Планктон. Диатомный планктон при утоплении

Добавил пользователь Владимир З.
Обновлено: 21.12.2024

Алматинский филиал РГКП "Центр судебной медицины" Минздрава Республики Казахстан Казахского национального медицинского университета им. С.Д. Асфендиярова, Алматы

Акционерное общество "Медицинский университет Астана", Астана

Алматинский филиал РГКП "Центр судебной медицины" Минздрава Республики Казахстан Казахского национального медицинского университета им. С.Д. Асфендиярова, Алматы

Усовершенствование методики обнаружения диатомового планктона в трупе при экспертизе утопления

Журнал: Судебно-медицинская экспертиза. 2013;56(1): 35‑38

Алтаева А.Ж., Галицкий Ф.А., Айдаркулов А.Ш. Усовершенствование методики обнаружения диатомового планктона в трупе при экспертизе утопления. Судебно-медицинская экспертиза. 2013;56(1):35‑38.
Altaeva AZh, Galitskiĭ FA, Aĭdarkulov ASh. The updated techniques for the detection of diatomic plankters in the corpse after death by drowning. Sudebno-Meditsinskaya Ekspertisa. 2013;56(1):35‑38. (In Russ.).

Алматинский филиал РГКП "Центр судебной медицины" Минздрава Республики Казахстан Казахского национального медицинского университета им. С.Д. Асфендиярова, Алматы

Описываются исследования, проведенные в целях совершенствования метода обнаружения диатомового планктона при судебно-медицинской экспертизе утопления. Авторами предложены способы исследования диатомового планктона в крови, перикардиальной жидкости и содержимом пазухи основной кости черепа для дифференциальной диагностики смерти от утопления с описанием особенностей изъятия трупного материала, его пробоподготовки и микроскопического исследования в темном поле и фазовом контрасте. Достоверно установлено, что применение разработанных способов исследования биологических жидкостей трупа на диатомовый планктон способствует сохранению всех видов диатомей, соответственно значительно повышается качество и сокращаются сроки проведения судебно-медицинских экспертиз.

Алматинский филиал РГКП "Центр судебной медицины" Минздрава Республики Казахстан Казахского национального медицинского университета им. С.Д. Асфендиярова, Алматы

Акционерное общество "Медицинский университет Астана", Астана

Алматинский филиал РГКП "Центр судебной медицины" Минздрава Республики Казахстан Казахского национального медицинского университета им. С.Д. Асфендиярова, Алматы

Утопление является одной из трудно диагностируемых причин смерти при обнаружении трупа в воде.

В практической деятельности судебно-медицинского эксперта в случаях исследования трупа, извлеченного из воды, практически всегда возникает вопрос о прижизненном или посмертном попадании тела человека в воду. При аутопсии не всегда присутствуют достоверные макроскопические признаки смерти от утопления. В связи с этим актуальным направлением судебно-медицинских исследований в диагностике смерти от утопления является поиск эффективных лабораторных методов.

Цель настоящего исследования — совершенстование метода обнаружения диатомового планктона в биологических жидкостях трупа (кровь, перикардиальная жидкость — ПЖ), в почках, а также в содержимом пазухи основной кости черепа (СПОКЧ) при судебно-медицинской экспертизе утопления.

Материал и методы

Объектами судебно-медицинского исследования являлись 322 трупа лиц мужского (70,2%) и женского (29,8%) пола в возрасте от 1 года до 75 лет, умерших от «механической асфиксии в результате закрытия дыхательных путей водой — утопления» (272 случая), черепно-мозговой травмы, огнестрельных ранений и др. (50 случаев).

Исследуемый материал был разделен на две группы:

«Утопление» — 272 трупа,

«Контроль» — 50 трупов.

В обеих группах для исследования брали кровь из правого желудочка сердца (КПЖС), кровь из левого желудочка сердца (КЛЖС), ПЖ, СПОКЧ, минерализат почки (МП) на предмет обнаружения в них диатомового планктона.

Вскрытие трупов проводили по общепринятому методу (метод Шора). Секционные инструменты и лабораторную посуду, использованные в ходе исследований, предварительно многократно споласкивали дистиллированной водой или обрабатывали паром. Для изъятия биологических жидкостей трупа использовали стерильные одноразовые шприцы марки Hayat 2 Pieces Syringes — 5, 10 и 20 мл.

Для проведения сравнительных исследований на диатомовый планктон использовали традиционный метод исследования МП, при этом выделение диатомей осуществляли путем разрушения ткани почек под воздействием концентрированных кислот и процесса кипячения, из полученного минерализата «методом обогащения» изготавливали препараты для микроскопического исследования диатомового планктона. Результаты исследования МП сравнивали с данными, полученными разработанными способами исследования биологических жидкостей трупа (кровь, ПЖ и СПОКЧ).

Изъятие трупного материала проводили следующим образом: до эвисцерации внутренних органов на перикардиальной сорочке секционным ножом делали разрез, через который вводили шприц и набирали ПЖ (͌ 5—10 мл). Далее извлекали сердце, последовательно на стенке левого желудочка, затем правого делали разрезы, через которые вводили шприц и набирали кровь. Если кровь отсутствовала, делали смывы дистиллированной водой в количестве не менее 500—1000 мл. При вскрытии черепной коробки, после извлечения головного мозга и удаления гипофиза, верхнюю стенку пазухи основной кости скалывали долотом, рассекали ее слизистую оболочку и содержимое собирали стерильным марлевым тампоном со стенок пазухи.

Пробоподготовку биологических жидкостей трупа проводили следующим образом:

1. ПЖ капали на предметные стекла (по 2—3 капли на стекло) и высушивали при комнатной температуре, заключали в полистирол (канадский бальзам или смолу Эльяшева), покрывали покровными стеклами и маркировали.

2. Кровь помещали в колбу, добавляли дистиллированную воду в соотношении 1:10, размешивали стеклянной палочкой 15—30 мин. Затем осторожно добавляли 3% водный раствор перекиси водорода в количестве 5—10 капель (для просветления). Полученную жидкость разливали в пробирки и центрифугировали в течение 3—5 мин при 3000 об/мин. Из каждой пробирки 2 /3 верхней части жидкости осторожно удаляли пипеткой, оставшуюся 1 /3 сливали в пробирки и снова центрифугировали, процедуру повторяли до тех пор, пока не получали одну пробирку с 2—5 мл осадочной жидкости, которую пипеткой наносили на предметные стекла (по 2—3 капли на стекло), высушивали, заключали в полистирол (канадский бальзам или смолу Эльяшева), покрывали покровными стеклами и маркировали.

3. Марлевый тампон, пропитанный СПОКЧ, помещали в колбу вместимостью 150—200 мл, добавляли 50—100 мл дистиллированной воды, размешивали стеклянной палочкой 15—30 мин. Затем тампон удаляли, предварительно отжав его о стенки колбы. Полученную жидкость разливали в пробирки. Дальнейшие процедуры те же, что при подготовке проб крови.

Микроскопическое исследование проводили в проходящем свете методом темного поля и фазово-контрастной микроскопии, используя бинокулярный цифровой микроскоп Leica DM4000B: окуляры — 10х; объективы — 5х, 10х, 20х, 40х. Фотографирование обнаруженных диатомей проводили цифровой камерой Leica DFC420.

При статистической обработке полученных результатов применяли общепринятые методы статистики с использованием компьютерной прикладной программы Microsoft Excel и Statgraf v.4.0. Достоверность полученных результатов оценивали с использованием t-критерия Стьюдента (коэффициент достоверности).

Для количественной оценки полученных результатов обнаружения диатомового планктона использовали 5-балльную шкалу: планктон не обнаружен — 1 балл, обнаружено до 20 экземпляров диатомей — 2 балла, от 20 до 50 — 3 балла, от 50 до 100 — 4 балла, от 100 экземпляров диатомей и более — 5 баллов.

Для оценки видового разнообразия диатомового планктона также использовали 5-балльную шкалу: планктон не обнаружен — 1 балл, обнаружено до 5 видов планктона — 2 балла; от 5 до 10 видов — 3 балла, от 10 до 15 — 4 балла, от 15 видов и более — 5 баллов.

Результаты и обсуждение

В ходе проведения микроскопического исследования группы «Контроль» (n=50) методом темного поля и фазово-контрастной микроскопии ни в одном из объектов МП, КПЖС, КЛЖС и ПЖ диатомовый планктон не был обнаружен. Из этого следует, что в случаях смерти, не связанных с утоплением, диатомовый планктон не обнаруживается. Микроскопическое исследование СПОКЧ в группе «Контроль» не удалось провести, так как ни у одного из трупов в пазухе основной кости черепа жидкость не была обнаружена.

При сравнительном микроскопическом исследовании МП, КПЖС и КЛЖС количественные показатели диатомей, выявленных предлагаемым способом определения диатомового планктона в КЛЖС, преобладали над таковыми, полученными традиционным методом исследования МП, достоверность различий p≥0,05. При микроскопическом исследовании МП, КПЖС и КЛЖС проводился учет всех видов обнаруженных диатомей, которые мы сопоставляли с диатомовым планктоном, обнаруженным в воде из места утопления (обнаружения) трупа. При этом выявленные экземпляры диатомей в крови правого и левого желудочков сердца по видовому разнообразию были идентичны тем, которые были выявлены в водных источниках, за исключением тех нескольких видов, форма панциря и размер которых являлись непреодолимым препятствием для попадания в организм, т.е. размером свыше 100 мкм. Экземпляры, выявленные в МП, по видовому разнообразию существенно отличались от обнаруженных в воде, так как в процессе минерализации ткани почки были полностью уничтожены мелкие, самые ценные в диагностическом отношении, виды диатомей, которые легко проникают в кровеносное русло при утоплении. В крови мы обнаруживали большое видовое разнообразие диатомового планктона в виде мелких колоний и единичных экземпляров. Диатомеи, обнаруживаемые в МП, были представлены прозрачными «скелетиками» панцирей диатомового планктона, так как органические структуры их были уничтожены в процессе минерализации. При сравнительном анализе полученных показателей видового разнообразия диатомового планктона в МП и в крови группы «Утопление» достоверность различий составила p≤0,001. Проведенные исследования показывают, что предлагаемый способ обнаружения диатомового планктона в крови является высокодостоверным лабораторным методом диагностики смерти от утопления по сравнению с традиционным методом исследования МП. Обнаружение диатомового планктона в правом отделе сердца нами объясняется следующим образом: под воздействием некоторых факторов (психоэмоциональный фактор — страх; алкогольное опьянение или похмельное состояние; переполнение желудка пищей; воздействие холодной воды на кожные покровы при разнице температуры воды и воздуха ͌ 20—25 °С) развивается спазм сосудов микроциркуляторного русла, что способствует централизации кровообращения и сбросу ͌ 50% объема крови по артериовенозным анастомозам в венозный кровоток, далее диатомовый планктон попадает в правый отдел сердца, это происходит при достаточно длительно продолжающейся сердечной деятельности во время утопления.

Нами проводились исследования ПЖ с целью определения в ней диатомового планктона для диагностики смерти от утопления. С целью сравнения эффективности предлагаемого способа мы решили сопоставить его с традиционным методом исследования МП. Диатомовый планктон в ПЖ был обнаружен в 159 случаях из 272, что соответствует 58% случаев смерти от утопления; в МП диатомовый планктон был обнаружен в 183 (67%) объектах; процент обнаружения диатомей в МП (67,28±2,83) превышает показатели в ПЖ (58,46±3,02). Однако необходимо принять во внимание количество исследованных препаратов от каждого объекта, так как при сравнении количества обнаруженных диатомей в МП и ПЖ следует учитывать то, что из одного объекта МП мы изготавливали от 10 до 15 препаратов, а из ПЖ — всего по 2—5 препаратов. В процессе микроскопического исследования в ПЖ обнаруживали более разнообразные виды диатомей. Видовое разнообразие в МП было меньшим — обнаруживали до 5 видов диатомей, в то время как в ПЖ — до 15 видов диатомового планктона, преимущественно мелких размеров. Это различие в обнаруживаемом видовом составе диатомей мы связывали с процессом минерализации, так как в МП оставались лишь наиболее устойчивые к действию концентрированных кислот и процессу кипячения формы, что и влияло на уменьшение видового разнообразия диатомей в МП в отличие от ПЖ. У всех обнаруженных видов диатомей нами отмечены характерные особенности, которые позволяют им проникать в кровеносное русло, далее в ПЖ и ткань почки при утоплении: во-первых, это очень маленький размер, преимущественно до 50 мкм, во-вторых, удлиненная и обтекаемая форма створок с двусторонним симметричным расположением структурных элементов. Также проводили сопоставление видов диатомей, выявленных в МП и ПЖ и присутствующих в воде водоема, из которого был доставлен труп. При этом выяснили, что диатомовый состав, обнаруживаемый в ПЖ трупов, был идентичен альгологической характеристике того водоема, где произошло утопление, за исключением крупных экземпляров диатолий, форма и размер панциря которых препятствуют их проникновению в организм человека при утоплении.

Согласно данным наших исследований СПОКЧ, лишь в 54% случаев смерти от утопления обнаруживаются слизеобразные массы (жидкость) — положительный признак Свешникова. Так же как и при исследовании ПЖ, при сравнении количества обнаруженных диатомей в МП и СПОКЧ следует учитывать тот факт, что из одного объекта МП мы изготавливали 10—15 препаратов, а из СПОКЧ — всего по 2—5 препаратов, поэтому важно принять во внимание и количество препаратов от каждого объекта исследования. Вместе с диатомовым планктоном в СПОКЧ обнаруживали споры и семена различных растений, простейшие, зоопланктон, а также крупинки песка. В 46% случаев смерти от утопления жидкость в пазухе основной кости отсутствовала; в 54% случаев смерти от утопления мы находили различное количество жидкости или слизеобразной массы, которую подвергали микроскопическому исследованию методом темного поля и фазового контраста, при этом в СПОКЧ обнаруживали различное количество диатомей: в 15% — до 20 экземпляров диатомового планктона, в 19% — до 50, в 13% — до 100 и в 7% — более 100 экземпляров диатомового планктона. Проводилась сравнительная оценка количества обнаруженных диатомей в СПОКЧ в МП (достоверность различий составила p≥0,05). В ходе исследования МП и СПОКЧ нами проводился учет всех видов выявленных диатомей, которые мы сопоставляли с диатомовым планктоном, обнаруженным в воде из места утопления (обнаружения) трупа. При этом выявленные экземпляры диатомей в СПОКЧ по видовому разнообразию были абсолютно идентичны тем, которые были обнаружены в водных источниках. В МП во всех исследованных случаях (183) мы обнаруживали до пяти видов диатомового планктона. При исследовании объектов СПОКЧ у 1 трупа было выявлено до пяти видов диатомового планктона, это мы связываем с периодом диатомового минимума, так как этот случай утопления был в зимний период, который характеризуется уменьшением количества диатомей в единице объема воды в связи с изменением физических параметров окружающей среды. Во всех остальных случаях утопления нами было обнаружено большое видовое разнообразие диатомового планктона; надо еще отметить тот факт, что все эти случаи смерти от утопления произошли в летний период времени — в период диатомового максимума, который характеризуется увеличением количества диатомей в связи с активной их вегетацией. При сравнительном анализе полученных показателей видового разнообразия диатомового планктона в МП и СПОКЧ достоверность различий составила p≤0,001.

По нашим наблюдениям, из 272 случаев смерти от утопления диатомовый планктон обнаружен у 184 (68%) трупов в КЛЖС, у 85 (32%) — в КПЖС, у 159 (58%) — в ПЖ, у 146 (54%) — в СПОКЧ. Следовательно, предлагаемые способы исследования биологических жидкостей трупа могут широко применяться в судебно-медицинской экспертизе утоплений.

Таким образом, при судебно-медицинском исследовании диатомового планктона в трупном материале традиционными способами происходит их разрушение в процессе пробоподготовки из-за минерализации, что дает ложноотрицательные результаты при заведомом утоплении. Разработанные нами способы обнаружения планктона позволяют усовершенствовать процесс пробоподготовки и дальнейшего микроскопического исследования.

Выводы

1. Достоверно установлена возможность проникновения из кровеносного русла в ПЖ различных видов диатомового планктона, размер которых не превышает 50 мкм, а панцирь имеет обтекаемую форму, что способствует их проникновению в ПЖ при утоплении.

2. Разработаны и предложены способы определения диатомового планктона в ПЖ (диатомеи обнаружены в 58% случаев смерти от утопления), крови (в 68%) и СПОКЧ (в 54%), которые являются достоверными (p≤0,001, p≥0,05) лабораторными методами диагностики смерти от утопления. Предлагаемые способы способствуют сохранению всех видов диатомового планктона в исследуемом трупном материале, особенно мелких форм, которые являются самыми ценными в диагностическом отношении, потому что именно эти виды легко проникают в кровеносное русло. Это позволяет определить тип утопления, время (при сопоставлении с периодами вегетации и суточной миграции диатомей в толще воды) и место (при сопоставлении видового разнообразия, поскольку в каждом водоеме встречаются характерные виды диатомей, отличающиеся от таковых других водных источников) утопления.

4. Полученные результаты позволяют рекомендовать способы определения диатомей в трупном материале при диагностике смерти от утопления. Применение разработанных способов исследования биологических жидкостей трупа на диатомовый планктон способствует сохранению всех видов диатомей в исследуемом трупном материале, что значительно повышает качество и сокращает сроки проведения судебно-медицинских экспертиз.

Анализ результатов исследований на диатомовый планктон при утоплении. Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

Аннотация научной статьи по прочим медицинским наукам, автор научной работы — Яблонский М. Ф., Жолнеровский В. М., Буйнов А. А.

Исследованы органы из 153 трупов лиц погибших вследствие утопления. При извлечении трупа из воды, особенно в состоянии выраженных гнилостных изменений, достоверным, а иногда единственным признаком смерти от утопления может служить диатомовый планктон, выявляемый в крови и органах трупа. Однако часто, при заведомом попадании живого человека в воду и наступлении его смерти от утопления диатомии в крови и органах не обнаруживаются. Наблюдаемое в последнее время снижение частоты обнаружения диатомовых водорослей в тканях трупа, может быть обусловлено выбором неадекватного метода исследования, характером водоема и временем года утопления, когда планктон в водоеме отсутствует, причиной и скоростью наступления смерти в воде, периодом циклического развития диатомей в данном водоеме. Полученные данные позволят эксперту составить представление о причинах необнаружения планктона в тканях органов, трупов извлеченных из водоемов, не исключая смерти от утопления.

Похожие темы научных работ по прочим медицинским наукам , автор научной работы — Яблонский М. Ф., Жолнеровский В. М., Буйнов А. А.

К вопросу установления места и времени утопления в пресной воде на основе результатов диатомового анализа

Применение диатомового анализа для расширения возможностей медико-криминалистических экспертных исследований при диагностике смерти от утопления

Микрофитоцинозы реки Енисей и их судебно-медицинское значение для установления обстоятельств утопления

Исследование биологических жидкостей на диатомовый планктон в судебно-медицинской экспертизе утопления

Особенности качественного и количественного состава диатомового планктона во внутренних органах трупов мужчин, утонувших в разных бассейнах реки Енисей

Текст научной работы на тему «Анализ результатов исследований на диатомовый планктон при утоплении. »

АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ НА ДИАТОМОВЫЙ ПЛАНКТОН ПРИ УТОПЛЕНИИ.

ЯБЛОНСКИЙ М.Ф.*. ЖОЛНЕРОВСКИЙ В.М.*. БУЙНОВ А.А.**

Управление по Витебской области Государственной службы медицинских судебных экспертиз**

УО «Витебский государственный медицинский университет»; кафедра судебной медицины *

Резюме: Исследованы органы из 153 трупов лиц погибших вследствие утопления. При извлечении трупа из воды. особенно в состоянии выраженных гнилостных изменений. достоверным. а иногда единственным признаком смерти от утопления может служить диатомовый планктон. выявляемый в крови и органах трупа. Однако часто. при заведомом попадании живого человека в воду и наступлении его смерти от утопления диатомии в крови и органах не обнаруживаются. Наблюдаемое в последнее время снижение частоты обнаружения диатомовых водорослей в тканях трупа. может быть обусловлено выбором неадекватного метода исследования. характером водоема и временем года утопления. когда планктон в водоеме отсутствует. причиной и скоростью наступления смерти в воде. периодом циклического развития диатомей в данном водоеме. Полученные данные позволят эксперту составить представление о причинах необнаружения планктона в тканях органов. трупов извлеченных из водоемов. не исключая смерти от утопления.

Ключевые слова: труп из водоема. частота выявления диатомового планктона. причины.

Abstract. The organs from 153 corpses of persons died from drowning have been studied. In taking out the corpse from water especially in the condition of expressed putrefactive changes diatomic plankton detected in blood and organs of corpse may be the single sign of death from drowning.

However in the condition when alive person notoriously was found himself in water and died from drowning diatomic plankton has not detected often in blood and organs of corpse.

In the recent period the observed reduction of frequency of diatomic seaweeds detection in the corpse tissues may be caused by the imperfection of a study method. character of reservoir and year season of person drowning ( when plankton is absent in reservoir). the cause and speed of death coming in water. period of cyclic development of diatomic plankton in this water.

The received data may be used in medicolegal examinations and help to raise their scientific validity and quality.

Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь. 210026. г. Витебск. ул. Гагарина. д.12. Управление по Витебской области Государственной службы медицинских судебных экспертиз- Буйнов А.А.. 210023. г. Витебск. пр. Фрунзе. д.27. Витебский государственный медицинский университет. кафедра судебной медицины. р.тел. 24-12-09. - Яблонский М.Ф.

Вводная часть: В подавляющем большинстве случаев установление диагноза - механическая асфиксия от закрытия дыхательных путей жидкостью (утопление). у трупов. извлеченных из водоема в ближайшее время после происшествия. не составляет больших затруднений. Выраженная бледность кожных покровов трупа. стойкая мелкопузырчатая белого цвета пена у отверстий рта и носа. в трахее и бронхах. острая эмфизема легких. подплевральные кровоизлияния. пятна Рассказова-Лукомского-Пальтауфа. наличие жидкости утопления в пазухе клиновидной кости и др. позволяют с большой достоверностью поставить правильный диагноз. Однако. длительное пребывание трупа в воде и последовавшие гнилостные изменения. состояние жировоска обычно вызывают трудности в установлении причины смерти. Лабораторные методы исследования. такие как установление посторонних примесей в крови (мыльных растворов. продуктов нефти и пр.). определение изменения удельного веса крови. температура замерзания. электропроводимости и др. в подавляющем большинстве подобных случаев не пригодны для установления причины смерти. Предложенный Ревенсторфом еще в 1904 г. метод определения в легких диатомовых водорослей является наиболее доказательным в диагностике утопления.

Диатомовые водоросли - одноклеточные микроскопические организмы размерами от 4 до 2000 мкм широко распространены в водоемах. Они делятся на два класса: центрические и пеннатные. Центрические имеют радиальносимметричный панцирь. а пеннатные - двустороннесимметричный.

Диатомовые водоросли интенсивно размножаются в водоемах. особенно весной и осенью (пик приходится на конец марта-апрель и конец августа-сентябрь). Поэтому в течение года в определенные сроки одни формы появляются. другие - отмирают.

Наличие у диатомовых водорослей панциря. состоящего из гидрата окиси кремния. отличает их от всех остальных водорослей. Кремнезёмный панцирь не подвержен процессу гниения. действию кислот и высокой температуры.

При утоплении диатомовые водоросли вместе с другими мелкими частицами. взвешенными в воде. проникают в кровь вместе с водой через поврежденные сосуды легких и кровотоком разносятся по внутренним органам [2.4.6.].

При попадании трупа в воду инородные частицы. в том числе и диатомовый планктон. могут быть обнаружены только в тканях легкого. иногда в пазухе решетчатой кости. так как они сообщаются с внешней средой.

Больше всего диатомей выявляется в органах с лучшим кровоснабжением: в легких. почках. печени. сердце. в самой крови. В случаях смерти в холодной воде от рефлекторной остановки сердечной деятельности и дыхания диа-томеи не могут попадать внутрь организма и обнаруживаются только в ткани легких.

Выявление диатомового планктона во внутренних органах. особенно у гнилостно измененных трупов имеет решающее значение для диагностики утопления.

Перечень объектов. объем и порядок забора для исследования на диатомовый планктон изложены в приложении №2 к Правилам судебномедицинской экспертизы трупа в Республике Беларусь. утвержденных прика-

Длительное время. занимаясь исследованием диатомового планктона во внутренних органах трупов при утоплении. мы обратили внимание на значительное снижение частоты обнаружения диатомий в тканях за последние годы. В связи с этим нами была поставлена цель изучить причины этого явления.

Объекты и методы исследования:

Исследованиям подверглись ткани внутренних органов и кровь от 153 трупов. извлеченных из водоемов (ткани легких. миокарда. печени. почек. селезенки. головного мозга. костный мозг).

В основном использовался распространенный метод деструкции и минерализации трупного материала. Измельченные ткани исследуемого органа нагревали в смеси концентрированных серной и азотной кислот. Затем исследуемый материал охлаждали. нейтрализовали раствором аммиака. центрифугировали и осадок исследовали путем микроскопирования.

Нами также опробован метод. предложенный С.И. Поновым в 1972 г. [5]. в тех случаях. когда возможен забор крови. а также промывных вод из левой половины сердца и аорты. Данный метод прост и удобен. Разведенную кровь или смывы отстаивают над покровным стеклом. помещенным на дно стеклянной трубки в съемном отстойнике. Полученный на стекле осадок микроскопи-руется. Достоинство метода заключается в том. что удается выделить из крови элементы фито- и псевдопланктона в их естественном виде.

Полученные результаты. частоту выявления диатомовых водорослей в каждом конкретном случае сопоставляли со следственными материалами. анализировали данные. пытаясь объяснить причины необнаружения диатомий в конкретных исследованных объектах.

Результаты и обсуждение: Были исследованы органы 153 трупов. лиц погибших вследствие утопления. Кроме того. в 84 случаях эксперты направляли материал на архивное хранение. В 2002г. в исследованных объектах от 50 трупов диатомовый планктон обнаружен в 27 случаях (54% от исследованных). В 2003г. материалы исследованы от 64 трупов. диатомовый планктон найден только в 26 случаях (40%). Из исследованных за 2004г. 39 случаев утоплений планктон обнаружен только в 9 случаях (23%). Подобную тенденцию снижения частоты обнаружения диатомовых водорослей в органах трупов. лиц утонувших. отмечает и Г.Н. Манько [3] по материалам Гомельского региона Республики Беларусь.

Обращает на себя внимание совсем небольшое количество направлений для контрольных исследований воды из водоемов. в которых произошло утопление (в Витебской области за 3 года вода на исследование направлялась только 2 раза).

Чаще всего на исследование поступали ткани легких. сердца. почки. печени. реже - селезенки. головного мозга и длинных трубчатых костей с костным мозгом.

Среди всех погибших 24 утопления (16%) произошли в зимние месяцы. В это время года в воде обнаружить диатомовый планктон не всегда возможно. В

реках, озерах. сажалках и болотах утонуло 112 человек (73% от всех исследованных случаев) и 41 (27%) в колодцах. ручьях и прочих водоемах (в том числе и в ваннах). т.е. там. где диатомовый планктон практически может не встречаться. При разрушении внутренних органов. особенно легких. кислотами может произойти выпадение в осадок нерастворимых солей. которые не дают возможности обнаружить в полученном осадке панцири диатомей.

Трудности. связанные с разрушением костных фрагментов. особенно грудины. влекут за собой образование большого количества осадков солей кальция. которые сильно затрудняют или лишают возможности различить в них диатомии.

По частоте выявления наибольшее количество диатомей обнаруживается в тканях сердца и почки. реже - в печени и селезенке. Ткани печени и головного мозга. по нашему мнению. необходимо исследовать только в крайних случаях. так как при разрушении их кислотами выделяется большое количество жира и побочных осадков. затрудняющих микроскопическое обнаружение диатомий.

По нашим данным. выявляемость планктона в крови по методу. предложенному С.И. Поповым. выше чем в тканях почки и печени и сравнима с результатами исследования тканей миокарда.

По данным В.В. Балдыкиной [1] частота обнаружения элементов планктона увеличивается в смеси таких органов как почка и сердце. почка и печень. исследованных совместно.

Обнаруженный планктон целесообразно фотографировать или зарисовывать. В последние годы все альгологические заключения эксперта нами иллюстрируются компьютерными фотографиями. полученными с помощью видеокамеры Leica icca и оформляются в виде фототаблиц.

1. Проведенный анализ частоты выявляемости диатомовых водорослей в органах трупов. лиц погибших от утопления. свидетельствует о тенденции снижения частоты обнаружения их в последние годы (2002-2004 гг.).

2. По нашему мнению. такое явление может быть обусловлено способом разрушения материала. направляемого на исследование. в результате применения концентрированных серной и азотной кислот для разрушения органов. дающих выпадение труднорастворимых осадков. затрудняющих или исключающих возможность выявления диатомового планктона. При возможности. целесообразно применять методику обнаружения диатомового планктона. предложенную С.И. Поповым.

3. Необнаружение диатомовых водорослей в крови и внутренних органах трупа. извлеченного из воды. не исключает смерти от утопления. Такое явление может наблюдаться в тех случаях. когда смерть наступает в холодной воде от рефлекторной остановки дыхания. сердечной деятельности. при отсутствии диатомовых водорослей в водоеме. в случаях утопления в период диатомового минимума в водоеме в процессе циклического развития диатомных водорослей.

1. Балдыкина. В.В. К вопросу диагностики утопления в воде на гнилостно измененных трупах / В.В. Балдыкина // Первый Всесоюзный съезд судебных медиков. - Киев. 1976.- С. 361.

3. Манько. Г.Н. Анализ судебно-гистологических исследований по определению диатомового планктона в утопленниках по Гомельской области / Г.Н. Манько // Материалы съездов. международных симпозиумов. научнопрактических конференций. - Минск. 2005. - Т. 1.- С. 121-124.

4. Марченко. Н.П. Диагностика смерти от утопления / Н.П. Марченко // Материалы судебных медиков Казахстана. - Алма-Ата. 1968.- С. 115-122.

5. Попов. С.И. Определение инородных частиц в крови для диагностики утопления в воде и прижизненного пребывания человека в очаге пожара / С.И. Попов // Первый Всесоюзный съезд судебных медиков. - Киев. 1976. - С. 360.

6. Свадковский. Б.С. Диатомовый анализ при судебно-медицинской экспертизе утопления / Б.С. Свадковский. В.А. Балякин. - М.. 1964. - С. 68.

Исследование диатомового планктона в случаях утопления


Исследование диатомового планктона в случаях утопления / Рыбалкин Р.В., Можаров П.В. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2007. — №81. — С. 104-106.

библиографическое описание:
Исследование диатомового планктона в случаях утопления / Рыбалкин Р.В., Можаров П.В. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2007. — №81. — С. 104-106.

код для вставки на форум:

  • — 10 % случаях — в возрасте до 16 лет;
  • —12 % случаев — в возрасте 60 лет и старше;
  • — 78 % случаев — в работоспособном возрасте населения (от 16 до 60 лет).

Одним из важных доказательств этого вида смерти является обнаружение планктона (диатомовых водорослей), который имеет специфические особенности: вид, класс и т.д., позволяющие сделать вывод о месте наступления смерти.

ПЛАНКТОН (от греч. «блуждающий») — это совокупность организмов, обитающих в толще воды и неспособных противостоять переносу течением. Его составляют множественные бактерии, диатомовые и некоторые другие водоросли (фитопланктон), простейшие, некоторые кишечнополостные, моллюски, ракообразные, оболочники, яйца и личинки рыб, личинки многих беспозвоночных животных (зоопланктон). Планктон непосредственно или через промежуточные звенья пищевых цепей служит пищей всем остальным животным, обитающим в водоемах. Раздел гидробиологии, изучающий планктон, его видовой состав, пространственное распределение, сезонные изменения, пищевые взаимоотношения и пр., получил настолько большое развитие, что выделился в особую ветвь — планктонологию.

ПСЕВДОПЛАНКТОН — это взвешенные в воде песчинки, зерна крахмала и др., которые могут попадать вместе с водой из легких в кровь.

ДИАТОМОВЫЕ ВОДОРОСЛИ (диатомеи, кремнистые водоросли), отдел (или тип) водорослей. Одноклеточные и колониальные организмы. Клетки их имеют твердый кремневый панцирь, состоящий из двух половинок - нижней (пшотеки) и верхней (эпитеки). Размножение делением, а через несколько поколений — половое. Около 20 тыс. видов в пресных и морских водах, на сырой почве и т.п. С юрского периода известны ископаемые диатомовые водоросли, иногда образующие мощные отложения — диатомиты.

Специальные исследования показывают, что диатомовый планктон специфичен для определенного водоема, причем его структура может не меняться десятилетиями за счет высокой сохраняемости основных признаков. При этом следует отметить, что кремневый панцирь диатомей выдерживает действие высоких температур, крепких кислот и щелочей.

Устойчивость видов диатомового планктона позволяет решать вопросы, связанные с определением места происшествия случая утопления, так как в определенных водоемах планктон, сохраняя свои структурные свойства, мало видоизменяется либо вообще не изменяется.

Судебно-медицинские изыскания по данному вопросу показали, что при истинном типе утопления диатомеи размером до 200 микрон вместе с водой через разорванные капилляры альвеол проникают в русло большого круга кровообращения и с током крови разносятся по всему организму, задерживаясь в паренхиматозных органах и костном мозге длинных трубчатых костей.

Учитывая анализ результатов исследований химически разрушенных почек, изъятых от трупов лиц, умерших в результате утопления, за последние три года (2003-2005), из 96 исследований с помощью достаточно эффективной методики накопления осадка по С.И. Попову, применяемой в медико-криминалистическом отделении ГУЗ «Бюро СМЭ», лишь в единичных случаях было установлено наличие диатомового планктона. При этом выявленные диатомеи не классифицировались, не производилось определение их типа.

Практика судебно-медицинской службы нашего края показывает, что основным (почти 100%-ным, а значит и стереотипным) объектом исследования на диатомовый планктон является почка.

  • - почка;
  • - кровь (не менее 100 мл) из левой половины сердца;
  • - вещество головного мозга (не менее 100 г);
  • - спинной мозг;
  • - мышца сердца (не менее 100 г);
  • - скелетная мышца в неповрежденной фасции (не менее 100 г);
  • - селезенка с неповрежденной капсулой;
  • - фрагмент бедренной или плечевой кости с костным мозгом (10-15 см);
  • - ткань легкого (подплевральная пластинка толщиной около 1 см и массой не менее 100 г);
  • - образцы воды (2-3 л) из водоема (в месте обнаружения трупа и из предполагаемого места утопления) в разных емкостях.

Согласно литературным данным, для реального достижения цели исследования, необходимо брать в отдельную посуду всю жидкость из пазухи основной кости, 200 г легкого (краевые отделы), 1 почку в капсуле (с предварительной перевязкой ножки).

При условии правильной подготовки материала к исследованию количество обнаруженных диатомей оказывается достаточным для подтверждения причины смерти от утопления.

На наш взгляд, необходимо решать проблему изученности диатомового планктона и специфичности его видов на территории Хабаровского края. Вопрос об идентификации планктона в настоящее время весьма злободневен. Нужно иметь в виду, что виды обнаруженных диатомей и их относительное количественное содержание могут свидетельствовать не только о факте утопления, но и о конкретном водоеме, в котором оно произошло. Поэтому необходимо планомерно проводить работу по созданию «Альбома-каталога диатомового планктона водоемов Хабаровского края». Необходимо ознакомиться с накопленными сведениями по этому вопросу и провести исследование маркированных образцов воды (объемом не менее двух л) из всех водоемов Хабаровского края, в чем существенную помощь могут оказать наши районные эксперты.

Подводя итог вышеизложенному, считаем, что для эффективного определения диатомового планктона необходимо: производить забор секционного материала в различных сочетаниях, предпочтительней 2-х и более объектов, в состав которых обязательно должны входить краевые отделы легких (не менее 200 г) и почка в капсуле (с предварительной перевязкой ножки).

похожие статьи

Модификация метода изготовления препаратов для микрологического исследования / Анисимов Л.П., Девятериков А.А. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2017. — №16. — С. 7.

Аспирация крупных инородных тел при утоплении / Витер Н.И. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1966. — №2. — С. 49.

Планктон. Диатомный планктон при утоплении

Планктон. Диатомный планктон при утоплении

Планктоном называют совокупность мельчайших организмов, населяющих воду любого водоема. Он разделяется на растительный (фитопланктон) и животный (зоопланктон). В любом водоеме планктон представлен характерным для него комплексом организмов, причем состав и насыщенность водоема планктоном изменяются в зависимости от сезона, времени cуток и глубины водоема. На это нужно обратить внимание следователя, который должен произвести забор пробы в водоеме, где был обнаружен труп.

Диатомовые водоросли представляют собой разнообразную группу, насчитывающую более 200 родов и 6000 видов. Клетка диатомеи состоит из протопласта, одетого пектиновой оболочкой, которая плотно прилегает к наружной кремнеземной оболочке, именуемой панцирем. Панцирь имеет две самостоятельные половинки, которые надвигаются одна на другую подобно крышке на коробку. Хроматофоры диатомей имеют желтый и бурый цвет. Форма днатомей разнообразная ладьевидная, палочковидная, бочкообразная, веретенообразная, прямоугольная, S-образная, в виде круга, квадрата и т. д. Зоопланктон (простейшие) может быть представлен плазматическими, жгутиковыми и ресничными клетками.
Частицы кремнезема имеют вид светлых кристаллов, отчетливо контурируемых на темном фоне.

Производя гистологическое исследование легких, необходимо помнить, что элементы диатомового планктона и минеральные частицы могут проникать в легкие посмертно во время пребывания трупа в воде. Поэтому их доказательное значение для диагностики утопления невелико. Тем не менее всегда нужно исследовать легкие на диатомовый планктон, так как это может дать представление с диатомовом составе водоема, откуда извлечен труп, т. е. служить контролем.

диатомный планктон

Для диагностики утопления практическое значение имеет обнаружение диатомового планктона в других органах и тканях, куда он проникает через большой круг кровообращения. Однако нахождение планктона в гистологических препаратах органов является технически сложным и не всегда успешным. Поэтому используют более простой и падежный способ исследования диатомового планктона методом обогащения в центрифугате.

В связи с тем, что диатомовые водоросли (в частности, их панцири) устойчивы к высокой температуре, гниению, воздействию щелочей и кислот, их исследуют после центрифугирования минерализата, получаемого в результате химического разрушения органов и тканей (смесью равных объемов концентрированных азотной и серной кислот с добавлением пергидроля). Для такого разрушения можно брать любые органы, кроме селезенки, в которой диатомеи встречаются непостоянно и в небольшом количестве. Практически бывает достаточно взять почку в капсуле и 200 г печени. При значительном гниении трупа исследуют костный мозг бедренных и плечевых костей.

Диатомеи можно найти в центрифугате крови и промывных под из левой половины сердца, предварительно прибавив в смесь несколько капель эфира или уксусной кислоты, для того чтобы наступил гемолиз. Хорошие результаты может дать метод «обогащенной капли» или центрифугата жидкости из основной и гайморовых пазух; в препарате, кроме диатомеи, находят инфузории, амебы и другие организмы водоема.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

I. Исследование на диатомовый планктон и псевдопланктон


Планктон -- это мельчайшие организмы растительного и животного происхождения, обитающие в воде озер, рек, морей и т. д. Для каждого водоема характерны определенные виды планктонов, которые имеют специфические отличия. Для диагностики утопления наибольшее значение имеет планктон растительного происхождения (фитопланктон), особенно диатомеи. Диатомовые водоросли имеют панцирь, состоящий из неорганических соединений кремния. Такой панцирь выдерживает действия высоких температур, крепких кислот и

щелочей. Диатомовые водоросли имеют различную форму: нити, ленты, цепочки, звездочки, кустики, бесформенные пленки. Размеры диатомовых водорослей колеблются от 4 до 2000 мкм.

Псевдопланктон (минеральный планктон) - это мельчайшие песчинки, обрывы различных водорослей, пыльца растений, хитиновый покров животных, яйца гельминтов, частицы угля, текстильные волокна и т. д. Размеры их колеблются от 70 до 100 мкм.

Установлено, что при утоплении диатомовые водоросли (размерами до 200 мкм) и элементы псевдопланктона проникают не только в ткань легких, но и в другие внутренние органы, куда они заносятся током крови (Н. И. Асафьева, 1958; Н. П. Марченко, 1958; Б. С. Свадковский, В. А. Балякин, 1964). По мнению указанных авторов, обнаружение диатомового планктона и псевдопланктона в крови и во внутренних органах утонувших (кроме легких) может считаться неопровержимым доказательством утопления.Нахождение диатомовых панцирей только в ткани легких можно трактовать как смерть в воде или как результат пребывания трупа в воде, так как в ткань легких диатомовые водоросли могут проникать и посмертно. Обнаружение значительного количества (десятков и сотен) панцирей диатомовых водорослей во внутренних органах (кроме легких): в почках, в мышце сердца, печени, головном и костном мозге, а также в крови (т.е. при исследовании 4-6 органов) - вполне достаточно для обоснованного заключения о наличии

или отсутствии диатомового планктона в органах трупа.

Важным условием для успешного использования метода определения диатомового

планктона является набор органов, необходимых для исследования, и строгое соблюдение правил изъятия материала на исследование и соответствующий навык эксперта. Основным источником загрязнения трупного материала при производстве вскрытия является водопроводная вода (в которой содержится значительное количество диатомовых водорослей), а также кожа трупа и пыль в помещении. Что касается количества каждого из исследуемых органов, необходимого для получения достоверного результата, то чем больше взято материала, тем большая возможность имеется для обнаружения диатомовых.

Для исследования на планктон может быть использована жидкость, изъятая из полости среднегоуха или из пазухи основной кости черепа.

Считается целесообразным брать для исследования на диатомовый планктон не менее 200 г каждого органа. Такое большое количество трупного материала следует брать потому, что при отрицательном результате возникает необходимость в повторном исследовании.

Кровь для исследования на диатомовый планктон получают из сердца. Правую и левую половину сердца вскрывают чистым ножом и пинцетом. Ложечкой собирают кровь в посуду отдельно из каждой половины сердца. После этого полости сердца промывают дистиллированной водой для того, чтобы снять элементы планктона с эндокарда и трабекул. При этом производят небольшой разрез стенки аорты, в отверстие вставляют стеклянную канюлю, соединенную резиновой трубкой с сосудом, в котором находится вода. Сосуд необходимо поднять на 1-2 м над поверхностью секционного стола. Сосуд-приемник для

промывных вод подставляют у разреза стенки левого желудочка в области верхушки. Промывные воды из сердца центрифугируют при небольшом числе оборотов. Полученный осадок исследуют. Кровь, взятую для исследования, гемолизируют добавлением небольшого количества аммиака. После повторного промывания дистиллированной водой и центрифугирования в осадке можно обнаружить планктон. При этом методе сохраняются даже самые тонкие, хрупкие диатомовые панцири (Инце Дьюла, 1941).

При экспертизе извлеченных из воды трупов с резко выраженными гнилостными

изменениями исследованию на диатомовый планктон следует подвергать костный мозг длинных трубчатых костей (плечевых и бедренных). Для получения достаточного количества костного мозга (около 200 г) необходимо взять обе плечевые и бедренные кости. Для изъятия костного мозга трубчатые кости вычленяют в суставах, очищают от мягких тканей, промывают дистиллированной водой и высушивают. Затем, после удаления надкостницы, в середине диафиза производят циркулярный распил примерно на половину толщины компактного слоя, после чего диафиз расшатывают и ломают. Из костномозгового канала каждой половины кюреткой полностью извлекают костный мозг. В случаях эксгумации, когда наступило гнилостное расплавление костного мозга,

надлежит промыть костный канал дистиллированной водой с добавлением серной или азотной кислоты из расчета 10 мл кислоты на 100 мл воды. Промывные воды по сравнению с костным мозгом быстрее подвергаются разрушению и не вызывают затруднений при последующем микроскопическом исследовании препаратов, так как не содержат костных балок и их фрагментов.

После разрушения органов и тканей из 2 - 3 мл центрифугированного осадка

изготавливают постоянные препараты для микроскопического исследования. С этой целью на покровные стекла размером 18 Х18, толщиной 0,018 - 0,020 мм, тщательно вымытые и обезжиренные, наносят каплю, жидкости с осадком, которую осторожно распределяют тонким слоем с помощью препаровальной иглы и подсушивают на электрической плитке. На чистые предметные стекла помещают небольшое количество какой-либо среды. Осторожно подогревают до расплавления среды. После этого теплые покровные стекла накладывают на каплю среды подсушенным слоем материала книзу. Для предупреждения образования кристаллов к раствору полистирола добавляют 1 мл пластификатора дибутилфталата. Приготовленные таким образом постоянные препараты исследуют под микроскопом с использованием иммерсионного объектива, дающего возможность детально рассмотреть структуру панциря диатомовых и произвести их определение. Обнаруженные экземпляры диатомовых необходимо измерить при помощи окуляр микрометра. В связи с тем, что обнаружение панцирей диатомовых водорослей при обычной микроскопии представляет известные трудности, возможно использование фазово-контрастного метода. Для документации исследования желательно производить микрофотографирование под микроскопом с введением в осветительную систему фазово-контрастного устройства.

Лабораторное исследование образца воды и внутренних органов трупов на наличие

диатомового планктона оформляется актом исследования, как и других вещественных доказательств.

Судебно-медицинский эксперт, оценивая результаты лабораторного исследования

органов на диатомовый планктон, должен принимать во внимание тот факт, что

доказательством утопления является только обнаружение диатомовых во внутренних органах (кроме легких) и в крови. Однако отсутствие диатомовых водорослей в крови и внутренних органах трупа, извлеченного из воды, не дает основания исключить смерть от утопления. Диатомовые водоросли могут не проникнуть во внутренние органы в тех случаях утопления, когда деятельность сердца прекращается в самом начале утопления или когда смерть наступает в воде (например, рефлекторная остановка сердца), в случаях облитерации плевральных полостей утонувшего, а также при отсутствии диатомовых водорослей в водоеме

или при утоплении в период диатомового минимума.

Решающее значение для диагностики утопления имеет обнаружение значительного

количества (десятков и сотен) панцирей диатомовых водорослей во внутренних органах (печень, почка, мышца сердца, головной мозг, мозг длинных трубчатых костей) и в крови.

Сопоставление результатов исследования на диатомовый планктон с другими данными, полученными при вскрытии трупа, гистологическом исследовании внутренних органов и т. д., позволяет в каждом конкретном случае квалифицированно и наиболее полно обосновать диагноз утопления.

Читайте также: