Лабораторная диагностика бабезиоза животных

Babesia spp. являются интраэритроцитарным протозойным паразитом собак, который вызывают бабезиоз, заболевание, которое проявляется в виде анемии, почечной недостаточности, а иногда и смертью.

Виды Babesia spp., которые являются патогенными для собак, включают следующие патогены:

• Babesia canis canis
• Babesia canis vogeli [3]
• Babesia bovis [4]
• Babesia rossi [5, 6]
• Theileria annae (недавно реклассифицированная)
• Babesia conradae

Клинически значимая тяжелая анемия у собаки, инвазированной простейшим паразитическим микрорганизмом Babesia canis, который относится к Protozoa [1].

Инфекции обычно передаются клещами, такими как Ixodes spp., Dermacentor spp. и Rhipicephalus spp. [7].

После прикрепления зараженного клеща трофозоиты Babesia spp. выделяются в кровь, заражая эритроциты животного. Внутри эритроцитов паразит размножается путем двоичного деления, образуя асексуальную форму шизогонии. Нативные клещи прикрепляются к собаке и заражаются Babesia spp., в процессе когда они пьют кровь [8].

Симптомы бабезиоза у собак

Клинические признаки бабезиоза у собак варьируются, однако лихорадка, бледность слизистых оболочек, депрессия, лимфаденопатия, спленомегалия и общее недомогание являются общими.

Диагноз Babesia spp. инвазии у собак основан на клинических признаках и дополнительных методах тестирования. Анализ крови обычно выявляет нормоцитарную, нормохромную и нерегенеративную анемию, нейтропению, тромбоцитопению, гипоальбуминемию и билирубинурию [9, 10]. У некоторых собак сообщалось о вторичной иммуно-опосредованной тромбоцитопении [11]. Данный процесс можно считать аутоиммунным. Описана аутоиммунная гемолитическая анемия при бабезиозе собак.

Легкая в исполнении микроскопическая визуализация интраэритроцитарных трофозоитов в мазке периферической крови с использованием окрашивания по Гимзе, Романовскому, Филда и модифицированного метода Райта часто помогает подтвердить бабезиоз у больных собак [12]. Отбор крови предпочтительно из капиллярного русла (например, из уха или срезанного когля) дает большую диагностическую точность, чем забор крови из более крупной вены. Важно мазок сделать из первой капли крови. Степень паразитемии очень низкая у B. canis, но может варьироваться от 2 до 6% (или выше) в эритроцитов при поражениях бабезиями вида B. gibsoni [13].

Для окончательной диагностики бабезиоза у собак обычно требуются проведение тесты ELISA или ПЦР-анализы [14].

Терапия собак, больных бабезиозом

Лечение собак при бабезиозе обычно эффективно после одной-двух инъекций имипропионата имидокарба в дозе 5,0-6,6 мг/кг подкожно или внутримышечно с интервалом от 2 до 3 недель. Доступные препараты имидокарба в России - пиростоп и фортекарб.

Альтернативная медикаментозная терапия собак, больных бабезиозом, включает одну внутримышечную инъекцию ацетата дименазола (5 мг/кг), пентимизин-изетионата (16 мг / кг внутримышечно каждые 24 часа всего 2 дозы) или атоваквона (13,3 мг/кг перорально три раза в день в течение 10 дней) и азитромицина (10-12,5 мг/кг перорально каждые 24 часа в течение 10 дней) [15].

При необходимости следует применять вспомогательную терапию, такую как внутривенные жидкости и переливание крови (в тяжелых случаях бабезиоза). Для коррекции аутоиммунных процессов в организме собак используют преднизолон в дозе 2 мг/кг 2 раза в день 3-5 суток.

Искоренение паразита затруднено, и нередки рецидивы заболевания.

До сих пор нет эффективных коммерческих вакцин против бабезиоза собак [16].

Профилактика бабезиоза у собак

Профилактика бабезиоза у собак заключается в сезонном использовании инсектоакарицидов для наружного (стронгхолд, инспектор, адвокат, адвантикс и т. д. 1 раз в 2-3 недели) или внутреннего применения препарата бравекта 1 раз в 3 месяца или нексгард 1 раз в 3 месяца.

Литература

1. Bada-UK
2. Cornell University
3. Wyatt Cleveland, C et al (2007) An Overview of Canine Babesiosis
4. Lemos TD et al (2012) Detection and molecular characterization of piroplasms species from naturally infected dogs in southeast Brazil. Rev Bras Parasitol Vet 21(2):137-142
5. Yisaschar-Mekuzas Y et al (2012) Identification of Babesia species infecting dogs using reverse line blot hybridization for six canine piroplasms, and evaluation of co-infection by other vector-borne pathogens. Vet Parasitol pii:S0304-4017
6. Zahler M, et al (2000) Babesia gibsoni of dogs from North America and Asia belong to different species. Parasitology 120:365-369
7. Ano H, Makimura S, Harasawa R (2001) Detection of Babesia species from infected dog blood by polymerase chain reaction. J Vet Med Sci 63:111-113
8. Birkenheuer AJ, et al (1999) Babesia gibsoni infections in dogs from North Carolina. J Am Anim Hosp Assoc 35:125-128
9. Gardiner CH, Fayer R, Dubey JP (1988) An Atlas of Protozoan Parasites in Animal Tissues. U. S. Department of Agriculture, Agriculture Handbook No. 651, pp 70-71
10. Taboada J (1998) Babesiosis. In: Greene CE (ed), Infectious Diseases of the Dog and Cat. WB Saunders, Philadelphia, PA, pp:473-481
11. Scheepers E et al (2011) Serial haematology results in transfused and non-transfused dogs naturally infected with Babesia rossi. J S Afr Vet Assoc 82(3):136-143
12. Carret C, et al (1999) Babesia canis canis, Babesia canis vogeli, Babesia canis rossi: Differentiation of the three subspecies by a restriction fragment length polymorphism analysis on amplified small subunit ribosomal RNA genes. J Eukaryot Microbiol46:298-303
13. Schetters TP, et al (1998) Parasite localization and dissemination in the Babesia-infected host. Ann Trop Med Parasitol 92:513-519
14. Comazzi S, et al (1999) Diagnosis of canine Babesiosis by Percoll gradient separation of parasitized erythrocytes. J Vet Diagn Invest 11:102-104
15. Di Cicco MF et al (2012) Re-emergence of Babesia conradae and effective treatment of infected dogs with atovaquone and azithromycin. Vet Parasitol 187(1-2):23-27
16. Schetters TP, et al (1997) Vaccination of dogs against Babesia canis infection. Parasitol 73:35-41.

Полезно знать

Клещевые инфекции являются одной из актуальных групп заболеваний в силу высокой активности клещей практически на всей территории Российской Федерации. При этом чаще всего мы думаем о таких распространенных клещевых инфекциях, как клещевой боррелиоз или болезнь Лайма и вирусный клещевой энцефалит. Вместе с тем, при укусах клещей передаются многие бактериальные и паразитологические патогены, способные вызвать заболевания, как у животных, так и у человека. Именно такой инфекцией и являются бабезиоз. Регистрация данного заболевания чаще встречается у животных. У человека же в силу трудностей диагностики диагноз бабезиоза выставляется достаточно редко.

Бабезиоз (бабезиеллез, пироплазмоз) – это зоонозное паразитарное инфекционное заболевание, вызываемое бабезиями, передающимися через укусы клещей, с острым или хроническим течением, способным поражать как животных, так и человека, протекающее как в острой, так и в хронической форме с развитием как легких, так и тяжелых форм болезни.

Географическое распространение заболевания обширно и затрагивает многие уголки планеты. Это Европа (Германия, Франция, Польша и другие), США и другие. В России это южные и юго-западные территории страны, как Европейской ее части, так и Сибири.

Причины возникновения бабезиоза.

Возбудитель бабезиоза – простейшие, относятся к семейству Babesiidae. Выделяют множество видов бабезий. Для животных патогенны B. bigemina, B. bovis (скот), B. odocoilei (олени), B. canis (собаки, кошки), B. microti (чаще мелкий рогатый скот), B. divergens (крупнорогатый скот), B. rodhaini. Для человека же опасны B. microti (распространенность чаще Северная Америка), B. divergens, B. rodhaini (Европейское распространение). Особенность бабезий – это внутриклеточное их паразитирование в эритроцитах, что объясняет особенности и диагностики. Диагностика проводится при микроскопии окрашенного мазка, где бабезии можно идентифицировать по их расположению в эритроцитах периферически или центрально в виде включений грушевидной формы до 5 мкм в диаметре или кольцевидной формы до 3 мкм.

Бабезии, формы паразита

Окончательным хозяином являются животные – собаки, коты, крупный рогатый скот, мелкий рогатый скот, а промежуточным - мыши полевки и другие грызуны. Именно животные переносят болезнь манифестно (с классическими симптомами). Еще один хозяин – человек, который в большинстве случаев переносит болезнь бессимптомно, а тяжелые формы заболевания развиваются у лиц с иммунодефицитами.

Механизм заражения – трансмиссивный (при укусе клеща). Переносчик бабезий – иксодовые клещи семейства Ixodidae, среди которых основное внимание уделяется Ixodes ricinusetperculatus. Попав в организм клещей, бабезии сохраняются в нем пожизненно и могут передаваться потомству. Передача возможна вместе со слюной в период присасывания клеща и питания. Иногда возможно микст-инфицирование при укусе клеща бабезий и боррелий, или эрлихий, или анаплазм.

Возможно заражение бабезиозом парентерально - при гемотрансфузиях зараженной крови от доноров - бессимптомных паразитоносителей. Не исключается и вертикальный путь передачи (внутриутробное заражение плода от инфицированной матери).

Восприимчивость населения невысокая. Чаще страдают лица определенных профессий – пастухи, лесники, охотники, сельскохозяйственные рабочие, туристы. Имеют значение периоды активности клещей и, соответственно, существует сезонность болезни – весна-лето и лето-осень (повышенная активность в мае-июне и в августе-сентябре).

Иммунитет после перенесенного заболевания нестерильный (наряду с антителами возможно бессимптомное носительство) непродолжительный (на 2-3 года).

Путь бабезий в организме при заражении.

Клещи при присасывании к больному животному получают зараженные эритроциты, которые разрушаются и бабезии начинают активно размножаться, трансформируясь от одной стадии в другую. Результатом цикла развития в организме клеща является накопление их в клетках слюнных желез.

После последующего присасывания клеща к окончательному хозяину бабезии проникают в кровь и в эритроциты. В организме зараженного начинают вырабатываться антиэритроцитарные антитела.

Далее под воздействием бабезий и антител эритроциты разрушаются с последующим появлением большого количества токсинов (продуктов жизнедеятельности бабезий) в крови. Выраженность симптомов зависит от степени разрушения эритроцитов и обилия токсинов в крови. Последствиями лизиса эритроцитов являются развитие анемии, недостатка кислорода тканей и органов (гипоксии), различными проявлениями нарушения кровоснабжения в организме. Страдают и основные органы выделения – почки, в которых оседает гемоглобин, разрушенные остатки эритроцитов, что может привести к почечной недостаточности. Выраженный гемолиз приводит к появлению желтухи и токсической энцефалопатии.

Как понять, что животное заражено бабезиозом?

Инкубационный период у животных от 5 до 15 дней в зависимости от заражения разными видами бабезий. У животных появляется интоксикация, повышается температура до 39-40°, животное часто дышит, частое сердцебиение, нарушение стула различной выраженности, снижение удоев, веса, ухудшение органолептических свойств молока у скота (цвет, вкус, запах), выкидыши, почечная недостаточность. Длительность бабезиоза животных от 4 до 8 суток. Летальность животных высокая 40-80%.

Клинические симптомы бабезиоза у человека.

Инкубационный период от 7 до 20 дней, реже до 30 дней.

Выраженность симптомов зависит от типа бабезий.

При заражении B. microti большая часть пациентов переносит болезнь бессимптомно. В некоторых случаях возможны эпизодические подъемы температуры, озноб и потливость, слабость. При обследовании выявляется анемия. Нередко в таких случаях заболевание переходит в хроническую форму с появлением в таких неспецифических жалоб, как слабость, постоянная утомляемость, миалгии различной выраженности, длительные периоды лихорадок различной выраженности. Иногда хронический бабезиоз принимают за психические расстройства (паранойя, неврастения и другие).

Только небольшая часть больных переносят бабезиоз, вызванный B. microti, тяжело. В основном это лица с выраженным угнетением гуморального иммунитета (онкологические заболевания, ВИЧ-инфекция, пациенты со спленэктомией – удалением селезенки, тяжелая сопутствующая патология, послеоперационный период, реципиенты органов и тканей, пациенты отделений гемодиализа и другие). У таких пациентов возможна гипертермия (до 40-41°), тяжелая анемия с появлением эритроцитов в моче и развитием острой почечной недостаточности (анурия – прекращение мочеиспускания). Летальный исход чаще наступает от уремической комы.

При заражении B. divergens и B. rodhaini бабезиоз в большинстве случаев протекает в тяжелой форме. Среди синдромов болезни можно выделить следующие:

- инфекционно-токсический (высокая лихорадка до 40°), выраженные мышечные боли, головные боли, выраженная слабость, артралгии (боль в суставах);

- синдром желтухи (гемолитическая желтуха как результат разрушения эритроцитов) – появление иктеричности (желтизны) склер глаз, лимонного цвета желтизна на коже на фоне общей бледности, холурия (темная моча), темный цвет кала;

- нефротический синдром (появление эритроцитов в моче, гемоглобина в моче), развитие снижения диуреза с возможным развитием анурии (прекращение мочеиспускания или снижение его до минимума), одновременно нарастает абдоминальный и поясничный болевой синдром.

Осложнения тяжелых форм: уремическая кома (результат острой почечной недостаточности), печеночно-почечная недостаточность, полиорганная недостаточность.

Летальность при тяжелой форме бабезиоза высокая (до 60%).

При микст-инфицировании различными видами патогенов (бабезии, боррелии, анаплазмы, эрлихии, вирусы) происходит наслоение симптомов заболеваний и развитие тяжелых форм и затяжного течения болезни, чаще развиваются хронические формы болезни.

Диагностика бабезиоза

Диагноз устанавливается на основании:

1) Эпидемиологических данных (укус клеща, пребывание на эндемичной территории, специфическая профессия пациента; в сложных диагностических случаях не забывать о возможности заражения при гемотрансфузиях, а также вертикальном пути заражения).

2) Клинических данных (развитие характерной симптоматики и осложнений).

3) Лабораторного подтверждения:

- Паразитологические исследования препаратов крови (тонкий мазок, мазок на толстую каплю) с целью микроскопического исследования окрашенных по Романовскому-Гимзематериалов и обнаруженияв эритроцитах периферически или центрально расположенных бабезий в виде включений грушевидной формы до 5 мкм в диаметре или кольцевидной формы до 3 мкм. Цитоплазма паразита голубого цвета, а ядро – красно-бордового цвета.

Метод информативен в разгар болезни и слабо информативен в начале болезни при низкой паразитемии, а также не всегда информативен при хронической форме забоелвания.

Бабезии при микроскопии

- Серологические исследования крови на антитела к бабезиям (метод непрямой иммунофлюоресценции), диагностически значимым тестом является 1:256.

- ПЦР-диагностика с целью выявления ДНК-бабезий;

- Биологический метод или ксенодиагностика (заражение золотистых хомячков без селезенки кровью больного и возможное развитие заболевания через 2-4 недели после заражения).

Дифференциальный диагноз проводится с такими инфекциями, как малярия (иногда бабезиоз протекает под маской устойчивой к препаратам тропической малярии), сепсис, геморрагические лихорадки (в частности геморрагическая лихорадка с почечным синдромом), риккетсиозы, ВИЧ-инфекция и другие.

Лечение бабезиоза человека.

1. Организационно-режимные мероприятия. Тяжелые формы лечатся в условиях стационара, легкие формы могут лечиться амбулаторно.

2. Медикаментозное лечение включает в себя:

- этиотропную терапию, направленную на возбудителя (хорошую эффективность показывают комбинации аторваквона и азитромицина, хинина и клиндамицина), своевременность назначения которой может дать возможность благоприятного прогноза;

- терапия анемии (вплоть до переливания донорской крови);

- терапия неотложных состояний (ОПН, ОПечН)

Лечение животных можно проводить следующими препаратами: беренил, пироплазмил, акаприн, гемоспоридин и другими.

Профилактика бабезиозов

1) Дератизационные мероприятия (уничтожение клещей, борьба с грызунами вблизи жилищ человека).

2) Применение акарицидов человеком.

3) Своевременное обращение за медицинской помощью при укусе клеща и, тем более, при появлении жалоб. Проведение медикаментозных профилактических мероприятий после укуса.

Бабезиоз крупного рогатого скота – остро протекающая трансмиссивная болезнь, сопровождающаяся лихорадкой, анемией, желтушностью слизистых оболочек, гемоглобинурией, нарушением деятельности сердечно-сосудистой и пищеварительных систем а также продуктивности животных.

К бабезиозу наиболее восприимчивы коровы и молодняк от года и старше. Молодняк до года иногда болеет в легкой форме. Для бабезиоза характерно сезонность, заболевание встречается преимущественно летом, иногда осенью.

Этиология. Возбудитель болезни –Babesia bovis. Локализуется в эритроцитах, иногда возбудителя можно найти в лейкоцитах и плазме крови в виде овальных, кольцевидных, амебовидных и грушевидных форм. Иногда лабораторным работникам приходится встречать анаплазмоидные формы в виде круглых точечных включений, имеющих меньшие размеры, встречаются преимущественно в начале болезни. В эритроцитах паразит наиболее часто занимает периферическое положение. Грушевидные формы меньше радиуса эритроцита, располагаются под тупым углом и лежат на периферии эритроцита, как бы оседлав его. Размеры грушевидных форм меньше радиуса эритроцита и составляет (1,5-2,4 х 0,75-1,12 мкм. В одном эритроците находится 1-2, иногда 3-4 возбудителя бабезиоза. Зараженность эритроцитов достигает 40-57% и более. Для бабезиоза характерна способность циркулировать в организме длительное время.

Babesia bovis переносится клещами Ixodes ricinus и Ixodes pesulcatus, как в стадии личинки, нимфы, так и имаго. Клещи чаще всего встречаются в заболоченных, сырых местах с большим количеством мелкого кустарника.

В организме животных паразит сохраняется до 1-3лет, при этом известны случаи его исчезновения из крови через несколько месяцев после переболевания (Л.П.Дьяконов, Н.Е. Косминков, 1999).

Тяжесть бабезиоза у животного зависит от патогенности возбудителя, резистентности организма, количества паразитирующих клещей и других факторов. Во внешней среде бабезии в результате высыхания быстро погибают.

Эпизоотологические данные. Заболевание распространено во многих странах Европы. В России заболевание часто наблюдается у крупного рогатого скота в Карелии, областях северо-западной зоны, средней полосе России, реже – на Северном Кавказе и в Закавказье. К болезни восприимчивы все породы крупного рогатого скота. Наиболее восприимчивы к бабезиозу взрослые животные, телята переболевают сравнительно легко, в то же время у молодняка 1-2летнего возраста бабезиоз протекает тяжело. Заболевание у животных регистрируют в пастбищный период; при зимнее-стойловом содержании бабезиоз встречается очень редко в результате заноса клещей в помещение с сеном или в случае обострения паразитоносительства.

Патогенез. Патологический процесс в организме больных животных развивается по мере размножения попавших в кровь возбудителей и накопления в крови продуктов их жизнедеятельности. Образовавшиеся токсины воздействуют на нервно-рефлекторный механизм, нарушая терморегуляцию, а в дальнейшее и обмен веществ. Во время размножения паразита в организме инвазированного животного происходит массовый распад эритроцитов, в результате чего их количество в крови резко уменьшается, у больного животного развиваются симптомы анемии. При этом в разрушение эритроцитов играют свою роль, как сами паразиты, так и их токсины. В результате массового распада эритроцитов в крови образуется большое количество гемоглобина, часть которого из организма животного выделяется через почки, придавая моче красный цвет (гемоглобинурия). В дальнейшем с усилением интоксикации организма, происходит увеличение порозности кровеносных сосудов, развиваются застойные явления, вследствие чего развивается нарушение кровообращения, газовый и белковый обмен.

Нарушение окислительно- восстановительных процессов у больного животного вызывает развитие аноксемии. В крови увеличивается количество остаточного азота и продуктов распада белка, что приводит к интоксикации животного. Развивающееся нарушение деятельности центральной нервной системы вызывает у больного животного общую депрессию или же симптомы временного возбуждения. У больного животного развивается мышечная дрожь, атония преджелудков и кишечника, иногда наступает парез конечностей.

Клиническая картина. Инкубационный период при заражении животного инвазированными клещами длится 8-14 дней. Болезнь протекает остро и продолжается у животного 4-8дней. Заболевание начинается с резкого повышения температуры тела до 41-42°С и стойко удерживается на этом уровне(лихорадка постоянного типа). Больные животные угнетены, теряют аппетит, отстают от других животных при пастьбе, больше лежат. При клиническом осмотре такого животного ветеринарных специалист отмечает бледность и желтушность видимых слизистых оболочек, иногда на слизистых оболочках находим точечные кровоизлияния. Дыхание учащено до 70-80 дыханий в минуту. Пульс частый, 110 и больше ударов в минуту, сердечный толчок усилен. Больная корова резко снижает удой молока — в первые дни на 40%, а в последующие дни до 80% и более. Молоко от такого животного имеет желтый цвет, горькое на вкус, иногда молоко имеет красноватый цвет, встречаются прожилки крови. У больной коровы на 2-3-й день после подъема температуры ветеринарные специалисты регистрируют гемоглобинурию (моча красная или темно-красная). При отстаивание мочи осадка не образуется; эритроциты в моче отсутствуют. На 5-6-е сутки болезни происходит резкое падение температуры тела до 35-36°С, у животного появляется мышечная дрожь и судороги.

С первых дней заболевания у животного регистрируем нарушение функции желудочно- кишечного тракта. В начале болезни у животного наблюдается понос, который сменяется стойкой атонией преджелудков. Заболевшее животное быстро худеет, больше лежит, с трудом поднимается. Кровь у больного животного становится водянистой, количество эритроцитов в 1мл уменьшаетсяна 50-60%, гемоглобина – до 30 и ниже процентов. Среди эритроцитов наблюдаются анизоциты, пойкилоциты, полихроматофилы, нормобласты и нередко базофильная зернистость. При исследовании лейкоцитов в лейкограмме регистрируем сдвиг влево до миелоцитов и юных нейтрофилов.

Патологоанатомические изменения. Трупы павших животных истощены. Слизистые оболочки глаз, ротовой полости и носа анемичны и желтушны. Подкожная клетчатка отечная, с желтым оттенком. Скелетные мышцы дряблые, имеют вид вареного мяса. Серозные оболочки органов брюшной полости желтушны, местами с кровоизлияниями. Лимфатические узлы сочные, красноватые. Селезенка увеличена в объеме в 1,5-2 раза, края тупые, поверхность гладкая, капсула напряжена, на разрезе пульпа имеет темно-вишневый цвет, легко снимается тупой частью ножа. У отдельных павших животных возможен прижизненный разрыв селезенки. Печень увеличена в объеме, на ощупь дряблая, глинистого цвета, на разрезе сочная. Желчный пузырь увеличен и переполнен густой зеленоватой желчью, зернистой на ощупь. Почки увеличены, капсула с почек снимается легко, под капсулой массовые кровоизлияниями, паренхима дряблая, граница между корковым и мозговым слоями стертая. Мочевой пузырь наполнен красной мочой; на слизистой оболочке могут быть кровоизлияния. Книжка увеличена в объеме, на ощупь плотная, набита кормом. Слизистая оболочка сычуга и кишечника покрыта слизью, иногда с кровоизлияниями. В грудной полости содержится до 4 литров красноватой жидкости. Сердце гипертрофировано, сердечная мышца дряблая, часто имеет вид вареного мяса. На перикарде и эндокарде точечные кровоизлияния. Легкие отечные. Сосуды головного мозга переполнены кровью.

Диагноз на бабезиоз ветеринарные специалисты ставят на основании эпизоотологических данных, сезонности заболевания, клинических признаков болезни, результатов патологоанатомического вскрытия павшего животного, обязательным исследованием мазков крови. Для мазка берут каплю крови из уха животного и окрашивают по Романовскому-Гимза.

Дифференциальный диагноз. Бабезиоз необходимо дифференцировать от сибирской язвы, лептоспироза, анаплазмоза, пироплазмоза, франсаиеллеза и отравления минеральными ядами.

Иммунитет. У переболевших бабезиозом животных создается нестерильный иммунитет (премуниция), напряженность и длительность которого находится в зависимости от вирулентности возбудителя, вызвавшего заболевание, тяжести перенесенного заболевания и состояния организма животного. При легком течении бабезиоза у животного имеет место менее продолжительный и менее напряженный иммунитет (до года). Иммунитет против бабезиоза в организме животного имеется пока в самом организме переболевшего животного находятся в небольшом количестве кровепаразит.

Вакцинация крупного рогатого скота против В.bovis проводится во многих странах мира. Для нее используется кровь от животных- доноров, которые недавно выздоровели от бабезиоза. Каждая доза вакцины содержит около 10млн. паразитов. Вакцину применяют для крупного рогатого скота в возрасте после года, в неблагополучных по бабезиозу местностях.

Лечение. Больных животных оставляют в помещении скотного двора, предоставив им полный покой. До оказания лечебной помощи животных нельзя перегонять на значительные расстояния.

Для химиотерапии заболевшим животным назначают следующие препараты:

• гемоспоридин — подкожно или внутримышечно в дозе 0,0005г/кг массы животного в виде 1-2% водного раствора;
• азидин (беренил) — в дозе 0,0035 г/кг массы в виде 7%-ного раствора внутримышечно или подкожно;
• флавакридина гидрохлорид (трипофлавин) – в дозе 0,003- 0,004 г/кг массы животного в виде 1%-ного раствора;
• диамидин (имидокарб, имидозолин) – в дозе 0,002 г/кг массы в 1-7%-ном растворе внутримышечно или подкожно.

Дополнительно при лечении бабезиоза у животных применяют альбаргин, тиорген, акаприн, наганин, и др. Перед применением специфических лекарственных средств животным вводятся сердечные препараты (кофеин,камфора). Проводится симптоматическое лечение больных животных. Больному животному в рацион кормления вводится луговое сено, мелко измельченные корма, парное или обезжиренное молоко. При атонии преджелудков задают глауберовую соль (250-300г), отвар льняного семени, растительное масло, настойку чемерицы 10мл в 500мл воды внутрь, 40° спирт (водку) 300-500мл. При наличии у больного животного стойкой атонии преджелудков хороший терапевтический эффект можно получить от внутривенного введения 200-300мл 10% гипертонического раствора натрия хлорида. Применяют лекарственные препараты, стимулирующие у больного животного гемопоэз (витамин В12,антианемин, кампалон и другие).

Профилактика и меры борьбы. С целью профилактики бабезиоза владельцам ЛПХ, КФХ и сельхозпредприятий необходимо по возможности выпасать на культурных пастбищах. В регионах, где имеются заклещеванные пастбища, выпасаемых животных необходимо периодически обрабатывать акарицидами. С профилактической целью всем животным один раз в 12дней проводить химиопрофилактику путем введения азидина или гемоспоридина. Лучше данные препараты применять в сочетании с наганином.

по лабораторным исследованиям на

1. Общие положения

1.1. 1.1. Пироплазмидозы (бабезиоз, тейлериоз) - протозойные болезни животных, вызываемые возбудителями отряда piroplasmida. Возбудители пироплазмидозов обладают видовой специфичностью.

Бабебиоз вызывают: у лошадей babesia caballi (piroplasma caballi), b. equi (nuttallia equi); у крупного рогатого скота - В.bovis (fransaiella colchica), b.bigemina (p.bigeminum), b.divergens (b. bovis); у овец и коз - b.ovis, b.motasi (p.ovis); у собак - b.canis (p.canis).

Тейлериоз вызывают: у крупного рогатого скота -theilezia annulata и th.sergenti; у овец и коз - th. ovis.

Заболевания протекают остро, подостро, хронически и сопровождаются лихорадкой, анемией, желтушностыо и кровоизлиянием на слизистых оболочках, гемоглобинурией (при бабезиозе), увеличением лимфатических узлов (при тейлериозе) и заканчиваются нередко гибелью.

1.2.Диагноз на пироплазмидозы ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов микроскопического исследования.

1.3. Лабораторные исследования на пироплазмидоаы включают: микроскопию мазков крови, внутренних органов, головного мозга, пунктатов лимфатических узлов; дифференциацию возбудителей.

2. Отбор и пересылка материала для исследования.

2.1. В лабораторию для исследования направляют: от подозреваемых в заболевании или больных животных - тонкие мазки крови из периферических сосудов уха, хвоста или венчика, на тейлериоз дополнительно - мазки из пунктатов лимфатических узлов; от павших или убитых - часть печени, легких, селезенки, почки, гепатита головного мозга и лимфатические узлы.

2.2. Мазки крови берут в период развития симптомов болезни, при повышенной температуре, до применения специфического лечения.

2.2. Перед отбором материала у животного шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу тщательно протирают в начале ватным тампоном, смоченным в растворе спирта, а затем сухим. Стерильной иглой делают прокол вены ушной раковины или ножницами надрезают край верхушки уха или хвоста. К свободно выступившей капле крови легко прикасаются поверхностью сухого обезжиренного предметного стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают пальцами, левой руки в горизонтальном положении. Шлифованным краем другого предметного или покровного стекла прикасаются к капле крови. Как только кровь равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности стекла справа налево под углом 45°. Ширина мазка должна быть уже предметного стекла. Для каждого НОВОГО мазка берут свежую каплю крови. От каждого животного готовят по 2 мазка.

Готовые мазки крови высушивают на воздухе; подсушивать их над пламенем или на солнце нельзя. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке стерилизатора.

Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкие, равномерные, достаточной длины и заканчиваться за 0,5-1,0 см от края стекла.

2.4.При взятии пунктата из лимфатического узла животное хорошо фиксируют, на месте пункции выстригают шерсть, кожу протирают ватным тампоном, смоченным в растворе спирта или настойке йода. Левой рукой оттягивают лимфатический узел и удерживают большим и указательным пальцами левой руки. Затем вглубь узла вводят стерильную иглу, надевают на нее шприц и поршнем отсасывают лимфу. После шприц отсоединяют, иглу извлекают, а содержимое шприца выдавливают поршнем на

предметное стекло, делая тонкие мазки, которые высушивают на воздухе.

2.5. На высушенных мазках крови и пунктата острым предметом или простым карандашом пишут номер, вид животного и дату приготовления мазка.

2.6. Материал от павших или убитых животных отбирают до наступления трупного окоченения.

2.7. Мазки упаковывают в чистую бумагу, патологический материал - во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора.

3. Микроскопическое исследование

3.1. Из доставленного для исследования патологического материала делают по 2 мазка из каждого объекта.

3.1.1. Мазки из головного мозга готовят путем заключения мелких кусочков между предметными стеклами. После растирания помещенного между ними материала стекла разъединяют в противоположные стороны в горизонтальном направлении, в результате чего получаются два довольно тонких мазка. Мазки высушивают на воздухе.

3.1.2. Из паренхиматозных органов готовят мазки-отпечатки. Для этого вырезанный острым скальпелем кусочек органа захватывают пинцетом и свободной поверхностью кусочка делают на стекле несколько тонких отпечатков, мазки-отпечатки высушивают на воздухе.

3.2. Мазки фиксируют этиловым ректификованным спиртом 96°- ным в течение 20 -25 мин. или смесью этилового спирта и серного эфира в равных количествах - 10-15 мин.

После высушивания мазки окрашивают азур — эозином по Романовскому-Гимзе (краску разводят дистиллированной водой рН 7,0-7,2 - в соотношении 1:10) - 30-45 мин. (в зависимости от качества краски и температуры помещения), промывают дистиллированной водой рН 7,0-7,2 до исчезновения следов краски на фильтровальной бумаге, высушивают и исследуют под иммерсионной системой микроскопа (х90). Качество окраски мазка определяют под микроскопом по окраске лейкоцитов. Если лейкоциты бледно окрасились или не окрасились, исследовать препарат бесполезно, необходимо применить другую серию краски.

3.3. При микроскопии обнаруживают бабезии в эритроцитах, теилерии и Б.екви - еще в клетках лимфоидной ткани в виде различной формы шизонтов. Цитоплазма пироплазмид окрашивается в голубовато-синеватый цвет, глыбки хроматина - в красно-фиолетовый или красный.

4. Дифференциальная диагностика возбудителей и оценка результатов.

4.1. Пироплазмид дифференцируют между собой (по форме, углу соединения парных форм, соотношение их размера и радиуса эритроцита, локализации в эритроците), а также от

анаплазм и эперитрозоон. При определении пользуются следующей таблицей:

В центре эритроцитов

клетках лимфоидной ткани

клетках лимфоидной ткани

тромбоцитов, в плазме крови

4.2. Результат исследования считают положительным при обнаружении в препарате из исходного материале возбудителей пироплазмидозов.

5. Срок микроскопического исследования до 2 дн.

Методические указания по лабораторным исследованиям на пироплазмидозы животных разработаны сотрудниками Всероссийского института экспериментальной ветеринарии и Центральной научно-производственной ветеринарной лаборатории.

к "Методическим указаниям по лабораторным исследованиям на пироплазмидозы животных"

Пироплазмидозы - протозойные болезни животных, вызываемые возбудителями отряда piroplasmida. Пироплазмиды - одноклеточные простейшие организмы со сложной структурой и жизненным циклом. Возбудители паразитируют у позвоночных и клещей; у первых пироплазмиды размножаются в эритроцитах и клетках лимфатической системы (тейлерии, бабезия екви), цикл развития возбудителей в организме клещей-переносчиков полностью не расшифрован.

Характерной особенностью возбудителей пироплазмидозов является их специфичность к определенным вилам хозяев.

Болезнь проявляется там, где имеются зараженные соответствующим видом возбудителя клещи -переносчики, паравитоносители и восприимчивые животные. Сезон заболевания животных совпадает с периодом активной фазы клещей-переносчиков, являющихся одним из главных звеньев в эпизоотической цепи. В естественных условиях пироплазмидозы возникают только в результате паразитирования зараженного соответствующим видом клеща-переносчика. Следовательно взаимный обмен возбудителями между теплокровным хозяином и клещом-переносчиком обусловливает сохранение возбудителей в пироплазмидозных очагах. На территории страны встречаются 6 родов

клещей, которые обитают в определенных микроклиматических условиях.

Возбудитель болезни попадает в организм восприимчивого животного со слюной клеща-переносчика во время питания на животном.

Размножение возбудителей бабезиоза в организме восприимчивого животного происходит в эритроцитах капилляров внутренних органов, затем в эритроцитах кровяного русла. Паразиты питаются за счет эритроцитов путем осмоса. Выделяемые паразитами продукты межуточного обмена вызывают нарушение функции органов кроветворения, нарушается кровообращение, возникает застой в малом кругу кровообращения, появляется одышка, на почве застойных явлений происходит расстройство деятельности внутренних органов, нарушается обмен веществ, возникает порозность стенок сосудов и появляются кровоизлияния на слизистых, серозных оболочках, во внутренних органах; расстройство работы сердца и других органов часто приводит к отеку легких, затем и к гибели животного. При тейлериозе возбудитель, попавший в организм животного размножается вначале в лимфатических узлах, затем в паренхиматозных органах и внедряется в эритроциты.

Первые признаки болезни проявляются через 8-12 дней после нападения зараженных клещей. У животных отмечают высокую температуру, угнетение, потерю аппетита, анемию, нередко желтушность; при бабезиозе - гемоглобинурию, нарушение функции сердца, желудочно-кишечного тракта и других органов вменяется морфологический состав крови. Продолжительность болезни 1-3 недели. Если животные пали, то выздоравливанне проходит медленно. Смертность племенного и привозного

крупного рогатого скота при тейлериозе выше, чем при бабезиозе. Переболевшие животные годами остаются носителями возбудителей и в течение всего этого периода они невосприимчивы к повторному заражению одноименным возбудителем при ежегодном с ним контактировании.

При вскрытия часто обнаруживают желтушность тканей, кровоизлияния на серозных и слизистых оболочках и в мышце сердца. Лимфатические узлы, селезенка увеличены, с кровоизлияниями, печень увеличена, желчный пузырь растянут, мочевой пузырь наполнен мочой красноватого цвета (при бабезиозе), в слизистых оболочках сычуга, иногда кишечника, имеются язвы (при тейлериозе).