Метод флотации кала при лямблиозе

Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиты L. intestinalis, в оформленных фекалиях - только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях - трофозоиты и цисты.

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования.

· Микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий.

Подготовка к исследованию.

1. Предварительно нанести на предметные стекла 1-2 капли физиологического раствора, раствора Люголя и метиленового синего.
2. Из пробы кала выбрать обычную порцию и порцию с патологическими признаками (слизь, кровь), смешать с каплей подготовленных на предметном стекле растворов, накрыть покровным стеклом.

Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо применять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях и проводить многократные исследования (от 2 - 3 до 6 - 7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод флотации. В большинстве случаев цисты L. intestinalis в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении L. intestinalis могут колебаться от 2 - 3 суток до 2 - 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

В дуоденальном содержимом трофозоиты L. intestinalis обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании L. intestinalis в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов. В настоящее время всё реже используется этот метод, т.к. он очень болезненный для пациента и требуется специально подготовленные сотрудники.

· Метод иммунохроматографического выявления антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноХА - Лямблия - Экспресс).

Набор ИммуноХА - Лямблия - Экспресс предназначен для быстрого, качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммунохроматографического анализа при диагностике лямблиоза и мониторинге лечения.

В основе определения лежит принцип иммунохроматографического анализа. Исследуемый образец всасывается поглощающим участком индикаторной полоски; при наличии в образце антигена лямблий последний вступает в реакцию с моноклональными антителами к антигену лямблий, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген–антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и связывается с другими антителами, иммобилизованными на мембране в виде линии, окрашивая ее в розово-фиолетовый цвет. Не связавшиеся реагенты продолжают двигаться по мембране дальше и образуют розово-фиолетовую линию в зоне контроля. Результаты реакции оценивают визуально(см.Рис. 1).

Положительный результат	Отрицательный результат	Ошибочный результат

Рисунок 1-Индикаторные полоски тест-системы

Выявление в рабочей зоне двух линий (тест и контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. в анализируемом образце фекалий содержится антиген лямблий, что свидетельствует о наличии в кишечнике самих паразитов.

Выявление в рабочей зоне только одной линии (контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. в анализируемом образце антигена лямблий нет или же его концентрация ниже порогового значения.

Если линия контроля не появилась, анализ признается недействительным, и определение необходимо повторить с использованием другой индикаторной полоски.

· Иммуноферментный анализ для определения антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноФА – Лямблия - Ar)

Набор ИммуноФА-Лямблия-Аг предназначен для качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммуноферментного анализа (ИФА) при диагностике лямблиоза и мониторинге его лечения. Набор рассчитан на проведение анализа 94 неизвестных образцов и 2 контрольных проб (всего 96 определений).

Оптическая плотность отрицательного контроля при правильно проведенном анализе должна находиться в пределах 0,050 - 0,100 ед. ОП, а положительного - в пределах 1,0 - 2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Иммуноферментный анализ для определения антител
к антигенам лямблий в сыворотке крови.

Тест-система предназначена для выявления IgM и IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови обследуемых лиц при диагностике острого лямблиоза в комплексе с другими методами, при изучении патогенеза и иммуногенеза лямблиоза в клинических и научно-исследовательских лабораториях.

При правильно проведенном анализе оптическая плотность отрицательного контроля (ОП К¯) должна находиться в пределах 0,050–0,100 ед. ОП, а положительного – в пределах 1,0–2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей ОП К¯на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, ОП К¯ контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Лямблии обитают в начальном отделе тонкой кишки, поэтому для него характерно развитие местных иммунологических реакций. Однако и в сыворотках крови зараженных лямблиями людей выявляются антитела к их антигенам, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов. При воспалении слизистой оболочки кишечника ее проницаемость возрастает, и попадание антигенов лямблий в периферическую кровь увеличивается в результате резорбции. Выявление IgМ к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии острого лямблиоза, диагностика которого возможна на 10 - 14 день от начала инвазии. Выявление IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии хронического лямблиоза.

Анализ на антитела нельзя назвать точным методом диагностики данного заболевания. Обычно полностью антитела к L. intestinalis исчезают из крови через 2-6 месяцев. К тому же иммуноглобулины класса G и M могут появиться в ответ на проникновение иных видов паразитов и бактерий.

В результате сравнительной характеристики лабораторных методов исследования был сделан вывод, что копрологический метод исследования на лямблиоз является наиболее точным и оптимальным, однако требует высокой подготовки и знаний медицинского лабораторного техника при проведении этого исследования. Метод ИФА в основном используется в совокупности с другими методами, поэтому он чаще используется для профилактики.

Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Лечение лямблиоза в первую очередь направлено на уменьшение проявлений у ребенка признаков интоксикации и аллергии, а также усиления собственной иммунной защиты организма. Лечение лямблиоза должно быть комплексным, что подразумевает назначение врачом противолямблиозных препаратов и соблюдение диеты ребенком.

Пути заражения лямблиозом

Лямблии – это одноклеточные паразиты, которые живут в кишечнике и являются причиной диареи у детей. Болезнь, вызванная заражением лямблиями, называется лямблиоз.

Лямблиозом болеют дети всех возрастов, начиная с 3-месячного возраста, причем частота заражения лямблиями у детей в возрасте до 9 лет в 3 раза превышает таковую у взрослых из-за отсутствия естественного иммунитета к этой инвазии и высокого уровня пристеночного пищеварения, способствующего размножению лямблий в кишечнике. По статистике мальчики поражаются лямблиями в 2-3 раза чаще, чем девочки.

Если полностью излечиться от глистов (остриц), возможно, так как они не размножаются в организме и при отсутствии повторного заражения и соблюдении определенных условий (тщательно мыть руки, овощи, фрукты, зелень и т.п), острицы погибают и без какого-либо лечения. То с лямблиями дела обстоят иначе: благодаря способности лямблий размножаться в полости кишечника, возбудитель может очень длительное время находиться в организме ребенка или взрослого.

Источниками инфекции является больной лямблиозом. Механизм передачи лямблиоза – фекально-оральный. Пути распространения – водный, контактно-бытовой и пищевой.

• Водный путь – основной в распространении лямблиоза. Цисты лямблий сохраняются в воде до 3 месяцев, особенно при температуре не выше 4-20°C. В основном водные вспышки лямблиоза регистрируются в конце зимы - начале весны, что связано с таянием снегов и загрязнением цистами лямблий воды открытых водоемов. В сточной воде в летнее время цисты лямблий выживают до 3-4 месяцев. В большинстве случаев заражение человека лямблиозом происходит через питьевую воду (цисты лямблий обнаруживаются в хлорированной воде из-под крана). Следует отметить, что многие бытовые водоочистительные фильтры так же не способны полностью очистить воду от цист лямблий. Однако кипячение приводит к мгновенной гибели цист и при температуре 55°С лямблии погибают через 5 минут.
• Контактно-бытовой путь наиболее характерен для детских образовательных учреждений. Заражение происходит через загрязненные цистами руки детей и персонала, а также полы, ковры, игрушки, поверхность мебели и предметов в туалетах, на которых цисты сохраняют жизнеспособность до нескольких суток.
• Пищевой путь – не так распространён т.к. цисты лямблий не размножаются вне организма человека. Возможно заражение при употреблении инфицированных цистами пищевых продуктов, особенно употребляемые без термической обработки (салаты, зелень, овощи, ягоды, фрукты).

Основные симптомы лямблий у детей. (Симптомы лямблиоза)

Лямблиоз может протекать как без клинических проявлений (латентный), так и с клиническими проявлениями в острой или хронической форме.

Длительное паразитирование лямблий в организме ребенка приводит к нарушению функции всех систем организма: изменения ЖКТ, нервной и сердечно-сосудистой системы.

Острая форма чаще всего встречается у детей раннего возраста. Острый период длится обычно несколько дней, после чего лямблиоз чаще всего переходит в подострую или хроническую стадии.

Бледность кожных покровов, особенно лица, отмечается почти у всех больных, даже при высоких показателях гемоглобина. При длительном течении заболевания и высокой степени интоксикаций выделяется резкая бледность кожи носа ("мраморный нос").

Показания к обследованию на лямблиоз

Клиническими показаниями к обследованию на лямблиоз являются имеющиеся болезни пищеварительного тракта, аллергические проявления и др.:

• диарея неустановленной этиологии;
• хронические заболевания желудочно-кишечного тракта;
• дисбиоз кишечника;
• гипотрофия, отставание в физическом развитии;
• дерматиты, крапивницы, экземы, нейродерматиты;
• стойкая эозинофилия крови (повышение уровня эозинофилов);
• иммунодефицитные состояния;
• обструктивные бронхиты, бронхиальная астма;
• аллергии неустановленной этиологии;
• контактные с больным (паразитоносителем) лямблиозом.

Диагностика лямблиоза у детей

Диагноз устанавливают на основании клинических признаков болезни, результатов лабораторного обследования.

Для выявления паразитических простейших лямблий исследуют:

• дуоденальное содержимое (исследовании желчи). При подозрении на лямблиоз исследуют порцию желчи в которой присутствует содержимое просвета двенадцатиперстной кишки. В ней могут быть обнаружены вегетативные подвижные формы лямблий при условии исследования свежезабранной желчи;
• фекалии. Для выявления цистных форм лямблий в фекалиях применяют копропротозооскопические исследования (исследование фекалий на кишечные простейшие). Для обнаружения цист лямблий наиболее эффективно исследовать фекалии не позднее 2-3 часов после дефекации. Исследования при подозрении на лямблиоз при первом отрицательном анализе проводятся 3-4-кратно с интервалом 3-4 дня;
• сыворотку венозной крови (забранной натощак). Серологический метод диагностики является косвенным методом диагностики лямблиоза, поэтому может использоваться как дополнение. Он основан на обнаружении в крови антител, специфичных к антигенам лямблий. Уровень таких антител, относящихся к различным классам иммуноглобулинов (A, G, M), зависит от особенностей иммунной системы ребенка, интенсивности инвазии, формы течения заболевания и ряда других факторов. Антитела к антигенам лямблий появляются на 10-14 день после начала инвазии и присутствуют в крови и секретах человека практически на всех ее стадиях. Через 1-2 месяца после полной элиминации паразита (процесса удаления продуктов его жизнедеятельности из крови почками) концентрация специфичных IqG в крови ребенка резко снижается.

Лечение лямблий у детей и взрослых (схема)

Противолямблиозные препараты обладают побочными эффектами, поэтому проводить лечение зараженных лямблиями, особенно детей, без лабораторного обследования не допускается. Специфическое лечение лямблиоза назначают при обнаружении возбудителя и наличии клинических проявлений болезни. Контактным лицам лечение назначается при обнаружении возбудителя вне зависимости от клинических проявлений ("Профилактика лямблиоза. Методические указания. МУ 3.2.1882-04").

Наиболее эффективен метод трехэтапного лечения лямблиозной инвазии:

• подготовительный этап до 1 - 2 недель;
• этиотропное лечение - это лечение, направленное на устранение причины возникновения заболевания;
• восстановление кишечной микрофлоры.

Контроль эффективности лечения лямблиоза проводят через 5 - 6 дней после лечения. Критерии эффективности лечения: три отрицательных результата копропротозооскопического исследования с интервалом 1 - 2 дня.

Подготовительный этап лечения лямблиоза

Лечение лямблиоза (этиотропное лечение)

Этиотропное лечение лямблиоза предусматривает использование препаратов, направленных на уничтожение паразита и выведение его из организма.

Для избавления организма от токсинов используются как энтеросорбенты – энтеросорбентные препараты (например, энтеросгель, полисорб, отруби, лактофильтрум, СУМС, активированный уголь, карболен, полифепан, смекта, энтеродез и др.), так и инфузионная терапия (например, гемодез, 5%-ный раствор глюкозы, /page/enterosgel и др.).

Специфическое лечение лямблиоза проводится на фоне назначения антигистаминных препаратов.

Для снижения остроты аллергических реакций взрослым и детям назначаются антигистаминные средства в возрастных дозировках (например, зиртек). У детей старше 12 лет препаратом выбора является, например, телфаст, у которого отсутствует седативный и кардиотоксический эффект.

Для лечения лямблиоза врачом назначаются препараты, которые эффективны в отношении патогенных и условно-патогенных простейших – например макмирор, немозол, фуразолидон, метронидазол (трихопол, флагил, клион), тинидазол (фазижин), тиберал (орнидазол), интетрикс, хлорхинальдол и др.

При выборе препарата необходимо учитывать сопутствующую, фоновую патологию у каждого ребенка:

• при наличии заболеваний мочевыводящей системы (инфекция МВП, хронический пиелонефрит, цистит) целесообразно применение макмирора или других нитрофурановых препаратов;
• при сопутствующих гастритах, ассоциированных с Helicobacter pylori более оправдан метронидазол, при массивной пролиферации условно-патогенной флоры и дрожжевых грибов лучше применять интетрикс или хлорхинальдол, обладающие широким спектром активности в отношении бактерий, грибов и простейших.

Необходимо учитывать, что препараты имеют ряд противопоказаний: болезни крови, ЦНС, повышенную чувствительность к препарату и др. При лечении лямблиоза и санации кишечника при массивном заселении условно-патогенными простейшими у детей с атопическими дерматитами применяется тиберал, который эффективен при лечении кишечных протозоозов и вызывает относительно небольшую частоту обострений кожного процесса. При назначении тиберала следует помнить о возможности развития побочных эффектов со стороны ЦНС, особенно у детей, с исходно неблагоприятным преморбидным фоном (резидуальные проявления тяжелого перинатального поражения ЦНС, эписиндром в анамнезе). В этих случаях лечение лучше проводить в условиях стационара. У детей возможно деление суточной дозы на 2-3 приема, что уменьшает риск побочных явлений.

Однако традиционные препараты: метронидазол, тинидазол и орнидазол – не всегда эффективны, особенно у детей с различной патологией пищеварительной системы. В ряде случаев у пациентов наблюдаются побочные реакции: диспепсический и астено-невротический синдром, аллергические проявления. Это обусловлено следующими факторами:

• резким снижением иммунной защиты;
• отсутствием препаратов с выраженным противолямблиозным действием и без побочных вредных эффектов;
• высоким уровнем реинфицирования, особенно в детских коллективах и семье;
• возможным появлением устойчивых форм паразитов к использовавшимся многие годы препаратам (трихопол, фуразолидон);
• существенными побочными эффектами при применении трихопола, фуразолидона.

Основная направленность заключается в рациональной желчегонной и противовоспалительной терапии, повышении иммунитета и создании условий, подавляющих размножение лямблий.

При выявленных изменениях микробиоценоза толстого кишечника – биопрепараты и фаги в возрастных дозировках в течение 4 недель. При реактивных изменениях в поджелудочной железе – ферментные препараты (например, панкреатин, мезим форте и др.) в зависимости от возраста ребенка в течение 3-4 недель.

После окончания курса любым из перечисленных препаратов необходимо проведение контрольного паразитологического обследования для определения эффективности лечения. Чтобы объективно судить об эффекте лечения и исключить реинвазию (повторное заболевание), исследовать материал от больного необходимо не позднее 1-1,5 недель после окончания лечения.

Диета при лямблиозе

При лечении детей с лямблиозом очень важно правильно назначить диету. Диетические рекомендации зависят от возраста ребенка и формы заболевания. Также следует учитывать наличие сопутствующих заболеваний.

Основой диеты при лямблиозе является ограничение легкоусвояемых углеводов, употребление которых способствует развитию паразитов и создает условия для развития микробной условно-патогенной флоры.

Прежде всего, следует исключить:

• сладости (шоколад, конфеты, торты, мороженое);
• готовые сладкие сухие завтраки;
• некоторые фрукты (бананы, виноград);
• жирные сорта мяса и птицы;
• копченые и маринованные продукты.

С осторожностью рекомендуются сладкий творог и йогурты. Допускаются сладкие каши, кисели, чай.

У детей раннего возраста при остром начале лямблиоза с выраженным диарейным синдромом необходимо в течение 1-2 дней включать в рацион питания продукты богатые пектинами – энтеросорбентами и пищевыми волокнами. Это рисовый отвар, морковно-яблочная смесь, черничный и клюквенный кисель, хлеб с отрубями и др.

Резко ограничивают или исключают продукты, содержащие глютен, – это хлебобулочные и макаронные изделия, все крупы, кроме рисовой, гречневой и кукурузной. Вместо хлеба можно использовать оладьи на кефире из рисовой, гречневой или кукурузной муки или использовать хлеб на основе отрубей. Вместо мучных продуктов, привычных для детей, к которым относится печенье, сдоба, можно использовать в пищу кукурузные хлопья (поп-корн), рисовые шарики, хлебцы (рисовые и кукурузные), не имеющие в своем составе пшеничной муки.

Продуктами, препятствующими размножению лямблий в кишечнике, являются брусника и клюква. Поэтому рекомендуется кислое питье в виде клюквенных и брусничных морсов (при их переносимости), нежирный кефир, компоты из сухофруктов. Мясо отварное нежирное и овощные гарниры. Овощные салаты, винегрет из вареной моркови и свеклы, заправленные подсолнечным маслом.

В дальнейшем ребенок постепенно переводится на физиологическое питание.

На фоне воспалительного процесса в кишечнике, особенно у детей раннего возраста, развивается синдром вторичной лактазной недостаточности. Поэтому, дальнейшее лечение невозможно без назначения безлактозной диеты как минимум на 3-4 месяца. При этом из рациона ребенка исключается цельное молоко или производят его замену соевыми или низколактозными смесями.

Восстановление кишечной микрофлоры

Третий этап восстановительного лечения включает назначение средств, восстанавливающих кишечную микрофлору. Применяются препараты, содержащие бифидо- и лактобактерии, лиофилизированные и живые (например, бифидумбактерин-концентрат, кисломолочный бифидумбактерин, линекс), бактисубтил, флонивин, энтерол, дюфалак, хилак форте. Применяется отвар березовых почек в течение 2-3 недель, после перерыва – 10-12-дневный курс отвара толокнянки.

Диагностика лямблиоза — задача трудная. Патогомоничные симптомы у заболевания отсутствуют. Зачастую клиническая картина лямблиоза наслаивается на таковую других заболеваний желудочно-кишечного тракта. Не всегда удается по целому ряду причин выявить антитела в сыворотке крови. У микроскопического метода также имеются свои ограничения — неспособность отличать близко родственные виды лямблий, а периодичность выделения цист делает копрологический метод диагностики менее информативным.

Анализ на лямблии включает в себя анализ кала, крови и дуоденального содержимого:

1. Микроскопия нативного (неокрашенного) и окрашенного раствором Люголя мазка на предмет обнаружения цистных форм в оформленных и прецистных форм паразита в жидких испражнениях. При поносе и в дуоденальном содержимом выявляются вегетативные формы возбудителей.
2. Обнаружение вегетативных форм лямблий при дуоденальном зондировании. Дуоденальная биопсия является наиболее надежным методом диагностики.
3. Выявление антител к возбудителю в сыворотке крови с применением ИФА и РНИФ является более чувствительным методом. В некоторых лабораториях производятся анализы на выявление антигенов паразитов в кале. Данная методика при диагностике лямблиоза является более предпочтительной, чем поиск цист в фекалиях больного.
4. Высокочувствительным считается молекулярно-генетический метод.
5. Лямблии культивируются на искусственных питательных средах, но данная методика на практике не применяется.

В связи с отсутствием 100% чувствительности каждого из вышеперечисленных методов диагностика лямблиоза должна проводиться комплексно.

Рис. 1. На фото лямблии (вегетативная форма паразита, трофозоиты).

Паразитологическое исследование

При подозрении на заболевание сдаются анализы на лямблии: исследуются фекалии и дуоденальное содержимое. В фекальных массах выявляются цисты, при поносе (в жидких фекальных массах) выявляются и цисты и трофозоиты, в дуоденальном содержимом выявляются только трофозоиты (подвижные вегетативные формы паразитов).

Рис. 2. Лямблии под микроскопом.

Рис. 3. На фото подвижные вегетативные формы лямблий (на фото вверху) и циста паразита (фото внизу).

Копрологический метод исследования (анализ кала на лямблии) является наиболее доступным, но менее информативным. С его помощью выявляются цисты паразитов, выделяемые больным с фекальными массами с 5 — 7 дня заболевания прерывисто, через каждые 2 — 21 день (в среднем через 8 — 14 дней).

Анализ на лямблии должны сдавать больные с заболеваниями желудочно-кишечного тракта со склонностью к хроническому течению, с сопутствующей нейроциркуляторной дисфункцией, с длительной эозинофилией и аллергическими заболеваниями.

Оптимизация копрологического исследования может быть достигнута следующим путем:

• проведение 4 — 5 кратного анализа кала на лямблии с интервалами 7 — 8 дней;
• исключение на 5 — 7 дней приема противопаразитарных препаратов;
• при невозможности доставить в лабораторию свежесобранный кал рекомендуется применение консервантов с расчета на одну часть кала три части консерванта;
• при запорах необходимо накануне проведения анализа кала на лямблии принять слабительное средство (гуталакс, сенаде и др.) и/или желчегонные препараты.

Рис. 4. На фото вегетативные формы паразитов — трофозоиты (электронная сканирующая микроскопия).

Рис. 5. Трофозоит (фото А) и цисты лямблий (фото В).

В дуоденальном содержимом при лямблиозе выявляются подвижные формы лямблий (вегетативные формы, трофозоиды) с большей частотой, чем в фекалиях. Однако если лямблии паразитируют в более низких отделах тонкого кишечника, получаются отрицательные результаты исследования. Исследования дуоденального содержимого должно проводиться одновременно с исследованием кала. В последнее время данный вид исследования применяется редко.

Рис. 6. На фото вегетативные формы (трофозоиты) Lamblia intestinalis, меченные антителами (флуоресцентное окрашивание, непрямая РИФ).

Иммунологические методы исследования

Анализ крови на лямблии сдается с целью выявления специфических иммуноглобулинов. Считается, что основным фактором патогенности Lamblia intestinalis (основным иммуногеном) является антиген Аг GSA-65, на основе которого созданы современные тест-системы, которые применяются для диагностики данного заболевания.

Методы иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунофлуоресценции (РНИФ) являются перспективными в лабораторной диагностике лямблиоза. С их помощью выявляются сывороточные иммуноглобулины классов G и M больных и носителей и антигены в пробах фекалий. Чувствительность и специфичность данных методов диагностики лямблиоза составляет более 90%.

• Иммуноглобулины IgM и IgG появляются в крови с 12 — 14 дня заболевания. Наличие одновременно иммуноглобулинов IgM и IgG говорит о наличии у больного лямблиоза. После санации IgM исчезают, а IgG сохраняются до двух месяцев.
• УровеньIgM (при отсутствии IgG) говорит о наличии острого лямблиоза у больных, инвазия у которых произошла не более 3-х месяцев назад.
• Уровень IgG (в сочетании или без IgM) указывает на хроническое течение лямблиоза или на начальную стадию реконвалесценции острого лямблиоза.

Чем выше уровень антител в сыворотке крови больного, тем чаще наблюдается отрицательное цистовыделение.

Антитела не определяются у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом и у больных с неэффективными механизмами гуморальной защиты, что способствует хронизации инфекционного процесса. Лечение лямблиоза в данном случае проводится по индивидуальным схемам.

Анализ на лямблии с одновременным использованием серологических и копрологических методов дает возможность более качественно выявлять заболевание. Диагностика лямблиоза только на основании результатов копрологических методов исследования считается неоправданной.

Рис. 7. На фото цисты Lamblia intestinalis.

Биопсия кишечника

Биопсия тонкого кишечника является ценным диагностическим методом исследования, позволяющая выявит и оценить степень повреждения слизистой оболочки и обнаружить паразитов. Методика используется в крайних случаях.

Рис. 8. При лямблиозе повреждаются ворсинки слизистой оболочки тонкого кишечника. На фото слева микроскопия биопсийного материала больного лямблиозом. На фото справа лямблии продвигаются к ворсинкам кишечника.

Дополнительные методы диагностики лямблиоза

При заболевании у больного проводится общий анализ крови.

Рис. 9. Эозинофилия говорит о развитии аллергических реакций у больного лямблиозом (фото слева). При длительном и тяжелом течении заболевания развивается анемия (фото справа).

Дифференциальная диагностика лямблиоза

Лямблиоз следует отличать от бактериальных и вирусных гастроэнтеритов. Схожую картину дают кишечные гельминтозы, бактериальная и амебная дизентерия.

Исследование кала помогает выявить в организме человека лямблии.

Как сдавать

Анализ направлен на достоверное определение наличия цист лямблий в кале. Это наиболее быстрый и точный метод исследования. Он также диагностирует форму заболевания – хроническую либо острую.

Провести обследование необходимо сразу же после обнаружения опасных признаков, потому что в течение нескольких дней после заражения лямблии легче всего обнаруживают свое присутствие в организме человека.

Определяя, где сдать такой анализ, можно выбрать вариант из предложений стационара, государственной поликлиники либо множества частных лабораторий.

В последних можно заказать комплексное обследование на наличие паразитов в организме либо ряд диагностических процедур, призванных подтвердить или опровергнуть наличие лямблиоза у пациента.

В кале зараженного паразитами человека могут быть найдены неподвижные цисты лямблий.

При этом в кале зараженного будут найдены неподвижные цисты лямблий, которые таким образом выводятся из тонкого кишечника наружу и представляют собой защитную форму одноклеточных.

Подготовка к сдаче

Чтобы получить правдивое заключение, к анализу следует тщательно подготовиться:

1. За неделю до сдачи перестать принимать любые антипаразитарные и противогельминтные препараты.
2. Ограничить прием других лекарственных средств, особенно ректальных, которые могут исказить клиническую картину, при невозможности – проинформировать о них врача.
3. Избегать приема антибиотиков до получения результатов.
4. За 2-3 дня до сдачи кала исключить из рациона слишком жирную пищу, по максимуму придерживаться основ здорового питания.
5. За 8-10 часов до дефекации воздержаться от приема пищи, чая, кофе и соков.
6. Избегать сдачи анализа во время менструального цикла у женщин либо после рентгена желудочно-кишечного тракта.

Как собрать материал

Для анализа кала на лямблии сбор материала проводится обязательно в одноразовый контейнер с герметичной крышкой (лучше всего приобрести его в аптеке) или в другую стерильную стеклянную или пластиковую сухую емкость.

Также следует использовать прилагающуюся пластиковую лопатку, при ее отсутствии – стерильные одноразовые шпатели или палочки.

Не допускается приносить биоматериал в спичечных коробках или бумажных пакетах, которые впитывают в себя жидкую каловую составляющую и нарушают тем самым его консистенцию, необходимую для анализа.

Кал должен быть получен после самопроизвольной дефекации (без помощи клизм или свечей, приема слабительных средств), не может содержать посторонних примесей.

Перед дефекацией необходимо сначала освободить мочевой пузырь, чтобы в процессе сбора анализа моча не смешалась с каловыми массами и не спровоцировала погрешность исследования.

Перед дефекацией нужно освободить мочевой пузырь, чтобы в процессе сбора анализа моча не смешалась с каловыми массами.

Перед сдачей анализа следует тщательно вымыть с моющим средством анальную область (допустимо – с аптечным раствором Фурацилина) и вытереться чистым сухим полотенцем.

Хорошо обнаруживается присутствие цист в жидком кале, поэтому следует отдать предпочтение задней порции биоматериала.

Как хранить

Доставить полученный анализ на обследование необходимо как можно быстрее.

В условиях стационара кал должен быть исследован в течение 20 минут после сдачи.

Желательно использовать утреннюю порцию биоматериала, поскольку он может храниться не более 4 часов при температуре +8…+20°С.

В лабораторию свежий материал следует доставить в течение 2 часов после его забора, поскольку в течение этого времени простейшие сохраняют подвижность и характерные для них жгутики, что облегчает исследование.

В лабораторию свежий материал следует доставить в течение 2 часов после его забора.

В старых фекалиях под воздействием окружающей среды и остывания массы цисты становятся твердыми, покрываются толстой оболочкой и теряют жгутики. Эти причины затрудняют их диагностику.

Лаборатории с новейшим оборудованием принимают на анализ и кал со сроком хранения до 12 часов, однако необходимо предварительно уточнить этот момент.

В случае невозможности быстрой доставки требуется попросить в лаборатории, где сдается анализ, специальные консерванты и использовать их для сохранения пробы (согласно полученным инструкциям).

Срок изготовления

Анализ в лаборатории в стандартном режиме делается в течение суток.

Сотрудник проводит микроскопию предоставленного материала, который подготавливается с помощью различных реагентов. Проба наносится на предметное стекло и помещается под микроскоп.

Проба наносится на предметное стекло и помещается под микроскоп.

Первоначальный мазок, предназначенный для изучения, подвергают обогащению и предварительно окрашивают 1%-ным раствором Люголя, поскольку сами цисты прозрачны.

Если обнаружены цисты лямблий или взрослые организмы, то диагностируется лямблиоз.

Результат

В случае положительного результата в заключении будет указано наличие цист Lamblia intestinalis. Также в пробе при наличии инфекции будет присутствовать слизь, крахмал, лейкоциты в количестве 0-1 в поле зрения.

При отрицательном варианте будет указано, что простейшие не обнаружены. Если лямблии обнаружены, то ложным быть такое заключение не может.

Иногда встречаются случаи, когда расшифровка дает ложноотрицательный результат, потому что следы лямблий могут не быть представлены в отдельно взятом образце кала. Такой результат может быть получен и при несоблюдении правил взятия образца или при некачественной подготовке к исследованию.

Иногда расшифровка дает ложноотрицательный результат, потому что следы лямблий могут не быть представлены в отдельно взятом образце кала.

Если, несмотря на отрицательный результат, есть все соответствующие симптомы, рекомендуется повторная сдача анализа через несколько дней. Специалисты считают, что точный диагноз лямблиоз в норме устанавливается после трехкратно подтвержденного результата.

Кал на антиген или ПЦР

Исследование кала на антиген к лямблиям – это более надежный метод исследования, исключающий роль человеческого фактора в диагностике и являющийся лучшим по своей достоверности.

Исследование позволяет выявить не самих паразитов и их цисты, а антитела, вырабатываемые иммунной системой в качестве ответа на присутствие патогенов в организме (моноклональные антитела к антигену GSA-65). В ходе анализа могут быть обнаружены фрагменты, яйца и цисты лямблий. Особенность метода в том, что он позволяет обнаружить лямблии даже в те периоды, когда цисты и следы яиц не просматриваются в фекальных массах.

Анализ количества и состава иммуноферментных белков позволяет диагностировать не только сам факт заболевания, но и его стадию.

Допускается прибегнуть к исследованию с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции), обнаруживая отдельные гены в ДНК лямблий, но даже в мегаполисах это редкая и дорогостоящая процедура.

В лаборатории проводится стимуляция деления и самовоспроизведения ДНК простейшего под воздействием реагентов и температуры.

В лаборатории проводится стимуляция деления и самовоспроизведения ДНК простейшего под воздействием реагентов и температуры. Благодаря этому удается достичь высокой точности (до 98%).

Другие методы диагностики

Если анализ кала стал неинформативным либо достоверность его результатов вызывает подозрение, назначается анализ крови на антитела к лямблиям (IgG, IgM, IgA). При этом врачи считают такой способ исследования дополнительным и диагностировать лямблиоз только на его основании невозможно.

Антитела лямблий в кале могут обнаруживаться не только с помощью копрограммы или соскоба, но и при проведении:

• имунногистохимического исследования (ИХГ);
• иммуноферментного анализа (ИФА).

Исследования отличаются различным методом обогащения взятых проб перед лабораторным анализом.

Как сдать анализ детям

В отличие от взрослых, особенностью сбора биоматериала у грудных детей является необходимость заранее освободить младенца от одноразового подгузника. Следует использовать пеленки или трусики. При сборе жидких каловых масс в стерильную емкость следует взять их из нескольких мест для повышения достоверности результата.

Если ребенок уже пользуется горшком, предмет следует тщательно вымыть детским мылом и ополоснуть кипятком.