Лабораторный материал для выявления микробоносительства брюшного тифа

Паратифов.

1. Исследование крови больного.

Контрольные вопросы.

Чем отличаются сальмонеллы брюшного тифа от сальмонелл паратифов А и В по биохимическим свойствам?

Какова антигенная структура сальмонелл?

Какие микробиологические методы используются для диагностики брюшного тифа и паратифов?

Какой материал берется от больного для ранней диагностики брюшного тифа и как этот материал исследуется?

Почему при серологической диагностике брюшного тифа используются "О" и "Н" - антигены?

Какое значение имеет исследование испражнений при брюшном тифе и паратифах?

Каков порядок исследования испражнений?

2. Исследование испражнений, желчи, мочи.

РПГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом. ИФМ. Реакция Видаля.

Методы микробиологической диагностики брюшнотифозного бактерионосительства

Исследование желчи, испражнений, мочи.

Реакция Ви-гемагглютинации для выявления Ви-антител, определение 0-, Н-, Vi-антител одновременно.

Кожная проба с Ви-тифином.

Как производится идентификация выделенных чистых культур возбудителей брюшного тифа?

Как определяются серологическая группа и серотип сальмонелл?

Как осуществляется фаготипирование брюшнотифозных бактерий и в чем заключается значение этого метода?

Какой материал берется для бактериологического исследования на брюшнотифозное бактерионосительство и каким образом он исследуется?

Как осуществляется серологическая диагностика брюшнотифозного бактерионосительства?

Каковы особенности патогенеза брюшного тифа?

Какие существуют иммунопрепараты для профилактики брюшного тифа и паратифов?

Приложение к занятию 5.

А. Классификация Семейства Enterobacteriaceae

Род Еscherichia Род Arizona

Б. Для фаготипирования брюшнотифозных бактерий, содержащих Vi-антиген, выпускается набор типовых брюшнотифозных Vi -фагов в ампулах с указанием рабочих разведений.Vi-I-фаг - универсальный, лизирует все культуры бактерий, содержащие Vi-антиген, Vi-II- фаг - лизирует только те штаммы, на которых он пассировался. Этот фаг подразделен на типы, обозначаемые заглавными буквами латинского алфавита. Соответственно типовым фагам существуют фаготипы брюшнотифозных бактерий, которые имеют идентичные обозначения.

В природе циркулирует 106 фаготипов возбудителя брюшного тифа. На территории нашей страны чаще всего встречаются фаготипы A, F 2, EI, С, Е2.

Разработаны системы фаготипирования возбудителей паратифа В (37 фаготипов) и паратифа А (более 10 фаготипов).

ЗАНЯТИЕ 6.

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ

(продолжение).

А. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов.

1. Продолжение исследования крови брюшнотифозного больного: посев со среды Рапопорт на скошенный МПА и дифференциально-диагностические среды - Плоскирева, Левина, Эндо, висмут-сульфит-агар (демонстрация).

2. Регистрация результатов реакции Видаля, поставленной на предыдущем занятии.

3. Продолжение исследования испражнений брюшнотифозного больного: изучение выросших колоний, пересев бактерии из подозрительных колоний на среды "пестрого ряда" и на скошенный МПА.

4. Применение иммунофлуоресцентного метода для ускоренного обнаружения и идентификации возбудителей брюшного тифа (демонстрация).

Б. Микробиологическая диагностика пищевых токсикоинфекций.

1. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл.

2. Исследование пищевых продуктов на наличие возбудителей пищевыхтоксикоинфекций: посев на среды обогащения и дифференциально-диагностические среды.

3. Исследование пищевых продуктов на наличие патогенных стафилококков и условно патогенных микробов (кишечная палочка, протей). Разбор методов.

А. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов.

§ 1. Отметить изменения, наступившие в среде Рапопорт в результате роста возбудителей брюшного тифа (покраснение среды) и паратифов (покраснение среды и наличие газа), и зарегистрировать (занятие 7). Сделать пересев культуры бактерий со среды Рапопорт на скошенный МПА и среды Плоскирева, Эндо, Левина (демонстрация).

§ 2. Произвести учет результатов реакции Видаля по четырехкрестной системе с "О"- и "Н"-диагностикумами. Результаты реакции и заключение записать в тетрадь.

§ 3. На чашках с посевами найти бесцветные прозрачные колонки, типичные для возбудителей тифо-паратифозной группы. Половину колонии использовать для приготовления препарата-мазка (окрасить по Граму), оставшуюся часть колонки засеять на среды "пестрого ряда", среду Пешкова (для исследования подвижности) и на скошенный МПА.

Б. Микробиологическая диагностика пищевых токсикоинфекций.

§ 1. Приготовить препараты-мазки из культур сальмонелл и кишечной палочки, окрасить по Граму, промикроскопировать и сравнить морфологию бактерий во всех препаратах. Препараты зарисовать. Изучить рост на жидких и плотных средах и биохимические свойства сальмонелл по готовым демонстрационным наборам сред "пестрого ряда".

§ 2. Приготовить взвесь в физиологическом растворе кусочка пищевого продукта, зараженного сальмонеллами, и произвести посев взвеси на среду обогащения и на дифференциально-диагностическую среду Плоскирева или Эндо.

Возбудителями брюшного тифа и паратифов (А, В) являются бактерии рода Salmonella, в состав которого входят два вида: Salmonella enterica с 6 подвидами (включая возбудители брюшного тифа, паратифов, сальмонеллезов – всего более 2400 сероваров) и Salmonellabongori(редко встречающиеся сальмонеллы).Возбудитель брюшного тифа обозначается как Salmonellaсеровара Typhi (Salmonella entericaspp. enterica ser. typhi, прежнее назва­ние Salmonella typhi), паратифа А — Salmonellaсеровара ParatyphiA, паратифа В — Salmonellaсеровара Paratyphi В.

Методы микробиологической диагностики брюшного тифа и паратифов представлены в схеме 9.

Выбор материала и метода микробиологической диагностики этих заболеваний зависит от стадии патогенеза. На первой неделе заболевания и в течение всего лихорадочного периода возбудитель можно выделить из крови (гемокультура), с конца второй и на третьей неделе — из мочи (уринокультура) и испражнений (копрокультура). Высокий процент высеваемости возбудителя отмечается при исследовании костного мозга (выделение миелокультуры). Удается обнаружить сальмонеллы в скарификате розеол (розеоло-культура), ликворе, содержимом две­надцатиперстной кишки, секционном материале. У реконвалесцентов исследуют испражнения и желчь (выделение биликультуры). Начиная со второй недели заболевания проводят серологи­ческое исследование. Микроскопическое исследование материала от больного не проводится, т.к. все энтеробактерии (как патогенные, так и непатогенные, например, E.coli) по морфологическим свойствам идентичны (рис. 14).

Бактериологическое исследованиеявляется основным лабораторным методом диагностики брюшного тифа и паратифов.

Ранним и надежным методом бактериологической диагностики является выделение возбудителей из крови (гемокультура).Взятую в асептических условиях кровь (15-20 мл) засевают на 10% желчный бульон или среду Рапопорт (10% желчный бульон, 1 % маннита или 2 % глюкозы, 1 % индикатора Андреде; в среду помещен поплавок для улавливания газа) в соотношении крови и среды 1:10 для накопления сальмонелл. Посевы инкубируют при 37 0 С 18 —24 ч. При наличии сальмонелл маннит или глюкоза расщепляется с образованием кислоты и среда приобрета­ет красный цвет; появление в поплавке газа свидетельствует о газообразовании - характерном признаке паратифозных бактерий.

Схема 9.Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов.

А б

Рис. 14. а - кишечная палочка(E.coli ув. Х1350), б- возбудитель брюшного тифа(S.typhi, ув. Х630) в мазках из чистой культуры. Окраска по Граму. Грамотрицательные беспорядочно расположенные палочки средних размеров.

Копрокультуру выделяют путем посева фекалий на среду Плоскирева, Эндо, висмут-сульфит агар и среды накоп­ления (селенитовую, магниевую, тетратионатную, Кауфмана, Мюллера) с последующей 18 —24-часовой инкубацией при 37 °С.

На 2-й день на средах Плоскирева, МакКонки или Эндо вырастают бесцветные (лактозоотрицательные) колонии, а на висмут-сульфит-агаре – черные. Колонии сальмонелл па­ратифа А окрашены взеленый цвет, так как не образуют сероводород. Из типичных колоний готовят мазок, окрашивают по Граму и после микроскопии остаток колонии пересевают на среду Ресселя или Олькеницкого. При отсутствии типичных колоний на те же среды засевают материал со среды обогащения.

ставят ориентировочную, а потом развернутую РА. Ориентировочную РА ставят со смесью О-сывороток, включающей агглютинины к О-антигенам 2, 4, 7, 8, 9, 3-10. При отсутствии РА с этой смесью используют смесь монорецепторных О-сывороток к редким группам сальмонелл (антитела к антигенам 11, 13, 15, 19, 23 и т.д.) При получении положительных результатов культуру испытывают отдельно с каждой из О-сывороток, входящих в состав смеси. После этого культуру агглютинируют с Н-сыворотками 1 фазы (a, b, i, c, d, g, m) а потом 2 фазы (1,2; 1,5), устанавливая антигенную формулу выделенной сальмонеллы в соответствии со схемой Кауфмана-Уайта (таблица 9). Эта схема разработана на основании изучения у сальмонелл О и Н антигенов и применяется с целью антигенной идентификации патогенных сальмонелл.

Таблица 9. Антигенная структура сальмонелл (сокращенная схема Кауфмана-Уайта)

Группа	Серовар	О-антиген	Н-антиген
Фаза 1	Фаза 2
А	Paratyphi A	1, 2, 12	a	-
B	Paratyphi B Typhi murium	1, 4, 5, 12 1, 4, 5, 12	b i	1, 2 1, 2
C	Paratyphi C Cholerae suis	6, 7, Vi 6, 7	c c	1, 5 1, 5
D	Typhi Enteritidis	9, 12, Vi 1, 9, 12.	d g, m	- -

Мочу, дуоденальное содержимое, соскоб розеол, сек­ционный материал с целью выделения тифо-паратифозных бактерий засевают на плот­ные среды (Эндо, Мак-Конки и т.п. в чашке Петри), а также в среды накоп­ления. При наличии характерного роста идентификация прово­дится по вышеописанной схеме.

Таблица 10. Биохимические свойства возбудителей брюшного тифа и паратифов

Биовар S.enterica	Ферментация	Продукция
Лакто- Зы	Глю- козы	Маль- тозы	Саха- розы	Ман- нита	Н2S	NH3	индо- ла
Typhi	-	К	К	-	К	+	-	-
Paratyphi A	-	КГ	КГ	-	КГ	-	-	-
Paratyphi В	-	КГ	КГ	-	КГ	+	+	-

Обозначения: (+) - наличие свойства, (-) - отсутствие свойства, К – образование кислоты, КГ – образование кислоты и газа.

Аналогично проводится исследование испражнений уперебо­левших брюшным тифом и паратифом лиц, а также у работников детс­ких учреждений, питания и водоснабжения с целью выявления бактерионосителей.

Серологическое исследование.Для серологической диагности­ки брюшного тифа и паратифов ставят ре­акцию Видаля (развернутая РА) с целью определения соответствующих антител в крови больного. Антитела к возбудителям брюшного тифа, парати­фов А и В обнаруживаются в сыворотке крови больных с 8— 10-го дня заболевания. Исследуемую сыворотку крови разводят двукратно в 6 параллельных рядах пробирок от 1:100 до 1: 1600 в объеме 1 мл, куда вносят по 2 капли ОН- и О- брюшнотифозного, паратифозного Аи паратифозного В диагностикумов. О-диагностикумы получают кипячением или обработкой спиртом взвеси соот­ветствующих культур, ОН-диагностикумы - обработкой формалином. Для контроля антигена диагностикумы вносятся в той же дозе в 1 мл физиологического раствора, а для контроля сыворотки ис­пользуют сыворотку в разведении 1:100 без добавления диагностикумов.

О-антитела имеют диагностическое значение, они появляются в крови на второй неделе заболева­ния и исчезают к его концу, а Н-агглютинины нараста­ют к концу заболевания. и диагностической ценности не имеют. Н-антитела могут обнаруживаться также у переболевших и вакцинированных. Ряд брюшнотифозных вакцин вызывает также выработку Vi – и О антител. Диагностический титр О-антител в реакции Видаля у неиммунизированных лиц 1 :100, а при отсутствии типичной клинической картины - 1 :200. Однако титр антител у больных может быть ниже диагностического в связи с ранним назначением антибиотиков или наличием у больного вторичного иммунодефицита. Таким образом, отрицательная реакция Видаля не исключает тифопаратифозное заболевание. С другой стороны, повышенные титры О-антител могут быть обусловлены прививками. Поэтому при подозрении на брюшной тиф или паратифы целесообразно исследовать сыворотку крови как можно раньше (до появления антител), а затем в динамике (с интервалом 7-12 дней) для выявления нарастания титра антител более чем в 4 раза. Если сыворотка крови больного агглютинирует одновре­менно два или три вида диагностикумов, учитывают титр агглютинации: специфическая агглютинация происходит обычно с более высокими, а групповая — с более низкими разведениями сыворотки.

Более чувствительны РНГА с эритроцитарными групповыми (А, В, С, Д, Е)и монорецепторными диагностикумами, а также ИФА, которые ставят с парными сыворотками в динамике заболевания.

Vi-антитела чаще обнаруживаются у бактерионосителей сальмонелл брюш­ного тифа, т.к. Vi-антиген способствует длительной персистенции возбудителя в организме. При обследовании лиц, подозрительных на носительство брюшнотифозных палочек, применяется РНГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом для определения соответствующих антител и их принадлеж­ности к классу IgG.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Основными методом является бактериологический анализ. Материал для исследования зависит от стадии заболевания. на первой неделе выделяют возбудителей из крови (гемокультура) и розеол (розеолокультура); на третьей и четвертой неделе - из испражнений (копрокультура), мочи (уринокультура) или желчи (биликультура).

Обнаружение антител в сыворотке - Реакция Видаля - является вспомогательным методом и ставиться, начиная со второй недели заболевания.

Культуральный ( бактериологический ) метод

Материалом для анализа служат кровь, испражнения, моча, желчь, содержимое розеол, секционный материал (отрезки тонкого кишечника и желчный пузырь). Этапы исследования.

1ый день. Материал засевают во флаконы, содержащими селенитовый бульон (желчный бульон, магниевую среду или др.) для подавления роста сопутствующей микрофлоры.

2ой день. Пересевают на среды Эндо, Плоскирева или висмут-сульфитный агар. На среде Эндо сальмонеллы образуют бесцветные, иногда розоватые прозрачные колонии, на среде Плоскирева - бесцветные, мутноватые. На висмут-сульфит агареS. typhi иS. paratyphi В образуют черные колонии с металлическим блеском, окруженные черным ободком (гало),S. paratyphi Л - коричневато-зеленые колонии.

3ий день. Пересев колоний на скошенный агар со средой Олькеницкого (или Ресселя) для накопления чистой культуры. Сальмонеллы вызывают изменение только цвета столбика агара (разлагается только глюкоза). Паратифозные бактерии, в отличие от брюшнотифозных, разлагают углеводы с образованием газа, что приводит к разрывам в столбике агара.

4й день. Идентификация культур, выросших на скошенном агаре. С этой целью проводятреакцию агглютинации на стекле с групповыми и моно- ( О- и Н- ) сальмонеллезными сыворотками, что позволяет определить О-серогруппу и серотип (по комплексуО- и Н-антигенов) возбудителя.

Иммунологический метод

а) Реакция Видаля (реакция развернутой агглютинации) используется для обнаружение в сыворотке антител к О- и Н-антигенам возбудителей брюшного тифа и паратифов. Реакцию у больных ставят в конце первой - в начале второй недели (8-10 день ) и в последующие сроки заболевания.

Наличие О-антител в диагностическом титре в исследуемой сыворотке свидетельствует о циркуляции тифо-паратифозного микроба в организме больного. У детей наблюдается более слабая динамика антителообразования, нежели у взрослых: диагностический титр антител (минимальный титр антител, выявляемый при заболевании) для детей составляет 1:100, а для взрослых - 1:200.

Изучают динамику образования антител в реакциях с парными сыворотками (взятыми с интервалом 1-2 недели). Характерной особенностью иммунограммы больною будет нарастание титра антител в ходе заболевания (титр антител будет выше в повторно взятой сыворотке).

б)Реакция непрямой гемагглютинации для обнаружения Ви-антител.

Обнаружение Vi-антител в исследуемой сыворотке в диагностическом титре 1:400 (и выше) указывает на бактерионосительство.

Препараты для специфической профилактики брюшного тифа Вакцина брюшнотифозная спиртовая сухая

содержит взвесь (в физиологическом растворе) убитых спиртом микробов культур брюшнотифозных вакцинных штаммов, содержащих О-, Н- и Vi-антигены. Применяется для активной иммунизации против брюшного тифа взрослых и детей с 7-летнего возраста.

Вакцина брюшнотифозная Vi - полисахаридная жидкая

представляет собой раствор капсульного полисахарида, извлеченного из супернатанта культуры Salmonellatyphi. Применяется для профилактики брюшного тифа у взрослых и детей с 3-х лет.

Бактериофаг сальмонеллезный

Представляет собой лиофилизированный концентрат фаголизатов наиболее распространенных сальмонелл.

Показания. Сальмонеллез (лечение, санация реконвалесцентов).

Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет проч­ный и продолжительный

4. Факторы и механизмы, инициирующие и поддерживающие ВИЧ-персистенцию:

Правильные ответы: 1. Интегративная вирогения. 2. Селекция иммунорезистентных клонов. 3. Мутабельность ВИЧ-генома. 4. Негативный самоконтроль за репликацией. 5. Наличие резервуаров с низким уровнем ВИЧ-репликации.

ВИЧ:Сем: Retroviridae(обратно) Род: Lentivirus(медл икаб пердиод) Чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет при нагревании. Вирус может длительно сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови. тип:ВИЧ1-основ возбуд, по всему миру; ВИЧ2-менее вирулентный, только в западной Африке

Сферич формы, сред размер. ретроРНК (+) двунитевая, стабилиз белком Р6 и Р7; Р 24 в структуре нуклеокапсида ( в форе яйца нуклекапсид=(капсид+геном)). вирус сложный, тк оболочечный, имеет суперкапсид: изнутри выстлан м-белок(матричный), далее трансмембр белок - GP 41(в слое) участв в адсорбции и проникновении(еще корецепторы(хемокиновые) в проникновении участвуют) GР120-поверхностный эпимембранный белок, выполн рецептор функцию(мишеньпатогенетич значим СD4 те Тхелп, они обеспеч 90% репликативн выхода вируса, так же мб мононуклеарн фагоциты – это вторые по значим:макроф, дендр кл, естест кил, ), с ним связана высокая АГ-ая изменчивость. GР120-могут сбрасыват-ся в окр среду, связыв с СD4-рецепт сосед клет превращая их в мишень для анти-ВИЧ-антител.

p51(ревертаза)p34 (инеграза отвечает за встраивание в геном хозяина),p11 (протеаза отвеч за образов структурн белков)

вирионная+РНК(обратная транскриптаза, с помощью РНК-зависм, ДНК-полимеразы, те ревертаза)àДНКлинейная(двунитевая)(с помощью интегразы)àтранспортируется в ядроàпровирус(те интегрированная ДНК)либо может вирус так и оставаться(латентная фаза). А может перейти в продуктивную фазу => транскрипция(рнк-полимераза). Трансляция. Формиров вирусн белков, сборка, созревание, и высвобожд вирионов

Гены вирионных белков: ENV (gp 41\120).GAG (груп АГ - p 7,6,17,24) POL (p51,p34,p11)

Клиника: поражается дыхательная система (пнев­мония, бронхиты); ЦНС (абсцес­сы, менингиты); ЖКТ (диареи), возникают злокачествен­ные новообразования (опу­холи внутренних органов).

ВИЧ-инфекция протекает в несколько стадий: 1) инкуба­ционный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорад­кой, диареей; завершает­ся стадия бессимптомной фазой и персистенцией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела, 3) стадия вторичных заболеваний, проявляющихся поражением дыхатель­ной, нервной системы. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией- СПИДом.

[Индик заболев: токспоплазмы, криптоплазмы, пневмоцисты, кандиды, крпитококки, сальмонеллы, микобакт, герпесвир, оп Капоши, лимфома, энцефалопатии] Микробиологическая диагностика.

Вирусологические и серологические исследования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ.Для этого исполь­зуют ИФА, ИБ и ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержат антитела ко всем вирусным белкам. Однако для подтвержде­ния диагноза определяют антитела к белкам gp41, gpl20, gpl60, p24 у ВИЧ-1 и антитела к белкам gp36, gpl05, gpl40 у ВИЧ-2. ВИЧ-антитела появляются через 2—4 недели пос­ле инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ.

Метод выявления вируса в крови, лим­фоцитах. Однако при любой положительной пробе для подтверждения результатов ставится ре­акция ИБ. Применяют также ПЦР, способ­ную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкуба­ционном и раннем клиническом периоде, однако ее чувствительность несколько ниже, чем у ИФА.

Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими иссле­дованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.

Диагностическая иммуноферментная тест-система для определения антител к ВИЧ – включает вирусный АГ, адсорбированный на носителе, АТ против Ig человека. Используется для серодиагностики СПИДа.

Лечение:применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активирован­ных клетках.

Лечение:1. инг ревертазы (азидотимидин), инг протеазы, анг интегразы, инг входа в Кл, инг слиян Вич с кл Профилактики нет спецефич

Состав вириона: нукеокапсид, суперк, ретроРНК(это медлен вирусы, с длит инкуб период, бессимпт и малосимпт персисенция), вирусспец ферм. Мишень протеазы: предшеств вирион белков.Агрес персист-я опред-ся: Аг-изм-ть(gp120и из-за не способн исправл ошибки рнк-завис ДНК-полмераз) активн Т-лимф, изм-ть функцин ВИЧ, выс Ур-нь реплик инфекц(тк во время интеграция она то же идет), блок центр Звена в коопер Иммункомпен-кл(вирус заставл иммунокомп кл работать на себя и тратить силы на ложн мешени, это дезорганизирует лимф тк). Поддерж-т персист: интегр вирогения,(интеграция непрерыв сочет с репликац), селекция иммунорезистент клонов, мутабельность генома, негат самоконтроль за реплик, резервуары с низ Ур Вич реплик.Поддерж персист: макроф(они не разруш-ся но снижаетсяспособ к представление аг,хуже фагоцитируют Т-лимф(кофакторы ускорения, приблеж терменальн фазу заболев). Вирусспецеф мишени в анти-вичтерапии: обратн транскр(те рнкзависм ДНК полмераза, она запускает ВИЧ инфекцию), протеаза. Серологич маркеры испоз-ны в диагностике:ВИЧ: АТ, РНК, АГ СПИД-фазы ВИЧ-инфекции: высокий уровень ВИЧ-виусемии, резкое снижение СD4 Т-лимф,клинечески(патогенетич)значимый иммунодефицит,длительн инкаб период( до 10лет),клиническая(спидовая)специфика(опухоли,истощение,оппуртунистичес инфекции, неврол забол),серопозитивность(анти-вич-АТ)

Экзаменационный билет 23

1.Нормальная микрофлора: значение в физиологии и патологии.

Норм. Микрофлора- совокупность множества микробиоценозов, характеризующихся опр. составом и занимающих тот или иной биотоп (кожу и слиз. оболочки ,верхние дыхательные пути ,пищ тракт ,мочеполовая система) в организме человека, сообщающийся с окр. средой. Организм чел-ка и его микрофлора находятсяся в состояниии динамичного равновесия (эубиоза) и являютсяся единой экосистемой. Среди нормальной микрофлоры выделяют резидентную(м/о которой постоянно присутствуют орг-ме) и транзиторную(не способна к длит. существованию в орг-ме.

Ф-ии нормальной микрофлоры

• Созд-е колониз. резист-ти.

• Прод-я фер-тов, участ. в мет-ме б,ж,у, а также улуч-е пищевар-я и усил. перистальтики киш-ка.

• Уча-е в водно-солевом обмене.

• Уча-е в обесп-и эукариотических клеток энергией.

• Прод-я БАВ(аминокислоты, пептиды, гормоны, жирные кислоты, витамины).

Дисбактериоз (дисбиоз) – это любые количественные или качественные изменения типичной для данного биотопа нормальной микрофлоры человека, возникающие в результате воздействия на макро– или микроорганизм различных неблагоприятных факторов.

При дисбиозе: снижение колонизации Резистентности, угнетение ф-ий иммун. системы, повышается восприимчивость к инфекционным заболеваниям(кандидоз)

Реализация иммунного ответа - совокупность реакций, направленных на

элиминацию антигенов и антиген-несущих мишеней (бактерий, зараженных клеток,

Дата добавления: 2018-02-28 ; просмотров: 157 ;

Используют бактериологический и серологические методы, которые проводят с учетом периода инфекционного процесса.

Материалом для выделения являются кровь (гемокультура), испражнения (копрокультура), моча (уринокультура), дуоденальное содержимое, желчь (биликультура), соскоб розеол, костный мозг.

В бактериологическом исследовании ранним методом является выделение возбудителя из крови (гемокультура) в период бактериемии (первая неделя заболевания).

Кровь засевают в желчный бульон или среду Рапопорт в соотношении 1:10 (чтобы уменьшить бактерицидные свойства белков крови). На 2-й день проводят пересев на среду Эндо или Левина, или висмут-сульфит агар. Подозрительные (прозрачные или черные в зависимости от сред) колонии пересевают на скошенный агар или одну из комбинированных сред (Олькеницкого, Ресселя, Клиглера). На этих средах для первичной идентификации определяют ферментацию глюкозы, способность к газообразованию, выделение сероводорода, отсутствие уреазы.

Одновременно изучают морфологию и тинкториальные свойства.

Определяют биохимические свойства. Бактерии тифо-паратифозной группы не разлагают сахарозу, лактозу, не образуют индол.

При выделении культур, имеющих характерные для сальмонелл ферментативные свойства, изучают их антигенную структуру в реакции агглютинации на стекле с О- и Н-диагностическими антисыворотками, определяют чувствительность к антибиотикам, проводят фаготипирование.

Для серологической диагностики брюшного тифа и паратифов с 5-7 дня заболевания в основном используется РПГА с О- и Н-эритроцитарными диагностикумами. Положительной считается реакция в титре 1:160 и выше. При исследовании в РПГА титр антител в динамике заболевания нарастает.

Возможно применение реакции агглютинации Видаля с О- и Н-монодиагностикумами к конкретным возбудителям (положительный титр реакции – 1:200 и выше). Серологический диагноз имеет ретроспективный характер.

Для выявления бактерионосителей используют РПГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом (титр реакции – 1:40). Исследуют били- и копрокультуру. Проводят фаготипирование с Vi-1 антигеном.

При эпидемических вспышках брюшного тифа для экспресс-диагностики с целью выявления АГ в крови, костном мозге и другом материале применяют РИФ и ИФА.

Лечение брюшного тифа

Этиотропную терапию проводят сразу после установления клинического диагноза. Для лечения используют фторхинолоны. При устойчивости к ним применяют цефалоспорины III поколения, азитромицин.

Левомицетин и ко-тримоксазол в настоящее время используют реже из-за распространения полирезистентных штаммов. Патогенетическое лечение включает инфузионно-дезинтоксикационную терапию.

Профилактика

Проводятся санитарно-гигиенические и противоэпидемические мероприятия, направленные на обезвреживание источников инфекции, пресечение путей передачи, повышение невосприимчивости организма.

Для специфической иммунопрофилактики брюшного тифа разработано 3 типа вакцин. Применяют инактивированные вакцины (эффективность 50-70%), разработана живая аттенуированная вакцина из штамма Ту21а (оказывает большее протективное действие, находится на стадии клинических испытаний). Эффективной является полисахаридная вакцина из Vi-антигена S. typhi(например, Вианвак пр-ва Российской Федерации), применяется по эпидпоказаниям, протективный эффект сохраняется до 2-х лет.

Сальмонеллезы

Сальмонеллезы – группа полиэтиологичных острых инфекционных болезней человека, животных и птиц, характеризующаяся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта, диареей и бактериемией.

Наиболее частой клинической формой сальмонеллезной инфекции является сальмонеллезный гастроэнтерит. Основные возбудители гастроэнтерита: S. Enteritidis, S .Choleraesuis, S .Anatum, S .Derby, хотя заболевания могут вызываться и многими другими вариантами бактерий.

Значительно более тяжелой формой является генерализованная сальмонеллезная инфекция – септицемия. Ее ведущим возбудителем является S. Typhimurium.

Большинство возбудителей выделяют у различных животных (основной резервуар) и человека.

Источником заражения человека чаще всего являются домашние птицы (50%), особенно куры и утки, а также их яйца (сальмонеллы могут проникать через скорлупу внутрь). Носительство сальмонелл выявлено у домашнего скота, собак, кошек, грызунов, у многих диких животных и птиц. Инфицированные животные выделяют бактерии с мочой и калом, молоком, слюной, загрязняя окружающую среду.

Основной путь передачи сальмонелл – пищевой. Заболевания возникают у человека в связи с употреблением мясных продуктов (говядина, свинина – до 20% случаев, мясо птицы), яиц, реже – рыбы, овощей, фруктов, моллюсков, раков, крабов.

Мясо может инфицироваться эндогенно при жизни животного во время его болезни, а также экзогенно в процессе транспортировки, переработки, хранения. Иногда продукты питания инфицируются при неправильной их кулинарной обработке, приготовлении пищи.

При несоблюдении санитарно-гигиенических норм может возникнуть контактно-бытовой путь передачи, который характерен для внутрибольничных вспышек сальмонеллеза. Такие вспышки отмечены в родовспомогательных учреждениях, хирургических, детских и других стационарах. При госпитальных сальмонеллезах чаще выделяется S. typhimurium иS. Haifa. В Республике Беларусь сальмонеллезные инфекции составляют более 50% от всех случаев госпитальных инфекций

Возбудители госпитальных сальмонеллезов отличаются высокой полирезистентностью к химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам.

Наиболее восприимчивы к сальмонеллезу дети в возрасте до 1 года и лица с различными иммунодефицитами.

Инкубационный период болезни – от 2-6 часов до 2-3 суток (в среднем составляет 7-24 часа).

Патогенез сальмонеллезов определяется факторами вирулентности возбудителей. Среди них наиболее важную роль играют инвазивные белки III типа секреции.

Некоторые из белков инвазии обеспечивают проникновение сальмонелл внутрь эпителиальных клеток кишечника, их выживание внутри вакуолей. Кроме того, они стимулируют выброс провоспалительных цитокинов и хемокинов из пораженных клеток, апоптоз макрофагов.

Внутри макрофагов бактерии не только размножаются, но и частично погибают с освобождением эндотоксина, поражающего нервно-сосудистый аппарат кишечника и повышающего проницаемость клеточных мембран.

В течение 1 часа от проникновения сальмонелл внутрь клеток развивается выраженная нейтрофильная инфильтрация стенки кишечника. Кишечное воспаление сопровождается выходом белка из пораженных энтероцитов, усилением секреции хлоридов с развитием профузной диареи.

Часть сальмонелл может продуцировать энтеротоксин, который через повышение содержания цАМФ в энтероцитах стимулирует экскрецию хлоридов, что усугубляет диарею.

В большинстве случаев на этой стадии инфекционный процесс может завершиться (гастроинтестинальная форма).

В тяжелых случаях возникает бактериемия и генерализация инфекции, что приводит к септицемии.

Эта форма сальмонеллеза наиболее характерна для S. Typhimurium и S. Enteritidis. Ее развитие обусловлено белками вирулентности, которые кодируются островом патогенности SPI-2. Данные белки подавляют фагоцитоз, что обеспечивает выживание и размножение бактерий внутри фагоцитов, их проникновение в кровь и паренхиматозные органы.

В результате сальмонеллы могут вызывать дистрофические изменения в пораженных органах (селезенка, печень) с формированием вторичных гнойных очагов.

Обычно болезнь заканчивается выздоровлением, однако септические формы инфекции могут приводить у летальным исходам.

Иммунитет

Постинфекционный иммунитет непродолжительный, нестойкий, типоспецифический. В сыворотке больных и реконвалесцентов обнаруживаются агглютинины, преципитины, бактериолизины и другие антитела. Заболевание, вызванное одним сероваром, не создает иммунитета к другим, а перенесенная инфекция не исключает реинфекцию.