Если рнк вич 1 не обнаружена
Что нас дурачат ВИЧ/СПИДом уже 30 лет, это медицинский факт, который давно уже не нуждается ни в каких доказательствах. Я никого не хочу обижать, но правда такова, что в настоящий момент, имея перед собой всю имеющуюся информацию об альтернативной точке зрения, то есть представленную ВИЧ-диссидентами, просто невозможно продолжать и далее наивно верить в искусственно созданную и навязанную с помощью циничной и лживой пропаганды ВИЧ/СПИД-теорию.
Если вы высказывали своё недоумение по поводу того, что диагностические тесты на ВИЧ определяют не сам вирус, а только антитела к нему, причём это относится не только к иммуноферментному анализу, но и к считающемуся более точным иммунному блотингу, то наверняка потом слышали уверения врачей или неких осведомлённых людей о том, что вот есть метод полимеразной цепной реакции, который не имеет отношения к антителам, а выявляет непосредственно сам вирус.
Слышали о методе ПЦР-диагностики, и в частности ВИЧ-инфекции? Наверняка. А пробовали хоть немного вникнуть и разобраться? Нет? Итак ясно, что нас дурачат? Хорошо. Но сейчас я покажу это наглядно, на пальцах.
Да, нас действительно нагло и цинично дурачат, когда заверяют, что ПЦР-тест на ВИЧ определяет наличие самого вируса или его концентрацию в крови, то есть вирусную нагрузку. И сразу скажу, что в этом отношении метод ПЦР не только ничем не отличается от ИФА и ИБ, но можно сказать прямо основан на точно таком же принципе.
Что это значит? Напомню, что диагностические ВИЧ-тесты ИФА и Иммуноблот основаны на реакции антител в исследуемом образце с помещёнными в сам тест антигенами вируса. Что там в тест-системах в качестве этих ВИЧ-белков - одному Богу известно, и то наверное далеко не всё. Соответственно, совершенно непонятно, какие антитела вступают в реакцию с этими якобы ВИЧ-белками, в результате чего приводится список в 62 пункта о заболеваниях и состояниях, вызывающих ложноположительную реакцию.
Что лежит в основе метода полимеразной цепной реакции, и каким образом происходит диагностирование на наличие инфекционных заболеваний? В случае с гепатитами и ВИЧ исследуется кровь пациента. Чтобы установить присутствие конкретного возбудителя заболевания в исследуемом образце крови, для ПЦР-тестирования используется праймер, то есть фрагмент ДНК самого возбудителя, комплементарный к специфическому участку его ДНК, то есть в сущности праймер присоединяется к участку ДНК точно так же, как соединяются между собой участки двойной спирали ДНК.
Улавливаете? Берётся ваша кровь, потом к ней добавляется нечто, что якобы несомненно является уникальной частью генома ВИЧ-вируса, добавляются другие необходимые ингредиенты, потом раз тридцать всё это то нагревается, то охлаждается, и в результате - вуаля! вы ВИЧ-положительны! ваша вирусная нагрузка 3 миллиона! срочно начинайте приём терапии!
Но подождите. Вы разве не видите, как с самого начала вас одурачили?
Вас уверяли, что метод ПЦР выявляет сам вирус. Но это абсолютная ложь! Метод ПЦР в этом отношении ничем не отличается от ИФА и ИБ! Как там под видом ВИЧ-антигенов в тест-системах используется неизвестно что, так и в ПЦР-тестах под видом праймеров, выдаваемых за часть ДНК самого ВИЧ, точно так же используется совершенно неизвестно какая субстанция. Вы же понимаете, что если ВИЧ не существует, то не может быть и речи ни о каком ДНК ВИЧ, или РНК ВИЧ, или об антителах к ВИЧ, в частности материнских, которыми нам трахают мозги, рассказывая, что они есть у всех детей от ВИЧ-положительных матерей, и сами собой исчезают на втором году жизни.
Вот так.
- Метод ПЦР выявляет сам вирус ВИЧ, тут не может быть никаких ошибок и сомнений! И этот точнейший метод показывает вирусную нагрузку, что очень важно для наблюдения динамики заболевания и его лечения!
- Ну-ну.. Сам вирус говоришь? А что там используется в качестве праймера? Тот же самый вирус? Тот самый, который Монтанье и Галло открыли 30 лет назад? Правда они его нашли? Правда очистили? Правда сфотографировали? Правда доказали, что он для репликации/воспроизводства использует Т-лимфоциты, в результате чего их общая численность истощается и наступает опасный иммунодефицит? Это всё правда?
И в сущности метод ПЦР в спидологии применяется не столько благодаря его изобретателю Кэри Муллису (скорее даже вопреки его мнению!), сколько благодаря Монтанье и Галло, которые высосали из пальца ВИЧ, и ДНК-праймеры которого используются при ПЦР-диагностике ВИЧ.
Так что вот так вот. Если вам сказали, что по результатам ПЦР-тестирования вы ВИЧ-положительны, и у вас высокая вирусная нагрузка, или речь идёт о вашем ребёнке - не волнуйтесь ни секунды! вас нагло обманывают! Сам изобретатель метода полимеразной цепной реакции, микробиолог Кэри Муллис, является ВИЧ-диссидентом, и он категорически против использования ПЦР в ВИЧ-диагностике, потому как хорошо понимает, что в случае с несуществующим ВИЧ-вирусом это просто наглый циничный обман.
Ещё момент. Вы слышали про неопределяемую вирусную нагрузку? Дело в том, что далеко не у всех ВИЧ-положительных при тестировании на количество вируса в крови выходит некий результат, который в зависимости от величины считается низкой либо высокой вирусной нагрузкой. Если бы таких людей было совсем мало, о них бы вообще не говорили. Но дело в том, что их видимо очень много, и поэтому и говорится о неопределяемой вирусной нагрузке при ВИЧ-инфекции. Я не буду упоминать про пиар терапии, которая якобы снижает ВН до неопределяемой. Нет, в том и дело, что без всякой терапии у очень многих людей она не определяется. Никогда.
То есть, пациенту поставлен диагноз ВИЧ-инфекция, но с помощью знаменитого сверхчувствительного космически точного метода ПЦР-диагностики в его организме невозможно найти ВИЧ-вирус. Как же так?
И тогда нам говорят, что метод конечно уникальнейший, но современные технические средства таки накладывают ограничения, и саааамые маааалые коооолиииичестваааа виииируууссааа не мооогууут быть обнаружены при ПЦР-диагностике.
То есть, ВИЧ у пациента несомненно есть. Вирус неизлечим, неистребим, хитёр, коварен, злокознен, чрезвычайно умён и изобретателен. И даже суперволшебный метод ПЦР не в состоянии обнаружить, где там хитрющий вирус прячется от учёных и врачей.
Получается, что с одной стороны нам рассказывают, какой чудесный и высокоточный метод ПЦР, он де по одной молекуле может угадать всего слона и даже кита - а с другой стороны потувши очи долу нам невнятно мямлят про неопределяемую вирусную нагрузку у тысяч пациентов, которые десятки лет живут с диагнозом ВИЧ-инфекция и не принимают антиретровирусное лечение.
Такие дела. Дурачат нас, как хотят. А вы не будьте непугаными идиотами. Не верьте на слово никаким врачам и учёным. Они вам трижды по семь коробов наговорят про космическую точность ПЦР-тестов, но всего одно замечание об используемых при этом ВИЧ-праймерах в момент и вдребезги разбивают всю великолепную картину. Потому что смеха ради можно сказать, что как Галло запатентовал первые ВИЧ-тесты, когда открыл фальшивый ВИЧ-вирус, точно так же он мог бы запатентовать и ВИЧ-праймеры для ПЦР-диагностики ВИЧ-инфекции, потому что праймеры в сущности то же самое, что и антигены ВИЧ - некие специфичные, присущие только этому вирусу биологические субстанции (фрагменты генома или специфические белки).
Вирус иммунодефицита человека – одно из самых страшных заболеваний прошлого и нынешнего столетия. Его изучение, поиск вакцин и препаратов приносят определенные плоды. Однако полностью победить опасный недуг на сегодняшний день специалистам в области медицины не удалось. Современные методы диагностики позволяют не только выявить вирус иммунодефицита на ранней стадии, но и контролировать течение заболевания в дальнейшем. Для того, чтобы принять решение о необходимости применять ту или иную терапию, используется РНК ВИЧ-анализ. Применяется он и для выявления данного заболевания. Здесь важно отметить, что анализ РНК ВИЧ не является повсеместным. Применяют его лишь в случае необходимости. Как проводится такое исследование, в каких случаях его применяют и какова его достоверность?
Вирус ВИЧ по РНК: суть исследования
Прежде чем говорить о том, каким образом производится определение РНК ВИЧ, следует выяснить, что обозначает эта аббревиатура, и какую роль она играет в организме. Рибонуклеиновая кислота – это молекула, содержание которой отмечается во всех живых организмах и некоторых вирусных инфекциях. Синтез этой молекулы производится на основе матрицы дезоксирибонуклеиновой кислоты. Отвечают за эти процессы определенные ферменты. Это полимеразы рибонуклеиновой кислоты.
Суть исследования такого типа заключается в проверке генного материала вируса. Для того чтобы произвести РНК анализ на ВИЧ специалисты в области медицины используют полимеразную цепную реакцию. ПЦР позволяет многократно увеличить объемы используемого для исследования биологического материала, благодаря чему он проверяется в несколько этапов с использованием сравнительного метода. Стоит отметить, что используется ПЦР на РНК не только при ВИЧ. Такая методика позволяет выявить большое количество наследственных заболеваний, некоторые вирусы и инфекции. Применяется она и для определения наследственных генетических патологий. В качестве биологического материала используется сперма, слюна и кровь. В случае с вирусом иммунодефицита предпочтительным материалом считаются сыворотка и плазма крови.
Тест РНК ВИЧ производится в несколько этапов. После того, как у пациента осуществлен забор крови, она направляется в лабораторию. Биологический материал помещают в специальный реактор, где происходит его расщепление. Для синтеза применяют специальные ферменты. Далее в искусственно созданных условиях из одной молекулы РНК синтезируют две, из двух четыре и так далее. При достижении их нужного количества, происходит сравнение с разными типами вирусов. Кстати, на выходе из одной молекулы рибонуклеиновой кислоты получается несколько сотен или тысяч молекул. РНК ВИЧ ультрачувствительный бывает нескольких видов. Здесь все зависит от цели исследования.
В современной медицине применяется два метода исследования рибонуклеиновой кислоты. Речь идет о количественном и качественном РНК ВИЧ. Оба эти способа исследования схожи, но несут они разные цели. РНК ВИЧ количественный – это определение вирусной нагрузки. Количество вирусных молекул генетической ткани может говорить о многом. В частности о том, на какой стадии находится заболевание в данный момент. Всем известно, что у вируса иммунодефицита их несколько. После наступления сероконверсии количество клеток вируса увеличивается, и его обнаружение становится возможным. На начальных этапах заболевания РНК ВИЧ количественный, норма которого устанавливается в лаборатории, позволяет не только обнаружить вирус иммунодефицита, но и принять решение о необходимости приема антиретровирусной терапии. Определив количественную вирусную нагрузку, специалист может принять решение о том, какую схему терапии необходимо использовать пациенту.
РНК ВИЧ качественный для новорожденных используется часто. Проводить его можно и у взрослых людей, например, для того, чтобы определить тип вируса. Но стоимость такого исследования не позволяет внедрить его во все медицинские учреждения. Поэтому применяют его в педиатрии и неонатологии.
Достоверность РНК ВИЧ, проводимого с чувствительностью 20 ме/мл, велика. Она составляет примерно девяносто один процент. Однако в современной медицине существуют методы, достоверность которых выше. Именно поэтому для определения наличия или отсутствия данного диагноза используется иммуноферментный анализ или иммунный блоттинг. Их достоверность несколько выше. Она составляет девяносто восемь – девяносто девять процентов.
Если говорить о самых оптимальных сроках проведения проверки, то медики назначают ее минимум через месяц после инфицирования. Если основная цель – определить, имеется ли у больного данный диагноз, проводить анализ РНК ВИЧ через 4 недели не стоит, достоверность его может быть неточной. Лучше сделать это через пять – шесть недель.
Если РНК ВИЧ не обнаружены, что это значит? Этот вопрос нередко задают специалистам в области медицины. Это может означать, что вирус иммунодефицита отсутствует, или говорит о том, что проверка была проведена слишком рано.
Предпочтительным методом проверки новорожденных на предмет наличия или отсутствия вируса иммунодефицита в том случае, если они родились у инфицированной матери, является анализ рибонуклеиновой кислоты. В этом случае РНК ВИЧ 20 ме/мл производится в первые 10 дней жизни малыша. Выявить наличие заболевания возможно и при помощи иммуноферментного анализа. Однако перед медиками стоит другая задача. Речь идет о необходимости определить, какие антитела вырабатывает организм малыша. Дело в том, что у младенца, рожденного от инфицированной матери, они будут в любом случае. Однако, иногда это всего лишь защита иммунной системы, а не факт заражения. Повторно достоверность ПЦР РНК ВИЧ проверяется через 6 месяцев.
14 сен 2016,
11:44Плазмаферез при псориазе
Поскольку псориаз носит аутоиммунный характер, одним из возможных провоцирующих факторов активации патологических процессов служит ослабление защитных сил организма в результате накопления в крови…
14 сен 2016,
12:11Голодание при псориазе
Лечение псориаза голоданием – один из немногих способов, позволяющий в комбинации с традиционными методиками добиться ремиссии или облегчения симптоматики заболевания. Если проводить голодание…
За последние несколько дней основная пресса энергично выдвинула теорию о происхождении коронавируса, который в настоящее время заразил более 70 000 человек только в Ухане (в зависимости от того, кому вы верите). Теория состоит в том, что Китай получил коронавирус через канадскую исследовательскую программу и начал превращать его в биологическое оружие в Институте вирусологии в Ухани. Политифакт указал пальцем на Ноль Хедж, в частности, хотя эта история была широко распространена среди независимых СМИ.
На сайте biorxiv.org ученые опубликовали вот такую любопытную информацию:
В настоящее время мы наблюдаем крупную эпидемию, вызванную новым коронавирусом 2019 года (2019 нКоВ). Эволюция 2019-нКоВ остается неясной. Мы нашли 4 вставки в спайке гликопротеина (S), которые являются уникальными для 2019-нКоВ и отсутствуют в других коронавирусах. Важно отметить, что аминокислотные остатки во всех 4 вставках имеют идентичность или сходство с остатками gp120 ВИЧ-1 или Gag ВИЧ-1. Интересно, что, несмотря на то, что вставки являются прерывистыми по первичной аминокислотной последовательности, 3D-моделирование 2019-нКоВ предполагает, что они сходятся, образуя цепь связывания рецептора. Обнаружение 4 уникальных вставок в 2019-нКоВ, все из которых имеют идентичность / сходство с аминокислотными остатками в ключевых структурных белках ВИЧ-1, вряд ли будет случайным по своей природе.
Теория состоит в том, что вирус, который был разработан экспертами в области инфекционных заболеваний для функционирования в качестве биологического оружия, был создан в лаборатории в Ухане доктора Пэн Чжоу , выдающегося исследователя иммунной системы летучих мышей в Китае, особенно в том, как адаптируется их иммунная система. на наличие вирусов, таких как коронавирус и другие разрушительные вирусы. Каким-то образом вирус вырвался из лаборатории, и рыбный рынок Хунани, где предположительно возник вирус, является всего лишь уловкой.
Теперь уважаемый эпидемиолог, который недавно заразился подозрением в том, что заявил в твиттере угрозу, что вирус оказался гораздо более заразным, чем первоначально предполагалось, указывает на нарушения в геноме вируса, которые предполагают, что он мог быть генетически спроектирован для целей оружия, и не просто оружие, а самое смертоносное из всех.
Для тех, кто испытывает нехватку времени, вот ключевые выводы из статьи, которая сначала фокусируется на уникальной природе 2019-нКоВ, а затем наблюдает четыре аминокислотные последовательности в коронавирусе Ухань, которые гомологичны аминокислотным последовательностям в ВИЧ1:
Наше филогенетическое древо полноразмерных коронавирусов предполагает, что 2019-нКоВ тесно связан с SARS CoV [Fig1].
Кроме того, другие недавние исследования связывают 2019-нКоВ с SARS CoV. Поэтому мы сравнили последовательности шипового гликопротеина 2019-нКоВ с последовательностями SARS CoV (регистрационный номер NCBI: AY390556.1). При тщательном изучении выравнивания последовательностей мы обнаружили, что пикоплик гликопротеин 2019-nCoV содержит 4 вставки [Рис.2]. Чтобы дополнительно исследовать, присутствуют ли эти вставки в каком-либо другом коронирусном вирусе, мы выполнили многократное выравнивание последовательностей аминокислотных последовательностей спайка гликопротеина всех доступных коронавирусов (n = 55) [см. Таблицу S.File1] в рефлексе NCBI (ncbi.nlm). .nih.gov) это включает одну последовательность 2019-нКоВ [Рис. S1]. Мы обнаружили, что эти 4 вставки [вставки 1, 2, 3 и 4] являются уникальными для 2019-нКоВ и не присутствуют в других проанализированных коронавирусах. Другая группа из Китая зарегистрировала три вставки, в которых сравнивалось меньше последовательностей спайков гликопротеинов коронавирусов. Другая группа из Китая зарегистрировала три вставки, в которых сравнивалось меньше последовательностей спайков гликопротеинов коронавирусов (Zhou et al., 2020).
Затем мы перевели выровненный геном и обнаружили, что эти вставки присутствуют во всех вирусах Wuhan 2019-nCoV, за исключением вируса 2019-nCoV Бата в качестве хозяина [Fig. S4]. Заинтригованные 4 высококонсервативными вставками, уникальными для 2019-nCoV, мы хотели понять их происхождение. Для этой цели мы использовали локальное выравнивание 2019-nCoV с каждой вставкой в качестве запроса ко всем вирусным геномам и рассматривали совпадения со 100% охватом последовательности. Удивительно, но каждая из четырех вставок выровнена с короткими сегментами белков вируса иммунодефицита человека (ВИЧ-1) . Аминокислотные положения вставок в 2019-нКоВ и соответствующих остатков в gp120 ВИЧ-1 и Gag ВИЧ-1 показаны в таблице 1.
Первые 3 вставки (вставки 1, 2 и 3) выровнены с короткими сегментами аминокислотных остатков в gp120 ВИЧ-1. Вставка 4 выровнена к ВИЧ-1 Gag. Вставка 1 (6 аминокислотных остатков) и вставка 2 (6 аминокислотных остатков) в пике гликопротеина 2019-нКоВ на 100% идентичны остаткам, сопоставленным с gp120 ВИЧ-1. Вставка 3 (12 аминокислотных остатков) в 2019-нКоВ сопоставляется с gp120 ВИЧ-1 с пробелами [см. Таблицу 1]. Вставка 4 (8 аминокислотных остатков) отображается на Gag ВИЧ-1 с пробелами.
Наблюдалось, что вставки присутствуют во всех геномных последовательностях вируса 2019-nCoV, доступных из недавних клинических изолятов. Чтобы узнать источник этих вставок в 2019-нКоВ, было выполнено локальное выравнивание с BLASTp с использованием этих вставок в качестве запроса для всего генома вируса. Неожиданно все вставки были приведены в соответствие с вирусом иммунодефицита человека-1 (ВИЧ-1). Дальнейший анализ показал, что выровненные последовательности ВИЧ-1 с 2019-нКоВ были получены из поверхностного гликопротеина gp120 (положения аминокислотных последовательностей: 404-409, 462-467, 136-150) и из белка Gag (аминокислота 366-384) ( Таблица 1).Gag белок ВИЧ участвует в связывании мембраны хозяина, упаковке вируса и образовании вирусоподобных частиц. Gp120 играет решающую роль в распознавании клетки-хозяина путем связывания с первичным рецептором CD4. Это связывание индуцирует структурные перестройки в GP120, создавая сайт связывания с высокой аффинностью для хемокинового корецептора, такого как CXCR4 и / или CCR5.
Трехмерное моделирование структуры белка показало, что эти вставки присутствуют в сайте связывания 2019-нКоВ. Из-за присутствия мотивов gp120 в гликопротеине-пике 2019-nCoV в его связывающем домене, мы предполагаем, что эти вставки мотива могли обеспечить повышенную аффинность к рецепторам клетки-хозяина. Кроме того, это структурное изменение могло также увеличить диапазон клеток-хозяев, которые может заразить 2019-нКоВ . Насколько нам известно, функция этих мотивов до сих пор не ясна в отношении ВИЧ и нуждается в изучении. Обмен генетическим материалом между вирусами хорошо известен, и такой критический обмен подчеркивает риск и необходимость исследовать отношения между, по-видимому, не связанными семействами вирусов.
Один ученных пишет так: Боже ты мой. Индийские ученые только что обнаружили вирусоподобные инсерции ВИЧ (СПИД) в вирусе 2019-nCov, которых нет ни в одном другом коронавирусе. Они намекают на возможность того, что этот китайский вирус был разработан
Чему собственно удивляться, когда Биолаборатории Пентагона разбросаны по всему миру
карта биолаболатории Пентагона
Для диагностики ВИЧ-инфекции проводится определение в крови антител к вирусу, его антигенов или генетического материала. Основных методов исследования два: Комботест, в ходе которого определяются антитела и антигены, а также ПЦР для оценки концентрации РНК в крови. Первое исследование в основном используют для первичной диагностики ВИЧ, второе – для оценки вирусной нагрузки, и лишь в небольшом числе случаев для первичной диагностики.
Особенности назначения исследования на вирус иммунодефицита
Обследование на ВИЧ проводится в рамках скрининга, по клиническим или эпидемиологическим показаниям. В некоторых случаях оно является обязательным, в других – добровольным.
Обязательное обследование
Обязательному периодическому обследованию на эту инфекцию подлежат:
- Доноры любого биоматериала. Чаще всего донорство используется в гематологии и онкологии. Доноры могут сдавать кровь и половые клетки (сперматозоиды, яйцеклетки). Реже используется донорство стволовых клеток, внутренних органов. В ходе переливания крови или использования любого другого биоматериала может произойти передача ВИЧ, поэтому всех доноров проверяют на эту инфекцию. В случае получения даже сомнительных результатов анализов донорство для них запрещают пожизненно.
- Представители некоторых профессий обследуются каждый раз, устраиваясь на работу. Некоторые также проходят периодическое профилактическое обследование на ВИЧ.
- Беременные. Согласно действующему приказу, беременных обследуют однократно, в последнем триместре. Если женщина не прошла диагностику в этот период, анализы берутся сразу после поступления в роддом.
- Дети, рожденные от ВИЧ-инфицированных матерей. Требует проведения обследования минимум три раза. Первый раз диагностика проводится сразу после рождения. Затем требуются повторные анализы в возрасте одного и полутора лет.
- Все учащиеся в военных учебных заведениях – обследуются однократно, при поступлении. Анализы также сдают при поступлении на воинскую службу.
- Иностранцы, которые запрашивают российское гражданство, вид на жительство или разрешение на работу в РФ.
Добровольное обследование
Поводом для добровольного обследования на ВИЧ-инфекцию могут стать три группы показаний. Это пациенты, имеющие симптомы острого заболевания, лица с признаками иммунодефицита, а также люди без каких-либо проявлений ВИЧ, но имеющие высокий риск этого заболевания (обнаружение одного или нескольких факторов риска, свидетельствующих о значительной вероятности заражения).
- длительные, плохо поддающиеся лечению, частые пневмонии;
- любые бактериальные, вирусные, грибковые инфекции, которые протекают тяжелее, чем у большинства людей (включая диссеминированную герпетическую инфекцию, герпетический менингоэнцефалит, инвазивный кандидоз или глубокие микозы);
- хронические воспалительные процессы малого таза у пациентов женского пола, которые не поддаются лечению стандартными методами.
- опоясывающий герпес у лиц, моложе 60 лет;
- криптококкоз (кроме легочной формы);
- пневмоцистная пневмония;
- поражения головного мозга токсоплазмой;
- криптоспоридиоз;
- гистоплазмоз;
- саркома Капоши;
- онкогематологические заболевания.
Обследоваться на ВИЧ рекомендовано лицам из групп риска по этому заболеванию. К факторам риска относятся гомосексуализм, проституция, беспорядочная половая жизнь, наркомания, пребывание в местах лишения свободы. Обследуют контактных лиц: в основном после полового акта с носителем инфекции или медицинских работников, проконтактировавших с кровью ВИЧ-позитивного пациента.
Методы лабораторной диагностики иммунодефицита
Основным методом первичной диагностики у взрослых является одновременное определение антител к ВИЧ 1 и 2 типов и антигена р25/24. Для этого используют ИФА или иммунохемилюминесцентный анализ. В качестве подтверждающего теста используют иммуноблот (может обозначаться аббревиатурой ИБ).
ПЦР используют как уточняющий метод для определения показаний к назначению лечения, оценки его эффективности. В некоторых ситуациях метод используют для первичной диагностики. Он применяется:
- Для обследования контактных лиц. Антитела в крови не образуются моментально. Они появляются только через несколько месяцев. Чтобы получить ответ в короткие сроки, определяется наиболее ранний маркер ВИЧ в крови – РНК вируса.
- Для обследования новорожденных. В их крови циркулируют материнские антитела. Поэтому проведенный анализ ИФА всегда будет положительным, независимо от того, болен ребенок или нет. Но вирусной РНК в его крови быть не должно. Поэтому ПЦР позволяет дать ответ, заразился ли новорожденный во время родов.
Расшифровка результата анализа при СПИДе
Стандартная схема обследования пациента предполагает проведение ИФА. В случае получения положительного результата нужно исключение ложноположительных реакций. Поэтому выполняется иммуноблот. Этот тест считается подтверждающим, он очень редко дает ложные результаты. Если они и бывают, то в основном связаны с человеческим фактором – ошибкой лаборатории, в которой проводилось тестирование.
Расшифровка ИФА и ИБ
Первичная диагностика может дать три варианта результатов:
Результаты обследования с помощью иммуноблота могут быть сомнительными. В этом случае человек должен наблюдаться в течение 6 месяцев. Повторное обследование проводят через 1-3 месяца. Если снова получен сомнительный результат, с высокой вероятностью человек здоров. Последнее обследование проводят спустя полгода. Получение сомнительного результата не является поводом для установления ВИЧ. Но пациент пожизненно отстраняется от донорства.
При выполнении перечисленных тестов расшифровка не представляет затруднений. На бумаге, выданной пациенту, пишется, положительный результат получен в ходе анализа или отрицательный. Количественных результатов нет.
Расшифровка ПЦР
Особого внимания заслуживает расшифровка результатов ПЦР. Ведь этот анализ дает количественные показатели. Он не только оценивает факт наличия или отсутствия вируса, но также сообщает врачу о количестве копий РНК вируса на 1 мл крови. Иногда обозначение результатов выглядит по-другому: может использоваться геномный эквивалент.
- Любое количество копий вирусной ДНК – повод для установления диагноза ВИЧ-инфекции.
- Вирусная нагрузка 100 000 копий/мл и более – оценивается как высокая.
- Вирусная нагрузка 10 000 копий/мл и меньше – классифицируется как низкая.
Вирусная нагрузка – важный показатель, позволяющий оценить эффективность проводимой антиретровирусной терапии. ПЦР помогает понять, работают ли назначенные врачом препараты. Если они работают, то назначение лекарств позволяет снизить вирусную нагрузку на 99% в течение 2 недель. У 85% пациентов после начала антиретровирусной терапии через 4 недели вирусная нагрузка не превышает 1000 копий/мл. Если лечение начинают при исходном уровне РНК ВИЧ меньше 1000 копий/мл, то через 2 недели она становится неопределяемой. При исходном уровне РНК 1 миллион копий/мл вирус перестает определяться в крови в среднем через 113 дней терапии.
В ходе лечения вирусная нагрузка при помощи ПЦР измеряется через каждые 4 недели. Этого срока вполне достаточно, чтобы спрогнозировать дальнейшую динамику. Если препарат не работает, это видно намного раньше – уже через 1-2 недели ПЦР позволяет получить результаты, которые демонстрируют вирусологическую неудачу с точностью 99%.
Порог определения вирусной нагрузки у разных лабораторных тестов отличается. В основном он составляет 20-50 копий/мл. Целью лечения является достижение отрицательных результатов ПЦР. До этого момента тест проводится каждый месяц. После получения отрицательного результата достаточно дальнейшего контроля 1 раз в 3 месяца. С такой периодичностью лабораторных контроль успешности лечения осуществляется до того момента, пока вирусная нагрузка снова не начнет увеличиваться. В этом случае пациента вновь будут обследовать через каждые 4 недели.
Обычно в первый месяц терапии вирусная нагрузка уменьшается в 100 раз и более. Максимум через 6 месяцев (при высокой исходной нагрузке) она становится неопределяемой.
Теоретически, ПЦР может определять вирус иммунодефицита не только в крови. В качестве материала для тестирования подходит эякулят, вагинальное отделяемое или ликвор. Но в медицинской практике такие исследования не проводятся. Их используют только в научных целях.
Значительно реже ПЦР используется как метод, позволяющий определить показания для начала антиретровирусной терапии. Пациентов с нормальным иммунитетом, без уменьшения CD4 клеток, обычно не лечат. В том числе в случаях, когда вирусная нагрузка высокая. Но эти показатели напрямую взаимосвязаны. Обычно чем выше количество копий РНК вируса, тем быстрее прогрессируют иммунные нарушения.
Основным исследованием, позволяющим оценить показания к началу антиретровирусной терапии, остается определение CD4. По европейским рекомендациям, лечение может быть назначено при уровне CD4 более 350 клеток/мкл только при наличии дополнительных факторов риска развития СПИД. Одним из них является вирусная нагрузка свыше 100 000 копий РНК в мл крови.
Как исключают вероятность получения ложного результата исследований
Основной метод диагностики ВИЧ – ИФА. Он обладает чувствительностью 99% и специфичностью 99,5%. Это означает, что ложноотрицательные результаты получает 1 из 100 пациентов, ложноотрицательные – 1 из 200 больных. К тому же, анализ может оказаться отрицательным в первые месяцы после инфицирования. Риск его получения, в зависимости от сроков проведения:
- через 3 месяца – 5-10%;
- через 6 месяцев – 1-2%.
- наличие антител к аутоантигенам HLA класса II;
- реактивные воспалительные процессы;
- заболевания печени;
- недавняя вакцинация.
Если для первичной диагностики использовалась ПЦР, при возникновении сомнений в результатах тест может быть проведен повторно. Методы обнаружения РНК ВИЧ-1 дают 2-5% ложных отрицательных результатов. Концентрация вируса при этом всегда составляет менее 2000 копий/мл. Повторное проведение теста с высокой вероятностью дает правильный отрицательный результат, если пациент не инфицирован.
Читайте также: