Рск и рмп при диагностике сифилиса

Показания к исследованию и подготовка

Анализ на РМП проводится в серологических лабораториях, которые находятся в кожно-венерологических диспансерах. Кровь сдают по направлению врача. Показания к исследованию бывают разные:

• незащищенный акт, после которого появилась сыпь в области половых органов;
• появление шанкра (твердое уплотнение, похожее на язву). Может возникнуть на половых органах, в области заднего прохода, на слизистых оболочках рта, глаз. Не сопровождается дискомфортом, проходит сам посебе на 15-45-й день;
• увеличение лимфатических узлов;
• высыпания по телу, повышение температуры тела в течение нескольких дней;
• фимоз, баланопостит у мужчин.

Анализ крови сдается натощак, но не ранее чем через 4 часа после еды. Недопустим алкоголь, в течение 2-3 дней перед сдачей следует воздержаться от жирной пищи, так как сыворотка крови после инактивации мутнеет и реакцию будет невозможно учесть.

Техника забора предусматривает определенные нюансы: кровь забирают из вены в объеме 5 мл в стерильную стеклянную пробирку или вакутайнер в манипуляционных кабинетах. Допустимо взятие крови из пальца, в редких случаях – спинномозговую жидкость. Манипуляции проводятся в медицинских учреждениях, материалы далее транспортируются в серологические лаборатории, где и осуществляют анализ.

Учет анализов проводит квалифицированный врач-лаборант. Выделяют четыре вида распознавания анализов на РМП:

• Положительный (++++) ;
• слабоположительный (++) ;
• сомнительный (+) ;
• отрицательный (-)

Любой из неотрицательных результатов является поводом для обращения к специалистам, не следует игнорировать даже сомнительную реакцию, она может быть первым признаком скрытого сифилиса, который не проявляется клиническими признаками и выявляется только лабораторно. Положительный и слабоположительный результат предусматривает в первую очередь пересдачу анализа, анамнез больного и осмотр.

Скрининговые тесты, к которым относится РМП, имеют некоторые недостатки – низкую чувствительность при первичном и третичном сифилисе и ложноположительные реакции.

Причинами ложноположительных реакций являются:

• инфекционные заболевания, возбудители которых имеют сходство с бледной трепонемой (сапрофиты в полости рта и на половых органах);
• состояния, приводящие к изменению обмена веществ, особенно липидного (беременность, пневмония, лепра, онкологические заболевания, инфаркт миокарда, искусственная иммунизация и пр.);
• технические погрешности при постановке.

Если при сдаче крови обнаружен неотрицательный результат на РМП или RPR, в первую очередь необходимо обратиться к врачу-венерологу. Чтобы убедиться в правильности предыдущего анализа, придется еще раз дать кровь. Следует учесть, что ни один из этих тестов не является основанием для выставления диагноза сифилис, а является причиной для дальнейшего обследования более чувствительными, трепонемными методами (РПГА, РИТ, РИФ).

Что такое сифилис

Сифилис относится к заболеваниям, передающимся половым путем. Оно имеет инфекционную природу, очень опасно и в большинстве случаев протекает тяжело.

Основным путем заражения является незащищенный половой акт (оральный, анальный, вагинальный) с зараженным партнером.

Иногда фиксируется бытовая передача:

• через ранки на слизистых оболочках,
• при поцелуях,
• через предметы общего пользования (особенно обувь, полотенца, белье, расческу, бритву),
• при переливании крови,
• при наркомании через шприцы,

Возбудитель заболевания — бледная трепонема, бактерия из семейства спирохет. Инкубационный период длится, в среднем. 7-10 суток, реже — 21 день. Он начинается с момента заражения и до образования шанкра — твердого уплотненного образования на коже или слизистых оболочках.

Еще один признак заболевания, который проявляется на начальном этапе, — увеличение лимфоузлов.

При остром течении заболевания появляется лихорадка и обширная сыпь. В этом случае человеку необходимо пройти ряд диагностических процедур, среди которых одно из важных мест занимает РМП-исследование крови.

Что такое сифилис и чем опасно данное заболевание рассказывается на видео:

RPR модификация

Также в современных лабораториях можно столкнуться с другим похожим названием — тест RPR. Это уже современная модификация преципитации, в которой обнаруживаются быстрые плазменные реагины. Такими реагентами называют антитела, принадлежащие к классам иммуноглобулинов G и M.

Именно RPR тест (его второе название — неспецифический антифосфолипидный или реагиновый тест) рекомендуется приказом Минздрава Российской Федерации для скрининга или первичного исследования на сифилис. Поэтому, если у вас есть выбор: сделать РМП либо выполнить RPR, — то лучше принять решение в пользу второго метода.

RPR — метод исследования позволяет выявить практически 80% лиц с течением первичной инфекции и почти 100% лиц, которые болеют вторичным сифилисом или латентными (скрытыми) формами. RPR — реакция способна выявить сифилис уже через 7 дней после появления первичной сифиломы, например, твердого шанкра. Обычно это можно сделать через месяц после заражения.

Что такое кровь на РМП и как сдавать анализ

Довольно часто в больницах на первой процедуре спрашивают, что такое кровь на РМП и сколько его делать. Данная процедура выполняется в течение одного дня и по его окончании уже можно узнать результаты анализа.

Прохождение процедуры анализа крови на РМП ничем не отличается от обычного забора крови.

Следует прийти на процедуру натощак. Разрешается пить обычную воду (без подсластителей и без газа).

Накануне анализа требуется воздержаться от приема алкоголя, острой пищи, жареных блюд — все это может снизить точность проводимой процедуры.

Заранее проинформируйте специалиста о приеме тех или иных медицинских препаратов
— действующие вещества лекарств тоже могут снизить точность проводимого анализа. Следует воздержаться от интенсивных физических нагрузок перед проведением данной процедуры.

Помимо вышеперечисленного крайне важно стараться не нервничать. Да, от результатов анализов зависит многое, однако если перенервничаете, то анализы придется пересдавать

Для успокоения выпейте стакан обычной воды — достаточное количество жидкости в организме способствует стабилизации нормального самочувствия.

У пациента берут образец крови, с которым затем проводят определенные манипуляции: добавляют специальные антигены, которые при наличии сифилиса приведут к разрушению эритроцитов (гемолиз). Данная процедура для больного ничем не отличается от обычного забора крови на общий анализ.

В настоящее время в медицинской практике титр антител от 1:2 до 1:800 свидетельствует о наличии сифилиса.

В результате обследования анализа крови на микрореакцию возможны положительный, отрицательный или ложноположительный ответы.

Положительный результат
говорит о том, что в организме пациента выявлены возбудители сифилиса. После этого сдаются дополнительные анализы.

Ложноположительный результат
возникает при обнаружении других заболеваний у пациента: злокачественная опухоль, диабет, СПИД, гепатит, подагра и другие.

Отрицательный результат
говорит об отсутствии у человека сифилиса. Для подтверждения отсутствия заболевания через некоторый промежуток времени данный тест проводят повторно: если первый анализ крови на микрореакцию преципитации проводился на раннем этапе заболевания (прошло меньше недели после заражения), то возбудители сифилиса могли еще не спровоцировать выработку антител, а соответственно, тест не мог их заметить.

Самым неприятным заболеванием, оказывающим удручающее влияние на личную жизнь человека, считают сифилис. Эта опасная инфекционная , вызывает массу тяжёлых последствий. Современная медицина владеет несколькими способами диагностики сифилиса, один из которых-анализ крови на РМП. Так, в сокращённом виде, называют реакцию микропреципитации.

При госпитализации или предоперационном обследовании пациент должен иметь представление об анализе крови на рмп, что это рутинная процедура, которую обязаны пройти все.

Принцип микропреципитации заключается в обнаружении к антигену кардиолипиновому, находящемуся в мембранах возбудителя сифилиса, Treponema pallidum и прочих микроорганизмов из рода Treponema порядка Spirochaetales. Реакция основана на феномене преципитации- выпадении в осадок смеси и реактива. Если осадок образуется, тест считают Положительной считают реакцию с образованием осадка.

Порядок проведения исследования

Что же это такое анализ крови РМП и как его делают? Для исследования у пациента отбирают плазму венозной крови, жидкость, сочащуюся из высыпаний на слизистой или пункцию лимфоузла. Выбор биоматериала определяется врачом.

Сдавать анализ на РМП следует натощак. При этом со времени последнего приема пищи должно пройти не менее 8-10 часов.

Перед проведением анализа пациенту разрешается пить минеральную воду без газа в малых количествах.

За день до проведения исследования из рациона обязательно нужно исключить острую, жирную и соленую пищу, алкогольные напитки.

Накануне этой процедуры следует ограничить физические нагрузки на организм.

Пациенты, которым необходимо регулярно применять какие-либо лекарственные препараты, обязательно должны проинформировать об этом врача, направляющего на обследование. В случае недомогания или плохого самочувствия нужно поставить в известность медсестру, выполняющую забор крови, или врача.

Современные методы диагностики и лечения болезни в большинстве случаев приводят к выздоровлению. Для терапии обязательно следует использовать антибактериальные препараты. Строгое выполнение рекомендаций врача станет залогом эффективного лечения, а исследование на РМП поможет контролировать ход процесса.

• Политика конфиденциальности
• Пользовательское соглашение
• Правообладателям

• Аденома
• Без рубрики
• Гинекология
• Молочница
• О крови
• Псориаз
• Целлюлит
• Яичники

Если РМП или RPR положительна

Конечно, больше всего людей беспокоит, если РМП положительна.

В этом случае необходимо проводить дополнительные подтверждающие тесты, о которых говорилось выше. Если предметом выбора будет иммуноферментный анализ и реакция пассивной гемагглютинации или РПГА, то их специфичность намного выше и составляют 100% при чувствительности в 95%. Но даже эти дополнительные методы могут тоже дать ложный положительный результат, особенно в случае сопутствующих воспалительных заболеваний, а также аутоиммунных процессов. Именно поэтому в клинической практике обязательно подтверждают диагноз сифилиса с помощью двух дополнительных способов. Это может быть реакция иммунофлюоресценции или иммобилизации возбудителей сифилиса (РИБТ). Но эти исследования дорогие и применяются нечасто.

Возможно применять реакцию связывания комплемента (РСК), в которой используется специфический трепонемный антиген. Показано проведение иммунного блота, который помогает в сомнительных случаях при неясных клинической картине. Наконец, на помощь приходит полимеразная цепная реакция, с помощью которой можно определить наличие ДНК бледной спирохеты в организме пациента.

Как диагностируют сифилис

Диагностика заболевания всегда должна базироваться на достоверных и неопровержимых клинических проявлениях:

• специфические проявления на коже и слизистых оболочках;
• данные анамнеза (наличие половых связей в определенный промежуток времени);
• результаты лабораторных исследований (РМП, RPR).

RPR (реакция плазменных реагентов) также является нетрепонемным тестом диагностирования сифилиса, по сути это аналог РМП (европейский метод), но может проводиться и с плазмой крови. РМП (плазмотест) допускается, но считается экспресс-методом. Проводится быстрее по времени и считается достоверным, но в сомнительных случаях лучше обратиться к анализу РМП из инактивированной сыворотки.

Инактивация – помещение сыворотки человека в термобаню на 30 мин. Для RPR диагностики она не обязательна.

Найдено (768 сообщений)

венеролог
7 июня 2012 г. / Софья / Нерюнгри

Здравствуйте. В конце апреля муж лег в больницу из-за гайморита, сдал анализы и на третий день пребывания в больнице отказался там лежать, а 4 мая позвонили из квд, сказали,… открыть (еще 5 сообщений)Последние 5:

12 сентября 2019 г. / Сергей Куликов

… , но не говорят от давности процесса.

Если лечение проходило адекватно диагнозу, если анализы с кардиолипиновым антигеном (РМП, РПР, ВДРЛ, реакция Вассермана) негативировались — дают отрицательные результаты, то приведенные анализы свидельствуют лишь о …

венеролог
5 сентября 2019 г. / Владимир… / Уруша

Здравствуйте! Рмп отрицательный, Рпга 4+, что это значит и как лечить открыть

венеролог
23 июля 2019 г. / Наталья / Новосибирск

… ,ИФА +, РПГА положительно 1:2560, реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном — отрицательный. За месяц до этого на RW РМП отрицательный? Доктор говорит, что у меня сифилис в острой форме, но никогда не было ни каких признаков и анализы всегда … открыть

венеролог
3 июня 2019 г. / Марина

Здравствуйте, помогите пожалуйста расшифровать результаты анализов. Проболела 12 лет назад, прошла лечение. Сейчас такой результат: 16:33 anti-t. pallidum сумм. (Ихла) anti-t. Pallidum… открыть

3 июня 2019 г. / Сергей Куликов

Эти анализы не отвечают на Ваши вопросы. Контроль излеченныости осуществляют по кардиолипиновым тестам (РПР, РМП, ВДРЛ, реакция Вассермана).

венеролог
18 апреля 2019 г. / Елена / Дмитров

… день,просто ужас какой то,долгожданная беременность(ЭКО),у мужа Рпга,Рпр,Ифа отрицательный,жена Рпр отрицательный,Рпга 2+,Рмп отрицательный,Ифа Igg положит.,Igm отрицательный,сдала Иммуноблот Igg положит.Igm отрицательный,заставляют лечиться,от того чего … открыть

19 апреля 2019 г. / Сергей Куликов

… трепонемные тесты (ИФА, РПГА, РИФабс.) позволяют поставить данный диагноз. Отрицательные кардиолипиновые тесты (РПР, ВДРЛ, РМП) могут быть отрицательными при давнем заболевании.

При беременности описана ситуация, когда данные исследования могут стать …

венеролог
1 февраля 2019 г. / Гость

Здравствуйте, помогите мне пожалуйста, был защинный пк и оральный не защищённый,так как статус портнера не известен и узнать уже не могу, по истечению 5,5 недель сдала… открыть (еще 10 сообщений)Последние 5:

22 февраля 2019 г. / Гость

… той же причине, на работе проходили мед осмотр, как и пологается с давались все анализы ВИЧ, гепатиты антитела, сифилис РМП и ИФА все отрицательные, от монета предполагаемого заражения выходит прошло 2 месяца, могу ли я быть уверена что здорова или также …

венеролог
13 декабря 2018 г. / Ирина / Москва

Ифа суммарные отрицательно, ифа igg,igm отрицательно; Рмп отрицательно; рпга положительный. Это сифилис? Никогда не болела, не лечилась, проявлений не было. открыть

венеролог
4 декабря 2018 г. / Пух

Здравствуйте, скажите пожалуйста ваше мнение,на сколько достоверны анонимные анализы в отличае от анализов по паспорту. Спасибо. открыть (еще 5 сообщений)Последние 5:

7 декабря 2018 г. / Аноним

венеролог
22 ноября 2018 г. / Ирина / Москва

Анализ на сифилис:
Ифа качественно и количественно не обнаружено
Рмп с кардиолипиновым антигеном отрицательно
Рпга обнаружено

У меня сифилис? Я два года в протоколах ЭКО, сдаю этот анализ каждый месяц, всегда был отрицательный открыть

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.