Лабораторный тест на коронавирус

Россия готовится к тотальному тестированию, новые тест-системы позволяют быстро провести масштабную проверку на вирус. К массовому выпуску приступил один из разработчиков нового продукта, два других начинают производство. Олег Гусев, ведущий научный сотрудник Научно-клинического центра прецизионной и регенеративной медицины Казанского федерального университета и института физико-химических исследований RIKEN (Япония) помог РБК Тренды разобраться в том, как устроено тестирование на коронавирус в России и в мире.

Что предлагает ВОЗ

Глава Всемирной организации здравоохранения Тедрос Гебреисус еще в середине марта призвал страны проводить как можно больше тестов на вирус, который вызывает заболевание SARS-CoV-2, даже людям без симптомов. Согласно руководству ВОЗ, анализы на коронавирус COVID-19 должны проводиться методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с обратной транскрипцией. Как говорится в рекомендациях, на сегодня это самый точный и надежный метод диагностики вирусной инфекции. Он позволяет определить даже очень небольшое количество РНК вируса в биологическом материале человека. Это помогает выявить болезнь в инкубационном периоде.

Изобретенный в 1983 году метод и сейчас считается фундаментальным в молекулярной диагностике. Американский ученый, который придумал способ значительного увеличения малых концентраций фрагментов ДНК в биологической пробе, получил за него Нобелевскую премию. Выявление ДНК/РНК методом ПЦР позволяет диагностировать такие заболевания, как ВИЧ, вирусные гепатиты, инфекции, передающиеся половым путем, туберкулез, боррелиоз, энцефалит и многие другие. Метод используют в археологии, криминалистике, генетике.

Как работает ПЦР-тест

Для анализа из физиологических жидкостей извлекают одноцепочечную РНК, моделируют на ее основе двуцепочечную ДНК и многократно дублируют с помощью специального фермента (полимеразы). Увеличение числа копий ДНК называется амплификацией. В результате концентрация определенных фрагментов ДНК/РНК в биологическом образце, изначально минимальная, значительно увеличивается. При исследовании копируется только необходимый для теста участок ДНК. И, конечно, дублирование происходит только в том случае, если искомый участок вирусной ДНК или РНК присутствует в исследуемом биоматериале. В случае с коронавирусом мазок для анализа берут из ротоглотки или носоглотки, поскольку в крови или в кале вирус появляется на более продвинутой стадии болезни.

Тест-система EMG — продукт совместной разработки российских и японских разработчиков, проводившейся с 2016 года, рассказывает Олег Гусев. На данный момент эти тесты включены в систему обязательного медицинского страхования в Японии.

В ближайшее время планируется производить до 2,5 млн. тестов и 1 тыс. портативных лабораторий в неделю. Сами тесты, как и многие реагенты производятся в России. Планируется, что цена на тесты EMG будет в среднем в пять раз меньше, чем на стандартные ПЦР-тесты в Европе.

Российско-японские тесты основаны на методе изотермальной молекулярной диагностики SmartAmp, превосходящем метод ПЦР по скорости работы в восемь раз, а переносная лаборатория позволяет тестировать до 20 пациентов в час, говорит Гусев.

Ключевое отличие теста EMG в том, что многие тесты, которые производятся сейчас, это тесты ИФА (имунноферментный анализ), а не ПЦР. Данные системы определяют антитела, которые организм начинает вырабатывать не ранее, чем через неделю после заражения. Российско-японская разработка позволяет получать результат уже за 30 минут, с точностью, равной почти 100%. Кроме того, тест EMG позволяет определить наличие вируса уже на самых ранних стадиях, в то время как другие системы диагностики короновируса обладают меньшей чувствительностью и не могут выявлять вирус на ранней стадии инфицирования.

Принцип технологии российско-японского теста, по сути, не отличается от классической ПЦР — это наращивание количества целевых фрагментов ДНК и их детекция. Однако в изотермической амплификации, в отличие от классической ПЦР, где необходимы циклы нагрева и охлаждения, все происходит при одной температуре. Это позволяет многократно увеличивать скорость реакции. Метод SmartAmp был изобретен более 15 лет назад (как и LAMP — другая популярная технология изотермальной амплификации, предшествующая SmartAmp). Впервые для инфекционных заболеваний эту технологию применили в 2009 году для быстрого выявления пандемического гриппа (H1N1) в Японии.

Повторные тесты необходимы при любом методе. Отрицательный тест на COVID-19 не гарантирует, что человек не заразится этим вирусом на следующий день. Поэтому, например, в японских лабораториях персонал тестируют каждые несколько дней. Повторный тест нужен и для того, чтобы подтвердить, что человек излечился.

Эта тест-система будет использоваться для диагностики COVID-19 не только в России и Японии. 40 тыс. тестов закупила Австрия, поступили заказы из других стран Европы, Ближнего Востока, и Латинской Америки. Подана заявка в Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов США (FDA) для поставок в эту страну.

На данный момент в России прошли регистрацию еще три теста на коронавирус.

По некоторым данным, в Москве проводится около 700 тестов на коронавирус в сутки. В планах у московских властей увеличить этот показатель до 10 тыс. тестов в сутки, а затем довести его до 25—28 тыс. тестов ежедневно.

Новые разработки за рубежом

Компания Bosch выводит на рынок свой тест на коронавирус, который сначала будет доступен в Германии, а вскоре появится в других странах. В его основе лежит диагностический аппарат Vivalytic, который, по словам изготовителей, станет первым автоматизированным тестом на COVID-19. Тест распознает не только коронавирус, но еще шесть респираторных заболеваний, например, вирусы гриппа А и B. Во время лабораторных испытаний аппарата его точность составила 95%.

Как пишет издание ZME Science, анализ может проводиться прямо в стационаре или медицинском центре — не нужно отправлять образцы в лабораторию и ждать, пока придет ответ. Врачи смогут быстрее идентифицировать и изолировать зараженных, а пациентам не придется пребывать в неизвестности несколько дней. Тест прост в обслуживании и не требует специальной подготовки. Медперсоналу нужно только взять мазок из носа или горла пациента, нанести его на картридж, содержащий реагент, и вставить картридж в анализатор. Каждый аппарат может выполнять до десяти анализов за 24 часа.

Еще более оперативный тест на COVID-19 разработали в Великобритании. Он позволяет выявить COVID-19 всего за 30 минут. Чтобы провести его, достаточно портативного оборудования стоимостью около $120 и набора полосок для мазков из носа и горла по $5 каждая. Одновременно проходить тест могут до шести человек.

FDA в экстренном порядке одобрило сверхбыстрый тест на коронавирус, разработанный калифорнийской компанией Cepheid. С его помощью диагноз можно будет поставить всего за 45 минут. Как отмечает Business Insider, для обработки результатов теста не требуется специальное обучение. Нужен лишь доступ к системе Cepheid GeneXpert — в США их 5 тыс., а по всему миру — 23 тыс.

Начало тотального тестирования людей на COVID-19 во всем мире — хорошая новость как для людей, так и для национальных органов здравоохранения. До сих пор в мире нет четкого представления о том, сколько людей заражены коронавирусом и выявление тех, у кого он уже есть: их госпитализация или отправка на домашний карантин позволит быстрее оценить масштаб угрозы и вовремя принять правильные меры.

Где и как можно сдать анализы на коронавирус?

До некоторого времени анализ на коронавирус можно было сдать только по назначению врача и только в определенных лабораториях, подчиняющихся Роспотребнадзору. И только пациентам с клиническими признаками ОРВИ, больным инфекционных отделений с тяжелым или прогрессирующим респираторным заболеванием, развившимся после зарубежной поездки или после контакта с человеком, вернувшимся из зарубежной поездки.

18 марта Роспотребнадзор изменил требования к лабораториям по работе с SARS-CoV-2, и теперь у россиян есть возможность сдать анализ не по назначению врача, а по собственному желанию — это можно сделать в некоторых поликлиниках в Москве и Петербурге .

Почему сразу не запустили тестирование в частных лабораториях?

Большинство лабораторий в регионах, а также частные лаборатории, имея все необходимое оборудование для проведения анализа, не могли приступить к тестированию. Этому препятствовали ограничения со стороны Роспотребнадзора.

До 18 марта проводить исследования могли только те лаборатории, которые работают с патогенами I и II группы (возбудитель коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 относится ко II группе). В новых рекомендациях теперь работать с SARS-CoV-2 могут и те лаборатории, у которых есть лицензии на работу c патогенами III-IV групп. Государственным лабораториям тест-системы будут выдавать бесплатно, а работа будет оплачиваться из государственного бюджета.

Сдать анализ на коронавирус по собственному желанию в частной лаборатории могут только люди, у которых отсутствуют симптомы ОРВИ, — таковы рекомендации Роспотребнадзора.

Люди, входящие в группу риска — те, кто вернулся из-за границы, испытывает те или иные простудные симптомы или контактировал с заболевшими, — будут маршрутизированы согласно рекомендациям Роспотребнадзора (необходимо оставаться дома и вызвать врача, а далее действовать согласно указаниям медиков).

Что происходит со взятыми образцами?

Для постановки диагноза однократной сдачи биоматериала недостаточно. Анализ у пациентов без симптомов ОРВИ берется дважды. У тех, у кого симптомы ОРВИ присутствуют, биоматериал берется при первичном обращении или поступлении в стационар, а потом спустя три и семь дней. Такой подход позволяет снизить вероятность получения как ложноположительного, так и ложноотрицательного результата.

Как проводится тест?

Тест включает в себя несколько последовательных этапов: выделение вирусной РНК, проведение обратной транскрипции — превращения РНК в ДНК под действием ферментов, проведение ПЦР.

ПЦР — полимеразную цепную реакцию — проводят в смеси, где содержится вирусная РНК, созданная на ее основе ДНК, а также белки-ферменты. Эта реакция помогает увеличить количество генетического материала, принадлежащего коронавирусу, и выделить именно его: это становится возможным потому, что в геноме вируса присутствуют уникальные фрагменты, с которыми могут связаться маленькие одноцепочечные кусочки ДНК — маркеры.

В ходе первого этапа могут происходить потери некоторого количества вирусной РНК или даже всей РНК целиком — в этом случае второй этап диагностики может дать отрицательный результат. Не исключено, что именно с этим связан тот факт, что в России обнаруживают гораздо меньше случаев коронавирусной инфекции, чем в других странах, — из-за потерь РНК в ходе первого этапа вирус не удается определить во время следующего.

Он также отмечает, что эта тест-система имеет более низкую чувствительность, чем те, которые используются в других странах. Впрочем, у новых тестов, производство которых запускается в России, чувствительность выше.

Известно, что сейчас к созданию тест-систем подключились не только государственные, но и частные компании, которым, впрочем, предстоит еще зарегистрировать наборы, прежде чем начать предоставлять их в клиники.

А как в других странах?

Страны, столкнувшиеся с коронавирусом, выбрали для себя разные стратегии проведения тестирования. В Германии сдать анализ без назначения врача невозможно, а во Франции и Бельгии тест рекомендован только для пациентов с тяжелым течением болезни.

В США в первые месяцы распространения коронавируса тесты, разработанные Центрами по контролю и профилактике заболеваний США (CDC), работали некорректно — из-за ошибок в составе реагентов они давали неверный результат . Никаких других тестов на тот момент в стране не было — из-за законодательства, которое в дальнейшем было изменено, ни частные, ни государственные компании не могли приступить к выпуску и проведению других тестов.

Сейчас ситуация с тестами нормализовалась — плюс к процессу подключили частные и университетские лаборатории, но это лишь незначительно повлияло на ситуацию: анализ стало возможно сдать за деньги, а из-за большой нагрузки результаты приходится ждать больше недели. Энтони Фаучи, руководитель CDC, признал , что в стране не хватает оборудования и специалистов для проведения тестов.

27 марта США вышли на первое место по числу заболевших Covid-19, обогнав Китай и Италию. Президент Дональд Трамп считает это не провалом, а успехом, связанным с увеличением охвата тестирования и выявлением очагов заражения.

Массовое тестирование проводится в Исландии , где сдать анализ может любой желающий, а также в Южной Корее, которая является своеобразным лидером по количеству проведенных тестов (их в стране сделано около 270 тысяч). Южнокорейские власти пошли другим путем, выбрав стратегию объемного тестирования. Сейчас в стране работает около 600 центров тестирования, среди которых есть и такие, в которых можно диагностироваться на коронавирус, не покидая собственного автомобиля. Вся процедура занимает не больше 10 минут, а результаты становятся известны на следующий день.

Массовое тестирование вводят и в Италии, которая сейчас является лидером в Европе по количеству заболевших. Сперва подход опробовали на жителях города Во, расположенного недалеко от Венеции. Анализ сдали все 3000 жителей, что позволило обнаружить бессимптомных носителей. Сейчас эту практику собираются распространить на все население области Венето.

Согласно руководству ВОЗ, анализы на вирус SARS-CoV-2 должны проводиться:

1. Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с обратной транскрипцией. Это самый точный и надежный метод диагностики вирусной инфекции, который позволяет обнаружить даже очень небольшое количество генетического материала (РНК) вируса в биологическом материале человека. Предпочтительно брать мазок из ротоглотки или носоглотки, потому что в кале и крови вирусов меньше.
2. В лаборатории с уровнем биологической безопасности 2 (BSL-2). Всего существует четыре уровня безопасности. На первом уровне требования минимальные, на четвертом — самые строгие. В лабораториях с уровнем безопасности BSL-2 исследуют микробов, представляющих умеренную опасность для сотрудников лаборатории и для окружающей среды.

ПЦР-анализ с обратной транскрипцией на SARS-CoV-2 можно провести только в лабораторных условиях, потому что для него требуется набор реактивов и лабораторное оборудование. Для этого нужны:

• микроцентрифуга,
• мешалка,
• детекторный модуль ПЦР в реальном времени с реакционным модулем амплификатора.

На дому такой тест сделать нельзя, поэтому экспресс-тестов на основе ПЦР не существует.

Но даже если в конце концов экспресс-тесты на основе ИФА и появятся, они будут уступать лабораторной ПЦР и в точности, и в скорости определения заражения вирусом. ИФА-тест обнаруживает не генетический материал вируса, а антитела — иммунные белки, которые организм вырабатывает к вирусу. Чтобы организм успел выработать антитела, с момента заражения должно пройти около недели. Если сделать ИФА-тест раньше, он не покажет заражения, даже если в организме у человека уже есть вирус SARS-CoV-2.

Где делают тест. В Европе, Великобритании и Австралии тесты делают в любой лаборатории с уровнем безопасности BSL-2, в которой есть оборудование для ПЦР-реакции с обратной транскрипцией и реактивы, которые необходимы для поиска РНК вируса SARS-CoV-2. В США тесты делают в лабораториях Центра по контролю и профилактике инфекционных заболеваний (CDC) и в государственных лабораториях общественного здравоохранения. Тест проводится в соответствии с протоколом, принятым в конкретной стране.

Принцип действия теста. В США и других странах для анализа берут мазок с задней стенки глотки, образец слюны или жидкости из нижних дыхательных путей (то есть мокроты). Затем образец доставляют в лабораторию и выделяют из него рибонуклеиновую кислоту (РНК), содержащую геном вируса. Затем к смеси реагентов добавляют фермент, который превращает РНК в ДНК — это и есть обратная транскрипция. После этого вирусную ДНК копируют миллионы раз и ищут в ней участок, соответствующий геному SARS-CoV-2. Если такой участок есть, анализ признают положительным.

Точность. Тест способен обнаружить 0,3–3 копии вирусной РНК в микролитре (0,001 мл).

Сроки. 24–48 часов.

Сколько сделано анализов. По данным CDC, на 16 марта 2020 года в США на SARS CoV-2 было проверено: в лабораториях CDC — 4 тыс. 255 анализов; в 48 государственных лабораториях — 20 тыс. 907 анализов. Анализы начали делать 18 января 2020 года.

Цена. Тестирование оплачивает государство. Сдать анализ на SARS-CoV-2 в частной лаборатории за деньги нельзя.

Это соответствует уровню безопасности BSL-3. Пример микроба, с которым обычно работают в лаборатории BSL-3 — Mycobacterium tuberculosis, то есть бактерии, вызывающие туберкулез. Получается, что в нашей стране для работы с коронавирусом лаборатории нужен почти что самый высокий уровень биологической безопасности из возможных — BSL-3. Это притом что большинство российских лабораторий, как и везде в мире, имеет уровень безопасности BSL-2. (Дополнение от 17.03.2020, 18:27 мск: в этот фрагмент внесены изменения, уточнена информация об уровнях безопасности лабораторий.)

Принцип действия теста. Как и за рубежом, анализ проводят методом ПЦР-реакции с обратной транскрипцией.

• реагент-1, прозрачная бесцветная жидкость, 0,70 мл, 1 пробирка;
• реагент-2, прозрачная бесцветная жидкость, 1,20 мл, 1 пробирка;
• положительный контроль (ПКО), прозрачная бесцветная жидкость, 0,20 мл, 1 пробирка;
• отрицательный контроль (ОКО), прозрачная бесцветная жидкость, 0,20 мл, 1 пробирка;
• эксплуатационная документация: инструкция по применению и паспорт.

Данные по составу реагентов не опубликованы.

Точность. ТАСС сообщает, что тест позволяет обнаружить 50–500 вирусных частиц в образце.

Цена. Тестирование оплачивает государство. Сдать анализ на SARS-CoV-2 в частной лаборатории за деньги нельзя.

Кому сейчас делают тесты на коронавирус?

Почему тесты не делают всем подряд?

Во всех странах делают одинаковые тесты?

Но ведь есть же ещё экспресс-тесты. Почему не делать их всем подряд?

А ПЦР-анализ вообще не ошибается?

Я знаю, что в России можно сдать платные тесты. Стоит ли?

А если я хочу знать, был ли у меня коронавирус, тест это покажет?

Что ещё почитать?

Сдать анализ самостоятельно можно. Но не нужно. И вот почему.

Кому сейчас делают тесты на коронавирус?

Всё зависит от страны. Минздрав РФ рекомендует Временные методические рекомендации ПРОФИЛАКТИКА, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ НОВОЙ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ (COVID‑19) тестировать лишь тех, у кого есть признаки ОРВИ и кто вернулся из‑за границы за 14 и менее дней до появления симптомов или в последнее время близко общался с людьми, у которых подтвердился диагноз COVID‑19.

Регионы могут уточнять рекомендации. Но решение о необходимости тестирования в каждом конкретном случае всё равно принимает врач.

Департамент здравоохранения Москвы расширяет КОРОНАВИРУС: ОТВЕТЫ НА ГЛАВНЫЕ ВОПРОСЫ перечень и определяет очерёдность. Людям из тех групп риска, которые находятся в начале списка, тест на коронавирус делают в первую очередь. Остальным — после того, как обследованы все пациенты из приоритетных групп.

1. Люди с признаками ОРВИ, которые в последние 14 дней пересекали границу одной из стран с неблагополучной эпидемиологической ситуацией (Китая, Южной Кореи, Ирана, США, Великобритании, большинства европейских стран, Украины, Белоруссии) или контактировали с человеком, который заболел COVID‑19 или прибыл из перечисленных государств.
2. Те, у кого есть признаки ОРВИ и диагностирована пневмония.
3. Люди старше 60 лет, у которых проявляются симптомы гриппа или простуды.
4. Люди с признаками ОРВИ, у которых есть хронические заболевания — сердечно‑сосудистые, онкологические, эндокринные.
5. Граждане, которые в последние 14 дней приехали из стран с неблагополучной эпидемиологической ситуацией.
6. Те, у кого есть симптомы ОРВИ.

Почему тесты не делают всем подряд?

Потому что мировая медицина до сих пор не определилась, как правильно. Несмотря на то, что ВОЗ призывает сделать тестирование массовым, каждая страна применяет свой подход. И надеется, что именно он окажется наиболее эффективным.

Наш призыв Media briefing on #COVID19 ко всем государствам прост: тестируйте, тестируйте и тестируйте!

Китай и Южная Корея выбрали путь широкомасштабного обследования граждан: анализы на коронавирус делают всем при наличии малейших симптомов и даже подозрения на симптомы. За ними последовала Германия: здесь проводят до 500 тысяч Germany ‘increases its COVID‑19 tests to 500,000 per week’ тестов в неделю.

В Италии, согласно рекомендациям DIREZIONE GENERALE DELLA PREVENZIONE SANITARIA. UFFICIO 5 PREVENZIONE DELLE MALATTIE TRASMISSIBILI E PROFILASSI INTERNAZIONALE местного Минздрава от 25 февраля, обследуют тех, у кого есть ярко выраженные симптомы коронавируса. В Великобритании долгое время тесты проводились только тяжелобольным.

Власти Франции, по данным Дело в цифрах: почему в разных странах по‑разному тестируют на коронавирус новостной радиостанции RFI, всё ещё полагают, что массовое тестирование не изменит ситуацию с распространением эпидемии. Куда важнее точечно отслеживать конкретные случаи, тестируя людей из групп риска, и изолировать тех, кто заболел.

В общем‑то, это обоснованно, учитывая, насколько сложен процесс тестирования.

Во всех странах делают одинаковые тесты?

Сейчас существуют два типа анализов на коронавирус — по методу ПЦР и экспресс. Каждый имеет свои преимущества и недостатки.

При организации массового тестирования обычно используют экспресс‑вариант. Если такой тест будет положительным, его обязательно перепроверят методом ПЦР.

Что такое ПЦР?

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Этот метод тестирования считают золотым стандартом диагностики любых инфекций, и именно он используется в государственных лабораториях.

В общих чертах проводят его так. Для исследования берётся мазок. В нём выявляют фрагменты ДНК, похожие на фрагменты вируса или бактерии. Затем эти фрагменты ДНК размножают в пробирке. Через некоторое время (от нескольких часов до нескольких дней) пробирку проверяют. Если удаётся обнаружить следы возбудителя инфекции, анализ считается положительным. Если нет — отрицательным.

ПЦР‑диагностика коронавируса в целом проводится так же, мазок берётся из носа и ротоглотки. Но есть нюанс. В основе коронавируса SARS‑nCoV‑2 РНК, а не ДНК.

Фото: freaktor / Shutterstock

Молекулы ДНК состоят из двух цепей полинуклеотидов (нуклеиновых кислот, в которых закодирована генетическая информация), спирально закрученных друг вокруг друга. РНК — из одной. Разница ощутима, поэтому процесс анализа усложняется.

Для начала исследователям приходится переводить кусочки РНК предполагаемого вируса в ДНК. Затем размножать ДНК. Потом снова переводить ДНК в РНК, чтобы выявить коронавирус. На языке микробиологии этот процесс называется ПЦР с обратной транскрипцией.

ПЦР‑анализ позволяет выявить коронавирус ещё до появления первых симптомов.

Но исследование занимает как минимум несколько часов (а затем ещё несколько часов на обработку результата) и требует довольно больших материальных и финансовых затрат: специального лабораторного оборудования, высококвалифицированных технических специалистов. Именно поэтому сделать тест ПЦР всем желающим — задача довольно дорогая и трудновыполнимая.

Но ведь есть же ещё экспресс-тесты. Почему не делать их всем подряд?

Самые быстрые варианты исследований основаны на анализе крови. Экспресс‑тест выявляет в ней иммуноглобулины IgM — антитела, которые человеческий организм начинает вырабатывать, когда обнаруживает, что столкнулся с новой инфекцией. Такое исследование даёт результат в течение 15–20 минут.

Проблема только в том, что достаточное для теста количество антител появляется в крови лишь на 4–10 день Fast, portable tests come online to curb coronavirus pandemic заболевания (включая инкубационный период). Если человек заразился недавно, такой тест может показать ошибочный отрицательный результат.

Или, напротив, быстрый тест может быть положительным у человека, который переболел в лёгкой форме, возможно, даже не заметив этого. Это происходит потому, что уровень антител в крови снижается не мгновенно и некоторые время остаётся высоким даже у выздоровевшего. Так возникает неопределённость: пациент всё ещё болеет и ему может требоваться помощь или же он уже выздоровел и не опасен для окружающих?

Именно поэтому быстрые тесты на антитела перепроверяют ПЦР‑методом.

А ПЦР-анализ вообще не ошибается?

Метод полимеразной цепной реакции в целом считается более надёжным, чем экспресс‑варианты диагностики. Но он тоже не всегда достоверен.

ПЦР с обратной транскрипцией — процедура длительная, сложная и достаточно неточная: у неё высокий процент ошибки что в одну, что в другую сторону Интервью с Алексеем Водовозовым .

Чтобы повысить точность, тест ПЦР проводится несколько раз. Департамент здравоохранения Москвы, например, настаивает КОРОНАВИРУС: ОТВЕТЫ НА ГЛАВНЫЕ ВОПРОСЫ на двух тестах, если у пациента нет симптомов ОРВИ, и трёх, если признаки простуды имеются.

Всё это делает процесс постановки диагноза ещё более длительным.

Впрочем, наука не стоит на месте. Например, Роспотребнадзор заявляет Учёные Роспотребнадзора создали высокоточный тест для диагностики COVID‑19 , что разработанные им новые тесты не дают ложноположительных результатов.

Я знаю, что в России можно сдать платные тесты. Стоит ли?

Кроме того, некоторые частные клиники начали брать образцы для анализов.

Также предоставлять услугу коммерческого тестирования на дому, без направления врача, планирует В Центре молекулярной диагностики Роспотребнадзора открыто бесконтактное тестирование на коронавирус Роспотребнадзор.

Однако необходимость процедуры всё ещё под вопросом. По нескольким причинам.

За коммерческий тест вам придётся выложить около 2 000 рублей. Точная цена зависит от конкретной лаборатории.

Стоимость анализа Роспотребнадзора, по данным Тест на коронавирус на дому будет стоить 1250 рублей РИА Новости, составит 1250 рублей. Дополнительно придётся оплатить выезд медперсонала на дом.

Тесты делаются только по записи. Поскольку лабораторий немного, не факт, что вам удастся записаться на анализ не то что в ближайшие дни, даже в ближайшие недели.

К тому времени, даже если у вас действительно есть коронавирусная инфекция, вы успеете переболеть и выздороветь.

Чтобы сдать анализ, вам придётся ехать в лабораторию. А значит, вы рискуете подхватить коронавирус по дороге или в очереди в самом учреждении. Если же вы инфицированы, вы можете заразить других людей.

Плюс для жителей Москвы и Подмосковья это нарушение режима самоизоляции. Ведь сдача анализов не похожа на обращение за экстренной помощью.

А чтобы попасть в государственную больницу, вам потребуется направление врача. Он же в первую очередь оценит ваши симптомы — те, которых нет. И если найдёт на то веские основания, предложит перепроверить результаты сделанного анализа в государственной лаборатории. То есть попасть в стационар исключительно по результатам коммерческого теста не получится.

В общем, если подозреваете у себя коронавирус, самое логичное, что вы можете сделать, — самоизолироваться и следить за симптомами. И лишь когда они появятся, связываться с участковым терапевтом и действовать в соответствии с его инструкциями.

А если я хочу знать, был ли у меня коронавирус, тест это покажет?

Нет. Существующие тесты определяют, есть ли активный вирус в вашем организме прямо сейчас.

Впрочем, теоретически всё возможно. Чтобы узнать, сталкивались ли вы с коронавирусом ранее, необходим анализ крови на иммуноглобулины IgG — антитела, которые организм вырабатывает, приобретая устойчивый иммунитет к инфекции. Но об иммуноглобулинах IgG и иммунитете к SARS‑nCoV‑2 современная наука пока знает недостаточно. Поэтому таких тестов не делают.

Более десятка российских компаний уже зарегистрировали или находятся в процессе регистрации в Росздравнадзоре тест-систем на коронавирусную инфекцию.

Некоторые из тестов, как заявляют производители, дают предварительные результаты за 10–15 минут, другим же требуется несколько дней.

Одни стоят несколько тысяч, другие обойдутся в 100 рублей. По оценкам экспертов, когда эпидемия коронавируса в России достигнет пика, ежедневно будет необходимо проводить более миллиона тестов. Насколько российские производители готовы к таким объемам и как работают тесты — подробнее в нашем материале.

Как устроены тесты на Covid-19. Научное обоснование

Тест-системы бывают двух видов. Первый и основной метод исследования на коронавирус, используемый в России сейчас, — это ПЦР (полимеразная цепная реакция), определяет генетический материал вируса. Тест можно проводить на образцах, взятых из дыхательных путей человека, полученных различными методами, включая мазок из носоглотки или образец мокроты. Тестирование занимает от нескольких часов до двух дней.

Тесты ПЦР выпускаются уже многими компаниями, и это то, что сейчас делается в лабораториях, когда доставляется образец и анализируется так называемая ОТ-ПЦР (обратная транскрипция полимеразной цепной реакции). ОТ-ПЦР-тест, проведенный с мазками из горла, надежен только в первую неделю болезни. Позже вирус может исчезнуть в горле, в то время как он продолжает размножаться в легких.

Для инфицированных людей, прошедших тестирование на второй неделе, в качестве альтернативы можно использовать материал из глубоких дыхательных путей, взятый с помощью всасывающего катетера, или же отхаркивающий материал (мокрота).

ПЦР с обратной транскрипцией

Одноцепочечную молекулу РНК в ходе реакции обратной транскрипции превращают в комплементарную ДНК и амплифицируют уже одноцепочечную молекулу ДНК, используя традиционную ПЦР. Метод ПЦР основан на многократном избирательном копировании определённого участка нуклеиновой кислоты ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце. Точность тестов определяется качеством выбранных реагентов. Разные производители выбирают из последовательности РНК вируса некоторый участок, который является специфичным для COVID-19 и по нему проводят реакцию.

FDA одобрило новый тест Abbott Labs, в котором вместо ОТ-ПЦР используется технология петлевой изотермальной амплификации нуклеиновых кислот (LAMP). Поскольку для этого не требуется длительных циклов чередования температур, этот метод может дать положительные результаты всего за 5 минут и отрицательные результаты за 13 минут.

В настоящее время в США насчитывается около 18 тысяч приборов для проведения LAMP, и Abbott планирует увеличить производство до 50 тысяч тестов в день.

Второй тип тестов направлен на выявление антител – то есть на ответ организма на вторжение вируса.

У нас ответ проявляется в виде выработки иммуноглобулина в острой стадии. В течение семи-десяти дней в организме выявляется иммуноглобулин M, а дальше иммуноглобулин G. Сейчас в эти наборы включены иммуноферменты — берется капля крови, добавляется буфер и на такой полоске определяют, есть в крови иммуноглобулины или нет.

Если их нет, значит, человек не перенес инфекцию или диагностика оказалась слишком ранней. Если иммуноглобулин М — значит, пациент в острой фазе, то есть инфекция есть прямо сейчас или только-только закончилась. Если иммуноглобулин M и G или только G, значит, инфекция перенесена и выработан определенный иммунитет, есть антитела.

Данный тип тестов представлен в двух форматах: экспресс-тесты на антитела (ИХА), которые разрабатывает, например, компания DRD Biotech, и обычный иммуноферментный анализ (ИФА), который с одной стороны определяет, встречался ли человек с вирусом (есть ли антитела), с другой стороны, показывает, что у него может быть иммунитет.

Российские тесты для выявления коронавируса

Сегодня во всем мире насчитывается более 1,2 млн заболевших. В России, по оценкам экспертов, пик эпидемии придется на вторую половину апреля. Именно в этот период потребность в тестах будет максимально высока.

25 компаний, работающих в том числе в рамках HealthNet, уже предложили свои решения в борьбе с коронавирусной инфекцией. Среди них:

Предпринимаются все возможные усилия для того, чтобы быстро и оперативно менять регуляторную среду и ответить на вызовы коронавируса.

Это касается и предложений Минздрава по введению электронного документооборота в нашей сфере, и организации и проведения клинических исследований, и ускорения всех разрешительных процессов, и конечно, ускорения согласования всех законопроектов по вопросу применения различных не зарегистрированных на сегодняшний момент медицинских изделий для диагностики.

Это все максимально приближает нас к точке, когда у нас не просто появится надежда, а когда у нас будут возможности сказать, что мы знаем, как бороться с коронавирусом.