Реалбест вгв вгс вич пцр

Анализ ПЦР — один из наиболее часто применяемых методов диагностики вирусного гепатита С. При помощи данного анализа можно выявить уровень заражения, а также проверить эффективность проводимой терапии. Благодаря высокой чувствительности теста, погрешность результатов анализа сводится к минимуму.

Но чувствительность определения 60 МЕ/мл — что это значит? Какую роль играет чувствительность теста при диагностике гепатита С и выборе подходящей терапии? Кому необходимо сдавать анализ ПЦР, и как к нему подготовиться? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Об анализе ПЦР

Полимеразная цепная реакция бывает двух типов:

Качественная — проводится с целью обнаружения патогена в крови обследуемого. Анализ рекомендуется как для диагностики болезни, так и для мониторинга его лечения. Положительный результат говорит о наличии вируса в крови больного и о неэффективности лечения, если таковое было. Отрицательный результат чаще всего является следствием отсутствия патогена.
Количественная — проводится после установки диагноза с целью определения уровня вирусной нагрузки. Чем выше итоговый показатель, тем серьезнее болен человек.

Сдать анализ ПЦР можно в любом профильном медицинском учреждении Москвы.

Полимеразная цепная реакция является одним из наиболее точных анализов, позволяющих выявить вирусный гепатит С. Проходить это тестирование рекомендуется следующим группам лиц:

Пациентам, у которых наблюдаются характерные для ВГС симптомы
Беременным женщинам на любом триместре
Больным, регулярно проходящим процедуру диализа
Пациентам, недавно пережившим операционное вмешательство
Инъекционным наркоманам
Посетителям татуажных или маникюрных салонов
Медицинским работникам и лаборантам, регулярно контактирующим с инфицированными выделениями
Членам семей, в которых проживает зараженный ВГС пациент

Также регулярно сдавать анализы рекомендуется тем, кто уже проходит терапевтический курс и борется с вирусным гепатитом. Это необходимо для отслеживания эффективности лечения.

Любое тестирование требует определенной подготовки, иначе будет нарушена его чувствительность. В частности, перед сдачей анализа ПЦР, пациенту следует:

Не употреблять в течение предстоящих 24 часов спиртные напитки и табачную продукцию
Отказаться от жирной пищи за несколько суток до явки в лабораторию
Ничего не есть в течение последних 8 часов перед сдачей крови

Анализы сдаются в лабораторных условиях в утренние часы. В качестве материала для исследования берется небольшое количество венозной крови пациента. В рамках личной безопасности, обследуемому рекомендуется следить за тем, чтобы используемый медработником шприц был совершенно стерилен.

Кровь из вены пациента берется в незначительном количестве, поэтому на его состоянии процедура никак не сказывается. После сдачи ПЦР пациент может отправляться домой.

О чем говорит порог чувствительности теста?

Итак, ПЦР является очень важным диагностическим тестом. Но его чувствительность определения 60 МЕ/мл — что это значит? Показатели чувствительности определения лабораторного тестирования говорят о том, насколько точно можно определить наличие вируса в крови пациента.

У качественного ПЦР порог чувствительности даже шире — от 10 до 500 МЕ/мл. Такой широкий разброс помогает определить заболевание на любой его стадии. В свою очередь, чувствительность определения количественной полимеразной цепной реакции колеблется в пределах от 50 до 800 000 МЕ/мл. Благодаря этому, можно с точностью определить стадию заболевания и уровень вирусной нагрузки.

Вирусный гепатит В (ВГВ, HBV)

ИФА – иммуноферментный анализ

HBsAg: Наличие этого антигена в крови человека говорит о том, что он инфицирован вирусом.

Этот антиген обнаруживается в сыворотки крови спустя 4 – 6 недель после заражения.
В это время признаки заболевания еще могут отсутствовать (антиген опережает симптомы примерно на месяц).
Антиген содержится в крови во время острого периода гепатита.
После выздоровления (исчезновения симптомов) этот антиген может исчезнуть из крови, но у некоторых людей сохраняется месяцы и годы.

Aнти-HBs (HBsAb): Чаще всего анти-HBs появляются у человека спустя 3- 4 месяца после того, как у него в крови исчез антиген HBs, то есть в стадию выздоровления.
Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении после острого гепатита и развитии иммунитета против вируса.

HBcAg: Этот антиген можно обнаружить только при биопсии (взятие кусочка органа для анализа) печени. Это довольно сложная процедура (по сравнению с взятием крови), поэтому HBcAg определяется редко.

анти-HBc (HBcAb): А вот антитела к этому антигену можно найти в крови. Появляются они еще до того, как разовьется желтуха, находятся в крови на протяжении всего острого периода болезни, циркулируют в крови продолжительное время.

НВеAg: Этот антиген появляется в крови одновременно с HBsAg. Его обнаружение свидетельствует о высокой активности вируса. Чем больше этого антигена, тем “заразнее” человек.

Aнти-НВе (HBeAb ): Антитела к НВе появляются после исчезновения из крови соответствующего антигена.
Снижение содержания в крови HBeAg и появление анти-НВе свидетельствует о том, что заболевание течет доброкачественно, если ситуация обратная – это признак затяжного течения заболевания и угрозы того, что оно может перейти в хроническую форму.

ПЦР – полимеразная цепная реакция

ВГВ-ПЦР, или типирование ДНК – установление генетической индивидуальности любого организма на основе анализа особенностей его дезоксирибонуклеинововой кислоты (ДНК).

Показатель активности вируса. Наиболее достоверный метод диагностики вируса гепатита В.

ПЦР-генотипирование ВГВ.

Молекулярная диагностика генотипический вариантов вируса гепатита В, позволяющий прогнозировать течение заболевания и эффективность терапии. В Узбекистане вывялены 5 из 9: A , B , C , D и G – генотипы. Наиболее распространенный генотипы А и D.

Вирусный гепатит С (ВГС, HCV)

ИФА

Антитела, Анти-ВГС (HCV Ab) – скрининговый тест для выявления инфицированности ВГС

Как показывает практика, определение антител является менее чувствительным в ранних стадиях заболевания и не может дифференцировать активность и ремиссию инфекции: РНК ВГС удается обнаружить на 7 – 21-й день после инфицирования ВГС, а анти-ВГС на 20 – 150-й день (в среднем 50-й день).

Антиген ВГС (HCVcoreAg) – качественный и количественный анализ ВГС в сыворотке или плазме крови.

Выявление самого вируса ГС по ВГС core Ag, антигенов, кодированных NS3 и NS4 зонами РНК ВГС, в ядре и цитоплазме гепатоцитов, у 60-90% больных острым и хроническим ГС; прямая корреляция между концентрацией РНК ВГС и выявлением Core Ag ВГС;

Важное диагностическое значение при установлении связи концентрации ВГС с инфекциозностью, тяжестью заболевания и ответом на противовирусную терапию.

ПЦР

РНК ВГС. Показатель репликативной активности вируса. Наиболее достоверный метод диагностики носительства вируса гепатита С. Репликативная фаза ВГС-инфекции подтверждается с помощью определения РНК вируса гепатита С в сыворотке методом полимеразной цепной реакции РНК – ВГС и обнаруживается у 65-85% лиц, имеющих антитела к ВГС.

ПЦР-генотипирование ВГС

Молекулярная диагностика генотипический вариантов вируса гепатита В, позволяющий прогнозировать течение заболевания и эффективность терапии. В Узбекистане вывялены 5 из 7: 1а, 1в, 2, 3а, 4 – генотипы. Наиболее распространенные в Узбекистане генотипы 1 и 3.

Генотип вируса является крупной “таксономической” единицей и устанавливается в ходе анализа консервативных областей вирусного генома. Показано, что наиболее благоприятный прогноз течения заболевания имеют лица с невысоким титром вируса в крови и генотипом 2 или 3. Кроме того, известно, что именно с генотипом вируса связывают уровень виремии вируса в крови больного, частоту хронизации и развития таких тяжелых исходов, как гепатоцеллюлярная карцинома и цирроз печени.

Вирус иммунодефицита человека

(вирус СПИДа, ВИЧ, HIV)

ИФА

Анти ВИЧ (HIV1\2 Ab) – скрининговый тест для выявления инфицированности ВГС

Спустя три месяца после попадания вируса в кровоток, в организме человека накапливается то количество антител, которое может определить иммуноферментный анализ. Примерно в 1-5% случаев он дает ложноположительный или ложноотрицательный результаты.

Ложноотрицательный результат может быть получен, если антитела к вирусу не успели выработаться либо на терминальной стадии СПИДа, когда вируса в крови настолько много, что клетки CD-4 и антитела почти отсутствуют. Если ты хочешь удостовериться, что твой отрицательный результат не является на самом деле ложноотрицательным, имеет смысл пересдать ИФА еще раз через 3 месяца.

Иммуноблот (ИБ) – определяет наличие специфических антител к ВИЧ. Результат может быть положительным, отрицательным и сомнительным (или неопределенным).

Неопределенный результат может означать, что в кровотоке человека присутствует ВИЧ, но организмом выработан еще не весь спектр антител. Как правило, по прошествии 1-3-6 месяцев с момента получения сомнительного результата в сыворотке появляются одно за другим все антитела и ВИЧ. В этом случае сомнительный результат является свидетельством начальной стадии ВИЧ-инфекции. Неопределенный результат иммуноблота также может означать, что человек не инфицирован ВИЧ, но в его организме есть антитела, похожие на антитела к ВИЧ. Такой результат бывает у больных туберкулезом, онкобольных, реципиентов, получающих многократные гемотрансфузии (переливания крови), у беременных женщин. При неопределенном результате ИБ пациент находится под наблюдением врача-инфекциониста и повторяет анализ через 1, 3 и 6 месяцев.

ПЦР

ПЦР-ВИЧ – используется для определения РНК и ДНК вируса. Это очень эффективная и чувствительная реакция, позволяющая получить результат, исследуя ДНК всего одной клетки путем умножения (или амплификации) специфических последовательностей ДНК. ПЦР используется для:

определения наличия или отсутствия самого ВИЧ в “период окна” и при неясном результате иммуноблота;
для определения, какой вирус присутствует в организме – ВИЧ-1 или ВИЧ-2; – для определения и контроля вирусной нагрузки;
для определения ВИЧ-статуса новорожденных, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей;
в службах переливания крови.

Чувствительность данного теста очень высока: он обнаруживает сам вирус, причем через короткое время (в среднем около 10-ти дней) с момента предполагаемого заражения. Однако эта же высокая чувствительность позволяет тесту реагировать и на многие другие инфекции, что приводит к частым ложноположительным результатам. Поэтому по результатам этого теста никогда не ставится окончательный диагноз.

Иммунный статус при ВИЧ

Снижение количества CD4- клеток ниже уровня 200 в мм куб. крови.

Критериями достаточной достоверности являются: Обнаружение суммарных антител к ВИЧ иммуноферментным или иным методом. Снижение количества CD4 ниже 400 в мм куб крови.

К критериям средней достоверности относятся сочетанные (синдромальные) показатели системных сдвигов иммунитета, типичных для ВИЧ-инфекции. На наш взгляд, к таковым среди доступных в обычной клинике может быть отнесено уменьшение соотношения СD4/ СD8 клеток, увеличение количества СD8 клеток. Среди малодоступных в обычной практике показателей можно упомянуть повышенные уровни сывороточного бета-2-микроглобина, неоптерина.

К критериям относительной достоверности можно отнести обнаружение отдельных лабораторных сдвигов, достаточно типичных для ВИЧ-инфекции, но неспецифичных, таких как лимфоцитопения повышение уровня кислотолабильного интерферона.

ПЦР-диагностика гепатита С – это исследование биологических образцов с применением полимеразной цепной реакции. Способ заключается в многократном копировании фрагментов РНК вируса. Благодаря такой методике всего нескольких молекул возбудителя достаточно для того, чтобы тест отреагировал на присутствие вируса. Результат можно получить уже в первые 5-7 дней после контакта с зараженным человеком. ПЦР позволяет выявить факт инфицирования, а также приблизительную концентрацию HCV и его генотип.

Когда назначается анализ ПЦР

Самая очевидная причина для назначения ПЦР на гепатит С в крови – это наличие признаков заболеваний печени:

хроническая усталость;

боли в области печени;

желтизна кожи и белков глаз;

гипертрофия печени;

тошнота.

Анализ на ПЦР целесообразно сделать в условиях повышенного риска заражения:

сексуальный контакт с предполагаемым носителем гепатита;
повышенная активность АЛТ и АСТ, выявленные по результатам биохимического анализа крови;
если результат ИФА на антитела к вирусу гепатита положительный.

Другие показания к сдаче крови:

Врачи-гепатологи назначают ПЦР на гепатит С в профилактических целях перед операциями.
Медработники и сотрудники детских садов и школ сдают анализ в ходе плановых проверок.
Метод показан при проведении вакцинации против вируса гепатита В.
Анализ проводится несколько раз в ходе терапии гепатита С, чтобы оценить ее эффективность.
ПЦР нужен для исключения смешанного поражения печени, что иногда бывает при гепатите В.

Как подготовиться и сдавать кровь

В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.

Перед сдачей анализа требуется подготовка:

за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
с утра до момента сдачи крови – не курить.

На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.

На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.

Расшифровка ПЦР на гепатит С

В настоящее время используются три метода ПЦР:

качественный (тест на наличие или отсутствие вируса);
количественный (тест на концентрацию вируса в крови);
с генотипированием (определяет принадлежность HVC к конкретному генотипу и субтипу).

Качественный анализ – это метод диагностики гепатита С, который позволяет подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в крови. Выявляет наличие в определенной концентрации – в пределах 10-500 МЕ/мл. Выполняется в течение 1-4 дней и дает следующие результаты:

Этот метод оценивает вирусную нагрузку, которая меняется в зависимости от стадии заболевания или этапа излечения. Метод не только показывает наличие флавивируса, но и его концентрацию в МЕ (международных единицах) на 1 мл крови. Это играет решающую роль при выборе тактики лечения гепатита С. Результаты количественной ПЦР-диагностики записываются следующим образом:

Количество вируса (МЕ/мл)	Расшифровка
Нет	Вирус отсутствует или количество HCV недостаточно для того, чтобы тест на него среагировал.
Менее 1,8х10^ 2	Концентрация вируса ниже линии границы.
Менее 8х10^ 5	Количество незначительное, соответствует началу заболевания. Прогноз благоприятный.
Более 8х10^ 5	Количество высокое, требуется лечение.
Более 2.4х10^ 7	Концентрация вируса выше линейного диапазона.

Для упрощения подсчетов:

Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).

Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С необходим для оптимального выбора препарата. С его помощью можно прогнозировать осложнения и эффективность терапии. Он позволяет оценить степень заразности носителя гепатита для окружающих: чем большее число вирусов насчитывается в крови, тем больше риск заражения.

Сегодня известно, что у гепатита С имеется 11 генотипов и огромное количество субтипов. В разных странах есть свои приоритетные разновидности. В России в основном встречается 1 генотип (1b чаще, чем 1а), на втором месте по распространенности – 3 генотип (субтип 3а), на третьем – 2.

У каждого генотипа свои особенности. Зная их, можно спрогнозировать характер течения инфекции, риск перехода в хроническую форму и вероятность ответа на противовирусную терапию. Например, 3 генотип HCV провоцирует стеатоз, а 1 генотип требует лечения в течение 48 недель. По рекомендациям Минздрава генотипирование должно предшествовать противовирусной терапии.

Исходя из результатов, врач определяет противовирусный препарат, его дозировку, курс приема.

Преимущества и недостатки ПЦР

ПЦР-диагностика на вирусный гепатит С опережает иные методы по чувствительности, низкой вероятности ошибок и другим показателям:

Позволяет выявить вирус на самых ранних стадиях, когда концентрация его в крови ничтожно мала. Для сравнения, иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) реагирует только на иммуноглобулины, а они вырабатываются лишь через несколько недель в ответ на инфекцию. В то же время ПЦР реагирует на сам антиген и показывает присутствие вируса уже через 5 дней после заражения.

Ложные результаты возникают гораздо реже, чем у других методов. Так, у ИФА возможны ложные результаты на гепатит при появлении перекрестных антител, но ПЦР реагирует непосредственно на патогены и такой погрешности не имеет.

ПЦР – высокочувствительный метод. Анализ реагирует на присутствие РНК вируса гепатита уже 10-100 клеток в пробе и дает результат еще задолго до появления первых симптомов.

В отличие от культуральных методов исследования, ПЦР проводится методом высокотехнологичной автоматизированной амплификации, что позволяет проводить тестирование в день забора.

Тест универсален и позволяет обнаружить несколько типов возбудителей гепатита в одной биологической пробе.

ПЦР-диагностика гепатита имеет и свои недостатки. Главный из них связан со способностью микроорганизмов к мутации. Вирусы гепатита приспосабливаются к условиям окружающей среды, и их генотип меняется. Когда это происходит, диагностическая система не может уловить гибрид. Второй недостаток ПЦР связан с возможностью получения ложноположительного и ложноотрицательного результата. Чтобы избежать ошибки, нужно соблюдать правила забора материала. Чаще всего погрешности возможны после уже проведенного лечения, поэтому принимать решение об отмене терапии может только лечащий врач.

РНК-вирус проникает в клетки печени и вызывает болезнь – гепатит С. Заболевание проходит в острой и хронической форме. Для него характерно протекание без видимых признаков. Такое течение объясняется высокой способностью вируса к мутации и появлению различных видов. Это помогает патогену приспосабливаться к организму хозяина и ускользать от иммунной защиты.

Исследования на ранних стадиях развития не дает результата. Качественный анализ ПЦР на гепатит С проводят, чтобы выявить патоген, и начать вовремя лечение.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое качественный анализ на гепатит С?

Гепатит С – серьезное заболевание, при хроническом развитии которого возникает цирроз и рак печени. Ученые длительное время не могут разработать вакцину от болезни, несмотря на изучение особенностей строения HCV. Многообразие видов патогена слабо поддается изучению.

Только с помощью лабораторных исследований можно обнаружить поражение органа, и предупредить инфицирование окружающих. С этой целью проводят качественный анализ ПЦР на гепатит С.

Носитель в течение многих лет может быть инфицирован и не подозревать о болезни. Качественный анализ предполагает проведение в лаборатории полимеразной цепной реакции крови пациента на наличие РНК вируса. Диагностика проводится на сверхчувствительном медицинском оборудовании, которое помогает его обнаружить.

Что показывает качественный анализ?

Качественное обследование с помощью ПЦР обладает достоинствами перед другими методами:

даннй метод помогает выявить генетический материал патогена на ранних стадиях;
показывает вид возбудителя;
используется система тестов, нет необходимости высеивать материал в питательной среде;
обладает высокой скоростью диагностики возбудителя: результат анализа будет готов через 5 часов;
выявляет скрытую инфекцию.

Качественный анализ назначают при профилактическом осмотре, когда имеются показания на его проведение. Он проводится во время лечения, после выздоровления. С его помощью подтверждают наличие или отсутствие антител вируса гепатита С в крови.

количественное содержание генотипа HCV;
качественные характеристики вирусной РНК;
генотипирование.

Диагностику проводят повторно для подтверждения результата с более чувствительным реагентом.

Показания к исследованию

Для проведения качественной ПЦР нужны предпосылки для ее назначения:

сексуальная связь с лицом, который инфицирован вирусом гепатита;
цирроз печени;
обязательное обследование перед оперативным вмешательством;
проведение вакцинации против вируса гепатита В;
плановое обследование работников медицинских учреждений, садов, школ.

Если у пациента видны явные признаки гепатита:

желтизна кожных покровов, белков глаз;
боль в правом подреберье;
усталость;
увеличение в размерах печени;
тошнота.

Вирус гепатита С проникает в клетки печени через кровеносные сосуды. Патоген может попасть при гемодиализе, при пользовании инфицированной иглой, при нанесении татуировки, в стоматологических и косметических кабинетах.

Возможна передача вируса новорожденному от инфицированной матери, если происходит травмирование кожи ребенка при родах. Качественный анализ выявляет вирус и указывает на второстепенные признаки: наличие в крови больного антител.

Расшифровка результатов

Врач-гепатолог или инфекционист проводит расшифровку результатов ПЦР и ИФА на гепатит С. Полученные данные подтверждаются комплексным обследованием:

биохимическим анализом;
УЗИ органа;
биопсией печеночных тканей.

Опираясь на полученные данные, врач подтверждает или отрицает гепатит С.

Стандартная чувствительность теста на ПЦР колеблется в пределах 10-500 МЕ/мл. Анализ не дает результата, если она ниже указанного параметра.

Количественный анализ ПЦР показывает вирусную нагрузку: концентрацию патогена в человеческом организме (сколько фрагментов флававируса в 1 мл крови). Такой метод обследования назначают перед началом комплексной терапии и на 12 неделе заболевания. Он помогает:

Выявить степень болезни. Если концентрация вируса в крови пациента высокая, возможна передача инфекции другим лицам.
Назначить противовирусную терапию, выбрать нужный метод лечения.
Сделать прогноз выздоравления.

Важно определить генотип, так как патоген постоянно мутирует и приспосабливается к организму. Известно 11 типов, на территории РФ выявлены три: 1, 2, 3. Обследование покажет тип вирусной инфекции.

При расшифровке пишут:

РНК обнаружено;
РНК не обнаружено (болезнь не выявлена);
тип флававируса;
количественный состав (концентрацию в крови);
название теста.

Если гепатит С обнаружен в биологическом материале пациента, врач назначает повторное исследование, чтобы исключить ошибку. Обследование биоматериала делают от 1 до 5 дней. Срок исполнения зависит от загруженности персонала.

Присутствие флававируса и антител к нему свидетельствует о продолжительном течении болезни, которая перешла в хроническую стадию. Ложные показания бывают у беременных женщин и у людей, имеющих другие инфекционные заболевания.

Качественный анализ не обнаружил гепатит С. Отрицательное значение означает, что в крови отсутствуют РНК вируса. Утомляемость и другие признаки возможно связаны с протеканием другой инфекции в организме и требуют дальнейшего изучения.

Что делать, если РНК вируса гепатита С обнаружено?

Если вирус обнаружен в крови, нельзя отчаиваться и впадать в панику. В 20 процентах болезнь излечивается самостоятельно. Антитела не всегда свидетельствует о том, что вы болеете гепатитом С. Случаются ошибки при лабораторных исследованиях. Доброкачественные и злокачественные опухоли, инфекционные очаги в организме, проведенная ранее вакцинация смазывают картину ПЦР.

Раннее обнаружение помогает вовремя остановить болезнь. Назначают противовирусную терапию. Препараты помогают вылечить хроническое заболевание в течение 3-6 месяцев.

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Что такое анализ ПЦР?

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

качественный анализ;
количественный анализ;
генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
метод и эффективность лечения;
длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Важно: нет прямой связи между уровнем HCV RNA в крови и тяжестью заболевания. У больного может быть очень высокая вирусная нагрузка, но это еще не свидетельствует о том, что имеется серьезное поражение клеток печени.

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Разные генотипы HCV по-разному поддаются противовирусной терапии. Например, 1 генотип требует до 48 недель лечения, а его эффективность в среднем составляет 60%, тогда как 2 и 3 генотипы лечатся в два раза быстрее с эффективностью до 85%.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Важно: в результате теста рядом с цифрой, показывающей генотип, может стоять латинская буква, например, 1а, что обозначает субтип вируса. Для врача он не имеет значения: для выбора метода лечения берется только генотип.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С. Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом. Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

Полезное видео

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Заключение

Для анализа на ПЦР гепатита С обычно берется венозная кровь. Чаще всего происходит двойной забор биологического материала — для ИФА, и непосредственно для ПЦР теста. Для корректных результатов тестов требуется соблюдение основных правил лабораторного забора биологического материала:

кровь на анализ сдается в первой половине дня натощак;
между приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов;
перед сдачей анализа нужно также исключить алкоголь и жареную пищу;
в течение суток перед сдачей крови необходимо избегать высоких физических нагрузок.

Результаты тестирования крови обычно готовы на следующий день.

Читайте также: