Тест-системы для определения стафилококков

Производитель:	ООО "БИОКОНТРОЛЬ ГР"
Модель:	БГКП/Staphylococcaceae
Метод оценки:	качественный
Скорость роста (час):	24 / 48 инкубации
Количество в упаковке:	10 тестов
Наличие:	Есть в наличии

В нашем интернет магазине можно приобрести недорого Экспресс - тест/БГКП/Staphylococcaceae (10 тестов) предназначенные для проведения качественного определения БГКП/Staphylococcaceae в воде и пищевых продуктах, других жидких средств, сырья, воздуха, всех типов поверхностей и дезинфекции в короткие сроки, не требующие специалистов. Экспресс – тест представляет собой стаканчик (или пробирку) с завинчивающейся крышкой, к которой прикреплена пластинка. На одну сторону пластинки наноситсяпитательная среда коричневато – красного цвета, предназначенная для обнаружения и выделения колиформных бактерий и кишечных патогенов – агар МакКонки – ГРМ, на другую сторону пластинки наносится питательная среда прозрачно – желтого цвета, предназначенная для выделения стафилококков – Стафилококкагар.
Порядок проведения анализа
1. Открыть крышку стаканчика (или пробирки) и извлечь пластину, не касаясь агаровых поверхностей.
2. При анализе жидких проб (вода, молоко и молочнокислые продукты) полностью смочить пластину, погружая ее в 25 мл исследуемого раствора или под струю жидкости (следите за тем, чтобы под давлением агаризованная среда не сместилась с пластины). Пластина должна находиться в контакте с испытываемой пробой не менее 5 секунд. При анализе вязких (масло, маргарин и т.д.) и твердых проб (мясо, колбасные изделия, сыр и т.д.) для достоверного результата необходимо использовать не менее 3 тестов по 5 отпечатков на каждую сторону.
3. При анализе жидких проб дать избытку жидкости стечь и/или промокнуть нижний край пластины чистой фильтровальной бумагой.
4. Плотно закрыть крышку и поместить тест в место, защищённого от солнца.
5. Пробы необходимо инкубировать при 37ºС до 18 – 20 часов в аэробных условиях.
6. Для оценки результата использовать следующие данные:
Качественное определение колиформных бактерий
Учёт результатов проводить через 18– 20 часов
Escherichia coli - гладкие, круглые, не слизистые, от розового до красного цвета, диаметром около 1,5 – 3,5 мм
Shigella flexneri -прозрачные, гладкие, круглые, блестящие, бесцветные или бледно – розового цвета, диаметром 1,0 –2,0 мм
Salmonella typhimirium -круглые, гладкие, бесцветные, диаметром 1,5 – 3,0 мм
Proteus mirabilis - круглые, гладкие, блестящие, бесцветные, диаметром 2,0 – 4,0 мм, роение подавлено
Enterococcus faecalis -мелкие, розово – красного цвета, диаметром до 1,0 мм
Подозрительные колонии следует подтвердить биохимическими или серологическими тестами в аккредитованной лаборатории.

Качественное определение стафилококков
Учёт результатов проводить через 48 часов. Колонии Staphylococcus aureus на питательной среде имеют круглые, выпуклые, непрозрачные, блестящие формы с ровными краями светло – желтого цвета, диаметром около 2,0 – 4,0 мм. На данной среде могут образоваться колонии Staphylococcus epidermidis и Staphylococcus saprophyticus, которые имеют круглые, выпуклые, блестящие, непрозрачные формы с ровными краями белого цвета, диаметром около 1,5 – 3,5 мм.

Хранение
Не вскрытые пробирки хранятся при температуре от +2 ºС до +15ºС в месте, защищённом от солнца и источников нагревания, а также при отсутствии паров кислот, щелочей и органических растворителей в течение всего срока годности. Срок годности указан на коробке. На стенках и дне пробирки может образоваться небольшое количество конденсата за счет испарений с агаровых поверхностей. Этот конденсат стерилен и может быть слит в систему канализации. Его присутствие не влияет на достоверность показаний экспресс – тестов, если только агаровая пластинка не повреждена.

Стоимость дана за 1 упаковку 10 тестов с НДС 20 %

Габаритный размер упаковки 160*100*65 мм, вес 170 гр.

Заказать звонок

Введите номер телефона и наш менеджер перезвонит вам в течение 15 минут.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии. Изобретение обеспечивает тест-систему ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка; способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, с применением указанной тест-системы; и способ диагностики стафилококковой аллергии. Применение заявленного изобретения позволяет выявить аллергию на стафилококк. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Рисунки к патенту РФ 2436100

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностике.

В России аллергическими заболеваниями страдает от 10 до 30% населения [1]. Инфекционно-зависимые формы в структуре аллергических болезней составляют до 75% всех аллергопатологий, в числе которых следует отметить тяжело протекающие болезни: бронхиальную астму, хронические бронхиты, риниты, аллергодерматозы, осложненные инфекцией, нередко приводящие больных к инвалидности [2]. Экономический ущерб от аллергических заболеваний, осложненных инфекцией, чрезвычайно высок из-за многократных ежегодных обострений хронических инфекций у больных.

В основе инфекционно-зависимых форм аллергии лежит гиперреактивность сенсибилизированного организма больного к аллергенам микробов, обитающих на коже и слизистых оболочках носа, зева, бронхов больных [3, 4, 5, 6, 7]. Аллергенные свойства микроба зависят от природы его метаболитов, путей их трансформации внутри организма человека, от специфики взаимосвязей живой микробной клетки с организмом хозяина.

Многообразие способов воздействия микроба на макроорганизм обусловливает сложность решения проблемы аллергенности бактерий и их метаболитов [8]. Ранее исследованиями многочисленных авторов [9, 10], в частности сотрудниками ГНЦ-Института иммунологии ФМБА А.Д.Адо, В.Н.Федосеевой и соавт. 1997-2003 гг., было показано, что стафилококки играют важную роль в патогенезе инфекционно-зависимых форм аллергии. Была доказана возможность формирования гиперчувствительности немедленного типа у больных респираторно-аллергическими заболеваниями, атопическими дерматитами на аллергены стафилококка. Последнее является важным критерием назначения больным аллерген-специфической иммунотерапии аллерговакцинами из стафилококка [11] и последующей тактики ведения больных с немедленным типом аллергии к стафилококку.

Авторы не обнаружили в уровне техники аналог-прототип, наиболее близкий к заявленному изобретению, поскольку нами впервые была поставлена задача разработки технологии получения тест-системы ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотках крови больных аллергическими заболеваниями, имеющих гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, и диагностики аллергии к стафилококку с использованием указанной тест-системы.

Использование настоящего изобретения позволяет определить специфические IgE-антитела к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями с помощью заявляемой тест-системы, обладающей высокой чувствительностью, и повысить эффективность диагностики аллергии к стафилококку.

В соответствии с настоящим изобретением тест-система ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, включает планшеты одноразового применения с иммобилизованной активной аллергенной субстанцией (AAC), выделенной из стафилококка, на стрипах; AAC St. aureus; положительный и отрицательный контроли (сыворотки); конъюгат анти-IgE-антител; твин-20; буфер с добавлением Твина (pH 7,0-7,2) для приготовления раствора для отмывок; цитратный буфер (pH 4,7) для приготовления рабочего раствора; ортофенилендиамин (ОФД) в виде таблеток 0,0002 г и пергидроль H 2 O 2 - 37% - для приготовления красящего раствора; H 2 SO 4 в качестве стоп-раствора; и инструкцию по использованию набора. При этом AAC состоит из трех активных фракций с молекулярными массами 50, 130 и 170 кДа.

Вторым объектом изобретения является способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка. Указанный способ включает следующие стадии: подготовку твердой фазы (планшет) для сорбции AAC с использованием КББ - карбонатно-бикарбонатного буфера (pH 9,5); нанесение раствора AAC в лунки планшета; инкубацию AAC на твердой фазе в холоде при 2-4°C в течение 2 суток; отмывание буфером (pH 7,0-7,2) трижды, подсушивание; нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (pH 7,0-7,2); инкубацию в термостате при 37°C в течение 2,5 часов; отмывание буфером (pH 7,0-7,2) трижды, подсушивание стрипов; нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов; инкубацию в холоде при 2-4°C в течение 18-20 часов; нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (pH 4,7) во все лунки стрипов; нанесение во все лунки стоп-раствора; контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 нм на Мультискане.

Следующим объектом изобретения является способ диагностики стафилококковой аллергии, включающий определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного с использованием вышеуказанного способа, причем позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Подбор и паспортизация опытных штаммов стафилококка для получения аллергенной субстанции осуществлялась на основе идентификации видовых признаков штаммов стафилококка, выделенных от больных бронхиальной астмой и атопическим дерматитом стафилококкового генеза, на базе бактериологической лаборатории ГФБУ Институт иммунологии ФМБА, Отдела живых культур ГИСКа им Л.А.Тарасевича Роспотребнадзора с учетом морфологических, культуральных и биохимических характеристик.

1.2 Создание банка специфических сывороток с высокой IgE-связывающей активностью с аллергенами стафилококка осуществлялось на основе клинико-лабораторного обследования больных респираторно-аллергическими заболеваниями и атопическим дерматитом (АД), осложненными стафилококковой инфекцией отделения НКО (зав. проф. Л.В.Лусс) и отд. аллергологии и иммунопатологии кожи (зав. проф. Феденко Е.С.). Обследовано 47 больных с бронхиальной астмой и 12 чел. с АД, осложненными стафилококковой инфекцией (всего 59 чел.). Банк специфических сывороток составил 15 образцов с интенсивностью ИФА в специфическом IgE-связывании со стафилококковым аллергеном 2-4 класса.

Из таблицы 1 видно, что образец AAC St. aureus, полученный в Институте иммунологии, обладает специфической активностью.

Уровни связывания специфических IgE-антител в сыворотках крови больных с гиперчувствительностью к Staphylococcus aureus с испытуемой AAC из Staphylococcus aureus составили 3,2±0,2 (класс ИФА), что подтверждает специфическую активность AAC. Препарат Рузам - менее активен.

2.5 Разработка экспериментального технологического процесса изготовления на основе ЛАС тест-системы ИФА для определения IgE-антител в сыворотках крови больных с гиперчувствительностью к аллергенам стафилококка

Были выявлены оптимальные условия связывания AAC Staphylococcus aureus на планшетах разной степени сорбции аллергенов. Найдены критерии оптимальной фиксации препарата и максимальной интенсивности специфического IgE-связывания, что использовано на разных этапах выполнения работ.

Проведена оценка специфической активности разработанной тест-системы ИФА.

Сформулированы требования к тест-системе ИФА на основе AAC:

- AAC должна обладать способностью взаимодействовать со специфическими к St. aureus IgE -антителами контрольной положительной сыворотки (положительный контроль). Образуемый комплекс выявляется пероксидазным конъюгатом моноклональных анти-IgE-антител, образующих цветное окрашивание с субстратной смесью. Определение проводят твердофазным иммуноферментным анализом (ИФА) [23].

Определение считают удовлетворительным, если положительная контрольная сыворотка при взаимодействии с испытуемыми образцами Staphylococcus aureus дает цветное окрашивание, оптическая плотность которого выше оптической плотности контрольной отрицательной сыворотки

Пример технологического процесса (ТП)

ТП-1 - подготовка твердой фазы (планшет) для сорбции AAC с использованием КББ (pH - 9,25);

ТП-2 - нанесение раствора AAC в лунки планшета;

ТП-3 - инкубация AAC на твердой фазе в холоде при 2-4°C в течение 2 суток;

ТП-4 - отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание;

ТП-5 - нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (pH 7,0-7,2);

ТП-6 - инкубация в термостате при 37°C в течение 2,5 часов;

ТП-7 - отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание стрипов;

ТП-8 - нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов;

ТП-9 - инкубация в холоде при 2-4°C в течение 18-20 часов;

ТП-10 - отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание стрипов;

ТП-11 - нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (pH 4,7) во все лунки стрипов;

ТП-12 - нанесение во все лунки стоп-раствора;

ТП-13 - контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 в Мультискане.

2.6 Апробация разработанной тест-системы ИФА в клинико-лабораторных исследованиях

Было собрано 26 сывороток крови больных с респираторно-аллергическими заболеваниями и атопическим дерматитом, осложненными стафилококковой инфекцией. Показано, что сыворотки 81% пациентов с гиперчувствительностью к St.aureus показали положительную реакцию с AAC в тест-системе ИФА (2-4 класс реакции) при сравнении с позитивным и негативным контролями.

На основании проведенной работы разработана Инструкция по применению тест-системы ИФА для диагностики аллергии к стафилококку и макет тест-системы (см. иллюстрации).

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ИФА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ К СТАФИЛОКОККУ

Назначение: тест-система ИФА на основе AAC St.aureus предназначена для выявления специфических к стафилококку IgE-антител в сыворотках крови больных аллергическими заболеваниями, осложненными стафилококковой инфекцией.

Область применения: данная диагностическая система может быть использована для выявления аллергии к стафилококку.

Принцип определения: на основе активной аллергенной субстанции стафилококка (AAC) проводится скрининговый ИФА для выявления специфических IgE-антител к стафилококку у больных аллергическими заболеваниями, осложненными стафилококковой инфекцией.

Комплект тест-системы включает:

- положительный контроль (сыворотка),

- отрицательный контроль (сыворотка),

- буфер с добавлением Твина (pH 7,2) (для отмывания, рабочий раствор),

- цитратный буфер (pH 4,7) - рабочий раствор,

- ортофенилендиамин (ОФД), таблетки 0,002 г,

- пергидроль H 2 O 2 - 37%,

- H 2 SO 4 - 50% (стоп-раствор),

- Инструкция по использованию набора.

2. Холодильник с морозильной камерой на -20°C.

3. Стерильные наконечники.

5. Центрифуга ЦЛ1/3.

6. Мультискан (Multiskan EX, Thermo Labsystems).

7. Термостат TC-80M-2.

8. Мешалка Titertek.

9. Иономер универсальный ЭВ-74.

- В лунки планшета вносят по 100 мкл карбонатного буфера.

- В каждую лунку добавляют 20 мкл AAC.

- Планшет помещают на 2 суток в холодильник.

- Отмывание несвязавшегося AAC проводят 3 раза буфером (pH 7,2).

- Во все лунки стрипов вносят по 50 мкл буфера pH 7,2, а затем:

- в стрип № 1 - 50 мкл положительного контроля - позитивная сыворотка, содержащая IgE-антитела к стафилококку, с реакцией в ИФА - 2-4 класса.

- В стрип № 2 - 50 мкл исследуемых сывороток крови, содержащих IgE-антитела к стафилококку.

- В стрип № 3 - 50 мкл сывороток крови, не содержащих IgE-антитела к стафилококку,

- отрицательный контроль, на 2-3 часа все стрипы, прикрыв крышкой, помещают в термостат при t=37°C.

- Планшет вынимают, отмывают буфером (pH=7,2) 3 раза.

- Заливают во все лунки каждого стрипа по 100 мкл рабочего раствора конъюгата и выдерживают в холодильнике 18-20 часов.

- Вынимают из холодильника и отмывают 3-4 раза буфером (pH 7,2), просушивают.

- Добавляют во все лунки стрипов по 100 мкл краски ОФД (рабочий субстрат), выдерживают в темноте 10-15 минут.

- Реакцию останавливают добавлением во все лунки стрипов по 100 мкл 50% р-ра H 2 SO 4 .

- Результаты считывают на Мультискане (при длине волны 492 нм).

Результаты измерений сравнивают с показателями в позитивном и негативном контролях, позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

Примеры осуществления способа диагностики

1. Пациентка Максимова И.В., 33 г. На протяжении 4 лет принимает противоаллергическую терапию без эффекта. Пациентке провели определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови заявленным способом. Определился 4 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

2. Пациентка Худуева Е.Ю., 47 л. Практически всю жизнь страдает от аллергии. Принимает лечение, часто без эффекта. Заявленным способом определили 4 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

3. Пациент Кларк М., 13 лет. Определили 3 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

4. Пациент Киреев C., 2 года. Определили 2 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ.

4. Елисютина О.Г., Феденко Е.С.Staphylococcus aureus в патогенезе атопического дерматита. Рос., аллергологический ж., 2004, № 1, с.17-21.

7. Хутуева С.Х. Бронхиальная астма. Нальчик, 1988, с.127.

8. Государственная Фармакопея СССР, XI, 1, 2, М., 1998.

14. Taskapan M.J., Kumar P. «Role о staphylococcal superantigens in atopic dermatitis, Ann Allergy Asthma Immunol, 2000, V. 84(1) p 3-10; p.11-2.

18. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP), Москва, 1992 г.

19. Siegel LM., Monty K J. Determination of molecular weights and frictional ration of proteins in impure systems by use of gel filtration and dtnsity gradient centrifugation. Application to crude preparations of sulfite and hidroxylamine reductases. Biochim. et biophis. acta, 1966, 112, p.346-362.

23. Федосеева В.Н., Кудрина Г.П.(ред). Методические рекомендации по оценке аллергенных свойств фармакологических средств. М.: МЗ, 1988, 22 с.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Тест-система ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, включающая планшеты одноразового применения с иммобилизованной активной аллергенной субстанцией (ААС), выделенной из стафилококка, на стрипах; ААС St. aureus; положительный и отрицательный контроли (сыворотки); конъюгат анти-IgE-антител; твин-20; буфер с добавлением Твина (рН 7,0-7,2) для приготовления раствора для отмывок; цтратный бефер (рН 4,7) для приготовления рабочего раствора; ортофенилендиамин (ОФД) в виде таблеток 0,0002 г и пергидроль H 2 O 2 - 37% - для приготовления красящего раствора; H 2 SO 4 в качестве стоп-раствора; и инструкцию по использованию набора.

2. Активная аллергенная субстанция (ААС), выделенная из стафилококка, которая состоит из трех активных фракций с молекулярными массами 50, 130 и 170 кДа.

3. Способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, с применением тест-системы по п.1, включающий подготовку твердой фазы (планшет) для сорбции ААС с использованием КББ (рН 9,5); нанесение раствора ААС в лунки планшета; инкубацию ААС на твердой фазе в холоде при 2-4°С в течение 2 суток; отмывание буфером (рН 7,0-7,2) трижды, подсушивание; нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (рН 7,0-7,2); инкубацию в термостате при 37°С в течение 2,5 ч; отмывание буфером (рН 7,0-7,2) трижды, подсушивание стрипов; нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов; инкубацию в холоде при 2-4°С в течение 18-20 ч; нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (рН 4,7) во все лунки стрипов; нанесение во все лунки стоп-раствора; контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 нм на Мультискане.

4. Способ по п.3, в котором планшетом является одноразовый планшет с высокой сорбцией.

5. Способ по п.3, в котором ААС является AAC St. aureus.

6. Способ по п.3, в котором промывочный раствор содержит натрия хлорид, Твин 20, дистиллированную воду.

7. Способ по п.3, в котором раствор конъюгата получают путем помещения конъюгата, представляющего собой моноклональные антитела против эпсилон-цепи IgE человека, в буфер натриевой соли - Твин 20.

8. Способ по п.3, в котором цитратный буфер содержит лимонную кислоту 0,1 М, натрий фосфорнокислый однозамещенный 0,2 М, натрий фосфорнокислый двузамещенный 0,2 М, дистиллированную воду.

9. Способ по п.3, в котором красящий раствор получают путем растворения в цитратном буфере 1 таблетки ортофенилендиамина, с последующим внесением пергидроля 37%.

10. Способ по п.3, в котором стоп раствором является серная кислота (H 2 SO 4 ) 50%.

11. Способ диагностики стафилококковой аллергии, включающий определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного с использованием способа по п.2, причем позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

12. Способ по п.11, в котором стафилококковой аллергией является аллергия немедленного типа.

Готовые подложки с питательными средами для выявления основных групп бактерий, общей бактериологической обсемененности, дрожжевых и плесневых грибов. Быстрые результаты исследований. Отсутствие необходимости самостоятельного нанесения сред, специальных лабораторных условий.

В компании КОЛБА возможно заказать БЕСПЛАТНЫЕ образцы тестов. Заявку можно отправить по электронной почте, приложив реквизиты организации.

Цена указана за упаковку 10 идентичных тестов (на один вид исследования). При заказе укажите, пожалуйста, какие тесты Вам необходимы.

Тесты реализуются без НДС

Описание

Микробиологические экспресс-тесты “Петритест” используются во всех областях пищевой промышленности.

Экспресс-тесты предназначены для выявления таких микробиологических показателей как:

1. Бактерии группы кишечной палочки
2. Дрожжи/грибы
3. Бактерии Сальмонеллы
4. Бактерии Стафилококка
5. Определение общего микробного числа (КМАФАнМ)

“Петритест” выполнен в форме подложки (пластиковой чашки Петри) с готовой питательной модифицированной средой на основе агара.

Это позволяет использовать тест сразу после вскрытия без процессов дополнительной пробоподготовки.

Преимущества экспресс-тестов для микробиологии “Петритест”

Экономичность. Стоимость одного теста – 120 рублей, тогда как отечественные аналоги стоят 200-240 рублей, зарубежные – свыше 300.
Простота применения, удобство эксплуатации и хранения. Не требуется отдельная лаборатория, дорогостоящее оборудование, специальная подготовка либо профессиональное образование для их проведения.
Быстрый результат. В 4 раза быстрее аналогов
Длительный срок хранения (12 месяцев при to +2.. +6 оС).

В рамках контроля микробиологии производства и продуктов, наряду с другими, определяют и бактерии группы кишечных палочек (БГКП), являющихся возбудителями пищевых интоксикаций. Определяют кишечную палочку и для санитарно-гигиенической оценки чистоты воды и поверхностей трубопроводов, оборудования, инвентаря, тары, рабочих поверхностей предприятий, а также чистоты рук персонала.

Имеются в виду одноклеточные грибы, которые называются дрожжи, и гифальные грибы, тело которых состоит из переплетающихся ветвящихся нитей (гиф), то есть плесень.

Грибы получили широкое распространение в пищевой промышленности. Так, дрожжи вызывают брожение и их с успехом применяют в пивоварении и квасоварении, хлебопечении и т.д. Плесени же используют для изготовления сыров, производстве лимонной кислоты, виноделии и пр.

Однако ни в коем случае нельзя недооценивать опасность грибов для здоровья человека. Многие плесневые грибы вырабатывают микотоксины – ядовитые вещества, ряд сапрофитов (грибы, питающиеся мертвыми органическими веществами) являются причиной заболевания человека и животных – микозов, аспергиллезов и др. Также некоторые виды плесени могут вызвать аллергические реакции. Широко известно негативное влияние грибов и в сельском хозяйстве – плесень заводится в зерне и кормах для животных.

В настоящее время существует несколько методик для определения грибов в продуктах питания. Они различаются как по питательным средам, так и по способам посева и времени инкубации. При изучении продуктов, куда специально добавляют плесень или дрожжи в процессе изготовления, необходимо определить соответствие данных показателей имеющимся нормативам.

Экспресс-тесты на грибы “Петритест” дают ускоренный результат исследования!

Экспресс-тест на Сальмонеллы

Основная роль в возникновении пищевых сальмонеллезов принадлежит мясу, субпродуктам, молоку и яйцам. Обсеменение мяса сальмонеллами происходит как прижизненно, так и после убоя – при неправильной обработке туш или обработке не продезинфицированными инструментами или человеком – носителем бактерий. Характерно, что в фарше сальмонеллы развиваются быстрее, чем в цельных кусках мяса. К сожалению, при тепловой обработке приготовленных из фарша продуктов очень трудно добиться их полной стерильности.

Молоко может быть инфицировано бактериями при доении коров и обработке молока. Опасность заключается в том, что сальмонеллы очень долго сохраняются в молочных продуктах: в сливочном масле более 4-х месяцев (130 суток), а в некоторых видах сыра до года. В свою очередь, яйца обсеменяются сальмонеллами как экзогенным, так и эндогенным путем.

Экспресс-тест на стафилококки

Одни из самых распространенных бактерий – стафилококки. Эти бактерии вырабатывают энтеротоксины, которые могут вызвать острые инфекции и заболевания, серьезные гнойные воспалительные процессы практически во всех органах и тканях.

На пищевом предприятии источниками обсеменения пищевых продуктов являются люди, причем не только с поражениями кожи (ожоги, порезы, гнойники и пр.) или страдающие ОРВИ. Было доказано, что и здоровые носители болезнетворных бактерий могут инфицировать продукты. Скорость образования опасных энтеротоксинов зависит от температуры и состава пищевых продуктов. Стафилококки могут быть как в белковых продуктах, так и в углеводистых. Так что стафилококковые токсикозы легко могут возникнуть и в молочных продуктах, и в кондитерских, и в мясных (особенно опасен фарш), и в салатах.

Анализы на ОМЧ (общее микробное число) проводятся на всех пищевых производствах. Это позволяет быстро обнаружить очаги распространения патогенных микроорганизмов, их степень размножения, и впоследствии принять все меры для профилактики развития посторонней микрофлоры либо для ее уничтожения.

Поставляются упаковками по 10 готовых подложек. Цена указана за упаковку.

Определение родовой, видовой и таловой принадлежности микроорганизмов на основании изучения морфологических, тинкториальных, культуральных, ферментативных и антигенных свойств — наиболее ответственная часть микробиологического исследования.

Большое количество патогенов, принимающих участие в возникновении инфекционного процесса, обусловливает применение различных тестов по определению ферментативных свойств путем постановки большого количества биохимических реакций, что позволяет в комплексе с другими данными определить вид микроорганизма. Этот наиболее трудоемкий процесс выполняется в несколько этапов, требует большого количества дифференциально-диагностических сред, реактивов, посуды, что значительно удорожает стоимость анализа и удлиняет сроки его проведения. Результаты удается получить через 4…7 сут. Поэтому для идентификации микроорганизмов наиболее перспективны микрообъемные коммерческие тест-системы (МТС). Они избавляют практических бактериологов от трудоемких и дорогостоящих процедур и позволяют получать стандартные, сопоставимые, воспроизводимые данные, экономят реактивы, ускоряют выдачу результата анализа.

Коммерческие тест-системы для биохимической идентификации микроорганизмов различных групп представляют собой готовые к использованию полистироловые планшеты и панели с сухими дифференцирующими средами или субстратами, которые выпускаются разными производителями.

Коммерческие тест-системы на основе полистироловых планшетов. В Российской Федерации наибольшее распространение получили следующие тест-системы.

4. Системы на основе стандартных 96-луночных микротитровальных планшетов для идентификации энтеробактерий (ММТ-Е1 и ММТ-Е2) (Ставропольская государственная медицинская академия).

5. Наборы для ускоренной (в течение 5 ч) идентификации энтеробактерий РапидЭнтеро 200 и РапидЭнтеро 750 (НИИЭМ им. Пастера, г. Санкт-Петербург).

Диагностические полоски и диски для биохимической идентификации микроорганизмов. Системы индикаторные бумажные (СИБ) представляют собой полоски или диски из хроматографической бумаги, пропитанные соответствующим субстратом и индикатором и покрытые для стабилизации водным раствором поливинилового спирта.

1. Диски с бацитрацином (10 ЕД). Применяют для селективной изоляции Haemophilus spp. при первичном культивировании. Тест основан на устойчивости Haemophilus spp. к высоким концентрациям бацитрацина по сравнению с сопутствующей флорой и саттелитного роста микроорганизмов этого рода в зоне диффузии экзогенных факторов роста из культуры S. aureus.

2. Диски с бацитрацином S. Предназначены для предварительной индикации β-гемолитических стрептококков группы А (S. pyogenes). Тест основан на высокой чувствительности S. pyogenes к незначительным концентрациям бацитрацина (0,04 ЕД), обеспечивающей образование зон задержки роста вокруг диска. Другие β-гемолитические стрептококки резистентны к таким дозам или образуют незначительные зоны ингибиции роста.

3. Диски с оптохином. Предназначены для рутинной первичной индикации S. pneumoniae и дифференциации их от других зеленящих стрептококков. Принцип теста основан на избирательной чувствительности пневмококков к оптохину и резистентности к нему других зеленящих стрептококков.

Общие правила работы с МТС. Методика проведения микробиологических исследований с использованием МТС должна полностью соответствовать прилагаемой инструкции. Общая схема работы с тест-системами состоит из следующих этапов.

1. Выделение культуры. Для работы с МТС используют только чистые культуры. При их выделении особое внимание следует уделять качеству питательных сред. От этого зависит видовой состав изолированных микроорганизмов, их количество в исследуемом материале и успех идентификации. По результатам первичного посева и микроскопии проводят дифференциацию культур на грамположительные и грамотрицательные кокки и палочки.

2. Приготовление бактериальной суспензии. Суспензию готовят в рекомендованной суспензионной среде из чистой 18…24-часовой культуры определенной степени мутности согласно инструкции. Использование слишком густой или жидкой суспензии может привести к ложным результатам. Параллельно делают контрольный высев взвеси культуры на кровяной агар для проверки ее чистоты, ростовых свойств и (или) для постановки дополнительных тестов.

3. Инокуляция. Суспензию тщательно встряхивают; необходимый объем вносят в каждую лунку соответствующего ряда. После этого в определенные лунки для создания анаэробных условий добавляют по 2 капли стерильного вазелинового или парафинового масла.

4. Инкубация. Планшеты в полиэтиленовых пакетах или закрытые крышками инкубируют при 30…37 °С в течение 4…48 ч.

5. Оценка результатов. По окончании выращивания проверяют чистоту культуры по контрольному посеву. При отсутствии роста увеличивают время инкубации. Затем добавляют в определенные лунки необходимые реактивы, позволяющие визуализировать или усилить цветные реакции. Учет проводят визуально с помощью специальных таблиц, цветовых шкал и (или) цветных реакций контрольных штаммов и заносят их в бланки.

6. Идентификация. Проводят с помощью таблиц биохимической активности, индексов профилей, книг-кодов или компьютерных программ.

При окончательной идентификации учитывают дополнительную информацию (микроскопия, характер колоний, наличие гемолиза, пигментообразование, подвижность и т. д.).

При работе с тест-системами следует придерживаться следующих рекомендаций.

1. Строго соблюдать правила работы с инфицированным материалом.

2. После употребления МТС необходимо обезвреживать автоклавированием при (120+2) °С в течение 1 ч.

3. Строго соблюдать условия и сроки хранения в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к тест-системам.

4. Если культуру не удается идентифицировать, следует проверить ее чистоту и повторить исследование.

5. При отсутствии роста на контрольной чашке необходимо увеличить время инкубации.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Читайте также:

• Тиф свфу г нерюнгри
• Осложнение на почки после сальмонеллеза
• Что такое стафилококковый анатоксин для беременных
• Вакцина от полиомиелита инструкция рлс
• Дизентерия относится к пищевым токсикоинфекциям

Классы МПК:	G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого A61P37/08 противоаллергические средства
Автор(ы):	Федосеева Вера Николаевна (RU) , Камышева Валерия Алексеевна (RU) , Миславский Олег Владимирович (RU) , Федоскова Татьяна Германовна (RU) , Лункина Елена Владимировна (RU) , Мартынов Александр Игоревич (RU)
Патентообладатель(и):	Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства (ФГБУ "Институт иммунологии" ФМБА России) (RU), Федосеева Вера Николаевна (RU), Мартынов Александр Игоревич (RU), Камышева Валерия Алексеевна (RU)
Приоритеты: