Папиллом высокого канцерогенного риска впч вкр 58

Цена 390 р.

Срок исполнения

Исследуемый материал

Папилломавирус человека (ВПЧ), Human papillomavirus (HPV) принадлежит к семейству паповавирусов (Papovaviridae), роду папилломавирусов. Это ДНК-содержащий мелкий вирус, термостабильный. Является самой распространенной инфекцией, передающейся половым путем: по некоторым данным, в молодом возрасте отмечается инфицирование до 80% населения. Вирус проявляет тропность к эпителию кожи, слизистых оболочек гениталий и других органов (гортань, ротовая полость, слизистая конъюнктивы).

Основной путь передачи — половые контакты, включая анальный, оральный секс, к сожалению, использование презервативов не защищает от инфицирования данным вирусом. Возможна передача при тесном контакте кожи, слизистых оболочек с инфицированными областями. Важным фактором инфицирования новорожденного с последующим развитием респираторного папилломатоза гортани является инфицирование при прохождении по половым путям во время родоразрешения. На сегодняшний день известно более 100 видов вируса папилломы человека (ВПЧ) и из них более 40 могут вызвать поражение аногенитального тракта (половые органы и задний проход) мужчин и женщин и появление остроконечных кондилом. Папилломавирусы можно разделить на 3 основные группы:

ВПЧ низкого канцерогенного риска (ВПЧ НКР): группа вирусов, которая приводит к доброкачественным поражениям, представлена 5 генотипами, но основными являются 6 и 11, которые составляют до 90% всех случаев инфицирования данными вирусами. Наиболее частые клинические проявление ВПЧ НКР- это остроконечные кондиломы (Condylomata acuminata). Также выделяют еще разновидности остроконечных кондилом: кератотические бородавки с локализацией на сухой коже, папулезные бородавки с локализацией на полностью ороговевшем эпителии, гигантская кондилома Бушке-Левенштейна (встречающаяся у больных сниженным клеточным иммунитетом или при беременности). Эндоуретральные кондиломы локализуются в уретре, часто сочетаются с обычными кондиломами и встречаются преимущественно у мужчин. Кондиломы шейки матки часто сочетаются с генитальными кондиломами: экзофитные кондиломы, эндофитные (плоские).

ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР): группа типов высокого канцерогенного риска представлена 15 генотипами, наиболее распространенными из которых являются десять: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 58, 59. При этом на долю 16 и 18 типов приходится 70% всех случаев инфицирования, и именно данные типы характеризуются высоким канцерогенным потенциалом, в отношении 18 генотипа наблюдается высокая частота выявления при аденокарциномах. На сегодняшний день доказана роль ВПЧ в развитии рака шейки матки, большей доли рака заднего прохода (около 90% случаев), около 40% всех случаев рака влагалища, вульвы, полового члена, 10–15% случаев рака ротовой полости и гортани.

Вирусная ДНК способна персистировать в клетке в двух формах: эписомальной (продуктивная стадия) и интегрированной (интегрированная стадия). На эписомальной стадии происходит усиленная продукция новых вирусов, что способствует вовлечению в патологический процесс новых клеток, однако клетки не теряют контроль над процессами апоптоза и эта стадия характеризуется доброкачественными изменениями со стороны эпителия. Интегрированная стадия — это стадия, когда вирус встраивается в геном клетки и приводит к суперэкспрессии онкобелков Е6, Е7, ассоциируется с предраковыми изменениями и требует соответствующей тактики лечения пациента.

Инфекция, вызываемая вирусом папилломы человека, имеет ряд важных особенностей, без учета которых использование ВПЧ-тестирования сопряжено с рядом трудностей в трактовке результатов.

С одной стороны:

С другой стороны:

Из перечисленных особенностей папилломавирусной инфекции следует, что:

1. Положительный результат тестирования на наличие вируса должен трактоваться как:

2. Отрицательный результат тестирования трактуется как отсутствие риска развития тяжелой дисплазии и рака.

Лабораторная диагностика. Диагностика ВПЧ инфицирования определяется клиническими проявлениями и клиническими задачами прогноза риска развития ВПЧ-ассоциированных злокачественных новообразований.

Лабораторные методы диагностики ВПЧ инфекции:

Стратегии использования ВПЧ-тестов в диагностике предрака и рака шейки матки:

Различные методы молекулярной диагностики (ПЦР анализа) позволяют решить различные диагностические задачи:

Генотипирование ВПЧ дает дополнительные возможности определения прогноза течения заболевания. Необходимость генотипирования может быть оправдана, т. к.:

Исследование на ВПЧ проводят у женщин. Материалом для исследования служит соскоб цервикального канала и/или зоны трансформации, выполненный цервикальной цитологической щеточкой. Исследование вагинального содержимого или соскоба уретры менее информативно, чем исследования цервикальных соскобов.

Маркер инфицирования ВПЧ. Маркер прогноза риска развития РШМ

• все женщины в возрасте 18-65 лет для оценки риска развития рака шейки матки;
• наличие патологии шейки матки;
• контроль персистенции конкретного типа вируса;
• контроль эффективности лечения

[youtube.player]

Папилломавирус считается наиболее распространенной инфекцией на планете. Им заражено почти 90% населения. На сегодняшний день изучено около 130 типов, и с учетом степени опасности они поделены на три обширные группы. Реальную угрозу для организма человека представляет ВПЧ высокого онкогенного риска. Каждый тип, относящийся к этой категории, может спровоцировать развитие онкологических заболеваний. Поэтому в случае обнаружения необходимо обязательно пройти курс комплексной терапии.

ВПЧ: типы высокого онкогенного риска

По частоте заражения людей вирус папилломы находится на втором месте. Многие считают, что он вызывает лишь образование на теле небольших родинок или бородавок. На самом деле, ВПЧ приводит к развитию тяжелого заболевания – рака.

Из более чем 130 известных типов ВПЧ досконально изучить удалось порядка 80 видов. Структура их ДНК постоянно изменяется, что обусловлено сочетанием отдельных штаммов, которые приводят к образованию различных комбинаций и мутации зараженных клеток. В результате каждый раз появляется новый генотип вируса. Это может приводить как к возникновению неприятных симптомов, так и развитию серьезных предраковых состояний.

Для возможности прогнозирования и минимизации рисков возврата рецидива, а также с целью определения правильной стратегии лечения проводится типирование с применением ПЦР диагностики, Digene-теста, ПАП-метода. На основании современной классификации все известные штаммы по степени онкогенности условно разделяются на три группы.

1. Низкого риска. Проявляются в виде одиночных наростов и вызывают лишь косметический дефект, не представляя угрозы организму. Это ВПЧ 6, 12, 14, 42-44 типа.
2. 
   Средней онкогенности. В некоторых случаях могут вызывать мутации клеток. К этой категории относятся штаммы 31, 35, 51.
3. Высокого канцерогенного риска. При сочетании некоторых факторов ВПЧ ВКР могут провоцировать злокачественные мутации клеточных структур, приводя к развитию дисплазии или цервикального рака. Данная группа включает все 13 типов онкогенных впч.

Последние считаются наиболее опасными, поскольку ассоциируются с учащением случаев развития карциномы шейки матки.

В случае обнаружения ВПЧ высокого онкогенного риска врачи подробно объясняют, что это такое, и какую опасность он представляет для здоровья. Ученными было выявлено более сотни штаммов вируса, внешне проявляющихся небольшими образованиями на различных участках тела. Те из них, которые в процессе размножения изменяют генетический код клеток и вызывают их перерождение в раковые, обладают высокой онкогенностью и представляют угрозу жизни.

ПО данным ВОЗ на сегодняшний день впч высокого онкогенного риска у женщин отмечается в 70% случаев от общего числа инфицированных. Возбудитель может передаваться только от зараженного человека к здоровому, животные не могут быть его переносчиками. Существует несколько способов передачи папилломавируса.

Половым путем. Наиболее распространенный вариант – незащищенный сексуальный контакт с инфицированным партнером, причем опасность представляет соитие любым способом. Отмечаются случаи передачи возбудителя через поцелуй, когда зараженная слюна одного партнера попадает на поврежденную слизистую ротовой полости другого.

Контактно-бытовым. Биологические выделения в виде капель крови, слюны или пота могут попадать на кожные покровы здорового человека. Заражение через белье или бытовые вещи практически невозможно. Риск проникновения возбудителя увеличивается при совместном использовании бритвенного прибора, маникюрных инструментов.

Плацентарным. Вирус легко может перейти от матери к плоду во время родов, при наличии у женщины кондилом на стенках влагалища или шейке матки, сформировавшихся в период беременности. В случае заражения у новорожденного может развиться ларингеальный папилломатоз.

После проникновения в организм ВПЧ может находиться в состоянии покоя длительное время и ничем себя не проявлять. Медики отмечают, что инкубационный период часто длится от 2-3 недель до нескольких десятков лет, человек может спокойно жить с вирусом.

Папилломавирус может переходить в активную фазу только на фоне ослабления иммунной системы, которое часто происходит под воздействием следующих факторов:

• нарушения гормонального фона;
• часты стрессы и депрессии;
• перегревания и переохлаждения;
• частые простудные заболевания;
• наличие хронических воспалительных процессов;
• вредные привычки;
• аутоиммунные заболевания и эндокринные нарушения;
• вредные условия производства;
• регулярные физические перегрузки;
• лишний вес, гиподинамия.

Из-за высокого титра канцерогенной опасности, которую представляют штаммы, входящие в третью группу, при малейших подозрениях необходимо обратиться к врачу для прохождения диагностики на ВПЧ.

Если во время визуального осмотра были обнаружены наросты на кожных покровах, слизистых влагалища и гениталий, а также эрозии шейки матки, врач дает направление на анализы. Помимо этого у женщины могут отмечаться такие симптомы:

• чувство тяжести в нижней части живота;
• болезненные ощущения при опорожнении мочевого пузыря;
• обильные выделения, иногда с незначительными примесями крови;
• дискомфорт во время полового акта или после его окончания.

ВПЧ высокого онкогенного типа у мужчин часто никак не проявляется. Признаки инфекционного процесса можно заметить в случае формирования папиллом на головке или стволе пениса. При стремительном развитии патологии мужчина может жаловаться на жжение и боль, которая усиливается во время мочеиспускания, занятий сексом, гигиенических процедурах.

Перечень анализов для определения патогена

Обнаружение возбудителя на раннем этапе позволяет минимизировать риск развития инфекции и формирования злокачественной опухоли. С этой целью специалисты проводят тщательную диагностику, включающую несколько видов исследований. Наиболее достоверными на сегодняшний день считаются следующие процедуры.

1. ПЦР. В плане выявления инфекции, спровоцированной папилломавирусом, этот метод считается наиболее достоверным. С помощью цепной реакции полимеразы имеется возможность выявить такие высокоонкогенные типы, как ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68. Материалом, который нужно сдавать для исследования, служит моча, кровь, мазок из влагалища или цервикального канала, соскоб со слизистой уретры. Метод позволяет с высокой точностью определить тип ВПЧ. Но поскольку его количественный показатель отсутствует, то назначается иная процедура.
2. 
   Digene-тест. Прогрессивная технология назначается в качестве скринингового исследования пациенткам старше 30 лет с целью выявления штаммов средней и высокой онкогенности. В клинической практике же этот метод применяется для определения присутствия возбудителя опасного типа в тканевых субстанциях. В случае положительного ответа по результатам тестирования врачу удается сделать заключение о вирусной нагрузке и установить степень запущенности заболевания.
3. PAP-тест. Цитологическое исследование по методу Папаниколау позволяет определить наличие в биоматериале ДНК ВПЧ среднеонкогенного риска, которые способны спровоцировать интенсивное развитие процесса, приводящего к предраковым изменениям. Результативность зависит от того, насколько точно был произведен забор контрольной субстанции, а также от квалификации медработника.
4. Генотипирование. Позволяет определить штамм, уделяя внимание наиболее опасным типам под номером 16 и 18.

На основании данных, полученных в результате проведения гемотеста и других методов обследования, врач ставит правильный диагноз и определяет степень вероятности развития злокачественного процесса. В случае обнаружения вируса высокоонкогенного риска в отношении пациента проводится курс специфической терапии, которая направлена на подавление инфекции и укрепление защитных сил организма.

Особенности лечения и прогноз

Если в процессе исследования был выявлен ВПЧ высокого канцерогенного типа, то специальное лечение показано проводить даже при отсутствии любой симптоматики. В данной ситуации применяется комплексный подход, включающий консервативные, инвазивные методы, а также народные средства.

Прежде всего, пациентам назначается курс медикаментозной терапии, направленный на угнетение жизнедеятельности вируса, и прекращение его размножения.

С этой целью применяются препараты следующих групп.

При подозрении на начало стремительного роста и размножения вируса с целью подавления данного процесса назначаются цитостатики:

Одинаково эффективными, по отзывам пациентов, являются лекарства общего и местного применения. Последние используются для обработки наростов, сформировавшихся на кожных покровах и эпителиальных тканях.

Эффективным методом терапии считается механическое удаление наростов любым из современных способов:

• электроэксцизия – выжигание образований электрическим током;
• радиотерапия – иссечение опухоли путем воздействия волн различной частоты;
• лазерное удаление – прижигание нароста пучком лучей;
• криодеструкция – удаление наростов с помощью жидкого азота.

Предупреждающие меры

Только один вид специфической профилактики может практически на 100% гарантировать, что в течение последующих 10-15 лет организм станет вырабатывать антитела к впч высокого канцерогенного риска, имеющие возможность спровоцировать предраковые состояния.

Это прививка, которую делают по желанию пациента. Во многих зарубежных странах на протяжении почти 10 лет для иммунизации используются рекомбинантные вакцины:

Обе сыворотки, имеющие доступную цену, содержат инактивированный вирус, который, по утверждению производителя, защищает только от двух видов штамма – 16 и 18. Но, на практике препараты показывают эффективность в отношении всех остальных опасных типов микроорганизмов. Стоимость обеих вакцин отличается, но не превышает 8000 рублей.

Вакцинацию проводят подросткам 9-14 лет и женщинам, не достигшим тридцатилетнего возраста. Процедура выполняется в три этапа и занимает полгода. Для каждой вакцины разработана индивидуальная схема введения инъекций, позволяющая добиться максимально пользы от действия прививки.

Общие меры профилактики предполагают строгое соблюдение врачебных рекомендаций:

• исключение случайных половых связей, в идеале практика моногамии;
• использование барьерных методов контрацепции;
• отказ от вредных привычек;
• предупреждение резкого ослабления иммунной защиты вследствие болезней;
• полноценный отдых;
• правильное и сбалансированное питание;
• регулярные физические нагрузки;
• соблюдение гигиенических норм, особенно при посещении бань, саун, бассейнов.

Заключение

Если возникли подозрения на проникновение вируса высокой онкогенности, следует обратиться к специалисту. Информативные методы исследования позволяют с достоверностью выявить присутствие инфекции, распознать ДНК ВПЧ и предупредить дальнейшее прогрессирование процесса. При комплексном подходе и адекватном лечении удается не только избежать неприятных последствий, но и полностью вылечить заболевание.

[youtube.player]

Исследование используется для диагностики папиллома-вирусной инфекции, с одновременным определением количества вирусной ДНК в исследуемом материале. Анализ позволяет сделать вывод о степени поражения слизистой, оценить эффективность терапии в процессе лечения. Определяется суммарное количество ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го генотипов. Тест также позволяет оценить вероятность интеграции ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го типа в геном человека (что является опасным и прогностически неблагоприятным фактором).

Папиллома-вирусы высокого канцерогенного риска, вирусы папилломы высокого канцерогенного риска, ВПЧ высокого канцерогенного риска.

Human Papillomavirus, DNA; HPV, Viral Load.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Женщинам исследование рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
• Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.

Общая информация об исследовании

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой широко распространённую и вариабельную группу вирусов, поражающих эпителий кожи и слизистых оболочек и обладающих онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.

К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путём, курение и проживание в крупных городах.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии (неоплазии) и в дальнейшем к раку (чаще всего в переходной зоне шейки матки).

К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68.

Для выявления возбудителя используется метод полимеразной цепной реакции, которая позволяет обнаружить ДНК вируса. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.

По данным исследований, количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии. При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования.

В исследовании проводится определение суммарного количества ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16, 18 и 45 генотипов. ВПЧ ВКР являются главной этиологической причиной развития РШМ и предшествующей ему тяжелой дисплазии. ВПЧ обнаруживается в 95 % случаев РШМ, из них 16, 18, 45 генотипы в совокупности являются причиной 75 % плоскоклеточных раков и 94 % аденокарцином шейки матки.

Известно, что развитие РШМ часто ассоциировано с интеграцией ДНК вируса в геном клетки-хозяина. Наиболее часто интегрируют ВПЧ 16 и 18 генотипов, при этом происходит разрыв участка Е1/Е2 при сохранении онкогена Е6/Е7. В тест-системе, на которой выполняется данное исследование, по разным каналам прибора детектируются разные участки генома ВПЧ 16, 18 и 45 типов. Выявление области Е6 при отсутствии области Е1/Е2 позволяет косвенно судить о возможности интеграции вируса в геном человека. В случае обнаружения возможности интеграции вируса в геном в бланк ответа выводится соответствующая информация.

Для чего используется исследование?

• Чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области и других локализаций).
• Для контроля за эффективностью лечения предраковых заболеваний, ассоциированных с ВПЧ.
• Для мониторинга папиллома-вирусной инфекции и прогнозирования ее течения.

Когда назначается исследование?

• При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау, в гистологическом препарате.
• При кондиломах и других морфологических изменениях половых путей.
• При скрининге рака шейки матки у женщин старше 25-30 лет (в качестве дополнительного исследования).
• При наблюдении за инфицированными ВПЧ.
• При лечении рака и предраковых состояний, ассоциированных с ВПЧ.

Что означают результаты?

Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.

• Количество ДНК ВПЧ не определяется при отсутствии вируса в исследуемом образце или его минимальном количестве (ниже детектируемого уровня) – риск развития патологического процесса, связанного с ВПЧ, минимальный.
• Клинически малозначимая концентрация вируса (менее 10 3 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток) – минимальный риск развития дисплазии, транзиторное течение вирусного процесса.
• Клинически значимая концентрация вируса (более 10 3 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток) – хроническая инфекция с высоким риском развития дисплазии и РШМ.
• Более 10 5 копий ДНК ВПЧ на 10 5 клеток при установленном факте персистентного течения инфекции (ВПЧ выявляется более 1 года) – усиленная вирусная нагрузка, ассоциированная с повышенным риском тяжелой дисплазии, часто встречается при РШМ.
• Снижение вирусной нагрузки в 10 раз за 6 месяцев – транзиторная инфекция.
• Рост вирусной нагрузки через 6 и более месяцев после лечения указывает на возможность рецидива.



• Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
• Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
• Результат анализа должен интерпретироваться с учетом заключений цитологического и гистологического исследований.

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог , педиатр, ЛОР.

[youtube.player]

ВПЧ – группа распространенных и генетически разнообразных вирусов, инфицирующих и поражающих эпителий кожных покровов (кожные типы ВПЧ) и слизистых оболочек ротовой полости и аногенитальной области (генитальные типы ВПЧ). Генитальные типы ВПЧ передаются преимущественно половым путем и через родовые пути от матери ребенку. Основными клиническими формами папилломавирусной инфекции гениталий являются остроконечные кондиломы, а также злокачественные формы изменения эпителиальных клеток, приводящие к раку шейки матки.

Исход инфекции зависит от типа вируса. Типы ВПЧ низкого канцерогенного риска (НКР, низкоонкогенные) связаны с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени. Типы ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР, высокоонкогенные) – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 – наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также индуцируют злокачественную трансформацию эпителия, приводящую к инвазивному раку.

Дифференциальная диагностика. Поражения шейки матки, влагалища, вульвы, пениса, заднего прохода непапилломавирусной этиологии; в случае остроконечных кондилом – с проявлениями, связанными с вирусом простого герпеса, а также с истинными папилломами.

Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции включает выявление и количественное определение ДНК ВПЧ ВКР, генотипирование ВПЧ ВКР, выявление ДНК ВПЧ НКР.

Материал для исследования

• Соскобы эпителия цервикального канала, влагалища, вульвы, заднего прохода – для выявления, количественного определения и генотипирования ВПЧ;
• мазки из ротовой полости и гортани – выявления ВПЧ НКР у детей.

Выявление и определение концентрации вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска

Показания к обследованию

• Определение группы риска по развитию рака шейки матки и рака заднего прохода;
• скрининговые программы с цитологическим исследованием одновременно или на первом этапе скрининга (до цитологического исследования) для женщин старше 30 лет;
• разрешение неопределенных и сомнительных результатов цитологических исследований (наличие ASCUS – атипичные плоские клетки неясного значения);
• контроль эффективности терапии тяжелой дисплазии (CIN2+) через 6 месяцев после удаления пораженного эпителия;
• проведение дифференциальной диагностики с заболеваниями непапилломарусной этиологии.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ ВКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Культивировать вирус не удается.

Гибридный захват является первым и наиболее охарактеризованным методом выявления ДНК ВПЧ. Применение метода позволяет определять концентрацию вируса в условных единицах оптической плотности, линейный диапазон небольшой (3–4 порядка). Образцы, в которых присутствует вирус в концентрации ниже порога клинической значимости, учитываются как отрицательные. Граница клинической значимости определяется путем тестирования эталонного образца (концентрация ДНК ВПЧ 1 пг/мл). Все сигналы, значения которых ниже эталонного, считаются отрицательными. Более современными, быстрыми и удобными для использования являются методы на основе АНК. МАНК, работающие в неколичественном формате, выявляют либо ДНК вируса (ПЦР, HDA и др.), либо мРНК транскрипты онкогенов E6 и E7 ВПЧ (NASBA, TMA). Для выявления только клинически значимых концентраций (по разным методикам учета – более 1 пг/мл или 1000 копий ДНК вируса на 100000 клеток человека) используют методики с чувствительностью, при которой образцы с низкой концентрацией учитываются как отрицательные. Наиболее целесообразно использовать ПЦР в реальном времени, которая позволяет точно определить концентрацию ДНК вируса. На основе полученных данных проводится не только оценка концентрации вируса, но, что важно, проводится градация результата по клинической значимости полученной концентрации на:

• положительный – выше порога клинической значимости;
• положительный – малозначимый (ниже порога значимости);
• отрицательный.

Различные наборы реагентов могут отличаться спектром выявляемых генотипов. К группе ВПЧ ВКР относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 генотипы. Наиболее канцерогенными считаются 16 и 18 типы, наименее – 51, 56, 68. Для РФ и стран СНГ клинический смысл исследования сохраняется только при определении как минимум 10 генотипов из перечисленных выше. Выявление в смеси генотипов низкого или неустановленного риска существенно снижает специфичность выделения группы риска онкологической патологии и не может быть оправдано.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Для проведения скринингового обследования на наличие предрака и рака шейки матки предпочтительным является использование мазков/соскобов эпителия цервикального канала и зоны трансформации, выполненных цервикальными цитологическими щеточками. Допускается использование для этих целей мазков из влагалища. Для скрининга рака шейки матки все тесты, вне зависимости от выбранной технологии, должны иметь сбалансированные аналитические и диагностические характеристики, удовлетворяющие следующим условиям – не менее 98% чувствительность по отношению к CIN2+ и не менее 90% специфичность относительно широко валидированного в скрининге теста (например, Hybrid Capture II). Для достижения оптимума аналитической чувствительности избирают подход отсечения образцов с концентрацией ДНК ВПЧ ниже порога клинической значимости. Для этого либо проводят искусственное снижение аналитической чувствительности, либо выбирают в качестве референтного контрольный образец с требуемой пороговой концентрацией. Предпочтительным является измерение концентрации ДНК ВПЧ методом ПЦР в реальном времени.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение ДНК ВПЧ в любой концентрации свидетельствует о наличии возбудителя, однако при интерпретации результатов тестирования следует учитывать, что более 80% инфицированных спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Опасность представляет персистентная форма инфекции (сохраняющаяся более 12–24 мес.). Однократный положительный результат надежно указывает на принадлежность к группе риска развития рака шейки матки в случае, если исследование проводится в группе женщин старше 30 лет или вступивших в половую жизнь более 6–7 лет назад. Особая настороженность должна быть проявлена в отношении пациенток, у которых подтверждается персистенция вируса при повторном тестировании через 1 год. При скрининге с использованием количественных тестов принимают во внимание только клинически значимый результат. Для дифференциальной диагностики и наблюдения пациентов после проведения лечения дополнительная ценность одиночного количественного определения не показана. Перспективным в прогнозе риска рецидива CIN2+ является оценка динамики вирусной нагрузки после лечения (снижение или увеличение концентрации вируса).

Генотипирование вирусов папилломы человека. Цель генотипирования ВПЧ – отличие персистирующей инфекции от случая повторного инфицирования (сохранение генотипа в повторных тестах); уточнение тактики ведения больных в зависимости от онкогенности выявленных типов вируса.

Показания к обследованию. Пациенты с выявленной папилломавирусной инфекцией ВКР

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для генотипирования ВПЧ используют МАНК. Распространение получили методики с детекцией продуктов амплификации методом электрофореза (генотипирование по величине амплифицируемого фрагмента), гибридизации на плашках и стрип-полосках, ПЦР в реальном времени.

Классические методики, использующие принцип гибридизации со специфическими зондами позволяют определять наиболее широкий спектр генотипов (20–40). Однако использование для амплификации универсальных праймеров приводит к существенным различиям в аналитической чувствительности выявления различных генотипов ВПЧ, приводя к заметным искажениям результатов. Кроме того, широкий спектр определяемых генотипов необходим только для научных исследований. В клинической практике достаточным может считаться генотипирование ВПЧ ВКР (10–13 типов). Методики, основанные на применении типоспецифических олигонуклеотидов, позволяют проводить типирование спектра клинически значимых генотипов и в заметной степени лишены проблемы различий аналитической чувствительности по отношению к разным генотипам ВПЧ. Предпочтение должно отдаваться мультиплекс-методикам с использованием ПЦР в реальном времени как наиболее быстрым, контаминационно безопасным, предполагающим возможность автоматизации. Может проводиться сокращенное генотипирование с выявлением только наиболее онкогенных типов ВПЧ 16 и 18.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для установления персистенции вируса применяют подход повторного генотипирования через 12 месяцев. Персистенция подтверждается при сохранении генотипа/ генотипов при повторном исследовании, полная смена спектра генотипов указывает на излечение и повторное инфицирование альтернативными ВПЧ. Выявление наиболее онкогенных типов ВПЧ (16 и 18) может указывать на потребность в более агрессивной тактике ведения больных (более частые повторные визиты, более тщательное обследование для выявления предраковых изменений и др.).

Выявление вирусов папилломы человека низкого канцерогенного риска

Показания к обследованию

• Определение группы риска развития папилломатоза гортани у ребенка (беременные и новорожденные);
• дифференциальная диагностика с заболеваниями непапилломавирусной этиологии.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ НКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Предпочтение должно отдаваться быстрым и контаминационно-безопасным методикам, таким как ПЦР в реальном времени.

Клинически оправданным является определение двух генотипов 6 и 11 (более 90% случаев папилломатоза гортани у детей). Некоторую дополнительную ценность имеет выявление 42, 43 и 44 генотипов. Количественное определение не оправдано.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Выявление 6 и/или 11 генотипов указывает на возможный риск развития папилломатоза гортани у ребенка (риск повышается, если вирус обнаружен в гортани). При планировании беременности может быть рекомендована выжидательная тактика. При сопутствующем наличии остроконечных кондилом – их лечение методом химической и/или физической деструкции. При наличии беременности ее прерывание или родоразрешение методом кесарева сечения не оправданы, так как риск развития папилломатоза гортани ниже риска возможных осложнений указанных операций.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

[youtube.player]