Вич методом пцр хламидии

Технология:

Дороговизна, длительность и трудоемкость микробиологического выделения хламидий в культуре существенно затрудняет использование этой процедуры в рутинной лабораторной диагностике. В литературе накоплен обширный клинико-лабораторный опыт по использованию метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) для выявления Chlamydia trachomatis . Особое внимание при его использовании следует уделять, без сомнения, вопросам правильной интерпретации получаемых результатов. Экстремально высокие показатели чувствительности и специфичности ПЦР делают эту методику во многом революционной в лабораторной диагностике. Основными мишенями при выявлении Chlamydia trachomatis являются нуклеотидная последовательность видоспецифической криптической плазмиды, последовательность главного белка внутренней мембраны, рибосомальные гены.

Данная реакция представляет собой многократно повторяющиеся циклы синтеза (амплификацию) специфической области ДНК-мишени в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы, дезоксинуклеотидтрифосфатов, соответствующего солевого буфера и олигонуклеотидных затравок-праймеров, определяющих границы амплифицируемого участка. Каждый цикл состоит из трех стадий с различными температурными режимами. На первой стадии при 94 0 С происходит разделение цепей ДНК, затем при 56-58 0 C- присоединение (отжиг) праймеров к комплементарным последовательностям на ДНК-мишени, и при температуре 72 0 C протекает синтез новых цепей ДНК путем достраивания цепей праймеров в направлении 5 ` -3 ` . В каждом цикле происходит удвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40 циклов наработать фрагмент ДНК, ограниченный парой выбранных праймеров, в количестве, достаточном для ее детекции с помощью электрофореза или альтернативными ему технологиями.

По сравнению с широко применяющимися иммунологическими тестами ПЦР-диагностика обладает рядом преимуществ:

• высокой и регулируемой специфичностью, обусловленной лишь нуклеотидной последовательностью, применяемой в данной диагностической системе;
• высокой чувствительностью, позволяющей диагносцировать не только острые, но и латентные инфекции (возможно выявление даже единичных бактерий или вирусов);
• химическое сходство всех нуклеиновых кислот позволяет разрабатывать универсальные процедуры для выявления различных инфекционных агентов;
• возможностью идентификации возбудителя в течении 4,5-5 часов.

Доставка биоматериала в ПЦР-лабораторию производится в холодовом термоконтейнере или термосе со льдом. Важной отличительной особенностью ПЦР-диагностики является относительно низкая стоимость оборудования для проведения анализа, сочетающаяся с универсальностью метода, что позволяет выявлять весь спектр клинически актуальных инфекционных агентов.

ПЦР-лаборатория должна быть разделена на зоны (комнаты). Cледует иметь не менее двух комнат:

• пре-ПЦР-помещение, где проводится обработка клинических образцов, выделение ДНК, приготовление реакционной смеси для ПЦР и постановка ПЦР (при наличии условий два последних этапа рекомендуется также проводить в дополнительном отдельном помещении);
  в этих помещениях запрещается проводить все другие виды работ с инфекционными агентами (микробиологический анализ, ИФА, другие диагностические тесты), ПЦР-диагностика которых проводится в данной лаборатории.
• пост-ПЦР-помещение, где проводится детекция продуктов амплификации, в ПЦР-помещении допускается использовать другие методы детекции инфекций, диагностика которых проводится в данной лаборатории. Комнату детекции продуктов амплификации (пост-ПЦР-помещение) следует располагать как можно дальше от пре-ПЦР-помещений. Следует исключить движение воздушного потока из пост-ПЦР-помещения в пре-ПЦР-помещение.

В комнате приготовления реакционной смеси и в комнате обработки клинических образцов должны быть установлены ультрафиолетовые лампы, рабочие поверхности в лаборатории должны обрабатываться дезинфицирующими растворами.

Показания:

1. Острая фаза заболевания.
2. Хроническая фаза заболевания.
3. Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом.
5. Бесплодие неясного генеза.
6. Контроль эффективности проведенного антибактериального лечения. В случае выявления фрагмента ДНК хламидии трахоматис после курса химиотерапии следует провести культуральную диагностику для исключения “ложноположительного с клинической точки зрения результата”. Если проведение культуральной диагностики невозможно, то необходимо через 5-6 недель (полное обновление эпителиального покрова мочеполовых путей) провести повторное исследование методом ПЦР.
7. Выявление хламидий у ВИЧ-инфицированных лиц, больных туберкулезом, вирусным гепатитом и со вторичными иммунодефицитными состояними (онкологические больные после курсов химио- и лучевой терапии, трансплантации костного мозга, получающие иммуносупрессивную терапию).

Современные тест-системы:

В 1991 году компания Хоффман-ла Рош ЛТД получила от компании Cetus права и патенты на использование ПЦР. В этом же году была создан Roche Molecular Systems, занимающийся исключительно вопросами развития и совершенствования ПЦР. В 1992 году были внедрены первые стандартизованные тест-системы для клинической ПЦР-диагностики AMPLICOR Chlamydia trachomatis, а в 1993 году начато производство этих тест систем. Многочисленные проведенные исследования показали высокую чувствительность и специфичность данного набора. Это позволило получить данной тест-системе сертификат Food and Drug Administration (FDA) в 1993 году. В 1995 году появился новый набор AMPLICOR Chlamydia trachomatis/Neisseria gonorrhoeae для одновременной их детекции в одной пробирке. В тесте использованы биотинилированные праймеры (СР24/CР27) из криптической плазмиды C. trachomatis. Чувствительность теста составляет 10 копий/мл, специфичность 99,6%. Тест-система включает: набор для сбора и транспортировки образцов, набор для выделения ДНК из цервикальных, уретральных образцов и мочи, набор для амплификации и детекции. Все наборы стандартизованы, полностью готовы к использованию, имеют внутренний контроль, систему защиты от контаминаций.

Научно-производственной фирмой “Литех” при НИИ физико-химической медицины МЗ РФ выпускается набор реагентов “Полимик” в виде трех отдельных наборов для определения соответственно Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealiticum . Каждый набор “Полимик” комплектуется отдельным набором для выделения ДНК из биопроб. Инструкция по применению набора реагентов рекомендована к утверждению экспертной комиссией Комитета по новой медицинской технике МЗ РФ (протокол No 3 от 18.03.96 г.) и утверждена Министерством здравоохранения РФ 17.05.96 г. (ТУ 9398-405-17253567-96).

В состав реакционной смеси набора “Полимик” входит внутренний контроль (рекомбинантная плазмида, содержащая фрагмент-вставку размером 308 н.п.). Этот компонент позволяет контролировать процесс прохождения реакции амплификации, а также тестировать наличие в пробах веществ, ингибирующих ПЦР. Полоса, соответствующая внутреннему контролю, должна проявляться как в положительном и в отрицательном контролях, так и во всех тестируемых пробах.

При выделении ДНК из биопробы (“Набор для выделения ДНК”) используется метод экстракции ДНК из клеток хламидий с помощью гуанидина тиоцианата и связывания высвобождающихся нуклеиновых кислот с частицами крупнопористого стекла. Это позволяет оптимизировать условия выделения и подготовки проб для амплификации, а также уменьшить количество манипуляций с образцом. При этом все манипуляции проводятся в одной пробирке. Выход хромосомной ДНК составляет 70-80% по результатам определения числа колониеобразующих единиц клеток Acholeplasma laidlawii (штамм микоплазм, взятый в качестве стандарта) как в случае чистой культуры, так и при добавлении этих клеток к клиническому материалу, не содержащему определяемых инфекционных агентов.

После завершения ПЦР продукты амплификации фракционируют методом электрофореза в 1,5% агарозном геле.

Анализ результатов диагностики:

1. положительном контрольном образце для хламидии выявляется полоса размером 501 н.п.
2. В отрицательном контрольном образце полоса, соответствующая фрагментам генома, хламидии должна отсутствовать. Появление полосы в отрицательном контроле свидетельствует о контаминации компонентов набора.
3. В анализируемой пробе отсутствие полосы строго на уровне соответствующего контроля свидетельствует об отсутствии возбудителя в пробе, наличие полосы, соответствующей по электрофоретической подвижности положительному контролю, свидетельствует о наличии хламидии в клинической пробе.
4. Во всех образцах выявляется полоса оранжево-красного цвета, соответствующая внутреннему контролю размером 308 н.п. Полученные результаты можно документировать фотографированием гелей с использованием оранжевого или интерференционного (594 нм) светофильтра. При использовании видеосистемы “Gel-doс” возможно документирование результатов электрофореза в виде компьютерного файла, доступного любым приложениям “Windows”.

Набор “Полимик” следует хранить при температуре -- 18-20 0 С в течение всего срока годности (6 месяцев). Допускается хранение и транcпортировка набора при температуре не выше 0 о градусов не более одних суток.

В настоящее время (по состоянию на третий квартал 1999 г.) Минздравом России помимо набора “Полимик” разрешены следующие диагностические наборы для обнаружения хламидии трахоматис методом ПЦР в качестве изделий медицинского назначения:

• набор реагентов амплификационный для определения ДНК хламидий (Хламидия-Ампли-тест) ТУ 9398-402-18137053-96 производства АО “ВНЦМДЛ”, Москва;
• набор реактивов для выявления нуклеотидных последовательностей хламидия трахоматис методом ПЦР (Хлам Ам) ТУ 9398-403-29032954-96 производства ЗАО “Внедрение систем в медицину”, Москва;
• набор реагентов для выявления ДНК хламидии трахоматис методом ПЦР (Хлам-Ген) ТУ 9398-412-46482062-97 производства НПФ “ДНК-технология”, Москва.

В таблицах 18 и 19 приведены данные А.В. Савичевой и М.А. Башмаковой по выявлению хламидии трахоматис в клинических пробах различными методами исследования. Использованы выборки из исследований, в которых хотя бы одним из методов они были бы обнаружены. Видно преимущество ПЦР как при исследовании первичных материалов, так и при детекции ДНК хламидий в клеточной культуре, зараженной клиническим материалом. В таблице 20 приведены данные о недостатках и достоинствах этих методов.

Таблица 18. Сравнительная чувствительность прямых методов исследования (ПИФ, ПЦР, ИФА) при выявлении С. trachomatis в клинических образцах

Метод выявления	Выявляемость хламидий в одних и тех же пробах, %
ПИФ	68,9
ПЦР	94,8
ИФА	25,62

Таблица 19. Сравнительная чувствительность прямых методов исследования (ПИФ, ПЦР) при выявлении C. trachomatis в клеточной культуре, зараженной клиническим материалом

Метод выявления	Выявляемость хламидий в одних и тех же пробах, %
ПИФ	94
ПЦР	96,2

Таблица 20. Достоинства и недостатки различных методов обнаружения Chlamydia trachomatis (Taylor-Robinson D., Thomas B.J.,1991, c дополнениями Говорун В.M, Бочкарев Е.Г., Парфенова Т.М.,1999)

УВЕДОМЛЕНИЕ

Данная работа написана врачами-профессионалами для врачей-профессионалов.
Она не предназначена для широкой аудитории и не является руководством
для диагностики и тем более лечения каких-либо заболеваний без участия врача.

Анализ на хламидии у женщин изучается методикой ПЦР, выявляя с высокой точностью наличие и концентрацию вредоносных бактерий в организме на основе ДНК исследований клеток биоматериала.

Анализ на хламидии у женщин является важным исследованием. Ведь хламидийная инфекция – это не просто болезнь, передающаяся посредством половой близости, но и такое коварное заболевание, способное без особых проявлений симптоматики стать причиной развития первичного бесплодия либо привычного невынашивания плода.

Симптоматика и признаки хламидиоза у женщин и мужчин

Исследования, проводимые методикой ПЦР, делают с целью диагностирования инфекций, провоцирующих следующие вирусы, как микоплазма, уреаплазма, хламидии и прочие. Для обследования наличия хламидиоза и прочих инфекционных заболеваний, нужно сдавать кровь на анализы, мазки на бактериологический посев либо соскоб.

Если сдать мазок на посев либо соскоб, то хламидиоз, как наиболее коварное заболевание, передающееся при половых контактах, может не обнаружиться. Ведь атипичные бактерии, как хламидии, размножаются и концентрируются внутри иных клеток организма. Именно потому, такое заболевание, как хламидиоз (и уреаплазма), практически не идентифицируется при исследованиях в рамках привычных анализов.

Период инкубационного развития хламидий до определения выраженной симптоматики длится до 3-х недель. Именно за это время инфекция успевает встроиться в клетку организма, как у мужчин, так и у женщин. Диагностика ПЦР позволяет раньше выявить вирус и не дать распространится такому возбудителю, как уреаплазма.

Когда организм уже захвачен болезнью, проявляется следующая симптоматика у мужчин:

• это моча мутного цвета;
• утренние выделения из мочеиспускательного канала;
• зуд и признаки жжения при мочеиспускании;
• общее состояние слабости с повышением температуры тела;
• выделения с кровянистыми примесями при мочеиспускании и даже наблюдается такое, как кровянистое семяизвержение.

Признаки заболевания хламидиозом у женщин это:

• присутствие неприятного запаха гениталий;
• желтоватые выделения слизистого состава из влагалища;
• зуд и неприятное жжение в процессе мочеиспускания;
• слабость самочувствия с незначительным повышением температуры.

Такие возбудители инфекций, как хламидии и уреаплазма, являются опасными, поскольку могут выказывать слабую симптоматику для обнаружения, а со временем исчезать. Запущенная форма деятельности в организме возбудителей, как хламидии и уреаплазма, приводит к поражению внутренних органов, как у мужчин, так и у женщин.

Анализ на хламидии – методики выявления хламидиоза для мужчин и женщиин

Диагностировать хламидиоз допустимо с использованием лабораторного метода исследований, где берут биоматериал для работ. Существует ряд методик выявления возбудителей типа хламидий и уреаплазма:

• ПЦР анализ (это генетически-биологическое исследование методов полимеразной цепной реакции) выявляет со 100% точностью вредоносные тела в биоматериале типа ареаплазма, хламидии и прочие.
  
• Бактериологическое культуральное обследование, это где берут материал на посев для выращивания, обнаружения и идентификации бактерий (хламидии, уреаплазма и прочих) в специальной питательной среде.
  
• ИФА (это иммуноферментный анализ) нужно сдавать, чтобы выявить антитела к идентифицированному возбудителю.
  
• РИФ (иммунофлуоресцентная микроскопия) – анализ, который нужно сдать, дабы основательно выявить хламидии.

Анализ на хламидии

Внешний первичный осмотр у врача не позволяет поставить точные диагнозы. Пациент опрашивается, а на основе его жалоб выдвигаются предположения о возможном заболевании. Уточнение спорного диагноза возможно только на основе результатов лабораторных исследований и различных анализов. ПЦР – это полимеразная цепная реакция. Популярный и эффективный метод заключается в исследовании самых малых частиц ДНК во взятом у пациента образце. Искусственное увеличение этих частиц с помощью ферментов позволяет увидеть возбудителя инфекции – хламидии. Точность методики ПЦР значительно выше, чем у схожих анализов. Определить хламидиоз на ранних стадиях можно только благодаря проведенному ПЦР. Другие же методы диагностики нуждаются в подтверждении.

Результаты анализов зависят от того, как подготовится пациент, сколько прошло времени с момента заражения и от индивидуальных особенностей организма инфицированного человека. Мазок на хламидии методом ПЦР назначается только врачом, и только опытный специалист занимается расшифровкой полученных результатов. Определение хламидии с помощью ПЦР не займет много времени, и позволит в кратчайшие сроки начать эффективное лечение венерической болезни.

Будьте осторожны

По статистике более 1 миллиарда человек заражено паразитами. Вы даже можете не подозревать, что стали жертвой паразитов.

Определить наличие паразитов в организме легко по одному симптому — неприятному запаху изо рта. Спросите близких, пахнет ли у вас изо рта утром (до того, как почистите зубы). Если да, то с вероятностью 99% вы заражены паразитами.

Заражение паразитами приводит к неврозам, быстрой утомляемости, резкими перепадами настроениями, в дальнейшим начинаются и более серьезные заболевания.

У мужчин паразиты вызывают: простатит, импотенцию, аденому, цистит, песок, камни в почках и мочевом пузыре.

У женщин: боли и воспаление яичников. Развиваются фиброма, миома, фиброзно-кистозная мастопатия, воспаление надпочечников, мочевого пузыря и почек. А так же сердечные и раковые заболевания.

Сразу хотим предупредить, что не нужно бежать в аптеку и скупать дорогущие лекарства, которые, по словам фармацевтов, вытравят всех паразитов. Большинство лекарств крайне неэффективны, кроме того они наносят огромный вред организму.

Что же делать? Для начала советуем почитать статью с главного института паразитологии Российской Федерации. В данной статье раскрывается метод, с помощью которого можно почистить свой организм от паразитов без вреда для организма. Читать статью >>>

Подготовка к анализу

ПЦР на хламидиоз происходит только после тщательной подготовки пациента. Соблюдение рекомендаций специалиста – гарантия точных результатов. Правила подготовки к сдаче биоматериала:

1. За тридцать дней до сдачи анализов, пациенту следует отказаться от приема любых медикаментов, в том числе антибиотиков и противогрибковых препаратов. В исключительных случаях, врачом назначаются средства, не влияющие на будущие результаты ПЦР (пациент страдает на хронические заболевания или возникала срочная необходимость для диагностики хламидиоза).
2. Собрать подходящий материал для дальнейших лабораторных исследований можно только спустя три, четыре часа после последнего мочеиспускания пациента.
3. Любые половые контакты прекращаются за неделю до сдачи анализов (ПЦР на хламидии). В противном случае, результаты будут неточными.
4. Для женщин назначается забор биоматериала только на четвертый день после окончания менструации.
5. За неделю до анализа, женщине следует отказаться от спринцевания или схожих очистительных процедур, которые может назначить гинеколог.

Подготовка к лабораторным исследованиям образца, взятого у пациента, является обязательным условием правильной диагностики инфекции. Пренебрежение рекомендация и назначений специалиста могут привести к осложнениям вследствие некорректного лечения хламидиоза.

Способ забора крови

Анализ на хламидии методом ПЦР не требует забора большого количества биоматериала пациента. Выведение частиц ДНК с помощью ферментации образца проходит при минимальном объеме биоматериала (не влияет ни результаты исследования). Для анализа могут сдаваться кровь и образцы из слизистой половых органов. Для мужчин назначается соскоб с уретры (концентрация паразитарных микроорганизмов в эякуляте мужчин больше, чем на слизистой женских половых органов). Женщины сдают образцы крови, во избежание гормональных перепадов, которые влияют на биоматериал из влагалища. Мазок также не сдают беременные с подозрением на развитие хламидиоза.

Назначение обследования

Диагностика хламидиоза касается каждого взрослого пациента, у которого появились неприятные симптомы. Женщинам, планирующим беременность, так же назначаются различные анализы для определения патогенных микроорганизмов и паразитов (перед зачатием). Если в паре болеет один партнер, второму следует пройти стандартную диагностику на наличие хламидий. Заражение от сексуального партнера и рецидивы заболевания (заражение через партнера, который не прошел лечение) проявляются в осложненных формах. Врач, ознакомленный с анамнезом пациента, определяет порядок сдачи тех или иных анализов.

Эффективный метод диагностики для выявления инфекции

Определение возбудителей инфекционных или паразитарных заболеваний по крови считается наиболее точным и безопасным для пациентов разного возраста, пола и положения. Метод ПЦР помогает подтвердить заболевание в кратчайшие сроки, в случаях развития:

• ВИЧ (вирус иммунодефицита человека);
• гепатиты класса В и С;
• паразитарных заболеваний (уреаплазмоза и трихомониаза);
• таких грибковых заболеваний, как кандидоз;
• мононуклеоза;
• обнаружить вирус папилломы;
• туберкулеза.

Метод полимеразной реакции используется в современной медицине, как один из самых эффективных способов диагностики хламидиоза.

Проведение анализа

Анализ, основанный на цепной реакции мелких частиц ДНК под воздействием ферментов, происходит в несколько этапов. Пациент соблюдает все рекомендации врача и тщательно подготавливается к сдаче образца. Исследование ПЦР начинается с забора крови или биоматериала с половых органов пациента с подозрением на хламидиоз. Если для дальнейших лабораторных исследований берутся соскобы, то мужчины проходят процедуру в кабинете уролога, а женщины обращаются к гинекологу.

У представителя сильного пола процесс занимает больше времени, так как для взятия образца необходимо воспользоваться специальными инструментами: ложечкой и зондом. Приспособления для забора биоматериала вводятся непосредственно в уретру мужчины, а затем аккуратно извлекаются образцы для проведения анализа. Зонд помещается в подготовленную очищенную пробирку (заполнена транспортной средой). Схожим образом собирается биоматериал из влагалища женщины. В особых случаях, когда забор образца из уретры невозможен (по разным причинам), у мужчин берутся слюна, моча после массажа простаты или эякулят. После взятия соскоба, полученные образцы отправляются в лабораторию для дальнейших исследований.

Среди инфекций, заражение которыми происходит преимущественно половым путем, одна из ведущих ролей принадлежит хламидиям. Эти внутриклеточные паразиты. Они легко проникают в организм человека при незащищенном сексуальном контакте, поражая мочеполовой тракт.

Опасны не только местными симптомами, но и системной реакцией иммунной системы. Поэтому даже при отсутствии клинической симптоматики, важно своевременно выявлять опасный микроорганизм. Наиболее подходящим способом является анализ ПЦР на хламидии.

• К чему приводит заражение
• Кому показано обследование
• Анализ ПЦР на хламидии: что можно исследовать
• Правила подготовки к процедуре
  • Как сдавать мужчинам анализ?
• ПЦР мазок на хламидии
• Этапы выполнения анализа
• Интерпретация результата

К чему приводит заражение

Хламидия трахоматис – это паразиты, располагающиеся внутриклеточно в эпителии мочеполового тракта. Такое паразитирование приводит к затяжному инфицированию, так как клиническими симптомами заболевание не проявляется.

В организме появляются антитела к хламидиям. Это приводит к поражению не только урогенитального тракта, но и суставов, сердца и внутренних органов. Заражение происходит мгновенно при незащищенном половом контакте, если один из партнеров инфицирован. Далее паразиты проникают в эпителий и интенсивно размножаются.

Возникает острая инфекция, которая зачастую сопровождается мучительными симптомами:

• жжением при мочеиспускании
• болями внизу живота
• снижением либидо
• неприятными выделениями из половых путей
• дискомфортом при сексуальном контакте
• общей интоксикацией (редко)

Но поражается не только мочеполовой тракт. Часто возникают проблемы с органом зрения и суставами.

При долгом персистировании хламидий возможно развитие контрактур крупных сочленений, что приводит к резкому снижению качества жизни. Кроме того, хламидии часто являются спутниками бесплодия и импотенции. Поэтому выявление микроорганизмов – важная цель для сохранения здоровья на долгие годы.

Кому показано обследование

Абсолютно всем людям, которые хотя бы однократно совершали сексуальные контакты без средств индивидуальной защиты. Следует провести исследование методом полимеразно-цепной реакции. Кроме того, обследование желательно проводить у большого контингента граждан.

Наиболее целесообразна ПЦР на хламидии в следующих ситуациях:

• любые симптомы неблагополучия в мочеполовой сфере
• субфебрилитет без четкой причины
• снижение трудоспособности
• частая смена половых партнеров
• бесплодие
• простатит
• снижение ощущений от сексуальной близости
• низкое либидо или эректильная дисфункция
• беременность

В последнем случае ПЦР нужно проводить обязательно. Так как микроорганизмы могут вызвать нарушения во время вынашивания ребенка.

Лучше выполнить исследование до зачатия, и в случае положительного результата, провести лечение. Однако даже при беременности адекватная терапия поможет избежать выкидыша.

Анализ ПЦР на хламидии: что можно исследовать

Так как хламидиоз поражает множество различных органов и систем, то материал для диагностики берут из разных мест.

Ниже рассмотрены основные варианты взятия биоматериала:

• Мазок со слизистой урогенитального тракта. Наиболее распространенный метод диагностики. Для исследования подходит отделяемое влагалища, слизистая уретры или соскоб с наружных половых органов
• Мазок из горла. Инфекция может попадать и распространяться через дыхательные пути. Поэтому при наличии гиперемии полости рта и часто возникающих простудных заболеваний используется мазок с задней поверхности глотки и миндалин
• Мазок с конъюнктивы. Метод исследования возможен только в том случае, если есть клинические проявления поражения органа зрения. В остальных ситуациях в практической работе не используется
• Исследование спермы. Хламидии часто поражают мужскую репродуктивную систему. Поэтому анализа эякулята применяется часто

• Анализ мочи. Так как хламидии паразитируют в слизистой уретры, то зачастую дополнительно требуется поиск ДНК хламидий в моче. Исследование высокоинформативно и служит основой для назначения специфического лечения. Важно лишь помнить, как собирается мочаправильно. Только первая порция подходит для ПЦР, так как затем хламидии смываются
• Анализ синовиальной жидкости. В нем возникает необходимость при наличии экссудативного воспаления в полости сустава, вызванного хламидиями. Пункция сочленения выполняется только в асептических условиях, чаще врачом-хирургом или травматологом

Выбор способа исследования материала зависит от клинической симптоматики. При отсутствии симптомов при подозрении на скрытую половую хламидийную инфекцию предпочтение отдается анализу мазка из урогенитального тракта.

Правила подготовки к процедуре

Чтобы получить наиболее достоверный результат, пациент должен ответственно подойти к подготовке к исследованию.

Для взятия мазка у женщин существуют следующие правила:

• последнее мочеиспускание за 3 часа до взятия материала
• идеальный период – с 5 дня месячных
• при наличии обильного кровянистого отделяемого исследование лучше отложить
• гигиенические мероприятия не менее чем за 2 часа до взятия мазка
• спринцевания запрещены
• за 48 часов желательно воздержаться от употребления алкоголя, если не сказано врачом иное

Для мужчин правила отличаются в связи с физиологическими особенностями строения половых органов.

Последнее мочеиспускание не менее, чем за 2 часа до исследования.
Алкоголь нежелательно употреблять за 72 часа до процедуры. После любых инструментальных обследований, например цистоскопии, должно пройти не менее 5 дней.

Мазок из горла берется обычно утром натощак, принимать пищу и пить воду нежелательно, так как хламидии могут быть смыты. Анализ синовиальной жидкости не требует специальной подготовки. Так как материал получают непосредственно в кабинете врача.

Кровь обычно для ПЦР не используется. составляют случаи, когда подозревается генерализация и распространение микроорганизмов с током крови или лимфы.

Гемотест подтверждает лишь наличие антител, а ПЦР подразумевает определение самой ДНК хламидии. Для выявления антител применяется метод ИФА, но он менее информативен.

ПЦР мазок на хламидии

Универсальным способ получения материала является мазок. Его делают нативно, то есть непосредственно в кабинете врача и сразу отправляют в лабораторию. Это обеспечивает высокую точность диагностики и минимум ошибочных результатов.

Исследование методом ПЦР позволяет обнаружить ДНК хламидии. Это означает 100%-ную специфичность анализа, так как ДНК является уникальной и принадлежит конкретному возбудителю.

Проблемы в урогенитальном тракте могут вызывать не только хламидии. Часто появляется герпес, уреаплазма или микоплазма. Они могут сопутствовать хламидиям и утяжелять течение болезни, но иногда персистируют изолированно. Поэтому параллельно можно исследовать мазок методом ПЦР не только на хламидийную инфекцию, но и на многие другие микроорганизмы.

Однако обследование выполняется обычно с материалом из половых органов, кровь для мазка, как правило, не пригодна. О том, как сдавать мазок, лучше посоветоваться с лечащим специалистом.

Многих людей волнует вопрос, могут ли не определяться в мазке хламидии? Метод ПЦР выявляет конкретную ДНК. Поэтому при наличии этих возбудителей в организме человека, результат будет положительным.

Хламидии не обнаружат в том случае, если неверно проведена подготовка. Либо с момента заражения прошло недостаточно времени для их размножения.

Этапы выполнения анализа

От того, сколько дней делается анализ, немало зависит от последовательности и быстроты проведения забора материала и доставки его в лабораторию. Даже временной фактор будет иметь значение, так как субстрат, полученный утром, будет проанализирован в этот же день.

Полная последовательность этапов анализа ПЦР на хламидии следующая:

• осмотр специалиста
• взятие биоматериала
• упаковка в физиологическую для хламидий среду
• доставка в лабораторию
• проведение теста
• врачебная верификация
• выдача результата

Непосредственная продолжительность тестирования не превышает 4 часов. Однако из-за задержек при транспортировке или позднем взятии материала, анализ бывает готов только на следующий день.

Обязательным условием достоверности исследования является врачебная верификация. Это означает, что врач-лаборант лично осматривает тест и проверяет наличие хламидийной ДНК.

Существует два варианта проведения полимеразно-цепной реакции – количественный и качественный.

Во втором случае результат будет получен быстрее, так как не требуется подсчет геномных эквивалентов микроорганизма. От этого же зависит, сколько стоит исследование. При получении количественного результата цена будет выше.

Однако в практической медицине ценовой диапазон на ПЦР не слишком высок. Так как проводить обследование требуется многим людям.

Интерпретация результата

Расшифровка анализа не представляет трудностей.

Качественный вариант исследования подразумевает только подтверждение наличия микроорганизма. Поэтому в заключении будет написано, отрицательный или положительный результат обнаружения ДНК.

Количественный вариант требует подсчет геномных эквивалентов (ГЭ). Чем их больше, тем серьезнее поражение человека.

Общепринятой градацией является следующая:

• менее 10 в 4 степениГЭ/мкл – низкая распространенность хламидий
• от 10*4 до 10*5 ГЭ/мкл – средняя степень
• более 10*5 ГЭ/мкл – очень высокий уровень заражения

Зависимость прямая. Чем больше хламидий, тем тяжелее протекает заболевание и вероятнее развитие системных негативных реакций.

Положительный результат свидетельствует о наличии инфекции.

Это значит, что необходимо проводить антимикробную терапию.

Отрицательный ответ свидетельствует лишь о том, что в настоящий момент возбудители не обнаружены. Однако при наличии факторов риска, обследование желательно повторить через 1 месяц.

Ложноположительных реакций не бывает, так как ДНК уникальна и типична только для одного конкретного возбудителя. Для получения достоверной картины инфицирования анализ лучше сдавать обоим партнером. В этом случае, даже при выявлении у одного из них, лечебные мероприятия потребуются каждому. Таким образом, анализ ПЦР на хламидии является незаменимым для точной диагностики половых инфекций.

Выявление и излечение хламидий – важнейший этап оздоровления организма.