Приготовление и контроль биопрепараты против сибирской язвы
Возбудитель сибирской язвы относится к роду Bacillus, виду B. anthracis ивходит в группу 18 (Грамположительные палочки и кокки, образующие эндоспоры) определителя Берджи.
B. anthracis – крупные палочки с прямыми концами, неподвижны. В организме образуют капсулу. Эндоспоры овальные, высокоустойчивые ко многим неблагоприятным воздействиям. В клетке образуется не более одной споры. При попадании в благоприятную среду в течение нескольких часов споры прорастают и дают начало вегетативной форме. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Активны в биохимическом отношении.
К основным антигенам возбудителя сибирской язвы относятся полисахаридный антиген клеточной стенки, протеиновый капсульный антиген, протективный антиген и антиген экзотоксина.
Основным фактором вирулентности B. anthracis является капсула. Мутанты, дефектные по образованию капсулы, авирулентны и используются в качестве вакцинных штаммов. Другой важный фактор вирулентности – токсинообразование. У сибиреязвенных бактерий обнаружен многокомпонентный комплекс экзо- и эндотоксинов.
Сибирская язва – особо опасная зоонозная инфекция. В естественных условиях ею болеют домашние животные, в основном, крупный и мелкий рогатый скот, лошади, свиньи, у которых сибирская язва может протекать даже бессимптомно. Люди заражаются при уходе за больными животными, разделке туш вынужденно забитых больных животных, употреблении в пищу их мяса, выделке шкур погибших животных. Возможно заражение и при непрямом контакте через объекты, инфицированные кровью или выделениями больных животных, а также через инфицированные предметы.
Заражение происходит через кожу, слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта или дыхательные пути. В зависимости от этого различают кожную, кишечную или легочную формы сибирской язвы. Две последние, как правило, переходят в септическую форму с высокой летальностью.
После перенесенного заболевания вырабатывается достаточно стойкий иммунитет. Он носит антимикробный и антитоксический характер.
Материал для исследования определяется клинической формой болезни. Для обнаружения возбудителя используют микроскопию мазков из патологического материала, методы иммуноиндикации. Бактериологическое исследование проводится только в лабораториях строгого режима. При комплексной диагностике сибирской язвы используют сибиреязвенный аллерген – антраксин.
Для лечения сибирской язвы помимо антибиотиков используют противосибиреязвенную сыворотку и специфический гамма-глобулин.
Специфическая профилактика проводится живой сибиреязвенной вакциной. На основе протективного антигена разработан6а также химическая вакцина. Для экстренной профилактики применяется сибиреязвенный глобулин.
Для приготовления вакцины используют стойкий бескапсульный вариант (мутант) сибиреязвенных бацилл, лишенный способности вызывать заболевание у людей и сельскохозяйственных животных. Готовый препарат представляет собой высушенную взвесь живых спор вакцинного штамма.
С целью получения вакцины споровую культуру вакцинного штамма, выращенную на плотной питательной среде, смывают с поверхности агара дистиллированной водой, устанавливают необходимую концентрацию спор в полученной взвеси, разливают ее по ампулам, замораживают и высушивают в условиях вакуума. Ампулы с сухой вакциной запаивают под вакуумом. В каждой ампуле содержится 8-10 млрд. спор вакцинного штамма. Сухая вакцина имеет вид пористой массы желтовато-белого цвета, которая в течение 2-3 минут равномерно суспендируется в воде без образования хлопьев или осадка.
В зависимости от показаний сибиреязвенная вакцина может быть применена накожным (скарификационным) или подкожным способом. В обоих случаях вакцинируют однократно.
Для накожной вакцинации сухую вакцину непосредственно перед применением разводят при строгом соблюдении правил асептики стерильным водным раствором глицерина, флакон с которым вкладывают в каждую коробку с вакциной. Содержимое одной ампулы, разведенное в 1 мл раствора глицерина, составляет 20 накожных прививочных доз. Кожу наружной поверхности средней трети плеча перед прививкой обрабатывают спиртом или эфиром. После испарения спирта или эфира на обработанный участок кожи шприцем с тонкой иглой наносят две капли по 0,02-0,03 мл разведенной вакцины в двух местах на расстоянии 3-4 см друг от друга. Через каждую нанесенную каплю стерильным пером проводят 4 параллельные насечки, после чего плоской стороной прививательного пера втирают вакцину в насечки и дают подсохнуть в течение 10 минут.
Учет результата вакцинации при накожном введении проводят через 24-48 часов. Прививочная реакция считается положительной при наличии на коже по ходу насечек выраженной гиперемии и припухлости.
Для подкожной вакцинации сухую вакцину разводят стерильным физиологическим раствором хлорида натрия: из флакона, содержащего 100 мл физиологического раствора, берут 2-3 мл и переносят в ампулу с сухой вакциной. Ампулу осторожно встряхивают до образования гомогенной взвеси, которую переносят обратно во флакон с физиологическим раствором. Таким образом, получают 100 мл вакцины, в которой суспендировано содержимое одной ампулы – около 100 млн. спор в 1 мл. Подкожная прививочная доза составляет 50 млн. спор в 0,5 мл взвеси.
Разведенные вакцины, применяемые как для накожного, так и для подкожного введения годны в течение 4 часов, после чего остаток неиспользованной вакцины уничтожают кипячением в течение 2 часов.
Плановую вакцинацию против сибирской язвы осуществляют по профессиональным показаниям накожным способом.
Внеплановую вакцинацию против сибирской язвы по эпидемиологическим показаниям проводят подкожным способом.
Детей в возрасте от 14 до 16 лет вакцинируют только по эпидемиологическим показаниям и только накожным способом. Дети младше 14 лет вакцинации не подлежат.
Сухую живую вакцину следует хранить в темном сухом помещении при температуре не выше 8 °С. Допускаются хранение и транспортировка вакцины при температуре ниже 0 °С.
Срок годности вакцины 3 года. Дата срока годности указывается на каждой ампуле. По истечении 3 лет неизрасходованная вакцина может быть подвергнута переконтролю в институте, выпустившем препарат. При условии соответствия качества вакицны установленным требованиям, в первую очередь при сохранении в препарате достаточного количества живых спор вакцинного штамма, срок годности проверенной серии может быть продлен еще на 2 года.
Сухая живая аэрозольная сибиреязвенная вакцина
Препарат представляет собой пористую серовато-белую массу, переводимую в аэродисперсное состояние с помощью специального прибора – распылителя.
Действующее начало вакцины – живые споры авирулентного высокоиммунного штамма сибиреязвенных бацилл, обладающего типичными признаками. 1 грамм сухой массы должен содержать не менее 30 млрд. спор, из них живых 90 %. Препарат контролируется на специфическую безвредность и иммунность.
Аэрозольная иммунизация проводится дважды с интервалом в 1 месяц.
Срок годности вакцины – 1 год.
Для пассивной профилактики и лечения сибирской язвы у людей применяется противосибиреязвенный глобулин, действующим началом которого являются β- и γ-глобулиновые фракции, полученные спиртовым осаждением из лошадиной противосибиреязвенной гипериммунной сыворотки.
Помимо обычных контролей, применяемых при изготовлении сывороточных препаратов, противосибиреязвенный глобулин проверяется на специфическую активность. Введенный внутривенно в дозе 1 мл/кг шести кроликам он должен предохранить не менее четырех из них при заражении вирулентной культурой бацилл сибирской язвы.
С профилактической целью вводится внутримышечно – взрослым в дозе 20-25 мл, подросткам – 12 мл, детям – 5-8 мл.
С лечебной целью его нужно вводить как можно раньше, тем же путем, в количестве 30-35 мл и, если нужно, повторно.
Срок годности глобулина – 2 года.
Антраксин является диагностическим препаратом и предназначен для выявления в кожно-аллергических пробах сенсибилизации у больных сибирской язвой, переболевших или привитых против этой инфекции.
Антраксин представляет собой бесцветную прозрачную жидкость, полученную путем гидролиза сибиреязвенных бацилл, выращенных на питательной среде. Действующим началом препарата является белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, извлекаемый при гидролизе из бацилл. Антраксин фасуют в ампулы по 1 мл. Это количество соответствует 10 кожным диагностическим дозам.
Реакцию ставят на внутренней поверхности предплечья строго внутрикожно в дозе 0,1 мл. Результат учитывают через 24-48 часов.
У людей, инфицированных сибиреязвенным микробом или иммунизированных сибиреязвенной вакциной, в результате иммуноаллергической перестройки организма, в месте введения антраксина возникают через 6-10 часов гиперемия и инфильтрат, достигающие максимального развития через сутки после введения препарата.
Срок годности препарата – 1 год.
Люминесцирующие адсорбированные сибиреязвенные антитела
Для выявления сибиреязвенных палочек в чистых и смешанных культурах, в пробах из различных объектов внешней среды и в материале от больных людей и животных могут быть применены люминесцирующие сибиреязвенные антитела.
Сырьем для приготовления их служат адсорбированные противосибиреязвенные сыворотки. Препарат обладает строгой специфичностью, он не сообщает свечения гетерологичным бактериям и бациллам, что позволяет расценивать его как ценное средство индикации возбудителя сибирской язвы.
62) Биопрепараты для диагностики профилактики и лечения сибирской язвы.
2. Живая вакцина из штамма 55
4. Ассоциированная живая жидкая вакцина против сибирской язвы и ЭМКАРа КРС
5. Гипериммунная лечебно-профилактическая сыворотка и гамма-глобулин
Диагностические биопрепараты: преципитирующая сыворотка и стандартный АГ для РП, люминесцирующие сыворотки для МФА, диагностические бактериофаги.
63) Патогенные анаэробы и болезни, вызываемые ими. Особенности взятия материала при анаэробных болезнях и проведения бакдиагностки (среды, условия).
Патогенные анаэробы относят преимущественно к клостридиям – это многочисленная группа почвенных, анаэробных, спорообразующих, палочковидных микроорганизмов, из них 12 патогенных: Сl.tetani – возбудитель столбняка(судороги); Cl.botulinum – возбудитель ботулизма(парезы и параличи гладкой мускулатуры); Cl.chauvoei – возбудитель ЭМКАРа(крепитирующие отеки в массивных группах мышц, хромотой, быстрой гибелью); Cl.perfringens, oedematiens, septicum, histolyticum, novyi, sordellii, sporogenes – возбудители злокачественного отека(отек и некроз травмированных тканей, лизис мышечной ткани с газообразованием, сепсис тканей, смерть); Cl.septicum, oedematiens, sordellii – возбудители брадзота овец(геморрагическое воспаление сычуга и 12-перстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально); Cl.perfringens тип C, D – возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии(геморрагический энтерит, кровоизлияния на слизистых, поражение почек, токсемия); Cl.perfringens тип B – возбудитель анаэробной дизентерии ягнят(общая токсемия, диарея, быстрая гибель, часто внезапная)
Кроме клостридий анаэробные инфекции вызывают микроорганизмы родов Fusubacterium necrophorum – возбудитель некробактериоза(гнойно-некротические поражения кожи, слизистой оболочки и конечностей); Bacteroides nodosus – возбудитель копытной гнили(мацерация и воспаление кожи межкопытной щели, гнойно-гнилостным распадом копытного рога).
Материал на ЭМКАР, брадзот, инфекционную энтеротоксемию и другие клостридиозы следует брать не позже 3-4 часов после гибели животного, так как затем происходит быстрое размножение анаэробов в организме. При ЭМКАРе не вскрывать трупы-ПОЧВЕННАЯ ИНФЕКЦИЯ. Среды Китта-Тароцци, молоко с кусочками печени, сахарно-кровяной агар Цейслера. Для выделения чистой культуры материал прогревают на водяной бане при 80С в течение 10-60 минут, чтобы в нем остались только споры клостридий. Создают анаэробные условия.
64) Лабораторная диагностика столбняка. Характеристика возбудителя, биопрепараты для профилактики и лечения.
Сем. Bacillacea, род Clostridium, возбудитель Clostridium tetani. Тонические и клонические судороги, что часто ведет к смерти.
В лабораторию: раневой экссудат (из глубины раны), кусочки тканей, гной
Морфология: Гр+, Споры+,Капсула–,Подвижность+. Тонкие палочки до 6мкм, спора на конце
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение с незначительным газообразованием, запах жженого рога, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) нежный налет или колонии с приподнятым центром и периферическими отростками(паучки), вокруг колоний гемолиз
Биопроба: материал растирают в ступке с кварцевым песком+физраствор, смесь выдерживают при 20С, фильтруют, вводят белым мышам в/м. Наблюдают 5 суток, при наличии токсина наблюдают ригидность хвоста(вытянут вверх), спастический паралич задней лапки, тетанические судороги, гибель.
Серодиагностика: токсины дифференцируют реакцией нейтрализации токсина(РН). Сыворотку получают на биофабрике. Мыши опытной группы остаются живы и не заболевают. В лаборатории при обнаружении и идентификации столбнячного токсина диагноз считается установленным.
65) Лабораторная диагностика ботулизма. Биопрепараты для профилактики и лечения.
Сем. Bacillacea, род Clostridium, возбудитель Cl.botulinum – возбудитель ботулизма(кормовой токсикоз, парезы и параличи гладкой мускулатуры)
В лабораторию: пробы кормов, содержимое желудка, кусочки печени павших и кровь больных животных
Морфология: Гр+, Споры+,Капсула–,Подвижность+. Крупные палочки с закругленными концами, споры расположены терминально.
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение с незначительным газообразованием,запах прогорклого масла, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) крупные колонии с корневидными отростками и зоной гемолиза или вуалеобразный налет с изрезанными краями.
Биопроба: экстракты фильтруют, делят на 2 части. Одну часть прогревают на водяной бане при 100С. Заражают морских свинок подкожно, мышей внутрибрюшинно или внутривенно. Зараженные некипяченым экстрактом погибают с западением брюшных мышц. Кипяченым – остаются здоровыми.
Серодиагностика: токсины дифференцируют реакцией нейтрализации токсина(РН). Сыворотку получают на биофабрике.Если тип токсина совпадает с антитоксической сывороткой, то мыши выживают, если нет – гибнут
66) Бактериологическая диагностика эмкара. Биопрепараты для профилактики и лечения.
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.chauvoei – возбудитель ЭМКАРа(крепитирующие отеки в массивных группах мышц, хромотой, быстрой гибелью);
В лабораторию: не вскрывая труп, кусочки мышц, отечную жидкость
Морфология: Гр+, Споры+,Капсула–,Подвижность+. Полиморфные толстые палочки до 8 мкм
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение, осадок с незначительным газообразованием,
запах прогорклого масла, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) колонии в виде перламутровой пуговицы, узкая зона гемолиза
Биопроба: центрифугатом заражают морских свинок внутримышечно, предварительно травмировав бедренную мышцу с внутренней стороны, наблюдают появление крепитирующих отеков в месте введения, интоксикацию и гибель.
Препараты: 1.Гидроокись алюминиевая формолвакцина против ЭМКАРа КРС и овец; 2.Ассоциированнная вакцина против ЭМКАРа и лептоспироза; 3.Ассоциированная вакцина против ЭМКАРа и сибирской язвы
67) Характеристика возбудителя некробактериоза. Проведение лабораторной диагностики.
Сем. Bacillacea, род Fusubacterium, Fusubacterium necrophorum – возбудитель некробактериоза(гнойно-некротические поражения кожи, слизистой оболочки и конечностей);
В лабораторию: соскобы тканей, трупы, паренхиматозные органы с некротическими очагами
Морфология: Гр–, Споры–,Капсула–,Подвижность–. Полиморфные кокки и палочки в виде цепе. Окрашиваются по Романовскому-Гимза.
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) помутнение с незначительным газообразованием,на Цейслера(сахарный кровяной МПА) мелкие росинчатые колонии
Биопроба: кроликов подкожно в ухо – возникает некроз; белых мышей подкожно в области хвоста – нагноение, припухлость, абсцесс, отпадение хвоста.
Серодиагностика: РН не применяется.
68) Характеристика возбудителей брадзота, энтеротоксимии, анаэробной дизентерии. Проведение лабдиагностики.
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.septicum, oedematiens, sordellii – возбудители брадзота овец(геморрагическое воспаление сычуга и 12-перстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально); Cl.perfringens тип C, D – возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии(геморрагический энтерит, кровоизлияния на слизистых, поражение почек, токсемия); Cl.perfringens тип B – возбудитель анаэробной дизентерии ягнят(общая токсемия, диарея, быстрая гибель, часто внезапная)
В лабораторию: паренхиматозные органы, измененные участки стенки сычуга, 12-перстная кишка, мезентеральные лимфоузлы, отечная ткань; содержимое тонкого кишечника, кишечник, печень почки, селезенка.
Морфология: Гр+, Споры+, Капсула–, Подвижность+. Палочки с закругленными концами, в мазках-отпечатках нити; Гр+, Споры+, Капсула+, Подвижность–. Толстые короткие палочки расположенные палисадом или одиночно или попарно
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) интенсивное помутнение, умеренное газообразование, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) сплошная нежная пленка с зоной гемолиза или корневидные колонии неправильной формы сероватого цвета с гемолизом или без;
На Вильсона-Блера с помутнением и газообразованием, на железосульфитном агаре черные колонии в глубине среды
Биопроба: лабораторных животных внутримышечно, в положительном случае гибель; лабораторных животных внутривенно или внутрибрюшинно, в положительном случае гибель
Серодиагностика: РН не применяется; РН со специфическими сыворотками при обнаружении в исследуемом материале токсина
69) Лабдиагностика при злокачественном отеке. Возбудители болезни и их характеристика морфологическая и культуральная.
Сем. Bacillacea, род Clostridium, Cl.perfringens, oedematiens, septicum, histolyticum, novyi, sordellii, sporogenes – возбудители злокачественного отека(отек и некроз травмированных тканей, лизис мышечной ткани с газообразованием, сепсис тканей, смерть);
В лабораторию: кусочки пораженных органов, мышц, раневой экссудат
Морфология: Гр+, Споры+, Капсула–, Подвижность+. Палочки с закругленными концами, в мазках-отпечатках нити; Гр+, Споры+, Капсула+, Подвижность–. Толстые короткие палочки расположенные палисадом или одиночно или попарно
Рост: на Китта-Тароцци(МППБ) интенсивное помутнение, умеренное газообразование, на Цейслера(сахарный кровяной МПА) сплошная нежная пленка с зоной гемолиза или корневидные колонии неправильной формы сероватого цвета с гемолизом или без;
На Вильсона-Блера с помутнением и газообразованием, на железосульфитном агаре черные колонии в глубине среды
Биопроба: лабораторных животных внутримышечно, в положительном случае гибель; лабораторных животных внутривенно или внутрибрюшинно, в положительном случае гибель
Серодиагностика: РН не применяется; РН со специфическими сыворотками при обнаружении в исследуемом материале токсина
70) Характеристика возбудителя колибактериоза. Лабдиагностика болезни. Биопрепараты для лечения и профилактики.
Семейство Enterobacteriaceae, род Escherichia, вид Escherichia coli, различные серовары(энтеротоксическая и энтеритная формы характеризуются диареей, обезвоживанием, интоксикацией, мастити, эндометриты, колисептицемия, отечная болезнь поросят, токсикоинфекции);
В лабораторию кал, сыворотка крови, трупы мелких животных, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, отрезок кишечника, головной мозг
Морфология: Гр–, Споры–, Капсула–, Подвижность+. Палочки, располагаются одиночно или попарно, факультативные анаэробы
Рост: на МПБ помутнение, легко разбивающийся осадок; на МПА сочные круглые колонии с ровными краями серо-белого цвета; на Эндо темно-малиновые колонии с мет.блеском; на Левина фиолетовые или черные колонии с мет.блеском; на Плоскирева скудный рост розовых колоний; на висмут-сульфит агаре не растет(или мелкие зеленоватые колонии); на 3хсахарном агаре Олькеницкого меняет цвет среды с розового на желтый.
Биохимические свойства Глюкоза+, Лактоза+, Маннит+, МПЖ–, H2S–, Индол+, Метиленовый красный+, на среде Симмонса с цитратом не растет(зеленая среда)
Биопроба: подкожно белых мышей, птиц интраокулярно
Серодиагностика: РА с инактивированным АГ, МФА
Препараты: диагностические: сыворотки люминисцентные для МФА, адгезивные коли-сыворотки, агглюцинирующие сыворотки; лечебные: поливалентная сыворотка против колибактериоза и сальмонеллеза, колипротектант ВИЭВ, антиадгезивные гипериммунные сыворотки, бактериофаг против колибактериоза и партифа, антибиотики; профилактические: вакцина для колострального иммунитета молодняка, поливалентная вакцина для пушных, ГОА вакцина, инактивированная формолвакцина для кур
71) Лабдиагностика сальмонеллезов. Основные серологические типы сальмонелл. Дифференциальная диагностика эшерихий от сальмонелл.
Семейство Enterobacteriaceae, род Salmonella, вид Salmonella enterica, сероварианты: S.enteritidis, S.dublin, S, typhisuis, S.abortus equi, S.abortus ovis, S.gallinarum, S.pullorum(лихорадки, диарея, плевриты, артриты, аборты, пищевые инфекции)
В лабораторию кал, сыворотка крови, трупы мелких животных, паренхиматозные органы, лимфатические узлы, отрезок кишечника, абортированный плод
Морфология: Гр–, Споры–, Капсула–, Подвижность+. Палочки, располагаются одиночно или попарно, факультативные анаэробы
Рост: культивирование в 3 этапа:
*на накопительных средах(Мюллера, Килиана)
*пересев на элективные и дифференциально-диагностические среды(Эндо, Левина, Плоскирева, ВСА)
*пересев на дифференциально-диагностические среды пестрого ряда для биохимического исследования.
МПБ-помутнение, осадок; МПА-колонии серо-белого цвета; Эндо(розовая)-колонии мелкие розовые; Левина(цвета гнилой вишни)-бесцветные колонии; Плоскирева(кипично-красная)-серо-желтые колонии;
ВСА-блестящие черные колонии на зеленой среде;
3хсахарный агар Олькеницкого-скос красный, столбик желтый, черные пятна разрывы среды
Биохимические свойства Глюкоза+, Лактоза–, Маннит+, МПЖ–, H2S+, Индол–, Метиленовый красный+, на среде Симмонса с цитратом растет меняя её цвет с зеленого на синий
Биопроба: подкожно белых мышей
Серодиагностика: МФА, РА с живой культурой, РА с сывороткой крови
Признаки | Escherichia coli | Salmonella enterica |
1.Образование H2S | – | + |
2.Образование индола | + | – |
3.Расщепление лактозы | +(изредка –) | – |
4.Свертывание молока | + | – |
5.Колонии на Эндо | вишневые с мет.блеском | светло-розовые |
6.Колонии на Левина | фиол. или черн. с мет.блеск. | голубовато-сизые |
7.Колонии на Плоскирева | розовые | серо-желтые |
8.Висмут-сульфит агар(ВСА) | не растет (или мелк.зеленов.колонии) | черные |
9.Среда Симмонса с цитрат. | не растет | растет, среда синеет |
10.Рост на 3-х сахарном агаре (Олькеницкого) | желтый столбик | розовый скос, желтый столбик, черные пятна |
11.РА | с инакт. АГ + | с живым АГ + |
72) Характеристика возбудителя паратуберкулеза и проведение лабдиагностки.
Семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium, вид Mycobacterium paratuberculosis(расстройство деятельности ЖКТ, истощение, летальный исход);
Морфология: Гр+, Споры–, Капсула–, Подвижность–. Палочки, располагаются в виде скоплений кучек, редко поодиночке, аэробы. Окрашивают по Цилю-Нильсену(красные на синем фоне)
Рост: на простых питательных средах НЕ РАСТЕТ! Посев на специальные среды с добавлением экстракта бактерийной массы микобактерий тимофеевой травы(Myc.phlei). Экстракт добавляют к средам Петраньяни, Гельберга, Левенштейна, а также используют специальную жидкую среду Данкина. На плотных – сначала изолированные колонии, затем складчатое наложение. На жидких – беловато-сероватая пленка, которая со временем увеличивается в объеме и опускается на дно.
Биопроба: лабораторные животные не восприимчивы
Серодиагностика: РСК, аллергический метод с паратуберкулином
73) Лабораторная диагностика туберкулеза. Характеристика видов возбудителя и их дифференциация.
Семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium, вид Mycobacterium tuberculosis, M.bovis, M.avium(образование туберкул в органах и тканях, аэрогенное и алиментарное заражение);
В лабораторию молоко, моча, слизь, бронхиальные и средостенные лимфоузлы, плевра, отрезки кишечника
Морфология: Гр+, Споры–, Капсула–, Подвижность–. Палочки, располагаются в виде скоплений кучек, редко поодиночке, аэробы. Окрашивают по Цилю-Нильсену(красные на синем фоне). Кислото-спирто-щелочеустойчивые.
Рост: для культивирования патматериал измельчают, обрабатывают 607% р-ром серной кислоты, отмывают физраствором, делают мазки на питательные среды(метод Гона, Аликаевой), для жидкого материала – метод флотации с NaOH с ксилолом. Для выделения из патматериала среды Петраньяни, Гельберга, Левенштейна, для хранения –МППБ и глицериновый картофель. На жидких образуют пленку, на плотных – колонии цвета морской кости.
Метод Прайса: возбудитель образует микроколонии на стекле в жидкой кровяной среде, окрашивают по Цилю-Нильсену
Корд-фактор образуют только патогенные микобактерии – микроколонии в виде жгутов и кос.
Биохимические свойства: растет с салицилатом натрия, кислото-щелоче-устойчивость, сахаролитическая активность, синтез уреазы, синтез каталазы.
Биопроба: на лаб.животных
Серодиагностика: РСК, РГемА, РДиффузнойП, аллергический метод с туберкулином(вводят в толщу кожи, учитывают по утолщению кожной складки за счет отека при положительной реации)
Дифференциация видов: человеческий тип-15-20 дней рост, у морских свинок генерализация, у кроликов очаговая форма, у птиц-непатогенен; бычий тип 25-35 дней рост, у морских свинок и птиц как у человеческого, у кроликов генерализация; птичий тип растет 1-2 месяца, для морских свинок непатогенен, у кроликов сепсис, у птиц генерализация.
Bacillusantracis, ПОЧВЕННАЯ ИНФЕКЦИЯ
Болеют КРС, свиньи +человек. Труп вздут, окоченения нет, красн пена- трупы не вскрывая СЖИГАЮТ.
Морфология: Гр+, Споры+ , Капсула+ общая для цепочки, Подвижность–. Палочки в виде цепочек.
Рост: МПБ – прозрачн, на дне комочки в виде ваты, МПЖ – елочка верхушкой вниз, воронка разжижения (аэроб), МПА – R-колонии (голова медузы, грива льва), Агар с пенициллином – жемчужное ожерелье
Биопроба – мышам подкожно в корень хвоста 0,1мл, свинкам 0,2мл, кроликам 0,3мл.
Серологич – РП по Асколи (несвежий материал) и РДискП, МФА и ИФА
ПЦР-обнаружение генов, кодирующих синтез токсина и капсулы.
Аллергический метод-у людей вводят антраксин в предплечье (у больных,переболевших, привитых – зона воспаления больше 15мм)
60) Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы и эмфизематозного карбункула.
+спора меньше диаметра кл.
+спора больше диаметра кл.
+ (Гамма МВА, К-ВИЭВ)
9.МФА (на сибирскую язву)
61) Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы и антракоидов (сибиреязвенноподобных).
В природе существует несколько видов микроорганизмов морфологически похожих на возбудителя сибирской язвы. Это непатогенные почвенные бациллы такие как Bac.anhtracoides,pseudoanthracoides,cereus,subtilis.
+ (Гамма МВА, К-ВИЭВ)
9.Серолог.диагностика (МФА, РДискП)
62) Биопрепараты для диагностики профилактики и лечения сибирской язвы.
1. Живая вакцина из безкапсульного эталонного штамма СТИ
2. Живая вакцина из штамма 55
4. Ассоциированная живая жидкая вакцина против сибирской язвы и ЭМКАРа КРС
5. Гипериммунная лечебно-профилактическая сыворотка и гамма-глобулин
Диагностические биопрепараты:преципитирующая сыворотка и стандартный АГ для РП, люминесцирующие сыворотки для МФА, диагностические бактериофаги.
63) Патогенные анаэробы и болезни, вызываемые ими. Особенности взятия материала при анаэробных болезнях и проведения бакдиагностки (среды, условия).
Патогенные анаэробы относят преимущественно к клостридиям – это многочисленная группа почвенных, анаэробных, спорообразующих, палочковидных микроорганизмов, из них 12 патогенных: Сl.tetani– возбудитель столбняка(судороги);Cl.botulinum– возбудитель ботулизма(парезы и параличи гладкой мускулатуры);Cl.chauvoei– возбудитель ЭМКАРа(крепитирующие отеки в массивных группах мышц, хромотой, быстрой гибелью);Cl.perfringens,oedematiens,septicum,histolyticum,novyi,sordellii,sporogenes– возбудители злокачественного отека(отек и некроз травмированных тканей, лизис мышечной ткани с газообразованием, сепсис тканей, смерть);Cl.septicum,oedematiens,sordellii– возбудители брадзота овец(геморрагическое воспаление сычуга и 12-перстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально);Cl.perfringensтипC,D– возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии(геморрагический энтерит, кровоизлияния на слизистых, поражение почек, токсемия);Cl.perfringensтипB– возбудитель анаэробной дизентерии ягнят(общая токсемия, диарея, быстрая гибель, часто внезапная)
Кроме клостридий анаэробные инфекции вызывают микроорганизмы родов Fusubacteriumnecrophorum– возбудитель некробактериоза(гнойно-некротические поражения кожи, слизистой оболочки и конечностей);Bacteroidesnodosus– возбудитель копытной гнили(мацерация и воспаление кожи межкопытной щели, гнойно-гнилостным распадом копытного рога).
Материал на ЭМКАР, брадзот, инфекционную энтеротоксемию и другие клостридиозы следует брать не позже 3-4 часов после гибели животного, так как затем происходит быстрое размножение анаэробов в организме. При ЭМКАРе не вскрывать трупы-ПОЧВЕННАЯ ИНФЕКЦИЯ. Среды Китта-Тароцци, молоко с кусочками печени, сахарно-кровяной агар Цейслера. Для выделения чистой культуры материал прогревают на водяной бане при 80С в течение 10-60 минут, чтобы в нем остались только споры клостридий. Создают анаэробные условия.
Читайте также: