2 белка в крови в анализе на вич что это
При ВИЧ-инфекции пациент регулярно сдает анализы крови.
Изначально они сдаются, чтобы подтвердить факт болезни. В дальнейшем – с целью её контроля.
Основные показатели – это:
- вирусная нагрузка (этот показатель меняется, в зависимости от прогрессирования болезни или успешности лечения);
- количество CD4 и соотношение CD4/ CD8 (отражает состояние иммунитета ВИЧ-инфицированных пациентов).
Проводятся также общеклинические исследования. Они нередко указывают на сопутствующие заболевания или побочные эффекты, развивающиеся в результате противовирусной терапии.
Общий анализ крови при ВИЧ: показатели
На основании ОАК при ВИЧ диагноз не ставится. Исследование имеет лишь вспомогательное значение.
Изменения наблюдаются в острой фазе ВИЧ. Снижается количество лейкоцитов. В наибольшей мере уменьшается концентрация в крови лимфоцитов. Но постепенно эти показатели восстанавливаются.
Следующие значительные изменения показателей ОАК можно будет выявить только на стадии СПИД.
В общеклиническом анализе крови может обнаруживаться:
- дефицит лейкоцитов;
- низкий уровень тромбоцитов;
- может понижаться гемоглобин и количество эритроцитов (хотя они обычно не опускаются ниже нормы);
- в лейкоцитарной формуле отмечается низкое содержание нейтрофилов и лимфоцитов.
Показатель СОЭ при ВИЧ
СОЭ – показатель, который возрастает при воспалительных реакциях в организме.
В норме он не должен превышать 10 мм/ч.
При недавнем заражении ВИЧ этот показатель может значительно возрастать. Дальше он постепенно приходит в норму.
СОЭ отражает активность иммунитета. Этот показатель соответствует уровню цитокинов. В том числе интерлейкина-6 и фактора некроза опухолей α. В дальнейшем по увеличению уровня СОЭ можно предположить повышение активности ВИЧ-инфекции. Потому что данный показатель возрастает в тот период, когда отмечается уменьшение числа CD4 клеток.
Но на практике СОЭ не имеет большого значения в диагностике. Потому что всем пациентам регулярно определяют уровень CD4 лейкоцитов. Их количество проверяется через каждые несколько месяцев.
СОЭ не является маркером острых интеркуррентных патологий при ВИЧ. Нередко даже значительное возрастание показателя до 100 мм в час и более не сопровождается никакими инфекциями или симптомами.
Биохимия крови при ВИЧ: показатели
Данный анализ не имеет большого значения в диагностике ВИЧ-инфекции. Он необходим в основном для оценки функции внутренних органов: почек, печени, поджелудочной железы и т.д.
Установлено, что у пациентов, страдающих ВИЧ, при снижении уровня CD4 в крови повышается уровень белка и альбумина. Остальные базовые показатели биохимического анализа крови у них в норме.
Однако на организм пациента влияет не только болезнь. Он постоянно принимает несколько антиретровирусных препаратов. Они могут оказывать побочные эффекты, влияя на функцию печени и почек.
В таких случаях возможно повышение в крови ряда показателей:
Чаще всего поражается печень. Потому что многие пациенты с ВИЧ наркозависимые. А наркотические вещества сами по себе оказывают гепатотоксическое действие.
Некоторые страдают также вирусным гепатитом С. В этом случае вероятность побочных эффектов со стороны печени возрастает.
Другие факторы риска:
- ожирение;
- пожилой возраст;
- высокий уровень трансаминаз на момент начала лечения;
- алкоголизм;
- низкий уровень тромбоцитов в крови;
- высокая вирусная нагрузка;
- недостаточность функции почек.
Признаки нарушения работы печени в биохимическом анализе крови при ВИЧ встречаются достаточно часто. Но тяжелая печеночная недостаточность развивается очень редко.
Такие случаи зафиксированы при использовании препаратов:
Иногда страдает функция почек. В этом случае возрастает уровень сывороточного креатинина. Причиной становится нарушение его секреции в проксимальных канальцах почек.
Такие побочные эффекты возможны при приеме:
- тенофира;
- атазанавира;
- индинавира (устаревший препарат, который почти не используется).
После отмены препаратов нефротоксические эффекты исчезают.
Вирусная нагрузка при ВИЧ: показатели
При острой ВИЧ-инфекции обычно отмечается стремительное увеличение виремии. Она достигает больше 100 миллионов копий РНК в мл.
Большинство патогенетических процессов происходят именно в эту фазу заболевания. Однако высокая вирусная нагрузка сохраняется недолго. Срабатывает иммунитет человека. А клетки, обеспечивающие репликацию вируса, погибают. Поэтому виремия начинает снижаться.
В течение нескольких недель она достигает значения, которое называют установочной точкой. Чем выше эта точка, тем хуже прогноз заболевания.
На величину установочной точки влияет:
- репликационная способность вируса;
- генетические факторы;
- врожденные особенности иммунитета.
В среднем после острого периода вирусная нагрузка составляет лишь 1% от исходного значения.
В дальнейшем она длительное время остается стабильной. Определяя уровень виремии через определенные промежутки времени, можно прогнозировать развитие заболевания. Исследования показывают, что если через 2 года вирусная нагрузка не превышает 1000 копий РНК в мл, то через 12 лет при естественном течении болезни у человека все ещё не будет стадии СПИДа.
Но если вирусная нагрузка через 2 года после инфицирования превышает 100 тысяч копий в мл, то 80% из них уже имеют СПИД-индикаторные заболевания.
От величины установочной точки зависит скорость падения уровня CD4-лимфоцитов. В норме этот показатель составляет от 435 до 1600 копий РНК в мл. В дальнейшем вирусная нагрузка возрастает.
Существует условная градация, когда её следует считать высокой, а когда – низкой.
Расшифровка – в таблице.
Показатель | Вирусная нагрузка |
До 10 000 копий РНК | Низкая |
От 10 до 100 тысяч копий РНК | Средняя |
Более 100 000 копий РНК | Высокая |
Обычно вирусная нагрузка коррелирует с уровнем CD4. Чем она выше, тем количество клеток иммунной системы в крови ниже. Вирусная нагрузка определяется регулярно. Она является показателем успешности лечения. Целью антиретровирусной терапии является достижение неопределяемого уровня виремии. То есть, тест ПЦР должен показывать отрицательные результаты.
Такие результаты могут быть достигнуты через 3-6 месяцев после начала лечения. Обычно неопределяемой считают нагрузку ниже 50 копий РНК в мл. Это граница чувствительности большинства тестов.
Показатели анализов при ВИЧ инфекции
При ВИЧ также сдают некоторые общеклинические анализы. Однако они нужны в большей мере для оценки функции внутренних органов, нежели для диагностики ВИЧ. Помимо общего и биохимического анализов крови сдаются анализы мочи.
Они помогают своевременно обнаружить поражение почек.
Некоторые препараты для антиретровирусной терапии способны спровоцировать почечную недостаточность. В этом случае уменьшается объем диуреза. Повышается плотность мочи.
Нефротоксические препараты также могут вызывать отложение конкрементов. В этом случае возможно появление солей в анализе мочи. Иногда в ней определяются эритроциты. Это происходит чаще после приступов почечной колики.
Иммунный статус при ВИЧ: показатели
При ВИЧ-инфекции страдают прежде всего показатели иммунитета.
В острой фазе заболевания происходит резкое снижение уровня CD4-лимфоцитов. Затем, после снижения виремии, количество этих клеток начинает постепенно восстанавливаться.
Однако без антиретровирусной терапии оно никогда не достигнет исходного уровня. Через неделю после заражения запускается каскад цитокиновых реакций. Наблюдается значительное возрастание количества цитокинов в крови. Они помогают держать под контролем инфекцию.
В этот же период увеличивается количество Т-лимфоцитов CD8. Они играют основную роль в сдерживании инфекции. А именно, убивают клетки, пораженные ВИЧ, с помощью цитолиза. Также они воздействуют они опосредованно, за счет увеличения продукции цитокинов.
На период возрастания популяции CD8-лимфоцитов приходится первичное уменьшение вирусной нагрузки. Т-клетки способны уничтожать вирус. Но он достаточно быстро мутирует, защищаясь от иммунитета. В дальнейшем иммунограмма для диагностики ВИЧ становится малоинформативной. Потому что показатели приближаются к нормальным значениям.
Если отклонения от нормы есть, то они незначительные. Обычно снижается общее число CD4-лимфоцитов.
Количество CD8-лимфоцитов может быть повышенным. Соотношение CD4/ CD8 уменьшается.
При ВИЧ оно составляет меньше единицы. Через несколько лет наступает стадия выраженного иммунодефицита (СПИД).
В этом случае в крови резко снижается количество CD4. В среднем у здорового человека их 800 до 1050 в мкл. Нормой считается содержание в крови CD4 от 500 до 1600 в мкл.
При ВИЧ их количество может снижаться до 200 в мкл и меньше. Общее количество Т-лимфоцитов уменьшается до 1000 и меньше в мкл.
Количество CD8 остается в пределах нормы. Поэтому соотношение CD4/ CD8 значительно уменьшается. В норме оно составляет 0,9-1,9. То есть, CD4 лимфоцитов должно быть в полтора-два раза больше, чем CD8. Но при ВИЧ их становится значительно меньше.
Антиретровирусную терапию обычно начинают при уровне CD4 ниже 350 в мкл.
Может также использоваться другой показатель для определения уровня иммунодефицита при ВИЧ. Это процент CD4 в общем количестве Т-лимфоцитов. Критическим значением является показатель 15%. Это означает, что следует начинать агрессивную антиретровирусную терапию. В том числе в случае, когда общее количество CD4 в иммунограмме остается высоким.
Существует прямая зависимость между вирусной нагрузкой и содержанием CD4 в крови. В среднем у человека на момент инфицирования этих клеток около 1000 в мл.
На пике острой фазы ВИЧ, когда вирусная нагрузка максимальная, количество CD4 снижается до 500 в мкл или меньше. Это происходит в среднем через 6 недель после инфицирования. Затем в течение последующих 9-12 месяцев начинается постепенное повышение CD4.
Оно достигает значения в 600-700 клеток в мл. Но затем снова начинает опускаться.
Снижение уровня CD4 происходит медленно, но неуклонно. В среднем через 5 лет после начала заболевания их уровень ниже 400 в мкл. Через 7 лет их уже меньше 200 в мкл.
По количеству этих клеток можно прогнозировать различные оппортунистические болезни. В прогностическом отношении имеет значение динамика изменения количества CD4.
В группу высокого риска входят пациенты, у которых число этих клеток уменьшается на 100 и более в мкл за 6 месяцев. Если за год их число снижается на 20-50 клеток в мкл, это средний риск.
Исследование специфических антител и антигена p24 вируса иммунодефицита человека.
Антитела к ВИЧ 1, 2, антитела к вирусу иммунодефицита человека, ВИЧ-1 p24, ВИЧ-1-антиген, p24-антиген.
Синонимы английские
Anti-HIV, HIV antibodies, human immunodeficiency virus antibodies, HIV-1 p24, HIV-1 Ag, p24-antigen.
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исследование на наличие ВИЧ-инфекции может проводиться анонимно и конфиденциально. При конфиденциальном обследовании в обязательном порядке необходимо предъявление паспорта.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – вирус семейства ретровирусов, который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы). Вызывает СПИД.
ВИЧ-1 – наиболее распространенный тип вируса, чаще всего встречающийся в России, США, Европе, Японии и Австралии (как правило, субтип В).
ВИЧ-2 – редкий тип, распространен в Западной Африке.
Для диагностики вируса иммунодефицита человека используется комбинированная тест-система четвертого поколения, способная определять ВИЧ-инфекцию уже через 2 недели после попадания вируса в кровь, тогда как тест-системы первого поколения делают это только через 6-12 недель с момента инфицирования.
Преимуществом этого комбинированного ВИЧ-анализа является выявление, благодаря использованию антител к ВИЧ-1 p24 в качестве реагентов, специфического антигена p24 (белка вирусного капсида), который может быть обнаружен данным тестом уже через 1-4 недели с момента инфицирования, т. е. еще до сероконверсии, что значительно сокращает "период окна".
Кроме того, такой анализ на ВИЧ выявляет в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (с использованием реакции антиген-антитело), которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой через 2-8 недель с момента заражения.
После сероконверсии антитела начинают связываться с антигеном p24, в результате чего тест на антитела к ВИЧ будет положительным, а тест на p24 – отрицательным. Однако спустя некоторое время в крови будут определяться и антитела, и антиген одновременно. На терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат, так как нарушается механизм выработки антител.
- Инкубационный период, или "период серонегативного окна", – время с момента заражения до выработки в крови защитных антител к вирусу, когда тесты на антитела к ВИЧ отрицательны, но человек уже может передавать вирус другим людям. Продолжительность данного периода – от 2 недель до 6 месяцев.
- Период острой ВИЧ инфекции наступает в среднем через 2-4 недели с момента инфицирования и длится примерно 2-3 недели. На данном этапе у некоторых людей могут развиться неспецифические симптомы, схожие с симптомами гриппа, что связано с активной репликацией вируса.
- Латентная стадия протекает бессимптомно, но в течение нее происходит постепенное снижение иммунитета и увеличение количества вируса в крови.
- СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) является конечной стадией развития ВИЧ-инфекции, которая характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также сопутствующими заболеваниями, энцефалопатией или онкологическими заболеваниями.
Несмотря на то что ВИЧ-инфекция неизлечима, сегодня существует высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ), которая может значительно продлить жизнь ВИЧ-инфицированного и улучшить ее качество.
Данный тест имеет особенно высокую диагностическую ценность, если инфицирование ВИЧ произошло незадолго до момента тестирования (за 2-4 недели).
Для чего используется исследование?
Анализ используется для ранней диагностики ВИЧ, что позволяет предотвратить дальнейшую передачу вируса другим людям, а также своевременно начать антиретровирусную терапию и лечение заболеваний, способствующих прогрессированию ВИЧ-инфекции.
Когда назначается исследование?
- При устойчивой симптоматике (на протяжении 2-3 недель) неясной этиологии: субфебрильной температуре, поносе, ночной потливости, резкой потере веса, увеличении лимфатических узлов.
- При рецидивирующей герпетической инфекции, вирусных гепатитах, пневмонии, туберкулезе, токсоплазмозе.
- Если пациент страдает заболеваниями, передающимися половым путем (сифилисом, хламидиозом, гонореей, генитальным герпесом, бактериальным вагинозом).
- Если у пациента был незащищенный вагинальный, анальный или оральный секс с несколькими половыми партнерами, новым партнером или партнером, в ВИЧ-статусе которого пациент не уверен.
- Когда пациент проходил процедуру переливания донорской крови (хотя случаи инфицирования таким путем практически исключены, т. к. кровь тщательно тестируется на наличие вирусных частиц и подвергается специальной термообработке).
- Если пациент употреблял наркотики инъекционным путем, используя нестерильные инструменты.
- При беременности / планировании беременности (прием азидотимидина во время беременности, кесарево сечение во избежание передачи вируса ребенку в момент прохождения через родовые пути и отказ от кормления грудью снижают риск передачи ВИЧ от матери к ребенку с 30 % до 1 %).
- Случайный укол шприцом или другим предметом (например, медицинским инструментом), содержащим в себе инфицированную кровь (в таких случаях вероятность инфицирования крайне низкая).
Что означают результаты?
Причины отрицательного результата:
- отсутствие ВИЧ-инфекции,
- период серонегативного окна (ни антиген, ни антитела еще не выработались в достаточном количестве, необходимом для определения тест-системой).
Причины положительного результата:
- Диагностика антител к ВИЧ у детей грудного возраста, рождённых от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена, так как младенец получает антитела от матери через плацентарную кровь. Как правило, тест на антитела к ВИЧ у таких детей становится отрицательным не позднее 18 месяцев, если ребенок не инфицирован ВИЧ.
- С помощью данного ВИЧ-теста невозможно определить, как давно произошло инфицирование, или стадию ВИЧ (например, СПИД).
- ВИЧ содержится практически во всех жидкостях организма, но только в крови, сперме и вагинальном секрете концентрация вируса достаточна для инфицирования. Кроме того, вирус нестабилен и способен жить лишь в жидких средах человеческого организма, поэтому ВИЧ-инфекция не передается через поцелуй, укусы насекомых и при бытовых контактах (например, при использовании общего туалета, через слюну, воду и пищевые продукты).
- Данный анализ на ВИЧ хотя и сокращает "период окна", но все же способен определить наличие антигена/антител не ранее чем через 1-3 недели с момента возможного инфицирования.
- Если событие, грозящее заражением ВИЧ-инфекцией, произошло менее чем за 1-3 недели до тестирования, рекомендуется повторить тест.
- Анализы первого и третьего поколений могли давать ложноположительный результат, если в крови обследуемого присутствовали антитела к вирусу Эпштейна – Барр, ревматоидному фактору, главному комплексу гистосовместимости HLA или антитела после введения вакцины против ВИЧ. Однако вероятность ложноположительного результата при комбинированном тесте практически исключена.
- В случае положительного результата тестирования проводится подтверждающий анализ с использованием метода иммуноблотинга (тест на антитела к ряду специфических белков вируса).
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, инфекционист, дерматовенеролог.
Все инфекционные заболевания нуждаются в своевременной точной диагностике. ВИЧ и СПИД — не исключение. Поставленный вовремя диагноз позволяет принять необходимые терапевтические меры и продлить пациенту жизнь. Как же определить наличие или отсутствие заболевания с максимальной точностью?
Диагностика ВИЧ-инфекции и СПИДа
Сегодня, наверное, каждый человек слышал о ВИЧ и СПИДе и знает, что эти заболевания очень опасны, что передаются они в основном во время незащищенного барьерным способом полового акта. А между тем, первые случаи инфицирования были зафиксированы не так давно — в 1978 году (у нескольких мужчин-гомосексуалов из США и Швеции). Сам вирус был открыт в 1983 году.
В первую очередь ВИЧ атакует и разрушает лимфоциты (Т-лимфоциты, или хелперы). Они отвечают за иммунный ответ организма, распознавание и уничтожение инфицированных клеток. В результате заболевший теряет способность противостоять инфекциям.
У здорового человека количество Т-лейкоцитов составляет 1200–3000 клеток/мкл. После ВИЧ-инфицирования число клеток снижается. При этом заболевший продолжает чувствовать себя нормально. Данный период болезни может длиться на протяжении многих лет. Но наступает момент, кода количество клеток-хелперов достигает критической отметки. Это может проявиться следующими проблемами:
- кандидоз полости рта и ЖКТ;
- опоясывающий лишай (герпес);
- неделями не спадающая высокая температура;
- ночная потливость;
- диарея;
- частые ОРЗ и ОРВИ и др.
Если число Т-лимфоцитов снижается до 200 клеток/мкл, то диагностируют СПИД. Организм больного в таком состоянии не может сопротивляться даже простейшим микроорганизмам — от дрожжей до вирусов. У здорового человека к ним развивается резистентность, тогда как страдающего СПИДом они могут довести до летального исхода. Чаще всего возбудителями смертельных заболеваний становятся токсоплазма, криптоспоридии, цитомегаловирус. Кроме того, снижение лимфоцитов провоцирует образование злокачественных опухолей.
При отсутствии должного лечения пациенты с ВИЧ-инфекцией не переступают порог выживаемости в 10 лет. Грамотно и своевременно назначенная терапия затормаживает развитие болезни, в разы увеличивая продолжительности жизни больного. ВИЧ-положительный человек в таком случае может дожить до преклонных лет.
Основной метод диагностики инфекции — анализ крови. С момента заражения до появления антител в крови проходит 1–3 месяца.
Разные виды лабораторных анализов венозной крови, взятой натощак, позволяют обнаружить наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции в крови. Рассмотрим виды этих исследований.
- Скрининговое исследование иммуноферментными (ИФА) методами представляет собой выявление антител к антигенам ВИЧ-типов: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Уже со второй недели после инфицирования могут появиться антитела, хотя они способны обнаружиться и позже — через несколько месяцев. В последующее время количество антител растет и сохраняется в крови пациента. При наличии антител в большинстве случаев клинические признаки ВИЧ не проявляются 2–10 лет.
Отметим, что данный тест не всегда точен, возможен ложноположительный результат. В любом случае при положительном результате назначается повторный анализ через 2-3 недели. - Верификационное исследование методом иммуноблота проводится, если описанный выше анализ дважды дал положительный результат. Данное исследование сочетает анализ ИФА и метод электрофореза, который позволяет разделить по молекулярному весу входящие в состав вируса антигены. Данное исследование имеет максимальную точность.
- Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени дает возможность определить концентрацию вирусной РНК в плазме крови. Тест проводят в целях ранней диагностики возможного инфицирования после случая повышенного риска (на 7–10 день после предположительного инфицирования).
Также данный анализ назначается для оценки эффективности применяемой терапии, для решения вопроса о начале антиретровирусной терапии, о проведении кесарева сечения у инфицированных беременных за 4 недели до родов.
Такое исследование крови проводят новорожденным детям инфицированных матерей. Полученный дважды положительный ответ говорит о заражении ребенка.
Поводом пройти исследование на ВИЧ-инфекцию может стать множество причин. Тест необходим перед оперативным вмешательством, в случае планирования беременности, риск приобретения данной инфекции несут случайные половые контакты. Отдельная категория граждан (врачи, педагоги, работники пищевых производств, продавцы пищевой продукции и др.) обязана проходить тест в рамках оформления медицинской книжки, являющейся обязательным условием допуска к работе.
Что касается тревожных симптомов, то обычно врачи назначают анализ на ВИЧ при следующих состояниях:
- Резкая потеря веса.
- Диарея, длящаяся более трех недель.
- Лихорадка неясного происхождения.
- Увеличение лимфатических узлов в разных областях.
- Лейкопения и лимфопения.
- Тяжелые инфекционные заболевания: пневмония, кандидоз внутренних органов, туберкулез, манифестный токсоплазмоз, частые случаи обострения герпесвирусной инфекции и другие.
Специальной подготовки перед сдачей венозной крови не требуется. Единственное — это воздержание от приема пищи в течение 8–10 часов. Также накануне рекомендуется избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от употребления алкоголя.
Вся процедура забора венозной крови занимает не более пяти минут. После взятия материала место укола дезинфицируют и заклеивают специальным пластырем. Так как анализ берется натощак, во избежание головокружения после забора крови следует выпить сладкий чай или съесть кусочек шоколада.
В государственных поликлиниках, чтобы получить направление на анализ, придется сначала посетить участкового терапевта. В частных же медицинских центрах нужно просто заполнить заявку на анализ. Для этого в клинике попросят предъявить паспорт или какой-либо другой документ, удостоверяющий личность (миграционная карта, водительские права, военный билет и т. д.). Документ позволит идентифицировать результаты анализа. Впрочем, тест на ВИЧ можно сделать и анонимно. В этом случае заявке и образцу крови, который отправляется на анализ в лабораторию, присваивается номер, известный лишь пациенту и медицинскому персоналу. Однако результаты анонимных исследований не могут быть представлены для госпитализации, в женские консультации и не могут быть зарегистрированы в ОРУИБ (Отдел регистрации и учета инфекционных болезней).
Следует помнить, что интерпретировать результаты исследования и поставить точный диагноз способен только врач. Полученный результат ни в коем случае не может быть поводом для самолечения, к тому же одни и те же результаты у разных пациентов могут говорить о противоположной клинической картине.
Показывает объем выявленной РНК вируса иммунодефицита человека, выраженный в C/ml (копии/мл). Интерпретировать результаты следует следующим образом:
- РНК не выявлена, либо значение ниже предела чувствительности метода (20 копий/мл).
- Меньше 20 копий/мл — РНК выявлена в концентрации на пределе чувствительности метода, характеристика с удовлетворительной точностью невозможна.
- От 20 до 10 6 копий/мл — полученное значение находится в пределах линейного диапазона, результат достоверен.
- Больше 10 6 копий/мл — РНК выявлена в указанной концентрации, выходящей за верхний предел линейного диапазона.
Анализы на ВИЧ можно сдать в частных клиниках. В этом случае стоимость скринингового исследования иммуноферментными методами в среднем составит от 400 до 800 рублей. Срок выполнения исследования — один рабочий день, хотя возможна и срочная диагностика, в таком случае ответ будет получен через 2 часа.
Верификационное исследование методом иммуноблота обойдется в 3000–5000 рублей. Результаты станут известны через 3–7 рабочих дней.
Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени представляет собой более сложный анализ, поэтому его стоимость намного выше — она составляет 10 000–12 000 рублей. Результаты исследования готовятся в среднем 10–14 рабочих дней.
Согласно законодательству все иммунные анализы в государственных медицинских учреждениях проводятся бесплатно. В обязательном порядке проверку на ВИЧ-инфекцию проходят беременные женщины, пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству и госпитализации. В остальных случаях направление на данное исследование назначается по усмотрению врача.
Пройти анализ на ВИЧ-инфекцию сегодня не составляет сложности. Сама процедура практически безболезненна и занимает считанные минуты. Современное оборудование и методики проведения теста позволяют получить максимально точные результаты.
Вопреки некоторым мнениям, ВИЧ не является приговором. Инфицированные люди способны прожить долгую, полноценную жизнь. Они могут иметь семью, детей, без опасений общаться с окружающими. Главное при этом выполнять особые правила гигиены и бытового поведения, знать, как свести к минимуму риск заражения домочадцев. А в случае возникновения сомнительных или спорных ситуаций — обращаться к специалистам: врачам, психологам. Но ни в коем случае не замыкаться и не ставить на жизни крест.
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.
Читайте также: