Типовые стафилококковые бактериофаги способ получения

Рисунки к патенту РФ 2036232

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к производству медицинских биологических препаратов.

Гнойно-воспалительные заболевания, вызванные бактериями стафилококка, стрептококка, синегнойной и кишечной палочкой, протеем, широко распространены и трудно поддаются антибиотикотерапии, часто заканчиваются смертельным исходом, особенно у детей раннего возраста. В последние годы наряду с перечисленными возбудителями в 10-30% случаев от больных выделяются бактерии клебсиелл пневмонии.

Недостатками известного способа являются:
низкий выход биомассы бактериофагов при их культивировании, обусловленный фазой развития (фаза отмирания) бактериальной популяции, использующейся для размножения фагов, а также неоптимизированными условиями культивирования;
нетехнологичность, связанная с использованием для стерилизующей микрофильтрации тупикового режима, керамических фильтров, обладающих низкой производительностью в связи с фильтрацией в тупиковом режиме;
нетехнологичность способа, обусловленная получением фагов в бутылях и невозможность получения препарата в больших объемах;
реактогенность препарата, связанная с присутствием в составе препарата белков питательной среды и метаболитов бактериальных клеток, образующихся в процессе роста бактериальной популяции, а также при фаголизисе;
недостаточно широкий спектр действия препарата, связанный с отсутствием в составе препарата бактериофагов клебсиелл пневмонии;
длительность технологического цикла более 30 ч.

Целью изобретения является разработка нового способа получения пиобактериофага и расширение спектра действия препарата.

Для этого в состав препарата, содержащего бактериофаги стафиликокка, стрептококка, синегнойной палочки, кишечной палочки и протея, дополнительно вводят бактериофаги клебсиелл, получение бактериофагов проводят с использованием экспоненциально размножающейся бактериальной популяции в жидкой питательной среде с последующей очисткой препарата путем микро- и ультрафильтрации в режиме тангенциального потока. Микрофильтрацию проводят на мембранах с размером пор 0,2 мкм, а ультрафильтрацию на мембранах с порогом задержания веществ 150-200 КД. После очистки проводят стерилизующую микрофильтрацию.

Сравнение существенных признаков предлагаемого технического решения и прототипа показывает, что общим для них является процесс культивирования в жидкой питательной среде для получения биомассы фагов стафилококка, стрептококка, синегнойной, кишечной палочки и протея, а также процесс заключительной стерилизующей микрофильтрации фаголизатов для удаления бактериальных клеток.

Однако использование экспоненциально размножающейся бактериальной популяции для получения стафилококкового, стрептококкового, синегнойного бактериофагов в литературе не описано.

Описанный в литературе способ очистки бактериофагов (авт. св. NN 1412302) включает в себя четыре этапа: микрофильтрацию, которая проводится в тупиковом режиме в три этапа (на фильтр-картоне, на целлюлозных мембранах с размером пор 0,5-0,7 мкм, затем на целлюлозных мембранах с размером пор 0,2 мкм) и четвертый этап очистка фаголизатов методом ультрафильтрации в режиме тангенциального потока через полые волокна с порогом задержания веществ 100 КД. Предлагаемый способ включает двухэтапную очистку: микрофильтрацию в режиме тангенциального потока на капроновых мембранах с размером пор 0,2 мкм и очистку ультрафильтрацией в режиме тангенциального потока на плоских мембранах с размером пор 150-200 КД. Предлагаемый способ микрофильтрации на капроновых мембранах более технологичен, производителен и выдерживает 50-70 циклов в отличие от одноразовых целлюлозных мембран и фильтр-картона. Плоские мембраны для ультрафильтрации имеют размер пор 150-200 КД, они более производительны, чем модули с полыми волокнами, вследствие большей скорости потока на плоскорамных установках, определяемой диаметром просвета волокна (полые волокна) и высотой камеры (плоскорамная установка). Использование полых волокон не позволяет в отличие от плоских мембран удалять из фаголизатов вещества, в том числе и фракции эндотоксина, образующиеся при фаголизисе, с молекулярной массой более 100 КД. Очистка на полых волокнах фаголизатов, полученных на таких средах, как мясопептонный бульон и бульон Мартена, содержащих высокомолекулярные фракции белков и пептидов, практически невозможна вследствие образования слоя белка на внутренней поверхности волокон и замедления фильтрации из-за белок-белковых взаимодействий. На плоскорамных установках фаголизаты, полученные на мясопептонном бульоне и бульоне Мартена, фильтруются также хорошо, как и фаголизаты, не содержащие высокомолекулярных белков и пептидов питательных сред.

Проведенный анализ свидетельствует, что предлагаемая совокупность существенных признаков является новой, а влияние отличительных от прототипа существенных признаков на достижение технического результата не следует из известного уровня техники, т.е. предлагаемый способ соответствует критериям "новизна" и"изобретательский уровень".

П р и м е р 1. Способ получения пиобактериофага.

Как видно из табл. 1, использование предлагаемого способа позволяет:
повысить на 50-90% выход биомассы фагов при клуьтивировании и сократить время культивирования в среднем на 21 ч (Р повысить производительность и сократить время стерилизующей микрофильтрации в среднем на 6 ч;
сократить время технологического цикла в среднем на 25 ч (Р Препарат очищенного пиобактериофага в отличие от прототипа не обладал токсическими свойствами при внутрибрюшинном введении препарата белым мышам в дозе, в 3500 раз превышающей максимальную разовую для человека в пересчете на ед. массы тела. Гибели животных, падения массы тела и патологических изменений внутренних органов не обнаружено.

Кроме того, препарат очищенного пиобактериофага в отличие от прототипа не обладал токсическими свойствами при внутрибрюшинном введении в течение 21 дн в терапевтических дозах в расчете на ед. массы тела (хроническая токсичность). Препарат обладал антибактериальной активностью в отношении бактерий стафилококка в титре 10 5 -10 6 по Аппельману, в титре 10 6 -10 7 в отношении бактерий стрептококка. Активность компонентов бактериофагов кишечной и синегнойной палочек, протея также находилась в пределах 10 5 -10 6 по Аппельману (табл. 2). В отличие от прототипа препарат очищенного пиобактериофага обладал антибактериальной активностью в отношении бактерий клебсиелл пневмонии в титре 10 5 -10 7 .

Кроме того, использование предлагаемого способа позволяет повысить выход на 50-90% биомассы бактериофагов при их культивировании, сократить время культивирования в среднем на 21 ч, повысить производительность и сократить время технологического цикла фильтрации в среднем на 25 ч и вести крупномасштабное производство.

Внедрение препарата очищенного пиобактериофага позволит дать практическому здравоохранению эффективный антибактериальный препарат, превосходящий по своей активности как антибиотики широкого спектра действия, так и антибиотики резерва, отличительным признаком которого в отличие от антибиотиков является отсутствие токсичности.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПИОБАКТЕРИОФАГА, включающий культивирование бактерий и бактериофагов стафилококка, стрептококка, синегнойной палочки, кишечной палочки и протея в жидкой питательной среде с последующим сведением в один объем и стерилизующей микрофильтрацией, отличающийся тем, что дополнительно проводят культивирование бактерий и бактериофагов клебсиелл, для получения фаголизатов используют бактерии-продуценты в экспоненциальной фазе роста, микрофильтрацию проводят через мембраны с размером пор 0,2 мкм, после чего проводят ультрафильтрацию через мембраны с порогом задержания веществ 150 - 200 КД в режиме тангенциального потока.

Препараты бактериофагов применяют для лечения и про­филактики инфекционных болезней, а также для определе­ния фагочувствительности и фаготипирования при индика­ции микроорганизмов. Действие фагов основано на их стро­гой специфичности. Препарат фага представляет собой фильтрат бульонной культуры бактерий, зараженной соответствующим фа­гом.

В настоящее время выпускаются сле­дующие препараты фагов, используемые для лечения и профилак­тики.

1. Поливалентный брюшнотифозный бактериофагпредставляет собой фильтрат фаголизата брюшнотифозных бактерий. Препарат применяется для массовой профи­лактики брюшного тифа, а также при противоэпидемических мероприятиях в очагах брюшного тифа.

2. Поливалентный сальмонеллезный бактериофаг групп А, В, С, Д, Еполучен из смеси фаголизатов несколь­ких типов наиболее распространенных сальмонелл (из серо­логических групп А, В, С, Д, Е). Бактериофаг применяют для лечения больных сальмонеллезами, для санации реконвалесцентов и носителей сальмонелл и с целью профилактики сальмонеллезной инфекции.

3. Поливалентный дизентерийный бактериофагявляется смесью фильтратов фаголизатов шигелл Зоне и Флекснера. Бактериофаг применяют с профилактиче­ской целью в сезон подъема заболеваемости дизентерией (в детских уч­реждениях и среди работников пищевой промышленности) и в очагах заболевания по эпидемическим показаниям, а также для лечения дизентерии.

4. Бактериофаг колипредставляет собой фильтрат фаголизатов наиболее часто выделяющихся энтеропатогенных сероваров эшерихий. Коли-бактериофаг рекомендуется для лечения больных с заболеваниями, вызванными энтеропатогенными сероварами эшерихий.

5. Бактериофаг протейный состоит из смеси фильтратов фаголизатов основных видов протеев. Фаг применяют с лечебной целью местно.

6. Коли-протейный фаг представляет собой смесь фильтратов фаголизатов энтеропатогенных эшерихий и проте­ев. Фаг применяется per os при лечении детей с кишечной инфекцией, вызванной энтеропатогенными эшерихиями и про­теем.

7. Стафилококковый фаг является фильтратом фаголизата патогенных стафилококков. Применяется с лечеб­ной целью при стафилококковых поражениях кожи и подкож­ной клетчатки. Стафилококковый фаг используют и с профилактической целью для орошения ран.

8. Стрептококковый фаг получен из фаголизата патогенных для человека стрептококков. Фаг применяют для лечения и профилактики заболеваний, вызванных стрептококками.

Диагностические бактериофаги широко применяются для идентификации бактерий, выделенных от больного или из ин­фицированных объектов внешней среды. С помощью бакте­риофагов можно опреде­лить виды бактерий и их фаговары.

В настоящее время наиболее разработана фагодиагностика и фаготипирование в отношении бактерий рода Salmonella, Vibrio и патогенных стафилококков. Фаготипирование имеет эпидемиологическое значение, т.е. помо­гает устанавливать источник инфекции, пути распространения, изучать эпидемические связи.

В основе фагодиагностики и фаготипирования лежит прин­цип совместного культивирования выделенного микроорганиз­ма с соответствующими видовыми или типовыми фагами. По­ложительным результатом считается наличие хорошо выра­женного лизиса исследуемой культуры с видовым или типовым фагом.

Стафилококковые типовые фаги (29, 52, 52А, 79, 80 и др.) являются фильтратом фаголизата патогенных стафилококков соответствующего типа. Применяются для фаготипирования стафилококков с целью установления источника инфекции при внутрибольничных инфекциях.

Брюшнотифозный Vi I бактериофагпредставляет собой фильтрат фаголизата брюшнотифозных бактерий, содержащихVi-антиген. Препарат применяется для определения наличия Vi-антигенау сальмонелл брюшного тифа с целью последующего Vi-фаготипирования.

Брюшнотифозные типовые Vi –II бактериофаги(А, В1, В2, В3,C1, C2, 28, 40, 41 и др.) представляют собой фильтраты фаголизатов брюшнотифозных бактерий, содержащихVi- антиген соответствующего типа. Применяются для определения фаготипа сальмонелл брюшного тифа.

1. Бактериофаги очень широко распространены в природе, они обнаруживаются там, где находятся чувствительные к ним бактерии ("сопровождают бактерии") – в воде, почве, молоке, в испражнениях больных кишечными заболеваниями, в гное и мокроте больных при других инфекциях. Особенно часто выделяется фаг в период выздоровления.

Чаще всего пользуются для выделения бактериофагов сточными водами путем фильтрования последних через бактериальные фильтры. О наличии бактериофага судят на основании просветления соответствующей бульонной культуры бактерий или образования "стерильных пятен" на плотных средах.

2. Для получения фага содержащий фаг материал (например, испражнения больных дизентерией) засевают в жидкую питательную среду (бульон) и выдерживают в термостате при 37° С 18-20 часов для накопления фага. Затем бульонную культуру фильтруют через бактериальные фильтры для отделения фага от бактериальных клеток. Фильтрат добавляют к свежей культуре дизентерийной палочки, а после ее просветления (свидетельство присутствия и размножения фага и лизиса бактериальных клеток) вновь проводят фильтрацию и добавляют к свежей культуре дизентерийной палочки, т.е. проводят многократное пассирование через культуру чувствительных к фагу бактерий, в результате чего увеличивается количество (титр) выделяемого фага. После накопления достаточного количества фага бульонную культуру вновь отфильтровывают и получают препарат фага. Таким образом, препараты фага – фильтраты бульонных культур лизированных ими бактерий (прозрачные жидкости светло-желтого цвета). Фаги также выпускают в виде таблеток с кислотоустойчивым покрытием, в форме мазей, аэрозолей и свечей (готовят из фильтратов).

3. На препаратах бактериофага обязательно указывается титр фага или количество фаговых частиц в единице объема или в 1 мг (или в 1 таблетке) препарата.

Количество фаговых частиц можно определить путем посева на чувствительную бактериальную культуру, растущую сплошным газоном на плотной питательной среде. В результате размножения фага, вызывающего лизис бактерий, образуются "стерильные пятна" ("бляшки") – негативные колонии фага (они имеют характерную для данного фага форму). Число колоний равно числу фаговых частиц, т.к. один фаг инфицирует одну бактериальную клетку, а стерильное пятно образуется уже в результате его репродукции.

4. Титр фага – наибольшее разведение фага, которое способно еще вызывать лизис чувствительных к нему бактерий.

Титрование – установление титра – можно осуществить на жидких и плотных питательных средах. Для этого препарат бактериофага разводят от 10 -1 до 10 -9 и более. К каждому разведению добавляют одинаковое количество суточной бульонной культуры соответствующих бактерий. Титр определяется после выдерживания в термостате по просветлению бульона в последней пробирке. Например, если первые шесть пробирок остались прозрачными, а в последующих разведениях и в контрольной пробирке имеется рост культуры, то титр фага 10 -6 . При титровании на плотных средах разведения фага наносят на засеянную сплошным газоном бактериальную культуру. Титр определяется по последней чашке, где еще имеются "стерильные пятна". В медицинской практике чаще всего применяются бактериофаги с титром 10 -7 и 10 -8 .

5. Применение фага основано на его строгой специфичности. Они используются для:

а) диагностики инфекционных заболеваний – с помощью известного (диагностического) фага можно определить видовую или типовую принадлежность выделенной культуры. Определение фаговара – фаготипирование – имеет большое значение для выявления вариантов (типов) внутри вида, позволяет установить источник и пути распространения инфекции. В настоящее время разработано фаготипирование р. Salmonella, р. Vibrio, стафилококка. С помощью известной бактериальной тест-культуры можно определить неизвестный фаг в исследуемом материале, что свидетельствует о присутствии в нем соответствующих возбудителей. Присутствие возбудителей в исследуемом материале можно установить по нарастанию титра фага при внесении такого фага в исследуемый материал.

б) лечения и профилактики заболеваний. Лечебный эффект препаратов тем больше, чем раньше от начала болезни начато их применение. Установлена большая эффективность профилактического применения фагов. С профилактической целью их назначают лицам, соприкасавшимся с больным или бактерионосителем. Для получения лечебно-профилактических препаратов используют проверенные производственные штаммы фагов и соответственно типичные культуры микроорганизмов. Бактериальную культуру в жидкой питательной среде, находящуюся в стадии логарифмического роста, заражают маточной взвесью фага. Лизированную фагом культуру фильтруют через бактериальные фильтры и получают препарат.

На жидких и плотных питательных средах бактериофаги очень быстро растворяют соответствующие бактерии, но в организме человека лизис бактерий происходит не в полной мере (действие тормозится в присутствии крови, гноя, лимфы, содержимого кишечника), но бактерии становятся более податливыми действию защитных факторов организма.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Технология приготовления бактериофагов, в основном, аналогична технологии приготовления вирусных препаратов, только вместо эукариотов используются бактериальные клетки, в которых бактериофаги размножаются.

Высокая специфичность некоторых штаммов бактериофагов позволяет использовать их для диагностики инфекционных заболеваний и индикации патогенных микроорганизмов. Фагоиндикация позволяет установить природу возбудителя инфекции даже в том случае, когда другие методы, в т.ч. и серологические, оказываются неэффективными.

В последние годы получение бактериофага широко используется как экспериментальная модель в молекулярной биологии, генной инженерии, биохимии и биофизике (рис.6).

Рис.6. Технология получения бактериофагов

Выявление фаговых частиц и определение их количества. Если к растущей в жидкой среде культуре чувствительных бактерий добавить небольшом количестве частицы вирулентного бактериофага, то бактериальные клетки окажутся зараженными. В течение некоторого времени никаких видимых изменений зараженных клеток обнаружить нельзя. Обычно этот период продолжается от 15 мин до 1ч, а иногда и более (длительность его зависит от природы фага и бактерии, а также от условий культивирования). Затем внезапно происходит лизис зараженных клеток.

При лизисе клетки из нее высвобождается большое количество новых фаговых частиц. Эти частицы могут в свою очередь заражать другие клетки популяции, и при этом вновь повторяется тот же самый процесс. Следовательно, если в культуру внести даже небольшое (по сравнению с количеством бактериальных клеток) число инфекционных фаговых частиц, то через несколько часов практически вся популяция бактерий будет уничтожена.

Число фаговых частиц или зараженных бактериальных клеток в суспензии легко определить, если подходящее разведение этой суспензии нанести на чашку с агаром, поверхность которого равномерно покрыта разбавленной суспензией чувствительных бактерий. После соответствующей инкубации вся поверхность чашки будет покрыта сплошным слоем бактерий, за исключением тех мест, где оказались частицы фага или зараженные клетки. В результате последовательных циклов развития фага пленка бактерий вокруг таких точек локально разрушается и образуются прозрачные зоны лизиса – бляшки

Если имеется смесь зараженных клеток и свободных фаговых частиц, то с помощью соответствующих методов их можно разделить (используя, например, дифференциальное центрифугирование) и затем с помощью описанного метода подсчета бляшек определить по отдельности число тех и других.

Если нужно определить лишь число фаговых частиц, содержащихся в суспензии, то можно избирательно убить присутствующие в ней зараженные клетки. Обычно для этого суспензию клеток и фага встряхивают с хлороформом, к которому бактериофаги устойчивы.

Выделение и очистка бактериофагов. Метод подсчета числа бляшек может быть использован для выделения тех фагов, которые способны развиваться в определенных видах или штаммах бактерий. Для этого пробу материала из природного местообитания такой бактерии встряхивают с водой, освобождают эту суспензию от бактерий, ее через мембранный фильтр или обрабатывая хлороформом, аликвоты смешивают с суспензией данной бактерии и высевают на чашки с агаром.

Любая бляшка, которая выявляется на чашках, соответствует присутствовавшей в природном материале фаговой частице. Фаг из отдельной бляшки можно выделить, прикоснувшись к ней стерильной иглой и суспендировав прилипший к игле материал в небольшом объеме стерильного раствора. Обычно в такой суспензии оказывается от 10 4 до 10 6 фаговых частиц. Затем проводят очистку фага, последовательно повторяя такое выделение из отдельной бляшки.

Для получения больших количеств фага для химического или физического исследования заражают фагом экспоненциально растущую в жидкой среде культуру бактерий. В результате ряда циклов развития фага большинство, а иногда и все клетки культуры, лизируются. Затем оставшиеся в культуре клетки и их обломки удаляют с помощью низкоскоростного центрифугирования, а получившуюся жидкость стерилизуют либо фильтрованием, либо обрабатывая ее хлороформом. В результате получается стерильный лизат, который содержит обычно от 10 9 до 10 12 фаговых частиц на 1 мл, а также растворимый материал и фракцию частиц, которые освобождаются из клеток при лизисе.

Для окончательной очистки бактериофагов обычно используют ультрацентрифугирование. Даже самые мелкие фаговые частицы осаждаются при ускорениях порядка 100 000 g (в 10 5 раз превышающих ускорение под действием земного притяжения). Часто предварительно вирусные частницы осаждают сульфатом аммония или некоторыми другими веществами.

Контроль фаговых препаратов проводят на чистоту, активность и специфичность.

Стерильность бактериофагов проверяют высевом на питательные и культивируют в термостатах при 37 0 С (для выявления бактериальной микрофлоры) и при 24 °С (для выявления грибковой флоры). Препарат считают годным, если через 8 суток во всех средах не обнаруживают рост микроорганизмов. При выявлении роста бактерий или грибов хотя бы в одной пробирке проводят повторный контроль из удвоенного количества образцов. При повторном проросте сред препарат бракуют.

Активность и специфичность бактериофагов устанавливают на жидких и твердых питательных средах титрованием с соответствующим видом бактерий.

Если результаты проверки не соответствуют требованиям инструкций по изготовлению и контролю, то такой препарат не подлежит выпуску.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Содержание

Русское название

Латинское название вещества Бактериофаг стафилококковый

Фармакологическая группа вещества Бактериофаг стафилококковый

Типовая клинико-фармакологическая статья 1

Фармдействие. Обладает способностью специфически лизировать стафилококковые бактерии.

Показания. Гнойно-воспалительные заболевания ЛОР-органов, дыхательных путей, легких (синусит, отит, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит) и ЖКТ (гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз кишечника); хирургические инфекции (гнойные раны, ожог, мастит, абсцесс, флегмона, карбункул, гидраденит, панариций, парапроктит, бурсит, остеомиелит); урогенитальные инфекции (уретрит, цистит, пиелонефрит, кольпит, эндометрит, сальпингооофорит);гнойно-воспалительные заболевания новорожденных и детей грудного возраста (омфалит, пиодермия, конъюнктивит, гастроэнтероколит, сепсис);генерализованные септические заболевания. Для профилактики — обработка послеоперационных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям.

Дозирование. Внутрь. Энтероколит, заболевания внутренних органов, дисбактериоз кишечника — 3 раза в день за 1 ч до еды. На 1 прием до 6 мес — 5мл, 6–12 мес — 10 мл, от 1 года до 3 лет — 15 мл, от 3 до 8 лет — 20 мл, от 8 лет и старше — 30 мл.

Ректально 1 раз в день (в виде клизмы) в сочетании с двукратным приемом внутрь. На 1 прием до 6 мес — 10 мл; 6–12 мес — 20 мл; от 1 года до 3 лет — 30 мл; от 3 до 8 лет — 40 мл; от 8 лет и старше в клизме — 50 мл.

Местно в течение 7–20 дней при терапии гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями.

В случае обработки полости гнойного очага химическими антисептиками перед применением бактериофага полость промыть стерильным 0,9% раствором NaCl.

Гнойные раны — в виде орошения, аппликаций, повязок, введение через дренаж не менее 1 раза в день. При абсцессах после вскрытия и удаления гнойного содержимого препарат вводят в количестве меньшем, чем объем удаленного гноя. В дренированные полости ежедневно 1 раз в день — 20–200 мл.

Остеомиелит — 10–20 мл в полость раны через турунду, дренаж.

Введение в полости (плевральная, суставная и др. ограниченные полости) — до 100 мл бактериофага, оставляя капиллярный дренаж, через который в течение нескольких дней бактериофаг вводится повторно.

Гнойно-воспалительные гинекологические заболевания — 5–10 мл ежедневно 1 раз в день в полость вагины, матки.

Гнойно-воспалительные заболевания ЛОР-органов — 2–10 мл 1–3 раза в день в полости среднего уха, носа. Бактериофаг используют для полоскания, промывания, закапывания, введения смоченных турунд (оставляя их на 1ч).

Цистит, пиелонефрит, уретрит — 20–50 мл в мочевой пузырь и 5–7 мл в почечную лоханку через цистостому или нефростому.

Детям до 6 мес. Сепсис, энтероколит новорожденных, включая недоношенных детей, 2–3 раза в сутки в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер). При отсутствии рвоты и срыгивания препарат применяют внутрь, смешивая с грудным молоком. Возможно сочетание ректального и перорального применения препарата. Курс лечения — 5–15 дней, при рецидивирующем течении заболевания возможно проведение повторных курсов лечения. Для профилактики сепсиса и энтероколита при внутриутробном инфицировании или опасности возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяется в виде клизм 2 раза в день в течение 5–7 дней.

Омфалит, пиодермия, инфицированные раны — 2 раза в день ежедневно в виде аппликации (марлевую салфетку смочить бактериофагом и наложить на пупочную ранку или пораженный участок кожи).

Побочное действие. Не описаны.

Особые указания. Применение бактериофага не исключает применение др. ЛС , в том числе антибактериальных и противовоспалительных препаратов.

Важным условием эффективной фаготерапии является предварительное определение фагочувствительности возбудителя.

[1] Государственный реестр лекарственных средств. Официальное издание: в 2 т.- М.: Медицинский совет, 2009. - Т.2, ч.1 - 568 с.; ч.2 - 560 с.

Читайте также:

• Холера особливо небезпечна інфекція
• Как вы пили стафилококковый бактериофаг
• Как подготовиться к прививке акдс и полиомиелит
• Стафилококк галлинарум чем лечить
• Лямблиоз у детей аллергическая