Мук лабораторная диагностика золотистый стафилококк

Методы микробиологической диагностики стафилококковых забо­леваний отражены в схеме 1. Выполняется следующий комплекс методов исследования.

Бактериоскопический метод – микроскопия мазков из материала от больного, окрашенных по Граму. Выявление в мазках кокков, располагающихся небольшими группами по 2-3 бактерии; типичное расположение в виде гроздьев винограда характерно для чистых культур стафилококка (рис. 1 – цветная вкладка).

Бактериологический метод.Исследуемыйматериал засевают на чашки с желточно-солевым (ЖСА) и кровяным МПА, инкубируют при 37 0 С сутки. На 2 день учитывают характер

роста колоний на обеих средах. На желточно-солевом агаре колонии стафило­кокка имеют ровные края, гладкую поверхность, вокруг колонии образуется радужный венчик в результате расщепления лецитина яичного желтка ферментом лецитовителлазой; цвет пигмента колоний варьирует от золотистого до белого. На кровяном МПА вокруг колоний образуются зоны

гемолиза. Из типичных для стафилококка колоний делают мазок, окрашивают его по Граму, микроскопируют. Оставшуюся часть колонии пересевают на скошенный МПА для получения чистой культуры. На 3 день проводят идентификацию выделенной культуры стафилококка с дифференциацией основных видов в соответствии с таблицей 2, определяют чувствительность к антибиотикам методом бумажных дисков и фаговар (набор для фаготипирования состоит из фагов 21 типа, разделенных на 4 группы; при внутрибольничных инфекциях наиболее часто встречаются фаговары 77 и 80).

Таблица 1.Этиология бактериальных раневых и гнойно-воспалительных инфекций

Аэробы

Анаэробы

Грамположительные бактерии Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Erysipelotrix rhusiopathiae Грамотрицательные бактерии Burkholderia cepacia, Citrobacter koseri, Edwardsiella tarda, Eikenella corrodens, Enterobacter spp, Escherichia coli, Haemophylus influence, Klebsiella spp, Listeria monocytogenes, Moraxella catarrhalis, Proteus spp, Pseudomonas spp, Salmonella enterica, Serratia spp, Spirillum minus, Streptobacillus moniliformis, Vibrio vulnificus

Неспорообразующие грамположительные бактерии Bacteroides spp, Prevotella spp, Porphiromonas spp, Fusobacterium spp, Veilonella spp Неспорообразующие грамотрицательные бактерии Peptostreptococcus spp, Propionibacterium spp Cпорообразующие грамположительные бактерии Clostridium perfringens, Clostridium novy, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium sporogenes, Clostridium ramosum

Схема 1. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
Материал: гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, кровь, мокрота, моча, ликвор, рвотные массы, испражнения, остатки пищи.
Микроскопический метод Выявление грамположительных кокков (группами по 2-3 клетки) в мазках из материала от больного, окрашенных по Граму Серологический метод РНГА или РН для определения α-антитоксина в сыворотке крови больных хроническими стафилококковыми инфекциями. ИФА для определения антител к стафилококку. Имеет вспомогательное значение Бактериологический метод 1 день. Посев материала на чашки с желточно-солевым (ЖСА), кровяным МПА, сахарным МПБ. 2 день -учет характера роста колоний. На ЖСА колонии стафило­кокка с ровными краями, гладкой поверхностью, радужным венчиком вокруг, цвет - от золотистого до белого.	На кровяном МПА - зоны гемолиза, в МПБ –равномерное помутнение. В мазке из колоний в окраске по Граму – кокки в виде гроздьев винограда. Пересев оставшейся части колонии на скошенный МПА для получения чистой культуры, а с сахарного МПБ на кровяной МПА и ЖСА для получения изолированных колоний. 3 день - идентификация выделенной культуры стафилококка, дифференциация видов по биохимическим свойствам, определение чувствительности к антибиотикам и фаговара. Выделение чистой культуры с ЖСА и кровяного МПА. 4 день.Заключение о виде стафилококка. Идентификация культуры, выделенной из сахарного МПБ 5 день.Заключение о виде стафилококка, выделенного из сахарного МПБ.

Таблица 2. Дифференциация основных видов стафилококка

Признаки	Виды стафилококков
S. aureus	S. epidermidis	S. saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Лецитиназа	+	-	-
Альфа-токсин	+	-	-
Анаэробная ферментация глюкозы	+	+	-
Анаэробная ферментация маннита	+	-	-
Чувствительность к новобиоцину	S	S	R

Обозначения: (+) – наличие признака; (-) – отсутствие признака; S - чувствительный; R – резистентный.

Для выявления плазмокоагулазы цитратную плазму крови кролика разводят в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, куда вносят петлей культуру стафилококков. Резуль­таты регистрируют через 2, 4, 24 часа. При наличии плазмокоагулазы об­разуется сгусток.

В некоторых случаях у выделенных чистых культур стафилококка определяют наличие ДНК-азы, каталазы, лизоцимной активности, фибринолизина, гиалуронидазы.

Лизоцимную активность выявляют по зонам просветления вокруг колоний стафилококка при его посеве на МПА в чашках Петри с культурой Micrococcus luteus.

Определение ДНК-азы. Суточную агаровую культуру стафилококка засевают на МПА в чашке Петри, содержащий ДНК. После инкубации посевов при температуре 37 0 С в течение 18-24 часов поверхность МПА заливают 1 N раствором соляной кислоты. Наличие ДНК-азы характеризуется появлением зоны просветления вокруг колоний.

Каталазный тест. Чистую культуру стафилококка вносят в каплю 3%-10%-го раствора перекиси водорода на стекле и растирают круговыми дви­жениями. При наличии каталазы перекись водорода разлагается с образо­ванием пузырьков кислорода.

Cерологический методв диагностике стафилококковых инфекций имеет вспомогательное значение, используясь, в основном, для диагностики хронических процессов (остеомиелит, септикопиемия и др.). Для определения антител к токсину стафилококка применяют РНГА с эритроцитарным диагностикумом, нагруженным α-токсином стафилококка или РН (реакция нейтрализации гемолитической активности стафилококкового токсина антитоксинами сыворотки крови больного в присутствии эритроцитов кролика). У здоровых лиц титр стафилококкового антитоксина составляет 0,5-4 АЕ. Разработан также ИФА.

Клинически значимые виды стафилококка Коагулазоположительные: S. aureus, S. hyicus Коагулазоотрицательные: S. epidermidis, S. saprophyticus, S. haemolyticus, S.hominis

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Относятся к семейству Micrococcoceae. Род Staphylococcus включает 19 видов, из которых патогенны для человека только некоторые: S.aureus, S.epidermidis и S.saprophyticus. Заболевания вызывают золотистые, реже – эпидермальные и еще реже – сапрофитные стафилококки.

Морфология, физиология. Отдельные клетки имеют форму правильного шара, при размножении образуют скопления в виде гроздьев винограда (slaphyle – виноградная гроздь). Размер от 0,5 до 1,5 мкм. В препаратах из патологического материала (из гноя) располагаются поодиночке, парами или небольшими скоплениями. Золотистые стафилококки имеют способность образовывать нежную капсулу.

Стафилококки – факультативные анаэробы, но лучше развиваются в аэробных условиях, Гр+. На поверхности плотных питательных сред образуют круглые, выпуклые, пигментированные (золотистые, палевые, лимонно-желтые, белые) колонии с ровными краями; в жидких – равномерное помутнение. В лабораториях используют способность стафилококков размножаться в средах с большим количеством (6-10 %) NaCl (ЖСА). Такую концентрацию соли другие бактерии не переносят Þ солевые среды являются элективными для стафилококков. Штаммы золотистых стафилококков, продуцирующие гемолизины, дают на кровяном агаре колонии, окруженные зоной гемолиза.

Стафилококки имеют ряд ферментов, расщепляющих многие углеводы, белки. Дифференциально-диагностическое значение имеет тест на сбраживание глюкозы в анаэробных условиях. Из ферментов, участвующих в патогенезе стафилококковых инфекций, только плазмокоагулаза и частично ДНКаза характерны для S.aureus. Другие ферменты (гиалуронидаза, протеиназа, фосфатаза, муромидаза) непостоянны (но чаще продуцируются S.aureus). Стафилококки ситезируют бактериоцины. Устойчивы к пенициллину (пенициллиназа).

Антигены. Вещества клеточной стенки: пептидогликан, тейхоевые кислоты, белок А, типоспецифические агглютиногены, а также капсула, имеющая полисахаридную природу. Пептидогликан имеет общие АГ с пептидогликанами микрококков и стрептококков. Антигенность тейхоевых кислот связана с аминосахарами. Белок А золотистого стафилококка способен к неспецифическому соединению с Fc-фрагментом IgG, в связи с чем он агглютинируется нормальной человеческой сывороткой. У стафилококков есть 30 белковых типоспецифических антигенов. Но внутривидовая дифференциация по Аг структуре в практике не используется.

Патогенность. Повреждающее действие на клетки и ткани организма человека оказывают токсины и ферменты. Также к факторам патогенности можно отнести капсулу, препятствующую фагоцитозу и связывающую комплемент, а также белок А, инактивирующий комплемент и тормозящий опсонизацию при взаимодействии с Fc-фрагментом IgG.

S.aureus способен выделять ряд токсинов, в частности лейкоцидин, который оказывает губительное действие на фагоцитирующие клетки, главным образом на макрофаги. Гемолизины (α, β, дельта, γ) оказывают лизирующее действие на эритроциты человека и животных (кролика, лошади, барана). Основным из них является α-токсин, продуцируемый S.aureus. Помимо гемолитического, этот яд обладает кардиотоксическим действием, вызывает спазм коронарных сосудов и остановку сердца в систоле, он поражает нервные клетки и нейроны, лизирует мембраны и лизосомы клеток, что приводит к освобождению лизосомальных ферментов.

Возникновение пищевых отравлений стафилококковой природы связано с действием энтеротоксинов, продуцируемых золотистыми стафилококками. Известно 6 антигенов различных энтеротоксинов (АВСDЕF).

Эксфолиативные токсины вызывают у новорожденных пузырчатку, локальное буллезное импетиго, генерализованную скарлатиноподобную сыпь. Заболевания сопровождаются внутриэпидермальной отслойкой эпителия кожи, образованием сливающихся пузырей, жидкость в которых стерильна. Фокус стафилококковой инфекции находится чаще всего при этом в пупочной ранке.

Экзоверменты: плазмокоагулаза осуществляет свертывание плазмы (белки как бы одеваются в фиброзный чехол, защищающий их от фагоцитоза). Большие концентрации коагулазы, в организме больного, приводят к уменьшению свертываемости периферической крови, нарушению гемодинамики, прогрессирующему кислородному голоданию тканей.

Гиалуронидаза способствует распространению стафилококков в тканях. Лецитиназа разрушает лецитин, входящий в состав оболочек клеток, вызывает лейкопению. Фибринолизин растворяет фибрин, отграничивающий местный воспалительный очаг, чем способствует генерализации патологического процесса. Патогенетические свойства других экзоферментов стафилококков (ДНКаза, мурамидаза, протеиназа, фосфатаза), часто сопровождающих коагулазную активность, еще не определены.

Экология и распространение. В первые дни жизни человека стафилококки поселяются на слизистых оболочках рта, носа, в кишечнике, а также на коже, входят в состав формирующейся нормальной микрофлоры тела человека.

Стафилококки постоянно поступают в окружающую среду от человека. Они присутствуют на предметах обихода, в воздухе, в воде, в почве, на растениях. Но их болезнетворная активность различна, особое внимание уделяется золотистым стафилококкам как потенциально патогенным для человека. При контакте с источником инфекции носителями S.aureus становятся не все люди. Формированию бактерионосительства способствуют низкое содержание SIgA в носовом секрете и другие проявления функциональной недостаточности иммунной системы. У таких лиц формируется резидентное носительство, т.е. постоянным местом обитания стафилококков становится слизистая оболочка носа, на которой микроорганизмы интенсивно размножаются и выделяются в окружающую среду массивными дозами. В лечебных учреждениях их источником являются больные с открытыми гнойно-воспалительными процессами (инфекция передается контактным путем). Этому способствует длительность выживания стафилококков на окружающих предметах.

Хорошо переносят высушивание, пигмент защищает их от губительного действия солнечного света (прямые солнечные лучи убивают их только через несколько часов). При комнатной температуре они остаются жизнеспособными на предметах ухода за больным в течение 35–50 дней, на предметах твердого инвентаря – десятки дней. При кипячении гибнут мгновенно, чувствительны к дезинфектантам, к бриллиантовой зелени, что позволяет широко применять её для лечения поверхностных воспалительных заболеваний кожи.

Патогенез заболеваний человека. Способны поражать любую ткань человеческого организма. Это местные гнойно-воспалительные процессы (фурункулы, карбункулы, нагноения ран, бронхиты, пневмонии, отит, ангина, конъюнктивит, менингит, эндокардит, энтероколит, пищевые отравления, остеомиелит). Генерадизация любой формы местного процесса завершается сепсисом или септикопиемией. У лиц с иммунодефицитными состояниями стафилококковые инфекции развиваются чаще.

Иммунитет. Взрослые устойчивы, т.к. имеют естественные защитные механизмы и специфические антитела, которые приобретаются в течение жизни при контакте с больными и носителями. В процессе стафилококковой инфекции возникает сенсибилизация организма.

В формировании иммунитета имеют значение как антимикробные, так антитоксические и антиферментные антитела. Степень защиты определяется их титром и местом действия. Большую роль играют секреторные IgA, обеспечивающие местный иммунитет слизистых оболочек. Антитела к тейхоевым кислотам определяются в сыворотках крови взрослых и детей с тяжелыми стафилококковыми инфекциями: эндокардитом, остеомиелитом, сепсисом.

Лабораторная диагностика. Материал (гной) подвергают бактериоскопии и высевают на питательные среды. Кровь, мокроту, фекалии исследуют бактериологическим методом. После выделения чистой культуры по ряду признаков определяют видовую принадлежность. В случае выделения S.aureus определяют плазмокоагулазу, гемолизин, А-протеин.

Серодиагностика: РП (альфа-токсин), РНГА, ИФА.

Для установления источника и путей распространения инфекции, выделенные культуры фаготипируют. Лабораторный анализ непременно включает определение чувствительности выделенной культуры или культур к антибиотикам.

Профилактика и лечение. Профилактика направлена на выявление носителей S.aureus, главным образом среди персонала медицинских учреждений, с целью их санации. Особое внимание уделяется профилактике стафилококковых инфекций у новорожденных.

Для лечения острых стафилококковых заболеваний назначаются антибиотики, выбор которых определяется чувствительностью выделенной культуры к набору препаратов. При септических процессах вводят противостафилококковый иммуноглобулин или антистафилококковую плазму. Для лечения хронических стафилококковых инфекций (хрониосепсис, фурункулез и др.) применяют стафилококковый анатоксин, аутовакцину, которые стимулируют синтез антитоксических и антимикробных антител.

Представители этого рода — неспорообразующие неподвижные грамположительные кокки, формирующие при росте колонии в виде виноградной грозди (кластера) и входящие в состав нормальной микрофлоры кожного покрова животных и человека.

Стафилококки — представители семейства Micrococcaceae. Существует свыше 26 видов стафилококков, но лишь некоторые из них представляют угрозу для здоровья человека. Самым опасным считают золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), отличающийся от остальных наличием фермента коагулазы.

Этот вид долгое время считали единственным патогенным микроорганизмом в своём роде. Носительство S. aureus у человека обычно протекает бессимптомно; его обнаруживают у 40% здорового населения.

Обычно он локализуется на слизистой оболочке носа, коже подмышечной области и промежности.

Коагулаза, продуцируемая Staphylococcus aureus, катализирует реакцию превращения фибриногена в фибрин и помогает микроорганизму образовывать защитный барьер. Кроме того, наличие рецепторов к поверхностным структурам клеток хозяина и матричным белкам (например, фибронектину, коллагену) обусловливает возможность адгезии возбудителя.

Он вырабатывает экстрацеллюлярные лизирующие ферменты (липазу), разрушающие ткани и способствующие инвазии. Некоторые штаммы продуцируют сильнейший экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока. Выделяемые бактерией энтеротоксины могут быть причиной диареи.

Staphylococcus aureus вызывает различные заболевания. Кожные инфекции возникают в условиях повышенной температуры и влажности, а также в связи с нарушением целостности кожного покрова при некоторых заболеваниях (экзема и др.), хирургических операциях, инъекциях или внутривенной катетеризации. Даже на здоровой коже может развиться поверхностная пиодермия (импетиго), которая затем передаётся от человека к человеку.

Пневмонию, вызванную S. aureus, наблюдают достаточно редко (в большинстве случаев в качестве осложнения гриппа). Инфекция быстро профессирует (часто наблюдают образование полостей или каверн); характерен высокий уровень смертности. Быстрое течение свойственно и стафилококковому эндокардиту, возникающему при неправильном подборе антибиотиков или вследствие микробной колонизации внутривенных устройств. Заболевание часто приводит к смерти пациента. Кроме того, S. aureus — наиболее распространённая причина остеомиелита и септического артрита.

Изменение чувствительности S. aureus к антибиотикам можно считать настоящим пособием по антимикробной химиотерапии. Сначала против золотистого стафилококка был в полной мере эффективен бензилпенициллин, но затем возникли штаммы, способные вырабатывать бета-лактамазы. Со временем они стали преобладать над всеми остальными. С внедрением в клиническую практику метициллина и родственных ему лекарственных средств (флуклоксациллина) именно они стали препаратами выбора и в настоящее время остаются таковыми при наличии чувствительных штаммов.

Позже возникли штаммы золотистого стафилококка, устойчивые к действию метициллина. Их резистентность обусловлена геном тесА+, кодирующим белки со сниженным сродством к пенициллинам. Некоторые из устойчивых штаммов способны вызвать эпидемические вспышки заболевания, для борьбы с которыми применяют ванкомицин и тейкопланин.

В настоящее время обнаруживают всё больше микроорганизмов со средней устойчивостью (или гетерорезистентностью) к гликопептидам. Описаны случаи полной гликопептидной резистентности у некоторых штаммов, обусловленной наличием генов vanA+ и vanB+ заимствованных у энтерококков.

Другими эффективными препаратами считают линезолид, аминогликозиды, эритромицин, клиндамицин, производные фузидовая кислота, хлорамфеникол и тетрациклин.

В отношении метициллинчувствительных штаммов активны цефалоспорины первого и второго поколения. Производные фузидовой кислоты применяют при комбинированной терапии инфекционных заболеваний костей и суставов. Лечение должно сопровождаться обязательным проведением теста на чувствительность к антимикробным препаратам.

Передача инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus, происходит посредством аэрозольного и контактного механизма. Носителей или лиц, заражённых штаммами, устойчивыми к метициллину и гликопептидам, необходимо изолировать в отдельные боксы и соблюдать меры предосторожности во избежание раневого или энтерального проникновения бактерий.

Следует помнить, что медперсонал может стать носителем инфекции и способствовать её распространению в лечебном учреждении. Именно поэтому всем работникам больницы рекомендовано применение местных растворов мупироцина и хлоргексидина.

1.1. Стафилококкоз - инфекционная болезнь сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц, характеризующаяся гнойно-воспалительными процессами в различных органах и тканях, артритами, маститами, эндометритами, а в некоторых случаях - сепсисом со смертельным исходом.

1.2. Возбудитель болезни - Staphylococcus aureus - крупные неподвижные грамположительные кокки, располагающиеся неправильными скоплениями, а также одиночно или попарно.

1.3. Диагноз на стафилококков устанавливают по результатам лабораторного исследования с учетом клинических данных.

1.4. Лабораторная диагностика стафилококкоза включает микроскопию мазков, выделение культур стафилококков с последующей их идентификацией и изучением патогенных свойств.

1.5. Для исследования в лабораторию посылают трупы мелких животных и птиц целиком, от трупов крупных животных направляют части паренхиматозных органов, головной мозг, кровь и сердце; от больных животных, в зависимости от клинических признаков - абортированные плоды, истечение из шейки матки, содержимое абсцессов, синовиальную жидкость на воспаленных суставах.

1.6. Патологический материал для исследования на стафилококковую инфекцию от животных, не подвергавшихся лечению антибиотиками, сульфаниламидными или нитрофурановыми препаратами в течение последних 10 дней.

2.1. Из доставленного материала готовят мазки и опрашивают их по Граму.

В мазках обнаруживают крупные грамположительные кокки, располагающиеся скоплениями в виде гроздьев, в мазках из гноя могут быть парные кокки, короткие цепочки.

3.1. Высевы из патологического материала делают в МПБ, на МПА или молочно-солевой агар (pH сред. 7,2 - 7,4). Высев можно проводить и на кровяной агар.

Посевы инкубируют при температуре 37 - 38 °С в течение 18 - 20 ч.

3.2. В МПБ отмечают интенсивное равномерное помутнение среды, на дне пробирки - рыхлый осадок. Иногда появляется пристеночное серовато-белое кольцо или пленка.

На МПА и молочно-солевом агаре стафилококки образуют круглые с ровными кроями, выпуклые колонии белого, кремового, золотистого или лимонно-желтого цвета.

3.3. У выделенных культур изучают морфологические, культуральные биохимические и патогенные свойства.

3.4. Для изучения биохимических и гемолитических свойств суточную культуру стафилококка пересевают в среды Гисса с глюкозой, лактозой, мальтозой, сахарозой, маннитом, дульцитом и на глюкозо-кровяной агар Нейсслера.

S. aureus ферментирует с образованием кислоту без газа глюкозу, маннит, мальтозу, сахарозу, не ферментирует лактозу и дульцит, на глюкозо-кровяном агаре Нейсслера образует β-гемолиз.

4.1. Определение патогенности проводят в реакции плазмокоагуляции, по дермонекротической пробе или биопробой на цыплятах.

4.2. Постановка реакции плазмокоагуляции.

В реакции используют сухую кроличью плазму, выпускаемую предприятиями Минздрава СССР. Для работы сухую плазму разводят согласно прилагаемому наставлению.

При необходимости приготовление плазмы в лаборатории у кролика берут кровь из ушной вены или сердца в пробирку с 5 %-ным раствором лимонно-кислотного натрия (2 мл раствора на 8 - 10 мл крови). Цитратную кровь центрифугируют: при 3000 об/мин в течение 10 мин, затем плазму отсасывают и переносят в стерильные пробирки, которые закрывают крышками и хранят в холодильнике до 3 нед. Перед употреблением плазму вводят стерильным физиологическим раствором 1:5.

Подготовленную для исследования плазму разливают по 0,5 мл в стерильные уленгутовские пробирки по количеству изучаемых культур. Затем в пробирку вносят 2 капли бульонной или одну петлю агаровой 18 - 24-часовой культуры. Одновременно ставят контроль плазмы без добавления культуры.

Пробирки помещают в термостат при температуре 37 - 38 °С. Учет реакции проводят через каждый час в течение 5 - 6 часов. При отсутствии коагуляции пробирки выдерживают при комнатной температуре 18 ч.

При положительной реакции плазмокоагуляции образуется сгусток, который не выпадает из пробирки при наклоне. В случае, когда коагулирована не вся плазма, сгусток плавает в ней.

4.3. Дермонекротическую пробу ставят на кроликах (лучше белой масти) массой 2 - 2,5 кг. Накануне у кролика на боку в 2 местах выстригают шерсть на площади 2×2 см. Суточную бульонную культуру вводят внутрикожно в выстриженные участки кожи в дозе 0,2 мл.

Наблюдение за кроликами ведут в течение 4 дн.

4.4. При выделении от птиц культур стафилококков, не обладающих плазмокоагулирующими свойствами, их патогенность определяют на 1 - 2-суточных цыплятах.

Суточную бульонную культуру в дозе 0,1 мл вводят 2 цыплятам интраорбитально во внешний уголь глазницы между глазным яблоком и краем орбиты.

Гибель цыплят наступает на 3 - 5 сут.

Культуру считают патогенной при выделении ее из паренхиматозных органов и костного мозга павших цыплят.

Наблюдение за цыплятами ведут в течение 5 сут.

Стафилококки - бактерии округлой формы, способные образовывать скопления, напоминающие гроздья (staphyle - виноградная гроздь) . Грамположительные, факультативные анаэробы, хорошо размножаются на простых питательных средах и растут на средах с высокой концентрацией NaCI.

Это обширная группа бактерий, насчитывающая 27 видов, 14 из которых обнаруживаются на коже и слизистых человека. При этом лишь 3 вида способны вызывать болезни, поэтому относятся к условно-патогенной микрофлоре:

- эпидермальный стафилококк (S. epidermidis). Селится на любых слизистых и участках кожи. Наибольшую опасность представляет при операциях, например, может заноситься в организм с зараженным протезом – клапаном, шунтом и прочим. Наиболее частая причина нагноения катетеров. В большинстве случаев этот стафилококк лечения не требует, а вызванная им инфекция проходит сама после удаления протеза или замены катетера, а также очищения раны.

- сапрофитный стафилококк (S. s aprophyticus). Наименее опасен из всех условно-патогенных видов, чаще всего обитает в области мочеиспускательного канала и гениталий. Может вызывать цистит и уретрит.

- золотистый стафилококк (S. aureus ). Наиболее патогенный вид из всех существующих. Подавляющее большинство болезней, вызванных бактериями стафилококка, связаны именно с этим видом. При этом может также присутствовать в микрофлоре здорового человека.

Факторы вирулентности стафилококков, особенно S. aureus, связаны с их адгезией на рецепторах чувствительных клеток, колонизацией и агрессивными свойствами, проявляющимися в подавлении фагоцитоза. Из экзоферментов, продуцируемых главным образом S. aureus, существенную роль в патогенезе заболеваний играют плазмокоагулаза, гиалуронидаза, лецитиназа, фибринолизин, ДНК-аза. Стафилококки секретируют ряд токсинов, отличающихся друг от друга по механизму действия. К ним относятся мембраноповреждающие токсины. Золотистые стафилококки могут образовывать гистотоксины, к которым относятся энтеротоксины, вызывающие пищевую интоксикацию.

Преимущественное значение в патологии человека имеет S. aureus. В организм человека он может проникать различными путями. Их патогенность выражается в способности вызывать гнойно-воспалительные процессы в коже, подкожной клетчатке, лимфоузлах (фурункулы, карбункулы, маститы, абсцессы и др.), респираторном тракте (бронхиты, пневмонии, плевриты), ЛОР-органах (отиты, ангины, гаймориты, тонзиллиты и др.), органах зрения (конъюнктивиты, язвы роговицы), желчевыводящих путях (холециститы, холангиты и др.), мочеполовых органах (гломерулонефриты, уретриты, простатиты и др.), опорнодвигательном аппарате (остеомиелиты, артриты, миозиты), а также пищевые отравления. Генерализация любой формы местного процесса может привести к сепсису или септикопиемии.

Основной метод лабораторной диагностики - бактериологический, так же разработаны и внедрены серологические реакции. В случае необходимости (при интоксикациях) прибегают к биологической пробе.

Материалом для бактериологического исследования служат кровь, гной, слизь из зева, носа, отделяемое ран, мокрота (при стафилококковой пневмонии), испражнения (при стафилококковом колите), в случае пищевых интоксикаций - рвотные массы, испражнения, промывные воды желудка, подозрительные продукты.

Материал засевают на кровяной агар (гемолиз), на молочно-солевой (молочно-желточно-солевой) агар (угнетается рост посторонних бактерий за счет NaCl, лучше выявляются пигмент и лецитиназа). Выделенную культуру идентифицируют по видовым признакам, определяют у нее наличие основных признаков и факторов патогенности (золотистый пигмент, сбраживание маннита, гемолиз, плазмокоагулаза), обязательно проверяют чувствительность к антибиотикам, в случае необходимости проводят фаготипирование.

Из числа серологических реакций для диагностики гнойно-септических заболеваний применяют РПГА и ИФМ, в частности для определения антител к тейхоевой кислоте или к видоспецифическим антигенам.

Для определения энтеротоксигенности стафилококков используют три метода:

1) серологический - с помощью специфических антитоксических сывороток в реакции преципитации в геле обнаруживают энтеротоксин и устанавливают его тип;

2) биологический - внутривенное введение фильтрата бульонной культуры ста­филококка кошкам в дозе 2-3 мл на 1 кг веса. Токсины вызывают у кошек рвоту и понос;

3) непрямой бактериологический метод - выделение из подозрительного продукта чистой культуры стафилококка и определение у него факторов патогенности.

Staphylococcus aureus (стафилококк ауреус, золотистый стафилококк) — условно-патогенная бактерия, обитающая на различных объектах окружающей среды и в локусах человеческого организма. Микробы колонизируют кожный покров и слизистую оболочку внутренних органов. Их обнаруживают в воздухе, почве, на бытовых предметах, игрушках, медицинских инструментах. Условно-допустимое количество золотистого стафилококка в любом биоматериале – менее 10 4 колониеобразующих единиц. Заразиться этой опасной инфекцией можно в местах общего пользования.

Микроб получил свое название благодаря свечению золотистого цвета, которое он издает при посеве на питательную среду, а также пигменту из группы каротиноидов, придающему колониям золотой окрас.

Излюбленным местом обитания Staphylococcus aureus является носоглотка. Каждый второй житель нашей планеты является носителем бактерии и часто даже не подозревает об этом. Микроб долгое время может мирно существовать в организме человека, не причиняя ему никакого вреда. Под воздействием неблагоприятных факторов стафилококк активизируется и становится патогеном, что приводит к развитию различных заболеваний. В наибольшей степени этому подвержены дети, пожилые люди и беременные женщины, а также прочие лица с ослабленным иммунитетом.

Staphylococcus aureus – неподвижный микроорганизм шаровидной формы, способный размножаться и приобретать патогенные свойства только в организме человека. Он является возбудителем различных заболеваний у детей и взрослых: дерматологических, бронхолегочных, костно-суставных и эндоваскулярных патологий, раневых и внутрибольничных инфекций, гнойно-очаговых процессов. Стафилококковый сепсис – очень опасное и тяжело поддающееся лечению заболевание.

Staphylococcus aureus — самый опасный представитель данного рода, вызывающий гнойно-воспалительные процессы в жизненно важных органах с развитием тяжелых осложнений, которые могут привести к смерти. Именно поэтому данные микроорганизмы представляют особый интерес для современной медицины. Устойчивость стафилококка ауреус к большинству антибиотиков и дезинфицирующих средств осложняет лечение и делает профилактику инфекции малоэффективной.

Диагностика заболеваний, вызванных стафилококком ауреус, основывается на результатах микробиологического исследования кала, отделяемого носа и зева, содержимого придаточных пазух и другого биоматериала. В норме золотистый стафилококк определяться не должен. Лечение инфекции этиотропное, антибактериальное. Больным назначают антибиотики широкого спектра действия из группы тетрациклинов, фторхинолонов, пенициллинов, макролидов. При выявлении Staphylococcus aureus необходимо приложить максимум усилий, чтобы его ликвидировать и избежать развития опасных для жизни осложнений.

Этиология

Staphylococcus aureus — основной представитель рода Staphylococcus семейства Micrococcaceae.

Staphylococcus aureus под микроскопом

Морфология. Staphylococcus aureus – шаровидная бактерия, лишенная жгутиков и способная формировать микрокапсулы, которые защищают ее от повреждения и высыхания.

Тинкториальные свойства. Стафилококки окрашиваются по Грамму в синий цвет. В мазке они располагаются хаотично, скоплениями или в виде гроздьев винограда.

Культуральные свойства. Бактерии растут на питательных средах, содержащих соль, желток куриного яйца, молоко, кровь. Обычно в микробиологических лабораториях используют элективные среды — ЖСА, МЖСА и кровяной агар. Колонии золотистого стафилококка имеют желтый или кремовый оттенок благодаря пигменту-каротиноиду и радужный венчик по периферии.

Биохимические свойства. Staphylococcus aureus сворачивает цитратную кроличью плазму, обладает лецитовителлазной активностью, расщепляет аэробный маннит.

Физиологические свойства. Бактерии устойчивы к замораживанию, нагреванию, солнечным лучам и некоторых химикатам. Оптимальная температура для жизнедеятельности стафилококка – 30-37°C. Способность к размножению микроб сохраняет при 4-43°C. Бактерии сохраняют жизнеспособность и в более суровых условиях. Отличительное свойство стафилококка ауреус – способность выживать в растворе поваренной соли. Микроб быстро приспосабливается к воздействию антибиотиков и антисептиков. В организме здорового человека размножение стафилококка ауреус сдерживается клетками иммунной системы, лакто- и бифидобактериями.

Патогенные свойства бактерии: адгезивность – прикрепление к клеткам макроорганизма, колонизация – размножение на этих клетках, инвазивность – проникновение внутрь клеток и продукция токсинов.

К факторам патогенности стафилококка ауреус относятся:

1. Фибринолизин способствует проникновению микробов в кровь и развитию сепсиса.
2. Гемолизины угнетают клеточный иммунитет и помогают стафилококкам выжить в очагах воспаления. Благодаря этим факторам инфекция может приобретать генерализированную форму.
3. Эксфолиатин повреждает клетки кожи. Он поражает эпидермис, вызывая появление таких пузырьков, как при ожогах.
4. Лейкоцитин разрушает лейкоциты — белые клетки крови.
5. Энтеротоксин – ядовитое вещество, вырабатываемое стафилококками и вызывающее у человека пищевое отравление. Он провоцирует рвоту, боль в животе, диарею. Этот яд накапливается в пище и не разрушается при термической обработке.
6. Коагулаза — фермент, свертывающий кровь. Плазмокоагулаза, продуцируемая Staphylococcus aureus, бывает двух видов: связанная с клеточной стенкой и свободная. Первая защищает микроб от фагоцитов, окружая барьером из свернувшейся крови, а вторая образует коагулазотромбин, вызывающий тромбообразование.
7. Белок А, выделенный с поверхности клеточной стенки стафилококка ауреус, хорошо связывает иммуноглобулины класса G.
8. Пенициллиназа защищает микроб от большинства пенициллиновых антибиотиков.
9. Лидаза расплавляет кожные покровы и потовые железы, позволяя бактериям проникнуть вглубь организма.
10. Эндотоксин, вырабатываемый микробом, приводит к развитию интоксикационного синдрома.

Устойчивость микробов к антибактериальным препаратам – проблема современной медицины. Отдельные штаммы Staphylococcus aureus приобретают резистентность к некоторым антибиотикам – цефалоспоринам и пенициллинам. Их называют метициллин-резистентными (MRSA). Антибиотикорезистентность обусловлена мутацией штаммов, произошедшей под давлением естественного отбора и наличием у стафилококка ауреус пенициллиназы — фермента, расщепляющего молекулу пенициллина. Метициллинрезистентные стафилококки очень важны в эпидемиологическом отношении.

Эпидемиология

Стафилококк ауреус — естественный обитатель кожи и слизистых оболочек практически всех людей. В настоящее время около 50% жителей нашей планеты являются носителями бактерии. Этот условно-патогенный микроорганизм колонизирует гортань, подмышечные впадины, пах, влагалище, промежность, ЖКТ, волосистую часть головы. У большинства людей золотистый стафилококк постоянно или эпизодически обитает в носу. У 100% он живет и размножается на коже. Лица с активно функционирующей иммунной системой надежно защищены от стафилококковой инфекции. Процесс размножения Staphylococcus aureus и приобретения патогенных свойств подавляется нормальной микрофлорой макроорганизма. При снижении общей резистентности и ослаблении защитных сил микроб вызывает различные заболевания.

Патогенные штаммы Staphylococcus aureus могут проникать в организм извне при ослаблении иммунитета и контакте с бактерионосителем.

Факторы, способствующие снижению иммунитета и заражению стафилококком ауреус:

• Длительный прием антибиотиков и гормонов;
• Стрессовое воздействие;
• Недостаток витаминов и минералов в организме;
• Дисбиоз кишечника;
• Вирусная инфекция;
• Несоблюдение правил личной гигиены;
• Нарушение обмена веществ;
• Преклонный возраст;
• Недоношенность.

При нормальном иммунитете и отсутствии провоцирующих факторов бактерии не наносят вреда человеку.

Стафилококк ауреус — возбудитель внутрибольничной инфекции. Он представляет особую опасность для новорожденных детей. В роддоме и других отделениях стационара высокая концентрация данного микроба в окружающей среде связана с нарушением правил асептики и стерилизации инструментария, а также с носительством стафилококка среди медперсонала. Около 30% госпитализированных больных становятся носителями больничных штаммов S. aureus. Инфекция развивается в результате инвазивных диагностических или лечебных манипуляций, длительного приема антибиотиков, внепочечного очищения крови. Примерно 35% медицинских работников являются хроническими носителями стафилококка ауреус.

Заразиться Staphylococcus aureus также можно в салонах тату и пирсинга, где работники не соблюдают гигиенические привила и санитарные нормы.

Источником и резервуаром инфекции являются больные, носители и обсемененные продукты питания.

Способы распространения стафилококков:

1. Контактный – при соприкосновении раны с патогенной поверхностью: грязью, пылью, а также при поцелуе, объятии, рукопожатии, прикосновении.
2. Артифициальный — при использовании нестерильного медицинского инструментария во время диагностических инвазивных процедур.
3. Аэрогенный — при разговоре, чихании, кашле.
4. Пищевой — при употреблении инфицированных продуктов питания.
5. Вертикальный — во время родов от матери к ребенку.

Тяжесть заболеваний, вызванных Staphylococcus aureus, зависит от вида бактерии, пораженного органа, массивности заражения, статуса иммунной системы человека.

Симптоматика

Общие симптомы стафилококковой инфекции — признаки интоксикационного синдрома:

• Лихорадка,
• Озноб,
• Плохое самочувствие,
• Слабость, вялость, разбитость,
• Снижение аппетита, тошнота,
• Цефалгия,
• Снижение давления,
• Нарушение сна.

Гнойное воспаление — основной признак деятельности стафилококка ауреус на коже и во внутренних органах. Стафилококковая инфекция может протекать в генерализованной или локальной форме. К первой относят сепсис, септикопиемию и септикоцемию, а ко второй – заболевания кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей и суставов, ЦНС. Генерализация процесса обусловлена распространением микробов по сосудистому руслу в органы – печень, легкие, кости, почки с образованием очагов инфекции. Болезни сопровождаются интоксикацией, болью, дисфункцией органов. В отдельную группу выделяют пищевые отравления стафилококковым эндотоксином.

1. Поражение кожи и клетчатки протекает по типу фурункулеза, пиодермии, панариция, флегмоны, экземы, эпидемической пузырчатки, импетиго, везикулопустулеза, эксфолиативного дерматита.
2. При поражении глаз развивается хронический конъюнктивит, проявляющийся непереносимостью яркого света, слезотечением, отечностью век, выделением гноя из глаз.

фото: гнойное воспаление глаз, кожи

Диагностика

Диагностика заболеваний, вызванных стафилококком ауреус, заключается в проведении лабораторных исследований — микробиологического, серологического и общеклинического.

• Бактериологическое исследование биоматериала — посев на питательные среды с последующей идентификацией выделенного возбудителя и определения его чувствительности к антибиотикам. Материалом для исследования является: отделяемое слизистой носа, зева, влагалища, конъюнктивы, нативнй кал, рвотные массы, промывные воды желудка, отделяемое раны или некротизированные корочки, мокрота, моча, желчь, ликвор, кровь. Посев производят на элективные для S. aureus среды – кровяной агар, ЖСА, МЖСА. Чашки инкубируют в термостате в течение 48 часов, а затем описывают характер выросших колоний. Они имеют характерный кремовый или желтый цвет и радужную оболочку вокруг. Проводят микроскопию окрашенных по Грамму мазков. Изучают морфологические и тинкториальные свойства, ставят дополнительные тесты. Положительный коагулазный тест в пробирке — один из признаков, подтверждающих принадлежность возбудителя к виду S. aureus. Микробы ферментируют аэробный маннит. При этом цвет среды изменяется и становится вместо зеленого желтым. С целью определения массивности обсеменения проводят количественный анализ. Биоматериал засевают на ЖСА, подсчитывают число характерных колоний и определяют значение колониеобразующих единиц. В норме у здорового человека количество Staphylococcus aureus не должно превышать 10 3 степени. Если показатели превышают 10 6 степени, это говорит о высокой интенсивности инфицирования.
• Серологические методы исследования применяют в тех случаях, когда бактериологические анализы невозможно выполнить. Они предназначены для видовой и штаммовой идентификации возбудителя и заключаются в обнаружении в плазме крови антигенов, присущих стафилококку ауреус. Обычно ставят реакцию латекс-агглютинации, иммуноферментный анализ, реакцию пассивной гемагглютинации.
• Общеклинический анализ крови – лейкоцитоз, нейтрофилез, подъем СОЭ.
• Общий анализ мочи — протеинурия, лейкоцитурия, бактериурия.
• Фаготипирование выделенных стафилококков — определение чувствительности микроба к фагам-вирусам для назначения соответствующего лечения.
• ПЦР-диагностика – определение возбудителя заболевания по ДНК.

Лечение

Лечением стафилококка ауреус занимаются специалисты разного профиля – хирурги, дерматологи, ЛОРы, офтальмологи, терапевты, педиатры и инфекционисты.

Больным показана этиотропная противомикробная терапия.

1. Если КОЕ превышает 10 3 степени, считается, что бактерии из носоглотки активно попадают в окружающую среду. Таким бактерионосителям показана санация очагов инфекции.
2. При более низком значение КОЕ и отсутствие явной клиники принимать антибиотики не следует.
3. Если КОЕ превышает 10 4 степени, проводят стандартное лечение антибиотиками.
4. Количество микробов 10 5 степени и 10 6 степени — показатель массивного заражения стафилококком Заболевание сопровождается выраженной клиникой и требует обязательного лечения противомикробными средствами.

В тяжелых случаях, когда антибактериальное лечение неэффективно, применяют альтернативные и безопасные средства – антистафилококковый бактериофаг, антистафилококковую плазму и иммуноглобулин.

Местное лечение кожных заболеваний, вызванных стафилококком ауреус: обработка ран растворами антисептиков, применение антибактериальных мазей. Абсцессы и флегмоны вскрывают хирургическим путем с целью оттока гноя.

Стафилококковая пищевая токсикоинфекция лечится антистафилококковым анатоксином. Больным промывают желудок, проводят инфузионную дезинтоксикационную терапию — вводят внутривенно солевые растворы.

Народные средства, применяемые для лечения патологий, обусловленных Staphylococcus aureus: растительные иммуномодуляторы – экстракт элеутерококка, лимонника, женьшеня; иммуностимуляторы — эхинацея, шиповник, зверобой, боярышник. Из перечисленных растений готовят настои и отвары для приема внутрь.

При отсутствии своевременного и адекватного лечения инфекции, вызванной S. aureus, развиваются тяжелые осложнения:

• Сепсис,
• Менингит,
• Эндокардит,
• Инфекционно-токсический шок,
• Кома,
• Летальный исход.

Прогноз заболевания неоднозначный. Он определяется степенью тяжести патологии. Легкие формы с вовлечением в патологический процесс кожи и слизистых полностью излечиваются без негативных последствий. Сепсис, поражение мозга и прочие тяжелые осложнения нередко заканчиваются смертью.

Профилактика

Мероприятия, позволяющие избежать развития стафилококковой инфекции:

1. Укрепление иммунитета — закаливание, спорт, правильное питание, полноценный сон, прогулки на свежем воздухе,
2. Своевременное лечение инфекционных заболеваний и санация очагов инфекции — кариеса, тонзиллита, уретрита,
3. Соблюдение правил гигиены — частое мытье рук, влажная уборка в помещении, качественное приготовление пищи,
4. Ограниченное посещение общественных мест в пик респираторных заболеваний.

Профилактические мероприятия государственного масштаба заключаются в постоянном контроле санитарно-эпидемиологического режима в ЛПУ, плановом обследовании медработников роддомов и хирургических отделений, своевременном выявлении носителей стафилококка ауреус, иммунизации лиц из группы риска анатоксином или иммуноглобулином.

Заболевания, вызванные Staphylococcus aureus, без соответствующего лечения быстро прогрессируют. Воспалительный процесс при этом легко переходит из первичного очага на соседние органы и ткани. В ослабленном организме может произойти инфицирование любого органа. Самолечение и нежелание обращаться за медицинской помощью к врачу обычно заканчивается осложнениями и даже смертью больных.

Видео: золотистый стафилококк в программе о “Самом главном!”