Взятие мазка на бактериологическое исследование на коклюш
Приложение 1
к приказу министерства здравоохранения
Нижегородской области и
Управления Нижегородской области
от 19 декабря 2012 г. N 3012/58-о
Порядок
взятия и транспортировки материала для бактериологической диагностики коклюша
1. Бактериологическое обследование с диагностической целью проводят в ранние сроки заболевания (но не позднее 3 недели) двукратно ежедневно или через день. Обследование при первичном обращении проводится до назначения лечения.
2. При госпитализации с подозрением на коклюш 2-кратное бактериологическое обследование на наличие возбудителя коклюша проводят в первые 3 дня поступления в стационар независимо от назначения антибиотиков.
3. Взятие материала может проводиться двумя способами: "кашлевыми пластинками" и заднеглоточными тампонами.
4. Забор материала заднеглоточными тампонами:
4.1. Взятие материала для исследования (носоглоточная слизь) осуществляется натощак или не ранее, чем через 2 часа после еды, а также до применения полоскания или других видов лечения.
4.2. Используются 2 заднеглоточных тампона одновременно - сухой, который сразу засевается на питательную среду, и увлажненный фосфатным буфером с углем (согласно инструкции по бактериологическому и серологическому исследованиям при коклюше и паракоклюше (1984)), который доставляется в бактериологическую лабораторию в течение 3 часов, где засевается на питательные среды.
4.3. Техника забора материала: шпателем, находящимся в левой руке, фиксируют корень языка, правой рукой вводят тампон в полость рта за корень языка, не касаясь слизистой языка, щек, миндалин. Кончиком тампона и его выпуклой частью касаются задней стенки глотки, делая два штриха справа - налево. Тампон извлекают из полости рта, также не касаясь слизистой языка, щек, миндалин.
4.4. Коммерческие транспортные среды для взятия материала на коклюш не применяются.
4.5. При заборе материала на коклюш можно использовать стерильные сухие ватные тампоны коммерческие (на деревянных палочках, не использовать дакроновые тампоны) или приготовленных # в лабораторных условиях с учетом требований инструкции по бактериологическому и серологическому исследованиям при коклюше и паракоклюше (1984). Тампоны должны иметь форму "капли", а не "веретена".
4.6. При невозможности доставки исследуемого материала в баклабораторию в установленные сроки, т.е. не позднее 3-х часов (удаленные территории, проведение обследования во второй половине дня, праздники), материал засевается на питательные среды и термостатируется при температуре 37°C до утра следующего дня, но не более 1 суток.
5. Метод "кашлевых пластинок":
5.1. Используют только с диагностической целью при наличии кашля. У детей грудного возраста взятие материала рекомендуется брать заднеглоточным тампоном.
5.2. Взятие материала "кашлевыми пластинками" производят на 2 чашки с питательной средой КУА. Во время приступа кашля левой рукой снимают крышку чашки, а правой подносят ее ко рту на расстоянии 10 - 12 см так, чтобы капельки слизи из дыхательных путей попали на поверхность среды. Чашку в таком положении держат некоторое время (в течение 6 - 8 кашлевых толчков). При непродолжительном покашливании можно эту чашку поднести повторно. На питательную среду не должны попадать слюна, рвотные массы, мокрота. Затем чашку с питательной средой закрывают крышкой и доставляют в лабораторию.
5.3. При невозможности доставки исследуемого материала в баклабораторию, материал помещается в термостат при температуре 37°C до утра следующего дня, но не более 1 суток.
6. Для обеспечения биологической безопасности и поддержания оптимальной температуры (+4°C - +37°C) в условиях термоконтейнеров осуществляется транспортировка:
- чашек с питательными средами и пробирок с увлажненными тампонами как из лаборатории к месту хранения, так и врачом к пациенту
- материал для исследования как на чашках, так и на тампонах в пробирках к месту посева.
7. В холодное время необходимо принимать меры по предотвращению замораживания материала (использование грелок).
8. В направлении материала на исследование указывается: наименование учреждения, направившего материал на исследование, фамилия, имя, отчество, возраст и домашний адрес обследуемого, причина обследования, дата заболевания, дата и время взятия материала, число обследований, наименование материала и метод его забора, подпись лица, взявшего материал.
9. Ответ при бактериологическом исследовании на коклюш выдается не ранее 5 суток.
> Порядок взятия и транспортировки материала для ПЦР-исследования на коклюш, паракоклюш и бронхосептикоз |
Содержание Приказ Министерства здравоохранения Нижегородской области и Управления Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей. |
Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Коклюш, паракоклюш, бронхисептикоз.
Коклюш - заболевание, продолжающееся минимум две недели, без явлений интоксикации и повышения температуры тела, протекающее с приступообразным кашлем, усиливающимся ночью и по утрам, сопровождающимся покраснением лица, шумными вдохами (репризами), заканчивающимся отхождением вязкой слизи или рвотой в конце приступа кашля.
Осложнения коклюша:
Специфические: эмфизема легких, эмфизема средостения и подкожной клетчатки, ателектазы, коклюшная пневмония, нарушения ритма дыхания (задержки дыхания - до 30 с; остановки - апноэ - более 30 с), нарушение мозгового кровообращения, кровотечения (из носа, заднеглоточного пространства, бронхов, наружного слухового прохода), кровоизлияния (в кожу и слизистые оболочки, склеру и сетчатку глаз, головной и спинной мозг), грыжи (пупочная, паховая), выпадение слизистой оболочки прямой кишки, разрывы барабанной перепонки и диафрагмы.
Неспецифические осложнения обусловлены наслоением вторичной бактериальной флоры (пневмония, бронхит, ангина, лимфаденит, отит и др.). Резидуальные явления: хронические бронхолегочные заболевания (хронический бронхит, бронхоэктатическая болезнь); задержка психомоторного развития, неврозы, судорожный синдром, различные речевые расстройства; энурез; редко - слепота, глухота, парезы, параличи.
Лабораторная диагностика
Лабораторные исследования проводят с диагностической целью и по эпидемическим показаниям:
1) с диагностической целью:
- детям, кашляющим в течение 7 дней и более, независимо от указаний на контакт с больным коклюшем;
- детям с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания по клиническим данным; - взрослым с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания, работающим в родильных домах, детских больницах, санаториях, детских образовательных учреждениях и школах, в т.ч. закрытого типа;
2) по эпидемическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больным):
- детям, посещающим детские образовательные учреждения, находящимся в детских больницах, санаториях, в которых были выявлены больные коклюшем/паракоклюшем, а также всем детям до 14 лет, общавшимся с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях;
- взрослым, работающим в указанных выше детских учреждениях, при выявлении в них больных коклюшем/паракоклюшем, а также при общении с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях.
Диагноз "коклюш, вызванный B. pertussis" ставится при подтверждении клинического диагноза "коклюш" хотя бы одним из указанных методов:
- выделение культуры B. pertussis; - обнаружение специфического фрагмента генома B. pertussis методом ПЦР; - у привитых детей и взрослых: выраженная сероконверсия, т.е. увеличение или уменьшение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA (ИФА) или уровня агглютинирующих антител (РА) при исследовании парных сывороток, взятых с интервалом не менее 2 недель;
- у взрослых: допустимо однократное обнаружение специфических IgM (ИФА); - у непривитых детей: однократное обнаружение специфических IgM, и/или IgA, и/или IgG (ИФА) или антител в титре 1/80 и более (РА).
Диагноз "коклюш, вызванный B. parapertussis" ставится в случае: - выделения культуры B. parapertussis; - или при обнаружении фрагмента генома B. parapertussis методом ПЦР;
- или при обнаружении антител к B. parapertussis методом РА в титре не менее 1/80.
Диагноз "бронхисептикоз" ставится при выделении культуры B. bronchiseptica или при обнаружении специфического фрагмента генома B. bronchiseptica методом ПЦР.
Обследование методом ПЦР нередко оказывается эффективнее бактериологического метода в более поздние сроки заболевания и на фоне лечения антибиотиками.
Материал для исследования:
1.мазки со слизистой нижнего носового хода и задней стенки ротоглотки
2. культуры микроорганизмов.
Взятие мазков со слизистой нижнего носового хода
Мазки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с тампоном) помещают до места слома в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают и маркируют.
Взятие мазков из ротоглотки
Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с вискозными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки.
После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с вискозным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают, маркируют.
Хранение
Допускается хранение клинического материала до проведения исследования в течение 3 суток при температуре от 2 до 8 °С или 1 неделю – при температуре не выше минус 16 °С.
ВНИМАНИЕ! САЙТ ЛЕКЦИИ.ОРГ проводит недельный опрос. ПРИМИТЕ УЧАСТИЕ. ВСЕГО 1 МИНУТА.
Цель: собрать материал для бактериологического исследования.
Показания:обследование детей с подозрением на менингококковую инфекцию, коклюш, обследование контактных в период карантина, выявление бактерионосителей.
Противопоказания: нарушение целостности слизистых оболочек верхних дыхательных путей.
Оснащение:резиновые перчатки, маска, стерильная пробирка с сухим ватным изогнутым тампоном (если тампон не изогнут, извлеките его на 2 /3 длины и слегка изогните о внутреннюю стенку пробирки под углом 135° на расстоянии 3—4 см от нижнего конца и вновь поместите в стерильную про бирку), штатив для пробирок, стерильный шпатель в лотке, бланк-направление в лаборатортю.
Обязательные условия: пробирки с тампонами на металлической петле хранить в холодиль-> нике и использовать в течение 2—3 дней (на пробирке должна быть g указана дата изготовления), забор материала из носоглотки проводить натощак, до орошения или полоскания горла.
Этапы | Обоснование |
1.Объяснить маме/ребенку цель и ход проведения исследования, получить согласие | Обеспечение права на информацию, участие в исследовании |
2. Подготовить необходимое оснащение. Выписать направление в бактериологическую лабораторию | Обеспечение четкости выполнения исследования |
3. Вымыть и осушить руки, надеть маску, перчатки | Обеспечение инфекционной безопасности |
4. Поставить на инструментальный столик необходимое оснащение (расположив по правую руку) | Создание удобства при проведении исследования |
5. Усадить ребенка лицом к источнику света и при необходимости зафиксировать его с помощью помощника: а) ноги ребенка помощник обхватывает своими ногами; б) руки и туловище фиксирует одной рукой; в) голову держит, положив ладонь другой руки на лоб ребенку | Необходимое условие для проведения исследования |
6. Попросить ребенка широко открыть рот и шпателем нажать на корень языка. Примечание: ребенку младшего возраста открыть рот с помощью шпателя, взяв его как писчее перо левой рукой, ввести в ротовую полость до зубов, повернуть ребром и провести по боковой поверхности десен до места окончания зубов, после чего перевернуть его плашмя, поместить на корень языка и резко нажать на него | Обеспечение доступа для проведения исследования |
7. Извлечь ватный тампон из пробирки, взяв его правой рукой за пробку, в которую он вмонтирован | Обеспечение достоверности результата |
8. Осторожно, не касаясь языка, зубов, слизистой оболочки полости рта, ввести тампон по шпателю: — изогнутым концом вверх, под мягкое небо (за язычок) в носоглотку при обсле довании на менингококк; — изогнутым концом вниз по задней стенке при обследовании на коклюш | Место максимальной локализации данных бактерий |
9. Двумя-тремя легкими движениями собрать слизь с задней стенки глотки | Условие, обеспечивающее эффективность |
10. Извлечь тампон из ротовой полости и поместить в пробирку, не касаясь ее краев | Обеспечение достоверности результата |
11. Вымыть и обработать антисептическим материалом руки в перчатках. Снять маску, перчатки. Вымыть и осушить руки | Обеспечение инфекционной безопасности |
12. На менингококк — немедленно отправить материал в бактериологическую лабораторию в сопровождении направления при температуре 36—39 °С (в контейнерах с грелками). На коклюш — доставить в бактериологическую лабораторию не позже 5 ч после забора материала | Обеспечение достоверности исследования. Менингококк и палочка Борде—Жангу неустойчивы во внешней среде |
Примечания: наиболее часто возбудитель высевается в первые дни болезни при менингококковой инфекции и в первые 2 недели — при коклюше; взятие материала производят натощак или через 2-3 ч после еды, полоскания полости рта антисептическими растворами;
при доставке в лабораторию его необходимо беречь от охлаждения, поэтому пробирки транспортировать срочно между слоями пеленки в биксе, на дне которого находится грелка с водой температуры 36-37 °С, результат посева получают через 72 ч.
Многие считают, что коклюш — детская инфекция, редко встречающаяся и легко протекающая. В действительности и коклюш, и паракоклюш становятся все более серьезной проблемой в мире из-за тяжелого течения и наличия атипичных, или стертых, форм. В этой статье мы расскажем, как вовремя распознать это непростое заболевание.
Коклюш — острое инфекционное заболевание, поражающее преимущественно детский организм и сопровождающееся спазматическим кашлем. Инфекция передается воздушно-капельным путем: при кашле, чихании и даже во время разговора.
Коклюш вызывает бактерия Bordetella pertussis, которая попадает в дыхательные пути и прикрепляется к клеткам эпителия. В результате микроскопические реснички, помогающие выводить мокроту и очищать бронхи, повреждаются. Бактерия начинает размножаться и выделять несколько видов токсинов, которые и приводят к появлению симптомов.
Первый симптом коклюша — ночной кашель. Постепенно он усиливается и появляется днем. Так может продолжаться до двух недель. Со временем состояние ухудшается, кашель становится спастическим, или спазматическим. Во время приступа человек с трудом может вдохнуть, напрягается, лицо становится красным или даже синеватым, появляется ощущение нехватки воздуха. Приступ такого мучительного кашля иногда заканчивается рвотой или выделением очень густой стекловидной мокроты.
Проблема своевременной диагностики заключается в том, что патология начинается с незначительных симптомов. Сухое покашливание ночью или перед сном напоминает кашель при ОРВИ. Температура тела больного может как незначительно повыситься на несколько дней, так и остаться нормальной. Общее самочувствие инфицированного почти не страдает. И только когда появляются более серьезные симптомы, врачи начинают задумываться о полноценной лабораторной диагностике коклюша.
Еще в начале прошлого столетия коклюш считался одной из самых опасных инфекций, он ежегодно становился причиной смерти тысяч детей. Но даже на современном уровне развития медицины коклюш может протекать очень тяжело.
Исследования, проведенные в 2000-е годы, указывают на значительное увеличение за последнее десятилетие доли тяжелых и среднетяжелых случаев коклюша. Если в 1990-х годах регистрировалось только 18,6% тяжелых форм болезни, то в 2000-е — уже 43,2%.
Токсины, которые выделяет возбудитель коклюша, поражают дыхательный центр в головном мозге. Из-за этого возникает нарушение дыхания, в крови становится меньше кислорода, увеличивается содержание углекислого газа. Возникает гипоксия — кислородное голодание. Поражаются сосуды, развивается повреждение головного мозга (энцефалопатия). В крови увеличивается количество лимфоцитов и лейкоцитов.
К осложнениям коклюшной инфекции относят ателектаз легкого (сближение и сжатие стенок легкого, сопровождающееся выходом воздуха с данного участка), кровоизлияния на коже и в конъюнктиву глаза, поражение сосудов, энцефалопатию, легочное сердце. Из-за снижения иммунитета часто присоединяется вторичная инфекция, развивается бронхит или пневмония.
Паракоклюш — острое инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Bordetella parapertussis. Она очень похожа по своему строению на возбудитель коклюша и поэтому вызывает практически такие же симптомы.
Раньше считалось, что паракоклюш — более легкое заболевание. Но последние исследования доказали, что он тоже может привести к тяжелому судорожному кашлю, рвоте и нарушению дыхания. Единственное клиническое отличие этого заболевания от коклюша — отсутствие повышения уровня лейкоцитов в крови.
Особо тяжелые последствия наблюдаются при заражении взрослых и подростков. По данным серологических исследований, проведенных в США, 12–21% взрослых с кашлем более 2 недель могут болеть коклюшем. В России ситуация примерно такая же. Согласно исследованиям ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, проведенным в очагах коклюша, после контакта с зараженным заболело 23,7% взрослых.
Существуют бактериологические, серологические и ПЦР-методы диагностики коклюша и паракоклюша. Биологический метод (посев материала из носоглотки и культивирование его на питательной среде) информативен на раннем этапе. В первые дни болезни он дает достоверный результат в 86–98% случаев. Но со временем показатели точности снижаются до 15–20%. Особенно если ребенок начинает принимать антибиотики.
Каждый из анализов на коклюш имеет свои особенности, показания, принципы интерпретации результатов. Давайте разберем их все.
Этот анализ проводят в катаральном периоде заболевания, то есть в первые дни появления кашля. Исследование назначают после контакта с больным коклюшем, особенно если у ребенка нет прививок или нет данных об их проведении.
Чувствительность теста колеблется в зависимости от качества и сроков исследования от 20 до 90%. При этом анализ выявляет и коклюш, и паракоклюш. В более поздний период заболевания и при приеме антибиотиков его результативность сильно снижается. Исследование проводится натощак, через 2–3 часа после питья или еды. Материал забирают в среднем на 5–7 день заболевания двукратно: два дня подряд или через день. Мазок берется с поверхности ротоглотки.
Биоматериал помещают в специальную емкость и направляют в лабораторию. Там проводится посев материала на питательную среду. Через несколько дней проводится микроскопическое исследование выросших колоний бактерий. Предварительный результат обычно можно получить на 3–5 день, окончательный — на 5–7 день.
Наличие Bordetella в организме говорит или о заболевании коклюшем (паракоклюшем), или о бессимптомном носительстве. Лечение необходимо в любом из этих случаев.
Исследование проводят при подозрении на инфекционное заболевание, при кашле, повышении температуры и практически при любых заболеваниях. Анализ может дать информацию о наличии воспаления в организме, но что послужило причиной, на его основании сказать нельзя.
Кровь забирают натощак и отвозят в лабораторию. Само исследование проводится или на специальном гемоанализаторе, или с помощью ручного подсчета клеток крови.
Результаты анализа крови при коклюше у детей нельзя анализировать без учета клинической картины и данных других методов исследования. При заражении коклюшной инфекцией значительно повышается количество лейкоцитов и лимфоцитов, при этом скорость оседания эритроцитов (СОЭ) остается в пределах нормы. При паракоклюше повышения лейкоцитов не наблюдается.
При проведении анализа на антитела к коклюшу выявляют три вида иммуноглобулинов — IgA, IgG и IgM.
ИФА назначают при подозрении на коклюш, часто на поздних стадиях болезни, когда бактериологическое исследование уже неэффективно. То есть начиная со 2-3 недели заболевания. Диагностическая чувствительность этого метода — 66,6%, специфичность — 100%.
Забор крови проводится натощак, не раньше чем через 4 часа после последнего приема пищи. После этого из крови выделяют сыворотку, которая и является материалом для исследования. Собранный материал отправляется в лабораторию, где проводится серологический анализ на коклюш методом ИФА.
Исследование можно проводить в течение первых 4-х недель заболевания. Чувствительность этого теста превосходит бактериологическое исследование во много раз. Специфичность метода —100%.
Мазок берется из носа или из ротоглотки. Забор материала желательно проводить натощак или через 2-3 часа после питья и еды. Предварительно полоскать рот не нужно.
В лаборатории в забранном материале определяются специфические участки ДНК бактерии, которая вызывает коклюш. Положительный результат говорит о заболевании коклюшем или о бактерионосительстве.
Не стоит самостоятельно выбирать тип анализа на коклюш, необходимо проконсультироваться со специалистом. И помните, на результат исследования влияет качество подготовки и проведения: техника взятия материала, условия транспортировки, состояние питательных сред.
В среднем определение каждого типа иммуноглобулинов обойдется в 700–850 рублей. Бактериологический анализ на коклюш будет стоить уже дороже — от 850 до 1400 рублей. Ценовая разница при ПЦР-тестировании составляет от 300 до 800 рублей.
При этом стоит учесть расходы на взятие анализа крови (100–150 рублей) или мазка (200–250 рублей). Дополнительно клинический анализ крови с определением СОЭ будет стоить примерно 400–460 рублей.
Комплексное исследование, направленное на диагностику коклюша и паракоклюша, а также на оценку эффективности вакцинации против коклюша.
Возбудители коклюша, паракоклюша; комплексное обследование.
Синонимы английские
Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis; comprehensive examination.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь, мазок из носоглотки, мазок из зева (ротоглотки).
Как правильно подготовиться к исследованию?
- За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
Общая информация об исследовании
Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию. Возбудитель – Bordetella pertussis (палочка Борде - Жонгу), мелкая неподвижная грамотрицательная коккобацилла, строгий аэроб. Инфекция передается воздушно-капельным путём. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса.
В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный период (длительностью от нескольких дней до двух недель), катаральный (от 5-8 до 11-14 дней), пароксизмальный, или спазматический (2-8 недель), разрешения (2-4 недели) и реконвалесценции (2-6 месяцев). Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, лихорадка, слабость, в гемограмме – лейкоцитоз, лимфоцитоз. Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста, возможно развитие осложнений со стороны бронхолегочной и нервной систем. У взрослых и лиц после вакцинации коклюш чаще протекает в легкой, атипичной форме, как правило, без осложнений.
Паракоклюш – это острая бактериальная инфекция респираторного тракта, поражающая детей и взрослых. Возбудителем инфекции является аэробная палочка Bordetella parapertussis. Клинические проявления данного заболевания схожи с картиной коклюша, характерна более стертая смена периодов, легкое течение, редкое развитие осложнений, преимущественно у детей.
Диагностика коклюша и паракоклюша основана на клинико-эпидемиологических данных, результатах изменений в клиническом анализе крови и подтверждается лабораторными методами. В клинической лабораторной диагностике данных заболеваний применяют несколько методов: бактериологический метод для выявления роста колоний возбудителей коклюша/паракоклюша; серологический метод, направленный на определение суммарных антител к данным возбудителям; метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – для выявления генетического материала возбудителя коклюша.
Бактериологическое обследование является первым этапом диагностики, но позволяет выявлять возбудителей только на ранних сроках заболевания, в первые 2-3 недели.
Метод ПЦР является высокоэффективным в диагностике коклюша, позволяет выявлять фрагменты ДНК возбудителя B. pertussis в исследуемом биоматериале, обладает высокой диагностической специфичностью, достигающей 100 %. Использование данного метода рекомендовано в первые три недели от начала клинических проявлений заболевания, то есть в катаральный и ранний пароксизмальный период. В более поздние сроки заболевания диагностическая чувствительность метода падает. Следует отметить, что в отличие от других лабораторных методов ПЦР эффективна на фоне лечения антибактериальными препаратами. Также она используется при обследовании детей раннего возраста, в отличие от более старших детей и взрослых, когда возможно возрастание числа ложноположительных результатов. У лиц, вакцинированных против коклюша, положительный результат данного метода может свидетельствовать о транзиторном носительстве патогена, а не об активной форме заболевания.
Серологическое обследование позволяет выявлять в сыворотке крови специфические антитела, направленные к антигенам возбудителей B. pertussis и B. parapertussis. Они могут быть обнаружены с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).
При выборе РНГА в качестве диагностического теста при подозрении на коклюш и паракоклюш следует учитывать клинический период заболевания, возраст пациента и наличие предшествующей вакцинации. Для подтверждения диагноза необходимо определение нарастания титра антител в четыре и более раза в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней. Реакцию ставят параллельно с коклюшным и паракоклюшным антигеном. Серологическое обследование рекомендовано применять в период 3-6 недель от начала первых клинических симптомов заболевания, характеризующий пароксизмальный период коклюша. Данный метод не рекомендуется применять детям до 3 месяцев, так как иммунная система новорождённых в это время ещё незрелая и могут быть обнаружены материнские антитела в низких титрах. Также не рекомендуется проводить серологическое исследование лицам в течение 1 года после вакцинации против коклюша вследствие невозможности различить иммунный ответ на вакцинацию или на первичную инфекцию. Титр антител к B. pertussis может быть определен для оценки эффективности прививки против коклюша у детей.
Для чего используется исследование?
- Для комплексной лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша.
- Для диагностики коклюша в первые три недели от начала заболевания, характеризующие катаральный и ранний пароксизмальный период, а также на фоне лечения антибактериальными препаратами.
- Для диагностики коклюша и паракоклюша в спазматический (пароксизмальный) период заболевания.
- Для оценки эффективности вакцинации против коклюша.
Когда назначается исследование?
- При клинических проявлениях коклюша/паракоклюша: сухой спастический кашель, сопровождающийся глубоким свистящим вдохом, рвотой, цианозом носогубного треугольника, акроцианоз, лихорадка, слабость, насморк, слезотечение.
- При обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными коклюшем/паракоклюшем.
- При оценке эффективности вакцинации против коклюша.
Что означают результаты?
1. anti-Bordetella pertussis
Титр: после вакцинации: 1:160.
2. anti-Bordetella parapertussis
Титр: Bordetella pertussis, ДНК
Результат: не обнаружено.
Причины положительного результата:
- коклюш;
- паракоклюш;
- транзиторное носительство;
- иммунный ответ после вакцинации.
Причины отрицательного результата:
- отсутствие коклюша/паракоклюша;
- неэффективная вакцинация против коклюша;
- снижение иммунологического ответа после вакцинации;
- ложноотрицательные результаты.
Что может влиять на результат?
- Клинический период заболевания, возраст пациента, наличие предшествующей вакцинации;
- применение антибактериальных препаратов в зависимости от стадии (периода) заболевания и применяемого метода лабораторной диагностики;
- особенности иммунного ответа у новорождённых детей;
- предшествующая вакцинация.
- При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать методы диагностики, возраст пациентов, клиническую стадию (период) заболевания, предшествующую вакцинацию.
- Для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.
- Посев на Bordetella pertussis/parapertussis
- Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
Кто назначает исследование?
Инфекционист, педиатр, пульмонолог, оториноларинголог, терапевт, врач общей практики.
Читайте также: