Как хранится сыворотка при исследовании на вич

ПРИЛОЖЕНИЕ № 1
к приказу Минздравмедпрома РФ от 16.08.1994 г. № 170

Методические указания по организации лечебно-диагностической помощи и диспансерного наблюдения за больными ВИЧ-инфекцией и СПИДом

Основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител к вирусу с помощью иммуноферментного анализа.

Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3-х месяцев после заражения, у 5-9% — через 6 месяцев от момента заражения и у 0,5-1% — в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител — 2 недели от момента заражения. В терминальной фазе СПИД количество антител может значительно снижаться, вплоть до полного их исчезновения.

Серологическая диагностика инфекции ВИЧ на первом этапе строится на выявлении суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. На втором этапе методом иммунного блоттинга (Western blot) проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

Забор крови производится из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 3-5 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь. Полученный материал не рекомендуется хранить более 12 часов при комнатной температуре и более 1 суток в холодильнике при +4-8° С. Наступающий гемолиз может повлиять на результаты анализа. Лучше всего сразу после взятия крови отобрать из нее сыворотку. Сыворотка отделяется центрифугированием или обводкой крови по стенке пробирки пастеровской пипеткой, либо стеклянной палочкой. Отделенная сыворотка переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку, флакон или пластиковый контейнер, и в таком виде она может хранится до 7 дней при температуре +4-8° С.

При работе следует соблюдать правила техники безопасности, приведенные в "Инструкции по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД" № 42-28/38-90 от 5 июля 1990 года.

Для проведения лабораторных исследований с помощью ферментных методов необходимо иметь следующее оборудование:

1. спектрофотометр;
2. отмыватель планшетов;
3. термостат;
4. автоматические пипетки;
5. наконечники к автоматическим пипеткам;
6. центрифуги;
7. холодильники;
8. тест-системы.

В настоящее время в России рекомендовано к применению достаточное количество тест-систем для выявления антител к ВИЧ. Все они основаны на общем принципе иммуноферментного анализа.

Нагрузка на бригаду иммуноферментного анализа должна составлять до 400 исследований в смену, при условии оснащения современным автоматическим оборудованием и до 180-200 исследований, оснащенных отечественным рутинным оборудованием.

Принцип иммуноферментного анализа основан на выявлении комплекса антиген-антитело с помощью фермента (пероксидаза, щелочная фосфатаза и др.) по изменению окраски специфического субстрата. Основной компонент твердофазных иммуноферментных тест-систем — полистироловый планшет с лунками или полистироловые шарики, на поверхности которых сорбирован антиген: вирусный лизат, рекомбинантные белки или синтетические антигенные детерминанты. Из всех модификаций твердофазного иммуноферментного анализа для диагностики инфекции, вызываемой ВИЧ, наиболее широко применяются непрямой и конкурентный варианты.

Предварительно приготовленный согласно инструкции, прилагаемой к набору, исследуемый материал (сыворотка, плазма) вносится в лунку планшета. Если этого требует методика, планшет предварительно отмывается. Несколько лунок планшета заполняются контрольными сыворотками, содержащими и не содержащими антитела к ВИЧ. При работе с контрольными сыворотками необходимо строго соблюдать инструкции по применению диагностической тест-системы, т.к. интерпретация результатов зависит от значений оптической плотности контрольных сывороток. Планшет с внесенными контрольными сыворотками и исследуемым материалом инкубируется при условиях, указанных в инструкции, прилагаемой к диагностическому набору.

Если специфические антитела присутствуют в сыворотке, они образуют комплекс с антигеном, сорбированным на поверхности лунок планшета. Несвязавшиеся с антигеном антитела удаляются при отмывке планшета.

Затем во все лунки планшета вносят конъюгат-антитела против иммуноглобулинов человека, меченые ферментом (пероксидаза, щелочная фосфатаза и др.). При последующей инкубации происходит образование комплекса антиген-антитело-конъюгат. Несвязавшийся конъюгат удаляется во время отмывки планшета. Наиболее широко применяемым индикаторным ферментом для иммуноферментного анализа является пероксидаза хрена. Субстратом для нее является перекись водорода. Эта реакция протекает без видимых проявлений. Изменение окраски раствора происходит при окислении красителей (ортофенилендиамина или др.), который входит в состав субстратного раствора.

Краситель из восстановленной формы переходит в окисленную окрашенную форму. Таким образом, происходит окрашивание только тех лунок, в которых присутствует комплекс антиген-антитело-конъюгат. Иногда окрашивание может быть результатом неспецифического связывания иммуноглобулинов с антигенами ВИЧ. Учет реакции проводят на спектрофотометре (ридере) при длине волны, указанной в инструкции, прилагаемой к диагностическому набору. Длина волны зависит от красителя, используемого в тест-системе.

При конкурентном методе иммуноферментного анализа в лунки планшета с нанесенным антигеном одновременно вносятся исследуемые сыворотки и конъюгат. Конъюгат в данном случае — это антитела против ВИЧ, меченые ферментом. При последующей инкубации антитела, содержащиеся в сыворотке, и конъюгат вступают в конкурентное взаимодействие с иммобилизированными на твердом носителе антигеном. Если сыворотка содержит антитела, они взаимодействуют с антигеном, блокируя образование комплекса антиген-конъюгат. При отсутствии антител в сыворотке происходит образование комплекса антиген-конъюгат. Оставшиеся несвязанные компоненты после инкубации отмываются и в систему добавляется соответствующий субстрат. При наличии антител в сыворотке цветная реакция не развивается.

№ п/п	Типы дефекта	Видимые проявления	Возможные причины дефекта
1.	Высокий фон	Значение оптической плотности в лунках с отрицательным результатом превышает 0,2 ед.	неправильно приготовлено разведение сывороток; неправильно проводилась отмывка планшетов; неправильно приготовлен конъюгат; неправильно приготовлен субстрат; краситель плохого качества (раствор красителя имеет жёлтый цвет), заводской брак.
2а.	Слабый сигнал	Значение оптической плотности положительного контроля ниже минимального значения оптической плотности, указанного в инструкции, значение оптической плотности положительных сывороток не превышает 0,4 ед.	несоблюдение правил хранения тест-систем, что приводит к нарушению связи антигена с носителем; неправильное разведение контрольных сывороток; неправильное разведение конъюгата; неправильное разведение и хранение перекиси водорода; заводской брак при изготовлении тест-системы.
2б.	Слабый сигнал положительного контроля	Значение оптической плотности положительного контроля не превышает 0,4 ед.	неправильное разведение и хранение разведённых контрольных сывороток; заводской брак при изготовлении контрольной сыворотки.
3.	Отсутствие сигнала	В лунках с позитивным контролем не произошло окрашивание	не внесён конъюгат; не правильно приготовлен субстрат (не добавлена перекись водорода) не внесён антиген в лунки при изготовлении тест-системы.

При постановке иммуноферментного анализа в случае получения положительного результата анализ проводится еще 2 раза (с той же сывороткой). При получении хотя бы еще одного положительного результата сыворотка направляется в референс-лабораторию.

В настоящее время для подтверждения специфичности первичного положительного результата чаще всего используется метод иммунного блоттинга — Western blot. Принцип метода заключается в выявлении антител к определенным белкам вируса, иммобилизованным на нитроцеллюлозную мембрану. В организме человека образуются антитела к ряду компонентов вируса, данные об этих антигенах приводятся в таблице.

Группа белков	ВИЧ-1	ВИЧ-2
Белки оболочки вируса (env)	гп 160 кд, 120 кд, 41 кд	гп 140 кд, 105 кд, 36 кд
Белки сердцевины вируса (gag)	п 55 кд, 24 кд, 17 кд	п 56 кд, 26 кд, 18 кд
Ферменты вируса (pol)	п 66 кд, 51 кд, 31 кд	п 68 кд
Примечание: Молекулярный вес белков выражается в килодальтонах - кд, гп - гликопротеины, п - протеины.

Подготовка нитроцеллюлозных мембран для тест-системы производится следующим образом. На первом этапе производят разделение белков вируса иммунодефицита человека по молекулярному весу с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Белки мигрируют в слоях геля при наложении электрического потенциала: белки с низким молекулярным весом проходят через поры в полиакриламидном геле легче, чем белки с высоким молекулярным весом и быстрее достигают конца геля. В результате этого происходит разделение белков на отдельные полосы по молекулярному весу. Затем осуществляется электрофоретический перенос из полиакриламидного геля на поверхность нитроцеллюлозной мембраны. После этого мембрана обрабатывается блокирующим раствором во избежание неспецифического связывания иммуноглобулинов сывороток крови, затем отмывается, высушивается и разрезается на отдельные полоски, которые вкладываются в набор. Перенесенные таким образом белки выявляются на нитроцеллюлозной реплике (блоке) с помощью непрямого анализа, а именно: сыворотка или плазма инкубируются с блотом; если исследуемый материал содержит антитела к белкам ВИЧ, они связываются с антигеном, перенесенным на нитроцеллюлозную мембрану, после отмывки полоски блота инкубируются с конъюгатом; при образовании комплекса антиген-антитело, конъюгат присоединяется к нему, после отмывки от конъюгата и инкубации с субстратом происходит окрашивание тех участков нитроцеллюлозы, где произошло образование комплекса антиген-антитело-конъюгат. Полученный результат сравнивается с результатами тестирования положительной и отрицательной контрольных сывороток.

Результаты, полученные в иммунном блоттинге интерпретируются как положительные, сомнительные и отрицательные.

Название центров	Положительный результат	Сомнительный результат	Отрицательный результат
1. ВОЗ	Сочетание полос к гп 41 и гп 120, или гп 41 и гп 160, или гп 120 и гп 160	Полосы к другим антигенам ВИЧ	Отсутствие полос к какому-либо из антигенов ВИЧ
2. Российский центр по профилактике и борьбе со СПИД	Полосы хотя бы к одному из белков гп 41, гп 120, гп 160 в сочетании с другими полосами или без них	Полосы к другим антигенам ВИЧ	Отсутствие полос к какому-либо из антигенов ВИЧ
Примечание: Рекомендации Российского центра учитывают опыт работы с сывороткам детей из внутрибольничных очагов, у которых часто определялись антитела только к одному из белков оболочки вируса. Своевременная постановка диагноза у таких детей позволила быстро начать противоэпидемические мероприятия и специфическую терапию.

Вопросы стандартизации и интерпретации результатов иммунного блоттинга были рассмотрены на совещании экспертов ВОЗ в Женеве 22-23 апреля 1990 г.

Согласно этим рекомендациям при наличии реакции только из белков оболочки (гп 160, гп 120, гп 41) в сочетании или без реакции с другими белками результат считается сомнительным и рекомендуется повторное исследование, с использованием набора другой серии или другой фирмы. Если и после этого результат остается сомнительным, рекомендуется наблюдение в течение 6 месяцев (через 3 месяца). Наличие положительной реакции с п 24 может указывать на период сероконверсии. В этом случае рекомендуется, в зависимости от клинических и эпидемиологических данных, повторить исследование с образцом сыворотки, взятой через 2 недели.

Положительные реакции с белками gag и pol без наличия реакции с белками env могут отражать стадию ранней сероконверсии, либо указывать на ВИЧ-2 инфекцию или на неспецифическую реакцию. Лица с такими результатами после тестирования на ВИЧ-2 должны повторно исследоваться через 3 месяца (в течение 6 месяцев). Если через 6 месяцев вновь будут получены неопределенные результаты (отсутствие реакции с белками env ВИЧ-1 и ВИЧ-2), а также не будут выявлены факторы риска и клинические симптомы иммунодефицита, можно сделать вывод о неспецифической реакции. Наличие неспецифической реакции не дает основания для постановки диагноза ВИЧ-инфекции, но доноров, имеющих такой результат, от донорства необходимо отстранить.

Результаты серологических исследований используются эпидемиологами и практическими врачами для ранней диагностики ВИЧ-инфекции, своевременного выявления источника инфекции, скорейшего проведения противоэпидемических мероприятий и оказания помощи зараженным лицам. На основании только лабораторного анализа диагноз не может быть выставлен . Для вынесения диагностического заключения необходимо учитывать данные эпидемиологического анамнеза, иммунологических тестов и результатов клинического обследования.

1. Методические указания по организации лечебно-диагностической помощи и диспансерного наблюдения за больными ВИЧ-инфекцией и СПИДом.

Приложение N 6
к приказу
от 27 января 2006 г. N 16/9

Правила забора, хранения и транспортировки
крови для исследования на ВИЧ

1. Для исключения ложных результатов при исследовании на антитела к ВИЧ рекомендуется неукоснительно выполнять следующие правила забора и транспортировки сывороток крови:

1.1. Кровь для первичной серодиагностики в ИФА берется из локтевой вены в количестве 3-5 мл, желательно натощак, в чистую сухую пробирку.

Допускается пальцевая проба у детей. При невозможности взятия крови из вены, кровь может быть взята из пальца в количестве до 1 мл.

1.2. Пробирки герметично закрывают резиновыми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками и помещают в штатив, который доставляется в лабораторию в специальном контейнере или биксе с маркировкой "Осторожно, AIDS". Не допускается перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования, а также запрещается доставка биоматериала на исследование больными или родственниками пациентов. При перевозке на транспорте требуется доставлять исследуемый материал для проведения скрининговых исследований в сумках-холодильниках (термоконтейнерах) при температуре +4 +8. При необходимости возможно использование уплотнителей (вата, поролон), которые в последующем в лаборатории подлежат обеззараживанию и утилизации. Запрещается перевозка на общественном транспорте.

1.3. Срок хранения крови, забранной для анализа на ВИЧ, - не более 12 часов при комнатной температуре и не более 1 суток в холодильнике при +4 +8 град. Наступающий гемолиз может повлиять на результат анализа. По этой причине цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в день забора.

1.4. Предпочтительнее сразу после взятия крови и наступления ретракции кровяного сгустка после ценрифугирования (или отстаивания) отобрать сыворотку. Отдельная сыворотка переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку, пластиковый контейнер. Если сыворотка не может быть сразу же доставлена в СПИД - лабораторию, то в таком виде она может храниться до 3 дней при температуре +4 +8 С.

Категорически запрещается переливание сыворотки через край пробирки, пипетирование сыворотки ртом. Отсасывание сыворотки производит лаборант с помощью груши, лучше автоматическими пипетками с одноразовыми наконечниками, при этом необходимо обеспечить, чтобы каждый образец сыворотки отбирался индивидуальным наконечником. Стеклянные палочки и пипетки должны быть индивидуальными для каждой сыворотки. Ни в коем случае нельзя использовать повторно палочки и пипетки в процессе отделения сыворотки из разных образцов, т.к. это может привести к перекрестной контаминации отрицательных сывороток.

1.5. Пробирки маркируют карандашом по стеклу. Не рекомендуется использовать для этой цели этикетки из лейкопластыря. Номера пробирок в штативе должны соответствовать номерам в направлениях и в общем списке. Зачеркивать, вносить изменения, поправки категорически запрещается.

1.6. Сопроводительная документация составляется в 2-х экземплярах. Лечебно-профилактические учреждения при первичном (скрининговом) лабораторном исследовании пациентов на антитела к ВИЧ заполняют направление по форме N 264/у-88. Зачеркивания, внесение изменений, поправки категорически запрещены. Направления помещают в полиэтиленовые пакеты и доставляют в лабораторию вне контейнера.

1.7. В случае поступления в лабораторию биоматериалов на исследование с направлением в виде свободной таблицы-списка, необходимо одновременно предоставить заполненный бланк направления отдельно на каждого обследуемого по форме N 264/у-88 (см. Приложение N 7).

1.8. С целью обеспечения полноты обследования на ВИЧ, особенно в условиях работы стационаров, необходимо осуществлять забор крови на ВИЧ ежедневно, включая выходные и праздничные дни. После отстаивания или получения сыворотки путем центрифугирования рекомендуется отделить сыворотку от кровяного сгустка (лучше в стерильную пробирку) и доставить в СПИД-лабораторию в день транспортировки, сохраняя сыворотку в холодильнике при температуре +4 +8 С.

1.9. Лаборатории диагностики ВИЧ-инфекции/СПИД перекладывают присланный материал в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором.

1.10. Лаборатория в обмен выдает пробирки, обработанные согласно МУ 3.5.1/3.5.4.001-98, в полиэтиленовые мешки учреждений. Штативы и биксы возвращают только после дезинфекции.

1.11. Термоконтейнеры или биксы с биоматериалом доставляет в лабораторию персонал, прошедший инструктаж. Выполнение этими лицами данных функциональных обязанностей должно быть предусмотрено приказом по ЛПУ.

2. В случае положительного скринингового теста на антитела к ВИЧ проводится дальнейшая серологическая диагностика с целью подтверждения специфичности полученного результата в референс-лаборатории.

2.1. С целью окончательного лабораторного подтверждения ВИЧ-инфекции забор крови осуществлять лучше в стерильную пробирку, желательно натощак, свежеприготовленная сыворотка доставляется в референс-лабораторию в день забора крови.

2.2. При повторном взятии крови необходимо предупредить все возможные ошибки обусловленные неточностью маркировки пробирок и заполнения бланков направлений, которые могут привести к подмене сывороток от разных пациентов.

2.3. При отправке в референс-лабораторию второй порции сыворотки для проведения подтверждающей серологической диагностики ВИЧ-инфекции заполняется сопроводительная документация, составленная по форме N 265/у-88 (Приложение N 8), заверенная подписью врача, направившего материал на референс-исследование.

2.4. Сыворотка упаковывается в соответствии с правилами транспортировки инфекционного материала и доставляется в штативе, отдельном от других образцов, с собой маркировкой пробирок красным карандашом по стеклу.

2.5. Прием контейнера с сывороткой, предназначенной для проведения подтверждающих тестов, регистрируется в отдельном журнале с указанием должности, фамилии лица, ответственного за транспортировку сыворотки, направленной на перепроверку или постановку иммуноблота.

3. При проведении повторных исследований на антитела к ВИЧ, при сомнительных результатах первичного исследования сыворотки крови, (через 3 месяца и при сохранении неопределенных результатов - через 6 месяцев) - забор крови и транспортировка проводится в соответствии с п.п. 2.1.-2.5. с обязательной отметкой в ф. N 265/у-88 (Приложение N 8).

> N 8. Направление N_____ на исследование крови на СПИД в референс-лабораторию

Содержание Приказ Министерства здравоохранения Самарской области от 27 января 2006 г. N 16/9 "Об улучшении работы по выявлению ВИЧ-инфицированных.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Результаты скрининга на ВИЧ в обязательном порядке требуются при оформлении пациента в стационар, призыва на военную службу, а также в случаях оформления права на временное проживание и вида на жительство для иностранных граждан.

Вирус иммунодефицита человека – это опасная инфекция, при которой нарушаются защитные механизмы, и пациент становится особенно восприимчивым к любым заболеваниям. Он может находиться длительное время в крови и не проявляться клиническими признаками. Однако человек становится переносчиком вируса и представляет опасность для окружающих.

ВИЧ-инфекция, вирус иммунодефицита человека

РЕГИСТРАЦИЯ НАПРАВЛЕНИЯ осуществляется на отдельном столе, при этом выполняется следующее правило: “Каждой сыворотке соответствует свой регистрационный номер“. Номер проставляется против соответствующей фамилии в направлении и на пузырьке с исследуемой сывороткой.

Сыворотка от сгустка отделяется центрифугированием при 1,5 — 3 тыс. оборотах в минуту в течение 15 минут. Допустимо предварительное отстаивание забранных образцов крови в течение 1,5 — 2 часов при комнатной температуре или в течение 1 часа при 37 град. Для лучшего отделения сыворотки рекомендуется обведение сформировавшегося сгустка крови стеклянной палочкой или пипеткой.

Симптоматика ВИЧ на ранних стадиях часто остается незамеченной, так как она схожа с проявлениями других болезней. Их выраженность зависит от того, как протекает заболевание у пациента.

Есть люди, которые считают ВИЧ и СПИД синонимами. Чтобы не путаться, нужно знать что ВИЧ — это вирус, поражающий иммунную систему, а СПИД развивается у человека тогда, когда настолько ослабляет организм, что появляются сопутствующие заболевания. Качественное исследования крови на ВИЧ предполагает получение положительного либо отрицательного результата. В ходе анализа можно обнаружить наличие или подтвердить отсутствие вируса в материале, но не рассчитать его количество. Такие методы подходят для плановой диагностики и при подозрении на ВИЧ. В их основе лежат серологические реакции – те, что проводятся с сывороткой крови.

Какой срок годности у биохимических анализов?

Лаборатории диагностики ВИЧ-инфекции/СПИД перекладывают присланный материал в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором.

Клинические признаки, схожие с проявлениями простуды, могут сигнализировать о развитии ВИЧ. Сдавать кровь каждый раз, когда повышается температура, не нужно: достаточно проходить обследования с периодичностью раз в год, если нет дополнительных показаний.

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10-ти рабочих дней. ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), вызывающий СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) — принадлежит к семейству ретровирусов.

При наличии клинического подозрения на острую ВИЧ-инфекцию (острый ретровирусный синдром, контакт группы риска с ВИЧ-инфицированным человеком) целесообразно выполнение ВИЧ-ПЦР. С учетом возможного ложноотрицательного результата, в общих случаях ВИЧ-ПЦР может использоваться для исключения факта передачи ВИЧ-инфекции, однако лишь условно — она не может заменить серологический анализа на ВИЧ.

Как долго актуальны анализы на ВИЧ и гепатит?

Отбор сыворотки осуществляется отдельным наконечником. Нельзя отбирать сыворотку переливая ее из пузырька в пузырек. Это приводит к бактериальному загрязнению исследуемого материала, увеличивает риск аварии.

Процесс взаимодействия вируса с клеткой включает ряд стадий: связывание вируса с клеткой, освобождение его от оболочки, проникновение в цитоплазму, синтез ДНК по вирусной РНК, встраивание вирусной ДНК в геном клетки-хозяина. После этого начинается латентная стадия инфекции. Обычно в платной клинике пациента знакомят с результатами ИФА-тестирования на следующий день после забора.

Поэтому положительный результат скринингового ИФА обследования может не подтвердиться в подтверждающих тестах, после чего пациенту выдадут отрицательный или неопределенный результат.

Условия хранение сыворотки крови отобранных для исследования на вич

Выявление антител (АТ) к вирусу иммунодефицита человека — основной метод лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит ИФА (чувствительность — более 99,5%, специфичность — более 99,8%). Также для диагностики ВИЧ-инфекции применяется определение антигена (Аг) p24 методом ИФА.

Анализ на ВИЧ полностью анонимно и абсолютно бесплатно вам сделают в поликлинике. За небольшие деньги диагностику выполнят в центрах профилактики и борьбы со СПИДом, которые расположены в каждом крупном городе. Работающие в них специалисты обязаны хранить врачебную тайну – не разглашать сведения о пациентах, поэтому не нужно стесняться обращаться в подобное учреждение.

Человек может заразиться определенным образом, а анализ позволит выявить болезнь на первых стадиях заражения.

По медицинским показаниям в государственных учреждениях тестирование проводится бесплатно, но результат предоставляется не ранее чем через полторы недели. Платная услуга оказывается в случаях, когда требуется срочное установление ВИЧ-статуса (например, при неплановой госпитализации), при анонимной сдаче анализа (кроме СПИД-центра), в платных центрах.

В случае необходимости лечения в стационаре без проведения данного анализа могут даже отказать в приеме в стационар.

От заражения ВИЧ до постановки диагноза СПИД может пройти достаточно большой период времени, иногда несколько лет. Люди с положительным иммунным статусом сдают анализ на количество клеток СD4, и если их количество опускается ниже определенной нормы, назначается антиретровирусная терапия, которая помогает удержать их численность от дальнейшего понижения и даже увеличить число Т-лимфоцитов.

Наконечники, коснувшиеся положительного контроля, ортофенилендиамина, рабочие плашки собираются на рабочих столах в отдельную емкость с дезраствором, затем переносятся в дезраствор (хлорамин 3%) на 18 часов и выбрасываются. Можно этот инструментарий собирать в полиэтиленовый пакет, а затем автоклавировать при 1,1 кгс/кв. см. при температуре 120 град. C в течение 45 минут.

Этот анализ сдается не зависимо от приема пищи, но все же лучше идти в манипуляционный кабинет натощак. Также следует воздержаться от сдачи анализа во время вирусной инфекции. Следует дождаться выздоровления и восстановления организма.

Кровь для первичной серодиагностики в ИФА берется из локтевой вены в количестве 3-5 мл, желательно натощак, в чистую сухую пробирку.

Сколько делается анализ на ВИЧ по времени?

Срок хранения крови, забранной для анализа на ВИЧ, — не более 12 часов при комнатной температуре и не более 1 суток в холодильнике при +4 +8 град. Наступающий гемолиз может повлиять на результат анализа. По этой причине цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в день забора.
Кровь на ВИЧ сдается на голодный желудок. Перед походом в учреждение для сдачи анализов примерно за сутки нужно воздержаться от секса, употребления алкогольных напитков, приема жирной и соленой пищи. СПИД можно достоверно выявить только в лаборатории, где используются эффективные методы лабораторной диагностики ВИЧ инфекции.

В первые недели инфекции, еще до появления антител к вирусу (т.е. до сероконверсии), в образцах сыворотки или плазмы можно выявить присутствие антигенов ВИЧ, в том числе его капсидного белка р24.

Если больной получает такое лечение, то необходимо решить вопрос о временной отмене лекарственных препаратов. Материал забирается из последней порции кала, доставляется в лабораторию в стерильной посуде в течение 1-2 часов. Подготовка: пробу фекалий собирают только в стерильную посуду, которую необходимо получить заранее в клинике. Время и место забора материала: до 09.00, вне клиники.

Методики исследования крови и расшифровка результатов

Материал собирается утром в постели без проведения предварительных гигиенических мероприятий. Время и место забора материала: до 09.00, вне клиники. Время сдачи материала в клинику: до 14 часов.

Если Вы испытываете трудности с отменой лекарственных препаратов, то обязательно сообщите об этом лечащему врачу.

Сдача крови на ВИЧ – это плановая процедура, к которой важно правильно подготовиться. В том числе важна информационная консультация пациента – ее можно получить в любой больнице либо поликлинике. Важно знать, откуда берут кровь, нужно ли придерживаться специальной диеты перед процедурой и сколько времени займет получение результатов. Подготовка несложная, а забор крови займет не более 5–10 минут.

Предпочтительнее сразу после взятия крови и наступления ретракции кровяного сгустка после центрифугирования (или отстаивания) отобрать сыворотку. Отдельная сыворотка переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку, пластиковый контейнер. Если сыворотка не может быть сразу же доставлена в СПИД – лабораторию, то в таком виде она может храниться до 3 дней при температуре +4 +8 С.

Разумеется, тест нужно проходить после случайных половых связей, когда риск заражения очень велик и нет уверенности в отрицательном ВИЧ-статусе полового партнера.

Но во врачебной практике наиболее точными считаются анализы, произведенные не более, чем через два часа после дефекации. Необходимо тщательно следить за сроком годности сдаваемых анализов, ведь от точности полученных результатов зависит эффективность назначаемого лечения, а значит здоровье и жизнь пациентов.

Экспресс-тесты должны использоваться только для первичной ориентировочной оценки. Они не подходят для подтверждения или исключения острой инфекции. Результат экспресс-теста должен быть подтвержден при первой же возможности в ходе рутинного лабораторного исследования с использованием стандартного анализа на ВИЧ.

Поэтому этот биологический материал грудничков необходимо направлять на обследование немедленно, ведь наличие аммиака в моче может стать причиной выявления в моче несуществующих на самом деле у ребенка заболеваний. Анализы мочи будущих мам делятся на плановые и анализы, необходимые при выявлении патологий в течение беременности.

Как правильно подготовиться к процедуре?

Срок хранения крови, забранной для анализа на ВИЧ, – не более 12 часов при комнатной температуре и не более 1 суток в холодильнике при +4 +8 град. Наступающий гемолиз может повлиять на результат анализа. По этой причине цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в день забора.

При доставке крови необходимо добиваться, чтобы сыворотка на сгустке была не более 3 часов, в противном случае лизис и другие биохимические процессы приводят к разрушению антител и работа становится бессмысленной. Сыворотка может храниться в холодильнике при +4 градусах C до 7 суток с момента забора крови.

Пробирки маркируют карандашом по стеклу. Не рекомендуется использовать для этой цели этикетки из лейкопластыря. Номера пробирок в штативе должны соответствовать номерам в направлениях и в общем списке. Зачеркивать, вносить изменения, поправки категорически запрещается.

Перед лечением в больнице либо перед поездкой в санаторий, целесообразно сначала сдать анализы с длинным сроком действия. Постепенно необходимо переходить к сдаче анализов, у которых срок действия короткий. Как хранится моча и кал? Моча и кал – это биологический материал, который имеет благоприятную среду для размножения бактерий, особенно при комнатной температуре.
Изменения в общем анализе крови могут помочь выявить вирус иммунодефицита и определить инфицированного на начальной стадии. Даже небольшая концентрация вируса в крови должна стать поводом для беспокойства.