Проведение арбитражных исследований на вич

Приложение N 1
к приказу МЗ УР N 118
от 11 апреля 2001 г.

Инструкция по тактике арбитражного
исследования сыворотки крови на ВИЧ

1. В случае получения в диагностической лаборатории положительного результата при исследовании сыворотки крови на ВИЧ методом ИФА, исследование повторяется с данной порцией сыворотки на следующий день в другой тест-системе дважды. При получении двух положительных результатов из трех, сыворотка направляется на арбитражные исследования в референс-лабораторию РЦ СПИД и ИЗ. Заполняется направление утвержденной формы, где обязательно указывается:

- "первично положительная в ИФА",

- "повторно на исследование в иммуноблоте", дата и результат в сомнительном иммуноблоте,

- "вторая кровь на ИФА", дата положительного иммуноблота и оперативного донесения.

Флакон закрывается крышкой, на нем подписывается фамилия и инициалы исследуемого. Материал с направлением помещают в термоконтейнер и доставляют в референс-лабораторию РЦ СПИД и ИЗ.

В ЛПУ выдается результат: "ИФА на ВИЧ положительный, сыворотка направлена на иммуноблот". В день получения положительного результата врачом, проводившем исследование, передается письменное сообщение в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Эпидемиолог при получении данных в этот же день передает сообщение об ИФА-позитивном лице в соответствующее отделение переливания крови (станцию переливания крови, Республиканскую станцию переливания крови).

2. Прием сывороток крови на арбитражные исследования ведет врач референс-лаборатории РЦ СПИД и ИЗ и проверяет все поступающие сыворотки в базе данных компьютера, определяя тактику арбитража. При дефектах взятия материала и заполнения направлений, делается запись в дефектурный журнал под роспись доставившего сыворотку. Материал утилизируется, направление с указанием дефекта отправляется обратно.

3. Флаконы с подписанной фамилией и направлением помещаются в отдельную коробку в морозильную камеру и обследуются в ИФА дважды в различных типах и сериях тест-систем. Заполняется весь протокол в компьютерной программе "Иммуноблот" с указанием всех типов и серий тестсистем и с датой в ИФА. При двух отрицательных результатах в направлении ЛПУ делается отметка "ИФА на ВИЧ отрицательный" и оно отправляется обратно. Сыворотка утилизируется.

4. При получении хотя бы одного положительного результата в ИФА сыворотка направляется на иммуноблот вместе с сыворотками из лаборатории РЦ СПИД и ИЗ, которые в арбитраж ИФА не берутся. Врач, проводящий исследование в иммуноблоте, проверяет каждую сыворотку в базе данных компьютера. Продолжается заполнение протокола исследования в компьютерной программе "Иммуноблот" с указанием Ф.И.0. врача, второй даты анализа, серии тест-системы и результата анализа. Сыворотки, направленные повторно на иммуноблот, при получении сомнительных результатов, в арбитраж на ИФА не ставятся, а сразу берутся на иммуноблот.

5. При получении в иммуноблоте:

- отрицательного результата - делается отметка "Иммуноблот отрицательный" в направлениях от всех ЛПУ, они отсылаются обратно, сыворотка утилизируется;

- сомнительного результата - указывается весь перечень полученных белков в направлении учреждения и протоколе иммуноблота и срок, через который необходимо повторить забор сыворотки для повторного иммуноблота, сыворотка утилизируется;

- положительного результата - направляется запрос на повторный образец сыворотки, сыворотка остается в морозильной камере вместе с направлением, подписывается - N 1, выписывается оперативное донесение (автоматически из компьютерной программы). Если положительный результат иммуноблота получен в динамике из сомнительного, второй образец для ИФА не запрашивают, в ЛПУ результат не выдается.

6. Второй образец сыворотки крови при получении оперативного донесения ставится в ИФА в диагностической лаборатории зонального центра СПИД. При получении положительного результата данные передаются в референс-лабораторию РЦ СПИД и ИЗ, делается отметка в протоколе и компьютерной программе против фамилии данного лица, результат второй сыворотки в ИФА передается в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Если получен отрицательный результат в ИФА во второй сыворотке, исследуется вновь сыворотка N 1 и N 2, запрашивается третий образец сыворотки от данного лица. При получении отрицательных результатов в сыворотках N 2 и N 3 дается отмена по оперативному донесению на данное лицо.

7. Делается распечатка всего арбитража за неделю (от первой даты в ИФА) в двух экземплярах: в лабораторию и отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. В направлениях всех ЛПУ делается отметка результата (кроме положительных развернутых иммуноблотов) с указанием типа, серии тест-системы, даты анализа и Ф.И.0. врача, проводившего иммуноблот. Сыворотка утилизируется.

8. Стрипы с результатами иммуноблотов наклеиваются на белый лист бумаги скотчем. Сбоку указывается соответственно номеру стрипа Ф.И.0. сыворотки исследуемого лица. Внизу ставится подпись врача, дата анализа, серия тест-системы, подшивается в отдельную папку.

9. Протокол арбитража подписывается заведующей лабораторией и относится в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Оперативное донесение подписывается заведующей лабораторией, главным врачом РЦ СПИД и ИЗ или его заместителем, направляется в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ и отправляется факсом в Российский Федеральный Центр СПИД - 8-095-365-4680.

10. Данные о поступлении вторых образцов сывороток от лиц, на которых поданы оперативные донесения, направляются заведующей лабораторией еженедельно главному врачу РЦ СПИД и ИЗ и ежемесячно заведующим зональными центрами СПИД.

Главный врач ГУЗ РЦ СПИД и ИЗ

>
N 2. Направление на исследование крови на СПИД в реакции иммуноблота

Содержание
Приказ Министерства здравоохранения УР от 11 апреля 2001 г. N 118 "Об упорядочении проведения арбитражных исследований.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УДМУРТСКОЙ РЕСПУБЛИКИ

от 11 апреля 2001 г. N 118

ОБ УПОРЯДОЧЕНИИ ПРОВЕДЕНИЯ АРБИТРАЖНЫХ

ИССЛЕДОВАНИЙ НА ВИЧ

В последнее время в Удмуртской Республике значительно ухудшилась эпидемическая ситуация по ВИЧ - инфекции. С начала регистрации (1993 г.) выявлено 503 ВИЧ - инфицированных (показатель пораженности на 100 тысяч населения по УР - 30,8; по РФ - 76,0). Соответственно этому резко возросло количество арбитражных исследований сывороток крови на ВИЧ в реакции иммуноблота: 1102 в 2000 году против 675 в 1999 году. Увеличение объема арбитражных исследований требует более оперативных сроков их проведения, а также осуществления неотложных мер по предотвращению передачи ВИЧ при переливании крови и ее компонентов.

1. Инструкцию по тактике арбитражного исследования сыворотки крови на ВИЧ (приложение N 1).

2. Направление на исследование крови на СПИД в реакции иммуноблота (приложение N 2).

1. Начальникам Управлений здравоохранения гг. Ижевска, Глазова, Сарапула, начальнику Отдела здравоохранения Администрации г. Воткинска, главным врачам республиканских лечебно - профилактических учреждений и центральных районных больниц:

1.1. Обеспечить забор и доставку второй сыворотки крови от лица, на которого подано оперативное донесение, в течение 14 дней по запросу Республиканского центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями и зональных центров СПИД в диагностическую лабораторию зонального центра СПИД по месту закрепления.

2. Главному врачу Государственного учреждения здравоохранения “Удмуртский республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями“ Е.Г.Кузьмину:

2.1. Обеспечить подачу информации о всех лицах, имеющих положительный результат на ВИЧ методом ИФА, в день выявления в Республиканскую станцию переливания крови (станции переливания крови, отделения переливания крови).

2.2. Обеспечить контроль за направлением сывороток крови на арбитражные исследования по утвержденной форме (приложение N 2).

2.3. Осуществлять контроль за проведением арбитражных исследований сывороток крови на ВИЧ согласно “Инструкции по тактике арбитражного исследования“ (приложение N 1).

3. Контроль за исполнением приказа возложить на первого заместителя министра Блохина Ю.Г.

от 11 апреля 2001 г. N 118

ПО ТАКТИКЕ АРБИТРАЖНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

СЫВОРОТКИ КРОВИ НА ВИЧ

1. В случае получения в диагностической лаборатории положительного результата при исследовании сыворотки крови на ВИЧ методом ИФА, исследование повторяется с данной порцией сыворотки на следующий день в другой тест - системе дважды. При получении двух положительных результатов из трех сыворотка направляется на арбитражные исследования в референс - лабораторию РЦ СПИД и

ИЗ. Заполняется направление утвержденной формы, где обязательно указывается:

- “первично положительная в ИФА“,

- “повторно на исследование в иммуноблоте“, дата и результат в сомнительном иммуноблоте,

- “вторая кровь на ИФА“, дата положительного иммуноблота и оперативного донесения.

В ЛПУ выдается результат: “ИФА на ВИЧ положительный, сыворотка направлена на иммуноблот“. В день получения положительного результата врачом, проводившим исследование, передается письменное сообщение в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Эпидемиолог при получении данных в этот же день передает сообщение об ИФА - позитивном лице в соответствующее отделение переливания крови (станцию переливания крови, Республиканскую станцию переливания крови).

2. Прием сывороток крови на арбитражные исследования ведет врач референс - лаборатории РЦ СПИД и ИЗ и проверяет все поступающие сыворотки в базе данных компьютера, определяя тактику арбитража. При дефектах взятия материала и заполнения направлений, делается запись в дефектурный журнал под роспись доставившего сыворотку. Материал утилизируется, направление с указанием дефекта отправляется обратно.

3. Флаконы с подписанной фамилией и направлением помещаются в отдельную коробку в морозильную камеру и обследуются в ИФА дважды в различных типах и сериях тест - систем. Заполняется весь протокол в компьютерной программе “Иммуноблот“ с указанием всех типов и серий тест - систем и с датой в ИФА. При двух отрицательных результатах в направлении ЛПУ делается отметка “ИФА на ВИЧ отрицательный“ и оно отправляется обратно. Сыворотка утилизируется.

4. При получении хотя бы одного положительного результата в ИФА сыворотка направляется на иммуноблот вместе с сыворотками из лаборатории РЦ

СПИД и ИЗ, которые в арбитраж ИФА не берутся. Врач, проводящий исследование в иммуноблоте, проверяет каждую сыворотку в базе данных компьютера. Продолжается заполнение протокола исследования в компьютерной программе “Иммуноблот“ с указанием Ф.И.О. врача, второй даты анализа, серии тест - системы и результата анализа. Сыворотки, направленные повторно на иммуноблот, при получении сомнительных результатов, в арбитраж на ИФА не ставятся, а сразу берутся на иммуноблот.

5. При получении в иммуноблоте:

- отрицательного результата - делается отметка “Иммуноблот отрицательный“ в направлениях от всех ЛПУ, они отсылаются обратно, сыворотка утилизируется;

6. Второй образец сыворотки крови при получении оперативного донесения ставится в ИФА в диагностической лаборатории зонального центра СПИД. При получении положительного результата данные передаются в референс - лабораторию РЦ СПИД и ИЗ, делается отметка в протоколе и компьютерной программе против фамилии данного лица, результат второй сыворотки в ИФА передается в отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. Если получен отрицательный результат в ИФА во второй сыворотке, исследуется вновь сыворотка N 1 и N 2, запрашивается третий образец сыворотки от данного лица. При получении отрицательных результатов в сыворотках N 2 и N 3 дается

отмена по оперативному донесению на данное лицо.

7. Делается распечатка всего арбитража за неделю (от первой даты в ИФА) в двух экземплярах: в лабораторию и отделение эпидемиологии РЦ СПИД и ИЗ. В направлениях всех ЛПУ делается отметка результата (кроме положительных развернутых иммуноблотов) с указанием типа, серии тест - системы, даты анализа и Ф.И.О. врача, проводившего иммуноблот. Сыворотка утилизируется.

8. Стрипы с результатами иммуноблотов наклеиваются на белый лист бумаги скотчем. Сбоку указывается соответственно номеру стрипа Ф.И.О. сыворотки исследуемого лица. Внизу ставится подпись врача, дата анализа, серия тест - системы, подшивается в отдельную папку.

Главный врач ГУЗ РЦ СПИД и ИЗ

от 11 апреля 2001 г. N 118

НАПРАВЛЕНИЕ N _____

НА ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ НА СПИД В РЕАКЦИИ ИММУНОБЛОТА

Имя ______________________ Отчество ______________________________

Пол ____ Дата рождения _________ Гражданство _____________________

Почтовый адрес ___________________________________________________

Место работы или учебы ___________________________________________

Код контингента _______

Дата последнего положительного анализа:

в ИФА ________ тип тест - системы ________ N серии _______________

в Иммуноблоте ________ тип тест - системы _______

N серии ________

Адрес учреждения направившего сыворотку __________________________

Телефон учреждения __________

Факс и электронный адрес _________________________________________

Должность, фамилия, подпись лица, направившего материал __________

“___“ __________________ 200 г.

Примечания. 1. В графу “код контингента“ заносятся все коды из списка, к которым относится обследуемый.

2. В графе “в Иммуноблоте“ указывается результат последнего иммуноблота (отрицательный, положительный, сомнительный).

Все инфекционные заболевания нуждаются в своевременной точной диагностике. ВИЧ и СПИД — не исключение. Поставленный вовремя диагноз позволяет принять необходимые терапевтические меры и продлить пациенту жизнь. Как же определить наличие или отсутствие заболевания с максимальной точностью?

Диагностика ВИЧ-инфекции и СПИДа

Сегодня, наверное, каждый человек слышал о ВИЧ и СПИДе и знает, что эти заболевания очень опасны, что передаются они в основном во время незащищенного барьерным способом полового акта. А между тем, первые случаи инфицирования были зафиксированы не так давно — в 1978 году (у нескольких мужчин-гомосексуалов из США и Швеции). Сам вирус был открыт в 1983 году.

В первую очередь ВИЧ атакует и разрушает лимфоциты (Т-лимфоциты, или хелперы). Они отвечают за иммунный ответ организма, распознавание и уничтожение инфицированных клеток. В результате заболевший теряет способность противостоять инфекциям.

У здорового человека количество Т-лейкоцитов составляет 1200–3000 клеток/мкл. После ВИЧ-инфицирования число клеток снижается. При этом заболевший продолжает чувствовать себя нормально. Данный период болезни может длиться на протяжении многих лет. Но наступает момент, кода количество клеток-хелперов достигает критической отметки. Это может проявиться следующими проблемами:

кандидоз полости рта и ЖКТ;
опоясывающий лишай (герпес);
неделями не спадающая высокая температура;
ночная потливость;
диарея;
частые ОРЗ и ОРВИ и др.

Если число Т-лимфоцитов снижается до 200 клеток/мкл, то диагностируют СПИД. Организм больного в таком состоянии не может сопротивляться даже простейшим микроорганизмам — от дрожжей до вирусов. У здорового человека к ним развивается резистентность, тогда как страдающего СПИДом они могут довести до летального исхода. Чаще всего возбудителями смертельных заболеваний становятся токсоплазма, криптоспоридии, цитомегаловирус. Кроме того, снижение лимфоцитов провоцирует образование злокачественных опухолей.

При отсутствии должного лечения пациенты с ВИЧ-инфекцией не переступают порог выживаемости в 10 лет. Грамотно и своевременно назначенная терапия затормаживает развитие болезни, в разы увеличивая продолжительности жизни больного. ВИЧ-положительный человек в таком случае может дожить до преклонных лет.

Основной метод диагностики инфекции — анализ крови. С момента заражения до появления антител в крови проходит 1–3 месяца.

Разные виды лабораторных анализов венозной крови, взятой натощак, позволяют обнаружить наличие или отсутствие ВИЧ-инфекции в крови. Рассмотрим виды этих исследований.

Скрининговое исследование иммуноферментными (ИФА) методами представляет собой выявление антител к антигенам ВИЧ-типов: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Уже со второй недели после инфицирования могут появиться антитела, хотя они способны обнаружиться и позже — через несколько месяцев. В последующее время количество антител растет и сохраняется в крови пациента. При наличии антител в большинстве случаев клинические признаки ВИЧ не проявляются 2–10 лет.
Отметим, что данный тест не всегда точен, возможен ложноположительный результат. В любом случае при положительном результате назначается повторный анализ через 2-3 недели.
Верификационное исследование методом иммуноблота проводится, если описанный выше анализ дважды дал положительный результат. Данное исследование сочетает анализ ИФА и метод электрофореза, который позволяет разделить по молекулярному весу входящие в состав вируса антигены. Данное исследование имеет максимальную точность.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени дает возможность определить концентрацию вирусной РНК в плазме крови. Тест проводят в целях ранней диагностики возможного инфицирования после случая повышенного риска (на 7–10 день после предположительного инфицирования).
Также данный анализ назначается для оценки эффективности применяемой терапии, для решения вопроса о начале антиретровирусной терапии, о проведении кесарева сечения у инфицированных беременных за 4 недели до родов.
Такое исследование крови проводят новорожденным детям инфицированных матерей. Полученный дважды положительный ответ говорит о заражении ребенка.

Поводом пройти исследование на ВИЧ-инфекцию может стать множество причин. Тест необходим перед оперативным вмешательством, в случае планирования беременности, риск приобретения данной инфекции несут случайные половые контакты. Отдельная категория граждан (врачи, педагоги, работники пищевых производств, продавцы пищевой продукции и др.) обязана проходить тест в рамках оформления медицинской книжки, являющейся обязательным условием допуска к работе.

Что касается тревожных симптомов, то обычно врачи назначают анализ на ВИЧ при следующих состояниях:

Резкая потеря веса.
Диарея, длящаяся более трех недель.
Лихорадка неясного происхождения.
Увеличение лимфатических узлов в разных областях.
Лейкопения и лимфопения.
Тяжелые инфекционные заболевания: пневмония, кандидоз внутренних органов, туберкулез, манифестный токсоплазмоз, частые случаи обострения герпесвирусной инфекции и другие.

Специальной подготовки перед сдачей венозной крови не требуется. Единственное — это воздержание от приема пищи в течение 8–10 часов. Также накануне рекомендуется избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от употребления алкоголя.

Вся процедура забора венозной крови занимает не более пяти минут. После взятия материала место укола дезинфицируют и заклеивают специальным пластырем. Так как анализ берется натощак, во избежание головокружения после забора крови следует выпить сладкий чай или съесть кусочек шоколада.

В государственных поликлиниках, чтобы получить направление на анализ, придется сначала посетить участкового терапевта. В частных же медицинских центрах нужно просто заполнить заявку на анализ. Для этого в клинике попросят предъявить паспорт или какой-либо другой документ, удостоверяющий личность (миграционная карта, водительские права, военный билет и т. д.). Документ позволит идентифицировать результаты анализа. Впрочем, тест на ВИЧ можно сделать и анонимно. В этом случае заявке и образцу крови, который отправляется на анализ в лабораторию, присваивается номер, известный лишь пациенту и медицинскому персоналу. Однако результаты анонимных исследований не могут быть представлены для госпитализации, в женские консультации и не могут быть зарегистрированы в ОРУИБ (Отдел регистрации и учета инфекционных болезней).

Следует помнить, что интерпретировать результаты исследования и поставить точный диагноз способен только врач. Полученный результат ни в коем случае не может быть поводом для самолечения, к тому же одни и те же результаты у разных пациентов могут говорить о противоположной клинической картине.

Показывает объем выявленной РНК вируса иммунодефицита человека, выраженный в C/ml (копии/мл). Интерпретировать результаты следует следующим образом:

РНК не выявлена, либо значение ниже предела чувствительности метода (20 копий/мл).
Меньше 20 копий/мл — РНК выявлена в концентрации на пределе чувствительности метода, характеристика с удовлетворительной точностью невозможна.
От 20 до 10 6 копий/мл — полученное значение находится в пределах линейного диапазона, результат достоверен.
Больше 10 6 копий/мл — РНК выявлена в указанной концентрации, выходящей за верхний предел линейного диапазона.

Анализы на ВИЧ можно сдать в частных клиниках. В этом случае стоимость скринингового исследования иммуноферментными методами в среднем составит от 400 до 800 рублей. Срок выполнения исследования — один рабочий день, хотя возможна и срочная диагностика, в таком случае ответ будет получен через 2 часа.

Верификационное исследование методом иммуноблота обойдется в 3000–5000 рублей. Результаты станут известны через 3–7 рабочих дней.

Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени представляет собой более сложный анализ, поэтому его стоимость намного выше — она составляет 10 000–12 000 рублей. Результаты исследования готовятся в среднем 10–14 рабочих дней.

Согласно законодательству все иммунные анализы в государственных медицинских учреждениях проводятся бесплатно. В обязательном порядке проверку на ВИЧ-инфекцию проходят беременные женщины, пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству и госпитализации. В остальных случаях направление на данное исследование назначается по усмотрению врача.

Пройти анализ на ВИЧ-инфекцию сегодня не составляет сложности. Сама процедура практически безболезненна и занимает считанные минуты. Современное оборудование и методики проведения теста позволяют получить максимально точные результаты.

Вопреки некоторым мнениям, ВИЧ не является приговором. Инфицированные люди способны прожить долгую, полноценную жизнь. Они могут иметь семью, детей, без опасений общаться с окружающими. Главное при этом выполнять особые правила гигиены и бытового поведения, знать, как свести к минимуму риск заражения домочадцев. А в случае возникновения сомнительных или спорных ситуаций — обращаться к специалистам: врачам, психологам. Но ни в коем случае не замыкаться и не ставить на жизни крест.

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
лихорадка;
мышечные или головные боли;
молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
воспаление слизистой носа, рта или глотки;
ночная потливость;
ломота в суставах;
длительная диарея;
тошнота, рвота;
резкое снижение массы тела;
высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

ИФА (иммуноферментный анализ).
Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

При положительном результате ИФА пациенту рекомендуют обратиться к инфекционисту Центра СПИД или специализированных клиник для консультации и проведения повторного исследования крови. Дополнительно назначают специальный подтверждающий тест – иммунный блотинг, принцип которого заключается в выявлении антител к определенным белкам ВИЧ, или гликопротеидам (gp). На нитроцеллюлозу нанесен вируснный АГ (env,pol полимераза,gag - сердцевина) - инкубация с образцами- промывка -+АТ к IgGпациента. Меченные щелочной фосфатазой, икуб, отмвыка+хромоген - появление специф. окраш полос - наличие АТ. Результат: + - наличие 1/2 полос env+-pol+-gag, не опред. - pol +gag, отр - нет полос

При выявлении антител к одному из гликопротеидов - gp 41, 120, 160 – результат считают положительным. В случае обнаружения антител к другим белкам вируса ответ расценивают как сомнительный и рекомендуют повторить обследование через 3 и 6 месяцев. Отсутствие антител к белкам вируса в реакции иммунного блотинга означает, что первый ИФА был ложноположительным.

Следует правильно понимать, что позитивный результат ИФА на антитела к ВИЧ – это не диагноз. Только врач может поставить диагноз ВИЧ-инфекции после повторного ИФА, врачебного осмотра и проведения дополнительных лабораторных тестов. И только врач может исключить этот диагноз при отрицательных повторных результатах ИФА.

Если человек попал в ситуацию, потенциально опасную по передаче ВИЧ, ему рекомендуется как можно раньше обратиться за медицинской помощью и начать проведение постконтактной профилактики АРВ-препаратами, не дожидаясь, пока истекут необходимые для появления антител и проведения ИФА 3 месяца.

Тесты 1 уровня- серологич. скрининговое обслед-е ИФА;

Тесты 2 уровня - арбитражные исследования первично серопозитивных проб ИФА - макс возможные наборы тест-систем;

Тесты 3 уровня - скрининговые арбитражные и подтверждающие исследования ИФА, иммуноблотинг.

2. Проточная цитофлюориметрия

3. СД4 - 200 - критический уровень

(ВИЧ – медленно прогрессирующее заболевание с многолетней репликацией вируса в лф, мф и клетках нервной ткани, вызывающей нарушение иммунной и нервно-психической регуляции организма => гибель больного от поражений вторичного порядка, обусловленных нарастающим иммунодефицитом. ВИЧ относится к РНК-содержащим ретровирусам. Способен синтезировать в клетках хозяина ДНК своего генома. Вирусная ДНК включается в геном лиц, где ее экспрессия создает условия развития хронической инфекции. Вирус иммунодефицита человека генетически и антигенно неоднороден: выделены ВИЧ-1 и ВИЧ-2. При заражении ВИЧ-1 продолжительность жизни составляет 10-12 лет, а ВИЧ-2 – свыше 20-25 лет. Впервые был выделен в 1983 от больного лимфоаденопатиейв институте Пастера и в 1984 в США.

Чувствителен к действию детергентов. ПАВ, спиртов, хлорсодерж., перекись (1-3% хлорамин, 3% хлорной извести - через 15 мин). Полная инактивация при56С 30мин. Устойчив к УФ. Сохраняется на высушенных субстратах 7 сут.

Патогенез - цитопатическое действие на ИКК (разрушение, нарушение функций, спонтанная поликлональная активация В-л, гипергаммаглобулинемия). АГ вируса выступают в роли суперантигенов - гиперактивация специфичных и неспецифичных клонов - апоптоз - дефицит. Время от момента заражения до появления антител -3нед -3 мес. до 6 мес

Пути заражения ВИЧ инфекцией: -парантеральный -внутриутробный-вертикальный - половой

1стадия : Латентный период. Период вирусоносительства без клинической манифестации. ПЦР

2 стадия: Первичной манифестации. От 2 нед до неск месяцев. острая инфекция(похожа на грипп,высокая тем-ра, инфекц.мононуклеоз) от 1 недели до месяца, ИФА ВИЧ- отрицателен.

3-стадия: ассимптомной инфекции (д-з.ставится на основании эпид.анализа и лаб-ых исследований)Отсутствуют клинические признаки, длится от 1 года до 10 лет.Продолжительность зависит от образа жизни, материального достатка и др)

4-стадия:персистирующая генерализованная лимфоаденопатия (увеличение лимф. узлов)

5-стадия: пре СПИД - от 2до 10 лет.Переход от ВИЧ-инфекции к стадии вторичных заболеваний + оппортунистические инфекции (кандидоз полости рта, туберкулёз лёгких,опоясывающий лишай,локализ.форма саркомы Капоши)Снижение массы тела на 10%, немотивированная лихорадка, диарея,общая слабость. и др.)

Риск передачи ВИЧ в мед.уч. При парантеральном пути передачи (от пациента к персоналу и наоборот). При в/в; в\м; и др. инъекциях. При переливании крови и кровезаменителей, стоматолог, хирург, гинекологическом кабинете.

КЛ диагностика ВИЧ-инфекции имеет 3 направления: 1. Установление факта инфицированности ВИЧ, диагноза ВИЧ инфекции; 2. Определение стадии клинического течения б-ни и выявление вторичных заб-ий; 3. Прогноз прогрессии клин течения заб-ия и лаб контроль проводимого лечения.)

95. Микробиологические методы диагностики туберкулеза и определения лекарственной резистентности возбудителя.

Включает микроскопию препаратов, окрашенных по Цилю - Нильсену для выявления микобактерий туберкулеза (кислотоустойчивых бактерий, КУБ),

Сбор мокроты для анализа на КУБ. На исследование направляются три пробы мокроты от каждого пациента. Первую пробу мокроты пациент собирает через 1-2 ч после сна под наблюдением медицинского работника. Вторая проба мокроты собирается больным в тот же день через несколько часов после взятия первой пробы. Третья проба - утром следующего дня.

Пациенту следует откашливать мокроту из более глубоких отделов легких. Во время забора мокроты медработник должен стоять за спиной больного. Для исследования необходимо получить достаточное количество мокроты (3-5 мл), содержащей плотные гнойные частицы, а не слюну.

Техника приготовления и окраски препаратов Бактерии чаще обнаруживаются в плотных гнойных частицах мокроты. Результат исследования в большей степени зависит от правильного выбора этих частиц. Гнойные частицы выбирают из 4-6 разных мест, распределяют по предметному стеклу тонким слоем. Мазок можно приготовить и другим способом. Стекло с отобранной мокротой покрывают другим предметным стеклом и, придавливая друг к другу, тщательно растирают, раздвигая стекла в противоположном направлении.

Подготовленные мазки просушивают на воздухе в течение 15-30 мин. Подогревать препарат для высушивания не рекомендуется, так как при этом легко происходит разрушение микробных клеток. Высушенный мазок фиксируют трехкратным проведением его в течение 3-5 с через среднюю и наиболее яркую часть пламени спиртовки. Нужно избегать следующих ошибок: 1) изготовлений слишком толстых препаратов (трудно искать бактерии), 2) фиксирования плохо высушенных мазков (получается плохая окраска), 3) недостаточной фиксации, ведущей к сползанию препарата, 4) длительной фиксации над пламенем, вызывающей обугливание мокроты, что сильно отражается на качестве окраски.

Окраска по Цилю - Нильсену Предметные стекла помещают на мостик с промежутками между краями. Мазки накрывают фильтровальной бумагой. На всю поверхность фильтровальной бумаги, покрывающей стекло, наносят карболовый фуксин Циля (1 г основного фуксина растворя ют в 10 мл этилового спирта, раствор выливают в 100 мл 50 г/л раствора карболовой кислоты). Стекло с мазком медленно нагревают над пламенем спиртовки до появления пара. Не допускается кипение или высушивание окрашивающего раствора на предметном стекле. Если раствора недостаточно, его можно добавить еще и нагреть второй раз. Мазок с прогретым раствором оставляют на 5 мин, после чего фильтровальную бумагу удаляют пинцетом и помещают в бачок для сбора отходов. Каждое предметное стекло аккуратно ополаскивают отдельно под слабой струей воды из водопроводного крана до полного удаления окрашивающего раствора. Мазок держат ребром к струе воды. Не разрешается смывать и обесцвечивать одновременно несколько мазков во избежание перекрестного заражения. Все стекла помешают на мостик и обрабатывают, каждый из них индивидуально, 250 г/л раствором серной кислоты до полного отхождения краски. Смывают каждое предметное стекло как описано выше. Затем каждый мазок обрабатывают 96% этиловым спиртом в течение 5 мин и промывают водой. Обесцвеченные, промытые стекла с мазками докрашивают (3 г/л водным раствором метиленового синего в течение 60 с), промывают, как описано выше, оставляют сушить на воздухе.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Читайте также: