Количество кишечных палочек содержащихся в 1 л воды
Коли-индекс - количество кишечных палочек в 1 л воды.
Установив коли-титр, можно произвести пересчет на коли-индекс. В отличие от других микроорганизмов, кишечная палочка может размножаться при температуре до 45°С, легко сбраживать углеводы с образованием кислоты и газа. Это свойство микроба положено в основу определения коли-титра.
Существует несколько методов определения ОКБ, ТКБ и коли-титра.
Метод мембранных фильтров. Сущность этого метода заключается в концентрировании микробов из определенного объема воды на мембранных фильтрах с последующим выращиванием их на фильтрах на среде Эндо и дифференцированием выросших колоний.
Мембранные фильтры № 3 кипятят в дистиллированной воде, кладут на асбестовый фильтр Зейтца и фильтруют через него определенное соответствующей методикой количество воды (например, питьевой воды - 333 см 3 , воду открытых источников - в нескольких объемах: 100 см 3 , 10 см 3 , 1 см 3 , 0,1 см 3 ). После окончания фильтрации фильтр захватывают стерильным пинцетом и кладут на поверхность среды Эндо в чашках Петри. Инкубируют в термостате 18-24 ч. При обнаружении на фильтре колоний, характерных для кишечных палочек (темно-красных с металлическим блеском или без него), готовят мазки, окрашивают по Граму, ставят оксидазную пробу. Оксидазной пробой дифференцируют кишечную палочку от других грамотрицательных водных сапрофитов, которые в отличие от кишечной палочки обладают ферментом оксидазой (например, Pseudomonas sp.)
Подсчитывают лактозоположительные оксидазоотрицательные колонии грамотрицательных микробов, что характерно для кишечной палочки, и вычисляют коли-индекс.
Пример: профильтровано три объема воды по 100 см 3 . На первом фильтре выросло 3 колонии кишечной палочки, на втором - 5 колоний, на третьем - 4 колонии. Среднее арифметическое (3+5+4) : 3=4 колонии при посеве 100 мл воды, соответственно в 1000 мл - 40 кишечных палочек. Значит коли-индекс равен 40, коли-титр равен 25 (1000 : 40).
Бродильный метод. Сущность этого метода заключается в посеве определенных объемов воды в дифференциально-диагностические среды. При наличии изменений сред, характерных для роста кишечной палочки, пересевают культуру на среду Эндо и проводят ее идентификацию.
В зависимости от водоисточника, проводят посев различных объемов воды. Например, при исследовании воды открытых водоемов – 100 см 3 ,
10 см 3 , 1 см 3 , 0,1 см 3 . Объемы 100 см 3 и 10 см 3 высевают в колбы или флаконы, 1 см 3 и 0,1 см 3 — в пробирки.
Для исследования воды бродильным методом используют дифференциально-диагностические среды Кода (с лактозой и индикатором бромтимоловым синим), Хейфеца (с маннитом, розоловой кислотой и метиленовым синим), Кесслера (с лактозой и генцианом фиолетовым), Булира (с маннитом и нейтральным красным с поплавком). Посевы воды культивируют в термостате при 37°С или при 44°С в течение суток. Из пробирок и флаконов, в которых отмечено помутнение среды, образование кислоты или газа при расщеплении углевода, производят пересев на среду Эндо бактериологической петлей густым штрихом для получения изолированных колоний. При обнаружении темно-красных колоний с металлическим блеском или без него проводят микроскопию с окраской по Граму и дальнейшую идентификацию кишечной палочки по общепринятой методике.
Результат анализа выражают в виде коли-индекса, который определяют по специальным таблицам. Так, например, при отсутствии роста кишечной палочки во всех объемах воды (100 см 3 , 10 см 3 , 1 см 3 , 0,1 см 3 ) коли-индекс будет менее 9, коли-титр — более 111.
По ГОСТу коли-титр водопроводной воды в городах должен быть не менее 300 (коли-индекс не более 3), в многомиллионных городах коли-титр не менее 500 (коли-индекс не более 2). Вода открытых водоемов считается хорошей при коли-титре 100, коли-индексе 10.
В настоящее время наряду с определением коли-титра в воде проводят также определение титра Enterococcus faecalis. Для этого цельную воду и ее разведения в объеме 1 см 3 засевают в одну из жидких элективных сред для энтерококков (щелочно-полимиксиновая энтерококковая среда и др.), а затем проводят идентификацию данных микроорганизмов.
В качестве СПМО воды используют также бактериофаги кишечной палочки – коли-фаги, а также фаги сальмонелл и шигелл. Их обнаруживают там, где есть соответствующие бактерии, к которым эти фаги адаптированы. Фаги выживают во внешней среде более 9 мес. Они ценны как показатель фекального загрязнения, особенно энтеровирусами, так как фаги выделяются из сточных вод с той же частотой, что и энтеровирусы (например, возбудитель гепатита А человека). По устойчивости к хлору фаги сравнимы с энтеровирусами, поэтому их считают одним из показателей качества очистки сточных вод.
Санитарно-бактериологическое исследование воды - Ф. К. Черкес
Исследованию подлежит вода:
1) централизованного водоснабжения;
2) из колодцев различного типа;
3) открытых водоемов (рек, озер, морей);
4) плавательных бассейнов;
Примечание. Пробы хлорированной воды берут во флаконы с дехлоратором (гипосульфитом).
Отбор проб воды. Из открытых водоемов воду берут с помощью специальных бутылей или батометров, снабженных грузилами. Пробу воды рекомендуют брать на глубине 10-15 см от поверхности (так как поверхность подвергается воздействию атмосферных факторов) и на расстоянии 1,5 м от берега (вода у самого берега может быть загрязнена микрофлорой почвы).
Для отбора проб водопроводной воды используют стерильные флаконы вместимостью 500 мл, закрытые ватно-марлевыми пробками и покрытые бумажными колпачками.
Кран предварительно обжигают тампоном, смоченным спиртом, после чего воду спускают в течение 10-15 мин и набирают во флаконы. Заполненные флаконы закрывают стерильными пробками.
Примечание. Исследуют 333 мл воды (табл. 54).
Таблица 54. Эмпирическая таблица ГОСТ 16963-73
В распределительной сети водопровода отбор проб воды осуществляют в зависимости от количества населения, проживающего в зоне обслуживания.
Стандартные методы исследования регламентированы для воды центрального водоснабжения (ГОСТ 18963-73) и предусматривают:
1. Определение общего числа микроорганизмов (в 1 мл исследуемой воды должно быть не более 100).
2. Определение коли-индекса и коли-титра (коли-индекс 3, коли-титр 333 и выше; для Москвы и Ленинграда коли-индекс не более 2, а коли-титр более 500).
3. Исследование по эпидемиологическим показаниям на патогенную микрофлору (патогенных микроорганизмов не должно быть обнаружено).
Согласно ГОСТу 18963-73 общее число бактерий - это то количество микроорганизмов, которое содержится в 1 мл исследуемой воды, способных в течение суток при температуре 37° С образовывать колонии, видимые невооруженным глазом (или при увеличении с помощью лупы).
При исследовании водопроводной воды засевают 2 чашки. В одну из них вносят 1 мл неразведенной воды, в другую 1 мл воды, разведенной в 10 раз (т. е. 0,1 мл исходной пробы).
При исследовании более загрязненной воды засевают 1 мл воды, разведенной в 100 раз. Это соответствует 0,01 и 1 мл .воды, разведенной в 1000 раз (0,001 мл) и т. д. Для получения таких объемов готовят последовательно десятикратные разведения, по 1 мл каждого разведения вносят в чашку и заливают тонким слоем (12-15 мл) растопленного и остуженного до 45° С питательного агара. Для равномерного распределения исследуемой воды залитые агаром чашки перемешивают путем вращения их. После застывания агара посевы ставят в термостат и инкубируют при температуре 37° С 24 ч.
Чашки с посевами вынимают из термостата и подсчитывают число выросших колоний. Учитывают только те чашки, где число колоний находится в пределах 30-300. Если колоний немного, их подсчитывают невооруженным глазом или при помощи лупы.
Если колоний много, то подсчет можно вести с помощью специального прибора для счета микробных колоний (рис. 54).
Рис. 54. Прибор для счета колоний микроорганизмов. 1 - столик для чашки Петри; 2 - игла с пружинным устройством; 3 - показатель счетчика; 4 - тумблер для включения импульсного счетчика; 5 - тумблер для включения лампы освещения счетчика
Подсчитанное количество колоний умножают на разведение и узнают число микробов в 1 мл исследуемой воды.
Наличие БГКП (бактерий группы кишечной палочки) является показателем фекального загрязнения, интенсивность которого характеризуют:
Коли-индекс - количество кишечных палочек, обнаруженных в 1 л воды.
Коли-титр - наименьшее количество воды, в котором обнаруживают присутствие кишечной палочки * .
* ( Коли-титр и коли-индекс - это один показатель, различно выраженный.)
Для выявления в воде БГКП можно пользоваться двумя методами: титрационным (бродильным) и методом мембранных фильтров.
Для исследования воды используют среду накопления глюкозопептонную (ГПС) среду Эйкмана с индикатором и бродильными трубками. Среда готовится концентрированной (в 10 раз) и нормальной концентрации - для посева 1 мл воды.
Исследуемую воду засевают по 100 мл в 3 колбы, по 10 мл в 3 пробирки (с концентрированной средой) и по 1 мл в 3 пробирки (со средой нормальной концентрации) - всего 333 мл. Посевы инкубируют в термостате при 37° С 24 ч.
Вынимают посевы из термостата и просматривают их.
При наличии помутнения в колбах или пробирках из них производят посев петлей на сектора среды Эндо в чашках Петри. Посевы инкубируют в термостате при 37° С.
Вынимают чашки из термостата. Из подозрительных колоний делают мазки. При наличии грамотрицательных палочек ставят пробу на оксидазную активность. Положительная проба на оксидазу дает право дать отрицательный ответ.
Проба на оксидазу. 1-й способ: со среды Эндо снимают петлей 2-3 колонии каждого типа и наносят на поверхность фильтровальной бумаги, смоченной диметилпарафенилендиамином. Положительная реакция характеризуется посинением штрихов, сделанных из колоний.
2-й способ: реактив можно нанести на изолированную колонию на среде Эндо (красная колония - синеет) (рис. 55).
Рис. 55. Определение коли-индекса воды титрационным методом
Отрицательная проба на оксидазу свидетельствует о наличии в воде БГКП. В этом случае вычисляют коли-индекс и коли-титр с помощью стандартных (эмпирических) таблиц ГОСТа 16963-73 (см. табл. 54).
Эти таблицы предусматривают любую возможную комбинацию объемов посева, из которых выделена кишечная палочка.
Для фильтрации воды можно использовать воронку Гольдмана вместимостью 700-800 мл.
В воронку смонтированного и простерилизованного фильтровального прибора Зейтца наливают отмеренный объем исследуемой воды. С помощью насоса создают вакуум в приемном сосуде (обычно воду фильтруют через фильтры № 2 и 3). По окончании фильтрации стерильным или обожженным в огне пинцетом снимают фильтр и накладывают его на среду Эндо в чашке Петри так, чтобы поверхность с осевшими на ней микробами была обращена вверх (на одну чашку можно помещать 3-4 мембранных фильтра).
Посевы инкубируют в термостате при температуре 37° С 18-24 ч.
Чашки с посевами (фильтрами) вынимают из термостата. Отсутствие подозрительных колоний дает право дать отрицательный ответ.
Учету подлежат все красные и розовые колонии с металлическим блеском или без него. Из выросших колоний делают мазки, окрашивают по Граму (рис. 56).
Рис. 56. Определение коли-индекса воды методом мембранных фильтров
При наличии грамотрицательных палочек ставят пробу на оксидазу. Положительная оксидазная проба дает право дать отрицательный ответ. При отрицательной оксидазной пробе производят посев на полужидкую среду с глюкозой и индикатором или на среду ГПС с бродильными трубками - для выявления ферментации углевода до кислоты и газа. При наличии кислоты и газа вычисляют коли-индекс. Например, на всех фильтрах, находящихся на среде Эндо, выросло 3 колонии, пропущено через фильтр было 300 мл воды.
Примечание. Титрационный метод более точный и может быть использован при наличии в воде примесей. Метод мембранных фильтров экономичнее и дает возможность дать ответ на 2-й день.
Для определения наличия в воде свежих фекальных кишечных палочек производят посев воды (3-х объемов) на лактозопептонную среду с борной кислотой. Инкубируют при 43° С 24 ч. Наличие кислоты и газа свидетельствует о свежем фекальном загрязнении.
По эпидемиологическим показаниям в воде определяют сальмонеллы, шигеллы, энтеровирусы.
Примечание. Общепринятым дополнительным показателем фекального загрязнения питьевой воды являются энтерококки. При проведении бактериологического исследования определяют все группы энтерококков, хотя санитарное значение имеют преимущественно фекальные стрептококки, обнаружение которых является показателем свежего фекального загрязнения.
1. Какова основная задача санитарной микробиологии?
2. Что такое санитарно-показательные микроорганизмы?
3. Что такое коли-индекс и коли-титр?
4. Какие Вы знаете методы определения БГКП?
Определите общее число микробов в исследуемой пробе воды. Среда ГПС (Эйкмана).
ГПС (Эйкмана) концентрированная. В 1 л воды растворяют 100 г пептона, 50 г хлорида натрия. Нагревают смесь до кипения, фильтруют, прибавляют 100 г глюкозы, устанавливают рН 7,4-7,6 и разливают по 10 мл в колбы вместимостью 250 мл, по 1 мл в 3 пробирки (концентрированной среды) и по 1 мл в 3 пробирки со средой нормальной концентрации (во всех емкостях среду до нужной концентрации доводят стерильной водой).
Примечание. При исследовании особенно загрязненных вод делают большие разведения (например, 10 -6 , 10 -7 и т. д.).
Наименьшее количество воды, в котором обнаружено присутствие кишечной палочки
Общее количество бактерий в 1 л воды
Бактериологический контроль нестерильных лекарственных средств предполагает возможность присутствия незначительного количества групп микроорганизмов. Каких именно?
Кишечная палочка
При исследовании бактериального загрязнения воздуха учитывают общее количество микроорганизмов в определенном объеме, а также качественный состав микрофлоры. Какие микроорганизмы являются санитарно показательными для воздуха закрытых помещений
Золотистый стафилококк
Для характеристики бактериального загрязнения почвы, источником которого является человек или животные определяют санитарно показательные микроорганизмы. Какой микроорганизм свидетельствует о давнем фекальном загрязнении почвы?
Clostridium perfringens
В соответствии с требованиями ВОЗ и Фармакопеи Украины в ушных каплях количество микроорганизмов в 1 мл препарата не должно превышать:
100000 микробных клеток(бактерий и грибов)
10000 микробных клеток(бактерий и грибов)
1000 микробных клеток(бактерий и грибов)
Микробных клеток(бактерий и грибов)
10 микробных клеток(бактерий и грибов)
Качество лекарственных препаратов оценивают по ряду показателей, включая "микробиологическую чистоту". Укажите лекарственные формы, в которых допускается значительно больше по сравнению с другими формами количество сапрофитных бактерий?
Настои
После дорожно-траспортного происшествия пострадавшему оказали медпомощь и ввели иммунологический препарат для создания пассивного искусственного иммунитета против анаэробной инфекции. Какой это препарат?
Антитоксическая сыворотка
При проверке состояния воздуха в аптечном помещении, где изготовляются инъекционные формы лекарств седиментационным методом выявлено 5 мелких округлых колоний, вокруг которых четко видно зону гемолиза. На какую среду сделан посев?
Среда Эндо
В соответствии к требованиям Фармакопеи лекарственные препараты для местного применения должны подвергаться контролю на "микробиологическую чистоту". Выявление каких микроорганизмов свидетельствует о непригодности этой группы препаратов в медпрактике?
Синегнойная палочка
Результаты микробиологического исследования настоя из листьев мяты перечной свидетельствуют о его несоответствии требованиям Фармакопеи - выявлена патогенная микрофлора. Укажите наличие какой микрофлоры стало причиной этого?
Золотистый стафилококк
Во время сбора лекарственного сырья на плантациях обнаружено большое количество растений с мозаичной окраской листьев. Какой вероятный агент вызвал такое поражение растений?
Фитопатогенные вирусы
Токсические вещества почвы
На фармацевтическое предприятие поступила партия сырья растительного происхождения для приготовления фитопрепарата. Какой микробиологический тест необходимо использовать для оценки качества этого сырья?
Общее количество микроорганизмов в 1 г сырья
После длительного лечения антибиотиками у больной в мазках из вагинального секрета выявлены клетки овальной формы с четко дифференцированным ядром, некоторые клетки почкуются. Какие препараты необходимо применить для лечения в случае подтверждения диагноза кандидоз?
Противогрибковые
Для предупреждения инфекционных заболеваний широко используется вакцинация населения. Какой вид иммунитета обеспечивает введение вакцин?
Искусственный активный иммунитет
Естественный активный иммунитет
Искусственный пассивный иммунитет
Естественный пассивный иммунитет
Патогенным микроорганизмам присуще наличие ферментов агрессии, которые определяют их вирулентность. Выберите среди перечисленных такой фермент:
Гиалуронидаза
Наличие патогенных микроорганизмов в воздухе можно предусмотреть по присутствию санитарно-показательных бактерий. Выберите среди перечисленных бактерии, которые являются показателем непосредственной эпидемиологической опасности:
Вода, предназначенная для питья и приготовления пищи, должна отвечать следующим гигиеническим требованиям :1) обладать хорошими органолептическими свойствами и освежающим действием, быть прозрачной, бесцветной, без неприятного привкуса или запаха. 2) не содержать избытка солей и токсичных веществ, способных оказать вредное воздействие на организм человека;3) не содержать патогенных возбудителей, яиц и личинок гельминтов. Эти требования обозначены в ГОСТ 2874— 82 и СанПин 2.1.4.1074-01.
Физические свойства воды.
Прозрачность воды зависит от наличия в ней взвешенных частиц. Питьевая вода должна быть такой, чтобы через слой ее в 30 см можно было прочесть печатный шрифт определенного размера. Цветность питьевой воды вызвана наличием гуминовых веществ, размножением водорослей в водоеме (цветение), а также загрязнение сточными водами. После очистки воды на водопроводных станциях цветность ее уменьшается. Сравнивают интенсивность цветности питьевой воды с условной шкалой стандартных растворов и результат выражают в градусах цветности. В водопроводной воде цветность не должна превышать 20°. Вкус и запах питьевой воды обусловлены наличием в воде органических веществ растительного происхождения, наличием большого количества растворенных в них минеральных солей и газов, например хлоридов, сероводорода. Определяют характер запаха (ароматический, аптечный и т. д.) или привкуса (горький, соленый и т. д.), а также их интенсивность в баллах: 0 — отсутствие, 1 балл — очень слабый, 2 — слабый, 3 — заметный, 4 — отчетливый, 5 баллов — очень сильный. Допустима интенсивность запаха или привкуса не выше 2 баллов. При обнаружении несвойственных природной воде цвета, вкуса и запаха необходимо выяснить их происхождение. Температура воды из подземных источников 8-12°С, поверхностных источников 0,1-30°С.
Химический состав воды.
Активная реакция воды – показатель щелочности или кислотности, характеризуется концентрацией водородных ионов pH. Питьевая вода - pH 6,5-8,5. pH ˃7 – щелочная, pH =7 –нейтральная, pH ˂7 – кислая. Сухой остаток, остающийся после выпаривания 1 л воды, характеризует степень минерализации воды и для водопроводной воды не должен превышать 1000 мг/л (пресная вода). Железо находится в подземных водах главным образом в виде дигидрокарбоната железа (II) Fе(НСОз)2. При контакте воды с воздухом железо окисляется, образуя гидроксид железа (III) — Fe(OH)3, придающий воде мутность и бурую окраску. При концентрации железа свыше 1—2 мг/л вода, кроме мутности и окраски, приобретает неприятный вяжущий привкус. Содержание железа в водопроводной воде не должно превышать 0,3 мг/л, а марганца – 0,1 мг/л
Жесткость воды (моль/л) - наличие солей кальция и магния . Воду с жесткостью до 1,75 моль/л, считают мягкой, от 1,75 до 3,5 — средней жесткости, от 3,5 до 7 — жесткой, выше 7 моль/л — очень жесткой.. В соответствии с требованиями стандарта жесткость питьевой воды не должна превышать 3,5 моль/л (7 мг-экв/л).Хлориды (хлор-ион). Обычно в проточных водоемах содержание хлоридов невелико (до 20—30 мг/л), но может значительно возрастать в водоемах, не имеющих стока, содержание хлоридов в водопроводной воде не должно превышать 350 мг/л. Сульфаты (сульфат-ион). Сульфаты в количестве, превышающем 500 мг/л, придают воде горько-соленый вкус, неблагоприятно влияют на желудочную секрецию. Фтор способствует развитию и минерализации костей и зубов. При прочих равных условиях заболеваемость населения кариесом зубов снижается с повышением концентрации фтора в воде до 1 мг/л. Однако при содержании в воде больше 1,5 мг/л фтора возникает другое заболевание зубов — флюороз. Фтор в концентрации свыше 5 мг/л вызывает поражение также костей. Оптимальным содержанием фтора в питьевой воде считают 0,7—1,0 мг/л, ПДК — 1,5 мг/л. Присутствие в воде токсичных веществ связано главным образом со сбросом в водоем промышленных сточных вод. В этих случаях ознакомление с технологией производства позволяет решить вопрос, какими исследованиями необходимо дополнить обычный анализ воды. В воду могут попадать также смываемые осадками с сельскохозяйственных полей устойчивые к разложению пестициды. Основной источник появления в воде аммонийного азота и нитритов — это разложение белковых остатков, трупов животных, мочи и фекалий. Концентрация нитритов в 0,002—0,005 мг/л.
Бактериологические показатели качества воды.
Чем меньше загрязнена вода кишечной палочкой, тем меньше она опасна в эпидемиологическом отношении. Кишечная палочка – следствие фекального загрязнении воды. При исследовании воды на наличие бактерий группы кишечных палочек результаты анализа выражают величинами коли-титра и коли-индекса. Коли-титр — это наименьшее количество воды, в котором обнаруживается одна кишечная палочка. Чем ниже коли-титр, тем сильнее фекальное загрязнение воды. Коли-индекс — число кишечных палочек, содержащихся в 1 л воды.
В 1 мл водопроводной воды (микробное число) не должно превышать 100, коли-индекс — 3, а коли-титр должен быть не меньше 300 мл.
Биологические показатели качества воды
Вода - среда для развития многочисленных форм вирусов, бактерий, простейших и сложных организмов. К числу бактериальных и вирусных водных инфекций относятся дизентерия, брюшной тиф, холера, полиомиелит, бруцеллез и др. Питьевая вода не должна содержать живых и мертвых планктонных организмов, продуктов обмена веществ и распада клеток этих организмов. Обеспечение этого условия осложняется при так называемом цветении воды, т. е. массовом развитии планктона.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Информация
Добавить в ЗАКЛАДКИПоделиться: |
кишечная палочкаФаги кишечных палочек как более устойчивые, чем БГК.П, к ряду физико-химических воздействий рассматриваются как показатели энтеровирусного загрязнения водоемов. Наличие фагов кишечных палочек более 1000 БОЕ в 1 л свидетельствует о возможном присутствии в воде источников водоснабжения кишечных вирусов.[ . ] Наличие кишечных палочек само по себе безвредно, но оно ■свидетельствует о загрязнении воды хозяйственно-фекальными стоками и поэтому дает основание предполагать возможность заражения воды болезнетворными бактериями. Объем воды см3), в котором содержится одна кишечная палочка, называемая титром кишечной палочки (коли-титр). Титр кишечной палочки в питьевой воде должен быть не менее 300.[ . ] Преимущество кишечной палочки как показателя фекального загрязнения состоит в полном соответствии основным требованиям, предъявляемым к санитарно-показательному микроорганизму. Кишечная палочка постоянно обитает в кишечнике человека и теплокровных животных, в больших количествах выделяется в окружающую среду; ее выживаемость и устойчивость близка, но несколько превышает таковую патогенных кишечных бактерий. Как правило, кишечные палочки не размножаются до значительных количеств в воде в экспериментальных и натурных условиях. Описаны отдельные случаи размножения кишечных палочек в воде при благоприятной температуре и наличии большого количества легкоусвояемых органических веществ, при изменении естественного биоценоза водоема (в стерильной или обеззараженной воде), в присутствии некоторых химических веществ (например, алкилсульфата). Однако аналогичные условия способствуют более длительному выживанию и увеличению численности патогенных бактерий, в частности, сальмонелл (Е. А. Можаев и др., 1972). При этом кишечная палочка ведет себя так же, как и патогенные энтеробактерии, и сохраняет санитарно-показательное значение.[ . ] Примечание: (+) рост кишечной палочки на среде Эндо, кислоте и газообразование во второй бродильной пробе, (—) отсутствие роста на среде Эндо и отсутствие газообразования во второй бродильной пробе.[ . ] Согласно ГОСТ 2874-73 под кишечной палочкой следует понимать все разновидности граммотрицательных палочек, сбраживающих лактозу с образованием газа при 37°С в течение 27—48 ч или глюкозу при 37°С в течение 27 ч, и негативных по хромоксидазному тесту.[ . ] Наличие в исследуемой воде кишечной палочки и ее разновидностей определяется методом мембранных фильтров - или методом ¿родильных проб, предусмотренных ГОСТом 5216-50-55.[ . ]
В случае более крупных бактерий кишечной палочки сильный эффект стерилизации достигается уже при относительно малых дозах ”0,3 кГр (рис. 3 [7]).[ . ] Коли-индекс показывает количество кишечных палочек (коли) в 1 мл воды. Коли-титр - это наименьшее количество воды, в котором обнаруживается хотя бы одна кишечная палочка. Многолетний опыт показал, что вода безопасна в эпидемическом отношении, если ее коли-индекс не выше 3.[ . ] Мнение бактериологов в отношении преимущества кишечных палочек нашло отражение в официальных нормативных документах, в последних изданиях которых нормируется именно этот показатель. Кишечные палочки являются основным критерием при оценке качества питьевой воды, воды источников водоснабжения, пресной и морской воды плавательных бассейнов, воды в районах морского водопользования, при определении эффективности очистки и обеззараживания сточных вод.[ . ] Изучение соотношения Е. coli и цитратположительных кишечных палочек в водоемах в летний период показало, что Е. coli очень быстро отмирала в сточных водах и при сбросе их в водоем составляла только 30% от числа лактозоположительных штаммов. В реках и особенно в вог дохранилищах Е. coli была редкой находкой. Обнаружение в этих же пробах воды сальмонелл и кишечных вирусов показало, что оценка качества воды водоемов тодько по Е. coli недостаточно надежна как с эпидемиологической точки зрения, так и в отношении фекального загрязнения. Более надежным тестом является учет всей группы кишечных палочек (Т. 3. Артемова и др., 1972).[ . ]
Одной из наиболее изученных бактерий рода Bacterium является кишечная палочка Bacterium coli (в ряде определителей описывается под другим названием — Escherichia coli). Эта палочка всегда содержится в кишечнике людей и животных. Поэтому обнаружение ее в воде и пищевых продуктах свидетельствует об их загрязнении. Некоторые штаммы (разновидности) Bacterium coli вызывают заболевания у людей.[ . ] Токоферол (витамин Е) при добавлении в элективные среды ускоряет рост кишечных, брюшнотифозных и дизентерийных бактерий. По данным Л. С. Корецкой с со-авт. (1960), время развития кишечной палочки на среде Эндо с витамином Е сокращается на треть.[ . ] Присутствие в воде патогенной микрофлоры оцён Р1 вается по наличию бактерий кишечной палочки (коли-J тест). Коли-тест позволяет определить зпидемиологиче-’ скую опасность воды, поскольку наряду с бактериями Coli в ней могут присутствовать возбудители брюшного тифа, паратифа, холеры и др. Наличие бактерий Coli в воде считается показателем фекальных загрязнений.[ . ] Вопрос доброкачественности питьевой воды решают путем определения количества кишечной палочки в 1 л воды. Кишечная палочка — это микроб, постоянно обитающий в кишечнике человека и животных и, следовательно, безвредный. Однако ее присутствие в воде свидетельствует о наличии в ней выделений людей или животных и о возможности загрязнения воды болезнетворными бактериями. Согласно нормам, в 1 л питьевой воды может содержаться не более трех бактерий группы кишечной палочки (БГКП). Это число называется коли-индексом воды; обратная величина, т! е. количество миллилитров воды, в котором находится одна кишечная палочка, называется коли-титром. Питьевая вода, безупречная в бактериальном отношении, должна иметь коли-титр не менее 333.[ . ] Минимальная токсическая концентрация нитрата уранила (на уран) составляла: для кишечной палочки 1,7—2,2 мг/л, для дафний 13 мг/л, для сине-зеленых водорослей — 22 мг/л и для простейших 28 мг/л 2. Для гольяна средняя смертельная концентрация в мягкой воде при длительности опыта 96 ч составляла: сульфата уранила — 2,8 мг/л, нитрата уранила — 3,1 мг/л, ацетата уранила — 3,7. мг/л; минимальная смертельная концентрация (на металл) составляет 11 мг/л при экспозиции 96 ч [8].[ . ] Особо важным показателем санитарного состояния водоема считают концентрацию в воде кишечной палочки (£. Coli), поскольку ее присутствие говорит о загрязненности воды фекальными стоками.[ . ] Таким образом, для очищенных водопроводных вод требуемое нашим стандартом количество кишечных палочек является вполне надежным показателем освобождения питьевой воды от патогенных микробов, и кишечная палочка, с этой точки зрения, может считаться не только косвенным, но и прямым бактериологическим индикатором на загрязнение питьевой воды.[ . ] Обнаружение яиц паразитических червей (гельминтов) человека и животных во внешней среде наряду с кишечной палочкой является прямым показателем ее фекального загрязнения и может служить критерием эффективности проводимых санитарных мероприятий.[ . ] Засеянные чашки помещают в термостат на 16—24 часа при температуре 37°С. При отсутствии роста колоний кишечной палочки дается окончательный отрицательный (—) ответ, и дальнейшее исследование прекращается.[ . ] Основными показателями загрязнения морской воды являются плавающие вещества, содержание бактерий и кишечной палочки; повышение окисляемости и ВПК сказывается в сравнительно небольшой степени, поэтому необходимость механической очистки и обезвреживания сточных вод в аналогичных условиях .можно считать доказанной.[ . ] Бактериологическое исследование сточных вод состоит в определении общего числа бактерий в 1 мл, числа кишечных палочек в 1 л (показателя фекального загрязнения) и характерной микрофлоры.[ . ] Наиболее признанным и распространенным во всем мире санитарно-показательным микроорганизмом является кишечная палочка, открытая в 1885 г. Escherich. Масе (1888) впервые предложил использовать кишечную палочку в качестве показателя фекального загрязнения воды.[ . ] Дополнительные сведения о происхождении загрязнения можно получить путем определения энтерококков и фагов кишечных палочек как более устойчивых к действию обеззараживающих агентов, нежели БГКП.[ . ] Показателями загрязненности воды служат коли-титр и коли-индекс. Наименьший объем воды в миллилитрах, содержащий одну кишечную палочку, называют коли-титром, количество кишечных палочек в 1 л воды — коли-индексом.[ . ] Кол и-т и т р - наименьшее количество грунта, почвы или воды (выраженное, соответственно, в г или мл), в котором обнаруживается кишечная палочка. Чем больше величина коли-титра данного грунта, тем чище грунт в отношении кишечной палочки (Escherichia coli). Его определяют бродильным методом, заключающимся в посеве определенных объемов исследуемого субстрата в среды накопления, которые выдерживают при 37 °С. В качестве сред накопления используют глюкозопептонную или лактозопептонную среду с индикатором. Затем из сред накопления делают высевы на среду Эндо с последующей идентификацией выросших колоний.[ . ] Присутствие в водопроводной воде болезнетворных бактерий является недопустимым. Показателем бактериального загрязнения могут служить кишечные палочки (бактерии коли), которые сравнительно легко обнаружить при анализе и которые попадают в воду тем «ли иным путем из кишечника животных и людей.[ . ] Вторичная бродильная проба позволяет установить, действительно ли выделенный на фуксин-сульфитной среде микроорганизм относится к группе кишечной палочки или он является непоказательным в санитарном отношении (кишечная палочка холоднокровных).[ . ] Токсичен для водных организмов: токсическая концентрация для водорослей сценедесмус 4 мг/л при 24 °С через 4 сут, для дафний—100 мг/л при 23 °С через 2 сут. На кишечную палочку не оказывает действия концентрация 1000 мг/л [2]. Пескари в хорошо аэрированной воде при 15°С, переносят концентрацию 70 мг/л, но погибают при 100 мг/л.[ . ] Нафтеновые кислоты обладают высокими дезинфицирующими свойствами по отношению к холерным вибрионам, стафилококкам, бактериям сибирской язвы, тифа и к кишечной палочке [18].[ . ] Наряду с нормативами, приведенными в табл. 34, Правила предусматривают, что в местах водозаборов плавательных бассейнов с морской водой количество бактерий группы кишечных палочек и энтерококков не должно превышать 100/л и 50/л соответственно. В местах массового купания дополнительным показателем загрязнения является содержание стафилококков в воде. Сигнальное значение для регламентации нагрузки на пляжи имеет количество стафилококков более 100/л. Коли-ин-декс морской воды на границе I и II поясов зоны санитарной охраны не должен превышать 1 млн.[ . ] Процесс синтеза белка является очень сложным многоступенчатым процессом. Совершается он в специальных органеллах — рибосомах. В клетке содержится большое количество рибосом. Например, у кишечной палочки их около 20 000.[ . ] Нитроанилины очень токсичны для людей и теплокровных животных 15. Минимальная средняя токсическая концентрация для рыб 24 мг/л 8, для дафний — 24 мг/л, для водорослей Сценедесмус — 20 мг/л, для кишечной палочки — более 100 мг/л [1].[ . ] Для рыб летальная концентрация хлорида тория—18 мг/л при экспозиции в 1 сут [1]. Нитрат тория оказывает губительное действие на водоросли Сценедесмус в концентрации 0,4—0,8 мг/л через 4 сут при 24 °С, на кишечную палочку — 0,8 мг/л, на простейших Микрорегма — 25 мг/л 1, на рыб — 18 мг/л 3.[ . ] Вызывает гибель гольяна при 200 мг/л через 26 ч, оказывает токсическое действие на рыб при 65,7 мг/л, водоросли сценедесмус погибают при 240 мг/л через 4 сут при 24 °С, дафнии при 88 мг/л через 2 сут при 23 °С, но кишечная палочка выживает при 1000 мг/л [2].[ . ] В чашку со средой Эндо вносят 1 мл воды из каждого разведения и распределяют равномерно шпаделем по поверхности среды. Посевы инкубируют при 43°С в течение 24 часов. Затем учитывают наличие на поверхности среды Эндо типичных для кишечной палочки колоний, без их подсчета. Наличие или отсутствие роста кишечной палочки отмечают в протоколе анализа соответствующим знаком (+ или —).[ . ] Так как в фекалиях человека термофилы присутствуют в очень незначительных количествах, обильное обнаружение их в почве при большом количестве коли-бактерий свидетельствует о загрязнении почвы навозом, а не фекалиями. Напротив, обилие кишечной палочки при малом числе термофилов — показатель фекального загрязнения.[ . ] В отдельных случаях производился высев проб воды на элективные среды: среду Чапека, сроду Красильникова и суо-ло-агар. Для анализа отбирали 1 и 10 мл воды, а в случае определения бактерий на среде Эндо - 333 мл.[ . ] Основными источниками микробиологического загрязнения являются сточные воды предприятий пищевой и кожевенной промышленности, бытовые и промышленные свалки, кладбища, канализационная сеть и др. Загрязняются почвы, горные породы, поверхностная и подземная гидросфера. Патогенные кишечные палочки обнаруживаются в подземных водах на глубине до 300 м от поверхности земли.[ . ] Согласно другому стандарту обязательным при контроле почвы санитарнозащитной зоны предприятия независимо от его профиля является определение pH почвы и содержания в ней канцерогенных и радиоактивных веществ, а из санитарно-бактериологических показателей - определение бактерий группы кишечной палочки и титра Clostridium perfringers. Ряд загрязняющих почву химических веществ подлежит определению только при наличии известного источника загрязнения - это аммонийный и нитратный азот, хлориды, пестициды, тяжелые металлы в валовых и подвижных формах, нефть и нефтепродукты, летучие фенолы, сернистые соединения, детергенты, мышьяк, цианиды, полихлоридные бифенилы.[ . ] Более надежными являются почвенные методы биологической очистки (на полях орошения и полях фильтрации), которые при условии нормальной нагрузки на поля обеспечивают высокий эффект (до 99,9%) бактериальной очистки. Работами С. Н. Черкинского и Л. Б. Доливо-Добровольского доказано, что патогенные бактерии кишечной группы обнаруживаются в очищенной воде даже тогда, когда кишечная палочка отмирает на 99%. Поэтому после механической и искусственной биологической очистки сточные воды до спуска их в водоем, безусловно, необходимо обеззараживать. В случаях почвенной очистки сточных вод на полях-орошения или полях фильтрации дезинфекция, как правило, не требуется.[ . ] При обнаружении в водопроводной воде бактериального загрязнения выше допустимых норм следует производить повторный отбор проб, в которых качественно устанавливают наличие или отсутствие показателей свежего фекального загрязнения. В качестве таких показателей в настоящее время приняты бактерии группы кишечных палочек (преимущественно E. coli), способных образовывать газ на лактозном бульоне с бриллиантовым зеленым при 44,5°С или с борной кислотой при 43°С (ГОСТ 18963-73).[ . ] Эффективность очистки воды была изучена при ее коагулировании и пропускании через контактный осветитель. Воду с исходной мутностью 4,5 мг/л коагулировали АЬОз в концентрации 6,75 мг/л; при мутности воды 35 мг/л доза коагулянта увеличивалась до 12,6 мг/л. При последующем пропускании воды через контактный осветлитель содержание фага в воде снижалось в среднем на 99,7%, содержание кишечной палочки — на 90% (при дозе 6,75 мг/л) и 99% (при дозах 11,6 и 12,6 мг/л) и содержание вируса — на 99%. В воде, взятой сразу у выхода из контактного осветлителя, содержание кишечной палочки снижалось менее значительно, чем содержание вируса полиомиелита. Таким образом, при данном методе обработки степень очистки воды от вируса и кишечной палочки можно считать одинаковой. Уменьшению содержания в воде микроорганизмов во всех случаях сопутствовало снижение мутности и цветности воды.[ . ] Исследование вирусной суспензии. Ни один из обнаруженных вирусов не может быть использован как имитатор всех типов вирусов [13, 14]. Однако бактериофаг E. coli Т объединяет многие типы вирусов, найденные в бытовых сточных водах, и его довольно легко определить (Т — является двадцатигранным фагом размером приблизительно 500—100 нм). Поэтому с ним и проводили эксперименты. Связь вирусов с кишечной палочкой зависит от типа и концентрации катионов в растворе.[ . ] При биологическом окислении идут окислительно-восстановительные реакции, сопровождающиеся отнятием атомов водорода от одних соединений (доноров) и передачей его другим (акцепторам), или реакции, связанные с переносом электронов от донора к акцептору. Эти процессы осуществляются при участии ферментов, относящихся к классу оксиредуктаз. Процессы дыхания, в которых акцептором водорода или электронов является молекулярный кислород, называются аэробными. Если же акцепторами будут другие неорганические или органические соединения, то такой тип дыхания называется анаэробным. По типу дыхания выделяют две группы микроорганизмов: аэробы (оксибиотические формы), которым для дыхания необходим кислород, и анаэробы (аноксибиотические формы), развивающиеся в отсутствие кислорода. Между ними нет резкого различия. Наряду со строгими (облигатными) аэробами и анаэробами есть микроорганизмы, которые могут жить в присутствии кислорода и без него. Это микроаэрофилы, оптимум содержания кислорода в воздухе для которых составляет 0,5—1%, и факультативные анаэробы. Так, кишечная палочка является факультативным анаэробом.[ . ] Читайте также:
|