Лабораторная диагностика лямблиоза у детей

Для диагностики лямблиоза используют несколько методов (анализов на лямблиоз), основным из которых являются обнаружение цист лямблий в кале пациента, в содержимом двенадцатиперстной кишки (лабораторная диагностика) или при заборе кусочка ткани тонкого кишечника (биопсия).

Лабораторная диагностика лямблиоза (лямблий), анализы на лямблиоз

Диагностика лямблиоза основывается, прежде всего, на результатах исследования кала (цистные формы) и содержимого двенадцатиперстной кишки (вегетативные формы). Это основные анализы на лямблиоз.

Цисты лямблий сохраняются в оформленном кале до 10 дней и более, исследование можно проводить в течение суток с момента забора материала (следить, чтобы кал не высох). При формах, сопровождающихся поносом, можем рассчитывать на обнаружение вегетативных форм. Однако в этом случае кал следует доставить в лабораторию не позже, чем через 15-20 мин. после дефекации (вегетативные формы погибают через 30-60 мин.), что технически затруднено, с чем и связана сложность диагностики острого лямблиоза.

Микроскопию дуоденального содержимого следует осуществлять как можно быстрее после забора материала, пока он теплый (более информативен метод формалин-эфирного осаждения) - в этом случае обнаруживаются вегетативные формы.

Энтеротест на лямблиоз

Последнее время приобретает все большее диагностическое значение новый метод использования нейлоновой нити. Метод состоит в проглатывании желатиновой капсулы, внутри которой находится нейлоновая нить. При попадании в кишечник капсула растворяется, и паразиты прилипают к данной нити. По истечению двух часов нить выходит вместе с каловыми массами и подвергается микроскопическому исследованию.

Биопсия кишечника для диагностики лямблиоза (лямблий)

Один из самых ценных в диагностическом отношении методов, поскольку позволяет не только получить данные о присутствии паразитов, но и узнать, не изменена ли тканевая структура тонкого кишечника. Единственным минусом является дороговизна данной процедуры, поэтому её используют в случаях, когда трудно поставить точный диагноз, и есть подозрение на наличие опухолевидного процесса в кишечнике.

Иммунологическая (серологическая) диагностика лямблиоза

Для серологической диагностики лямблиоза (исследование крови) используют метод иммунофлюоресценции (75-80% достоверности). Специфические антитела обнаруживаются в крови через 2-4 нед. после заражения. В основу метода положено определение специфических антител в крови, направленных на борьбу с чужеродными микроорганизмами. Антитела (иммуноглобулины) представляют собой специальные белки со свойствами нейтрализовывать вредные бактерии, вирусы и другие патологические агенты, проникшие в организм человека. Иммуноглобулины обозначаются сокращённо латинскими буквами Ig.

Если обнаруживают IgM, то это обозначает, что имеется острая фаза патологического процесса.

Если обнаруживают IgG, то это обозначает хронический процесс.

Если же выявляют большие концентрации IgM и G, то это значит, что пациент хронически болеет лямблиозом и у него на данный момент времени наблюдается обострение заболевания.

Данный метод диагностики постепенно утрачивает свою ценность, поскольку нет 100% специфичности при определении иммуноглобулинов против лямблий. Это обозначает, что те же иммуноглобулины классов М и G могут появляться в ответ на проникновение других видов паразитов и бактерий. Новые технологии позволяют определять наличие специфических антител в каловых массах. В этих целях применяют такие методы иммунной диагностики как: иммуноэлектрофорез, иммунодиффузия, ELISA.

Развернутая копрограмма диагностики лямблиоза - исследование патологических копрологических синдромов.

Исследование желчи - нарушениия метаболизма желчных кислот, нарушение коллоидного состояния желчи.

В общем анализе крови могут определяться эозинофилия, лейкоцитоз, лимфоцитоз, несколько увеличена скорость оседания эритроцитов (СОЭ), не резко выражена анемия. Иногда показатели эозинофилии могут быть очень высокими, достигая степени лейкемоидной реакции эозинофильного типа.

Ультразвуковое исследование органов брюшной полости - для оценки состояния желчевыводящей системы, печени и поджелудочной железы.

Фиброгастродуоденоскопия - для исключения эрозивных или субатрофические изменения слизистой оболочки двендцатиперстной кишки, которые часто сопровождают лямблиозную инвазию.

Исследование кала на дисбактериоз: Лямблии отрицательно воздействуют на нормальную микрофлору кишечника, способствуя развитию дисбактериоза, в т.ч. кандидозного, т.к. грибы рода Candida выделяют витамины группы В, необходимые для жизнедеятельности лямблий. Проявления дисбиоза кишечника характеризуется значительным снижением содержания кишечной палочки (до 1-40 млн в 1г) и уменьшением или полным отсутствием бифидум- и лактобактерий. У детей раннего возраста на этом фоне выявляется условно-патогенная микрофлора: энтеробактер, клебсиелла, стафилококк, реже - протей, грибы рода Candida.

Лямблиоз распространен повсеместно, причем зараженность детей лямблиями, особенно в раннем и школьном возрасте, в несколько раз превышает соответствующие показатели у взрослых. Среди детей, посещающих детские коллективы (ясли, сады, школы), пораженность

Клиническая симптоматика лямблиоза складывается из нескольких симптомокомплексов: синдрома поражения желудочно-кишечного тракта и нарушений питания, синдрома интоксикации, в том числе поражение центральной нервной и вегетативной нервной системы, аллергического синдрома (поражение кожи и респираторных органов).

Гастроинтестинальный синдром. Основные клинические симптомы лямблиоза диагностируются со стороны желудочно-кишечного тракта, так как лямблии паразитируют в кишечнике человека. В клинической картине заболевания преобладают энтеральные расстройства, проявления которых в значительной степени зависят от возраста ребенка. Так как местом локализации лямблий является тонкая кишка, где происходит всасывание питательных веществ, у некоторых детей развивается синдром мальабсорбции в виде белково-энергетической и полигиповитаминозной недостаточности.

Аллергические проявления на коже, а также со стороны респираторного, желудочно-кишечного тракта и крови могут проявляться при любой форме лямблиоза вне зависимости от тяжести и остроты процесса. Давно известно, что в ответ на внедрение паразита повышается уровень IgE и уровень эозинофилов в периферической крови [3, 4, 7] — гиперпродукция IgE и эозинофилия являются древнейшими филогенетическими способами антипаразитарной защиты. Именно этим можно объяснить хорошо известный клиницистам факт, что паразитозы усиливают аллергические признаки у детей с атопией и другими формами аллергических проявлений.

Следует отметить, что диагностика лямблиоза затруднена в связи с отсутствием патогномоничной симптоматики, а сам лямблиоз либо наслаивается на другие заболевания, либо все клинические проявления этой паразитарной инфекции объясняются прочими разными причинами [4].

Обследование на лямблиоз показано при следующих состояниях (Н. П. Шабалов, Ю. И. Староверов, 1998) [5]: наличие заболеваний пищеварительного тракта, тенденция к их хроническому течению с частыми, но умеренно выраженными обострениями; нейроциркуляторная дисфункция, особенно в сочетании с желудочно-кишечными нарушениями; стойкая эозинофилия крови; аллергические проявления.

По данным литературы, иммунологические методы, например определение антител к лямблиям в сыворотке крови, обладают высокой чувствительностью и специфичностью.

Выявление специфических IgM и IgG к антигенам лямблий методом иммунофлюоресцентного анализа (ИФА) возможно с 12–14-го дня заболевания.

После санации IgM быстро исчезают. Их выявление свидетельствует о заболевании лямблиозом, IgG сохраняются до 2 мес после санации.

Однако пока патогенные свойства паразита недостаточно изучены, в частности не идентифицированы лямблиозные токсины, представляется преждевременным полагаться в диагностике лямблиоза только на результаты иммунологического исследования.

По нашим наблюдениям, у детей с упорным, длительно текущим лямблиозом антитела к лямблиям в сыворотке крови могут не определяться. И. В. Куимова и Т. Н. Ткаченко (2002) также обнаружили антитела менее чем у половины инфицированных лямблиями детей [2], что, по нашему мнению, может свидетельствовать о неэффективности механизмов гуморальной защиты.

Поэтому отсутствие специфических иммуноглобулинов у детей с повторным обнаружением цист лямблий является плохим прогностическим признаком и требует от врача применения индивидуальных схем лечения. Достаточно часто антитела к лямблиям не обнаруживаются у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом.

В современных условиях диагностика лямблиоза осуществляется рутинным методом микроскопии фекалий, однако этот метод в значительной степени субъективен, многое зависит от правильности проведения всех этапов исследования.

Также большое значение имеет правильное приготовление препарата для микроскопии. Материал должен наноситься на стекло тонким, прозрачным слоем, иначе цисты лямблий очень трудно рассмотреть в толще детрита. Микроскопию следует осуществлять сразу же после приготовления препарата.

Известно, что создание неблагоприятных условий способствует цистированию и выделению цист. Было отмечено, что при назначении желчегонных и противолямблиозных препаратов цисты обнаруживаются значительно чаще.

Еще большей настойчивости требуется при лечении лямблиоза. При назначении антипротозойных препаратов следует помнить, что терапия этой инфекции преследует цель не столько полной эрадикации лямблий из кишечника, сколько уменьшения клинических проявлений интоксикационного, гастроинтестинального и аллергического синдромов.

Эффективность применения противолямблиозных препаратов для уменьшения клинических проявлений аллергического синдрома достаточно выражена. Используя в качестве стартовой терапии макмирор или метронидазол, мы отмечали клиническое улучшение в течение первых 7–10 дней. У 85% детей с атопическим дерматитом отмечалось ослабление кожных проявлений; явления бронхиальной обструкции исчезли или сократились у 86% детей: исчезли одышка и удлинение выдоха, смягчился кашель; явления аллергического конъюнктивита уменьшились у всех детей.

Положительный эффект наблюдался как при назначении макмирора, так и при назначении метронидазола. В отличие от метронидазола и фуразолидона, в элиминации которых участвует печень, макмирор практически полностью элиминируется почками, и при этом не затрагиваются дезинтоксикационные резервы печени.

Следует помнить, что при назначении медикаментозных препаратов, эффективных в отношении Lamblia intestinalis, таких, как метронидазол и фуразолидон, на второй-третий день лечения может наступить ухудшение самочувствия ребенка в виде тошноты, рвоты, зуда, высыпаний на коже. Под влиянием лечения продукты массивного распада паразита всасываются в кровь и становятся причиной усиления интоксикации и сенсибилизации организма. Накопление продуктов распада паразитов в кишечнике способствует изменению рН внутренней среды и развитию дисбактериоза. Эта реакция носит название реакции Яриш-Гейксгеймера, как правило, она, длится не дольше 5–7 дней. Для уменьшения ее проявлений в течение курса лечения 1-2 раза в неделю рекомендуется проводить тюбажи с осмотическими слабительными — 25–30% раствором сульфата магния, сорбитом, ксилитом у детей старше 5–7 лет. Осмотические слабительные препятствуют всасыванию продуктов распада паразитов и ослабляют реакцию Яриш-Гейксгеймера.

Из-за опасности усиления интоксикации в первые дни лечения нецелесообразно применять противолямблиозные препараты короткими курсами. Длительность приема противолямблиозных препаратов 5–7 дней не приводит к эрадикации паразита, после отмены препарата клинические проявления заболевания возобновляются, и в результате такой курс может не привести к клиническому улучшению.

Уменьшению проявлений реакции Яриш-Гейксгеймера также способствует назначение препаратов системной энзимотерапии, в частности вобэнзима, представляющего собой комплекс высокоактивных ферментов растительного и животного происхождения. Препарат обычно назначается по 3–5 драже 3 раза/сут за 40 мин до еды, начиная со второго 10-дневного курса лечения макмирором или метронидазолом, на весь период проведения основного и противорецидивного курсов.

Следует отметить, что, во-первых, в условиях углубляющегося микробиоценотического дисбаланса кишечника нарастающий эндо- и экзотоксикоз приводит к сенсибилизации организма и создает риск возникновения и развития пищевой аллергии (рис.). Прямое системное и местное участие полиферментных препаратов в метаболизме и всасывании токсинов и сенситинов существенно улучшает эту ситуацию.

Во-вторых, растительные компоненты препарата (папаин и бромелаин) активны в толстой кишке, где рН среды смещен в кислую сторону. Тем самым обеспечивается глубокий протеолиз белков и гликопротеидов, что, по-видимому, лишает условно-патогенные (и патогенные) микробы-ауксотрофы факторов роста и пищевых субстратов, в то время как неприхотливые компоненты нормальной, сбалансированной микробиоценотической системы кишечника (например, микробы-сахаролитики) не нуждаются в белках для своей жизнедеятельности.

В-третьих, иммуномодулирующие свойства полиферментного препарата, прежде всего стимуляция макрофагов, позволяют противостоять антигенной гиперстимуляции с последующим истощением местного иммунитета [8].

Обобщив опыт наблюдения более чем 400 больных с лямблиозом, мы считаем, что для получения максимального эффекта целесообразно назначать противолямблиозный препарат двумя 10-дневными курсами с 5-дневным перерывом между ними.

За это время мы наблюдали уменьшение клинических проявлений со стороны желудочно-кишечного тракта более чем у 95% детей и стойкое уменьшение аллергических проявлений (кожных, респираторных и т. д.) более чем у 80% детей.

При излечении от лямблиоза сохраняется высокий риск повторного заражения, так как, во-первых, распространенность этой инфекции в популяции достаточно велика, во-вторых, все исследователи единодушно признают возможность повторного заражения. У многих пациентов мы наблюдали возврат клинических проявлений в течение ближайших недель и месяцев.

С другой стороны, отсутствие цист ляблий в кале не может служить критерием успешного лечения. Главный показатель выздоровления — исчезновение клинических симптомов: прекращение болей в животе, восстановление массы тела, очищение языка, ликвидация кожных проявлений, нормализация стула и размеров печени.

Увеличение размеров печени является одним из самых динамичных симптомов лямблиозной интоксикации. У подавляющего большинства больных безболезненный и эластичный край печени выступает из-под края реберной дуги на 1 — 4 см. На 5–7-й день от начала лечения размеры печени обычно нормализуются (т. е. край печени пальпируется по краю реберной дуги). Если в процессе лечения не удалось добиться эрадикации паразита, увеличение размеров печени происходит через 9–14 дней после окончания курса лечения. В этом случае показаны повторные противорецидивные курсы: однократный прием метронидазола в возрастной дозировке на ночь, утром тюбаж с осмотическим слабительным. Как правило, проводится не менее 4–6 противорецидивных курсов. За данный период времени удается добиться стойкого уменьшения аллергических проявлений более чем у 90% больных.

Дети, у которых методом копроскопии неоднократно обнаруживаются цисты лямблий, а иммунологическое исследование (ИФА) не выявляет антител к лямблиям (т. е. гуморальная защита против паразита неэффективна), составляют особую группу, нуждающуюся в проведении иммунокоррекции, которую мы осуществляли препаратом вобэнзим. Наш выбор был обусловлен еще и тем, что у многих больных лямблиозом — и детей, и взрослых — отмечались различные проявления синдрома мальдигестии — нарушения пищеварения в тонкой кишке.

Под нашим наблюдением находилось 27 детей в возрасте от 1 года. В клинической картине преобладали: синдром мальдигестии и мальабсорбции с отставанием в физическом развитии у всех детей, выраженный абдоминальный болевой синдром — у 23 детей. Все дети получили традиционные препараты макмирор и метронидазол двумя повторными курсами по 10 дней и противорецидивные курсы тинидазолом. Начиная со второго 10-дневного курса макмирора, 20 детям был назначен вобэнзим в течение 2-3 мес. Дети получали препарат из расчета 1 таблетка на 5 кг массы в сутки. В группе детей, получавших вобэнзим в течение 2-3 мес, восстановление массы тела произошло у 17 детей, абдоминальный болевой синдром уменьшился у 16 из 17. Количество противорецидивных курсов тинидазолом было сокращено до 2. В группе детей, получивших лечение только противолямблиозными препаратами за тот же период, болевой синдром уменьшился у 4 из 6, а полное восстановление массы тела произошло у 3 детей. В этой группе потребовалось провести 4 противорецидивных курса тинидазолом. Применение вобэнзима позволило быстрее достичь восстановления массы тела, уменьшения болевого синдрома и сократить количество противорецидивных курсов тинидазолом [1].

Для закрепления положительного эффекта лечения широко используются лекарственные травы с регенерирующим, эпителизирующим, противовоспалительным, желчегонным и обволакивающим действием. В летний период времени показана курортотерапия: морские купания, солнечные и воздушные ванны. При достижении клинической ремиссии заболевания дети продолжали находиться под наблюдением и при повторном появлении типичных симптомов заболевания получали противорецидивные курсы макмирора. Такой порядок ведения больных лямблиозом позволил удлинить клиническую ремиссию у детей до 6 лет с атопическим дерматитом и респираторными аллергозами.

По вопросам литературы обращайтесь в редакцию.

Т. Ю. Бандурина, кандидат медицинских наук, доцент
Г. Ю. Кнорринг, кандидат медицинских наук
МАПО, Санкт-Петербург

Лямблии — распространённые паразиты. Каждый второй ребёнок, посещающий детский сад, школу, подвержен риску заболевания. Каждый пятый взрослый – носитель. Основной источник заражения — вода.

Лямблии и лямблиоз

Выделяют два цикла развития паразита: трофозоит и циста. Функционал цисты – распространение. При поддержании необходимой влажности живет 70 дней в окружающей среде. Устойчива к концентрации хлора, используемой для обработки воды.

При реакции с секрецией желудка оболочка цисты растворяется, приобретает форму трофозоита. Десять личинок паразитов провоцируют инфицирование. Трофозоит при помощи присоски крепится к стенкам кишечника, становится цистой – делает невозможным выявление вегетативной формы в анализах кала при лямблиозе.

Методы исследования

Известны способы, позволяющие диагностировать заболевание у детей и взрослых. Обследования не дают 100% гарантированного результата. Важно подходить к процессу комплексно. Начальные шаги определит врач на основании жалоб, наличествующих симптомов.

Диагностика лямблиоза проводится прямыми и косвенными способами. В первом случае постановка диагноза основана на обнаружении цист, их ДНК; во втором — антител, вырабатываемых организмом, защищаясь от инфицирования.

Врач назначает способы диагностики:

копрограмма;
биопсия;
анализ на иммуноглобулины;
анализ на антиген;
ПЦР;
фиброгастродуоденоскопия;
энтеротест;
биохимическая гепатограмма;
ультразвуковое исследование печени.

Рассмотрим методы, сравним результативность.

Копрологические исследования

Копрограмма — исследование кала специальными реагентами.

Цистогенез (образование новых личинок) — процесс непрерывный, учитывая комфортную для размножения среду кишечника, в которую паразит заносится с водой, продуктами. Общий инкубационный период — 2 недели. При особо острых формах цисты попадают в кал на 5-7 сутки после заражения.

Наряду с традиционным методом копрограммы используют прибор Paraset, увеличивающий шанс обнаружить паразитов. В пробирку наливается смесь эфира и формалина, закручивающаяся вместе с 1 г кала.

В лаборатории образец помещается в центрифугу. При скорости вращения 3000 оборотов в минуту лямблии проходят через фильтр, скапливаются в нижней части пробирки. Способ даёт быстрый результат, повышает достоверность исследования.

Инвазивные методы

Биопсия – ценный для диагностики метод, дорогостоящий. По анализу с высокой точностью можно диагностировать лямблиоз у взрослых, исключить подозрения на опухоль в желудочно-кишечном тракте. Основан на изучении небольшого кусочка ткани определенного органа.

Используется для детской диагностики. Пациент глотает капсулу из желатина, внутри которой нейлоновая нить. Личинки паразитов налипают к нити. После выводятся из организма с каловыми массами, исследуются в лаборатории.

Фиброгастродуоденоскопия (дуоденальное зондирование) — манипуляция, проводимая врачом в стационарных условиях для извлечения и изучения содержимого двенадцатиперстной кишки.

Подготовка к исследованию проводится в течение 5 дней. В этот период прекращается приём желчегонных, слабительных, стимулирующих пищеварение лекарств.

Во время исследования при помощи зонда извлекается 20-25 мл желчи. Важно немедленно произвести микроскопическое исследование материала. Срочность необходима – вегетативные формы лямблий гибнут через 30 минут после извлечения. Метод трудоёмок, малоэффективен, применяется редко. Исследование назначают детям с 10 лет при условии тщательной подготовки к анализу. Переносится процедура тяжело, может оказать пагубное влияние на детскую психику.

Обнаружение лямблий в кале методом ПЦР. Экспериментальный метод молекулярной биологии. В основе лежит многократное копирование определенного участка ДНК. В природе подобным образом образуются раковые опухоли. В результате копирования должно получится количество генетического материала, достаточное для визуального анализа.

Копируется заданный участок ДНК, если он есть в исследуемом материале (кале). Лямблиоз диагностируется при наличии в кале ДНК паразита. Позволяет поставить диагноз в период отсутствия цист. Уровень достоверности метода — 98%. Исследование дорогостоящее, проводится в клиниках крупнейших городов.

Косвенные способы диагностики

Анализ на иммуноглобулины – серологическая диагностика относится к косвенным методам. Изучается сыворотка крови. Исследование показывает наличие антител, вырабатывающихся организмом в ответ на заражение. Анализ определяет инфекцию уже через 2 недели после заражения. Кровь из вены берётся натощак.

Различают IgM и IgG. Если обнаружено антитело первой группы – в организме происходит острая фаза патогенного процесса, если второй – хроническое течение, M и G – свидетельство хронической формы лямблиоза в период обострения. Количество антител повышается с интенсивностью заражения.

На уровень антител влияет ряд факторов, что иногда дает ложноотрицательные результаты. Пример: у детей с сильно сниженным иммунитетом, рецидивирующим заболеванием антитела не обнаруживаются. При перекрестной реакции с антителами на других паразитов дает ложноположительный результат. Достоверность анализа — 75-80%.

Достоверность метода близка к 100%. С помощью новейшей технологии выявляется антиген лямблий. Тест проводится быстро, особой подготовки не требует. Отсутствие субъективных факторов позволяет выявить цисты и вегетативную форму. В процессе исследования вмешательства в организм не происходит, что делает его удобным для детской диагностики. Исследуемый материал предоставляется в течении трёх суток (возможна заморозка).

Биохимическая гепатограмма используется в качестве эффективной альтернативы при невозможности проведения других анализов. Подходит для детской диагностики. Представляет обследование печени на основании результатов анализа венозной крови. Помогает выявить лямблии в печени (копрологические исследования ложноотрицательны).

Ультразвуковое исследование печени позволяет выявить поражение органа, использовать результаты для постановки диагноза.

Анализ на дисбактериоз – лабораторная диагностика, в процессе которой исследуют каловые массы. Лямблия агрессивно воздействует на микрофлору желудочно-кишечного тракта, вызывает дисбактериоз, кандидоз. Грибы Candida – источник витаминов В, необходимые для жизни паразитов. У детей до 3 лет выявляется патогенная флора. Дисбактериоз — возможный симптом лямблиоза.

Сравнение методов

Большая часть лабораторий предоставляет исследование, определяющее антитела к паразитам. Анализ ошибочно диагностирует ложноположительный результат, быстро подтверждать с его помощью выздоровление недостоверно – IgG могут проявляться через полгода после окончания лечения.

Анализ на антиген обладает высокой достоверностью в сравнении с другими методами. Минус – процедура отсутствует в перечне услуг многих клиник. Проверочный тест на лямблиоз должен проводиться минимум через три недели после выздоровления – антиген 2 недели присутствует в организме, искажает результаты анализа.

ПЦР — отличный метод, но для большинства людей это чисто теоретическая возможность.

Профилактика лямблиоза

Для профилактики лямблиоза медики советуют тщательно мыть овощи и фрукты, употреблять только кипяченую воду, посещать периодически терапевта для уверенности в отсутствии угрозы здоровью.

Лямблиоз не смертельно опасное заболевание. Существенно подтачивает иммунитет человека. Следует быть осторожнее с домашними животными – могут являться переносчиками паразитов.

Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиты L. intestinalis, в оформленных фекалиях - только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях - трофозоиты и цисты.

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования.

· Микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий.

Подготовка к исследованию.

1. Предварительно нанести на предметные стекла 1-2 капли физиологического раствора, раствора Люголя и метиленового синего.
2. Из пробы кала выбрать обычную порцию и порцию с патологическими признаками (слизь, кровь), смешать с каплей подготовленных на предметном стекле растворов, накрыть покровным стеклом.

Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо применять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях и проводить многократные исследования (от 2 - 3 до 6 - 7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод флотации. В большинстве случаев цисты L. intestinalis в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении L. intestinalis могут колебаться от 2 - 3 суток до 2 - 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

В дуоденальном содержимом трофозоиты L. intestinalis обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании L. intestinalis в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов. В настоящее время всё реже используется этот метод, т.к. он очень болезненный для пациента и требуется специально подготовленные сотрудники.

· Метод иммунохроматографического выявления антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноХА - Лямблия - Экспресс).

Набор ИммуноХА - Лямблия - Экспресс предназначен для быстрого, качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммунохроматографического анализа при диагностике лямблиоза и мониторинге лечения.

В основе определения лежит принцип иммунохроматографического анализа. Исследуемый образец всасывается поглощающим участком индикаторной полоски; при наличии в образце антигена лямблий последний вступает в реакцию с моноклональными антителами к антигену лямблий, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген–антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и связывается с другими антителами, иммобилизованными на мембране в виде линии, окрашивая ее в розово-фиолетовый цвет. Не связавшиеся реагенты продолжают двигаться по мембране дальше и образуют розово-фиолетовую линию в зоне контроля. Результаты реакции оценивают визуально(см.Рис. 1).


Положительный результат	Отрицательный результат	Ошибочный результат

Рисунок 1-Индикаторные полоски тест-системы

Выявление в рабочей зоне двух линий (тест и контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. в анализируемом образце фекалий содержится антиген лямблий, что свидетельствует о наличии в кишечнике самих паразитов.

Выявление в рабочей зоне только одной линии (контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. в анализируемом образце антигена лямблий нет или же его концентрация ниже порогового значения.

Если линия контроля не появилась, анализ признается недействительным, и определение необходимо повторить с использованием другой индикаторной полоски.

· Иммуноферментный анализ для определения антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноФА – Лямблия - Ar)

Набор ИммуноФА-Лямблия-Аг предназначен для качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммуноферментного анализа (ИФА) при диагностике лямблиоза и мониторинге его лечения. Набор рассчитан на проведение анализа 94 неизвестных образцов и 2 контрольных проб (всего 96 определений).

Оптическая плотность отрицательного контроля при правильно проведенном анализе должна находиться в пределах 0,050 - 0,100 ед. ОП, а положительного - в пределах 1,0 - 2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Иммуноферментный анализ для определения антител
к антигенам лямблий в сыворотке крови.

Тест-система предназначена для выявления IgM и IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови обследуемых лиц при диагностике острого лямблиоза в комплексе с другими методами, при изучении патогенеза и иммуногенеза лямблиоза в клинических и научно-исследовательских лабораториях.

При правильно проведенном анализе оптическая плотность отрицательного контроля (ОП К¯) должна находиться в пределах 0,050–0,100 ед. ОП, а положительного – в пределах 1,0–2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей ОП К¯на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, ОП К¯ контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Лямблии обитают в начальном отделе тонкой кишки, поэтому для него характерно развитие местных иммунологических реакций. Однако и в сыворотках крови зараженных лямблиями людей выявляются антитела к их антигенам, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов. При воспалении слизистой оболочки кишечника ее проницаемость возрастает, и попадание антигенов лямблий в периферическую кровь увеличивается в результате резорбции. Выявление IgМ к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии острого лямблиоза, диагностика которого возможна на 10 - 14 день от начала инвазии. Выявление IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии хронического лямблиоза.

Анализ на антитела нельзя назвать точным методом диагностики данного заболевания. Обычно полностью антитела к L. intestinalis исчезают из крови через 2-6 месяцев. К тому же иммуноглобулины класса G и M могут появиться в ответ на проникновение иных видов паразитов и бактерий.

В результате сравнительной характеристики лабораторных методов исследования был сделан вывод, что копрологический метод исследования на лямблиоз является наиболее точным и оптимальным, однако требует высокой подготовки и знаний медицинского лабораторного техника при проведении этого исследования. Метод ИФА в основном используется в совокупности с другими методами, поэтому он чаще используется для профилактики.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Читайте также: