Treponema pallidum возбудитель сифилиса
Глава 37. Возбудитель сифилиса
Treponema pallidum - возбудитель сифилиса включен в род Treponema (от лат. trepo - поворачивать, nemo - нить).
Т. pallidum открыта Ф. Шаудином в 1905 г. Большой вклад в изучение сифилиса внесли И. И. Мечников, П. Эрлих, Д. К. Заболотный и др.
Морфология. Т. pallidum - спиралевидная нить размером 8-18 × 0,08-0,2 мкм с мелкими, равномерными завитками. Число завитков 12-14. Концы трепонемы заострены или закруглены. Трепонемы подвижны. Обладают четырьмя видами движения. По Романовскому - Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет, поэтому они называются Т. pallidum - бледная трепонема. Плохое окрашивание объясняется малым содержанием нуклеопротеидов. Спирохеты можно выявлять в препаратах, окрашенных по Бурри, серебрением. Кроме того, их изучают в живом состоянии - в темном поле.
Возбудители сифилиса спор и капсул не имеют (см. рис. 4).
Культивирование. Бледные трепонемы очень требовательны к питательным средам. На искусственных питательных средах они растут только в присутствии кусочков мозга или почек кролика и асцитической жидкости. Растут медленно, 5-12 дней при температуре 35-36° С в анаэробных условиях. Бледные трепонемы хорошо размножаются в курином эмбрионе (поперечным делением). При выращивании на искусственных питательных средах трепонемы теряют вирулентность. Такие культуры называются культуральными. Культуры, выращенные в курином эмбрионе, называют тканевыми. Они обычно сохраняют вирулентность.
Ферментативными свойствами трепонемы не обладают. Однако культуральные штаммы различаются между собой по способности образовывать индол и сероводород.
Токсинообразование. Не установлено.
Антигенная структура. Бледная трепонема содержит несколько антигенных комплексов: полисахаридный, липидный и протеиновый. Серогруппы и серовары не установлены.
Устойчивость к факторам окружающей среды. Бледные трепонемы малоустойчивы. Температура 45-55° С губит их через 15 мин. К низким температурам они устойчивы. При замораживании сохраняются до года. Спирохеты чувствительны к солям тяжелых металлов (ртути, висмута, мышьяка и др.). Обычные концентрации дезинфицирующих веществ губят их в течение нескольких минут. Они чувствительны к бензилпенициллину, бициллину и др. Под влиянием некоторых факторов внешней среды и антибактериальных препаратов трепонемы могут образовывать цисты. В такой форме они длительно находятся в организме в латентном состоянии.
Восприимчивость животных. В естественных условиях животные сифилисом не болеют. Однако на обезьянах, как показали И. И. Мечников и Э. Ру, можно воспроизвести клиническую картину сифилиса: на месте введения образуется твердый шанкр. В настоящее время показано, что при заражении кроликов, морских свинок на месте введения или в другом месте на коже образуются язвы. На кроликах путем пассажей можно длительное время сохранять выделенный штамм трепонем.
Источники инфекции. Больной человек.
Пути передачи. Контакт бытовой (прямой контакт), преимущественно половой путь. Иногда сифилис может передаваться через предметы (посуду, белье). От больной сифилисом матери заболевание передается через плаценту ребенку (врожденный сифилис).
Патогенез. Входными воротами являются слизистые оболочки половых путей и ротовой полости.
Первичный период - спирохеты попадают на слизистую оболочку, и после инкубационного периода (в среднем 3 нед) на месте внедрения образуется язва, которая характеризуется плотными краями и дном - твердый шанкр. Образованию твердого шанкра сопутствует увеличение лимфатических узлов. Первичный период продолжается 6-7 нед.
Вторичный период - возбудители сифилиса по лимфатическим и кровеносным путям распространяются по всему организму. При этом на коже и слизистых оболочках образуются розеолы, папулы, везикулы. Продолжительность этого периода - 3-4 года.
Третий период - развивается при нелеченом сифилисе. В этот период в органах, тканях, костях, сосудах образуются грануляционные разрастания - гуммы или гуммозные инфильтраты, склонные к распаду. Этот период может продолжаться несколько лет (в скрытой форме). Больной в этот период незаразен. При нелеченом сифилисе (в некоторых случаях), спустя много лет, может наступить поражение центральной нервной системы: при поражении головного мозга - прогрессивный паралич, при поражении спинного мозга - спинная сухотка. Эти заболевания возникают при локализации трепонем в мозговой ткани, что приводит к тяжелым органическим и функциональным изменениям в организме.
Иммунитет. Естественного иммунитета нет. При заболевании сифилисом развивается "нестерильный" инфекционный иммунитет. Его называют шанкерный, так как при повторном заражении твердый шанкр не образуется, но все последующие периоды развиваются. При сифилисе обнаруживают IgC и IgM, а также реагины IgE, которые в присутствии кардиолипидного антигена связывают комплемент.
Профилактика. Санитарно-просветительная работа, раннее выявление больных сифилисом. Специфическая профилактика. Не разработана.
Лечение. Пенициллин, бициллин, биохинол и др.
1. Опишите морфологию спирохет и методы окраски.
2. Что такое твердый шанкр?
3. Какой материал для исследования Вы будете брать в разные периоды заболевания сифилисом?
4. Каков иммунитет при сифилисе?
Цель исследования: выявление бледной трепонемы и серодиагностика.
1. Содержимое твердого шанкра (первичный период).
2. Содержимое розеол, папул, везикул (вторичный период).
3. Кровь (вторичный, третий и четвертый периоды).
Способы сбора материала
2. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
3. Серологический: 1) реакция Вассермана (РСК);
2) осадочные реакции.
4. Реакция иммобилизации трепонем (РИТ).
Ход исследования
Реакция Вассермана. Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента (табл. 52). Отличается она тем, что при реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген. Например, липоидный экстракт из бычьего сердца - кардиоантиген. Ввиду неспецифичности антител, реагирующих с этим антигеном, их называют реагинами. Реакция с неспецифическим антигеном объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидными экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При постановке серологических реакций нужно использовать также специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.
Таблица 52. Постановка реакции Вассермана
Примечание. 1) ++++ полная задержка гемолиза; - гемолиз; 2) антиген № 1 неспецифический (липоидная фракция бычьего сердца); 3) антигены № 2 и 3 специфические, приготовленные из культур трепонем.
Осадочные реакции. 1. Реакция Кана. Сыворотку больного инактивируют при 56° С 30 мин. К антигену (экстракт липидов бычьего сердца) прибавляют 0,6% холестерина для повышения чувствительности реакции (табл. 53).
Таблица 53. Схема постановки реакции Кана
Учет результата: появление преципитации отмечается как положительная реакция.
2. Реакция Закса - Витебского (цитохолевая осадочная реакция) является модификацией реакции Кана. Авторы применили более концентрированный антиген, к которому прибавлен холестерин, что способствует более быстрому образованию преципитата.
Реакция иммобилизации трепонем (РИТ). Это наиболее специфичная реакция в диагностике сифилиса.
В настоящее время разработана методика этой реакции: взвесь трепонем получают из измельченного яичка кролика, зараженного Т. pallidum, и сохраняют в специальной среде, не угнетающей подвижность трепонем. В пробирку вносят 1,7 мл взвеси тканевых трепонем, добавляют 0,2 мл испытуемой сыворотки, 0,1 мл свежего комплемента.
Контроли: в 1-ю пробирку вместо испытуемой сыворотки вносят сыворотку здорового лица; во 2-ю - наливают инактивированную сыворотку морской свинки. Все пробирки помещают в эксикатор или анаэростат, заполняют их смесью газов (1 объем углекислоты и 19 объемов азота) и ставят в термостат при 35° С. Затем исследуемый материал наносят на стекло и изучают подвижность трепонем в темном поле. Принцип реакции заключается в том, что сыворотка больного сифилисом в присутствии комплемента угнетает движение бледной трепонемы. Определяют процент иммобилизованных трепонем.
Результат считают положительным, если иммобилизованных трепонем выше 50%; слабоположительным - от 30-50%; отрицательным - ниже 20%.
1. Какой материал используют для лабораторной диагностики сифилиса в разные периоды заболевания?
2. Каковы методы лабораторного исследования при диагностике сифилиса?
3. Какими антигенами нужно пользоваться при постановке реакции Вассермана?
4. Какие ингредиенты необходимы для постановки реакции иммобилизации трепонем (РИТ)? Какой материал берут у обследуемого, что в нем определяют?
Разных микроорганизмов настолько много, что в течение столетий ученым так и не удалось их полностью изучить. К примеру, между исследователями нет единого мнения по поводу возникновения или происхождения сифилиса. Считается, что это одно из самых древних заболеваний, которое появилось с возникновением человека.
Впрочем, официально возбудитель сифилиса был открыт в 1905 году немецкими микробиологами Э. Гофманом и Ф. Шаудином. Именно они впервые открыли ряд биохимических, морфологических и культурных свойств бледной трепонемы и ее особенности.
В этой статье мы попытаемся подробно разобраться, что это такое - treponema pallidum. Каково ее строение, структура, физиологические свойства, а также инфекционный агент, вызывающий сифилис.
Но для начала определим, что это значит - treponema pallidum. Это возбудитель сифилиса - бледная трепонема, и относится она к порядку Spirochaetales.
Простое описание
Сифилис - это венерическое хроническое заболевание, которое передается половым путем. Инкубационный период организма составляет около трех недель. После этого в месте, где возбудитель был внедрен, появляется первичный аффект в виде твердого шанкра или безболезненной язвы. При отсутствии лечения инфекции развивается вторичный и третичный сифилис.
Антитела к treponema pallidum - что это?
В ответ на развитие инфекции иммунная система человека вырабатывает противосифилитические антитела, поэтому для диагностики заболевания чаще всего применяют серологические методы. Сначала иммунная система вырабатывает антитела класса lgM, затем, по мере развития заболевания, преобладает синтез антител IgG. Treponema Pallidum на стадии появления этих антител характеризуется острой формой. Они могут сохраняться у пациента пожизненно. Получается, что антитела к treponema pallidum - это еще и средства диагностики.
Морфологические свойства
Трепонема состоит из клеток длиной 6-15 мкм и шириной 0.1-02 мкм. Она представляет собой цитоплазму, окруженную цитоплазматической мембраной. По внешнему виду клетка этого организма напоминает тонкую завитую нить.
Обычно число завитков варьируется от 8 до 14. Причем эти завитки сохраняются даже при движении между других клеток.
На фото, предоставленном ниже, видно, какой вид имеет этот микроорганизм.
Между цитоплазмой и оболочкой находятся фибриллы. Одна часть фибриллы всегда остается свободной, хотя другая неподвижна и зафиксирована. Именно фибриллы представляют собой двигательный аппарат трепонемы, который позволяет ей передвигаться в жидкой среде. Благодаря этому микроорганизм может двигаться, сгибаться и вращаться вокруг своей оси.
Treponema pallidum - это грамотрицательный микроорганизм, но он не окрашивается из-за присутствия в составе гидрофобной частицы, которая является невосприимчивой к анилиновым красителям.
По Романовскому-Гимзе трепонема приобретает слабо розовый цвет, и эта особенность в некоторой степени сыграла роль для названия возбудителя. Сам по себе микроорганизм является довольно требовательным к окружающей среде. Его комфортная среда обитания - 30-37 градусов, и он достаточно быстро инактивируется слабым холодом, теплом, дезинфицирующими средствами.
Биохимические свойства
Невозможно до конца понять, что это такое - treponema pallidum, не определив ее биохимических и культурных свойств. По сути, трепонема считается облигатным паразитом, поэтому в искусственных питательных средах она не выживет. В течение последних 75 лет так и не удалось культивировать ее in vitro (в пробирке). При культивации данный микроорганизм теряет патогенность, однако некоторые антигенные свойства у него сохраняются. Впрочем, культивируют трепонему в тестикулах кроликов, где она размножается и вызывает орхит.
Размножение трепонемы происходит поперечным бинарным делением, комфортная температура для этого - 37 градусов. Отметим, что во внешней среде устойчивость организма очень слабая:
- Вне организма человека трепонема живет пару минут, после чего полностью высыхает. При температуре около 40 градусов она погибает в течение двух часов, а при температуре 50 градусов трепонемы выдерживают всего 15 минут.
- При неблагоприятных условиях для организма образовываются цисты и L-формы, которые впоследствии также могут приобрести спиралевидную форму.
Отметим, что трепонема - это хемоорганогетеротрофом по типу метаболизма. Это значит, что для жизни ей необходимы органические вещества, которые служат источниками энергии. Именно из-за неспособности существования вне среды человека ее биохимические свойства изучены очень плохо.
Антигенная структура
Антигенная структура данного организма изучена плохо. Она представлена термолабильным протеиновым антигеном, а также полисахаридным антигеном. Говоря простыми словами, антигены treponema pallidum являются обычными белками и полисахаридами наружной мембраны клетки.
Токсическую и антигенную функцию выполняет лопополисахарид клеточной стенки. Для бледной трепонемы он является эндотоксином.
Факторы патогенности
Факторы патогенности также изучены достаточно плохо. После того, как treponema pallidum попадает в макроорганизм, она высвобождает липопротеины и специфические белки - липополисахариды. Они проявляют токсические свойства после гибели организма. Липопротеины принимают участие в активации иммунной системы, а протеины достаточно похожи по некоторым свойствам на бактериальные гемолизины.
Способность этого микроорганизма высвобождать липидные антигены и эндотоксины относится к факторам патогенности. Эти элементы обладают свойствами аутоантигенов.
Лабораторная диагностика
Теперь нам более-менее понятно, что это такое - Treponema Pallidum. В лаборатории диагностировать сифилис можно двумя методами:
- Выявление возбудителя заболевания с помощью биологических препаратов.
- Серологические реакции.
Последний способ диагностики может быть использован для постановки диагноза и для оценки эффективности лечения. Особенность серологии заключается в том, что положительные результаты на ранних этапах заболевания могут вообще отсутствовать, хотя симптомы у больного будут. Это объясняется легко: инкубационный период сифилиса составляет 3-5 недель. Однако у людей, которые злоупотребляют спиртными напитками, болеют туберкулезом или ВИЧ-инфекцией, инкубационный период может длиться около двух недель.
При приеме антибактериальных препаратов инкубационный период может возрасти до 6 месяцев. В течение всего этого времени концентрация антител достаточного мала и не достигает диагностического титра. Но у человека все равно могут наблюдаться клинические симптомы сифилиса. Такое заболевание называется серонегативным сифилисом.
Серопозитивный сифилис отличается ярко выраженными симптомами и клинической картиной. В крови сразу обнаруживаются антитела treponema pallidum. Положительный результат предполагает немедленное лечение заболевания. В противном случае серопозитивный сифилис перетекает во вторичный, и он может длиться годами.
Первые клинические признаки заболевания (кроме появления твердого шанкра) - это суммарные treponema pallidum антитела, то есть IgM и IgG. В дополнение проводится антикардиолипиновый тест - RPR. Данные тесты являются взаимодополняющими и при совместном применении помогут точно диагностировать или исключить заболевание сифилиса.
Лечение заболевания
Как уже было сказано, если тест на антитела положительный, то прибегают к лечению заболевания. Оно должно быть направлено на уничтожение возбудителя. Причем показано даже превентивное лечение людям, у которых клиническая картина отсутствует, но которые имели половой контакт с человеком, болеющим ранней формой сифилиса.
Профилактическое лечение также получают беременные женщины с положительным и серологическими тестами. В РФ есть схемы лечения этого заболевания, которые систематически обновляются. Последний раз они были пересмотрены в 1999 году.
Первичный сифилис лечится путем назначения "Бензатина бензилпенициллина" по 2.4 млн ЕД внутримышечно (2 инъекции 1 раз в неделю). Также возможно назначение бициллина-5 по 1.5 млн ЕД внутримышечно (2 раза в неделю, 5 инъекций).
В качестве альтернативного лечения назначается "Ампициллин", "Цефтриаксон", "Доксициклин" и другие препараты. В любом случае лечение назначает врач на основании полученных результатов тестов.
После полного цикла лечения пациенты также должны проходить серологические исследования в течение следующих двух лет. Если титры АТ (нетрепонемные тесты) будут снижены в 4 раза в течение года после лечения, то это считается хорошим результатом, позволяющим сделать вывод, что лечение было произведено эффективно.
Также лечению должны подвергаться все половые партнеры пациента вне зависимости от результатов серологического теста. Как уже описано выше, серологический тест может быть отрицательным в инкубационный период, даже несмотря на присутствии в организме человека treponema pallidum. Что это такое, вы уже знаете.
Профилактика и прогноз
Самое лучшее предупреждение заболевания - избегание случайных половых связей и использование защитных средств (презервативов или химических средств) при половых контактах. Также уместно обращаться в круглосуточные пункты профилактики ИППП.
При обнаружении сифилиса на первичной или вторичной стадии прогноз благоприятный. Однако поздние стадии заболевания приведут к тяжелым последствиям: заболеваниям сердечно-сосудистой системы, слепоте, психическому расстройству и заболеванию нервной системы. Были также зафиксированы случаи смерти.
Теперь вы знаете, что это такое - treponema pallidum, и насколько опасен сифилис.
Заключение
Несмотря на возможные печальные последствия, не заметить появление в организме возбудителя почти невозможно. Любой здравомыслящий человек обратится к врачу уже на ранней стадии развития заболевания, поэтому не стоит переживать о тяжелых последствиях. Они могут возникнуть только на поздней стадии, если человек вообще не будет обращать внимание на развитие недуга.
Бледная трепонема (Treponema pallidum) является возбудителем сифилиса. Это венерическое заболевание известно с древних времен, однако его возбудитель был открыт только в 1905 году австрийскими учеными Э. Гоффманом и Ф. Шаудином. Его назвали бледной (pallidum) спирохетой.
Специфические признаки сифилиса после манифестного течения самопроизвольно исчезают, а далее вновь появляются, меняя свою окраску. Длительность рецидивирующего течения заболевания протекает около 2-х лет и является важнейшим признаком раннего сифилиса. Сифилиды, лишенные эпителия, содержат большое количество бледных трепонем. С годами заразность больных сифилисом уменьшается.
Бледная трепонема относится к отряду Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Спирохеты обладают уникальным строением и морфологией. Они широко распространены в природе. Это тонкие, довольно длинные, гибкие и подвижные бактерии. Патогенными для человека являются четыре подвида Treponema pallidum:
- Treponema pallidum pallidum вызывает сифилис.
- Treponema pallidum pertenue является причиной фрамбезии (невенерический сифилис, тропическая гранулема).
- Treponema carateum вызывает заболевание пинта.
- Treponema pallidum endemicum является причиной эндемического сифилиса (невенерический сифилис детского возраста, беджел).
Заболевания, вызванные патогенными трепонемами, имеют хроническое волнообразное течение. Сифилис распространен повсеместно, а пинта, фрамбезия и беджел встречаются только в тропических странах и имеют доброкачественное течение.
Рис. 1. Вид бледной трепонемы в электронном микроскопе.
Устойчивость возбудителей во внешней среде
- Бледная трепонема устойчива к низким температурам. До одного года выдерживает замораживание. Хранятся патогенные штаммы возбудителей в бескислородной среде при низких температурах (20 — 70°С) или высушенными из замороженного состояния.
- Трепонемы сохраняют свою вирулентность на предметах окружающей среды до момента высыхания. При температуре до 42°С активность бактерий вначале повышается, а затем они погибают. При нагревании до 60°С трепонемы сохраняют свою активность в течение 15 минут. Более 3-х суток возбудители сифилиса сохраняют свои патогенные свойства в трупном материале.
- Вне организма человека бактерии быстро погибают. При температуре 100°С они погибают мгновенно. Бледные трепонемы чувствительны к дезинфицирующим средствам и некоторым антибиотикам.
Рис. 2. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции.
Возбудители сифилиса в организме больного
В организме человека бледная трепонема паразитирует в тканях, а перемещается по кровяному руслу и лимфатическим сосудам. По окончании инкубационного периода в организме больного отмечаются первичные изменения в виде твердого шанкра.
В этот период бактерии находятся в очагах поражения и тканевой жидкости в спиралевидной форме, а сам больной становится распространителем инфекции. Особенно заразны больные во вторичном периоде — периоде рецидивного сифилиса. Периоды затихания заболевания связаны с тем, что большая часть трепонем находится внутриклеточно (в фагоцитах). В таком состоянии бактерии не способны размножаться и распространяться по организму.
Бледные трепонемы способны укрываться от негативного воздействия факторов окружающей среды, превращаясь в L-формы и цисты, что объясняет хроническое течение заболевания. На поздних стадиях сифилиса заразность больных минимальная. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма на инфекцию ослаблена.
Рис. 3. Микроскопия мазка, приготовленного методом серебрения. Возбудители сифилиса имеют темную окраску. В желтый цвет окрашены клетки инфицированных тканей.
Характеристика возбудителя: внешнее строение
Бледная трепонема по внешнему виду напоминает штопор. Она имеет 8 — 14 равной величины завитков, высота которых уменьшается на концах. Спиралевидная форма возбудителя сохраняется во всех случаях и при любых условиях. Длина микроорганизма составляет от 5 до 15 мкм, ширина — 0,2 мкм.
Рис. 4. На фото возбудитель сифилиса Treponema pallidum (вид в электронном микроскопе).
Концы у большинства трепонем заострены. На них расположены выросты дискообразной формы (блефаропласты) с прикрепленными к ним в количестве 10 — 11 фибриллами.
Фибриллы тянуться вдоль тела трепонемы и обвивают его, обеспечивая бактерии спиралевидную форму. С каждого конца отходит по 2 самостоятельных пучка фибрилл. Они располагаются под наружной стенкой, проходя над цитоплазматической мембраной. Под цитоплазматической мембраной также обнаружены фибриллы. Они более тонкие и многочисленные. Фибриллы наружного пучка обеспечивают трепонеме движение, они в два раза толще. Они представляют собой длинные трубочки, состоящие из белка флагелина, достаточно устойчивого к воздействию ряда ферментов. Фибриллы внутреннего слоя играют роль каркаса.
На одном из концов бактерии имеется два округлых образования (губчатое тело). Оно обеспечивает активное проникновение бактерий в клетки хозяев.
Бледные трепонемы могут осуществлять поступательные (назад и вперед), вращательные, сгибательные, волнообразные (судорожные) и винтообразные движения.
Рис. 5. На фото бледная трепонема (культуральная форма).
Рис. 6. На фото бледные трепонемы с увеличением в 3000 раз (темнопольная микроскопия). Данный вид исследования позволяет регистрировать форму и движение живых бактерий.
Внутреннее строение бледных трепонем (ультраструктура)
Тело бактерии окружено слизевидным бесструктурным веществом (микрокапсулой). Эта мукополисахаридная субстанция защищает трепонемы от фагоцитов и антител. Капсульное вещество продуцируется самой трепонемой.
Цитоплазматическая мембрана бактерий выполняет ряд жизненно важных функций: транспортную, защитную, является местом локализации антигенов и ферментов, она принимает активное участие в делении клетки, L-трансформации и спорообразовании. Цитоплазматическая мембрана имеет трехслойное строение. Ее внутренний слой образует в протоплазматическом цилиндре многочисленные выросты, за счет чего осуществляется активный перенос извне питательных веществ. От состояния цитоплазматической мембраны зависит жизнедеятельность бактерий.
Протоплазматический цилиндр находится под наружной стенкой. Структура цитоплазмы бледных трепонем мелкогранулярная. В прозрачную гиалоплазму погружены гранулы-рибосомы и множество пластинчатых структур. Рибосомы обеспечивают синтез белка в бактериальной клетке. В цитоплазме также присутствует нуклеотид, не имеющий ограничительной мембраны. Он тянется по всей длине протоплазматического цилиндра.
Мезосомы являются производными цитоплазматической мембраны. Они занимают половину или целую ось поперечника трепонемы. Мезосомы снабжают энергией бактериальную клетку в точках усиленного роста при спорообразовании и делении. Их функция аналогична митохондриям. Мезосомы различаются по характеру строения, но количество их всегда очень большое.
Рис. 7. Ультраструктура бледной трепонемы. Мукопротеидный чехол сверху, далее трехслойная клеточная стенка, внутри — цитоплазматическая мембрана и цилиндр с нуклеотидом, мезосомами, рибосомами и другими включениями. На фото хорошо просматриваются фибриллы, идущие вдоль тела бактерии.
Размножение бледных трепонем
Размножение возбудителей сифилиса происходит путем поперечного деления. Деление бактериальной клетки длится около 33 часов и происходит только при температуре около 37 °C. Иногда бледные трепонемы делятся сразу на несколько частей.
Рис. 8. На фото бледные трепонемы.
Формы существования возбудителей сифилиса
В неблагоприятных условиях (воздействие антибиотиков, антител, физических и химических факторов окружающей среды, истощение питательной среды) бактерии трансформируются в L-формы, распадаются на зерна, образуют цисты и кокковые формы. В таких формах трепонемы могут длительно существовать в организме больного, а потом реверсировать, обуславливая рецидив сифилиса.
Бледные трепонемы в L-форме способны проникать в организм человека даже при отсутствии повреждений на коже и слизистых оболочках, проходят через фильтры, которые применяются при обработке кожи.
При заражении цист-формами бактерий отмечается удлинение инкубационного периода, возникновение скрытых форм заболевания и развитие устойчивости к антибактериальным препаратам.
Неблагоприятные условия существования приводят к тому, что бледная трепонема превращается в цисту. Она сворачивается в клубок, а вокруг образуется бесструктурная прозрачная оболочка (чехол), состоящий иногда из нескольких слоев. Все морфологические элементы возбудителя при этом сохраняются. Существование цист покоя объясняет существование скрытых форм заболевания, длительное и вялое течение, устойчивость к антибактериальным препаратам. По мере давности заболевания количество цист увеличивается. Исследователями доказано, что цистообразование — это защитная реакция, обеспечивающая выживание и размножение возбудителей сифилиса.
В L-формы трепонемы превращаются под воздействием целого ряда факторов. Трепонемы приобретают шаровидную форму, из-за блокировки синтеза истончается клеточная стенка, приостанавливается размножение, но сохраняется рост и интенсивность синтеза ДНК. В цитоплазме L-форм бактерий определяется гигантский нуклеотид, внутри которого находится большое количество нитей, содержащих ДНК.
- Спиралевидные формы бледных трепонем преобладают на ранних стадиях сифилиса. В этот период бактерии располагаются внеклеточно, интенсивно делятся, что делает их уязвимым к действию антибиотиков.
- Во вторичном периоде рецидивного сифилиса трепонемы располагаются не только внеклеточно, но и внутри фагоцитов, обнаруживается большое количество цист, более устойчивых к лечению.
- На поздних стадиях заболевания отмечается значительное снижение спиралевидных форм трепонем, увеличение числа цист и L-форм. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма ослаблена.
Рис. 9. Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити).
Бледные трепонемы под микроскопом
- Хорошо просматриваются трепонемы с помощью фазово-контрастной (темнопольной) микроскопии. В свежеприготовленном мазке с живыми возбудителями в темном поле видны плавно изгибающиеся спиралевидные бактерии. От сапрофитных спирохет, которые встречаются в полости рта и на слизистых оболочках половых органов, бледные трепонемы отличаются равномерностью завитков, они более тонкие, осуществляют плавные волнообразные движения и способны сгибаться под углом.
- Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити). Трепонемы окрашиваются в черный цвет и хорошо видны на фоне окрашенных в желтый цвет клеток исследуемых тканей. Серебро осаждается на бактериальных клетках, увеличивая их диаметр.
- Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции. Бактерии в мазке, обработанные люминесцирующей сывороткой, светятся в ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа.
Рис. 10. На фото бледные трепонемы под микроскопом: импрегнация серебром (фото слева), микроскопия в темном поле (фото посередине), реакция иммунофлюоресценции (фото справа).
Культуральные свойства возбудителей сифилиса
Бледные трепонемы являются облигатными анаэробами — живут и растут в условиях отсутствия молекулярного кислорода. Бактерии практически не растут на искусственных питательных средах. Для их выращивания используются среды, содержащие лошадиную и кроличью сыворотки, на которых бледные трепонемы растут медленно и теряют вирулентные свойства. Рост происходит при температуре 35 0 С. Колонии возбудителей сифилиса появляются на 3 — 5 (на некоторых средах на 7 — 9) сутки.
Рис. 11. На фото рост колоний бледных трепонем.
Биохимические свойства бледных трепонем
Биохимические свойства возбудителей сифилиса изучены мало. Ряд штаммов продуцируют сероводород и индол. Некоторые штаммы разжижают желатин, другие — глюкозу, сахарозу, галактозу и мальтозу с образованием кислоты. Некоторые штаммы разлагают только глюкозу. Несколько штаммов возбудителей подвергают гемолизу эритроциты человека.
Рис. 12. На фото бледные трепонемы. Вид в электронном микроскопе.
Читайте также: