Иммунологические методы диагностики гельминтозов у животных

ДИАГНОСТИКА ГЕЛЬМИНТОЗОВ ЖИВОТНЫХ

Диагноз на гельминтозы ставят на основании комплекса исследований — эпизоотологических, клинических, патологоанатомических и др. При этом проводят исследование крови, экстирпированных кусочков мышц, связок, сухожилий, кожи, проб фекалий, мочи, содержимого и соскобов слизистой желудка и т. д. Исследуют их с целью обнаружения яиц, личинок или взрослых гельминтов.

Необходимо знать, что по количеству яиц или личинок гельминтов в исследуемой пробе материала или по отсутствию их не всегда можно точно судить об экстенсивности и интенсивности инвазии. Например, нет четкой зависимости между количеством яиц и личинок стронгилят в пробах фекалий и взрослых нематод в желудочно-кишечном тракте и легких жвачных (J. Р. Яаипаий, 1974). Гельминтоовоскопическое исследование фекалий и послеубойный осмотр печени коров на фасциолез совпадают лишь у 50 % обследованных животных (Г. А. Котельников, 1984).

Можно привести много примеров, когда у одних животных обнаруживают мало яиц и личинок в фекалиях и много взрослых гельминтов в организме, и наоборот, что объясняется рядом причин — возрастом животных, их физиологическим состоянием, кормлением, содержанием, сезоном года и т. д.

Прижизненная диагностика гельминтозов

Прижизненную диагностику гельминтозов проводят с применением эпизоотологических, клинических, лабораторных и других методов исследований. Эпизоотологическими исследованиями определяется степень распространения паразитозов, возрастные и сезонные особенности проявления их, уровень экстенс- и интенсинвазированности животных гельминтами. Клиническим обследованием животных определяют форму течения гельминтозов (клиническое или субклиническое), острое, подострое или хроническое проявление и т. д. Лабораторные методы предполагают использование гельминтокопроскопических методов исследований, которые направлены на обнаружение в фекалиях животных яиц гельминтов (гельминтоовоскопия), их личинок (гельминтолярвоскопия), половозрелых паразитов или их фрагментов (гельминтоскопия).

Оборудование для гельминтокопроскопических исследований

1. Микроскопы биологические (МБИ) или стереоскопические (МБС), лупы. 2. Чашки Петри, предметные стекла, часовые стекла, стаканчики с диаметром вверху 4— 5 см, стеклянные палочки, воронки, глазные пипетки, центрифужные пробирки, кюветы, штативы, ведра. 3. Центрифуги лабораторные (ОПн-3 и др.) с частотой вращения пробиркодержателя 1000, 1500 и 3000 об/мин. 4. Денсиметры. 5.

Аппарат Бермана. 6. Фильтрационные ситечки, металлические петли с диаметром кольца 8— 10 мм. 7. Газовые горелки или спиртовки. 8. Флотационные растворы, молочная кислота, глицерин, гидрофильный целлофан.

Флотационные растворы и способы их применения

Раствор нитрата аммония (NH4NO3) — на 1 л горячей воды добавляют 1,5 кг гранулированной или обычной аммиачной селитры. Плотность раствора нитрата аммония должна быть 1,5.

Раствор нитрата натрия (NaNОз) готовят путем добавления на 1 л воды 1 кг азотно-кислого натрия и плотность доводят до 1,38—1,40.

Раствор сульфата цинка (ZnSO 4 -7H2O) готовят с плотностью 1,24 путем добавления к 1 л воды 0,4 кг серно-кислого цинка.

Раствор гипосульфита натрия (Na2S2O3 -5H2O) с плотностью 1,4 готовят путем добавления к 1 л воды 1,75 кг вещества.

Раствор хлористого натрия (№0) применяют с плотностью 1,18—1,20. Для этого в емкость с кипящей водой добавляют небольшими порциями соль из расчета 0,4 кг ее на 1 л воды. Для приготовления насыщенного раствора на дне емкости должны оставаться кристаллы соли.

Раствор сульфата магния ^gSO^) с плотностью 1,26—1,28 готовят путем добавления на 1 л воды 0,92 кг соли.

Взятие и доставка в лабораторию проб фекалий животных

Пробы фекалий берут рукой, одетой в тонкую резиновую перчатку, из прямой кишки животных. Допускается отбор проб из только что выделившихся фекалий при испражнении животных. Однако надо следить, чтобы пробы отбирались из верхней части экскрементов, не соприкасавшихся с полом или землей. У мелких животных пробы фекалий берут указательным и средним пальцами. Масса пробы должна быть не менее 8—10 г. После этого тщательно моют руки с мылом.

При обследовании животных на гельминтозы пробы берут от 10 % поголовья, но не менее чем от 25-30 голов.

На отобранные пробы составляется опись и сопроводительное письмо по установленной форме и они отправляются в ветеринарную лабораторию для исследований. Пробы фекалий в ветеринарную лабораторию необходимо доставлять в целлофановых мешочках, в стеклянных банках или завернутыми в пергаментную бумагу. Они должны быть не более как суточной давности, а при исследовании на диктиокаулез и стронгилоидоз - не более 3-4-часовой давности.

Если нет возможности своевременно доставить пробы в лабораторию для исследований, то их консервируют. Для этой цели применяют физические и химические методы консервации.

Из физических методов наиболее простым является воздействие пониженной температуры. Для этой цели используют холодильник, в котором при температуре +2-4°С развитие личинок гельминтов задерживается.

Для консервирования с помощью химических методов применяют различные средства.

1. Жидкость Барбагалло (смесь 3%-ного формалина и физиологического раствора). Помещение проб фекалий в эту жидкость позволяет сохранить их до 2 недель.

2. Смесь формалина (5 мл), глицерина (5 мл) и воды (100 мл).

3. Смесь 0,2%-ного азотно-кислого натрия (1900 мл), 250 мл раствора Люголя, 300 мл формалина и 25 мл глицерина.

В статье изложены методы диагностики гельминтных инвазий: микроскопические, иммуноферментный анализ, серологические, полимеразной цепной реакции, биорезонансная диагностика, гемосканирование, а также инструментальные (ультразвуковое и рентгенологическое исследование, компьютерная томография) и лабораторные, имеющие косвенное значение (клинический анализ крови, анализ крови на печеночные пробы, анализ кала на дисбактериоз). Описаны достоинства методов, их недостатки, достоверность полученных данных. Предложены анкеты-опросники для пациентов для выявления риска инфицирования гельминтами. Описаны достоинства методов, их недостатки, достоверность полученных данных. Предложены анкеты-опросники для пациентов для выявления риска инфицирования гельминтами.

По данным Всемирной организации здравоохранения, основными паразитарными инфекциями на Земле инфицировано почти 4,5 млн человек. Но это только диагностированные случаи, реальная заболеваемость намного выше. Гельминтозы на сегодняшний день остаются наиболее распространенными паразитарными болезнями человека и имеют большое значение, особенно у детей [2, 3, 8, 10].

Чаще гельминтозы встречаются в детском возрасте. Этому способствуют: широкая распространенность репродуктивного материала паразитов (цисты, яйца, личинки) в окружающей среде и недостаточное развитие у детей гигиенических навыков; наличие периодов транзиторного ослабления иммунитета после перенесенных острых респираторных заболеваний; пребывание в оздоровительных лагерях, туристические поездки и др. [3]. Пики выявленных гельминтозов у детей отмечаются в следующие возрастные периоды — 2–3 года, 4–7 лет, 10–14 лет. Среди всех гельминтных инвазий преобладают аскаридоз, энтеробиоз, лямблиоз, трихинеллез, реже — описторхоз, трихоцефалез, стронгилоидоз, тениаринхоз, тениоз, гименолепидоз, дифиллоботриоз, токсокароз. В последнее время среди гельминтозов большое место занимают так называемые микст-инвазии, диагностика которых особенно трудна [1, 2].

Гельминты оказывают отрицательное воздействие на организм человека. Они приводят к аллергизации, развитию полигиповитаминоза, макро- и микроэлементозов, нарушению кроветворения и проницаемости сосудов, гормональному дисбалансу. Гельминтозы способствуют формированию хронических заболеваний (холецистит, желчнокаменная болезнь, панкреатит, колит, сахарный диабет, бронхиальная астма, атопический дерматит), психоэмоциональных нарушений (хроническая усталость, раздражительность, тревожность, гиперактивность у детей), анемии и др. При длительной гельминтной инвазии может развиваться вторичный иммунодефицит [3, 4, 8].

Настороженность врачей в отношении гельминтозов у населения в настоящее время недостаточная, а профилактика сводится к лечению выявленных инвазированных пациентов.

Непосредственное выявление паразита не всегда возможно ввиду его тканевой локализации (трихинеллез, эхинококкоз, токсокароз).

Иммунологическое исследование крови позволяет определить наличие антигенов и антител к гельминтам, достоверность зависит от количества и жизненного цикла гельминтов в организме. Иммуноферментный анализ обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая составляет 90 %, дает возможность определения вида гельминтов, их количества, прослеживания динамики развития процесса, на который указывает уровень антител. Недостаток метода — можно обнаружить ограниченный круг паразитов — лямблии, описторхи, трихинеллы, аскариды, токсокары, токсоплазмы. Достоверность метода — 60–80 %, меньше — у лиц с иммунодефицитами [3, 8, 11].

При серологическом исследовании определяют наличие антител к гельминтам (достоверность — около 60 %): при подозрении на эхинококкоз, цистицеркоз, трихинеллез, токсокароз широко используют реакции непрямой гемагглютинации, агглютинации латекса, связывания комплемента, иммунофлюоресценции [8, 11].
Не во всех случаях методы определения специфических антител обладают достаточной специфичностью и достоверностью. Антигенный состав гельминта зависит не только от вида, но и от стадии; проходя сложный цикл развития от яйца до взрослой особи, гельминты меняют антигенный состав. Кроме того, в иммунодиагностических реакциях используются соматические антитела, а в организме хозяина антитела вырабатываются в основном на экскреты и секреты гельминта. Неспецифическая сенсибилизация организма, общность некоторых антигенов трематод, простейших и человека создают высокий удельный вес ложноположительных реакций в титрах ниже достоверно диагностических [8, 10].

Метод определения гельминтов с помощью полимеразной цепной реакции является высокоспецифичным и высокочувствительным, но из-за дороговизны и сложности не может быть скрининговым, когда, например, нужно обследовать группу детей из детского учреждения [7].

Иммунная система не всегда реагирует (распознает и уничтожает) на наличие гельминтов в организме. Это объясняется тем, что некоторые гельминты имеют прочную и химически устойчивую капсулу или покрыты веществом, которое не распознается иммунной системой; локализуются в тканях, наиболее защищенных от воспалительных реакций, например в спинном мозге; многие виды из них в пищеварительном тракте выделяют антиэнзимы, что спасает их от гибели; имеют большую продолжительность жизни (годами, а иногда до смерти самого человека); питаются за счет гликолиза чистых углеводов; имеют такие приспособления, как присоски, крючки и др., что способствует фиксации внутри организма; у многих видов существует половое размножение, при котором происходит обмен генной информацией, что приводит к усилению гетерогенной популяции, уменьшению уязвимости; обладают высоким уровнем плодовитости.

При ультразвуковом, рентгенологическом исследовании органов брюшной полости, компьютерной томографии можно выявить косвенные признаки гельминтозов: гепатоспленомегалию, неравномерность паренхимы печени и селезенки за счет мелких гиперэхогенных сигналов, увеличенные лимфатические узлы в воротах селезенки и сами гельминты (эхинококки, клубки кишечных гельминтов и т.д.).

Биорезонансная диагностика — современная энергоинформационная методика обследования, основанная на регистрации специальными датчиками электромагнитных колебаний с уникальным специфическим частотным спектром, которые способен испускать каждый гельминт. Биорезонансная диагностика позволяет обнаружить наличие паразитов на разных стадиях развития, указать их локализацию, определить степень повреждения органов. Характеризует состояние организма и улавливает предболезненные состояния, которые можно корректировать и не допустить болезни. Данный метод считается самым надежным, достоверность составляет 75–95 % [5, 9].

Гемосканирование — качественное исследование крови с помощью мощного темнопольного микроскопа, можно увидеть состояние клеток крови (форму, размер, активность, цвет и т.д.), наличие неспецифических элементов и веществ — все это напрямую или опосредованно говорит о наличии в организме гельминтов. Изображение выводится на экран монитора с помощью встроенной видеокамеры в микроскопе. Этот метод диагностики обладает высокой достоверностью [8].

Косвенными лабораторными признаками гельминтозов могут быть анемия, базофилия, эозинофилия, увеличение уровня аспартатаминотрансферазы. Так, при токсокарозе выявляется лейкемоидная реакция эозинофилов (более 20 %) на фоне стойкого аллергического синдрома (атопический дерматит с выраженным зудом и резистентностью к традиционной терапии, тяжелая бронхиальная астма). Угнетение нормальной кишечной палочки в анализе кала на дисбактериоз также может говорить о возможном гельминтозе.

С учетом распространенности гельминтозов мы предлагаем анкету для определения риска инфицирования гельминтами.

Купаетесь в пресноводных водоемах.
Не моете руки перед едой с мылом в горячей воде.
Употребляете воду из непроверенных источников.
Употребляете в пищу домашнее сало с прожилками мяса.
Употребляете в пищу малосольную рыбу.
Употребляете в пищу слабопрожаренное мясо (с кровью).
Употребляете в пищу малосольную икру незаводского приготовления.
Не моете куриные яйца с мылом.
Не моете бананы, апельсины, мандарины перед употреблением.
Удобряете огород навозом.
Употребляете овощи прямо с грядки.
Употребляете фрукты и ягоды прямо с грядки.
Употребляете упавшие фрукты.
Не обдаете всю зелень кипятком для приготовления салатов.
Храните морковь в песке, взятом в дворе.
Ходите босыми ногами по траве.
У членов семьи были глистные инвазии.
В семье имеется собака или кошка.

Поскольку клинические проявления гельминтозов не всегда специфичны, а в начальних стадиях — неспецифичны, мы предлагаем анкету для пациентов для самодиагностики гельминтозов.

Бывает зуд в области ануса по утрам.
Тошнота по утрам при чистке зубов.
Шелушение пальцев рук или ног со слущиванием пластов кожи.
Аллергическая сыпь на коже, кожный зуд.
Шелушение и отечность в области век.
Повышенная утомляемость, вялость, сонливость.
Повышенное чувство голода.
Чувство дискомфорта в животе.
Снижение массы тела.
Наличие нескольких хронических заболеваний органов желудочно-кишечного тракта, суставов, бронхолегочной системы.
Плохое самочувствие, отсутствие официального диагноза, длительное неэффективное лечение.
Периодический подъем температуры, сопровождающийся мышечными и суставными болями.

ВЫВОДЫ

1. На современном этапе нет лабораторных методов исследования на гельминтозы, которые обладают 100% надежностью.

2. Наибольшей достоверностью в диагностике гельминтозов обладают полимеразная цепная реакция и биорезонансная диагностика.

3. Для диагностики гельминтозов рекомендуется использовать комплекс лабораторно-инструментальных методов.

В последние годы предприняты многочисленные поиски методов прижизненной диагностики гельминтозов с помощью иммунологических методов — серологических и аллергических реакций.

Практически применяют их при эхинококкозе, трихинеллезе. Так, А. С. Бессонов (1967) предложил метод иммунологической диагностики трихинеллеза, а Р. С. Шульц — эхинококкоза. Однако все методы недостаточно совершенны: низка эффективность иммунологических реакций, нередко антигены дают неспецифические перекрестные реакции, притом не только между биологически близкими видами, но и видами из другого класса гельминтов и даже бактериями и простейшими.

При обработке гомогенатов гельминтов изменяются структура белков и их активность, специфические реактивные молекулярные структуры перераспределяются таким образом, что количественное содержание белков в антигене не позволяет с достоверностью определить его иммунологическую ценность.

Почти при всех основных гельминтозах испытаны с положительным результатом кожная аллергическая реакция (внутрикожная проба) и реакция связывания комплемента, преципитиновые реакции: кольцепреципитации, микропреципитации на живых личинках, реакция двойной диффузии в гель по Ухтерлони, реакция агглютинации прямая и пассивная, латексагглютинации и др.

Внутрикожная проба. В последние два десятилетия широко применяют внутрикожную аллергическую пробу при эхинококкозе овец. Наибольшее число правильных показаний дает очищенный антиген. По данным В. Т. Рамазанова (1968), аллергическая проба в серии опытов давала правильные показания на 75—80%. Отрицательные реакции часто были при эхинококкозе легких, особенно при ацефалоцистах, нагноении эхинококковых цист.

Специфическая сенсибилизация в результате предшествовавшего введения одной диагностической дозы аллергена не позволяет повторно проводить пробы и ставить диагноз на эхинококкоз сельскохозяйственных животных.

Для прижизненной диагностики ценуроза овец (аллергическая проба) лучший результат дает полисахаридный антиген (Ронжина, 1961; Шульц, 1964; Исмагилова, 1968). Аллергические реакции применяли при цистицеркозе свиней, кроликов, крупного рогатого скота, аскаридозе свиней, метастронгилезе, сетариозе, диктиокаулезе и других гельминтозах, однако из-за сенсибилизации организма использование их ограничено.

Реакция сколексопреципитации (РСкП). Впервые ее разработали применительно к диагностике эхинококкоза Р. С. Шульц и Р. Г. Исмагилова (1963). РСкП очень проста по своим показаниям, однако для диагностики эхинококкоза с помощью этой реакции необходимы постоянно свежие сколексы. М. В. Алферова (1968) испытала эту реакцию при цистицеркозе крупного рогатого скота и пришла к выводу, что она достаточно чувствительна, но требуется более тщательная доработка.

Для прижизненной диагностики цистицеркоза крупного рогатого скота E. С. Лейкина с соавт. (1968) рекомендовали реакцию латекс-агглютинации с антигеном из лиофилизированных цистицерков. Чувствительность этой реакции оказалась равной 94—97%. Ь. К. Омаровым (1973) разработана реакция флюоресцирующих антител для диагностики цистицеркоза с высоким показателем чувствительности.

Получены хорошие показатели специфичности и чувствительности реакции связанного комплемента применительно к диагностике фасциолеза крупного рогатого скота (Полуэктова, 1978). Для целей иммунодиагностики успешно применяют реакции флуоресцирующих антител. В качестве антигенов служат цельные или фрагментированные организмы, яйца или личинки гельминтов. При аскаридозе свиней Л. Е. Верета (1969) отметил высокую чувствительность метода флуоресцирующих антител (антитела обнаружены на 7-й день после заражения). При трихинеллезе реакция иммунофлуоресценции прямого типа введена Jackson (1959). Антигеном служили инкапсулированные личинки трихинелл. Последних инкубировали в иммунной меченой сыворотке, в смеси иммунной меченой и нормальной сыворотками. Все меченые иммунные сыворотки вызывали флуоресценцию пищеварительного тракта личинок. Реакцию непрямой флуоресценции испытали несколько авторов (Sadun, 1961; Sadun et al., 1962; Barata et al., 1963) и установили большую ее чувствительность при диагностике трихинеллеза. Kagan (1964) подтвердил, что флуоресцирующие антитела могут быть выявлены раньше, чем комплементсвязывающие.

Реакция иммунофлуоресценции прямого типа позволила успешно выявлять участки локализации антигена и пути миграции личинок трихинелл. Начиная с 4-го дня после заражения, флуоресцирующие участки обнаруживали в капиллярах печени, синусах и просвете кровеносных сосудов селезенки белых мышей. Это свидетельствовало о миграции личинок трихинелл через внутренние органы (Берчев, 1966). Результатами более объективной оценки иммунофлуоресценции нужно считать установление большого числа неспецифических реакций при исследовании сывороток от индивидов, зараженных различного рода паразитами и незараженных трихинеллами.

Практическое применение реакции флуоресцирующих антител затрудняется сложностью теста, требующего определенной аппаратуры для приготовления антигена и учета реакции, необходимых антивидовых глобулинов и использования дорогих и дефицитных реактивов.

Реакция энзим-меченых антител. Основана она на переводе антигенов в нерастворимое состояние путем пассивной адсорбции на твердой поверхности. С помощью реакции можно количественно определять специфические антитела. Для ее постановки используют растворимый антиген, которым покрывают стенки пробирок из полистирола, и меченный пероксидазой или фосфатазой антииммуноглобулин (Voller, 1976). Реакция энзим-меченных антител значительно специфичнее и чувствительнее других методов иммунодиагностики (Huldt et al., 1975; Bout et al., 1976; Me Laren et al., 1979; Белозеров, 1982; Полетаева, 1983).

Большинство гельминтологов (иммунологов) при постановке этой реакции стремятся получить специфичный и высокочувствительный антиген, определить его химический состав, который бы позволил точнее воспроизводить результаты и достигнуть надлежащей стандартизации. Однако добиться этого трудно, так как невыяснено, какие стадии развития гельминта являются наиболее удобными для получения антигенов. В различных лабораториях антигены готовят произвольно. Поэтому любой антиген, даже если он получен от одного и того же паразита, отличен от другого и не соответствует требованиям стандартизации. Гельминтные антигены не химическое вещество, а биологический материал сложного строения, поэтому необходима полная стандартизация антигенов из гельминтов, рекомендуемых для серологической диагностики.

Посмертная (послеубойная) диагностика гельминтозов. Гельминты паразитируют во всех органах и тканях, поэтому истинную картину поражения можно установить только после убоя или падежа животных с помощью методики гельминтологических вскрытий, разработанной К. И. Скрябиным. Количественный подсчет всех видов гельминтов, которыми поражено животное, можно произвести методом полных гельминтологических вскрытий. Если требуется определить место нахождения того или иного гельминта, то проводят полное гельминтологическое исследование отдельных органов. Неполным гельминтологическим вскрытием предусматривается извлечение из органов и тканей лишь отдельных гельминтов.

Гельминты различных видов в процессе физиологического развития приспособились к паразитированию в организме определенного вида животных в отдельных органах и тканях, вызывая соответствующие гельминтозы. Знание мест локализации гельминтов в организме окончательного хозяина позволяет более быстро диагностировать тот или иной гельминтоз.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Гламаздин И.Г., Гармаш С.И., Панюшкин А.

По результатам проведенных клинико-имму-нологических исследований крови гельминтозных собак показаны акценты патогенеза. Обсуждается эффективность копрологических и инструмен-тальных методов диагностики гельминтозов.

Kliniko-immunological description of some helminths of dogs

By the results of conducted kliniko-immunological researches of blood of helminthosis dogs the accents of pathogenesis are shown. Efficiency of coprology and instrumental methods of diagnostics of helminthosis is discussed.

Патогенез, патология и экономический ущерб

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ ГЕЛЬМИНТОЗОВ СОБАК

И.Г. ГЛАМАЗДИН доктор ветеринарных наук

С.И. ГАРМАШ, А. ПАНЮШКИН аспиранты

Московский государственный университет прикладной биотехнологии, 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д. 33, тел. 277-03-45, e-mail:glamazdin@yandex. ru

По результатам проведенных клинико-иммунологических исследований крови гельминтозных собак показаны акценты патогенеза. Обсуждается эффективность копрологических и инструментальных методов диагностики гельминтозов.

Ключевые слова: гельминты, собаки, биохимические исследования, IDEXX.

В патогенезе гельминтозов важная роль отводится механическим повреждениям в период миграции и локализации паразитов, развитию аллергических реакций и нарушений деятельности пищеварительного тракта. Однако до сих пор не выяснены механизмы проявления некоторых признаков при гельминтозах: анемии, почечной или печеночной недостаточности, аллергических реакций, снижения эффективности иммунной защиты. Современная концепция гельминтозной болезни не выделяет формы, степени тяжести, этапы развития и комбинации основных клинических проявлений. В последние годы появились противоречивые сообщения [1, 2] об иммунологических нарушениях или биохимических изменениях в крови собак, инвазированных гельминтами.

Известно, что системный лечебно-диагностический подход к болезни возможен только при условии целостного взгляда на патогенез, проявление клинических признаков, а также аллергий и иммунодефицита.

Гельминтозы собак городской популяции являются одной из проблемных задач ветеринарии. Многие гельминты, паразитирующие у собак и кошек, являются опасными для человека. Рост численности собак в таких крупных мегаполисах как Москва, Санкт-Петербург, Ростов, Воронеж и других представляет особую опасность как источник загрязнения внешней среды фекалиями и инвазионными яйцами гельминтов [1].

Целью наших исследований явилось изучение клинико-иммунологической картины некоторых гельминтозов собак.

Материалы и методы

В работе использовали физико-химические, иммунологические, иммунохимические и гельминтологические методы исследований. Физико-химические методы включали определение белка по Лоури и Варбургу, Христиану. Белок из раствора осаждали сульфатом аммония. Биохимические иссле-

Российский паразитологический журнал, 2009, № 3

дования сыворотки крови проводили на биохимическом анализаторе. Для определения активности антител в сыворотках крови спонтанно инвазиро-ванных собак использовали метод твердофазного ИФА на пластике и нитроцеллюлозной мембране. Гельминтологические методы включали метод Фюл-леборна и Дарлинга.

Результаты и обсуждение

При обследовании 970 собак городской популяции собак у 51 животных (5,3 %) обнаружены цестоды, в том числе: Taenia sp. - у 38, Dipylidium cani-num - у 6, Diphyllobothrium latum - у 4 и Mesocestoides lineatus - у 3. Нематодами были поражены 83 собаки (8,5 %). В тонкой кишке обнаруживали 29 экз. Toxocara canis, 20 - Toxascaris leonina, 9 - Ancylostoma caninum, 7-Uncynaria stenocephala. Нематоды, паразитирующие в толстой кишке представлены Trichocephalus vulpis у 12 собак. У 6 собак выявлены Dirofilaria spp.

Патогенез при гельминтозах следует рассматривать как цепь возникающих в организме хозяина взаимообусловленных процессов, главным звеном которых является паразитирование гельминтов. Следует отметить, что общей закономерностью патогенеза является принцип саморазвития и саморегуляции. Поскольку эволюция паразитов на протяжении тысячелетий проходила совместно с хозяином, в его организме, то при слабой инвазии гельминтоз-ный процесс может протекать без ярко выраженных клинических признаков. Тем не менее, при гельминтозах отмечают травматизацию тканей режущими и колющими морфологическими структурами; давление на ткани; разрывы сосудов; сужение просветов или полное их закрытие; возникновение геморрагий и лимфорагий; потребление необходимых хозяину питательных веществ, витаминов, микроэлементов; химическое воздействие ферментами проникновения, секретами, метаболитами и аллергизацию хозяина. К тому же существует и неспецифическое воздействие гельминтов, которое является вторичным и обусловлено возникновением рефлекторных и нервногуморальных реакций хозяина.

При гельминтозах у животных отмечали исхудание, рвоту, слабость, признаки обезвоживания, диарею. Причем эти признаки проявлялись при интенсивной инвазии и после дегельминтизации, что, очевидно, связано с интоксикацией организма продуктами распада погибших гельминтов.

При исследовании крови собак отмечали увеличение лейкоцитарного индекса, нейтрофилию и эозинофилию, снижение уровня гемоглобина крови, содержания альбуминов сыворотки крови, резкое увеличение содержания Ри у-глобулинов, повышение активности щелочной фосфатазы, амилазы, увеличение концентрации билирубина, рост активности АЛТ, ЛДГ, снижение уровня мочевины (табл.).

При цестодозах интенсивность инвазии составила 1-2 экз./гол. При этом ELISA показал результаты экстинкции около 1,0. При интенсивности инвазии свыше 6-10 экз./гол. в ELISA были получены максимальные значения экстинкции - до 1,4. При слабой нематодозной инвазии (1-2 экз./гол.) реакция ELISA соответствовала показателю 1,2, что несколько выше, чем при цестодозах. Интенсивная степень инвазии нематодами обеспечивала такой же уровень реакции, как и при цестодах. Таким образом, нами отмечена корреляция между интенсивностью реакции и степенью инвазии.

Полученные результаты указывают на то, что при гельминтозах происходят очень серьезные нарушения в крови и изменения активности ферментов. Поэтому разработка конкретной схемы уменьшения последствий инвазии для хозяина на основе современных вариантов иммуномодуляции, диеты и антигельминтиков представляет большой практический интерес. Решение подобной проблемы приведет к более эффективному и своевременному вос-

Российский паразитологический журнал, 2009, № 3

становлению рабочих качеств собаки после инвазии гельминтами и обеспечит биологическую безопасность окружающей среды и мясопродуктов.

Биохимические показатели крови собак при высокой интенсивности инвазии нематодами

Показатель Ед. измерения Значение показателя для группы

Глюкоза 3,04±0,3 ммоль/л 3,5±0,3

Креатинин 118,0±9,4 мкмоль/л 70,2±7,3

Мочевина 4,1±0,4 ммоль/л 5,5±0,5

АСТ 74,0±6,2 Е/л 40,2±4,1

АЛТ 67,8±7,0 Е/л 38,4±3,7

Белок общий 58,8±6,3 г/л 60,4±5,7

ЛДГ 201,9±17,6 Е/л 57,2±4,7

Альбумин 32,4±4,0 г/л 36,5±3,4

Амилаза 1144,0±44,2* Е/л 600,4±25,4

Щелочная фосфатаза 94,3±8,4* Е/л 51,6±5,0

Билирубин прямой 0,26±0,08 мкммоль/л 0,3±0,02

Билирубин общий 5,23±0,9* ммкмоль/л 2,5±0,3

Читайте также: