Исследование паразитов у животных
Гельминтокопроскопия (от греческого слова helmins – червь, kopros – кал, навоз, skopeo – смотрю) – совокупность методов взятия, обработки и исследования проб фекалий животных и человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов или же самих паразитов, их фрагментов (членики, отрезки) и постановки диагноза.
Методы исследования направленные на отыскание самих паразитов и их отдельных фрагментов называется гельминтоскопией. Яйца гельминтов обнаруживают гельминтоовоскопическими, а личинок гельминтоларвосколическими методами
1. Порядок взятия и доставки материала для исследований
Фекалии у животных берут либо из прямой кишки, либо с земли (или пола) в зависимости от вида гельминта в количестве 4-10 г. При взятии их из прямой кишки на руки надевают тонкие резиновые перчатки или напальчники. При исследовании на кишечные стронгилятозы и легочные гельминты (особенно при диктиокаулезе) фекалии нужно брать только из прямой кишки во избежание загрязнения исследуемого материала личинками свободно живущих гельминтов. Допустимо отбирать пробы с пола, когда исследования проводят на заболевания, при которых го яиц не выходят личинки (фасциолез, дикроцелиоз, мониезиозы, аскаридиозы и т.д.).
У крупного рогатого скота, лошадей, собак фекалии берут индивидуально, указывая кличку и номер животного. У свиней, овец, оленей, кроликов и пушных зверей не всегда удается индивидуальное взятие проб, у этих животных фекалии чаще берут групповым методом, при этом указывают группу, отару, № станка и клетки.
Исследуют не менее 10% животных отары, фермы, хозяйства. Доставляют пробы фекалии в стеклянной, пластмассовой таре, целлофановых мешочках или пергаментной бумаге с обязательной описью проб в сопроводительном документе. При этом указывают, хозяйство, отделение, бригаду, участок, ферму, вид животного, их возраст, на какие гельминты исследовать, дату взятия и направления материала. Клички, номера животных, станка, клетки должны соответствовать номеру пробы фекалий на упаковке.
2. Методы гельминтоскопии
Гельминтоскопию применяют для обнаружения в исследуемом материале половозрелых и юных гельминтов или их фрагментов. Гельминты нередко отходят сами. А у цестод некоторых групп систематически отторгаются членики и фрагменты (отрезки) стробилы с яйцами и выделяются наружу. Исследуя фекалии животных невооруженным глазом можно заметить гельминтов или их фрагменты и членики, а иногда приходится использовать специальные методы исследования.
Особое значение гельминтоскопия имеет при цестодозах, а также при диагностической дегельминтизации.
С целью обнаружения члеников имагинальных цестод осматривают свежие фекалии. У овец, северных оленей, телят, лошадей члеников цестод нетрудно заметить при обычном осмотре. В фекалиях ягнят и овец рано утром или после дневного отдыха находят членики мониезий, тизакиезий, аветеллин и стилезий. У плотоядных животных членики цестод из отряда тениата способны активно передвигаться во внешней среде. Поэтому необходимо осматривать свежие фекалии.
Весьма характерны по форме членики огуречного цепня ( Dipylidium caninum ) паразитирующий у собак, лисиц, песцов, енотовидных собак, кошек и других плотоядных, а также у человека. Членики этого паразита внешне напоминают огуречные семена, их легко заметить в фекалиях, выделенных инвазированными животными.
Из специальных методов гельминтоскопии практически прост и приемлем метод последовательного промывания.
2.1. Метод последовательного промывания
При проведения этого метода собирают свежие порции фекалий от животных, их кладут в сосуд, заливают водой в соотношении 1:5 и 1:10, тщательно перемешивают. Взвесь оставляют на 5 мин. для осаждения. Затем верхний слой сливают до осадка, после чего снова заливают водой и повторяют эти операции до тех пор, пока жидкость над осадком не будет прозрачной. После надосадочную жидкость сливают последний раз, а осадок помещают в кювет или чашку Петри для исследования под лупой. Так как одни гельминты хорошо видны на белом фоне, а другие на черном, то для более полной выборки гельминтов чашку Петри ставят то на белую, то на черную бумагу. Гельминты выбирают препаровальной иглой или кисточкой, а затем микроскопируют для установления вида, при этом пользуются ручной, а также штативной лупой или стереоскопическим микроскопом.
2.2. Метод отсеивания
При этом методе используют набор из 2 – 4 металлических сит с отверстиями убывающего диаметра. Струей воды промывают фекалии, при этом частицы фекалий уносятся водой, а гельминты в зависимости 6 v величины задерживаются на разных ситах. Затем гельминтов выбирают и исследуют. Этим методом можно собрать гельминтов разной величины
3. Методы гельминтоовоскопии
Гельминтоовоскопия (от латинского ovum – яйцо, греческого skopeo – смотрю) объединяет группу методов исследования, с помощью которых выявляют яйца возбудителей гельминтозов.
Предложено много методов овоскопии. Но не все они заслуживают практического внимания: одни сложны по технике выполнения, при исследовании другими требуется значительное время, третьи малоэффективны. В данной работе мы приведем только те методы, которые заслуживают практического внимания.
Удельный вес яиц тяжелее обычной воды, вследствие этого яйца гельминтов, как более тяжелые частички вымываются из фекалий водой и оседают на дно сосуда с различной скоростью, в зависимости от удельного веса, Быстрее всего оседают яйца более крупного размера.
В растворах же солей высокого удельного веса яйца гельминтов наоборот всплывают (явление флотации) в верхний слой и концентрируются в нем.
На использовании этих физических закономерностей основала технология всех современных методов гельминтоовоскопии, которые подразделяются на три группы:
а) Методы осаждения (седиментации) яиц гельминтов;
б) Методы флотации яиц гельминтов;
в) Комбинированные методы (осаждения и флотации) яиц гельминтов.
3.1. Методы осаждения (седиментации)
Основаны на принципе осаждения взвешенных в жидкости яиц гельминтов, промывки осадка и исследования его. Эти методы применяются в основном для диагностики тех гельминтозов, возбудители которых выделяют яйца с высоким удельным весом (фасциолез, дикроцелиоз, парамфистоматоз, описторхоз и др.). Методики осаждения менее эффективны и более трудоемки, чем флотации. Это связано со сложностью отыскания яиц гельминтов в осадке взвеси.
3.1.1 . Метод последовательных смывов
Пробу фекалий весом 3-5 г кладут в стакан, вливают небольшое количество воды и размешивают палочкой или пинцетом до получения жидкой кашицеобразной массы, затем добавляют воду порциями до объема 50 мл при постоянном размешивании; После взвесь процеживают через металлическое сито или марлю в другой стакан, в нем отстаивают в течение 5-10 мин. Затем верхний слой жидкости над осадком сливают, а к осадку добавляют новую порцию воды и вновь отстаивают в течение 5 – 10 мин. Описанная процедура повторяется до тех-пор, пока вода не станет прозрачной. Ее в последний раз сливают, а осадок (около 5 мл) разливают на предметные стекла или стекла большего размера (12×19) и микроскопирутот.
Эта методика широко применяется в ветеринарных лабораториях для диагностики фасциолеза, дикроцелиоза, парамфистоматоза, эуриггрематоза и других гельминтозов жвачных. Вместе с тем, она трудоемка и по диагностической эффективности значительно уступает специальным флотационным и комбинированным методам гельминтоовоскопии.
3.1.2. Метод Горшкова.
Этот метод предложен ял я диагностики драйшеоза и габромематоза лошадей. Основан на принципе осаждения и концентрации яиц 150-30° г фекалий помещают на металлическом сите или марле в большую воронку с верхним диаметром 15-20 см. Предварительно на нижний конец воронки надевают резиновую трубку длиной 10-15 см с зажимом на конце. Воронку укрепляют в штативе. Фекалии разрыхляют, заливают доверху теплой водой (38 – 39°С) и выдерживают 4-24 часа. Затем зажим осторожно открывают, и жидкость выпускают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин, в течение 3-х мин. Верхний слой жидкости сливают, а осадок наносят на предметное стекло и микроскопируют.
3.1.3. Метод соскоба с перианальных складок
Эту методику применяют для диагностики оксиуроза лошадей и пассалуроза кроликов. Из деревянной палочки или щепочки делают лопаточки (можно и спички), смачивают смесью глицерина с водой (1:1) и делают соскоб с перианальных складок с внутренней стороны хвоста в области промежности. Соскоб переносят на предметное стекло с указанной смесью, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом.
3.2. Флотационные методы
Все методы флотации (от англ. Flotation — всплывание) основаны на единой физической закономерности, обеспечивающей всплытие яиц гельминтов в насыщенных, растворах солей. Для этого рекомендуются растворы различных солей, но предпочтительнее дешевых и повсеместно доступных.
Отдельные методы флотации называются по именам авторов, впервые предложивших ту или иную соль для приготовления флотационной жидкости.
3.2.1. Метод Фюллёборна
Для этой методики нужен насыщенный раствор поваренной соли, который готовят путем кипячения 400-420 г соли на 1 л воды.
Пробу фекалий весом 3 – 5 г помещают в стакан, заливают небольшим количеством флотационной жидкости, тщательно размешивают, затем добавляют 50-100 мл этого раствора и процеживают через металлическое сито или марлю в один спой в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивают 40-60 мин., затем прикосновением петли снимают поверхностную пленку, переносят ее на предметное стекло для микроскопирования.
Этот метод в отечественной лабораторной практике может применяться для диагностики аскаридоза, стронгилятозов и стронгилоидоза свиней, неоаскаридоза, стронгилятозов стронгилоидозов, мониезиоза,. тизанизиоза, жвачных, параскаридоза, стронгилятозов кишечника лошадей
Плотность насыщенного раствора поваренной соли невысокая — 1,18-1,20. Тогда как удельный вес яиц аскариса равен 1,10-1,14 : а у неоплодотворенных яиц — 1,26, а трихоцефалюса — 1,16-1,22. Поэтому насыщенный раствор поваренной соли способен флотировать только масть яиц аскарид и трихоцефалюсов, по этой причине диагностическая эффективность данной методики невысокая. Кроме того, раствор на предметном стекле быстро кристаллизуется.
3.2.2. Метод Котельникона-Хренова с аммиачной селитрой
Технология этого метода такая же, как и метода Фюллёборна, но в качестве флотационной жидкости применяется нитрат аммония (техническая гранулированная аммиачная селитра) используемый для удобрений. При приготовлении флотационной жидкости на 1 л кипящей воды растворяют 1,5 кг селитры. Плотность раствора — 1,32. Поверхностную пленку можно микроскопировать через 10 мин.
Данная методика обладает высокой диагностической эффективностью. Кроме того, гранулированная аммиачная селитра, применяемая для флотационного раствора — общедоступная дешевая соль и производится в огромном количестве как минеральное удобрение.
В лабораторной практике эта методика широко применяется для выявления яиц аскаридоза, трихоцефалеза, эзофагостомоза и метастронгилеза свиней, неоаскарндоза, стронгилятозов пищеварительного тракта, трихоцефалеза, авителлиноза жвачных, параскаридоза и стронгилятозов лошадей, токсокароза и токсаскаридоза собак, кошек, песцов, лисиц и других плотоядных, стронгилоидоза животных разных видов, аскаридиоза и гетеракидоза кур.
Недостатком этого метода является то, что флотационная жидкость из аммиачной селитры не способна поднять тяжелые яйца трематод (фасциол, парамфистом, описторхисов и др.), т.к. удельный вес этих яиц больше чем 1,3 и раствор быстро кристаллизуется.
3.2.3. Метод Котельникова-Хренова с нитратом свинца
Техника проведения этого метода аналогична методу Фюллёборна. В качестве флотационной жидкости при этом используется насыщенный раствор нитрата свинца из расчета 0,65 кг на 1 л воды. Плотность этой жидкости достигает 1,5. Применение такого флотационного раствора дает возможность диагностировать широкий круг возбудителей гельминтозов и
с его помощью легко выявляются и тяжелые яйла фасциол (удельный вес 1,31-1,35), парамфистоматат (1,33-1,38), дикроцелиумов (1,3) и еще быстрее яйца с меньшим удельным весом, аскаридат, стронгилят, метастронгилюсов, трихоцефалят, стронгилоидесов, аноплоцефаяят (мониезий), тениат, скребней (макраканторинхусов), а также капсулы тизаниезий.
Недостатком данной методики является дороговизна нитрата свинца. Вместе с тем, при работе данным препаратом петли покрываются белым налетом, (нитрат свинца входит в химическую реакцию с металлами), яйца трематод сильно деформируются, что создает определенные трудности при исследовании. Кроме того, используемый препарат соль тяжелого металла — свинца, который является высокоядовитым веществом, что создает опасность для здоровья исследователей и окружающих, отработанные растворы данного препарата запрещено сливать в канализационные стоки. По совокупности этих причин, указанная методика не нашла широкого применения в практике.
Кроме того, в качестве флотационных жидкостей авторами были предложены насыщенные растворы из следующих солей: нитрата натрия — 1 кг препарата на 1 л воды, р — 1,38 (метод Калантаряна), тиосульфата натрия — 1,75 кг препарата на 1 л воды, р — 1,40 (метод Болховитинова), карбоната калия — 0,6 кг на 1 л воды, р — 1,41 (метод Вольфа). Однако все эти методы по тем или иным причинам также не нашли широкого применения в практике.
Паразиты у животных — симптомы и лечение. Виды паразитов у животных. Методы борьбы с глистами. Пути заражения, методы лечения, диагностики и профилактика гельминтозов у животных. Медикаменты для лечения паразитарных инвазий у животных.
Солитер в рыбе: как выглядит, чем опасен, фото и описание
Солитер в рыбе – ленточный червь, который может вызвать у человека смертельно опасные заболевания, например, дифиллоботриоз. Особенно опасен солитер для детей, так при заражении этим паразитом у ребенка могут появиться .
Глисты у собаки: причины, симптомы, диагностика, фото
Глисты у собаки могут угрожать здоровью человека. У собак паразитируют следующие виды глистов: Нематоды (круглые черви) Нематоды – это наиболее обширная группа гельминтозов. Различные виды нематод паразитируют практически во всех .
Стронгхолд для собак – инструкция по применению для капель
Стронгхолд для собак – эффективный противопаразитарный препарат, который применяется для лечения и профилактики гельминтов. Общие сведения о препарате Стронгхолд для собак Стронгхолд (капли на холку) – лекарственное средство с широким .
Стронгхолд для кошек – инструкция по применению препарата
Стронгхолд для кошек по праву считаются одним из лучших препаратов для лечения паразитарных заболеваний у животных. Стронгхолд прост в применении и практически не имеет побочных действий. Животные, как правило, легко .
Фото глистов у кошек – какие паразиты живут у кошачьих
Фото глистов у кошек. Кошки и собаки, даже не выходящие на улицу, могут стать носителями паразитов и представлять опасность для человека. Представители семейства кошачьих заражаются трематодами, нематодами и цестодами. Все .
Нематоды у кошек – симптомы, признаки и общие методы лечения
Нематоды у кошек – одна из разновидностей глистной инвазии, которая вызывается круглыми червями. При заражении поведение кошки может измениться, чаще всего она теряет аппетит, становится вялой и сонливой. Кто такие .
Лечение кошек от глистов – признаки и виды паразитов
Лечение кошек от глистов предопределяет применение противогельминтных препаратов, которые в широком ассортименте представлены в зоомагазинах. Средства от глистов для котов выпускаются в виде таблеток, капель и суспензий. Какую лекарственную форму .
Заразиться глистами от кошки – возможно ли это?
Заразиться глистами от кошки можно, поскольку известно, что представители семейства кошачьих могут являться переносчиками опасных паразитарных инфекцией, таких как токсоплазмоз, гельминтозы, токсокароз и другие. Для того, чтобы обезопасить себя от .
Гельминты кошек – какие существуют, признаки и методы лечения
Гельминты кошек существует множество разновидностей, которые способны паразитировать у домашних питомцев. Как правило, начало заражения не характеризуется появлением каких-либо симптомов, но со временем животное может стать вялым, беспокойным, потерять аппетит, .
Глисты у котят – симптомы, признаки, методы лечения
Глисты у котят - очень опасны, так как это может негативно сказаться на росте и развитии животного, а также вызвать хронические заболевания внутренних органов. Глистная инвазия у котёнка Сделать предположение .
Капли от глистов на холку для кошек: популярные препараты
Капли от глистов на холку для кошек – это одна из форм выпуска противогельминтных препаратов у животных. В ветеринарных аптеках и зоомагазинах представлен широкий спектр выбора медикаментозных средств, способных помочь .
Таблетки от глистов для собаки – популярные препараты
Таблетки от глистов для собаки необходимо выбирать по рекомендации ветеринара в зависимости от породы, возраста и веса животного. Современные противогельминтные препараты не оказывают негативного влияния на работу внутренних органов животного, .
Таблетки от глистов для собак – как правильно дать лекарство
Таблетки от глистов для собак. К сожалению, многие кошки и собаки бывают поражены внутренними паразитами — гельминтами (глистами). Среди эндопаразитов встречаются круглые и ленточные черви. Подхватить их можно многими способами. При контакте с зараженным животным. При .
Как дать таблетку котенку от глистов – средства и методы
Как дать таблетку котенку. Профилактика гельминтов – лучший способ поддержать здоровье питомца, а также обеспечить безопасность всем членам семьи. Для профилактики и лечения паразитов у котов можно использовать лекарственные препараты .
Многие люди, содержащие на своем попечении лающих и мяукающих питомцев, ошибочно считают, что у их домашних любимцев полностью отсутствуют какие-либо паразиты. На самом деле невооруженным глазом их наличие во многих случаях можно и не выявить.
В первую очередь нужно запомнить: даже при условии тщательного ухода и присмотра, а также при проживании кошки или собаки под крышей в доме или квартире, вероятность заражения глистами, аскаридами и прочими паразитами остается очень высокой. Ведь если верить проводимым исследованиям, больше половины четвероногих друзей страдают наличием паразитов в своем организме. Вылечить взрослого кота или пса намного проще и эффективнее, чем бороться с недугом у совсем юных особей.
В нашей стране известно более 80 видов гельминтов, и почти половина из них представляет опасность для людей.
Чаще всего встречаются следующие особи:
- гельминтозы;
- токсокариоз;
- дипилидиоз;
- токсаскаридоз;
- унцинариоз.
Среди перечисленных выше паразитов есть 3 вида, представляющих смертельную опасность не только для самих питомцев, но и для их владельцев. И если домашний любимец уже заражен, есть высокая вероятность того, что может заразиться и человек. Но и как любую другую болезнь, наличие паразитов лучше всего предупредить, чем долго и тяжело лечить.
Первоначальное выявление симптомов
Так складывается ситуация, что заболевшие питомцы не могут рассказать о своем самочувствии и ощущениях на данный момент. Так что владельцы, опираясь на собственные наблюдения, должны предоставить подробный анамнез состояния домашнего животного ветеринарному врачу. Хозяева должны понимать, что если в поведении животного что-то изменилось, стоит задуматься, а все ли в порядке. Также нужно рассказать специалисту даже о том, что считается не таким уж и важным.
Оптимальными показателями во время измерения пульса являются: у псов – 75-115 ударов в минуту, у котов – 105-125 ударов в минуту. Чтобы провести данное измерение, необходимо обнаружить у животного бедренную артерию, находящуюся на внутренней поверхности, и приложить к ней пальцы.
Частота дыхания должна быть следующей: у котов – от 11 до 26, у псов – от 11 до 29. Это измерение производится, когда животное отдыхает или спит по движению грудной клетки.
Симптомы наличия паразитов у взрослых животных
Сразу стоит задуматься о наличии заболевания в том случае, если вдруг питомец стал менее активен и его постоянно клонит в сон. Также должны насторожить стоны и вой животного без имеющейся на то причины.
- Зараженные кошки или собаки становятся равнодушными к играм и еде, но появляется жажда.
- Нос больного животного чаще всего сухой, иногда может быть повышенной температуры.
- Слизистая оболочка глаз обычно раздражена, текут слезы.
- Туалет у домашнего любимца может вообще отсутствовать.
Симптомы паразитов у молодых котят и щенков
При обнаружении симптомов глистной инвазии у юного питомца, следует незамедлительно начать лечение. Заражение паразитами приводит к необратимым последствиям в развитии животного, а иногда оно может закончиться летальным исходом для маленького щенка или котенка.
Если при осмотре любимца был обнаружен раздутый живот при наличии просвечивающихся ребер, значит, заражение имеет место быть. Также одним из симптомов заражения является неуемное поедание предметов, не предназначенных для пищи, но это происходит в самом начале заболевания.
Когда паразитов становится больше, аппетит у домашнего животного пропадает. Если не проводить никакого лечения, произойдет закупорка кишечника, у питомца появится неконтролируемая тошнота и любимец может погибнуть. Поэтому необходимо следить за здоровьем прирученных кошечек и собачек.
Лечение и профилактика заболевания
Назначить лечение для тяжелого течения болезни может лишь специалист в ветеринарной клинике. Наряду с антигельминтными препаратами, доктор назначает введение физиологического раствора, кровеостанавливающие средства и послабляющие лекарства.
Для профилактической цели используется комплексное применение антигельминтных препаратов, благодаря высокой эффективности и низкой токсичности.
Избавление от паразитов — процесс довольно долгий и трудоемкий, ведь однократного применения антигельминтных препаратов недостаточно для полного излечения. Чаще всего первая обработка убивает лишь взрослых особей, при этом яйца глистов остаются в целости и сохранности. По этой причине необходима повторная процедура обработки от гельминтов после того, как прошло 10 суток со дня первой обработки. По истечении этого периода из яиц вылупляются паразиты, еще не готовые к размножению. Такая комплексная обработка принесет свои плоды.
Рекомендуется проводить подобные профилактические действия для всех членов семьи, тогда вероятность повторного заражения снизится в разы.
Методы прижизненной лабораторной диагностики гельминтозов:
— диагностическая дегельминтизация и другие методы;
Методы посмертной диагностики:
— полные и неполные гельминтологические вскрытия органов и тканей (ПГВ и НПГВ).
Инвазионные болезни могут протекать как в клинически выраженной форме со значительной смертностью, так и в скрытой (латентной) форме.
В зависимости от вида возбудителя инвазионного заболевания различают: протозоозы (вызываемые простейшими), гельминтозы (паразитическими червями – Scolecidae), арахнозы (вызываемые паукообразными, в том числе клещами) и энтомозы (вызываемые насекомыми).
В диагностике инвазионных болезней решающее значение имеют лабораторные исследования, в результате которых устанавливается возбудитель.
Рассмотрим методы прижизненной диагностики гельминтозов. Для этого используют как макро- , так и микроскопические исследования, прежде всего фекалий, мочи, крови,, дермы, содержимого полостей организма и др. Эти методы гельминто-диагностических исследований, направленные на отыскание и изучение самих гельминтов, их фрагментов Илии яиц и личинок наиболее доказательны и широко применяются для диагностики гельминтозов.
Материал для диагностических исследований должен быть свободен от всяких посторонних примесей и загрязнений, фекалии рекомендуется брать из прямой кишки животного , они должны быть свежими, их следует держать на холоде ( не >5 о С), можно также консервировать 5-10 % раствором формалина или карболовой кислоты.
Гельминтоскопия – применяется для обнаружения в фекалиях целых экземпляров гельминтов или их фрагментов, особенно при исследовании на цестодозы кишечника. Этот метод используется также для контроля эффективности проведённой дегельминтизации, для учёта количества изгнанных гельминтов. Для этих исследований необходимо брать всю единовременную порцию фекалий, а с целью учёта эффективности дегельминтизации следует собирать все экскременты, выделенные животным в течение 2-4 суток после обработки. Собранные фекалии предварительно осматривают невооружённым глазом. Затем их помещают в металлический сосуд, разбавляют 5-10 кратным количеством воды, перемешивают и дают некоторое время отстояться, затем верхний слой сливают (до осадка) и снова добавляют воду. Эти манипуляции последовательного промывания и отстаивания проделывают несколько раз. Полученный осадок небольшими порциями исследуют в кюветках (чашках Петри) на белом и чёрном фоне. Всех видимых гельминтов выбирают иглой и исследуют под микроскопом, устанавливая вид.
Гельминтоовоскопия – это методы диагностики гельминтозов в результате обнаружения в материале яиц гельминтов. Для проведения таких исследований применяют следующее оборудование и средства: микроскоп биологический, предметные стёкла, чашки Петри, стакана стеклянные или пластмассовые (диаметром не > 4-5 см), мензурки объёмом 50 мл , фильтрационные ситечки (с капроновой сеткой, чулочной), стеклянные палочки, металлические петли с диаметром кольца 8-10 мм.
Для диагностических исследований используют флотационные растворы. Наилучшей флотационной способностью обладают растворы при температуре 20-22 о С. Плотность раствора уточняем денсиметром. Насыщенный раствор технической селитры или аммония нитрата с плотностью 1,32 (1500 г на 1 литр кипящей воды); натриевой селитры или натрия нитрата с плотностью 1,38 (соотношение соли и горячей воды 1:1); магния сульфата (сернокислая магнезия )с плотностью 1,26-1,28 (920 г на 1 литр горячей воды); натрия тиосульфата или гипосульфита натрия, плотностью 1,38-1,40 ( 1750 г на 1 литр кипящей воды); сульфат цинка плотностью 1,24 ( 400 г на 1 литр воды); поваренная соль, плотностью 1,2 (400 г соли в 1 литре воды нагревают до кипения), применяют в холодном состоянии.
Самый простой метод гельминтоовоскопического исследования фекалий – это метод нативного мазка. Небольшой кусочек фекалий помещают на предметное стекло, добавляют 2-3 капли смеси равных частей глицерина и воды, тщательно смешивают, покрывают покровным стеклом и смотрят под микроскопом. Этот метод ненадёжный, так как при слабой инвазии даёт отрицательный результат.
Метод последовательного промывания (метод осаждения, седиментации) применяют для диагностики трематодозов животных, яйца возбудителей которых имеют большой удельный вес и не улавливаются методом всплывания (флотации). Берут 5 г фекалий, смешивают с10 кратным количеством воды, фильтруют через сито или марлю и фильтрат отстаивают 5 минут. Далее жидкость сливают, а к осадку добавляют чистую воду и снова отстаивают 5 минут. До тех пор пока жидкость не станет прозрачной. Жидкость сливают, а осадок исследуют под микроскопом на наличие трематод.
Для диагностики нематодозов и цестодозов чаще всего используют флотационные методы. Наиболее распространённый и чаще применяемый – метод Фюллеборна. Для этого берут 10-20 г фекалий, помещают его в банку или стакан ёмкостью 100-200 мл, тщательно растирают стеклянной или деревянной палочкой в насыщенном растворе поваренной соли. Общее количество добавляемого раствора должно быть примерно в 20 раз больше количества фекалий. Затем фильтруем и оставляем на 30 минут. С поверхности отстоявшейся жидкости металлической петлёй снимаем плёнку и переносим её на предметное стекло, покрываем покровным стеклом и исследуем под микроскопом. Метод Щербовича используют для обнаружения яиц с более высокой плотностью (например, яйца метастронгилид), для чего используют насыщенный раствор сернокислой магнезии. Пробу фекалий (3-5 г) размешивают в воде до получения равномерной взвеси. Фильтруем через ситечко в центрифужную пробирку и центрифугируем 1-2 минуты. Верхний слой сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор сернокислой магнезии, хорошо размешиваем и снова центрифугируем 1-2 минуты. Затем металлической петлёй снимают верхнюю плёнку, помещают её на предметное стекло, накрывают покровным и исследуем под микроскопом.
Метод Котельникова и Хренова. Пробу фекалий (3 г) кладут в стакан и заливают небольшим количеством насыщенного раствора аммиачной селитры, размешиваем стеклянной (деревянной) палочкой и добавляем раствор до 50 мл. Взвесь фильтруем в другой стакан и оставляем на 10-15 минут. Снимаем петлёй 3-4 капли с поверхности, переносим их на предметное стекло и микроскопируем под малым увеличением микроскопа. Обнаруживаем яйца аскарид, трихоцефал, эзофагостом, стронгилоидесов, метастронгилид, неоаскарид, стронгилят органов пищеварения, мониезий и тизаниезий, параскарид, токсокарисов и др.
Метод Н.В. Демидова для диагностики фасциолёза. Пробу фекалий (3г от овец, 5 г от крупного рогатого скота), помещают в стакан, наливают насыщенный раствор хлористого натрия, тщательно размешиваем стеклянной палочкой, отстаивают 15-20 минут. С поверхности удаляют крупные частицы; жидкость отсасывают спринцовкой, или осторожно сливают, оставляют примерно 20-30 мл, к осадку добавляют воду до полного объёма стакана, тщательно размешивают, фильтруют через сито или 1 слой марли; жидкость снова отсасываем, оставляя 15-20 мл осадка; осадок переливают в маленькие конические стаканы, отстаиваем 3-5 минут, жидкость отсасываем и на предметное стекло переносим осадок, исследуя его под малым увеличением микроскопа.
Метод Дарлинга комбинирует процедуры осаждения и флотации. Фекалий смешивают с водой и центрифугируют 3-5 минут. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку прибавляют жидкость Дарлинга (глицерин с насыщенным раствором хлористого натрия, 1:1), тщательно размешивают и вторично центрифугируют 3-5 минут. Металлической петлёй снимаем плёнку на предметное стекло, накрываем покровным и исследуют.
Есть ещё много модифицированных методов исследования с целью обнаружения яиц гельминтов. Существуют стандартизированные методы Фюллеборна, Щербовича и др. При всех исследованиях берут одинаковую посуду, одно и то же время отстаивают и центрифугируют пробы, пользуются петлями одинакового диаметра и, сравнивая число яиц в поле зрения микроскопа или в одной капле поверхностной плёнки до и после обработки животных, судят об эффективности проведённой дегельминтизации. Наиболее простой и достаточно точной является методика, предложенная М.Ш.Акбаевым с использованием сетки, изготовленной из фотоплёнки после рентгеновских снимков. Кроме того, используются количественные гельминтоовоскопические исследования.
Метод Стола. В 100 мл колбочку наливают вначале 56 мл воды и отмечают снаружи на уровне её мениска. Потом наливают ещё 4 мл воды и делают новую отметку. Воду выливают, а в градуированную колбочку наливают 56 мл 0,1н раствора едкого натра, добавляют столько фекалий, чтобы уровень жидкости достиг отметки 60 мл . (4 см 3 фекалий), всыпают 10-15 бусинок, тщательно взбалтывают. Сразу же после взбалтывания градуированной пипеткой набирают 0,075 мл или 0,1 мл смеси, наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом, подсчитывая число яиц гельминтов. Количество яиц в 1 см 3 (1 г) фекалий, найденное число яиц умножают на 200 (если исследовали 0,075 мл смеси) или на 150 (если 0,1 мл смеси).
Гельминтоларвоскопические исследования применяются для диагностики диктиокаулёза, мюллериоза и др. протостронгилидозов, а также стронгилятозов пищеварительного тракта жвачных и стронгилоидозов разных животных.
Метод Бермана и Орлова.10 г фекалий помещают в воронки аппарата Бермана на металлической сетке или завёрнутые в кусочки марли. Заливают водой комнатной температуры и оставляют на 3-6 часов. За это время личинки выползают из пробы в жидкость и опускаются по трубке на дно пробирки. Жидкость из пробирки сливают и отсасывают. Осадок после встряхивания разливают на предметное стекло и микроскопируют при малом увеличении микроскопа. Личинки нематод подвижны и легко обнаруживаются.
Упрощённая модификация метода Бермана (по Шильникову). В стакан с водой кладут пробы фекалий и завёрнутые в марлевые салфетки. Через 3-6 часов пробы вынимают, жидкость отстаивают 10-15 минут, затем пипеткой отсасывают прозрачный слой воды. Затем каплю осадка пипеткой наносят на предметное стекло для микроскопии.
Метод седиментации с центрифугированием. (экспресс-методика по Котельникову и др.). 3-5 г фекалий кладут в пробирки с водой (20-25 о С) и центрифугируют (1000-1500 оборотов в минуту) 2 минуты. Затем воду сливаем, а осадок, встряхнув, выливают на предметное стекло и исследуют на наличие личинок.
Метод Вайда. На предметное или часовое стекло кладут несколько шариков фекалий от овец, коз и добавляют воды температурой 40 о С. Через 4о минут шарики удаляют и исследуют под микроскопом жидкость, оставшуюся на стекле на наличие личинок нематод. Обнаруженных разными методами личинок необходимо дифференцировать.
Исследование крови по Куликову. Из ярёмной вены набирают 20 мл крови и добавляют 2 мл 3,8 % водного раствора лимонно-кислого натрия и отстаивают в течение 20-25 минут. Образуется 3 слоя: нижний – осевшие эритроциты, средний – лейкоциты и личинки нематод и верхний – сыворотка. Тонкой пипеткой, берут содержимое среднего слоя, наносят его каплями на предметное стекло, накрывают покровным и смотрят под микроскопом.
Исследование крови крупного рогатого скота (по Стюарду). Кожу освобождаем от волос, место дезинфицируем. Пинцетом оттягиваем кожу и кривыми ножницами отрезают поверхностный слой. Помещают на предметное стекло в каплю физраствора и тщательно расщепляют препаровальными иглами. Жидкость исследуют под микроскопом.
Исследование кожи лошадей по Р.С.Чеботарёву. На холке, плече, других местах выбирают участок кожи размером 5 см 2 , дезинфицируем спиртом. Захватываем кожу в складку, отрезаем кусочек толщиной 3-4 мм и площадью 2-3 см 2 . Срезы помещают в пробирке и заливают 2-3 мл физраствора и оставляют на несколько часов в термостате при 36-37 о С или при комнатной температуре. Затем содержимое пробирки выливаем на часовое стекло и исследуют под микроскопом, с целью обнаружения личинок онхоцерков.
Иммунобиологическая диагностика. В практике используют аллергические реакции для диагностики тканевых гельминтозов или, так называемых, ларвальных цестодозов, таких как эхинококкоз, ценуроз, цистицеркозы, а также нематодозов как трихинеллёза. Для этого применяют внутрикожную пробу. В качестве антигена рекомендуют жидкость из личинок (пузырей) или экстракты из трихинелл и их личинок.
В настоящее время большое внимание уделяют разработке и использованию серологических реакций, используя в качестве антигенов живых личинок гельминтов. По этому принципу ставят реакции микропреципитации на живых личинках нематод при нематодозах, на церкариях — при трематодозах, на онкосферах и сколексах — при ларвальных цестодозах. Другой принцип серологических реакций связан с использованием соматических антигенов. Применяют реакции гемагглютинации и флоккуляции (агглютинации) с адсорбированными антигенами. В качестве адсорбентов используют кармин, бентонит и латекссинтетическая смола.
Разновидностью серологических реакций являются: реакция сколексопреципитации (РСкП), разработанная Р.С.Шульц и Р.Г.Исмагиловой для диагностики эхинококкоза овец. Другие реакции: РНГА, РЗГА и др.
Диагностическая дегельминтизация является методом макрогельминтоскопи-ческого исследования. Используют её при подозрении на мониезиоз, тизаниезиоз, авителлиноз жвачных, аноплоцефалидозы лошадей, тениидозы плотоядных, дрепанидотениоз водоплавающих птиц, аскаридоз свиней, аскаридиоз кур и др. небольшой группе животных; наиболее подозрительных в заболевании, вводят соответствующий антгельминтик в лечебной или заниженной дозе. За животными наблюдают и проверяют все выделенные экскременты с целью обнаружения гельминтов или их фрагментов, которые в дальнейшем исследуют.
И, наконец, методы исследования других органов.
Исследование мочи: при диоктофимозе почек, капилляриозе мочевого пузыря. Мочу следует предварительно просмотреть макроскопически или при помощи лупы на наличие гельминтов или их фрагментов. Мочу разбавляют пополам дистиллированной водой и центрифугируют 2-3 минуты, жидкость сливают, а осадок наносят на предметные стёкла и исследуют.
Исследование содержимого трахеи птиц: в ней хорошо видны сингамусы или циатостомы, которые обычно имеют яркокрасный цвет.
Исследование содержимого конъюнктивальных полостей: прижизненная диагностика телязиоза крупного рогатого скота (Th. Rhodesi). Исследователь надавливает пальцем в области внутреннего угла глаза, затем приподнимает пинцетом или векодержателем третье веко. Обнаруживаем живых и подвижных паразитов. Кроме того, можно применить ирригацию глаз крупного рогатого скота из резиновой спринцовки 3-х % раствором борной кислоты. Исследуют вытекающую в кюветку жидкость (телязии).
Исследование камеры глаза. Прижизненная диагностика сетариоза глаз лошадей и крупного рогатого скота — проводят макроскопическим исследованием передней камеры поражённого глаза, где можно видеть свободноплавающих сетарий (5-10 см) и хорошо просвечивает даже через помутневшую роговицу.
Исследование поверхностного соскоба с перианальных складок: палочку или спичку, смоченную 50 % водным раствором глицерина делают соскоб с перианальных складок с внутренней стороны корня хвоста и с области промежности. Соскоб переносят на предметное стекло в 2-3 капли глицерина (1:1 в воде), покрываем покровным стеклом и исследуем под микроскопом на наличие яиц оксиурат.
Методы посмертной диагностики гельминтозов
— патологогистологические исследования. Посмертная диагностика гельминтозов различных стадий их развития в органах и тканях животных. Наиболее совершенная методика гельминтологического вскрытия разработана К.И.Скрябиым. Различают полное и неполное гельминтологическое вскрытие.
Полное гельминтологическое вскрытие – наиболее надёжный метод, позволяющий производить как количественный, так и качественный учёт всех гельминтов, которыми инвазировано животное.
Суть данного метода: после снятия с трупа кожи, тщательно осматривают подкожную клетчатку, затем вскрывают грудную и брюшную полости и извлекают все органы систем: пищеварительную, дыхательную систему, кровеносную, мочеполовую и др.
Органы отделяют и исследуют порознь, при этом используют метод последовательных смывов. Паренхиматозные органы (печень, лёгкие, поджелудочная железа, почки и др.) помещают в отдельную посуду и превращают в фарш, разрывая руками или разрезая на мелкие кусочки ножом или ножницами. Далее этот детрит отмывают водой или физраствором, пользуясь методом последовательных смывов. Полученный осадок изучают небольшими порциями сначала в чёрных, а затем в белых кюветах или в чашках Петри на чёрном и белом фоне. Крупных гельминтов выбирают визуально, а мелких – при помощи ручной лупы с 8-10-кратным увеличением. Собирают гельминтов только кисточкой или препаровальными иглами, но не пинцетом и непальцами.
НПГВ – упрощённое гельминтологическое вскрытие, в процессе которого извлекают из органов и тканей лишь отдельных резко выделяющихся по размерам гельминтов. Его используют также для получения музейного материала.
Гистологические исследования проводят с целью изучения деструктивных изменений при отдельных паразитозах.
Естественно, что это далеко не все методы лабораторной диагностики паразитозов. Самые современные методы основаны на электропроводимости тканей организма и гельминтов; на основе биохимических процессов, происходящих в организме животных профилактики инфекционных, инвазионных и незаразных болезней животных при воздействии тех или иных паразитов и т.д.
Читайте также: