Вакцина против чумы парвовирусного энтерита ботулизма и псевдомоноза норок

Разработана у норок.

Бионор – вакцина против чумы, парвавирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок. Взрослых прививают за 1 месяц до гона, молодняк с 8 недель. Однократно, внутримышечно, 1 мл, иммунитет до 1 года.

Минковак – вакцина против чумы, вирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок. Иммунитет до 1года.

Минковак-2 – вакцина против вирусного энтерита и ботулизма норок типа C. Иммунитет до 1 года.

Минковак-3 – вакцина против вирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок. Иммунитет до 1 года.

Минковак-В – вакцина против ботулизма норок. Иммунитет до 1 года.

Вакцина ассоциированная инактивированная против вирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок. Иммунитет до 1 года.

Вакцина против ботулизма норок инактивированная. Иммунитет до 1 года.

Профилактика и меры борьбы

Для предупреждения возникновения ботулизма у животных необходимо при заготовке и хранении кормов не допускать загрязнения землёй, трупами грызунов и птичьим помётом. Запрещается скармливать заплесневелые и испорченные корма. Увлажнённые корма следует давать сразу после приготовления. Корма животного происхождения давать животным после тщательной проварки в течение 2 часов. В звероводческих хозяйствах обязательно проводят вакцинацию против ботулизма. При возникновении заболевания ограничения и карантин не накладывают. Больных изолируют и лечат. Убой на мясо запрещается. Трупы уничтожают вместе со шкурами, также уничтожают корма, которые вызвали отравление у животных.

Ботулизм у человека

Возникает при употреблении заражённых продуктов домашнего изготовления: консервированные грибы в герметически закрытых банках, тушёнки, колбаса.

Инкубационный период 12-24 часа. Заболевание протекает в острой форме, наблюдается головная боль, боли в животе, слабость, запоры, вздутие живота. Характерным для ботулизма является расстройство зрения у человека через 1-3 суток. Затрудняется глотание, человек не может говорить, затрудняется дыхание, наблюдается тахикардия, синюшность и бледность кожных покровов.

Лечебная помощь: промывание желудка, клизма, противоботулиническая сыворотка внутримышечно, антибиотики, внутривенно физраствор и глюкозу. При своевременном лечении прогноз благоприятный. Восстановительный период несколько месяцев.

Столбняк

Острая раневая инфекционная болезнь животных и человека, характеризующаяся выраженной рефлекторной возбудимостью и судорожным сокращением мускулатуры тела. Tetanus.

История изучения

Впервые клиническую картину болезни описал Гиппократ, у которого от столбняка умер сын. Научное изучение столбняка началось во 2 половине 19 века. Возбудитель был открыт в 1883 году русским хирургом Монастырским и в 1884 году немецким учёным Николаером. Чистую культуру микроорганизмов выделил в 1887 году японский микробиолог Китазато, он же в 1890 году получил столбнячный токсин, совместно с немецким бактериологом Берингом создал противостолбнячную сыворотку. В 1923 году французский иммунолог Г. Рамон получил столбнячный анатоксин, который стал применяться для профилактики заболевания.

Распространённость заболевания

Встречается во всех регионах земного шара, наибольшее распространение имеет в странах с жарким и влажным климатом. В тропиках и субтропиках встречается круглогодично, в странах с умеренным климатом имеет ярко выраженный сезонный характер (с конца весны до начала осени).

Экономический ущерб

Столбняк встречается в виде спорадических случаев или в виде небольших эпизоотических вспышек. Ущерб складывается из гибели животных (летальность 45-90%), снижения продуктивности, затрат на лечение и ветеринарно-санитарные мероприятия.

Возбудитель

Семейство Bacillaceae, род Clostridium, вид Cl. tetani.

Подвижные палочки с закругленными концами. Облигатный анаэроб, развивается в анаэробных условиях. Образуют одну спору на конце бактериальной клетки, поэтому похож на барабанную палочку. Капсул не образует, Г+. Среды для анаэробов. Китта-Тароцци (помутнение, образование газа, своеобразный запах – жженого рога). Глюкозно-кровяной агар – колонии в виде переплетающихся нитей (некоторые колонии похожи на паучков).

Устойчивость

Вегетативные формы малоустойчивы, но споры очень устойчивы. В почве, высохшем кале, на предметах выживает свыше 10 лет, при 100 ̊С свыше 3 часов. Это свойство обусловливает стационарность болезни.

Препараты для дезинфекции

5% раствор фенола, 5% раствор формалина.

Эпизоотологические данные

Восприимчивость

Самые восприимчивые – лошади. Менее восприимчивы овцы, козы, КРС, свиньи. Редко болеют собаки и кошки. Птицы устойчивы, холоднокровные нечувствительны.

Изобретение относится к средствам специфической профилактики заболеваний норок, в частности к вакцине "Бионор" против чумы, вирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза. Ассоциированная вакцина "Бинор" содержит на одну прививочную дозу (1 мл) сухую вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 10 2,2 ТЦД, суспензию адсорбированной инактивированной культуры штамма паровируса плотоядных "Геркулес" - титр не менее 6 log₂ РГА (до инактивации), ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма Cl. Botulinum N 59 5-10 ЕС и смешанную адсорбированную суспензию Ps.Aeruginosa штаммов 381-П-06 Т 40, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, взятых в равных соотношениях - 0,9 млрд.кл. Использование в составе вакцины новых штаммов ЭПММ и "Геркулес", а также технология их подготовки обеспечивают высокую иммуногенность и термостабильность ассоциированной вакцины в процессе длительного хранения. 3 с.п. ф-лы.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к средствам специфической профилактики вирусного энтерита, чумы плотоядных, ботулизма и псевдомоноза.

Известна ассоциированная вакцина для профилактики вышеперечисленных заболеваний плотоядных, включающая суспензию инактивированной культуры штамма Virus enteritis lutreo larum "Родники-1631" с титром 1:128-512 в РГА, ботулинический адсорбированный анатоксин типа C из штамма Clostridium botulinum N 59 с активностью 5-10 EC/см 3 , смешанную суспензию Pseudomonas aeruginosa 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "ДН"-05 N 77 с концентрацией клеток 9-11 млрд/см 3 и лиофилизированный вирус Virus distemper canine штамм "ЭПМ" в титре 10 3,4-4,0 ТЦД₅₀/см 3 с сорбит-желатозным стабилизатором (RU N 2086260).

Однако известная ассоциированная вакцина недостаточно термостабильна.

Целью изобретения является стабилизация иммуногенных свойств вакцины.

Штамм вируса чумы плотоядных ЭПММ получен пассированием исходного штамма ЭПМ через организм хорька и на фибробластах перепела, хранится в коллекции ТОО "Биоцентр" под названием "ЭПММ" и характеризуется следующими признаками: - полиморфная частица размером от 140 до 220 нм: - относится к семейству Paramyxoviridae, род Morbillivirus: - лимфотропный; - гемагглютинирующие свойства отсутствуют; - имеет выраженное цитопатогенное действие в отношении культуры клеток ЭП; - содержит уменьшенное на порядок по сравнению с исходным вирусом ЭПМ дефектных интерферирующих частиц (ДИЧ) (вирусных капсидов, не содержащих РНК).

Иммуногенная активность: - при введении хорькам в титре не ниже 10 2,2 ТЦД вызывает полную невосприимчивость к заражению 1000 ЛД₅₀ вируса чумы плотоядных штамм Snyder Hill.

Титр культурального вируса 10 2,5 - 10 4,5 ТЦД₅₀/0,5 мл в культуре клеток ЭП.

Хранение в среде высушивания при pH 6.8-7,2 и температуре минус 20 o C. Допустимая длительность хранения без освежения - 2 года.

Сохраняет иммуногенность и стабильное значение титров на протяжении 10 пассажей в культуре клеток ЭП.

Иммуногенная активность сохраняется в течение 2 лет. Генетические свойства стабильные.

Штамм парвовируса плотоядных "Геркулес" выделен от больного тигра, хранится в коллекции ТОО "Биоцентр" под названием "Геркулес" и характеризуется следующими признаками: - икосаэдр размером 20-24 нм; - относится к семейству Parvoviridae, вид Parvovirus Carmivorum; - эпителиотропный: - агглютинирует эритроциты свиньи; - активен в РГА - не ниже 1:4096 ГАЕ₅₀/0,1 мл; - титр культурального вируса 1:64 FAE₅₀/0,1 мл в культуре CRFK; - клеточная культура - первично-трипсинизированная почка котенка, перевиваемая линия CRFK.

Хранение - нативный, замороженный, pH среды 6,8-7,4, температура минус 56 o C.

После инактивации обладает иммуногенной активностью. Сохраняет иммуногенные свойства после 2 пассажей в культуре клеток CRFK.

Сохранение иммуногенной активности - не менее 5 лет.

Данные штаммы используют для приготовления ассоциированной вакцины "Бионор".

Приготовление вакцины иллюстрируется следующим примером.

Стадия А. - Подготовка штамма вируса чумы ЭПММ для приготовления вакцины.

Вирус ЭПММ культивируют в роллерных бутылях с площадью культивирования не менее 800 см 3 на монослое фибробластов эмбриона перепела (ЭП). При получении вируссодержащей жидкости (ВСЖ) с титром не менее 10 3,0 ТЦД ее пулируют, разливают во флаконы емкостью 100 мл по 30 мл и лиофилизируют в среде высушивания, содержащей буферные соли, полимерные сахара и аминокислоты.

Контролируют специфическую активность после сушки, стерильность, безвредность, иммуногенность и термостабильность.

Для контроля термостабильности отбирают 10 ампул, прогревают при 37 o C в течение 7 дней, затем вновь проводят контроль специфической активности. Падение активности не должно привышать 0,5 lg ТЦД₅₀/0.1 мл.

Стадия Б. - Подготовка штамма парвовируса "Геркулес" для приготовления вакцины.

Вирус "Геркулес" культивируют в роллерных бутылях с площадью культивирования не менее 800 см 3 на монослое клеток перевиваемой линии почки котенка CRFK. При получении ВСЖ с титром не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи ее инактивируют формальдегидом и адсорбируют на гидроокиси алюминия.

Полученный компонент вакцины жидкой консистенции.

Стадия В. - Приготовление ассоциированной вакцины "Бионор".

Для приготовления одной прививочной дозы объемом 1 мл смешивают полученный на стадии Б компонент вакцины против парвовирусного энтерита в количестве 6 log₂ ГАЕ с инактивированным формальдегидом ботулиническим анатоксином типа C из штамма Cl. botulinum N 59 с активностью 5-10 ЕС и вакциной против псевдомоноза, представляющей собой смешанную адсорбированную суспензию культур Ps. aeruginosa 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77 в равных соотношениях при общем количестве микробных клеток не менее 0,9 млрд.

В полученную смесь 3-х вакцинных компонентов добавляют 3 об.% 19%-го раствора метабисульфита натрия. Проводят контроль на стерильность, безвредность, остаточную концентрацию формальдегида (не выше 0,0001%), а также на способность при смешивании с сухим компонентом (вакцина против чумы) не уменьшать специфическую активность последнего в течение 1-го часа.

Сухой компонент вакцины против чумы плотоядных, полученный на стадии А, смешивают с остальными жидкими компонентами вакцины (стадия В) из расчета на 1 дозу 2,2 lg ТЦД₅₀ непосредственно перед использованием ассоциированной вакцины.

Приведенные в примере концентрации компонентов вакцины являются минимально допустимыми.

Применяют ассоциированную вакцину по известной схеме.

Проверку термостабильности сухого компонента вакцины проводили следующим образом: 150 флаконов используют для опыта и 300 флаконов - контроль. Хранение - в условиях предприятия.

Опытные флаконы прогревают при 37 o C в течение 7 дней. Каждые три месяца проводят контроль активности (ЦПД в культуре клеток) и каждый год - контроль иммуногенности на животных (хорьках) с пробойником Snyder Hill. Исходная активность вакцины - 3,5 lg. После прогревания наблюдалось падение активности на 0,5 lg. За 2,5 года наблюдения (с ноября 1995 года) активность снизилась на до 2,5 lg (допустимая активность). В контроле (без прогрева) за тот же срок наблюдения активность составила 3,0 lg.

В известной вакцине сухой компонент сохраняет активность в течение 1 года при условии ее хранения строго при плюс 2-8 o C.

Таким образом, использование новых вакцинных штаммов обеспечивает вакцине в целом высокую иммуногенность и термостабильность в процессе ее хранения.

1. Вакцина против чумы, вирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок, содержащая ботулинический адсорбированный анатоксин типа C из штамма Clostridium botulinum N 59, лиофилизированную вируссодержашую жидкость штамма вируса чумы плотоядных со стабилизатором, суспензию адсорбированной инактивированной культуры штамма вируса энтерита и смешанную адсорбированную суспензию Pseudomonas aeruginosa штаммов 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, отличающаяся тем, что в качестве вируса чумы плотоядных она содержит штамм вируса чумы плотоядных ЭПММ, а в качестве вируса энтерита - штамм парвовируса плотоядных "Геркулес" при следующем количественном соотношении компонентов из расчета на 1 прививочную дозу (1 мл): - лиофилизированная вируссодержащая жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 10 2,2 ТЦД₅₀; - суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1 : 64 в РГА с эритроцитами свиньи; - ботулинический адсорбированный анатоксин типа C из штамма Clostridium botulinum N 59 - активность не менее 5 - 10 ЕС; - смешанная адсорбированная суспензия Pseudomonas aeruginosa штаммов 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, взятых в равных соотношениях - не менее 0,9 млрд.м.кл.

2. Вакцинный штамм вируса чумы плотоядных ЭПММ, депонированный в коллекции ТОО "Биоцентр", используемый для приготовления вакцины для плотоядных.

3. Вакцинный штамм парвовируса плотоядных "Геркулес", депонированный в коллекции ТОО "Биоцентр", используемый для приготовления вакцины для плотоядных.

Вакцинируют только клинически здоровых животных, используя вакцины, назначенные ветеринаром. Для профилактики болезней норок (чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза) используют препарат Бионор. Вакцина может быть моно- и поливалентной, в своем составе содержать: лиофилизированный живой компонент против чумы плотоядных (обозначается маркировкой Бионор D), жидкий инактивированный компонент против парвовирусного энтерита (Бионор Р), ботулизма (Бионор В), псевдомоноза (Бионор А), к примеру, препарат Бионор D РАВ вызывает образование специфических антител к вирусам всех перечисленных выше заболеваний. В целом, препарат Бионор выпускается в шести различных модификациях, применение которых варьируют в зависимости от эпизоотической ситуации в каждом конкретном случае.

Инструкция по применению (дозировка)

Вакцина состоит из двух компонентов: сухого (сухая аморфная масса бежевого цвета, допускается бледно-розовый оттенок) и жидкого (гомогенная суспензия с рыхлым осадком, который при встряхивании легко разбивается, от розового до бежевого цвета). Сухой компонент вакцины против чумы плотоядных (Бионор D) расфасован в стеклянные флаконы по 150 или 200 прививочных доз, а жидкий — по 150, 200, 400 или 450 прививочных доз.

Иммунизацию норок проводят с 8-недельного возраста животных, ежегодно, не менее чем за 1 месяц до гона и не ранее одной недели после вакцинации против других инфекций. За 10 дней до процедуры проводят дегельминтизацию животных и выводят эктопаразитов.

Перед применением сухой компонент растворяют жидким компонентом. Для этого стерильным шприцом через иглу всасывают надосадочную часть жидкого компонента, затем вносят ее во флакон с сухой вакциной и встряхивают, далее содержимое данного флакона вновь переносят во флакон с жидкой вакциной, и полученную смесь встряхивают до образования однородной взвеси. Вакцину желательно подогреть на водяной бане до 18 градусов.

В случае применения сухого компонента как моновакцины его растворяют водой для инъекций из расчета 1 мл воды на 1 дозу.

Вакцину вводят норкам в толщу мышц с внутренней стороны бедра в объеме 1 мл для каждого животного, независимо от возраста и массы тела. На месте введения может образоваться уплотненная припухлость, которая самостоятельно рассасывается в течение 3-5 дней. У некоторых зверей после введения вакцины наблюдается хромота в течение 1-3 суток, а также снижается аппетит.

Иммунитет у животных формируется через 14-21 день после вакцинации и сохраняется в течение года к каждому из возбудителей, входящих в состав препарата.

Обратите внимание, что вакцина не производит лечебный эффект, поэтому животные, иммунизированные в инкубационном периоде того или иного заболевания, могут погибать от инфекции.

Не допускаются к вакцинации самки норок во второй половине беременности, а также больные и истощенные животные.

Условия хранения

Срок годности вакцины Бионор составляет 12 месяцев с даты изготовления при соблюдении условий хранения: сухое темное место, при температуре от 2 до 10 градусов. После смешения компонентов вакцину используют в течение часа. Не подлежит хранению и применению жидкий компонент препарата, подвергнувшийся замораживанию. Также не используют вакцину, содержащую посторонние примеси, плесень и хлопья, которые не разбиваются при встряхивании флакона. Выбракованное средство обеззараживают путем кипячения в течение 20 минут и утилизируют вместе с бытовыми отходами.

Для вакцинации норок используют те же вакцины, что и для собак. Однако многие ветеринары не рекомендуют прививать этих животных отечественными препаратами, а отдают предпочтение импортным средствам, таким как Эурикан, Нобивак. При этом вакцинировать от инфекционного гепатита и парвовирусного энтерита не обязательно, так как норки не подвержены этим заболеваниям.

Владельцы патента RU 2708980:

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности, к средствам специфической профилактики заболеваний норок и соболей, а именно к вакцине "БИОКОН" против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза.

Известна ассоциированная вакцина для профилактики вышеперечисленных заболеваний плотоядных, включающая суспензию инактивированной культуры штамма Virus enteritis lutreo larum "Родники-1631" с титром 1:128-512 в РГА, ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма Clostridium botulinum N 59 с активностью 5-10 ЕС/см 3 , смешанную суспензию Pseudomonas aeruginosa 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "ДН"-05 N 77 с концентрацией клеток 9-11 млрд/см 3 и лиофилизированный вирус Virus distemper canine штамм "ЭПМ" в титре 103,4-4,0 ТЦД₅₀/см 3 с сорбит-желатозным стабилизатором (патент RU 2086260, 1994).

Однако известная ассоциированная вакцина недостаточно термостабильна.

Указанная вакцина разработана и широко применяется для вакцинации норок.

Накоплен положительный опыт применения вакцины для вакцинации соболя в звероводческих хозяйствах РФ. Однако вызываемые при этом поствакцинальные реакции, приводящие к некоторому снижению экономического эффекта от применения вакцины, сдерживают более широкое использование вакцины на поголовье соболя.

Задачей настоящего изобретения является разработка ассоциированной вакцины с высокой иммуногенностью и низкой реактогенностью как для норок, так и для соболей.

- лиофилизированная вируссодержащая жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 10 2,2 ТЦД,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Береговой" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС,

Ассоциированная вакцина "БИОКОН" является двухкомпонентной (сухой компонент и жидкий компонент-растворитель для сухого компонента) и содержит в своем составе следующие вирусные и бактериальные антигены:

Живой вакцинный вирус чумы плотоядных ЭПММ;

Ботулинический адсорбированный анатоксин Clostridium Botulinum (Тип С);

Инактивированные Pseudomonas Aeruginosa возбудители псевдомоноза серотипов 5, 6, 8.

Штамм парвовируса плотоядных "Береговой" выделен от больной норки, хранится в коллекции ООО "Биоцентр" под названием "Береговой" и характеризуется следующими признаками:

1. Вирионы - изометрические частицы кубической симметрии размером 20-24 нм;

2. Относится к семейству Parvoviridae, род Parvovirus;

4. Агглютинирует эритроциты свиньи. Активность в РГА с эритроцитами свиньи не ниже 1:4096 ГАЕ50/50 мкл;

Вирус накапливается в культуре клеток перевиваемой линии CRFK в титре не ниже 1:1024 ГАЕ50/50 мкл;

Хранение - нативный, замороженный, рН среды 6,8-7,4, температура - минус 56°С.

После инактивации обладает иммуногенной активностью. Сохраняет иммуногенные свойства после 2 пассажей в культуре клеток CRFK.

Сохранение иммуногенной активности - не менее 5 лет.

Грамотрицательные палочки, спор и капсул не образующие, подвижные. На твердых и жидких питательных средах через 18-24 ч продуцируют пигмент пиоцианин желтозеленого цвета и слизь, вследствие чего через 48 часов культивирования жидкие питательные среды приобретают слизистую консистенцию. На плотных питательных средах образуют круглые, разной величины колонии сероватого цвета со слегка вогнутым центром S форма, вокруг которых образуется пигментная зона. На жидких питательных средах через 12-18 ч культивирования образуется нежная сероватая поверхностная пленка, легко разбивающаяся при встряхивании;

На среде Гиса ферментируют без образования газа глюкозу, разжижают желатин, пептонизируют молоко, обладают каталазной активностью.

Метод серотипирования с О-агглютинирующими псевдомонозными сыворотками: по О-антигенной структуре относятся к 06 серологическому варианту. О-антигенная принадлежность штаммов проверяется в пластинчатой реакции агглютинации на стекле с серотиповыми О-агглютинирующими псевдомонозными сыворотками согласно наставлению по их применению.

Лд 50 для морских свинок массой 220-250 г составляет 1,5-2,0 млрд микробных тел.

Подготовка штамма вируса чумы ЭПММ для приготовления вакцины.

Вирус ЭПММ культивируют в роллерных бутылях с площадью культивирования не менее 800 см 3 в культуре клеток фибробластов эмбриона перепела (ЭП). При получении вируссодержащей жидкости (ВСЖ) с титром не менее 10 3,0 ТЦД ее объединяют со стабилизатором (сорбит, желатоза), разливают во флаконы емкостью 100 мл по 30 мл и лиофилизируют.

Контролируют специфическую активность после сушки, стерильность, безвредность, иммуногенность и термостабильность.

Приготовление ассоциированной вакцины "БИОКОН".

В полученную смесь 3-х вакцинных компонентов добавляют 3 об. % 19%-го раствора метабисульфита натрия. Полученный жидкий компонент оставляют в реакторе при непрерывном перемешивании на 24 часа. Проводят контроль на стерильность, безвредность, остаточную концентрацию формальдегида (не выше 0,001%), а также на способность при растворении сухого компонента (вакцина против чумы плотоядных) не снижать специфическую активность последнего в течение 1-го часа.

Сухой компонент вакцины против чумы плотоядных, полученный на стадии А, смешивают с жидким компонентом вакцины (стадия В) непосредственно перед использованием ассоциированной вакцины.

Применяют ассоциированную вакцину по известной схеме.

Таким образом, использование новых вакцинных штаммов обеспечивает вакцине в целом низкую реактогенность при сохранении высокой иммуногенности как для норок, так и для соболей.

- лиофилизированная вируссодержащая жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 10 2,2 ТЦД,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Береговой" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС,

Важным направлением в профилактике парвовирусной инфекции свиней явилась разработка живой вакцины. С целью получения аттенуированного штамма американские исследователи серийно пассировали парвовирус в первичной культуре клеток почки эмбриона свиньи (36 пассажей), а затем в культуре постоянной линии клеток тестикулярной ткани свиньи (18 пассажей). Вирус NADL-2 (54 пассажа, 6,0 lg ТЦД50/мл, ГА 1:64) использовали в качестве живой вакцины. Безопасность аттенуированного штамма была доказана на серонегативных свинках (44+2 дня супоросности). Исследования эмбрионов, проведенные через 40-45 дней после введения вакцинного вируса, показали, что вирус не проходит через плаценту, поскольку эмбрионы были живыми и не содержали вируса. Спустя две недели после вакцинации титр антител в РТГА составлял в основном 1:320 — 1:640. Наиболее высокий иммунный ответ у свиней отмечали при введении штамма NADL-2 в дозе 5,0 lg ИД50. При внутримышечном введении он размножася в селезенке, лимфатических узлах и других органах, хотя не менее интенсивно, чем вирулентный штамм. Распространяясь горизонтально, он не пересекал плацентарный барьер. Хотя при внутримышечном введении размножался в ткани плодов, вызывая их гибель.

Из этого следует, что живая вакцина NADL-2 эффективна для защиты свиноматок от парвовирусной инфекции. Однако ее не рекомендуют применять беременным особям из-за возможной реверсии вирулентности при серийных пассажах на свиньях.

Для получения аттенуированного штамма японские исследователи применяли серийные пассажи неразведенного вируса в перевиваемой культуре клеток почки эмбриона свиней с постепенным снижением температуры выращивания с 37 до 30°С. С 50-го до 55-й пассаж вирусную популяцию четыре раза клонировали методом предельных разведений при 32°С. Каждый пассаж длился 7-41 день при общей продолжительности культивирования 492 дня.

Получен штамм (HT-/SK), адаптированный к размножению при 32°С, но практически потерявший эту способность при 37 и 40°С. Аттенуированный штамм HT-/SK накапливался в культуре в титре 4,9 lg ТИД50/мл и агглютинировал эритроциты в разведении 1:128. Он не вызывал виремии и не выделялся из организма привитых свиней, не передавался горизонтально и вертикально, но вызывал образование иммунитета у 2-месячных поросят, привитых однократно подкожно, титр антигемагглютининов к моменту контрольного заражения через 11 и 15 недель составлял соответственно 1:320 и 1:1280. После заражения патогенным штаммом у вакцинированных поросят вирус не обнаруживали в крови и органах, не отмечали повышение титра антигемагглютининов. Трудность применения живой вакцины в неблагополучном хозяйстве состоит в том, что вакцинный вирус нейтрализуется в организме свиней даже с низким уровнем пассивного иммунитета.

В США применяют живую и инактивированную вакцины. Обе вакцины эффективны и безопасны. Живую вакцину вводят в дозе 2 мл за 2-8 недель до осеменения; инактивированную - в дозе 5 мл двукратно за семь и девять недель до осеменения. Ревакцинацию обеими вакцинами проводят однократно перед каждым осеменением.

Данные по вакцинопрофилактике ПВИСв позволяют сделать следующее заключение. Так как молодые свиньи наиболее чувствительны к инфицированию, их рекомендуют вакцинировать перед осеменением (при необходимости дважды с 2-4-недельным интервалом). Ревакцинацию проводят через каждые 6—12 месяцев. Желательно вакцинировать также серонегативных свиноматок и хряков. При систематической вакцинации можно снизить ущерб и, в конечном итоге, освободить хозяйство от инфекции.

Вирусный энтерит норок (ВЭН) — острая контагиозная болезнь, характеризующаяся фибринозно-геморрагическим энтеритом, распространенная во многих странах. В естественных условиях болеют норки всех возрастов, однако более часто — щенки, особенно в период отъема. Заражение происходит в основном фекально-оральным путем. Реконвалесценты длительно остаются вирусоносителями.

После переболевания у норок образуется иммунитет, который сохраняется всю жизнь. Антитела от беременных самок через систему плацентарного кровообращения поступают к эмбрионам и, кроме того, в организм щенят с молозивом. Материнские антитела обеспечивают пассивный иммунитет в течение шести недель.

Для активной профилактики болезни в ряде стран (Дания, Норвегия, Голландия, США) применяют инактивированные вакцины из культурального вируса. Норки приобретают иммунитет через семь дней после вакцинации, сохраняемый не менее двух лет. Колостральный иммунитет у потомства длится несколько недель. Для иммунизации зверей предложены бивалентные вакцины против ВЭН и ботулизма и трехвалентные - против ВЭН, ботулизма и псевдомоноза. В США используют комбинированную вакцину против чумы плотоядных, ВЭН и ботулизма. Препарат вводят с помощью безыгольного инъектора. Такая вакцинация обеспечивает устойчивость к контрольному заражению вирулентными вирусами и токсину, антигены которых входят в ее состав. В качестве живых вакцин применяют культуральные — из аттенуированных штаммов вируса энтерита норок или панлейкопении кошек. Между этими вирусами имеется тесное антигенное родство, поэтому живая вакцина против панейкопении кошек создает прочный иммунитет против вирусного энтерита норок. Иммунитет при применении живых вакцин наступает быстрее, чем в случае применения инактивированных вакцин. При ликвидации инфекции с учетом длительного носительства вируса в неблагополучных хозяйствах необходимо обеспечить достаточный уровень группового вакцинального иммунитета в течение трех лет.

Информация о документе
Дата добавления:
Размер:
Доступные форматы для скачивания:

Хлорсодержащие препараты (хлорная известь, хлорамин, гипохлориты) эффективны, но повреждают сетчатые выгулы клеток (коррозия и др.). Вместе с тем имеются данные о том, что в настоящее время число ус­тойчивых штаммов патогенных микобактерий к 5%-м растворам хлорной извести состав­ляет 94,2%; гипохлориту кальция – 74,8%; хлорамину Б – 64,8%; ДП-2 – 52,6%.

Ботулизм пушных плотоядных зверей – это острая неконтагиозная пищевая токсикоинфекция, обусловлен­ная употреблением корма, содержащего ботулинический токсин. Проявляется парезом и па­раличом мышц вследствие блокады токсином ацетилхолина в нервных синапсах.

Ботулизм типа С у зверей является классическим примером алиментарных токсикозов (ин­токсикаций, отравлений) инфекционного происхождения, не передающихся от зверя к зверю при контакте. Подобно микотоксикозам, у зверей, как и у восприимчивых животных и птиц, он развивается без размножения возбудителя в организме, тогда как ботулизм типа Е может протекать и как токсикоинфекция.

Этиология . Возбудитель болезни – спорообразующий анаэроб Clostridium botulinum . Существует 7 типов возбудителя: А, В, С, D, E, F и G, каждый из которых вырабатывает свой специфичес­кий экзотоксин. В подавляющем большинстве случаев падеж норок и хорьков вызывает ток­син типа С, к которому они высоко чувствительны даже при пероральном введении. Менее чувствительны звери к токсинам CI. botulinum типа А, В, D и Е, возможно, потому, что эти токсины быстро разрушаются в кормовой смеси микробными протеиназами.

Токсичность для норок токсина типа Е (из рыбных кормов) в 25 раз меньше, чем типа С, а типа А, опасного для человека, – в 400 раз.

Образование токсина происходит наиболее активно при температуре +27. 37°С без доступа воздуха, при +11. 20°С – медленнее, при +10°С и ниже – прекращается.

У с.-х. животных и зверей ботулизм установлен в начале XX в. Впервые вспышку ботулиз­ма типа А? у норок, при которой погибло 96% поголовья, описали Hall J.С. и Stiles G.W. в 1938 г., типа С – Quortrup E.R., Gorham J.R. (1940). Ботулизм у серебристо-черных лисиц и норок зарегистрировали Пиле, Браун (1939), Скульберг (1961).

Ботулизм у норок возникает после поедания кормов, содержащих токсин Clostridium botulinum типа С. Другие типы токсина (А, Е и В) также вызывают гибель не только норок, но лисиц и песцов.

В 1956–59 гг. Матвеев К.И., Булатов Т.И. и Сергеева Т.И. разрабо­тали метод специфической профилактики ботулизма анатоксином типа С, а Бузинов И.А. и Новикова Л.С. (1959) предложили формолквасцовую вакцину типа С, которая была внедре­на в производство.

Восприимчивость . К ботулизму наиболее восприимчивы норки и хорьки, хотя в литера­туре имеются сообщения и о поражении песцов и лисиц. У песцов из 10 вспышек ботулизма в четырех случаях был идентифицирован возбудитель типа Е, в одном – типа С и в двух – типа А; из трех вспышек ботулизма у лисиц в двух случаях выделен токсин типа С и в одном – типа Е.

Чувствительность норок и песцов к токсину А одинакова, тогда как лисицы проявляют высокую резистентность. Харак­терно, что многократное скармливание норкам, песцам и лисицам сублетальных доз ботулинических токсинов и культур возбудителя типов С и Е приводит к их заболеванию от суммар­ных доз токсина в 2,5. 10 раз меньше минимальной пероральной смертельной дозы (фено­мен Беринга). В общем же устойчивость песцов и лисиц к токсину типа С в 800 и 5000 раз (соответственно) больше, чем у норок. Отсюда становится понятным, почему лисицы и пес­цы, отличаясь от норок высокой устойчивостью, могут заболевать ботулизмом того или ино­го типа – для этого необходимо продолжительное поступление токсина с кормом.

Соболи высоко устойчивы к ботулизму. На практике они никогда не гибли от этой болез­ни.

Делая оценку чувствительности разных животных, необходимо иметь в виду, что она за­висит не только от типа токсина и частоты его поступления, но и от способа введения. Чувствительность норок к пероральному поступлению токсина С в 500 раз меньше, чем к внутримышечному.

Помимо зверей к ботулиническому токсину восприимчивы и заболевают чаще всего ло­шади и птицы, реже рогатый скот и свиньи. Значительно устойчивее домашние плотоядные животные.

К ботулизму чувствительны и люди. Вызывают его обычно токсины типов А, В и Е, обна­руживавшиеся в грибах, вяленой и копченой рыбе, овощных консервах.

Источник и пути заражения . Микроб широко распространен в природе – его можно выделить из почвы, морских и речных отложений, иногда – из фекалий людей, животных и птиц. Споры из внешней среды попадают в корма, где при благоприятных условиях прораста­ют в вегетативную форму. В процессе вегетации в местах размножения микроба накапливает­ся токсин.

Болезнь возникает после поедания сырых кормов, содержащих ботулинический токсин – самый сильный из всех микробных ядов! Он образуется в мясных, рыбных и растительных продуктах в условиях отсутствия кислорода, повышенной влажности, нейтральной или слабощелочной реакции. Наиболее благоприятные условия для размножения CI. botulinum воз­никают в кишечнике павших животных и рыб, в консервах, а также в толще растительных кормов, подвергшихся самонагреванию. Отсюда токсин постепенно попадает в смежные уча­стки. Обычно ботулизм возникает после скармливания норкам в сыром виде мяса и субпро­дуктов от вынужденно убитых или павших сельскохозяйственных животных в тех случаях, когда кишечник был удален позднее 2 часов после гибели животного. Часто причиной возникновения ботулизма может быть и скармливание мясопродуктов от морских животных, недоброкачественной рыбы, куриных трупов и субпродуктов, кон­ского или оленьего мяса, содержащих токсин CI. botulinum типов Е и С.

Патогенез . Токсин всасывается в тонком кишечнике и попадает в различные органы. Он воздействует на нервную ткань, блокируя высвобождение ацетилхолина, и нарушает нервно-мышечные связи. Это ведет к расслаблению мышечного тонуса, потере подвижности, пара­личу дыхательной и сердечной мускулатуры, асфиксии и смерти. Ботулизм типа Е у норок, песцов, лисиц и типа С у двух последних видов зверей протекает по типу пищевой токсикоинфекции при длительном инкубационном периоде и обнаружении возбудителя в желудочно-кишечном тракте в отличие от ботулизма типа С у норок, развивающегося обычно по типу интоксикации. Для возникновения токсикоинфекции типа Е необходимым условием является длительное поступление токсина с кормом (рыбой, мясом белухи и др.).

Симптомы . Инкубационный период болезни длится от 6 до 24 ч, реже – до 2. 4 суток, у хорьков – 12. 96 часов. 97% случаев ботулизма приходит­ся на май–сентябрь с пиком в августе. У больных норок и хорьков происходят парезы и пара­личи передних и задних конечностей, расширяются зрачки, иногда наблюдается слюнотече­ние. Взятый в руки больной зверь бессильно свисает и не реагирует на раздражение. Вначале поражаются задние конечности, что является типич­ным для ботулизма.

Болезнь длится от нескольких часов до суток, в редких случаях до 5. 6 суток. Летальность зависит от дозы токсина, поступившей в организм, и составляет 20. 100%. Следует отметить, что у норок, песцов и лисиц при кормлении некачественными рыбой, конским или оленьим мясом (выделены возбудители типов Е, С и А соответственно) ботулизм протекал в виде токсикоинфекции с длительным инкубацион­ным периодом. Гибель зверей наступала че­рез 15. 30 дней, из заболевших погибала только часть зверей, из внутренних органов которых выделен возбудитель ботулизма.

У песцов отмечают паралич заднего по­яса, нарушение координации движений, слабость конечностей, брюшное дыхание, рвоту, резкое угнетение, качающаяся походка, паралич хвоста, полный паралич и смерть. Животные, даже имеющие слабые признаки болезни, через два дня после проявления ее симптомов – погибают.

Патологоанатомические изменения . Павшие звери нормальной упитанности. Трупное окоченение обычно не выражено, желудок пустой. Слизистые оболочки желудка и кишечни­ка гиперемированы, селезенка несколько набухшая, светло-вишневого цвета; в легких нахо­дят темно-красные участки очаговых кровоизлияний; печень кровенаполнена, рыхлая, темно-вишневого цвета.

Диагностика . Основанием для подозрения на ботулизм служат внезапное появление бо­лезни, высокая смертность и характерные клинические признаки. Большую диагностическую ценность представляют типичные патологоанатомические изменения: отсутствие трупного окоченения, пустой желудок и очаговые кровоизлияния в легких. Подспорьем может служить факт скармливания подозрительных на наличие токсина кормов.

В лабораторию отсылают пробы корма, который скармливали зверям (пробы корма дол­жны храниться в холодильнике в течение 7 суток), остатки несъеденного корма, соскобы со слизистой желудка и кишечника, трупы целиком. Диагноз считают установленным, если уда­ется выделить токсин ботулинуса.

Дифференциальная диагностика . Внезапная гибель большого количества зверей мо­жет быть ошибочно расценена как отравление диметилнитрозамином или некоторыми ядо­химикатами. При ботулизме типичными являются параличи конечностей, отсутствие трупного окоченения, отсутствие содержимого в желудке у зверей, хотя корм накануне был ими съе­ден (это указывает на временной разрыв между началом всасывания корма и заболеванием, т.е. на наличие инкубационного периода, характерного только для биологических ядов; на­против, при отравлении химическими веществами болезнь развивается сразу после всасыва­ния корма и поэтому желудок у большинства животных не успевает опустошаться).

В случае гибели привитых против ботулизма норок и хорьков важное диагностическое значение следует придавать факту гибели зверей одной из двух возрастных групп – одноле­ток или взрослых. Это объясняется тем, что предыдущая или последняя вакцинации были сделаны неиммуногенной вакциной.

Окончательно заключение делают на ос­нове индикации токсина. При этом надо по­мнить, что обнаружить токсин при исследо­вании единичных бессистемно отобранных трупов или остатков корма не всегда удается, так как токсин быстро распадается. Поэтому для исследования необходимо направлять 10. 20 бесспорно свежих трупов зверей (а если имеются больные, то больных), от ко­торых в лаборатории целесообразно брать сборную пробу (соскобы со слизистой желудка и кишечника). Одновременно с трупами направляют пробы корма, взятые с хранения, за предшествующий падежу день.

Прогноз для норок неблагоприятный. Летальность зависит от дозы токсина, поступившей в организм, и может составить 100%.

Лечение . Специфическая терапия норок не разработана. Эффективным лечебным средством является эпинефрин (1 мл/гол. подкожно). Лечение ПЗ витаминами группы В , различными средствами заканчивалось неудачно.

Профилактика и меро­приятия по ликвидации болезни . При возникновении болезни исключают из рациона по­дозрительные (обычно условно годные) корма или скармливают их в вареном виде. К подо­зрительным кормам относят: плохо обескровленные туши с.-х. животных, недоброкачественные по свежести мясные субпродукты и рыбные корма, мясо морских жи­вотных даже доброкачественное по органолептическим данным, корма неизвестного проис­хождения, самонагревшиеся растительные и животные корма.

Мясо вынужденно убитых животных допускают в корм лишь после термической обработки. Туши павших животных для кормления зверей не используют. Туши убитых молнией или электрическим током животных при своевременной разделке можно скормить зверям лишь после тщательной проварки. При убое животных, предназначенных для кормления зверей непосредственно в хозяйствах, туши разделывают не позднее, чем через 2 часа после убоя. Мясо и субпродукты морских живот­ных включают в корм норкам лишь через 3 недели после их вакцинации против ботулизма. Они часто могут быть контаминированы токсином ботулизма, как и различными патогенными микробами – стрепто- и стафилококками, сальмонеллами, псевдомонасами, эшерихиями, протеем, клебсиеллами, пастереллами и др. Растительные корма, подвергнувшиеся самонагрева­нию, а также заплесневелые можно скармливать зверям только после термической обработки.

С профилактической целью и в вынужденных случаях зверям в обязательном порядке вво­дят моновакцину против ботулизма норок (квасцовый преципитат анатоксин-вакцины) или поливакцину против ботулизма, парвовирусного энтерита, чумы и псевдомоноза норок (БИОНОР). Щенков иммунизиру­ют согласно наставлению по применению вакцины, начиная с 45 или 60-дневного возраста (июнь–июль), основное стадо – после восстановления нормальной упитанности (июль–август). Иммунитет наступает через 2. 3 недели после иммуниза­ции и сохраняется не менее 12. 18 мес. Если применяется 4-компонентная вакцина, то эти сроки вакцинации неприемлемы из-за блокирующего влияния колостральных антител на фор­мирование иммунитета против чумы и парвовирусного энтерита.

Колостральный иммунитет при боту­лизме не формируется. За 3. 5 дней до начала массовой вакцинации рекомендуется делать пробную вакцинацию 50. 100 зверей, что дает возможность убедиться в безвредности вакци­ны и в отсутствии анафилактического шока на ее введение. Анафилактический шок обычно развивается через 1. 30 минут после инъекции. Развитию шока способствуют тяжелая анемия (уровень гемоглобина снижается на 1 / 3 или на 1 / 2 ) и плохое развитие щенков.

Соблюдение надлежащего температурного режима в холодильниках (не выше – 18°С) является хорошим подспорьем в профилактике ботулизма у всех видов пушных зверей.

Псевдомоноз (геморрагическая пневмония или синегнойная инфекция) – это очень опасная болезнь в первую очередь норок, начинающаяся как алимен­тарная инфекция и чрезвычайно быстро приобретающая черты острого высококонтагиозно­го заболевания с явлениями геморрагического воспаления легких и сепсиса.

У песцов и ли­сиц обычно проявляется как органная (местная) или вторичная инфекция, при которой наиболее серьезный ущерб бывает вследствие абортов у самок и гибели молодняка.

Болезни подвержены также растения, животные, птицы и че­ловек.

Этиология . Возбудитель – микроб Pseudomonas aeruginosa из рода Pseudomonas семейства Pseudomonadaceae , известный больше как синегнойная палочка ( Bacillus pyocyaneum ). Это короткая, подвижная палочка с одним полярным жгутиком, спор не образу­ет, по Граму красится отрицательно. Растет на обычных питательных средах, образуя R- и S-формы колоний и 4 типа пигмента: пиоцианин, флуоресцин, пиорубин и черный пигмент. По биохимической активности относится к числу слабо активных бактерий, в отношении отдельных углеводов активность различных штаммов неодинаковая. Относясь к группе психрофильных (холодолюбивых) микробов, синегнойная палочка способна расти при температуре не ниже 5°С. По этой причине микроб широко распространен во внешней среде, часто обнару­живается в испражнениях животных и человека, на поверхности тела, в наружных половых органах, фекалиях, а также в кормах, подстилке и воде даже в благополучных по псевдомонозу зверохозяйствах, причем тех же серотипов, которые вызывают эту опасную инфекцию. Микроб участвует в гнилостной порче мясных, рыбных, молочных и растительных продуктов (при их обсеменении), окисляет аммиак в нитриты, а также может размножаться в среде, бедной органическими и минеральными веществами, в частности, в воде. К физическим и химическим факторам слабо устойчив, однако в растительно-белковых субстратах сохраняет жизнеспособность не менее 6 месяцев, в лиофилизированном состоянии – не менее 3-х лет. Осо­бым отличительным свойством возбудителя псевдомоноза является высокая устойчивость ко многим антибиотикам. Патогенность штаммов псевдомонасов различается, что связано с ак­тивностью бактериальной эластазы.

P . aeruginosa имеет сложную антигенную структуру – разные антигены содержатся в жгутиках, слизистой капсуле, клеточной стенке, а также в продуктах метаболизма. Серологи­ческая вариабельность микроба насчитывает более 20 серотипов, но наибольшее признание для серотипирования получили сыворотки, приготовленные из термостабильного О-антигена. При типичном заболевании особенно часто выделяются серовары (по Habs) 05, 06, 08, 011 у норок, 06, 03, 02 и 05 и реже 01, 04, 09, 011 и 016 у песцов и лисиц. Иммунизация норок одним из указанных четырех серотипов не предохраняет от заражения остальными.