Методы подсчета яиц гельминтов
Гельминтоовоскопия включает в себя многие методы исследований, используемые для обнаружения яиц гельминтов. Однако не все методы по своей эффективности равнозначны. Известно, что интенсивность выделения яиц гельминтами зависит от многих факторов. В частности, у овцематок весной в период лактации резко повышается выделение яиц кишечных нематод, осенью же с наступлением холодов у диктиокаулюсов наступает половая депрессия.
Фекалии для исследования желательно брать из прямой кишки животного. Если в данный момент в конечном отрезке прямой кишки фекалии отсутствуют, то делают легкий массаж слизистой ануса. Для диагностики трематодозов, аскаридатозов, трихоцефалезов, анаплоцефалятозов пробы можно брать с пола, но при кишечных и легочных нематодозах фекалии нужно брать только из прямой кишки. Кроме того, при кишечных и легочных нематодозах исследования следует проводить в день взятия проб. Если же нет возможности исследовать своевременно, то пробы помещают в холодильник при температуре 3—4 °С (на 12—14 ч).
Метод нативного мазка.Он наиболее прост и легок, но наименее эффективен. Для исследования берут небольшой (с горошину) кусочек фекалий, помещают на предметное стекло, разбавляют 2—3 каплями воды или смеси глицерина с водой (1:1). Затем грубые частицы удаляют, а осадок исследуют под микроскопом. Желательно от одного животного одновременно исследовать 2—3 пробы фекалий. Более успешно метод применяют при кишечных цестодозах и нематодозах.
Метод соскоба с перианальных складок.Применяют для диагностики оксиуроза лошадей и пассалуроза кроликов. Из деревянной палочки или щепочки делают лопаточки (можно и спички), смачивают смесью глицерина с водой (1:1) и делают соскоб с перианальных складок с внутренней стороны хвоста в области промежности. Соскоб переносят на предметное стекло с указанной смесью, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. У кроликов при пассалурозе можно дополнительно исследовать смыв с перианалъных складок.
Метод последовательных смывов.Им можно пользоваться для диагностики многих гельминтозов, но в основном применяют для диагностики трематодозов. На результаты исследований существенно влияют масса пробы и ее состав. Для исследования достаточно брать 3—5 г фекалий. Их смешивают в фарфоровой ступке при помощи пестика с 10-кратным количеством воды и фильтруют через металлическое сито (ячейки диаметром не более 0,19 мм) или марлю в один слой. Пробы отстаивают в среднем 10 мин. Это зависит от состава проб. Например, фекалии крупного рогатого скота в пастбищный период плохо промываются и недостаточно просветляются. Поэтому их нужно отстаивать 12—13 мин. После отстаивания верхний слой жидкости осторожно сливают до появления сплошной грязной полоски, а к осадку добавляют свежую порцию воды и снова дают отстояться 6—8 мин. Процедуру повторяют до тех пор, пока верхний слой жидкости не станет светлее. Жидкость сливают, а осадок (около 5 мл) исследуют под микроскопом. Если фекалии мелкого рогатого скота уже сформировались в катышки или подсохли, то их следует растереть в ступке с небольшим количеством воды и после этого добавить требуемый объем воды
Метод флотации и его модификации.Этот метод основан на принципе разницы удельных масс яиц и используемых солевых растворов. Для вылавливания всплывших яиц используют петлю из мягкой проволоки с диаметром кольца 8—10 мм. При меньшем диаметре затрудняется сбрасывание капли на предметное стекло, при большем — пленка в кольце разрывается. Целесообразно брать с поверхности взвеси от 3 до 6 капель в зависимости от величины покровного стекла. Если же поставлена цель лишь обнаружить яйца, то можно исследовать верхний слой капель (без покровного стекла).
Для флотации яиц предложено большое количество насыщенных растворов солей — хлорид натрия (поваренная соль) плотностью 1,18—1,20 кг/м 3 (400 г на 1 л воды), нитрат аммония (гранулированная или химически чистая аммиачная селитра) плотностью 1,3 кг/м 3 (1500 г на 1 л воды), нитрат свинца (азотнокислый свинец) плотностью 1,5 кг/м 3 (650 г на 1 л воды), нитрат натрия (натриевая селитра) плотностью 1,38—1,4 кг/м 3 (1000 г на 1 л воды), тиосульфат натрия плотностью 1,4 кг/м 3 (1750 г на 1 л воды), хлорид цинка плотностью 1,82 кг/м 3 (2000 г на 1 л горячей воды), сульфат магния (английская соль) плотностью 1,26—1,28 кг/м 3 (920 г на 1 л воды).
Методами флотации пользуются в основном при диагностике цестодозов и нематодозов. Однако при наличии растворов солей с высокой удельной массой можно диагностировать и трематодозы.
Метод Фюллеборна.Для его осуществления нужен насыщенный раствор поваренной соли, который готовят путем кипячения соли в воде до тех пор, пока она не перестанет растворяться. Раствор процеживают через марлю и используют после охлаждения до комнатной температуры. Берут 5—8 г (можно и больше) фекалий, помещают в фарфоровую ступку и заливают небольшим количеством раствора соли. Затем после тщательного растирания фекалий в смесь добавляют 150—200 мл (можно 100—140 мл) раствора и процеживают через сито в сухой и чистый стакан, размешивая стеклянной палочкой. Взвесь отстаивают 10—15 мин, затем с поверхности жидкости с помощью петельки снимают пленку, переносят ее на предметное стекло для микроскопирования.
Некоторые модификации метода Фюллеборна имеют существенные преимущества при диагностических исследованиях отдельных гельминтозов.
Метод Дарлинга.Этот метод сочетает осаждение и флотацию. Сначала проводят обычные исследовательские смывы. Затем осадок 2—3 мин центрифугируют при 3000—4000 об/мин. Верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют смесь равных частей насыщенного раствора поваренной соли и глицерина плотностью 1,205 кг/м 3 . Пробирку энергично встряхивают для тщательного смешивания содержимого и вновь центрифугируют. Проволочной петлей снимают каплю с поверхности жидкости и исследуют под микроскопом. Метод чаще применяют при кишечных нематодозах.
Метод Щербовича.В качестве флотационных жидкостей можно использовать один из трех растворов: сульфат магния, тиосульфат натрия, нитрат натрия.
Фекалии величиной с грецкий орех кладут в стакан, добавляют 40—60 мл воды и размешивают стеклянной палочкой до получения однородной смеси. Если исследуемый объект твердой консистенции, его размешивают в ступке. Затем взвесь процеживают через металлическое сито в чистый стакан. После отстаивания жидкость сливают, а осадок в объеме центрифужной пробирки центрифугируют 2—3 мин при 3000—4000 об/мин. По окончании центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют растворы сульфата магния (для диагностики метастронгилеза свиней), тиосульфата натрия или нитрата натрия (для диагностики макроканторинхоза свиней, спираратозов птиц и полиморфоза уток, тениидо-зов собак). Осадок в пробирке размешивают стеклянной палочкой и опять центрифугируют в течение 1—2 мин при 1000—1500 об/мин. Затем петлей снимают поверхностную пленку, наносят ее на предметное стекло и микроскопируют.
Этот метод эффективен и при аскаридозах животных всех видов, стронгилятозах (желудочно-кишечных), трихоцефалезах, дикроцелиозе и аноплоцефалидозах.
Методы количественных овоскопических исследований.В некоторых случаях требуется определить при жизни животных интенсивность их заражения с помощью различных камер и сеток (Мак-Мастера, Столла, Мак-Майера в модификации Ветцеля, Трача, Акбаева, Мигачевой и др.).
Кроме того, с целью определения эффективности проводимых лечебно-профилактических мероприятий пользуются стандартизированными методами Фюллеборна, Щербовича и др. Для этого унифицируют условия работы: во всех случаях исследований берут одинаковое количество фекалий, идентичную посуду, отстаивают и центрифугируют пробы в течение одного и того же времени, пользуются петлями одинакового диаметра и подсчитывают яйца в одинаковом количестве полей зрения с одинаковым числом капель поверхностной пленки. Желательно проводить не менее чем в шести повторностях все исследования. Мы приводим простые, но достаточно эффективные методы определения количества яиц и личинок.
По методу Столла в 100-миллилитровую колбочку наливают 56 мл воды и на уровне мениска снаружи делают отметку, потом доливают 4 мл воды и опять делают отметку. Затем воду выливают, а в колбу наливают 56 мл 0,1 н. раствора едкого натра и добавляют фекалии так, чтобы уровень жидкости достигал верхней отметки — 60 мл. В колбу помещают 10—15 стеклянных бусинок и все тщательно взбалтывают. Для определения количества яиц в 1 г (1 см 3 ) фекалий сразу же после взбалтывания пипеткой набирают 0,075 мл
или лучше ОД мл смеси, наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом с помощью препаратоводителя. Выявленное количество яиц умножают на 200, если для исследования брали 0,075 мл, или на 150, если использовали 0,1 мл взвеси.
Так как подсчет яиц проводится без использования камеры, то точность определения их количества сомнительна.
Метод Акбаева.Данная методика подсчета яиц и мертвых личинок гельминтов наиболее проста и точна. Для этой цели легко готовят сетку из рентгеновских фотопленок. Для приготовления сетки требуются офицерская линейка, циркуль или швейные иглы и безопасная бритва (лезвие). Сначала пленку отмывают от эмульсии, затем четырехугольник линейки размером 40x17 мм размещают на куске пленки, иглой наносят едва заметные точки на расстоянии 1,6 мм друг от друга, с помощью линейки и лезвия чертят 11 горизонтальных и 26 вертикальных линий, которые иглой по краю сетки нумеруют.
Пленку с сеткой вырезают по размеру предметного стекла и приклеивают канадским (!) бальзамом начерченной сеткой вверх. После высыхания бальзама сетка готова к длительному употреблению.
Для подсчета яиц берут 1—3 г фекалий и проводят исследования по методу последовательных смывов. Затем осадок энергично встряхивают и пипеткой с отпиленным кончиком набирают 0,1 мл взвеси и наносят на сетку. Взвесь накрывают тонким предметным стеклом (толщина 1 мм), укороченным на 1 см. Обнаруженное число яиц и личинок умножают на весь объем осадка в миллилитрах, что составляет количественное выражение изучаемой массы
Сетку с успехом можно применять и для определения количества яиц гельминтов при использовании унифицированных методов флотации. В настоящее время при наличии тонких органических стекол не составляет труда начертить на них сетку, они экономичны и долговечны.
Важно разобраться, какие существуют исследования на гельминтозы у человека. Существует ряд методов, которые позволяют выявить наличие паразитов в организме.
Их два – прямой и косвенный.
Что же делать в такой ситуации ? Для начала советуем почитать эту статью. В данной статье подробно описываются методы борьбы с паразитами. Также рекомендуем обратиться к специалисту. Читать статью >>>
Как диагностировать глистов
- Макроскопический – представляет собой анализ человеческого кала. Иногда количество паразитов настолько велико, что их можно увидеть в фекалиях невооруженным глазом. Как проводится макроскопический анализ? Кал помещают в специальную посуду (неглубокая стеклянная или пластмассовая чашка с крышкой) и просматривают наличие глистов через лупу. Таким образом, можно обнаружить даже самых мелких червей. Обычно этот способ диагностики используется для определения наличия остриц и аскарид.
- Микроскопический – способ для обнаружения яиц и личинок глистов, который проводится при помощи метода Като (просветление толстого мазка глицерином). Этот метод представляет собой взятие толстого мазка и его последующее исследование на специальной мембране. Этот вид исследования не является идеальным, так как может пропустить следы некоторых типов червей. Для лучшей диагностики микроскопический метод совмещают с копроовоскопией (контрастное окрашивание). Количество особей обычно просматривается при совмещении методов Като и Столла (подсчет яиц гельминтов).
- Иммунологические – способы для выявления наличия в плазме крови антител к тому или иному виду гельминтов. к способам относятся: иммуноферментный анализ, метод пассивной гемагглютинации, иммуноэлектрофорез, иммуносорбция. Иммунологические способы диагностики позволяют обнаружить большое количество заболеваний, связанных с паразитами (альвеококкоз, эхинококкоз, аскаридоз, цистицеркоз).
- Биопсия – способ, применяемый для установки точного диагноза по наличию глистов в мышечной ткани человека. Мышцы являются местом паразитирования трихинелл. Для диагностики пациент подвергается процедуре отщипывания небольшого кусочка ткани. Полученный биоптат тщательно изучается под микроскопом.
- Исследование дуоденального содержимого – проводится при подозрениях на наличие гельминтов во внутренних органах (печени, жёлчном пузыре или 12-перстной кишке). На анализ берется смесь желчи, желудочного сока, химус поджелудочной железы и 12-перстной кишки.
- Электропунктурный – относится к аппаратным методам диагностирования заболеваний. Точки акупунктуры подвергаются воздействию тока слабой силы, после чего проводится анализ сопротивления кожи. Электропунктурная диагностика проводится двумя способами — вегетативно-резонансным тестированием и методом Фолля (изучение сопротивления кожи на пальцах рук и ног).
- Инструментальные – методы позволяют выявить, насколько сильно внутренние органы повреждены глистами и продуктами их переработки. В инстуметальные способы диагностики входят УЗИ, рентген, компьютерная томография.
Как только исследования будут проведены и поставлен диагноз по наличию паразитов, необходимо сразу же приступать к лечению.
В каком порядке проводится диагностическое исследование?
- После поступления жалобы от пациента, врач назначает лабораторные или инструментальные способы диагностики для установления предварительного диагноза. Сюда входит общий анализ крови, который позволяет определить, какие изменения в организме произошли при заражении глистами.
- Анализ кала также относится к лабораторным методам. С его помощью выявляется наличие глистов в фекалиях, а также их вид (круглые или плоские).
- Для установления точного количества видов паразитов и устранения каких-либо ошибок в установлении точного диагноза проводится исследования методами Като и Столла (подсвечивание и контрастное окрашивание).
- После взятия крови на анализ назначается иммуноферментное исследование сыворотки. Если будет выявлено наличие антител к какому-либо виду паразитов, то их наличие станет подтвержденным фактом.
Чтобы диагностика стала успешной, пациент подвергается комплексному обследованию, включающему, кроме анализов крови и кала, также все выше перечисленные исследования, которые помогут обнаружить наличие паразитов в мышечных тканях, в печени и желчном пузыре и их разрушающее действие на все внутренние органы посредством УЗИ, рентгена, ФГДС.
Показания к проведению исследования крови на гельминтозы
Анализ крови на гельминты, прежде всего, назначается по симптоматическим жалобам пациента:
- интенсивное опорожнение кишечника (диарея);
- рефлекторный выброс содержимого желудка (рвота);
- снижение массы тела без изменения рациона;
- болезненное пищеварение (диспепсия);
- субфебрильная (37–38°С) и фебрильная (38–39°С) температура тела;
- метеоризм и отрыжка;
- боли в области брюшной полости;
- полифагия (повышенный аппетит);
- аллергические кожные проявления;
- гипоактивность на фоне нестабильного психоэмоционального состояния.
Исследование входит в список анализов, результаты которых необходимо представить при поступлении ребенка в школу и дошкольное воспитательное учреждение. Анализ на глисты в обязательном порядке сдают:
- медицинский персонал;
- воспитатели и нянечки детсадов;
- работники предприятий торговли и общественного питания;
- животноводы.
Проверка на гельминтоз проводится у детей при эпидемических вспышках паразитоза в детских садах, образовательных учреждениях.
Врач может назначить исследование на возможное заражение паразитами по результатам общего клинического анализа (ОКА) крови, в котором показатели эозинофилов и лейкоцитов значительно превышают установленные нормы.
Гельминтоз чаще фиксируется у детей, чем у взрослых, поэтому в профилактических целях рекомендуется исследовать кровь на наличие паразитов у ребенка после летнего отдыха.
Разновидности исследования крови
Для диагностики гельминтоза используются следующие методы лабораторной микроскопии крови:
- ИФА;
- ПЦР;
- РИФ;
- вегетативный резонансный тест (метод Фолля).
Антитела, иначе иммуноглобулины (Ig) представляют собой специфические соединения белков, предназначенных для дифференциации антигена, и его эрадикации (уничтожения).
Антигенами являются чужеродные микроорганизмы, вызывающие заболевания. При внедрении в организм чужеродного агента начинается активное производство иммуноглобулинов.
В случае диагностики протозойной инфекции, антигенами выступают гельминты или одноклеточные паразиты. Иммуноферментный анализ – это двухэтапное исследования поведения антител, относительно антигенов. Первично чужеродный микроорганизм (лабораторный экземпляр) помещается на исследовательскую поверхность, и к нему добавляется биологический материал пациента (кровь).
На данном этапе идентифицируются иммуноглобулины, задействованные в реакции, позволяющие выявить возбудителя инфекции. И также оценивается интенсивность их выработки, и скорость образования иммунных комплексов.
На втором этапе к образованному комплексу присоединяют специальный фермент, и наблюдают за ферментной реакцией изменения окраски.
Реакция оценивается посредством колориметра (анализатора) ИФА, который показывает интенсивность окрашивания. Чем ярче, тем более насыщенная концентрация паразитов фиксируется в организме. В ходе исследования определяются три основных иммуноглобулина (IgA, IgM, IgG), и два дополнительных (IgD и IgE).
Расшифровка анализа на антитела к гельминтам проводится по трем критериям:
По трем основным иммуноглобулинам итоговые показатели ИФА могут иметь следующую интерпретацию:
Антитела | Диагноз | ||
IgM | IgG | IgA | |
— | — | — | отрицательный результат (отсутствие антител) |
— | + | — | наличие иммунитета после перенесенной инфекции |
+ | +/- | +/- | острый паразитоз |
+ | + | + | обострение хронического паразитоза |
— | +/- | +/- | хронический паразитоз в латентной форме |
— | выздоровление |
Иммуноглобулины появляются в крови с разным временным интервалом, относительно времени проникновения паразитов в организм. Первым на протозойную инфекцию реагирует IgM, его присутствие можно обнаружить на седьмой день с момента заражения. Данный вид антител сохраняется в крови около 60 дней.
IgA появляется на 14–28 сутки. После курса противогельминтной терапии сохраняется на протяжении месяца. Повторное выявление IgA указывает на хронический паразитоз. IgG анализ покажет не раньше, чем через месяц с момента инвазии. Антитела сохраняются в организме около шести месяцев.
ИФА обладает высокой точностью диагностики, является доступным и достаточно комфортным для пациента. Микроскопию проводят для выявления одной или нескольких инфекций. К недостаткам исследования можно отнести высокую стоимость комплексного (на все виды паразитов) анализа.
Как правильно сдавать кал на анализ?
Сдача биоматериала на анализ по выявлению яиц паразитических червей должна происходить по строго определенному алгоритму. Если вы не получили соответствующую инструкцию от обследовавшего вас врача, воспользуйтесь следующим планом:
Важно понимать: однократный анализ кала на наличие в нем яиц или взрослых особей червей-гельминтов не может быть стопроцентно точным. Зачастую, не обнаружив видимых следов присутствия паразитов, работники лаборатории, спустя определенный срок (обычно он составляет от одного до 6 рабочих дней), оглашают пациенту ложноотрицательный результат исследования.
Поэтому если состояние больного не улучшается, ему назначают повторные анализы (всего – от 3 до 6 процедур забора биоматериала , по правилам проводящихся не чаще, чем раз в два дня). Если результаты исследования и в этом случае окажутся спорными, врач может направить пациента на соскоб, выявляющий энтеробиоз.
Как подготовиться к соскобу на энтеробиоз?
Для того чтобы результат соскоба был наиболее достоверным, перед процедурой следует некоторое время воздерживаться от подмывания наружной области ануса, а также, по возможности, – от опорожнения кишечника.
Что касается, непосредственно, забора биоматериала , осуществить его можно как в медицинском учреждении с помощью специально обученного персонала, так и дома, самостоятельно.
Остановимся на втором варианте более подробно. Чтобы произвести соскоб на энтеробиоз самостоятельно, воспользуйтесь следующей пошаговой инструкцией:
- Наденьте купленные в аптеке стерильные перчатки и подготовьте емкость для сбора анализа. Обычно это небольшая пробирка с крышкой, продающаяся в комплекте со специально предназначенной для соскобов ватной палочкой, пропитанной физраствором. Последний производители иногда заменяют на глицерин или дистиллированную воду, особенного значения это не имеет.
- Не снимая перчаток, осторожно откройте пробирку, за кончик извлеките из нее ватную палочку и, осторожно раздвинув ягодицы руками, проведите мягким концом инструмента по коже, непосредственно, вокруг самого анального отверстия.
- Поместите стержень обратно в пробирку, стараясь при этом не касаться им стенок контейнера, и плотно завинтите крышку.
- Полученный таким образом соскоб доставьте в лабораторию в максимально кратчайшие сроки (чем меньше времени пройдет с момента сбора биоматериала до его исследования специалистами, тем более достоверным будет итоговый результат анализа на энтеробиоз и, как следствие, – на гельминтов).
Еще один удобный способ взять соскоб в домашних условиях базируется на использовании специального приспособления – предметного стекла, снабженного особой клейкой лентой, которое также можно приобрести в аптеке при медучреждении. Сама процедура при этом проводится следующим образом:
- Руками в стерильных перчатках обследуемый осторожно отклеивает ленту от предметного стекла (в данном случае именно она будет выступать инструментом для сбора биоматериала ).
- Наклейку следует на пару секунд приложить к коже вокруг анального отверстия (для удобства ягодицы в этот момент можно раздвинуть пальцами).
- После забора материала лента приклеивается обратно на стекло и в таком виде относится в лабораторию.
Полезно знать: в отличие от кала, биоматериал , полученный в процессе соскоба противопоказано хранить в холодильнике (заморозка может сильно повлиять на результаты исследования).
Как правило, при ярко выраженных симптомах гельминтоза (резь в животе, тошнота, зуд в области ануса и аллергия) для уточнения диагноза больного отправляют на соскобы несколько раз подряд. Обычно результаты исследований становятся известны пациенту уже на следующий день после забора материала.
Победить паразитов можно!
Антипаразитарный комплекс® - Надежное и безопасное избавление от паразитов за 21 день!
- В состав входят только природные компоненты;
- Не вызывает побочных эффектов;
- Абсолютно безопасен;
- Защищает от паразитов печень, сердце, легкие, желудок, кожу;
- Выводит из организма продукты жизнедеятельности паразитов.
- Эффективно уничтожает большую часть видов гельминтов за 21 день.
Сейчас действует льготная программа на бесплатную упаковку. Читать мнение экспертов.
Список литературы
- Centers for Disease Controland Prevention. Brucellosis. Parasites. Ссылка
- Corbel M. J. Parasitic diseases // World Health Organization. Ссылка
- Young E. J. Best matches for intestinal parasites // Clinical Infectious Diseases. — 1995. Vol. 21. — P. 283-290. Ссылка
- Ющук Н.Д., Венгеров Ю. А. Инфекционные болезни: учебник. — 2-е издание. — М.: Медицина, 2003. — 544 с.
- Распространенность паразитарных болезней среди населения, 2009 / Коколова Л. М., Решетников А. Д., Платонов Т. А., Верховцева Л. А.
- Гельминты домашних плотоядных Воронежской области, 2011 / Никулин П. И., Ромашов Б. В.
Лучшие истории наших читателей
Тема: Во всех бедах виноваты паразиты!
От кого: Людмила С. ([email protected])
Кому: Администрации Noparasites.ru
Не так давно мое состояние здоровья ухудшилось. Начала чувствовать постоянную усталость, появились головные боли, лень и какая-то бесконечная апатия. С ЖКТ тоже появились проблемы: вздутие, понос, боли и неприятный запах изо рта.
Думала, что это из-за тяжелой работы и надеялась, что само все пройдет. Но с каждым днем мне становилось все хуже. Врачи тоже ничего толком сказать не могли. Вроде как все в норме, но я-то чувствую, что мой организм не здоров.
Решила обратиться в частную клинику. Тут мне посоветовали на ряду с общими анализами, сдать анализ на паразитов. Так вот в одном из анализов у меня обнаружили паразитов. По словам врачей – это были глисты, которые есть у 90% людей и заражен практически каждый, в большей или меньшей степени.
Мне назначили курс противопаразитных лекарств. Но результатов мне это не дало. Через неделю мне подруга прислала ссылку на одну статью, где какой-то врач паразитолог делился реальными советами по борьбе с паразитами. Эта статья буквально спасла мою жизнь. Я выполнила все советы, что там были и через пару дней мне стало гораздо лучше!
Улучшилось пищеварение, прошли головные боли и появилась та жизненная энергия, которой мне так не хватало. Для надежности, я еще раз сдала анализы и никаких паразитов не обнаружили!
Кто хочет почистить свой организм от паразитов, причем неважно, какие виды этих тварей в вас живут - прочитайте эту статью, уверена на 100% вам поможет! Перейти к статье>>>
ЦЕЛЬ: Знать особенности жизненных циклов простейших и гельминтов, пути их проникновения в организм человека, место локализации в организме, способы передачи возбудителей. Знать основные диагностические признаки наиболее распространенных возбудителей протозойных болезней и гельминтов – паразитов человека.
Уметь идентифицировать паразитов, вызывающих протозойные болезни и гельминтозы человека. Уметь диагностировать цисты простейших, яйца гельминтов.
МАТЕРИАЛ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ к теме
Паразитарные инвазии во многих странах мира являются причиной высокой заболеваемости и смертности, при этом весьма часто они проявляются неспецифическими симптомами и признаками.
По данным Всемирной организации здравоохранения, основными паразитарными инфекциями на Земле инфицировано почти 4,5 млн человек. Но это только диагностированные случаи, реальная заболеваемость намного выше. Гельминтозы на сегодняшний день остаются наиболее распространенными паразитарными болезнями человека и имеют большое значение, особенно у детей.
Среди всех гельминтных инвазий преобладают аскаридоз, энтеробиоз, лямблиоз, трихинеллез, реже — описторхоз, трихоцефалез, стронгилоидоз, тениаринхоз, тениоз, гименолепидоз, дифиллоботриоз, токсокароз. В последнее время среди гельминтозов большое место занимают так называемые микст-инвазии, диагностика которых особенно трудна.
Большинство паразитарных болезней невозможно диагностировать с помощью одних только физикальных методов исследования, и лабораторные анализы необходимы для того, чтобы решить, имеется ли паразитарная инвазия у больного или нет, и при ее наличии определить, каким видом паразита она вызвана. Лабораторный анализ играет важную роль в постановке диагноза паразитарного заболевания и определяет выбор соответствующего лечебного препарата. Лабораторные анализы могут помочь врачу и принести пользу больному только в том случае, если их результаты будут точными и достоверными.
I. МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ПАРАЗИТАРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ
В лабораторной диагностике используют макроскопические, микроскопические и иммунологические методы исследования.
С помощью макроскопических методов удается обнаружить паразитов на наружных покровах или в фекалиях больного.
Микроскопическими исследованиями выявляют паразитов в мазках крови, тканевой жидкости, кусочках мышц, полученных с помощью биопсии, а также в экскретах (мокроте, фекалиях).
Среди иммунологических методов в диагностике протозойных болезней и гельминтозов чаще всего используют серологические и аллергические реакции.
1. Пробы фекалий
Пробы фекалий исследуют на наличие простейших и яиц или личинок гельминтов.
В фекалиях обнаруживают такие стадии простейших, как трофозоиты и цисты. В фекалиях также обнаруживают такие стадии гельминтов, как яйца и личинки, а иногда удается наблюдать и взрослых гельминтов или фрагменты последних. Взрослые гельминты и членики ленточных гельминтов обычно можно увидеть невооруженным глазом, однако яйца, личинки, трофозоиты и цисты можно увидеть только под микроскопом.
А) Микроскопическое исследование нативных препаратов
Анализ нативных препаратов является наиболее простым и легким методом исследования фекалий. Нативный препарат можно приготовить непосредственно из фекалий или из обогащенных проб.
Определяют яйца и личинки гельминтов. Материал не окрашивают, так как краски могут затруднить их идентификацию.
В нативных препаратах с физиологическим раствором можно увидеть личинки кишечной угрицы. Личинки анкилостомид обычно не встречаются в свежих пробах фекалий, однако при исследовании несвежих проб может возникнуть необходимость в дифференцировании личинок анкилостом и некаторов.
В препаратах с физиологическим раствором можно наблюдать трофозоиты и цисты амеб и жгутиковых. Цисты выглядят как круглые или овальные светопреломляющие образования; трофозоиты амеб могут иметь округлую или неправильную форму; трофозоиты жгутиковых обычно имеют удлиненную (грушевидную) форму. В свежевыделенных фекалиях, исследуемых не позднее чем через 1 ч после дефекации, можно обнаружить подвижные трофозоиты. Тип движения имеет весьма важное значение при видовой идентификации простейших, особенно из класса жгутиковых.
Обычно исследуют материал при большом увеличении - можно хорошо видеть тип движения, включения в виде эритроцитов и дрожжевых грибков в трофозоитах амеб, хроматиновые тельца в цистах амеб, а также детали формы и строения трофозоитов жгутиковых и цист (например, присасывательный диск, спиралевидные щели, либо филаменты).
Б) Дополнительные методы
Наряду с нативными препаратами имеется ряд дополнительных методов диагностики кишечных паразитов. К наиболее распространенным из них относятся методы обогащения для обнаружения яиц, личинок и цист, а также методы постоянного окрашивания препаратов для выявления трофозоитов и цист.
При использовании последних можно обнаружить яйца и личинки гельминтов и цисты простейших, однако нельзя увидеть трофозоиты простейших, поскольку они разрушаются в процессе обогащения. Поэтому исследование нативных препаратов является обязательным начальным этапом микроскопического исследования.
Использование методов обогащения показано в тех случаях, когда исследование нативных препаратов дает отрицательные результаты.
В качестве способа обогащения рекомендуется формалин-эфирный (или формалин-этилацетатный) метод. Посредством последнего можно обнаружить все типы яиц гельминтов (нематод, цестод и трематод), личинки, а также цисты простейших.
2. Перианальный соскоб на энтеробиоз
Анальные тампоны используются для обнаружения остриц, а также яиц тениид. Энтеробиоз встречается чаще у детей, чем у взрослых. Однако чаще всего, если острицы обнаруживаются хотя бы у одного ребенка в семье, все остальные члены семьи также оказываются инвазированными. Поэтому если у ребенка обнаружены острицы, необходимо подвергнуть обследованию всех членов семьи, особенно детей. Яйца остриц обычно находят в кожных складках перианальной области. Они редко встречаются в фекалиях.
Пробы мочи обычно исследуют на наличие возбудителей мочеполового шистосомоза. В них также можно наблюдать трофозоиты возбудителей мочеполового трихомоноза.
Иногда после центрифугирования мочи больных из эндемичных по филяриндозам стран, особенно при хилурии, в осадке можно обнаружить микрофилярий возбудителей вухерериоза и онхоцеркоза.
В эндемичных по шистосомозам странах первым косвенным указанием на наличие инвазии является гематурия и/или протеинурия, выявляемые посредством диагностических полосок. Макрогематурия указывает на интенсивную инвазию.
Для обнаружения яиц шистосом используются два метода — осаждение и фильтрация. Осаждение — менее чувствительный, но более дешевый и простой в выполнении метод. Фильтрация применяется в медицинских учреждениях в тех случаях, когда требуется получить количественную оценку интенсивности инвазии.
4. Выделения из влагалища и мочеиспускательного канала
Влагалищные и уретральные выделения исследуют на наличие Trichomonas vaginalis — жгутикового паразита мочеполовой системы. Он паразитирует как у мужчин, так и у женщин, однако у мужчин инвазия обычно протекает бессимптомно. Возбудителя обычно обнаруживают в нативных препаратах, приготовленных из влагалищных и уретральных выделений. (В окрашенных препаратах эти паразиты сильно деформируются и не всегда могут быть идентифицированы.)
В нативных препаратах жгутиковые могут быть идентифицированы по характеру их движения. Трофозоиты трихомонад передвигаются нервными, дергающими или прыгающими движениями. Поскольку Т. vaginalis является единственным видом трихомонад, обитающих в мочеполовой системе, нет необходимости изучать их морфологические признаки или дифференцировать их от кишечных трихомонад (Т.hominis), паразитирующих в кишечнике. В редких случаях за паразитов могут быть ошибочно приняты имеющие микроворсннки эпителиальные клетки половых путей.
5. Пробы крови и других биологических материалов
Кровь исследуют на наличие нижеперечисленных возбудителей паразитарных болезней:
Наиболее распространенным способом исследования крови является метод окрашенных препаратов крови. Для окрашивания препаратов крови обычно используется краска Гимзы (одна из разновидностей краски Романовского). Для окрашивания микрофилярий применяется гематоксилин Делафильда.
В зависимости от обстоятельств могут использоваться как толстые капли, так и тонкие мазки.
Исследование толстой капли является более чувствительным методом обнаружения паразитов, при этом сокращается также время на проведение исследования. В тонком мазке паразиты подвергаются лишь незначительной деформации, что позволяет установить их видовую принадлежность в тех случаях, когда это не удается сделать в толстой капле, но при этом может потребоваться исследовать намного больше полей зрения для обнаружения паразитов, если численность последних будет низкой. Поэтому при исследовании на малярийные паразиты и трипаносомы необходимо исследовать как толстые капли, так и тонкие мазки крови; при невозможности точной видовой диагностики по толстой капле это позволит установить вид паразита по тонкому мазку.
Для исследования на микрофилярий нужно использовать толстые капли.
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.
Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.
Читайте также: