Анализатор пцр диагностики туберкулеза genexpert
Экспертная ПЦР-система
Картриджи GeneXpert ® предназначены для использованиях в системах серии GeneXpert ® . Одноразовые тест-системы запатентованы компанией Серheid, США. Процессы подготовки пробы, амплификация и детекция проходят автоматически внутри картриджа. Данная технология полностью исключает контаминацию образцов. В камерах обработки пробы находятся реагенты и фильтры. В них происходят экстракция, очистка и амплификация целевых последовательностей нуклеиновых кислот. Через оптическое окно картриджа происходит мультиплексная детекция ПЦР в реальном времени.
Тесты, зарегистрированные в Росздравнадзоре:
| Каталожный номер | Наименование | Время до результата |
|---|---|---|
| GXMTB/RIF-10 | Тест на наличие Mycobacterium tuberculosis и ее резистентности к рифампицину в образцах мокроты (Xpert® MTB). 10 тестов в упаковке. | 2 часа |
| GXMRSA/SA-SSTI-10 | Тест для быстрого обнаружения метициллин-резистентного Staphylococcus aureus на коже и мягких тканях (Xpert® MRSA/SA SSTI). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXCDIFFICILE-10 | Тест для быстрого определения Clostridium difficile в мазках из кала. (Xpert® C. difficile). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXGBS-100N-10_D | Тест на наличие Стрептококка группы В в мазках (Xpert® GBS). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXBCRABL-100N-10_D | Тест для мониторинга лечения хронической миелогенной лейкемии (Xpert® BCR/ABL). 10 тестов в упаковке. | 2 часа |
| GXEV-100N-10 | Тест для быстрого обнаружения РНК энтеровируса (EV) в образцах спинномозговой жидкости (СМЖ) у пациентов с симптомами менингита (Xpert® EV). 10 тестов в упаковке. | 2,5 часа |
| GXVANA/B-CE-10 | Тест для быстрого выявления ванкомицин-устойчивых энтерококков (vanA/vanB) в образцах ректальных и перианальных мазков (Xpert® VanA/vanB). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXMRSA-100N-10_D | Тест для быстрого обнаружения метициллин-резистентного Staphylococcus aureus в мазках из носа (Xpert® MRSA). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXMRSA/SA-BC-10_D | Тест для быстрой диагностики метициллин-резистентного Staphylococcus aureus и Staphylococcus aureus из положительной гемокультуры (Xpert® MRSA/SA BC). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
| GXMRSA/SA-NASAL-10 | Тест для быстрой диагностики мазка из носоглотки на наличие метициллин-резистентного Staphylococcus aureus и Staphylococcus aureus (Xpert® MRSA/SA mecAnasal). 10 тестов в упаковке. | 1 час |
*На стадии регистрации тест-система (картридж) для количественного определения вируса иммунодефицита человека (HIV) методом ПЦР в реальном времени.
Вы всегда можете заказать необходимые реагенты, указав их каталожные номера или названия, а также свои контактные данные в форме обратной связи.
В 2004 году по инициативе д.м.н., профессора Михаила Александровича Владимирского, заведующего сектором молекулярной диагностики туберкулёза НИИ Фтизиопульмонологии Первого МГМУ им. И.М.Сеченова, мы начали разработки в области ПЦР-диагностики туберкулёза.
Выделение ДНК: использование оригинальных реагентов и магнитных частиц обеспечивает получение максимального количества чистой ДНК и позволяет автоматизировать процесс выделения ДНК.
ПЦР в реальном времени: одновременная детекция нескольких различных участков генома комплекса микобактерий туберкулёза (МБТ) увеличивает информативность и достоверность анализа.
I этап – Пробоподготовка, инактивация
II этап – Выделение ДНК
набор реагентов для выделения ДНК (на магнитных частицах)
набор реагентов для выделения ДНК микобактерий из клинических образцов и культур клеток на автоматизированных станциях TECAN
- Снижение риска контаминации во время выделения ДНК практически до нуля.
- Значительное уменьшение трудоёмкости процесса выделения ДНК.
- Стандартизированное выделение ДНК из клинических образцов.
- Экономическая выгода: низкий расход пластика и реактивов.
набор реагентов для ускоренной пробоподготовки и выделения ДНК микобактерий из образцов мокроты
III этап – ПЦР в реальном времени
Обнаружение и количественное определение комплекса МБТ
Набор реагентов АМПЛИТУБ-РВ — это:
- высокая достоверность анализа благодаря одновременному обнаружению двух специфичных генов M.tuberculosis complex: IS6110 и regX3;
- оценка пригодности образца ДНК для определения антибиотикоустойчивости;
- высокая чувствительность (не более 100 КОЕ/мл мокроты или 1–10 копий фрагментов ДНК в реакции) и 100%‑ая специфичность, подтверждённые на панели QCMD (Quality Control for Molecular Diagnostics) Mtb EQA (UK).
Определение антибиотикоустойчивости МБТ к препаратам I и II ряда
Наборы реагентов АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ, АМПЛИТУБ-FQ-РВ — это:
- диагностика форм туберкулеза с лекарственной устойчивостью, в том числе множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) и широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ);
- быстрая детекция мутаций M.tuberculosis, ассоциирующихся с устойчивостью к антибиотикам первого и второго ряда (рифампицину, изониазиду, этамбутолу, фторхинолонам);
- достоверность результатов, ежегодно подтверждаемая при проведении Федеральной службой внешней оценки качества (ФСВОК) Росздравнадзора испытаний шифрованных тест-культур и образцов.
Наборы АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ и АМПЛИТУБ-FQ-РВ основаны на использовании оригинальной мультиконкурентной аллель-специфичной методики ПЦР в реальном времени, позволяющей выявлять мутации в генах микобактерий туберкулеза, ответственных за устойчивость к конкретным антибиотикам.
Принцип мультиконкурентной аллель-специфичной методики ПЦР в реальном времени
- В формате одной пробирки используются 5’-флуоресцентно-меченые аллель-специфичные праймеры с общим комплементарным им 3’-меченым олигонуклеотидом-гасителем и контрольный флуоресцентный зонд, комплементарный участку ДНК без мутаций.
- При отсутствии мутаций в ДНК нарастание флуоресценции в ходе ПЦР-РВ наблюдается только по флуорофору зонда.
- При наличии мутаций в ДНК нарастание флуоресценции в ходе ПЦР-РВ наблюдается как по флуорофору зонда, так и по флуорофору 5’-флуоресцентно-меченого аллель-специфичного праймера. Данный метод позволяет определить не только точку мутации, но и процент устойчивого мутантного штамма МБТ на фоне дикого.
Интерпретация результатов выявления мутаций на примере
531 кодона rpoB гена M.tuberculosis
Гены, кодоны, замены, используемые в наборах реагентов
АМПЛИТУБ-МЛУ-РВ при определении антибиотикоустойчивости
Использование автоматизированных станций Freedom EVO (TECAN, Швейцария) для молекулярно-генетической диагностики туберкулёза
Трудозатраты — 1 час
Продолжительность выделения ДНК — не более 2 часов
Подготовка к амплификации и ПЦР-РВ — 1,5 часа
ИТОГО: результаты анализа будут готовы через 3,5 часа
Оператор затратит 1 час своего рабочего времени.
Исследование для выявления возбудителя туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микобактерии в образце биоматериала.
Туберкулез, микобактерии туберкулеза, палочка Коха.
Tuberculosis, Tubercle bacillus, Koch's bacillus.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат, венозную кровь, ликвор, мокроту, плевральную жидкость, первую порцию утренней мочи, эякулят.
Общая информация об исследовании
Туберкулез (от лат. tuberculum – "бугорок") – инфекционное заболевание человека и животных, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем. Риск заразиться повышает подавление иммунитета, вызванное ВИЧ/СПИДом, диабетом, заболеванием почек, трансплантацией органов и применением иммуносупрессоров, беременностью, старением. Кроме того, наиболее подвержены ему те, кто контактирует с больными туберкулезом, а также дети до 5 лет после виража туберкулиновой пробы. К наиболее уязвимым группам населения относят бездомных, заключенных, мигрантов из стран с высокой заболеваемостью туберкулезом, наркопотребителей, а также пожилых людей.
Для данного исследования используется тест-система, основанная на выявлении геномной ДНК возбудителя туберкулеза с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). В современной диагностике это один из самых быстрых, универсальных и высокочувствительных методов.
Стандартные способы обнаружения микобактерий туберкулеза базируются на выращивании патогенных микроорганизмов в питательной среде. Сложности связаны с низкой скоростью роста колоний Mycobacterium tuberculosis – необходимо ожидать до 1,5 месяцев после взятия материала.
Высокой чувствительностью и специфичностью обладают молекулярно-биологические методы, основанные на детекции генетического материала микобактерий туберкулеза. Их важнейшим преимуществом является высокая скорость получения результата. Использование ПЦР реал-тайм позволяет выявить возбудитель туберкулеза уже в день получения клинического образца.
Бактериемия (попадание в кровь пациента микобактерий) может возникать на ранних стадиях туберкулезной инфекции, а также при развитии генерализованного или внелегочного туберкулеза. Она опасна тем, что иммунный ответ на бактерии вызовет сепсис и септический шок, чреватый смертью. Риск развития генерализованного туберкулеза наиболее высок у пациентов с ВИЧ на поздних стадиях, у тех, кто прервал противотуберкулезную терапию, а также у не обратившихся вовремя за медицинской помощью при появлении симптомов туберкулеза.
Диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных затруднена из-за иммуносупрессированного состояния организма, что зачастую проявляется в ложноотрицательных результатах туберкулиновых реакций и микробиологических тестов. В связи с этим тестирование на Mycobacterium tuberculosis методом ПЦР реал-тайм имеет большое значение.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики туберкулеза легких (в частности, его генерализованных и внелегочных, связанных с бактериемией, форм), и контроля за его лечением.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на внелегочный туберкулез.
- При симптомах бактериемии на фоне туберкулезной инфекции: повышенной температуре тела, потливости и пр. (при небольшом количестве бактерий в крови бактериемия может протекать бессимптомно).
- Если у пациента был длительный контакт с больным туберкулезом.
- При ненормальной реакции на туберкулиновую пробу у детей.
- Когда у пациента ВИЧ-инфекция.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
- Наличие возбудителя в исследуемом биоматериале. Это обычно встречается при активной форме туберкулеза, требующей лечения. Выявление большого количества микобактерий чаще всего указывает на внелегочную форму туберкулеза либо генерализацию инфекции.
- Возбудителя туберкулеза не выявлено. Бактериемия отсутствует.
Что может влиять на результат?
Эффективная противотуберкулезная терапия со временем приводит к исчезновению микобактерий в клиническом материале.
- Для назначения корректной схемы лечения при выявлении у пациента туберкулеза необходимо провести тест на чувствительность микобактерий к противотуберкулезным препаратам.
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, фтизиатр, уролог, гинеколог, инфекционист.
Система GeneXpert® предназначена для проведения диагностики in vitro и включает автоматизированную подготовку образцов, амплификацию нуклеиновых кислот и определение искомой последовательности в простых или комплексных образцах с использованием методов ПЦР в реальном времени. Для работы системы используются одноразовые картриджи, содержащие все необходимые реагенты для проведения ПЦР. Результаты тестов предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах.
| Страна: | США |
| Кол-во картриджей: | 2 ед. |
Система GeneXpert Dx предназначена для проведения диагностики in vitro и включает автоматизированную подготовку образцов, амплификацию нуклеиновых кислот и определение интересующей последовательности в простых или комплексных образцах с использованием методов ПЦР в реальном времени и ПЦР с обратной транскриптазой.
Система состоит из диагностического устройства, персонального компьютера, сканера штриховых кодов и программного обеспечения для проведения тестов и просмотра их результатов.
Для работы системы используются одноразовые картриджи, содержащие реагенты для ПЦР, в которых и происходит реакция. Поскольку картриджи являются автономными, перекрестная контаминация образцов исключена. Результаты тестов предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах.
Прибор GeneXpert Dx оснащен независимыми амплификационными модулями, предназначенными для загрузки различных диагностических картриджей GeneXpert. После загрузки картриджа, прибор автоматически производит подготовку образца, амплификацию, обнаружение искомой последовательности нуклеиновой кислоты и предоставление результата.
Прибор GeneXpert Dx может содержать от 1 до 16 модулей, каждый модуль может обрабатывать одновременно одни образец. До 4 приборов могут объединяться вместе, и подключаться к одному компьютеру в единую диагностическую систему. Так как GeneXpert Dx - система с произвольным доступом, можно использовать модули независимо друг от друга, обрабатывать разные образцы и производить разные типы анализов на одном приборе. Поддерживается одновременная обработка до 16 образцов в каждом приборе.
Основные преимущества системы GeneXpert®:
- простота и удобство в работе
- высокая скорость получения результатов
- автоматизированная подготовка образцов
- высокая точность получаемых результатов
- исключена контаминация на любой стадии работы прибора
- система с произвольным доступом - возможность постановки теста в любое время
Типы используемых картриджей (заказываются отдельно)
- Xpert BCR-ABL, картридж для обнаружения хронической миелогенной лейкемии (CML).
- Xpert MRSA, картридж для быстрого обнаружения устойчивых к метициллину штаммов Staphylococcus aureus (MRSA) в мазках из носа пациентов, находящихся в группе риска назальной колонизации.
- Xpert GBS, картридж для обнаружения ДНК стрептококка группы B (GBS) в образцах вагинальных/ректальных мазков. Тест Xpert GBS предназначен для быстрой идентификации пренатальной и интранатальной инфекции GBS.
- Xpert EV, картридж для обнаружения РНК энтеровируса (EV) в образцах спинномозговой жидкости (СМЖ) у пациентов с симптомами менингита. Этот тест в сочетании с другими лабораторными результатами и клиническими данными может быть использован в качестве вспомогательного средства при лабораторной диагностике энтеровирусной инфекции у пациентов с подозрением на менингит или менингоэнцефалит.
- Xpert™ vanA/vanB, картридж для быстрого выявления генов ванкомицин-резистетности (vanA/vanB) в образцах ректальных и перианальных мазков у пациентов с риском колонизации кишечника ванкомицин-устойчивыми штаммами бактерий.
- Xpert MTB, картридж для выявления ДНК Mycobacterium tuberculosis и его резистентности к рифампицину в образцах мокроты.
Диагностика туберкулеза. Методы диагностика активного туберкулеза у взрослых и детей. Дагностика латентного туберкулеза.
Диагностика туберкулеза (ТБ) - это оценка результатов обследования в отношении здоровья (например, активное заболевание ТБ или скрытая туберкулезная инфекция) с использованием метода или инструмента для измерения, идентификации или анализа состояния организма.
В диагностике in vitro используются образцы, взятые из организма человека. Большинство случаев диагностики ТБ являются in vitro. Диагностика in vivo проводится на организме - туберкулиновый тест кожи, используемый для диагностики латентной ТБ-инфекции, - это диагностика in vivo.
- выявления скрытой туберкулезной инфекции
- поиска активного заболевания ТБ
- получения информации о резистентности к лекарственным средствам (какие препараты лучше всего подходят для лечения).
Туберкулезный диагностический словарь
Чувствительность: отражает долю людей с заболеванием, которые правильно идентифицированы диагностическим инструментом как как больные.
Специфичность: отражает долю людей без заболевания, которые правильно идентифицированы диагностическим инструментом как не имеющие этого заболевания.
Ложно положительный: тест, результаты которого неправильно отражают наличие заболевания (туберкулез, туберкулезная инфекция, лекарственная устойчивость), когда они не больны. Ложно положительный результат теста показывает, что он имеет низкую специфичность.
Ложно отрицательный: тест, который неправильно показывает отсутствие заболевания (туберкулез, туберкулез, лекарственная устойчивость), когда оно имеется. Этот тест имеет низкую чувствительность.
Среда: вещества (твердые или жидкие), содержащие питательные вещества, которые позволяют выращивать бактерии ТБ в лабораторных условиях.
Культура: процесс выращивания бактерий туберкулеза на веществе, обеспечивающем питательными веществами рост бактерий туберкулеза. Испытание на чувствительность к лекарственным средствам (ИЧЛ): тест на выявление резистентности к лекарственным средствам, т. е. тест на то, чтобы увидеть, какие препараты будут лучше работать против определенного штамма туберкулеза
Золотой стандарт: лучший способ сделать что-то.
Диагностика активного туберкулеза
Скрининг используется для выявления возможных случаев ТБ среди уязвимых групп населения с высоким риском заражения болезнью. Инструменты скрининга обычно не очень специфичны, но они чувствительны. Это означает, что ложно положительные результаты встречаются часто, но ложно отрицательные - редко. Скрининг используется для исключения активных случаев туберкулеза или необходимости микробиологического тестирования.
Основными инструментами для скрининга туберкулеза являются
- симптоматический скрининг и
- рентгенография грудной клетки.
Симптоматический скрининг может проводиться в группах с высоким риском заражения туберкулезом
Высокий риск ТБ:
- Люди с тесным контактом с больным туберкулезом
- Люди с ВИЧ
- Рабочие, подвергающиеся воздействию кристаллической кремнеземной пыли
- Кашель
- Хемоптизм (кашель с кровью )
- Лихорадка
- Ночные поты
- Потеря веса
Преимущества
Недостатки
- Помогает всем людям обращаться за медицинской помощью
- Позволяет запустить недорогой диагностический процесс
- Неконкретный (нет окончательного ответа)
- Проявляются, когда болезнь уже прогрессирует
- Не полезен для внелегочного туберкулеза (ТБ вне легких)
- Потенциально увеличивается количество ложных результатов
Рентгенография грудной клетки - еще один вариант скрининга, ее можно 
использовать вместе с симпоматическим скринингом, чтобы лучше определить, дальнейшее диагностическое тестирование (рис.)
Преимущества
- Быстрый
- Высокая чувствительность
- Недорогой
- Широко используемый
Недостатки
- Низкая специфичность
- Требуется дополнительное тестирование
- Нельзя использовать для внелегочного туберкулеза
- Активный туберкулез не всегда выглядит одинаково (особенно у людей с ВИЧ)
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Микробиологическое подтверждение - диагностика ТБ путем выявления наличия M. tuberculosis (MTB), бактерии, вызывающей туберкулез. Микробиологическое подтверждение является предпочтительным способом диагностики активного туберкулеза. Существует три типа микробиологических тестов на ТБ:
1) Поиск возбудителя
- Микроскопия мазка мокроты
2) Амплификация возбудителя (умножение генетической информации MTB)
- Тест амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT)
- Xpert MTB / RIF ULTRA
- Линейные зондовые анализы
- Твердая культура
- Жидкая культура (MGIT, MODS, BacT / ALERT 3D)
- Процедура
- Собирают мокроту
- Из небольшого объема мокроты делают мазок на стекле
- Окрашивают красителем для кислотоустойчивых бактерий (Циль-Нильсен)- Заливают мазок метиленовым синим контраст
- Обесцвечивают кислотно-спиртовым раствором
- Исследуют весь мазок под 40-кратным увеличением
- Подтверждают наличие или отсутствие MTB
Преимущества:
- Результаты в тот же день
- Низкотехнологичный
- Недорогой
- Широко доступный
- Может использоваться для мониторинга лечения
Рис 2 - Микроскопия мазка мокроты при ТБ 
Недостатки
- Низкая чувствительность (50%) среди всех случаев
- Полезен толь для туберкулеза в легких
- Неточен у детей, людей с ВИЧ
- Не дает информации о восприимчивости к препарату
- Многоступенчатая, сложная процедура
- Не удается отличить МТБ от других родственных бактерий (не туберкулезные микобактерии)
ВОЗ рекомендует следующие стратегии для улучшения микроскопии:
- Использовать флуоресцентное окрашивание
- Использовать светодиодный (светодиодный) микроскоп
- Можно использовать недорогой источник света с питанием от батареек.
Эти добавки облегчают обнаружение бактерий, повышая чувствительность на 10% и делая мазок на 25% быстрее по сравнению с обычной микроскопией.
Тем не менее, мазок менее чувствительны, чем Xpert MTB/RIF ULTRA и не дает никакой информации о лекарственной устойчивости.
Анализ амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT) выполняет поиск генетической информации в тестируемом образце, поиск присутствия MTB. NAAT может анализировать два разных вида генетической информации: ДНК и РНК. NAAT способен анализировать генетические мутации, которые вызывают лекарственную устойчивость, позволяет определить, какое лечение будет наиболее эффективным. NAAT - это быстрый метод тестирования, потому что генетическая информация извлекается и усиливается, а не ждут роста бактерий.
ВОЗ рекомендует GeneXpert в качестве первоначального теста для всех взрослых и детей, нуждающихся в оценке ТБ.
Новый картридж (2018 г) может обнаруживать устойчивость к большему количеству лекарств (изониазид, фторхинолоны и инъекционные препараты второй линии).
Преимущества GeneXpert
- Один этап - автоматизированный
- Быстрый (результат LPA, поэтому их можно использовать в лабораториях нижнего уровня
- Высокая чувствительность
- Высокая специфичность
- Может обнаруживать резистентность к рифампицину
- Такой же аппарат можно использовать и для ВИЧ, диагностики гепатита С / контроля вирусной нагрузки
- Может работать на многих образцах внелегочного туберкулеза
Недостатки:
- Требуется электричество
- Дорого
- Нельзя использовать для отслеживания хода лечения
- Требуется ежегодная калибровка
Линейные зондовые анализы (ЛЗА) представляют собой еще один генетический или молекулярный тест. Они могут обнаруживать наличие MTB. Первичные ЛЗА могут обнаруживать резистентность к рифампицину и изониазиду (MDR-TB). Вторичные ЛЗА могут использоваться для определения устойчивости к инъекционным препаратам второй линии и фторхинолонам. ЛЗА очень важен для быстрого принятия решений о лечении:
- Для выявления резистентности к изониазиду, который имеет худшие последствия для здоровья и не обнаруженной GeneXpert.
- Определить, какие люди с MDR-TB могут принимать сокращенный режим.
Преимущества:
- Может выполнять сразу несколько тестов
- Быстрый (результат менее 48 часов)
- Точный
- Быстрая информация об устойчивости к изониазиду
- Необходимыми предпосылками решения о лечении
Недостатки:
- Не удается полностью заменить другие методы, такие как традиционную культуру
- Не такой быстрый, как G eneXpert
- Дорого
- Требуется хорошо обученный персонал в профессиональной лаборатории
- Обладает высокими требованиями к биобезопасности (может использоваться только в определенных лабораториях)
Культура считается золотым стандартом, то есть самым точным тестом на туберкулез.Культура - это рост бактерий in vitro (в контролируемой среде вне организма) на среде (веществе, обеспечивающим питательными веществами).
Количество бактериальных клеток, образующих колониеобразующие единицы КОЕ-MTB, которые могут вырасти, затем подсчитывается либо визуально, либо путем автоматического обнаружения.
Культура положительная: наличие любых КОЕ.
Культура отрицательная: никаких КОЕ не обнаружено через 42 дня.
Преимущества:
Недостатки:
- Требуется обученный персонал
- Автоматизированная жидкая культура является дорогостоящей (но становится более доступной)
- Твердая культура занимает больше времени
Недорогой вариант некоммерческой жидкой культуры. Дает результаты в течение семи дней. Из-за его низкой стоимости MODS возможен в областях с ограниченными ресурсами. ВОЗ рекомендует MODS в качестве метода обнаружения в лабораториях, стремящихся к внедрению автоматизированных методов жидкой культуры.
Правило двойки
Легкий способ запомнить время выполнения каждого микробиологического теста: следует помнить число 2:
Линейный зондовый анализ
Портативная тест-система
Большинство микробиологических тестов для выявления MTB обеспечивают наиболее четкую диагностику туберкулеза и позволяют тестировать чувствительность к лекарственным средствам. Однако эти тесты имеют множество ограничений: они могут быть дорогими, длительными и требуют наличия инфраструктуры, например лабораторий и обученного персонала, для анализа образцов. Самое главное, текущие микробиологические тесты не предоставляют информацию по месту обслуживания пациента. Тест LAM - это недавно внедренный диагностический инструмент, который обеспечивает тестирование туберкулеза у постели пациента, пока у людей с ВИЧ.
Липоарабиноманнан (LAM) - это компонент клеточной стенки Mycobacterium tuberculosis, возбудителя ТВ. В настоящее время существует только один коммерческий тест на основе LAM, определение ТВ LAM Ag. Определение TB LAM Ag - недорогой анализ, который обнаруживает LAM в образце мочи за 30 мин. Анализ неинвазивный, не требует лабораторного или технического оборудования. Медицинский работник помещает 60 мкл образца мочи на один конец тест-полоски, положительный результат появляется на другом конце как окрашеннаяы полоса в течение 30 мин.
Первоначально ожидалось, что этот быстрый тест может удовлетворить распространенную потребность в портативном тестировании ТВ. Но исследования показали низкую общую чувствительность, с несколько лучшей точностью у людей, живущих с ВИЧ, у которых низкий уровень CD4 + Т-клеток.
В 2015 году ВОЗ рекомендовала ТБ LAM для людей с ВИЧ с CD4
- Портативный тест
- Простой, очень низкотехнологичный
- Быстрый (25 минут)
- недорогой
- Легко собирать и хранить мочу
- Обнаружение населения, которое не может использовать другие диагностические методы
- Не требует электричества или лабораторий
- Сохраняет жизнь, позволяя более раннее начало лечения *
- Тестирование должно сопровождаться другой диагностикой
- Низкая чувствительность
- Нет информации о лекарственной устойчивости
- Используется в ограниченной популяции пациентов
- Невозможно отличить MTB от других не-туберкулезных микобактерий
Обнаружение липоарабиноманнана (LAM) в моче свидетельствует о распространенном туберкулезе с участием почек у пациентов, живущих с ВИЧ, и о расширенном иммунодефиците.
Диагностика внелегочноготуберкулеза
Большинство тестов на туберкулез в качестве образца используют мокроту, но это не работает при внелегочном туберкулезе. В этом случае анализ выполняется по клиническому подозрению. Образец для анализа берут из подозреваемой области заболевания.
Варианты: использовать комбинацию тестов
- Мазок: может быть отрицательным
- GeneXpert: на биоптате ткани, содержимом желудка, гное, цереброспинальной жидкость и моче
- Культура: полезная, но занимает 2-3 недели
- Биопсия: очень полезно
- Если ничего не работает, то лечат туберкулез на основе клинического суждения даже в отсутствие подтверждения (эмпирическое лечение).
- Анализ крови не имеет значения в диагностике туберкулеза Кровь не используется при любой активной диагностике ТБ
Диагностика TB у детей
Дети особенно уязвимы к развитию активного туберкулеза. Диагностика у детей имеет свой набор трудностей, поскольку:
- Дети испытывают трудности с получением образцов мокроты
- Дети имеют более низкие уровни бактерий в организме
ТБ часто диагностируется у детей без микробиологического подтверждения. Вместо этого врач использует симптоматический скрининг, рентгенографию грудной клетки и историю контактов с инфицированными индивидуумами. Для использования микробиологических диагностических тестов предпочтительным является GeneXpert.
ДИАГНОСТИКА ЛАТЕНТНОЙ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ
Цель: предотвратить активный ТБ путем проведения профилактической терапии.
- Туберкулиновый кожный тест
- Сухой очищенный туберкулин (ППД)
| Преимущества | Недостатки |
|
|
- Интерферон-гамма-анализ (IGRA)
- Платина TB
- Тест T Spot.TB
- QuantiFERON-TB Gold Plus
| Преимущества | Недостатки |
|
|
ВОЗ рекомендует проводить тест Манту вместо интерферон-гамма анализа в условиях нехватки ресурсов из-за его стоимости и аналогичной эффективности.
Для людей с ВИЧ, если исключено активное заболевание, не нужно диагностировать латентную форму ТБ для того, чтобы начать профилактическую терапию.
Читайте также: