Диагностика излеченности от сифилиса
Диагностика сифилиса по сей день считается достаточно сложной процедурой, не всегда гарантирующей быстрые и правильные результаты. Как провериться на сифилис и верно определить результаты всех проведенных исследований?
Что такое лабораторное подтверждение указанного диагноза, каким образом оно производится? Как диагностировать вторичный сифилис или латентную стадию заболевания? Рассмотрим эти вопросы в данной статье.
Методы диагностики
Прежде всего, при наличии подозрений на сифилис следует немедленно отправиться на консультацию к венерологу. Уже на стадии консультирования и осмотра врач может выставить предварительный анализ.
Для диагностики венерологу нужно собрать анамнез, т.е. всю необходимую информацию: об особенностях половой жизни пациента, наличии у него контактов с возможными сифилитиками, жалобах, были ли раньше венерические заболевания и пр.
Получив эту информацию, венеролог концентрируется на решении вопроса, какому заболеванию свойственна выявленная в ходе сбора анамнеза симптоматика. Далее с целью проверки на недуг проводится клинический осмотр пациента.
Наибольшее внимание врач уделяет осмотру и изучению кожи и слизистых оболочек половых органов, заднего прохода, а также слизистых полости рта. Тщательно ощупываются лимфатические узлы, выявляются очаги их некроза.
На этом этапе обследования можно с высокой точности распознать недуг, т.е. выставить первичный диагноз. Но чтобы удостовериться в этом на 100%, необходим целый ряд лабораторных исследований с положительными данными.
Этот вид диагностики делится на два отдельных исследования. В первом случае можно выявить возбудителя этого сложного заболевания, во втором – определить степень изменения иммунитета больного.
Выявление бледной трепонемы осуществляется с помощью известной медицинской технологии под названием темнопольная микроскопия бактерий. Науке известно, что бледная трепонема плохо окрашивается традиционными красителями.
Поэтому на темном поле специального микроскопа она немедленно становится видна в виде небольшой спирали. При этом исследуется материал, взятый из язвочки, похожей на сифилитическую, являющейся результатом первичной инфекции.
В этом случае биологический материал обрабатывается специальной сывороткой, в результате действия которой бледная трепонема начинает светиться, выглядит очень красиво и нарядно.
С помощью этой реакции врач обнаружит ДНК бледной трепонемы, т.е. посредством ПЦР можно окончательно доказать наличие в организме больного данного инфекционного агента.
Серологическая диагностика
Как диагностировать это заболевание по иммунологическим показателям? Их исследование в медицине именуется серологией. Серодиагностика обладает множеством современных методов, они широко применяются на практике.
Все эти методы основаны на исследовании крови пациента. Одна группа методов направлена на выделение в крови антител против бледной трепонемы, Вторая группа изучает изменения в иммунитете в связи с деятельностью этой вредоносной бактерии.
1) Микроскопическая реакция преципитации.
В ходе этого исследования в крови больного выявляются и проверяются антитела, которые были выработаны его иммунной системой против клеток организма, поврежденных в результате деятельности бледной трепонемы.
Этот вид тестирования имеет высокую достоверность, но может выявить не только сифилис, но и иные заболевания (например, гонорею, её возбудителями являются гонококки). Поэтому с помощью теста появляется только подозрение на инфекцию.
Преципитацию часто используют не для диагностики, но и изучения эффективности терапии. Если пациент благополучно излечился, то указанная выше реакция становится отрицательной.
Этим этот вид лабораторного исследования существенно отличается от других вариантов серологических исследований, которые после излечения долго могут давать положительную реакцию, фиксировать наличие болезни в организме человека.
2) Реакция Вассермана.
Что такое трепонемная серология?
1) Реакция иммунологической флюоресценции.
В ходе данного тестирования обнаруживаются антитела, которые вырабатывает иммунитет человека, зараженного трепонемой. В ходе исследования сыворотка крови человека взаимодействует с препаратом, имеющим в своем составе антитела.
После смешивания обоих компонентов: сыворотки и антител, помеченных специальным светящимся веществом, они связываются друг с другом, после чего исследуются посредством специального микроскопа.
2) Иммуноферментный анализ.
С помощью этого анализа эффективно выявляется большинство инфекционных болезней. В ходе него происходит реакция антигена с антителами самого различного класса. При этом легко определить их количество.
По типу антител и их количеству можно сделать выводы по поводу диагноза, длительности течения выявленного заболевания, развитию патологического процесса, активности трепонемы, силе иммунной системы больного.
Благодаря обилию показателей зарождения, развития и течения болезни, этот анализ просто не заменим при диагностике множества инфекционных болезней. А также в качестве контроля их развития и излечения.
3) Реакция гемагглютинации.
В результате этого теста склеиваются эритроциты. Суть ее в том, что после предварительной подготовки на поверхности эритроцитов, фиксируются белки трепонемы.
Эти материалы перемешиваются с сывороткой крови, в которой имеются антитела к этой вредоносной бактерии. После склеивания эритроцитов исследуемая кровь становится густой и зернистой.
Интересно, что даже после полного излечения от недуга описанная выше реакция может давать положительный результат и сбивать врачей, занимающихся диагностикой иных инфекционных болезней.
Изменения в иммунной системе сифилитика
Итак, диагностика недуга и контроль его эффективного излечения – сложная профессиональная задача. А больному без серьезного образования в области медицины разобраться в хитросплетениях анализов и реакций попросту невозможно.
Попробуем просто и доступно объяснить развитие изменений в иммунной системе больного, и по каким лабораторным показателям это можно быстро выявить, чтобы своевременно поставить правильный диагноз.
Сразу после попадания инфекции (бледной трепонемы) в организм человека она сталкивается с иммунными клетками. Они немедленно идентифицируют ее, как чужеродный и опасный микроорганизм, и начинают действовать.
В крови больного, спустя неделю или месяц, появляются антитела, оказывающие специфическое воздействие на бактерии бледной трепонемы. Их можно разделить на два класса антител.
Первые свидетельствуют, что инфицирование произошло совсем недавно (неделю назад). Вторые говорят о том, что организм уже среагировал должным образом и сформировал собственную защиту, устойчивый иммунитет от болезни.
Перед появлением клинических симптомов этой болезни в крови больного выявляются специфические антитела. В ходе лечения количество антител существенно снижается и постепенно нормализуется. Формируется стойкий иммунитет к трепонеме в будущем.
Как интерпретировать результаты серологии?
Сегодня большинство венерологов в своей профессиональной практике, чтобы диагностировать сифилис чаще всего используются три реакции:
Если все три исследования дали отрицательный результат, значит, инфицирование отсутствует, либо диагностика проведена ранее определенного срока. Делать это нужно через семь дней после заражения.
Если все три исследования дали положительный результат, значит, наличие недуга в организме пациента подтверждено, и следует немедленно начать его интенсивное лечение, чтобы болезнь не переросла в хроническую форму.
Если отрицательные показатели выдала только реакция преципитации, значит, у пациента поздняя стадия лечения болезни, или терапия уже завершена. Положительный результат свидетельствует о наличии антител в крови.
Если отрицательные данные только у реакции флюоресценции, следует пройти все исследования вновь, т.к. велика вероятность, что они проведены неправильно и дают ложные показатели.
Если положительные показатели дала только гемагглютинация, значит, она либо ложная (проведена с нарушением установленных правил), либо проведена после окончания терапии заболевания.
Если положительные показатели дала только реакция флюоресценции, это либо ранняя стадия недуга, либо проведена после эффективной терапии. Если положительную реакцию дала только преципитация, то результат исследований – ложен.
Следовательно, для качественной диагностики этого сложного инфекционного заболевания только серологии недостаточно. Для постановки правильного и окончательного диагноза обязателен весь комплекс клинических исследований и дифференциальная диагностика.
Обычно РВ ставится с двумя или тремя антигенами. Наиболее часто применяется отличающийся высокой чувствительностью кардиолипиновый антиген (экстракт из сердца быка, обогащенный холестерином и лецитином) и трепонемный антиген (обработанная ультразвуком взвесь анатогенных культуральных бледных трепонем). Совместно с реагинами сыворотки крови больного эти антигены образуют иммунный комплекс, способный адсорбировать и связывать комплемент. Для визуального определения образованного комплекса (реагины + антиген + комплемент) в качестве индикатора применяется гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент связан в 1 фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), гемолиз не наступает - эритроциты выпадают в легко заметный осадок (РВ положительная). Если в 1 фазе комплемент не связан вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, он будет использован гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза при постановке РВ оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза ++++ или 4+ (РВ резкоположительная); едва начавшийся гемолиз +++ или 3+ (РВ положительная); значительный гемолиз ++ или 2+ (РВ слабоположительная); непонятная картина гемолиза ± (РВ сомнительная); полный гемолиз - (реакция Вассермана отрицательная).
Помимо качественной оценки РВ имеется количественная постановка с различными разведениями сыворотки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагинов определяется максимальным разведением, еще дающим резко положительный (4+) результат. Количественная постановка РВ имеет значение в диагностике некоторых клинических форм сифилитической инфекции, а также при проведении контроля за эффективностью лечения. В настоящее время реакция Вассермана ставится с двумя антигенами (кардиолипиновый и трепонемный озвученный штамм Рейтера). Как правило, РВ становится положительной на 5-6 неделе после заражения у 25-60% больных, на 7-8 неделе - у 75-96%, на 9-19 неделе - у 100%, хотя в последние годы иногда раньше или позже. При этом, титр реагинов постепенно нарастает и достигает максимальной величины (1:160-1:320 и выше) в случае появления генерализованных высыпаний (сифилис вторичный свежий). При позитивации РВ выставляется диагноз первичного серопозитивного сифилиса.
При вторичном свежем и вторичном рецидивном сифилисе РВ положительная у 100% больных, но у истощенных больных с ослабленным иммунитетом может наблюдаться отрицательный результат. Впоследствии титр реагинов постепенно понижается и при вторичном рецидивном сифилисе обычно не превышает 1:80-1:120.
При третичном сифилисе РВ положительная у 65-70% больных и обычно наблюдается низкий титр реагинов (1:20-1:40). При поздних формах сифилиса (сифилис внутренних органов, нервной системы) положительная РВ наблюдается в 50-80% случаев. Титр реагинов колеблется от 1:5 до 1:320.
При скрытом сифилисе положительная РВ отмечается у 100% больных. Титр реагинов от 1:80 до 1:640, а при позднем скрытом сифилисе от 1:10 до 1:20. Быстрое снижение титра реагинов (вплоть до полной негативации) во время лечения свидетельствует об эффективности лечения.
Недостатки реакции Вассермана - недостаточная чувствительность (в начальной стадии первичного сифилиса отрицательная). Она негативная также у 1/3 больных, если они в прошлом лечились антибиотиками, у пациентов третичным активным сифилисом с поражениями кожи и слизистых, костно-суставного аппарата, внутренних органов, центральной нервной системы, при позднем врожденном сифилисе.
Недостаточная специфичность - реакция Вассермана может быть положительная у лиц, которые ранее не болели и не болеют сифилисом. В частности ложноположительные (неспецифические) результаты РВ отмечаются у больных, которые страдают системной красной волчанкой, лепрой, малярией, злокачественными новообразованиями, поражениями печени, обширными инфарктами миокарда и другими заболеваниями, а иногда у совершенно здоровых людей.
Кратковременная ложноположительная реакция Вассермана выявляется у некоторых женщин перед родами или после них, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, после наркоза, приема алкоголя. Как правило, ложноположительная РВ выражена слабо, чаще с низким титром реагинов (1:5-1:20), положительная (3+) или слабо положительная (2+). При массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов составляет 0,1-0,15%. Для преодоления недостаточной чувствительности, пользуются постановкой на холоде (реакция Колляра) и одновременно она ставится с другими серологическими реакциями.
Псевдорезистентность - после проведенного лечения несмотря на положительные серологические реакции бледная трепонема в организме отсутствует. Антигена в организме нет, но продолжается выработка антител, которые фиксируются при постановке серологических реакций.
Серологическая резистентность может развиваться вследствие:
- неполноценного лечения без учета давности и стадии заболевания;
- недостаточной дозы и в частности из-за неучета массы тела пациентов;
- нарушения интервала между введением препаратов;
- сохранения в организме бледных трепонем несмотря на проведенное полноценное специфическое лечение, из-за их стойкости к пенициллину и другим химиопрепаратам в случае наличия скрытых, осумкованных очагов поражения во внутренних органах, нервной системе, лимфатических узлах, которые малодоступны для антибактериальных препаратов (нередко бледные трепонемы обнаруживаются в тканях рубца через много лет после окончания терапии, в лимфатических узлах иногда удается обнаружить бледные трепонемы через 3-5 лет после противосифилитической терапии);
- снижения защитных сил при различных заболеваниях и интоксикациях (эндокринопатии, алкоголизм, наркомания и др.);
- общего истощения (приемом пищи бедной витаминами, белками, жирами).
- сопутствующими неспецифическими заболеваниями внутренних органов, нарушениями сердечнососудистой системы, ревматизмом, дисфункциями эндокринной и нервной систем, тяжелыми хроническими дерматозами, злокачественными новообразованиями;
- поражениями нервной системы (тяжелые травмы, сотрясение головного мозга, психические травмы);
- беременностью; хроническими интоксикациями алкоголем, никотином наркотиками; инфекционными болезнями (малярия, туберкулез, вирусный гепатит, дизентерия, сыпной, брюшной и возвратный тифы).
Статистика заболеваемости сифилисом в России улучшается год от года. Однако ежегодно на тестированиях выявляют тысячи заболевших людей. Обследования на эту болезнь проводят и перед беременностью, и перед любой плановой госпитализацией. Кроме того, ежегодно представители многих профессий проходят диспансеризацию, при которой, кроме всего прочего, нужно сдать анализы на сифилис. И, разумеется, без этого анализа для человека будет закрыта карьера государственного служащего, врача, да и просто вакансии вроде учителей, поваров, воспитателей.
Как диагностировать сифилис?
Современная медицина знает множество способов обнаружить бледную трепонему, которая является возбудителем болезни, в крови человека. Эти методы разделяют на несколько больших групп:
- В первой группе исследований — тесты, при которых в биоматериале ищут присутствие трепонемы. Для этого на исследования забирают материал из язв или пораженных болезнью органов.
- Вторая, серологическая группа методов позволяет выявить косвенные следы присутствия трепонемы в организме. Здесь подразумеваются антитела, активной выработкой которых организм реагирует на инфекцию.
Лабораторное исследование заключается в том, что в пробирке размножают участки ДНК трепонемы в условиях повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе количество искусственно воспроизведенных копий возбудителя болезни удваивается. Специалисты называют это амплификацией фрагментов ДНК. Происходит разделение молекул по их весу, что и позволяет выявить трепонему.
Методика ПЦР-исследования позволит отыскать одну молекулу сифилиса даже в том случае, если она одна на тысячи других молекул. Генетический материал для ПЦР-тестирования могут забирать из непосредственно сифилитических язв, ликвора, плацентарной ткани, крови из пальца и даже семенной жидкости. Наиболее часто врачи используют именно тканевую жидкость из язв.
Эффективность ПЦР-исследования достигает 98,6%. При правильно подготовленном исследовании ложноположительные результаты при этом методе практически исключены. Также именно к данной методике врачи прибегают, если предполагают небольшое содержание трепонем в исследуемом материале. Именно этот фактор становится определяющим, если необходимо провести анализ при подозрении на врожденный сифилис.
Темнопольное микроскопическое исследование считается одним из самых дешевых, но вместе с тем эффективных методов выявления наличия бледной трепонемы, а также:
- Для исследования используют специальный солевой раствор, в который помещают препарат. После этого на предметное стекло направляют узкий пучок яркого света. Из-за так называемого феномена Тиндаля возбудители болезни начинают светиться в темном поле раствора.
- Лучшим материалом для подобного типа исследования также являются пробы тканевой жидкости, полученной из генитальных язв, расположенных, соответственно, на гениталиях. Это один из самых быстрых тестов, потому что результаты анализов будут готовы через несколько часов.
Однако стоит учитывать, что темнопольный метод годится для обнаружения еще живых трепонем. Соответственно, проходить такое исследование после начала наружного лечения практически не имеет смысла, так как будет почти невозможно обнаружить живые образцы возбудителя.
RIT-тест предполагает пересаживание материала от зараженного человека лабораторным кроликам. Чувствительность этих животных к инфекции сифилиса достигает 100%, так что если в биоматериале пациента содержались бледные трепонемы, то они поразят и кролика.
Однако на сегодняшний день этот метод практически не используют в силу дороговизны и временных затрат. При наличии более быстрых анализов врачи предпочитают не ждать, когда симптомы болезни проявятся у животного. Тем не менее этот метод продолжают использовать в исследовательских работах, а также для того, чтобы подтвердить или опровергнуть точность других типов анализов.
Серологические методы позволяют вычленить не сам возбудитель сифилиса в организме, а антитела, с помощью которых организм старается победить заболевание. Ученые подразделяют серологические методы на две группы, речь о которых пойдет ниже.
К нетрепонемным тестам относятся:
- РМП — реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой;
- RPR — тест быстрых плазменных реагинов.
Чаще всего специалисты прибегают к нетрепонемным тестам в том случае, если необходимо сделать массовый скрининг на сифилис. Это связано с тем, что такие тесты достаточно дешевы, не требуют специального лабораторного оборудования и отличаются сравнительно высокой точностью.
Также они не менее эффективны при оценке проводимого лечения. С их помощью можно оперативно следить за уровнем антител к сифилису в крови.
К трепонемным тестам относятся:
- ИФА — иммуноферментный анализ;
- РПГА — реакция пассивной гемагглютинации;
- РИФ — реакция иммунофлюоресценции;
- иммуноблоттинг;
- ИХЛ — иммунохемилюминесценция;
- РИБТ (РИТ) — реакция иммобилизации бледных трепонем.
Трепонемные тесты назначают в тех случаях, когда нужно убедиться, что результат нетрепонемного теста не был ложноположительным. К ним же прибегают в тех случаях, если результат скрининга при помощи трепонемного теста разошелся с результатом нетрепонемного.
Кроме того, трепонемные тесты отлично подходят для применения в том случае, если у болезни еще нет видимых проявлений, но присутствуют подозрения врача, основанные на анамнезе и результатах осмотра. К сожалению, нетрепонемные тесты в этот период малоэффективны и зачастую дают ложноотрицательные результаты.
Этот тип диагностики наиболее часто используется для определенных групп пациентов:
- Подобным тестом стоит воспользоваться каждой беременной женщине, чтобы обезопасить и себя, и будущего ребенка.
- Кроме того, воспользоваться таким методом могут люди, которые проживают в одном помещении с сифилитическими больными, не применяют контрацепцию и часто меняют половых партнеров. Также он подойдет тем, кто не может пройти полноценное обследование в больнице или клинике.
Принцип использования экспресс-теста на сифилис можно сравнить с использованием теста на беременность, однако в нем надо брать несколько капель крови.
Тест лучше всего проводить в первой половине дня натощак. За два дня до предполагаемого тестирования врачи рекомендуют не употреблять спиртное, а примерно за час до процедуры отказаться от сигарет.
Сам анализ занимает немного времени:
- Палец необходимо продезинфицировать спиртовой салфеткой, после чего из пореза выдавить несколько капель крови на тест-устройство.
- Затем добавить туда же идущий в комплекте реагент.
- В среднем нужно подождать 15 минут до появления результата. Специалисты предупреждают, что если результат появился по истечении получаса, то он может быть ложным.
Стоит учитывать, что если человек заразился совсем недавно, то точность и достоверность подобного тестирования не превышает 80%. Так что приравнивать его к полноценному обследованию у специалиста точно не стоит.
Где можно сдать анализ на сифилис?
Заказать исследование биоматериала на сифилис можно:
Сентябрь 8, 2015 / Комментарии 0 |