Заболевания вызываемые гонококками микробиология

Глава 17. Гонококки

Neisseria gonorrhoeae входят в семейство Neisseriaceae, род Neisseria. Гонококки обнаружены Нейссером в 1879 г. и в честь его названо все семейство.

Морфология. Гонококки - это диплококки, состоящие из двух бобовидных кокков, лежащих вогнутыми сторонами друг к другу (напоминают кофейные зерна). Размер гонококков 1,2-1,3 × 0,7-0,8 мкм. Они полиморфны, наряду с крупными встречаются очень мелкие, неправильной формы L-формы бактерий. Гонококки неподвижны, спор не имеют. В патологическом материале (гное) обнаруживают капсулообразное вещество. Грамотрицательны. Под влиянием лекарственных и других веществ быстро изменяются: появляются грамположительные формы. В патологическом материале располагаются внутриклеточно (в лейкоците), но могут быть вне клетки. Могут находиться в виде отдельных кокков (см. рис. 4).

Культивирование. Гонококки - аэробы. Очень требовательны к питательным средам. Растут на средах, содержащих нативный белок (человеческий) - кровь, сыворотку, при температуре 37° С и рН среды 7,2-7,4. Среды должны быть свежеприготовленными и влажными. Посев следует производить сразу после взятия материала. На сывороточной среде гонококки образуют мелкие колонии 1-2 мм, прозрачные, блестящие с ровными краями, напоминающие капельки росы. На кровяной среде гемолиза не дают. В сывороточном бульоне они дают слабое помутнение и пленку, которая оседает на дно пробирки. При скудном росте через 24 ч посевы оставляют в термостате на вторые сутки.

Ферментативные свойства. Сахаролитические свойства слабо выражены. Гонококки расщепляют только один сахар - глюкозу с образованием кислоты. Протеолитическими свойствами не обладают.

Токсинообразование. В клеточной стенке гонококков имеется токсическая субстанция - липополисахарид (мало изучен).

Антигенная структура. Антигенная структура неоднородна и легко изменяется под влиянием факторов внешней среды. Общепринятого деления гонококков на серовары и серотипы пока нет.

Устойчивость к факторам окружающей среды. Во внешней среде гонококки мало устойчивы. При температуре 56-60° С они погибают. При температуре 40° С их жизнеспособность резко снижается. Низкие температуры и высушивание их быстро губят. Но в гное они сохраняются до 24 ч. Дезинфицирующие растворы - 1% раствор фенола, сулема 1:1000 убивают гонококки в течение нескольких минут. Особенно гонококки чувствительны к солям серебра - 1% раствор серебра нитрата губит их сразу. УФ-лучи убивают их в течение нескольких минут.

Восприимчивость животных. Животные не чувствительны к гонококку. Однако внутрибрюшинное введение белым мышам гонококкового токсина вызывает их гибель.

Источники инфекции. Больной гонореей человек.

Пути передачи. Контактно-бытовой (половой), реже через зараженные предметы (полотенце, губки и др.).

Заболевания у человека. Гонорея и бленнорея.

Патогенез. Естественным хозяином гонококков является больной человек. Гонококки проникают через слизистые оболочки уретры (у женщин - уретры и шейки матки). Фактором патогенности гонококков является наличие у них пилей, которые, соединяясь с микроворсинками цилиндрического эпителия, способствуют проникновению гонококка внутрь клетки эпителия, обусловливая в слизистой оболочке острый воспалительный процесс.

Клинически гонорея проявляется болями при мочеиспускании, выделениями гноя из уретры и влагалища. Заболевание протекает остро, но иногда переходит в хроническую форму. Гонококки могут вызвать гонорейный конъюнктивит - бленнорею (гнойное воспаление слизистой оболочки глаз у новорожденных). Гонококки редко проникают из уретры в другие органы, но иногда они могут быть причиной артритов, эндокардитов и т. д.

Иммунитет. Естественной резистентности к гонококкам нет. Перенесенное заболевание также не создает иммунитета. Наблюдающийся фагоцитоз носит незавершенный характер.

Профилактика. Санитарное просвещение. Повышение культурно-гигиенического уровня. Специфической профилактики нет. Для профилактики бленнореи детям сразу после рождения обязательно вводят в конъюнктивальный мешок 1-2 капли 30% раствора альбуцида.

Лечение. Антибиотики (пенициллин, бициллин, стрептомицин и др.). Применяют также сульфаниламидные препараты. При хронической форме используют гонококковую вакцину.

1. Опишите морфологические свойства гонококков.

2. Каковы ферментативная активность и токсинообразование гонококков?

3. Какова устойчивость гонококков. К какому препарату гонококки особенно чувствительны?

4. Какие заболевания вызывают гонококки и их патогенез.

Цель исследования: выявление гонококков и противогонококковых антител.

1. Отделяемое слизистой оболочки уретры у мужчин.

2. Отделяемое слизистой оболочки уретры и шейки матки у женщин.

3. Гнойные выделения из глаз.

4. Кровь для получения сыворотки.

Способы сбора материала

Примечание. Для бактериоскопического и бактериологического исследования материал берут: 1) до начала лечения антибиотиками: 2) не ранее чем через 10 дней после окончания лечения антибиотиками; 3) не ранее чем через 2 ч после последнего мочеиспускания; 4) не ранее чем через 2 ч после спринцевания.

1. Микроскопический (главным образом используется при острых формах).

Первый день исследования

Вынимают посевы из термостата и просматривают их. Изучают колонии. Делают мазки. При наличии подозрительных грамотрицательных диплококков колонии пересевают на скошенную среду в пробирках (среда должна быть свежеприготовленной и содержать достаточное количество конденсата) и ставят пробу на оксидазу. Для этого пипеткой на колонию наносят каплю 1% раствора диметилпарафенилендиамина, колонии изменяют цвет от темно-коричневого до черного.

Вынимают посевы из термостата, делают мазки со скошенного агара, окрашивают по Граму и микроскопируют. Засевают на среды Гисса (лактозу, глюкозу, маннит и мальтозу). Эти углеводы должны содержать 30% сыворотки крови. Засеянные пробирки ставят в термостат.

Вынимают пробирки из термостата, при отсутствии роста оставляют их в термостате еще на 1-2 дня. При наличии роста учитывают результаты (табл. 28).

Таблица 28. Дифференциация гонококков от других нейссерий

Третья неделя заболевания. При хроническом течении заболевания и в сомнительных случаях ставят РСК с сывороткой больного (см. главу 12). В качестве антигена используют убитую культуру гонококков, которую готовят в производственных условиях. Можно применить реакцию непрямой гемагглютинации (см. главу 12).

1. Какой материал служит для выявления гонококков и каким способом его получают?

2. Через сколько времени после мочеиспускания (или спринцевания у женщин) можно брать материал для исследования?

3. Какой метод исследования является основным при острой форме и какой - при хронической форме гонореи?

4. Когда и какую серологическую реакцию ставят при подозрении на гонорею?

5. От каких микроорганизмов необходимо дифференцировать гонококки?

Получите у преподавателя препарат. Изучите его и зарисуйте гонококки, расположенные внутри лейкоцита и вне его при окраске по Граму.

Желточная среда. К 100 мл МПА из кроличьего мяса добавляют 15 мл желтка (свежего куриного яйца), 6 мл индикатора фенолового красного, 1,5 мл сахара, растворенного в 1 мл стерильной дистиллированной воды.

Питательная среда асцит-агар. К фильтрату бульона, приготовленного из кроличьего мяса, добавляют 2% агар, 1% пептон и 0,5% хлорид натрия. Нагревают до растворения агара, устанавливают рН 7,4-7,5, подщелачивают 20% гидроксидом натрия. Среду доводят до кипения, фильтруют, разливают в стерильные флаконы и стерилизуют в автоклаве 15 мин при 115° С.

Рецепты безасцитных питательных сред (МПА рН 7,4-7,5).

1) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

гидролизата казеина - 2 мл

дрожжевого аутолизата - 2 мл

сыворотки крови крупного рогатого скота - 20 мл

2) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

5% раствор гемогидролизата - 2 мл

дрожжевого аутолизата - 2 мл

сыворотки рогатого скота - 20 мл

3) мясной воды из кроличьего мяса или бычьих сердец - 100 мл

желтка куриного яйца - 10 мл

сыворотки крови рогатого скота - 20 мл

Рост гонококков на этих средах обильный. Колонии гонококка могут быть выявлены с помощью пробы на оксидазу, при которой они окрашиваются в красный цвет, переходящий в черный.

Гонококки – это грамотрицательные, неподвижные, не имеющий капсулы, неспо­рообразующие диплококки. В мазках кокки прилегают плоскими по­верхностями друг к другу и по очертанию похожи на кофейные зерна. Он имеет характерную для грамотрицательный микроорганизмов клеточ­ную структуру, и может размножаться вне, и внутри клеток хозяина. Не имеет внутривидовых вариантов.

Род Neisseriae включен в семейство Neisseriaceae, объединяющее грамотрицательные коккобактерии. Человек является един­ственным естественным хозяином двух патогенных гноеродных нейссерий – Neisseriae gonorrhoeae и Neisseriae meningitidis. Это фа­культативные анаэробы, паразитирующие на слизистых человека, продуцирующие оксидазу и каталазу.

Neisseriae gonorrhoeae (гонококк) является возбудителем гонореи – широко распространенной заразной инфекции, передающейся поло­вым путем. Болезнь была известна еще древним китайцам, египтя­нам, иудеям. Название свое получила от двух греческих слов gone – семя и rhein – истечение, то есть болезнь, передающаяся с семенной жидкостью. Так назвал ее Гален в начале новой эры. Гонококки так­же называют диплококками – это название дано ему немецким вра­чом Альбертом Нейссером, который в 1879 году обнаружил его в гнойном отделяемом уретры, шейки матки и конъюнктивы глаз. Возбудитель был назван в честь Нейссера – Neisseriae gonorrhoeae.

Гонококки. Общая характеристика

Гонорея – это болезнь, сопровождающаяся выделениями из уроге­нитального тракта, вначале жидкими, водянистыми, а затем гной­ными. Инкубационный период короткий – 3-5 дней. В первые дни болезни гонококки обнаруживаются свободно лежащими в серозном экссудате или прикрепившимися к эпителиальным клеткам. Когда отделяемое становится гнойным, кокки фагоцитируются и их можно увидеть в цитоплазме клеток гноя (долиморфонуклеарные нейтрофильные лейкоциты). В одной клетке могут быть от 20 до 100 гоно­кокков, которые будучи поглощенными, не погибают и остаются ви­рулентными. В поздней стадии болезни они могут быть обнаружены вне клеток, в стадии формирования хронического процесса чаще во­обще не обнаруживаются.

Гонококки – весьма прихотливые микробы, не растут на обычных пи­тательных средах, его с трудом удается культивировать на специ­ально приготовленных для них обогащенных средах. Лучше растут при слегка пониженной (до 35,5°С) температуре в присутствии ки­слорода и 10% СО₂.

Описано 4 типа колоний:
– гонококки 1 и 2 типа образуются вирулентными го­нококками;
– гонококки 3 и 4 типа – невирулентными.
Кокки, образующие колоши 1 и 2 типов имеют пили – фактор адгезии. Именно пилями бактерия прикрепляется к клеткам цилиндрического эпите­лия уретры, лейки матки, прямой кишки и не фагоцитируется, а за­селяет клетки этих отделов (колонизация). Прикрепление – необходимое условие инфекции, только бактерии, имеющие пили, счита­ются патогенными.

Гонококки продуцируют фермент индофенол оксидазу, катализи­рующую восстановление молекулярного кислорода независимо от перекиси водорода. Проба на оксидазу используется для идентифи­кации колоний в лабораторных культурах. Гонококки, относящиеся ко всей типам, продуцируют фермент, расщепляющий секреторный IgA, находящийся в секретах слизистой.

Несмотря на то, что гонококки в организме больного разрушаются с трудом, они крайне нестойки во внешней среде. Они погибают весьма быстро на солнечном свету и при высушивании. В гное или на белье, находящемся в темном влажном месте, могут сохраняться от 18 до 24 часов. Очень чувствительны к дезинфицирующим сред­ствам, особенно солям серебра. Температура +60°С убивает их через 10минут.

Гонококки. Патогенность

Гонококки являются специфическими паразитами человека. Экспе­риментальный гонококковый уретрит удается вызвать только у шимпанзе.В типичных случаях гонореи местами первичной инфицированности у женщин является уретра и шейка матки; у мужчин, соответствен­но, уретра.

Гонококки повреждают цилиндрический эпителий, выстилающий шейку матки и прямую кишку, а также промежуточный (урогени­тальный) эпителий, выстилающий мочевой тракт. Вагинальная инфекция не обнаруживается, поскольку эпителий, выстилающий вла­галище взрослой женщины – это ороговевающий многослойный плоский эпителий, устойчивый к гонококкам. До наступления половой зрелости вагина выстлана более мягким, особенно восприимчи­вым эпителием. Гонорейный вульвовагинит у препубертатных де­вушек может быть эпидемическим и трудно вылечиваемым. Изменение эпителия с окончанием пубертатного периода полностью ис­ключает эту форму гонореи.

В настоящее время важным первичным местом инфицирования яв­ляется конъюнктива глаза, и этот процесс (гонорейный конъюнкти­вит и кератит) активно повреждает глаза. Ophthalmia neonatorum – гонорейный конъюнктивит новорожденных, возникает при инфици­ровании глаз плода во время прохождения через родовые пути. Обильные гнойные выделения из глаза новорожденного могут соз­дать значительное давление под веками. Если веки насильно ра­зомкнуть, гной может брызнуть наружу. Врачи и медицинский пер­сонал, лечащие таких детей, должны тщательно оберегать свои гла­за. У детей или взрослых такая инфекция легко приводит к слепоте или серьезному ухудшению зрения вследствие воспалительных из­менений структур глаза.

Гонококковая инфекция из мужской уретры может непосредственно проникать в другие части мужской репродуктивной системы. У женщин она также может проникать в другие части тракта, особен­но в Бартолиниевы железы и фаллопиевы трубы.

Слизистая матки устойчива к воздействию гонококков, но примене­ние контрацептивов может облегчить внедрение гонококков в эндо­метрий, увеличивая риск осложнений в фаллопиевых трубах. Ин­фицирование фаллопиевых труб обычно происходит в первый или второй менструальный цикл после заражения, но в некоторых случаях оно происходит позже.

Вовлечение в воспалительный процесс фаллопиевых труб (сальпин­гит) приводит к значительному их перекручиванию и рубцеванию в случае, когда заболевание принимает хроническую форму.

Рубцевание уретры у мужчин может привести к стриктуре или об­литерации мочеиспускательного канала в одной или нескольких фо­кальных точках.

Иногда гонококки мигрируют из мочеполового тракта в лимфатиче­скую систему или кровоток, образуя дистантные фокусы инфициро­вания (например, эндокардит, перигепатит и менингит).

Гонококцемия связана с различными кожными повреждениями, из которых могут быть выделены микроорганизмы. Существенным проявлением экстрагенитальной гонококковой инфекции является гнойный деструктивный артрит, особенно часто встречающийся у лиц в возрасте от 15 до 35 лет. С увеличением числа случаев забо­левания гонореей, экстрагенитальные повреждения становятся более заметными.

Гонококки. Источники и пути заражения инфекцией

Гонококки никогда не обнаруживаются вне человеческого организма, если только они не находятся на объектах, совсем недавно загряз­ненных гонорейными выделениями. Поэтому гонорейные инфекции практически всегда распространяются путем прямых контактов, в основном при половом акте. Крайне редко гонорея предается не­прямым путем через загрязненные объекты,

Гонорейная офтальмия у взрослых обычно случайна. Инфекция из урогенитального тракта неумышленно заносится в глаза руками са­мого больного или: другого лица.

Вульвовагинит среди детей распространяется путем использования общего постельного белья, ванны, туалетных принадлежностей и т.д. Он обычно возникает там, где дети живут в перенаселенных квар­тирах.

Нелеченные гонорейные инфекции имеют тенденцию переходить в хроническое состояние. При отсутствии лечения или неправильном лечении женщины становятся бактерионосителями в течение мно­гих лет после исчезновения признаков заболевания. У 60-80% ин­фицированных женщин болезнь протекает бессимптомно. Примерно у 40% мужчин болезнь также протекает бессимптомно.

Гонококки. Лабораторный диагноз инфекции

Для установления диагноза гонореи используется несколько микро­биологических методов. Мазки, культуры и оксидазная реакция яв­ляются предварительными тестами. Для установления точного ди­агноза гонореи и подтверждения результатов предварительных тес­тов используется метод флуоресцирующих антител и реакция фер­ментации карбогидрата.

Бактериоскопическая диагностика. Прямые мазки генитальных вы­делений могут быть окрашены по Граму. Обнаружение грамотрицательных дипло­кокков в гнойных клетках генитального экссудата является сильным доводом в пользу того, что это гонококки. Это особенно верно, если отделяемое взято из мужской уретры, где, в случае типичного ост­рого гнойного уретрита, окрашенный по Граму мазок, содержащий ясно видимые внутриклеточные диплококки предполагает одно­значный диагноз.

У женщин типичные диплококки могут обнаруживаться в мазках материала, взятого из бартолиниевых желез и желез Скена на ран­ней стадии заболевания. Но на основании только этого нельзя по­ставить даже рабочий диагноз.

Причин насколько:
1. грамотрицательные диплококки (но не гонококки) встречаются вне клеток;
2. гонококки в одиночку или парами встречаются вне клеток;
3. в клетках встречаются грамположительные микроорганизмы с морфологией гонококков.

Все, что можно сказать о грамотрицательных диплококках, обнаруживаемых вне клеток, – так это то, что они могут быть гонококками. Весьма редко внутри гнойных клеток генитального экссудата находят грамотрицательные дип­лококки, не являющиеся гонококками.

Мазок, приготовленный из гонорейного экссудата, должен быть очень тонким. Гонококки реагируют на окраску по Граму таким об­разом, что в случае толстого и неравномерного по толщине мазка может быть получен ошибочный результат. В случае хронической гонореи микробы обычно не обнаруживаются в экссудате.

Разработаны специальные транспортные среды, которые позволяют отсылать подозреваемые культуры для дальнейшей идентификации. При этом используют пробирки с завинчивающимися пробками, со­держащие среду и смесь воздуха с СО₂. После инокуляции материа­ла рост гонококков поддерживается в течение 48-96 часов.

Согласно современным рекомендациям, материал, подозрительный на выделение культуры гонококка, должен быть получен не только из урогенитального тракта (эндоцервикального канала, передней уретры), но и из аноректальной области и глотки. Ректальную гоно­рею можно легко просмотреть. Тщательная работа с использованием тампонов необходима при обследовании мужчин-гомосексуалистов. У женщин необходимо орать цервикальные и ректальные мазки, поскольку у 50% инфицированных женщин гонококки оседают в рек­тальной области. Инфекция может оставаться там и после того, как она исчезнет из шейки матки.

Стерильные ватные тампоны часто содержат жирные кислоты и другие вещества, которые подавляют рост гонококков. Поэтому для взятия образцов рекомендуется использовать нейтральные в этом отношении тампоны, например из альгината кальция.

Гонококки могут быть получены из мочи мужчин, если первые 10 мл выделяемой мочи центрифугировать и выделить культуру из осадка. При более простом методе скрининга первые несколько ка­пель мочи, попавшие на сухой тампон, немедленно переносятся на среду. Культуры мочи при скрининговых программах помогают ус­тановить источник инфекции, среди мужчин с бессимптомным те­чением заболевания.

Следующей ступенью в бактериологическом изучении гонококков является качественный анализ биохимических реакций и идентифи­кация микроорганизмов с помощью антисывороток. Наличие у го­нококков специфического К-антигена дает возможность использо­вать метод флуоресцирующих антител, при обнаружении гонокок­ков в прямых мазках или экссудате, либо в мазках, приготовленных на культур.

Гонококки. Социальное значение гонореи

Гонорея имеет далеко идущие медицинские, социальные, психоло­гические и даже судебно-медицинские последствия. Болезнь приоб­рела характер близкий к пандемии – по наиболее вероятным оцен­кам ежегодно в мире регистрируется от 2,5 до 3 миллионов новых случаев в год, примерно 1 случай каждые 15 секунд. Более полови­ны случаев составляют подростки и молодые люди до 25 лет. Гоно­рея регистрируется не только среди подростков, но и среди детей, не достигших половой зрелости. Подозрительными должны быть любые выделения из влагалища или уретры у детей.

Отмечено, что гонорея является самой распространенной причиной бесплодия у обоих полов. У женщин стерильность обусловлена об­литерацией фаллопиевых труб рубцовой тканью, образовавшейся при разрешении гонорейного сальпингита. У мужчин стерильность обусловлена облитерацией семенных протоков, вызванной анало­гичным процессом гонорейного заражения и разрешением воспали­тельного процесса с последующим рубцеванием.

Гонококки. Иммунитет

Заболевание гонореей почти или вообще не создает иммунитета к последующим случаям заражения. Реакция антител слабо выражена. Очевидный дефицит иммунитета может быть главной причиной, почему болезнь остается эндемичной в человеческой популяции. Существует выраженная чувствительность к повторному инфициро­ванию. Относительный типоспецифический иммунитет к гонорее обусловлен опсонинами.

Гонококки. Профилактика

Вульвовагинит у детей может быть предотвращен путем надлежа­щей обработки постельного белья, ночной одежды, воды для мытья и ванны. Все дети должны быть обследованы на гонорею прежде чем получат разрешение на контакт с другими детьми в детских уч­реждениях или больницах. Врачи и медперсонал, использующие ре­зиновые или пластиковые перчатки для пальпации и обследования шейки матки и влагалища должны эти перчатки заменить перед пальцевым исследованием прямой кишки.

В связи с тем, что половым путем передается не только гонорея, каждый гонорейный больной должен пройти серологическое тести­рование на сифилис и ВИЧ-инфекцию.

Гонококковая вакцина была получена путем выделения и очистки белка пилей. Ее действие заключается в том, что антитела, продуци­руемые реципиентом, обволакивают ворсинки любого проникшего в организм человека гонококка, что препятствует фиксации бактерий на клетках хозяина и, тем самым, препятствует развитию заболева­нию.

Существует гонококковая вакцина (гоновакцина), представляющая собой взвесь инактивированной культуры гонококков в 0,9% рас­творе хлорида натрия. Используется при диагностике (установлении излечения гонореи), и как вспомогательный метод лечения при вяло протекающих рецидивах, при свежих торпидных и хронических формах заболевания. Назначается мужчинам с осложненной и женщинам с восходящей гонореей (после стихания острых воспали­тельных явлений).

Заключение

1. Нейссерии – это грамотрицательные, аэробные или факультативно- анаэробные микроорганизмы, паразитирующие на слизистой че­ловека.

2. Гонококки (возбудители гонореи) – это диплококки, которые могут быть расположены внутри- и внеклеточно.

3. Нейссерии растут только в атмосфере, содержащей 10% СО2, и лишь на специально обогащенных средах.

4. Пили гонококка являются структурой, обеспечивающей при­крепление микроба к цилиндрическому эпителию слизистой оболочки.

5. Гонококки из первичного очага инфекции (эпителий уретры, шейки матки, прямой кишки) распространяются в другие отде­лы организма, в том числе в репродуктивные органы. При повторяющихся заражениях происходит деформация фаллопиевых труб, вызванная формированием рубцов. Возможна полная не­проходимость. У мужчин образование рубцов приводит к суже­нию (структуре) уретры.

6. Одной из форм проявления гонококковой инфекции взрослых и, особенно, новорожденных детей, является специфическое гнойное воспаление конъюнктивы. В процесс иногда вовлекают­ся ткани глаза, что может привести к серьезному нарушению зрения.

7. Ophthalmia neonatorum – гонококковая инфекция, возникающая при прохождении плода через зараженный родовой канал. С целью профилактики всем новорожденным в конъюнктиваль­ный мешок обоих глаз вводят нитрат серебра (метод Креде).

Учебник предназначен для студентов, аспирантов и преподавателей высших медицинских учебных заведений, университетов, микробиологов всех специальностей и практических врачей.

5-е издание, исправленное и дополненное

Книга: Медицинская микробиология, иммунология и вирусология

Микробиология гонореи

Гонорея (греч. gonos – семя и rhoe – истечение) – инфекционное заболевание человека, вызываемое гонококком и характеризующееся воспалительным поражением преимущественно слизистых оболочек мочеполовых органов.

Возбудитель – Neisseria gonorrhoeae, открытый в 1879 г. А. Нейссером, представляет собой кокк, имеющий сходство с кофейным зерном или почкой, располагается парами, вогнутые стороны клеток обращены друг к другу. Размеры 0,7 – 0,8, иногда 1,25 – 1,60 мкм. Деление кокков происходит в одной плоскости. При электронно-микроскопическом исследовании вокруг гонококка обнаруживают слизистое капсулоподобное образование толщиной 0,35 – 0,40 мкм, благодаря ему кокки не соприкасаются между собой: между ними сохраняется щель. Гонококки грамотрицательны, они хорошо воспринимают основные анилиновые красители. Для окрашивания препаратов из гонорейного гноя чаще используют метиленовый синий, так как при этом лучше выявляется бобовидная форма гонококков, а для отличия от других сходных диплококков обязательна окраска по Граму. Фагоцитоз гонококков имеет незавершенный характер (см. рис. 60), завершенный фагоцитоз наблюдается в моноцитах и гистиоцитах. Гонококки не имеют жгутиков, капсул, спор и пигмента не образуют. Содержание в ДНК Г + Ц 49,5 – 49,6 мол %. На мясо-пептонном агаре они растут плохо, лучше размножаются на средах, содержащих сыворотку, асцитическую жидкость или кровь. Гемолиза не вызывают. Для роста гонококков необходимо наличие в среде железа. Добавление к плотным питательным средам крахмала, холестерола, альбумина или частичек угля способствует росту, а добавление ионов Ca ++ повышает жизнеспособность. Оптимальная температура для роста 35 – 36 °C, но рост происходит в диапазоне 30 – 38,5 °C, оптимальная рН 7,2 – 7,6. Гонококки – строгие аэробы, но при первичных посевах лучше вырастают при некотором повышении содержания СО₂.

Д. Келлог [и др.] выявили зависимость между вирулентностью гонококков и характером образуемых ими колоний. Вирулентные для человека гонококки, выделенные от больных острой гонореей, обладают пилями и образуют мелкие, в виде капель, блестящие колонии, обозначаемые как Т₁ и Т₂. Колонии больших размеров, плоские и тусклые (Т₃ и Т₄), образуют невирулентные и не содержащие пилей гонококки. Из углеводов гонококки ферментируют только глюкозу с образованием кислоты без газа. Среди гонококков существуют различные антигенные популяции. Это подтверждается отсутствием у людей иммунитета к повторному заражению. В соответствии с этим предпринимались попытки разработать универсальную серологическую классификацию гонококков. В частности, по белковым антигенам наружной мембраны гонококки распределены на 16 серотипов. Кроме того, гонококки различаются и по своим липополисахаридным антигенам. Обнаружено антигенное родство гонококков с другими видами нейссерий, наиболее близко оно с менингококками. Гонококки синтезируют бактериоцины, которые также могут быть использованы для их типирования. Дифференциальные признаки, отличающие гонококков от других видов рода Neisseria, представлены в табл. 24.

Факторы патогенности. Экзотоксины у гонококков не обнаружены. Основными факторами патогенности являются пили, с помощью которых гонококки осуществляют адгезию и колонизацию эпителиальных клеток слизистой оболочки мочеполовых путей, и освобождающийся при разрушении гонококков эндотоксин (липополисахарид).

Резистентность. Гонококки обладают слабой устойчивостью к внешним воздействиям: они быстро погибают под влиянием прямых солнечных лучей, УФ-света, высушивания, высокой температуры (при 40 °C быстро утрачивают жизнеспособность). Различные химические вещества, как например соли серебра, ртути, и обычные дезинфектанты убивают их в течение короткого времени. Так, нитрат серебра в разведении 1: 5000 убивает гонококки в течение 1 мин, а в разведении 1: 10 000 – через 10 мин.

Дифференциальные признаки отдельных видов рода Neisseria

Примечание. (+) – признак положительный более чем у 90 % штаммов; d – у некоторых штаммов признак положительный, у некоторых – отрицательный; v – признак непостоянный, у одного штамма может быть иногда положительным, иногда отрицательным; vi – очень важно; i – важно; ( – ) – признак отсутствует.

Эпидемиология, патогенез и клиника гонореи. Для животных гонококк не патогенен. Единственным источником инфекции является человек, инфицированный гонококками. Заражение происходит главным образом половым путем, иногда через предметы обихода. Основным местом обитания гонококков является поверхность слизистой оболочки мочеполовых путей, реже – прямой кишки и глотки. Местом входных ворот у мужчин является слизистая оболочка уретры, у женщин – чаще всего слизистая оболочка преддверия влагалища, уретры и шейки матки. В случае проникновения через эпителиальный барьер гонококки могут распространяться в окружающие ткани: в железы уретры и шейки матки, предстательную железу, семенные пузырьки, матку и фаллопиевы (маточные) трубы, поступать в кровь, проникать в синовиальные оболочки суставов, сердце и другие органы, вызывая воспалительные процессы, а иногда и септицемию. В определенных условиях гонококки могут проникать в конъюнктиву и вызывать офтальмию (воспаление слизистой глаза – бленнорею). Это наблюдается чаще всего у детей, рожденных инфицированными гонококками матерями. Инкубационный период варьирует от одного дня до 2 – 3 нед. и больше, но чаще всего составляет 3 – 4 дня. Клинически различают две основные формы гонореи – острую и хроническую. Типичным симптомом острой гонореи является острое гнойное воспаление уретры, желез нижнего отдела половых органов и шейки матки у женщин, сопровождающееся болевыми ощущениями, а также обильными гнойными выделениями из уретры. Для хронической гонореи типично более вялое проявление клинических симптомов, связанных с местом локализации возбудителя.

Постинфекционный иммунитет. Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета к повторному заражению, но это обстоятельство, вероятно, связано с тем, что иммунитет имеет типоспецифический характер, так как в крови переболевших обнаруживают антитела в достаточно высоких титрах.

Методы диагностики: бактериоскопический – материалом для исследования является гнойное отделяемое уретры, влагалища, шейки матки, предстательной железы и других органов, пораженных гонококком, а также осадок и нити мочи. Как правило, мазки окрашивают по Граму и метиленовым синим. Гонококки обнаруживают по трем характерным для них признакам: грамотрицательная окраска, бобовидные диплококки, внутриклеточное расположение (см. рис. 60). Для обнаружения гонококков в мазке применяют также метод прямой и непрямой иммунофлуоресценции. Однако под влиянием химио– и антибиотикотерапии, а также при хронической гонорее морфология и окраска по Граму у гонококков могут изменяться, кроме того, их в мазке может быть очень мало. Нередко при хронической гонорее в мазках обнаруживают гонококки типа Аша: клетки диплококка имеют неодинаковую величину и форму. В таких случаях используют бактериологический метод. С этой целью исследуемый материал засевают на специальные питательные среды. Выделенную культуру идентифицируют с учетом характерных для гонококка признаков (см. табл. 21). Следует учитывать, что если в мазках из гнойного материала гонококки окрашивались по Граму положительно, то в мазках из выросшей культуры у них восстанавливается грамотрицательная окраска. Все гонококки в 24-часовой культуре имеют почти одинаковую величину, форму диплококков или кокков, но через 72 – 96 ч культура становится полиморфной и клетки окрашиваются по Граму неравномерно. При хронической гонорее для диагностики могут быть использованы РСК или аллергическая кожная проба со специальным гонококковым аллергеном.

Лечение гонореи проводят антибиотиками и сульфаниламидными препаратами. Хорошие результаты дает применение различных пенициллинов, тетрациклиновых препаратов и других антибиотиков. Поскольку у гонококков к ним появляется устойчивость, следует определять, к каким антибиотикам выделенные от больного гонококки чувствительны.

Профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Общая профилактика такая же, как при других венерических болезнях, поскольку заражение происходит главным образом половым путем. Для предупреждения бленнореи у новорожденных детей им в конъюнктивальный мешок вводят 1 – 2 капли 2 % раствора нитрата серебра или (особенно у недоношенных детей) 2 капли 3 %-ного масляного раствора пенициллина, к которому гонококки очень чувствительны и быстро от него погибают (через 15 – 30 мин).