату.
- Результат исследования следует оценивать с учётом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.
Кто назначает исследование?
Инфекционист, уролог, хирург, невролог, врач общей практики.
Литература
- Al Dahouk S, Nöckler K. Implications of laboratory diagnosis on brucellosis therapy. Expert Rev Anti Infect Ther. 2011 Jul;9(7):833-45.
- Yu WL, Nielsen K. Review of detection of Brucella spp. by polymerase chain reaction. Croat Med J. 2010 Aug;51(4):306-13. Review.
- Morata P, Queipo-Ortuño MI, Reguera JM, Miralles F, Lopez-Gonzalez JJ, Colmenero JD. Diagnostic yield of a PCR assay in focal complications of brucellosis. J Clin Microbiol. 2001 Oct;39(10):3743-6.
- Nimri LF. Diagnosis of recent and relapsed cases of human brucellosis by PCR assay. BMC Infect Dis. 2003 Apr 28;3:5.
Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed
| Код | Наименование услуг | Цена, руб. | Доступность экспресс | Ед. измер. | Материалы | Заказать |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 003 | Бруцеллез (ПЦР) | 800 p (Время исполнения до 72 часов) | 1 исслед. | J N V E C U C |
Животные: Собаки, КРС, МРС
Выявление ДНК возбудителя бруцеллеза (микроорганизмов рода Род Brucella: Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis, Brucella ovis, Brucella canis методом ПЦР в реальном времени.
Материал для исследовнаия: Материал НЕ требующий оформления пробоподготовки: - сперма, моча - молоко от абортировавших животных - содержимое бурс и гигром - выделения из половых путей, взятые в первые 5 дней после аборта Материал требующий оформления дополнительной пробоподготовки. - Абортированный плод целиком или пат материал от него (содержимое брюшной полости и желудка, околоплодная жидкость или слизь между оболочками и плодом), парензиматозные органы (селезенка, печень, сердце, почки)). - плацента и плодовые оболочки от абортировавших животных; - в случае диагностического убоя животных для исследования отбирают парные лимфатические узлы (не менее 7 пар) подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, надколенные, подколенные, надвыменные, парааортальные, тазовые и кусочки паренхиматозных органов (печень, селезенка); - от самцов с признаками орхита или эпидидимита отбирают семенники с придатками. Для пат органов и абортированных плодов необходимо дополнительная утилизация отходов по весу на момент поступления в лабораторию Правила отбора проб для исследования: 1) Лимфоузлы берут целиком. 2) Жидкости для исследования, кроме молока, отбирают в объеме 5 - 10 мл в стерильные контейнеры. 3) Из органов и тканей вырезают кусочки не более 5 х 5 х 5 см, каждый орган помещается в отдельный герметичный пакет, подписывается. Органы, расфасованные в пакеты, от одного животного складываются в общий пакет и маркируются идентификатором животного. Доставляются в лабораторию в течение 2-х часов после отбора. При не возможности соблюсти данное требование, отобранный пат материал замораживается и через 1 сутки в замороженном виде доставляется в лабораторию, размораживание при транспортировке не допускается. 4) Взятие содержимого гигром, бурс. В области поражения выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы (бурсы) и переносят его в стерильную пробирку с плотной пробкой. 5) Молоко. Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждой доли вымени берут последние порции молока в количестве 10 - 15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.У собак при взятии проб молока соски обмывают теплой водой и обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждого соска сцеживают около 0,5-1 мл молока в стерильнуюпробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. У овец и коз пробы молока берут путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска и после попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. Молоко должно быть доставлено в лабораторию в день взятия пробы. 6) Абортированные плоды весом до 1 кг берется целиком. Плод помещается в отдельный чистый пакет, маркируется. Если вес плода более 1 кг, то необходимо провести вскрытие плода и взятие органов для исследования. Хранение: в холодильнике не более 48 часов при температуре +2-+8⁰С моча храниься не более суток (24 часа) при температуре +2-+8⁰С более длительное хранение при температуре не выше -16⁰С, кроме кровии мочи. Молоко и моча должны быть доставлены в лабораторию в день взятия пробы.
Бруцеллез – хроническая бактериальная инфекция, при которой возникает лихорадка, поражаются кости, мышцы, сердце, сосуды, нервная система, почки. Заражение происходит от животных. Бруцеллез относят к особо опасным инфекциям.
| Что такое особо опасная инфекция? Сегодня этот термин в мире не употребляется – он сохранился только в странах СНГ. Традиционно к особо опасным инфекциям принято относить такие заболевания, которые отличаются высокой заразностью и оказывают выраженное негативное влияние на организм. |
Впервые изучением бруцеллеза занялся исследователь Дж. Марстон на острове Мальта в XIX веке. Местные жители и расквартированные английские солдаты заражались заболеванием, когда пили сырое козье молоко. В 1886 году бактерия впервые обнаружена в селезенке погибшего больного (это было сделано ученым Д. Брюсом – в честь него возбудитель назван бруцеллой), а с 1897 года успешно применяется анализ сыворотки зараженных людей.
В России первые случаи заболевания зарегистрированы в 1912 году в Ашхабаде.
На этот вопрос сложно ответить, так как даже в развитых странах выявляют не всех больных. Например, в США ежегодно выявляется 200 новых случаев, но считается, что это лишь десятая часть от общего количества реально заболевших.
В некоторых странах бруцеллез не встречается вообще: в Дании, Швеции, Исландии, Финляндии, Швейцарии, Словакии, Чехии, Румынии, Нидерландах, Великобритании (включая Нормандские острова), Японии, Болгарии, Люксембурге, на Виргинских островах и на Кипре.
Наиболее подвержены заражению бруцеллезом люди следующих профессий:
- фермеры;
- работники мясоперерабатывающих предприятий;
- врачи-ветеринары;
- сотрудники бактериологических лабораторий.
Причины бруцеллеза
Бруцеллез – инфекционное заболевание, которое вызывают шесть родственных видов бактерий.
Животные, от которых может происходить заражение:
- козы и овцы;
- крупный рогатый скот;
- свиньи;
- северные олени.
Бруцеллы сохраняются в окружающей среде достаточно долго:
- в почве – до 6 месяцев;
- в молочных продуктах – до 2 месяцев;
- в мясе – до 20 суток;
- в сырах из зараженного молока – до 3-4 месяцев;
- в замороженном или засоленном мясе – до 1,5-2 месяцев.
Бруцелла – бактерия, способная обитать и размножаться внутри клеток человеческого тела, где она недоступна для иммунной системы. Защитные системы организма не могут справиться с возбудителем, и заболевание протекает в хронической форме.
От человека заразиться бруцеллезом нельзя. Хотя, есть некоторые данные о возможности заражения плода от беременной матери, ребенка через грудное молоко, партнера во время полового акта.
Пути заражения бруцеллезом:
- при употреблении в пищу инфицированного молока, молочных продуктов, мяса;
- при вдыхании пыли от шерсти, навоза, подстилки, земли;
- непосредственный контакт, разделка мяса, если есть повреждения, ссадины и мелкие царапины на коже.
Признаки бруцеллеза
Бруцеллез протекает в 5 стадий:| Название стадии | Что происходит в организме? | Какими симптомами проявляется? |
| Инкубационный период | Человек съедает зараженный продукт. Болезнетворные бактерии проникают в клетки слизистой оболочки пищеварительной системы (другие пути проникновения – через слизистые оболочки органов дыхания и порезы на коже), размножаются и накапливаются в них. Затем с током лимфы они попадают в близлежащие лимфатические узлы. | Инкубационный период может продолжаться от недели до месяца. Симптомы отсутствуют. |
| Острый период | Возбудитель проникает из лимфатических узлов в кровь и распространяется по всему организму.
| Симптомы острой стадии бруцеллеза:
|
| Стадия поражения различных органов | Из крови бруцеллы попадают в разные органы и оседают в них. Одновременно начинается перестройка иммунитета организма, возникают аллергические реакции.
| При хронической форме заболевания бывают поражены разные органы. Симптомы выражены в разной степени. |
Признаки бруцеллеза при поражении разных органов
Бруцеллезный артрит – воспаление сустава. Является самым частым проявлением бруцеллеза в хронической форме.
Симптомы бруцеллезного артрита:
- резкие боли в суставе;
- припухлость, покраснение в области пораженного сустава;
- нарушение движений.
Чаще всего возникают полиартриты, при которых поражается несколько разных суставов, причем, очаги поражения постоянно перемещаются. Как правило, воспаление развивается в крупных суставах: тазобедренных, коленных, локтевых, плечевых, нередко страдает сочленение между крестцом и костями таза.
Реже встречается поражение мелких суставов кистей и стоп.
Артриты межпозвоночных суставов отличаются упорным течением, часто рецидивируют. При бруцеллезе поражения суставов могут сочетаться с воспалительными процессами в сухожильных влагалищах (тендовагинит), синовиальных сумках (бурсит), болями по ходу рядом расположенных нервов.
При длительном течении воспалительного процесса вокруг сустава образуется разрастание костной ткани, в результате чего нарушаются движения.
Бруцеллезный миозит – воспаление мышечной ткани. Чаще всего поражаются мышцы поясницы, рук и ног.
Симптомы бруцеллезного миозита:
- Боли в мышцах. Они продолжаются в течение длительного времени, имеют тупой характер, усиливаются во время изменения погоды.
- В толще мышц появляются болезненные уплотнения, которые можно прощупать.
- Со временем боль проходит, уплотнения исчезают, но затем они появляются в других мышцах.
Возможные поражения сердца и сосудов при бруцеллезе:
- Эндокардит – воспаление внутренней оболочки сердца, которая выстилает его камеры изнутри. Основные проявления заболевания:
- лихорадка;
- слабость, потливость, повышенная утомляемость;
- боли в костях и мышцах;
- одышка;
- отеки на ногах, особенно в вечернее время;
- синюшный или фиолетовый оттенок кончиков пальцев, носа, мочек ушей.
- Перикардит – воспаление наружной оболочки сердца. Основные симптомы заболевания:
- повышение температуры тела;
- общая слабость, недомогание;
- боли в груди – возникают слева или в нижней части грудины, усиливаются во время частого глубокого дыхания, проходят в положении сидя, когда корпус наклонен вперед.
- Тромбофлебит – воспаление стенки вены и образование на ней тромбов. Основные симптомы заболевания:
- повышение температуры тела, недомогание;
- боль по ходу воспаленной вены;
- болезненные шишки под кожей;
- отек пораженной конечности, боли, онемение.
Опасное осложнение тромбофлебита – отрыв тромба и его попадание с током крови в сердце, легочные сосуды (это состояние называют тромбоэмболией).
Обычно подозрение на бруцеллез возникает в том случае, когда у больного имеются симптомы инфекционного эндокардита или перикардита, врач назначает исследования для выявления обычных возбудителей, а их результат оказывается отрицательным. После этого назначают специфические анализы на бруцеллез.
Симптомы со стороны органов дыхания при бруцеллезе выявляются редко.
Виды поражения дыхательной системы:
- Бруцеллезная ангина – воспаление миндалин. Они увеличиваются в размерах, возникает боль в горле, которая усиливается во время глотания. Глотание становится затрудненным.
- Бруцеллезный фарингит – воспаление слизистой оболочки глотки. При этом отмечаются боли в горле, кашель.
- Бруцеллезный бронхит и бруцеллезная пневмония (воспаление легких). Проявляются характерными классическими симптомами. Больного беспокоит частый кашель, отходит мокрота, в которой могут быть примеси крови.
Последствия и остаточные явления бруцеллеза
К какому специалисту обращаться?
Лечением бруцеллеза занимается врач-инфекционист. Однако чаще всего больной изначально обращается к другому специалисту: к терапевту, гастроэнтерологу, ревматологу, кардиологу.
Бруцеллез – заболевание, которое может проявляться по-разному, большим количеством симптомов. Поэтому поставить диагноз только после смотра очень сложно. Врач может лишь заподозрить заболевание. Окончательно диагностировать бруцеллез помогают лишь лабораторные тесты.
Доктор проводит обычный врачебный осмотр. Он осматривает кожу пациента, выстукивает и выслушивает грудную клетку, ощупывает живот, суставы, проверяет их подвижность, осматривает горло. При поражении нервной системы пациент осматривается неврологом, глаз – окулистом.
Назначается комплекс диагностики, который может включать разные исследования, в зависимости от имеющихся симптомов:
- при поражении суставов: рентген, УЗИ, компьютерная томография, артроскопия;
- при поражении сердца: рентген грудной клетки, ЭКГ, ЭХО-кардиография;
- при поражении органов дыхания: рентген грудной клетки, анализ мокроты;
- при поражении пищеварительной системы: УЗИ органов живота, биопсия печени, анализы на гепатит;
- при поражении мочеполовой системы: УЗИ малого таза, кольпоскопия, гистероскопия, анализ мазков из влагалища;
- при поражении нервной системы: рентгенография черепа, компьютерная томография, магнитно-резонансная томография, спинномозговая пункция, электроэнцефалография;
- при поражении лимфатических узлов и селезенки: ультразвуковое исследование, биопсия;
- при поражении глаз: осмотр окулиста.
- симптомы поражения суставов, которые беспокоят в течение длительного времени и не укладываются в клиническую картину большинства распространенных суставных заболеваний;
- эндокардит и перикардит, при которых бактериологические анализы показывают отрицательный результат;
- пневмония, бронхит или другое воспалительное заболевание, которое никак не поддается лечению обычными антибиотиками.
Лабораторная диагностика бруцеллеза
Существуют специальные лабораторные анализы, при помощи которых можно выявить возбудителя бруцеллеза. Однако их проведение возможно только в специально оборудованных лабораториях, так как выделение бруцелл в чистом виде представляет определенную опасность.
Читайте также: