Мазок из зева на дизентерию
Клиническая бактериология занимается диагностикой инфекционных процессов, возникающих на фоне конфликтных ситуаций между иммунными механизмами, обеспечивающими сохранение постоянства внутренней среды организма, и микробами нормальной микрофлоры.
В бактериологической лаборатории исследуется клинический материал на микрофлору и чувствительность к антибиотикам и бактериофагам из:
- Зева;
- Носа;
- Мокрота;
- Грудное молоко;
- Отделяемое с коньюктивы глаз;
- Уха;
- Раны;
- Половых органов;
- Эякулята;
- Простатического сока;
- Мочи;
- Крови на стерильность;
- Крови на гемокультуру;
- Кал на дисбактериоз;
- Кал на сальмонеллез;
- Кал на дизентерию;
- Кал на условно патогенные бактерии;
- Грибковые инфекции.
Производятся исследования на:
Осуществляется постановка серологических реакций на различные инфекции:
- Кровь на брюшной тиф — реакция Видаля;
- Кровь на Ви-гемагглютинацию.
В перечень услуг также включены бактериологические исследования на медицинский осмотр — мазки из зева и носа на стафилококк, дифтерию, кал на дизентерию и сальмонеллёз.
Часы работы: 8:00 — 15:12.
Забор материала: 8:00 — 10:00.
Выдача анализов: 14:00 — 15:00.
Срок исполнения: от 2 до 10 дней (в зависимости от вида исследования).
В бактериологической лаборатории работают высококвалифицированные специалисты.
Правила забора клинического материала на микробиологическое исследование
Для сбора кала используют стерильные одноразовые баночки с лопаточкой. Кал собирают после естественной дефекации больного или со стерильной бумаги помещённой в чистое судно, из разных мест, в количестве не менее 2-5 г. Материал доставляют в лабораторию не позднее двух часов с момента взятия.
В стерильный контейнер собирают среднюю порцию свободно выпущенной мочи в количестве 15-20мл. Перед взятием материала больной должен совершить тщательный туалет наружных половых органов.
Рекомендации для мужчин:
- Тщательно вымыть руки.
- Тщательно вымыть половой орган тёплой водой с мылом и высушить стерильной салфеткой. Обнажить головку полового члена (если не было обрезания) и выпустить небольшую порцию мочи, прервать мочеиспускание и выпустит порцию мочи в контейнер в количестве 15-20мл.
- Закрыть контейнер и передать в лабораторию.
Рекомендации для женщин:
- Тщательно вымыть руки.
- Вымыть половые органы, промежность и область заднего прохода используя стерильные марлевые салфетки и тёплую мыльную воду в направлении спереди назад.
- Промыть половые органы ещё тёплой водой и вытереть стерильной салфеткой.
- Отверстие влагалища желательно закрыть стерильным ватным тампоном. На протяжении всей процедуры держать половые губы раздвинутыми.
- Помочиться, отбросив первую порцию мочи. Собрать порцию мочи в стерильный контейнер 15-20 мл.
- Закрыть контейнер и передать в лабораторию.
Перед сцеживанием молока женщина моет руки с мылом тщательно обрабатывает соски и около сосковую область смоченными 700 спиртом ватными тампонами; каждая железа обрабатывается отдельным тампоном.
Для исследования мазков из зева и носа на микрофлору и чувствительность к антибиотикам необходимо прийти в лабораторию строго натощак, зубы не чистить, рот не полоскать.
Сбор мокроты производят утром, предварительно почистив зубы и прополоскав рот кипяченой водой. Материал собирают с соблюдением правил асептики в стерильную посуду. Доставить в лабораторию в течение 1-2 часов.
Забор крови производится в процедурном кабинете, строго натощак.
Для исследования мазков из зева и носа на дифтерию необходимо прийти в лабораторию строго натощак, зубы не чистить, рот не полоскать.
Забор клинического материала осуществляется в лаборатории. Накануне не капать в глаза лекарственные средства
Забор клинического материала производится в кабинете специалиста.
Дифтерия – инфекционное заболевание, возбудителем которого стали бактерии, локализующиеся на ротоглотке, носовых проходах. Реже болезнь поражает глаза и ушную раковину. Внешним признаком патологии, является налет в виде пленки на очаге поражения. Для определения клинической картины необходим мазок на дифтерию.
Показания для проведения анализа
Определить наличие палочки Леффлера, которая является возбудителем дифтерии, можно по симптомокомплексу. Такие проявления станут побудительной причиной для сдачи мазка на дифтерию:
- резкий скачок температуры, гипертермия достигает отметки 38 градусов и выше,
- сильные головные боли, общее недомогание,
- при дифтерии сильные приступы тахикардии,
- увеличение и уплотнение лимфатических узлов, расположенных около очага поражения, при пальпации они болезненные.
Если дифтерия не токсической формы, через три дня нормализуется температура, пленка приобретает мутно-белый цвет. При токсической форме дифтерии к симптомам прибавляется лихорадка, синюшный цвет носогубного треугольника, снижение артериального давления. При интоксикации появляются галлюцинации, отек и уплотнение в области шеи.
Патология входит в список заболеваний, против которых проводится вакцинация в детском возрасте. При несвоевременном обнаружении и лечении дифтерия способна вызвать:
- асфиксию (удушье),
- токсический шок,
- почечную недостаточность,
- поражение нервной системы,
- аномалии сердечной мышцы (миокардит).
В частых случаях мазок на флору и наличие палочки Леффлера, проводится не только для постановки диагноза и подбора терапии, но и для профилактики:
- при трудоустройстве в детское заведение, сферу питания, медицинское учреждение, берется мазок на дифтерию,
- перед началом учебного года,
- во время беременности, чтобы исключить риск осложнений,
- после контакта с инфицированным дифтерией.
С помощью профилактических мероприятий удается предотвратить распространение эпидемии, связанной с бактериальным возбудителем.
Подготовка перед сдачей мазков
Для достоверности анализа на дифтерийную палочку, необходимо соблюдать ряд рекомендаций. С учетом того, что мазок берется с ротовой полости и носовых проходов перед забором необходимо отказаться:
- от сосудосуживающих назальных препаратов за два дня до процедуры,
- от применения мазей на основе антибиотиков,
- в день сдачи мазка из носоглотки от приема пищи,
- непосредственно перед анализом от чистки зубов.
Если применяются препараты местного действия, в составе которых антибиотики, то их исключают из терапии за 2 дня до сдачи мазка на дифтерию. Прием перорально антибиотиков прекращается за две недели до анализа. При нарушении рекомендаций результат бактериологического исследования может быть неточным, что повлияет на дальнейшее лечение дифтерии.
Забор материала из зева и носа
Процедура проведения мазка на флору несложная, здесь нет необходимости в оборудовании, основное требование – стерильность инструментов.
Для исследования на предмет дифтерии собирается слизь или фрагменты пленки со стенок горла. Предварительно пациент предупреждается о нежелательности приема пищи перед процедурой. Если он поел, тщательно полощется ротовая полость, забор анализа на дифтерию проводится по истечении 2 часов.
Мазок из зева делается специалистом, условия для забора – нельзя касаться слизистой горла или языка, избегать контакта с зубами. На данных участках локализуются ложнодифтерийные палочки, по своему строению они схожи с оригиналом, но возбудителем заболевания не являются. Если в полости есть очаги пленочного налета, мазок берется по краю.
Последовательность процедуры:
- пациентом принимается позиция, лежа или сидя,
- максимально широко открывается рот, при помощи шпателя фиксируется язык, для предотвращения рвотного и глотательного рефлексов,
спиртом обрабатывается зона забора, - для процедуры берутся стерильные ватные или марлевые тампоны,
- их наматывают на деревянную или металлическую палочку,
- помещается конструкция в 9% физиологический раствор,
- осторожно, не касаясь стенок ротовой полости, берут мазок из зева с места наибольшей концентрации палочки Леффлера, по краю пленочного налета.
Палочка с биологическим материалом помещается в стерильную пробирку для дальнейшего микроскопического исследования.
Алгоритм проведения процедуры мазка из носа не отличается от анализа из зева. Перед процедурой необходимо очистить слизистую носовых проходов от уплотнений в виде корочек и скопившего секрета. Для этой цели подойдут ватные палочки, смоченные в физиологическом растворе, заменить их можно марлевыми или ватными жгутиками.
Удаление корочек проводится с максимальной осторожностью, чтобы не повредить целостность капилляров. Кровяные выделения повлияют на точность результата риноцитограммы. Тампон для взятия мазка на дифтерию из носа готовится по тому же принципу, что и для зева, только меньшего размера. Биологический материал берется со всей поверхности носовых проходов, помещается в стерильную пробирку для последующего анализа.
После получения мазка из носоглотки и носовых проходов, материал поступает в лабораторию для высевания флоры. Тампоны со слизью помещают в специальную среду, стимулирующую их рост. Лаборант отмечает, какие из них являются доминантами. Процесс роста бактерий занимает 48 часов. Меняя состав питательной среды до тех пор, пока колония перестает расти. Затем приступают к анализу колониеобразующей микрофлоры.
Расшифровка полученных результатов
Исследованием результата мазка из носа и зева занимаются врачи-микробиологи, занося результаты в специальный бланк. Нормальное содержание сапрофитов и условных патогенов: или колониеобразующих микроорганизмов на 1 миллиметр. Болезнетворные бактерии должны отсутствовать полностью.
После определения рода и вида, тестируют чувствительность к антибиотикам, противомикробным и антибактериальным препаратам. Лечение дифтерии назначается с учетом медикаментозного препарата, к которому менее устойчив патогенный микроорганизм.
Мазок из носа и зева на стафилококк (микрофлору) – это один из видов бактериологического исследования, целью которого является изучение микробной флоры носоглотки. Он позволяет не только выявить микроба, послужившего возбудителем заболевания ЛОР-органов, но и определить его чувствительность к антибиотикам.
Если у пациента на протяжении достаточно длительного времени сохраняются симптомы ринита, то можно предположить его аллергическую природу. Для подтверждения диагноза в данном случае выполняют взятие слизи из носа на эозинофилы.
Показания к исследованию
Мазок из носа и зева на микрофлору назначается с целью выявления возбудителя тонзиллита (ангины), фарингита. Некоторые пациенты считают данные заболевания несерьезными и потому не требующими никаких лабораторных исследований. Однако следует знать, что нередко они вызываются бета-гемолитическим стрептококком группы А. Коварство этой бактерии состоит в том, что она не только вызывает инфекции, поражающее горло, но и может стать причиной развития у пациента таких тяжелых заболеваний как ревматизм и гломерулонефрит.
Мазок из носа и зева на стафилококки чаще всего назначается пациентам, страдающим фурункулезом. Дело в том, что очень часто возбудителем данного заболевания являются штаммы золотистого стафилококка. Они образуют колонии на слизистой оболочке ротоносовой полости, откуда и попадают на участки кожи, вызывая гнойно-воспалительное поражение волосяных фолликулов.
Мазок на эозинофилы: что это такое?
Если у пациента на протяжении достаточно длительного времени сохраняются симптомы ринита, то можно предположить его аллергическую природу. Для подтверждения диагноза в данном случае выполняют взятие слизи из носа на эозинофилы. Правильно этот анализ называется риноцитограммой. Он строится на анализе цитологической картины, то есть наличия в исследуемом биологическом материале тех или иных клеток (эритроциты, нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы, лимфоциты, микроорганизмы).
Мазок из носа и зева на микрофлору назначается с целью выявления возбудителя тонзиллита (ангины), фарингита.
При аллергическом характере ринита в риноцитограмме будет повышено число эозинофилов, а при бактериальном – нейтрофилов. С целью проведения дополнительной дифференциальной диагностики этих двух заболеваний врач может назначить пациенту и анализ крови на лейкоформулу, который показывает соотношение субпопуляций белых клеток крови между собой.
Подготовка к мазку из горла и носа
Подготовка к анализу достаточно проста:
- За 72 часа до взятия биологического материала необходимо прекратить применение спреев, назальных мазей и растворов для полоскания горла, содержащих в своем составе антибиотики или иные противомикробные средства. Это связано с тем, что препараты этих групп изменяют микробное соотношение, что может стать причиной неправильно поставленного диагноза и, соответственно, неверно подобранного лечения.
- Утром, в день сдачи анализа, не следует чистить зубы, пить и принимать пищу, так как это также может стать причиной изменения микробиологической и цитологической картины мазка.
Как берется мазок из носа и зева?
Для взятия мазка из горла пациенту предлагают слегка запрокинуть голову назад и широко открыть рот. На язык надавливают шпателем и проводят по слизистой оболочке зева и миндалин стерильным ватным тампоном, намотанным на тонкую палочку. Процедура совершенно безболезненная, но неприятная, так как прикосновение тампона к задней стенке горла может спровоцировать достаточно сильные рвотные позывы.
При взятии мазка из носа сначала в одну, а затем в другую ноздрю вводят стерильный тампон и проводят им по стенкам носовой полости.
Процедура взятия мазка у детей точно такая же, как и у взрослых. При заборе материала у ребенка первых лет жизни необходим помощник, который будет фиксировать голову малыша в момент процедуры.
Мазок из носа и зева на стафилококки чаще всего назначается пациентам, страдающим фурункулезом.
Тампоны с кусочками слизи переносят в пробирку с питательной средой или стерильным физиологическим раствором, которые вместе с направлением доставляют в лабораторию.
Сколько дней делается анализ?
Полученный материал может быть исследован разными способами.
Быстрые антигенные тесты. Позволяют выявить присутствие в слизи из носоглотки определенного типа бактерий. Чаще всего этот анализ используется для обнаружения бета-гемолитического стрептококка группы А. Быстрые антигенные тесты отличаются высокой чувствительностью и специфичностью. Их результат бывает готов в течение 10–40 минут.
Бактериологический посев. Слизь из носоглотки переносят на питательную среду, а затем пробирку помещают в термостат. В благоприятной среде бактерии начинают активно размножаться, приводя к образованию колоний. Этот метод лабораторной диагностики позволяет выявить возбудителя того или иного заболевания ЛОР-органов, а также определить его чувствительность к антибактериальным препаратам. Длительность бактериологического исследования составляет от 3 до 10 дней.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР). В ходе этого анализа устанавливают, какие именно микробы населяют полость носа и горла по их фрагментам ДНК, содержащимся в слизи. В зависимости от используемой методики длительность исследования составляет от нескольких часов до нескольких дней.
Расшифровка результатов
Расшифровка анализа мазка из зева и носа достаточно сложна. Для правильной оценки полученных результатов следует учитывать взаимосвязь между выявленными микроорганизмами и имеющейся патологией. Например, если пациент страдает рецидивирующим фурункулезом, то выявление в мазке золотистого стафилококка будет иметь диагностическую ценность. В то же время выявление у этого же пациента грибков рода кандида не является основанием для постановки диагноза микотического поражения и, соответственно, не требует лечения.
Мазок из зева и носа позволяет не только выявить микроба, послужившего возбудителем заболевания ЛОР-органов, но и определить его чувствительность к антибиотикам.
Даже у совершенно здорового человека в посеве слизи с носа и зева могут обнаруживаться разные микроорганизмы. Присутствие условно-патогенных микробов является вариантом нормы, если их количество незначительно, и они не вызывают заболеваний.
При микроскопии мазка из носа могут обнаруживаться и следующие типы клеток:
- эозинофилы – в норме их не должно содержаться более 10% от общего числа лейкоцитов в мазке. Повышение этого показателя является лабораторным признаком аллергического ринита. В тоже время нормальное содержание эозинофилов не позволяет полностью исключить аллергическую природу ринита. Еще одной причиной повышенного содержания эозинофилов в мазке из носа может стать эозинофильный неаллергический ринит;
- нейтрофилы – повышенное содержание в мазке нейтрофилов свидетельствует о том, что воспалительный процесс в полости вызван бактериями или вирусами и находится в острой стадии;
- лимфоциты – повышенный уровень лимфоцитов в риноцитограмме чаще всего бывает обусловлен хроническим воспалением слизистой оболочки носовой полости;
- эритроциты – в норме отсутствуют. Их появление в мазке связано с повышенной проницаемостью стенок кровеносных сосудов слизистой оболочки носа, что наблюдается при ринитах, вызванных вирусом гриппа или дифтерийной палочкой.
Видео с YouTube по теме статьи:
Некоторые считают дифтерию проблемой из прошлого, болезнью-рудиментом, с которой повсеместно удалось успешно справиться. Но расслабляться еще рано. До сих пор регистрируются случаи этого заболевания, среди детей и взрослых циркулируют бактерии дифтерии. Поэтому о том, когда и какие анализы нужно сдавать на дифтерию, должен знать каждый.
Характеристика заболевания и особенности диагностики дифтерии
Дифтерия — это инфекционная болезнь, которой можно заразиться только от человека. Однако опасным может быть не только заболевший, но и носитель токсигенного (то есть производящего токсины) штамма. Такое носительство протекает без каких-либо признаков, и его можно обнаружить только с помощью лабораторного обследования.
Бактерии дифтерии — бациллы Леффлера — могут передаваться по воздуху с мельчайшими частичками влаги или пыли. Также бактерии могут передаваться при контакте с зараженными предметами обихода и изредка через зараженную еду.
При контакте с заболевшим или с носителем токсичного штамма вероятность заболеть примерно 15–20% [1] . Первые симптомы появляются через 2–10 дней. Повышается температура до 38–39°С, появляется боль в горле, становится сложно глотать. Признаки дифтерии сходны с ангиной, но при этом возникают и специфические симптомы.
Главная отличительная особенность — это тип поражения миндалин. На них образуется налет в виде плотных пленок. Свежие пленки снимаются достаточно легко, но они быстро утолщаются и становятся плотными. Если такую пленку с силой снять с миндалины, то под ней чаще всего образуется кровоточащая эрозия.
Такая типичная клиническая картина с высокой температурой, выраженной интоксикацией, ознобами, головной болью и бледностью кожи развивается у непривитых и имеющих слабый противодифтерийный иммунитет людей. При более высоком уровне иммунитета вместо пленок может образовываться рыхлый налет, а само заболевание протекает менее остро. Поэтому атипичные формы дифтерии легко можно спутать с обычной ангиной [2] .
Однако дифтерия страшна не только сама по себе, но и своими осложнениями.
Среди них выделяют:
- инфекционно-токсический шок;
- миокардит — поражение сердечной мышцы;
- полинейропатию — поражение периферических нервов;
- нефрозы — дистрофические процессы в почках;
- ДВС-синдром — нарушение свертываемости крови;
- круп — осложненное стенозом гортани воспаление дыхательных путей [3] .
Еще в середине XX века дифтерия была распространенной проблемой, вызывавшей осложнения, связанные с риском для жизни, у каждого пятого взрослого пациента и у каждого десятого заболевшего ребенка [4] .
В 1955 году в СССР было официально зарегистрировано около 321 000 случаев дифтерии [5] . В 2015 году, 60 лет спустя, на всей территории России было зарегистрировано только 2 заболевших [6] . То есть заболеваемость снизилась практически в 160 000 раз.
Так как в России регистрируются только единичные случаи дифтерии, далеко не все молодые врачи за свою практику сталкивались с этим заболеванием. Тем более что она может протекать в стертой или бессимптомной форме, маскируясь под ангину и менее опасные заболевания. Поэтому своевременная лабораторная диагностика играет значительную роль в выявлении этого заболевания.
Кроме обследования пациентов с подозрением на дифтерию проводится регулярный серомониторинг — определение уровня иммунитета среди группы населения. Например, среди детей 3–4 лет, 16–17 лет и взрослых. Это помогает оценить коллективный иммунитет, вероятность возникновения вспышек и распространения заболевания [7] .
Для диагностики дифтерии используются несколько методов — бактериологический, серологический и ПЦР-анализ, а также клинический анализ крови.
Основным методом, который позволяет установить диагноз, является микробиологическая диагностика дифтерии. Ее проводят при ангине с характерным выпотом на миндалинах, при подозрении на инфекционный мононуклеоз, паратонзиллярный абсцесс или ларинготрахеит. Это позволяет на самом раннем этапе исключить дифтерию.
С профилактической целью бактериологическое исследование проводят для поступающих на лечение или на работу в психоневрологические стационары, противотуберкулезные учреждения, дома ребенка. Такое обследование проводится, чтобы предотвратить вспышки инфекции в закрытом учреждении [9] .
Для проведения бактериологического исследования с пораженной поверхности забирают мазок и помещают его в транспортную питательную среду. Примерно через 5–7 дней из лаборатории приходит ответ, есть ли в биоматериале рост дифтерийной палочки и обнаружены ли у нее токсигенные свойства. В норме роста быть не должно. Если в результатах исследования указан нетоксигенный штамм, это тоже в большинстве случаев не страшно. Достаточно провести профилактику по назначенной врачом схеме. А вот если выявлен токсигенный штамм, придется пройти полный курс лечения и обследовать всех контактировавших с пациентом лиц.
Как дополнение к бактериологическому методу могут использовать ПЦР-диагностику . Показания к ее проведению те же, что и для бактериологического метода. Но для установления диагноза она уже не является обязательной. Материал для ПЦР-исследования забирают из очага поражения и помещают в специальную среду. В лаборатории выделяют гены дифтерийной бактерии, в том числе отвечающие за ее токсичность. Интерпретируют результат так же, как и при бактериологическом методе: в лучшем случае следы присутствия бактерии не должны обнаружить. Если же выявлен токсигенный штамм, придется срочно проходить лечение.
Еще один вспомогательный метод — клинический анализ крови. С его помощью нельзя отличить, например, дифтерию от ангины, но можно сказать, что воспаление вызвано бактериальной инфекцией. Для проведения этого анализа также берут кровь из вены. Этот анализ занимает всего 1–2 рабочих дня. При бактериальной инфекции повышается уровень СОЭ, количество лейкоцитов и нейтрофилов.
Анализы на дифтерию можно сдать как в государственных клиниках, так и в частных лабораториях. Анализ крови можно сдать в любой лаборатории и, чаще всего, для этого даже не нужно будет направление врача. А вот специфические анализы на дифтерию проводят уже не все, поэтому лучше заранее уточнить этот момент.
Забор материала лучше сдавать в клинике с собственной лабораторией, особенно это касается бактериологического и ПЦР-исследования. Результаты этих анализов во многом зависят от того, насколько точно соблюдали правила забора мазков, хранения и транспортировки материала. При нарушении на любом из этих этапов можно получить ложный отрицательный результат.
В государственном учреждении по направлению все эти исследования можно пройти бесплатно. В частной лаборатории придется заплатить как за само исследование, так и за взятие биоматериала. Но и уровень сервиса при этом обычно выше. Например, некоторые лаборатории высылают результаты исследований на электронный адрес или публикуют их в личном электронном кабинете пациента, так что возвращаться за бланками уже не нужно. Их можно распечатать самостоятельно в любой момент.
Острые заболевания лечатся незамедлительно. Анализ на дизентерию должен удовлетворять критерию скорости. У взрослых и детей фиксируется и хроническая форма. Тогда проводится анализ кала на дизентерию. Можно это сделать в рамках анализа состава микрофлоры, как при дисбактериозе. Принцип выращивания аналогичный. Быстрый результат даёт наблюдение в микроскоп.
Проблема сдачи бактериологического анализа в уровне достоверности – не превышает 30-50%. Потому врач руководствуется клиническими симптомами. На дизентерию и сальмонеллёз определение заражения заключается в пристальном осмотре окрашенной пробы. Но кал не всегда даёт всходы. Тогда на дизентерию берут кровь с целью обнаружения антител. Проблема в формировании иммуноглобулинов с опозданием (3 дня)…
Что делать?
Недостаточная точность лабораторных исследований обусловлена характерной клинической картиной дизентерии в острых случаях. Исключение – синдром интоксикации, проявляемый отравлением. Бактериологическое исследование проводится из:
Метод высевания занимает время, а дизентерия не длится долго. Проходит за неделю. Этого хватает, чтобы палочки дали всходы на питательной среде. Типичный протокол предусматривает отведение пятидневного срока на мероприятие (invitro.ru/analizes/for-doctors/571/17420/).
В школе учат: от кишечных инфекций ежедневно умирает 2100 детей. При беременности маме рассказывают, как опасно не мыть руки перед едой. Точность результата невысока. Но посев остаётся одним из вариантов.
Для заражения достаточно попадания внутрь организма человека менее 100 бактерий. Диагностика осуществляется 2 методами:
3-кратный бакпосев шигеллы на питательную среду при последующем исследовании даёт точность диагноза 40-60%. Экспресс-анализ кишечных инфекций проводится без выведения культур. Материал исследуется на наличие специфичных антигенов, токсинов. Пробы берутся из мочи, слюны, выделений ануса, крови. Применяются иммунологические методики, наделённые повышенной чувствительностью и избирательностью:
- иммуно-ферментный анализ (ИФА);
- иммунофлуоресценции (РИФ);
- реакция агглютинации латекса (РАЛ);
- полимеразной цепной реакции (ПЦР);
- реакции коагглютинации (РКА).
Проблема заключается в выпуске реактивов, индикаторов. Российскими предприятиями изготавливается спектр продукции для идентификации биопродуктов шигеллы Зонне.
Антитела крови распознаются в реакции пассивной (непрямой) гемагглютинации. Методы легли в основу исследовательских наборов, выявляющих шигеллы Флекснера, Флекснера-6, Зонне. В ходе процесса исследуются парные сыворотки, взятые в начале заболевания и через 1 неделю. Прочее выполняется согласно инструкции, идущей в комплекте. Положительный результат засчитывается при изменении плотности антител между пробами от 8 раз.
При попытках поставить этиологический диагноз по острой дизентерии на основании 4-кратного изменения титра возникают систематические ошибки. Результат РИГА сопоставляется с эпидемической обстановкой. Одновременно учитывается предполагаемый срок заболевания, особенности течения. Титр не должен быть ниже 1:400. Недостаточная чувствительность обусловливает нецелесообразность использования метода для выявления дизентерии.
При нетипичном развитии заболевания врач прописывает визуальный осмотр толстой кишки. Согласно стадиям развития заболевания выделяются внешние признаки – катаральные, геморрагические, язвенные, некротические, фиброзные. При хроническом течении часто фиксируется атрофия эпителиального слоя.
Иногда диагноз выставляется при вспомогательном изучении внешнего вида испражнений. Распознают выраженное поражение дистального отдела толстого кишечника по обилию слизи (лейкоцитов). Обнаружение эритроцитов говорит о наличии кровоизлияний.
Преимущество бактериологического посева в определении подходящего антибиотика. Выращиваются шигеллы – неподвижные (в отличие от эшерихий и сальмонелл) грамотрицательные палочки длиной 23 микрон, шириной 0,6. Бактерии анаэробные, способны существовать в кислородных средах.
Делается от 3 проб. Такой анализ в большей части случаев даёт правильный результат. Для высевания подходит любая среда. Шигелла – универсальный микроб. Штамм образует S-колонию, за исключением Зонне, разрастающемся в R-колонию.
В процессе роста не образуются ферменты, среда кислая. Шигеллу Зонне отличают по способности медленно расщеплять сахарозу и лактозу. Прочие штаммы различить по биохимическим признакам не представляется возможным. Для дифференциации рассматриваются экспрессированные на оболочке антигены. По структуре они напоминают представленные на кишечных палочках. Шигеллы могут образовывать с патогенными эшерихиями ассоциации.
Бакпосев взращивается несколько дней. Лабораториям требуется 5 суток. Назначается лечение – врач руководствуется клиническими проявлениями заболевания. Стоит удовольствие от 700 рублей.
При сборе фекалий старайтесь не захватывать кровь. При невозможности немедленного высевания проба кала консервируется в глицериновой смеси, либо растворе фосфорнокислых солей.
Биохимический анализ кала
В зарубежной практике осознали: ждать 5 дней опасно, учитывая процент смертей (до 40%). Учёные ищут токсины Шига. Яды выделяет даже атипичный штамм кишечной палочки. При дизентерии исследуется кал на признаки токсина.
Штамм кишечной палочки STEC – в научной среде О157 – ответственен за большую часть эпидемических вспышек. В 2011 году привёл к смерти 32 немцев. На долю STEC приходится до трети случаев кишечных инфекций. Пути заражения, клинические признаки напоминают дизентерию. Атипичные штаммы кишечной палочки имеют значение.
Сдавать кал нужно в начале болезни. В последующем становится сложно обнаружить токсин. Метод исследования дополняет бакпосев, серологический анализ на антитела. Для дифференциации с кишечной палочкой применяются электрофорез. С целью идентификации токсинов Шига 1 и 2 используется метод генного ПЦР копирования.
Цитотоксин Шига вырабатывается преимущественно Shigella Dysenteriae. Указанное исследование не всегда подходит для выявления дизентерии.
Серологический анализ
Через 3 дня организм начинает избавляться от дизентерии. Иммунная система формирует антитела (находятся в крови). В ходе исследования используется реакция пассивной гемагглютинации. Метод дополнителен при дизентерии – лабораторная проверка отрицательного результата, выданного диагностикой при помощи бакпосева. Серологический анализ хорош при запоздалом обращении пациента к врачу.
Антитела в крови исчезают через 2-3 года. Вспышка заболевания зарегистрирована через значительный промежуток времени. Минус методики – сложность выявления дизентерии при затяжном характере. Плотность антител падает. В результате процент тестов снижается до 40-30%. В начальной стадии даётся правильный ответ в исследовании до 80% случаев.
Обходят проблему повторным сбором анализа:
- При обращении пациента.
- Через неделю.
Достоверность результата оценивается по скорости изменения плотности антител в сыворотке. Положительный диагноз ставится при восьмикратном изменении. Антигены появляются в моче – могут фиксироваться соответствующим анализом.
Кожная проба
Токсический шок вызывает специфического рода высыпания на коже. В ослабленном болезнью организме достаточно появления дополнительно вводимого вещества для наблюдения реакции (гидролизат дизентерийных бактерий). Он в обилии содержит нужный токсин. Проба в количестве 0,1 мл вводится под кожу, в течение суток наблюдается реакция (как с Манту).
Общая картина исследований
На карантине врачи занимаются причиной возникновения ситуации. За прошедшие 3 столетия больше умирало от дизентерии бойцов, нежели в период сражений. В период Первой мировой войны сильно страдала немецкая армия в Восточной Африке. На 1000 солдат приходилось 277 больных дизентерией. Кишечные инфекции – гроза будущих гитлеровцев.
Помимо крови, мочи и кала исследуется визуально задний проход. Это копрологический метод. Бактериологическое исследование производится на основе:
- Продуктов, местной воды – чтобы установить источник заразы.
- Трупов пациентов.
- Промывных вод желудка.
Материалы хранятся в холодильнике до суток. Для сбора фекалий применяется деревянная, стеклянная палочка. Под бактериологический посев берутся среды Плоскирева и Эндо (реже Левина). Повышение всходов обеспечивается добавками Левомицетина, Синтомицина. Селенитовая среда используется для повышения продуктивности шигелл Зонне. Онаслужит для высевания рвотных масс, промывных вод.
Штамм выращивается при температуре 37 градусов Цельсия в течение 20 часов. На второй день колонии высевают на среду Ресселя. Для дифференциации используется внешний вид штамма:
- Всходы шигелл бесцветные, мягкие, правильной круглой формы, диаметром от 1 мм.
- Штамм Зонне грубый на вид, с изрезанным периметром.
Среда Ресселя содержит углеводы, по изменению собственного цвета позволяет судить о засеянной микрофлоре. Проводится дифференциация между штаммами шигелл Флекснера, атипичной кишечной палочкой, сальмонеллами. На третий день берётся кровь, начинается оценка результатов по питательным средам (внешний вид, цвет). Кал содержит много бактерий. Выбираются штаммы по внешнему виду похожие на шигеллы, по активности в отношении углеводов. Штамм Зонне расщепляет лактозу и сахарозу с образованием кислой среды, но процесс медленный.
Пристальное внимание уделяется неподвижным палочкам, не расщепляющим мочевину. Что касается шигелл Зонне, они ферментируют лактозу медленно. Для окончательной дифференциации штаммов используют прочие питательные среды: Гисса, Клиглера, мясопептонный агар, Симмонса, Кристенса. Аминокислоты некоторыми штаммами расщепляются до индола.
Антитела ищут по иммунологическим реакциям, подкрашивают для наблюдения в микроскоп. Визуальное исследование кишечника проводится в виде дополнительной меры, позволяющей оценить степень патогенных изменений. Полезно визуальное наблюдение кала.
Дифференциация прочих заболеваний
Чтобы назначать дизентерийный бактериофаг, врач должен убедиться в диагнозе. Целая группа кишечных инфекций даёт аналогичные симптомы. Это сальмонеллёз, холера, отравление, диарея. Лечение и симптомы мало связаны между собой. Главенствующая роль отводится анамнезу – что предшествовало заболеванию. Так удаётся выявить факторы, позволяющие думать на отравление. Носительство бактерий проверяется лабораторными исследованиями.
Вакцинация
Россияне уверены: прививка от дизентерии – лучшее средство… Сведений об этом в мировом интернете нет. Дезинфекция может предотвратить заражение. Дизентерийные вакцины в стадии разработки. Есть шансы испытания препаратов на россиянах.
Создание вакцины – решаемая задача лабораторий мира. Учёные уверены: опасность дизентерии сильно преуменьшена, новые виды тестов выявляют солидные цифры. Исследования показывают, что повторные заболевания дизентерией встречаются реже, нежели первичные. Это рычаг, которым ВОЗ хотят перевернуть Земной шар.
Специфика штаммов едва ли позволит создать единственное лекарство на все случаи жизни. Медики надеются прививать виды отдельно: Флекснера 2а, 3а, 6 и Зонне. Механизм прививки изучается на примере кератоконъюктивита у морских свинок, воспалении лёгких у мышей. Планируются исследования на людях. Направления движения лабораторий:
- Ослабленные формалином мёртвые клетки.
- Антигены.
- Гликоконъюгат.
Читайте также: