Гамма интерфероновый тест на туберкулез индекс стимуляции 3 7

Тест для диагностики латентной туберкулезной инфекции и активного туберкулеза, основанный на измерении интерферона-гамма, вырабатываемого сенсибилизированными Т-лимфоцитами в ответ на специфические антигены M . tuberculosis .

Интерфероновый тест на туберкулез, ИФН-гамма тест на туберкулезную инфекцию.

QuantiFERON, Interferon-gamma assay, IGRA, T-cel lassay, Interferon-γ release essay, Cytokine detection assay.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

Для диагностики латентной туберкулезной инфекции (ЛТБИ) в большинстве стран, в том числе и в России, используется туберкулиновая проба (проба Манту). До недавнего времени она являлась единственным методом диагностики ЛТБИ. Хотя этот метод широко распространен, он не лишен недостатков. Так как очищенный туберкулин (ППД), используемый в реакции Манту, представляет собой смесь более 200 антигенов M. tuberculosis, большая часть из которых идентична антигенам, входящим в состав вакцины БЦЖ и других видов микобактерий (нетуберкулезные микобактерии), на результат пробы Манту может влиять вакцинация БЦЖ в прошлом и/или наличие нетуберкулезной микобактериальной инфекции. Кроме того, для проведения пробы Манту необходимо как минимум два обращения к врачу (постановка пробы и измерение ширины папулы через 48-72 часа), что на практике не всегда выполнимо. Для того чтобы улучшить и упростить диагностику ЛТБИ, был разработан новый метод, основанный на измерении иммунного ответа сенсибилизированных к M. tuberculosis Т-лимфоцитов. Он получил название квантифероновый тест.

При наличии ЛТБИ или активного туберкулеза в крови присутствуют сенсибилизированные к этому микроорганизму Т-лимфоциты, способные при взаимодействии с антигенами M. tuberculosis вырабатывать интерферон-гамма. Квантифероновый тест основан на выявлении и количественном измерении вырабатываемого интерферона-гамма при добавлении венозной крови в пробирку, содержащую специфические антигены M. tuberculosis, в том числе ESAT-6 и CFP-10. Так как в исследовании используется смесь антигенов, специфических для туберкулезной палочки, квантифероновый тест более специфичен, чем проба Манту. Он не дает ложноположительных реакций при вакцинации БЦЖ в анамнезе или при наличии нетуберкулезной микобактериальной инфекции.

Специфичность квантиферонового теста в отношении инфицирования M. tuberculosis выше, чем специфичность пробы Манту (98-100 % против 55-95 %). Предсказательное значение положительного результата квантиферонового теста в отношении прогрессии ЛТБИ в активный туберкулез выше, чем положительного результата пробы Манту (2,8-14,3 % против 2,3-3,3 %). Преимуществом квантиферонового теста также является и то, что для его осуществления достаточно одного обращения к врачу. Результат теста, как правило, готов через 48 часов.

Благодаря высокой информативности и легкости выполнения, квантифероновый тест находит все более широкое применение в клинической практике. Он рекомендован для диагностики как ЛТБИ, так и активного туберкулеза. Чаще его используют вместо пробы Манту, однако в некоторых случаях оба теста используются одновременно.

Использование квантиферонового теста вместо пробы Манту

Квантифероновый тест может быть использован вместо пробы Манту во всех клинических ситуациях, когда показано проведение пробы Манту в качестве теста для диагностики инфекции M. tuberculosis.

1. Использование квантиферонового теста предпочтительнее (хотя проба Манту также может применяться) в следующих случаях:

• в группах пациентов, которые по опыт, не всегда возвращаются к врачу на второй прием для оценки результата пробы Манту (например, лица с наркотической зависимостью);
• у пациентов, получивших вакцину БЦЖ в прошлом (для вакцинации или лечения рака).

2. Использование пробы Манту предпочтительнее (хотя квантифероновый тест также может применяться):

3. Ситуации, в которых может быть использован или квантифероновый тест, или проба Манту, без предпочтения:

• при обследовании лиц, находившихся в контакте с пациентами с активным туберкулезом или подозрением на активный туберкулез ("контактных" лиц); в случае если квантифероновый тест был проведен менее чем через 8 недель после прекращения контакта, его рекомендуется повторить через 8-10 недель после прекращения контакта - эта рекомендация заимствована из алгоритма действий при постановке реакции Манту, так как данных о сероконверсии при использовании квантиферонового теста нет; при повторном тестировании рекомендуется использовать один и тот же тест;
• при периодическом обследовании лиц, имеющих риск заражения туберкулезом по роду деятельности (например, врачей).

Использование квантиферонового теста совместно с пробой Манту

В целом совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту не рекомендуется. Однако оно может потребоваться при получении отрицательного результата первоначального теста (квантиферонового или пробы Манту) в следующих ситуациях:

• высокий риск инфицирования M. tuberculosis, развития активного туберкулеза и его осложнений (пациенты с ВИЧ, дети младше 5 лет);
• присутствуют клинические симптомы, указывающие на активный туберкулез - в таком случае положительный результат повторного теста подтверждает инфекцию, а отрицательный результат первоначального теста следует считать ложноотрицательным; следует отметить, что даже многократные повторные отрицательные результаты квантиферонового теста или его комбинации с пробой Манту не позволяют полностью исключить инфекцию M. tuberculosis у таких пациентов.

Совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту может потребоваться при получении положительного результата первоначального теста (квантиферонового или пробы Манту) в следующих ситуациях:

• когда для подтверждения инфекции требуются дополнительные данные, например при положительном результате пробы Манту у вакцинированного БЦЖ пациента - в этом случае положительный результат подтверждающего (квантиферонового) теста позволяет не только выявить ЛТБИ, но и улучшить приверженность пациента проводимому лечению;
• в группе здоровых пациентов, имеющих низкий риск инфицирования M. tuberculosis, - как и в случае с пробой Манту, квантифероновый тест не рекомендован в группах пациентов с низким риском инфицирования M. tuberculosis; в случае если распространенность туберкулеза менее 1 %, даже если специфичность теста приближается к 99 %, большинство положительных результатов будут ложноположительными; в таком случае отрицательный результат повторного теста исключает инфекцию, а положительный результат первоначального теста следует считать ложноположительным.

Совместное использование квантиферонового теста и пробы Манту может потребоваться, если результат первоначального теста неопределенный, пограничный или неинформативный.

При интерпретации результата квантиферонового теста следует учитывать следующее:

• тест не позволяет различить ЛТБИ и активный туберкулез;
• у пациентов с клиническими признаками активного туберкулеза положительный результат теста позволяет подтвердить инфекцию, отрицательный же результат теста у таких пациентов исключить туберкулез не позволяет;
• у пациентов из группы низкого риска инфицирования M. tuberculosis однократный положительный результат квантиферонового теста не является доказательством инфекции; ввиду малой вероятности инфицирования в этой группе пациентов положительный результат, вероятнее всего, является ложноположительным, может быть рекомендовано повторное исследование;
• квантифероновый тест – это непрямой метод диагностики, основанный на выявлении и измерении степени иммунного ответа пациента на M. tuberculosis; в отличие, например, от бактериологического метода (посева), квантифероновый тест не определяет сам микроорганизм, его результат в значительной степени зависит от состояния иммунной системы пациента;
• квантифероновый тест не может быть использован в качестве основного метода диагностики ЛТБИ или активного туберкулеза. Это дополнительный тест, используемый в сочетании с анамнестическими, клиническими, другими лабораторными и инструментальными данными.

Важно отметить, что диагностическое значение квантиферонового теста до сих пор не было должным способом оценено у детей, ВИЧ-инфицированных пациентов, а также при наличии внелегочного туберкулеза. Четких рекомендаций по интерпретации результата квантиферонового теста у таких пациентов нет. Также не в полной мере исследованы феномен реверсии квантиферонового теста и его интерпретация.

Для чего используется исследование?

• Диагностика латентной туберкулезной инфекции и активного туберкулеза.

Когда назначается исследование?

• В качестве основного теста при профилактическом осмотре лиц, находящихся в группе риска инфицирования M. tuberculosis (медицинские работники, "контактные лица", пациенты с иммуносупрессиией – ВИЧ-инфекция, применение кортикостероидов, сахарный диабет, алкоголизм).
• В качестве подтверждающего теста после проведения пробы Манту.
• При наличии признаков активного туберкулеза: кашля, кровохарканья, потери веса, ночных профузных потов, стойкого субфебрилитета, рентгенологических признаков туберкулеза.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

• латентная туберкулезная инфекция (ЛТБИ);
• активный туберкулез.

Что может влиять на результат?

• Время с момента заражения M. tuberculosis. Феномен сероконверсии/реверсии квантиферонового теста изучен недостаточно.
• Состояние иммунной системы.



• Диагностическое значение квантиферонового теста до сих пор не было должным способом оценено у детей, ВИЧ-инфицированных пациентов, а также при наличии внелегочного туберкулеза.
• Интерпретацию результата следует проводить с учетом анамнестических, клинических, других лабораторных и инструментальных данных.

60 Определение неоптерина в сыворотке крови (диагностика туберкулеза и вирусных инфекций)

Анализ на туберкулез вместо Манту

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) признает, что для эффективной борьбы с туберкулезом (ТБ) жизненно важное значение имеют точная идентификация и лечение скрытых инфекций ТБ и его активных форм.

Наибольший риск инфицирования и приоритет диагностики имеют

• Медицинские работники (РЗ)
• Военнослужащие
• Пожилые люди
• Студенты
• Иммигранты
• Близкие контакты лиц, известных или подозреваемых в активной формой туберкулеза
• Люди, которые проживают в учреждениях длительного ухода
• Люди с ослабленной иммунной системой
• Заключенные и лица, живущие в других местах массового скопления людей

Туберкулез (ТБ) существует как активная форма заболевания или латентная инфекция (ЛТИ).

Тест освобождения гамма-интерферона

Современным анализом на туберкулез вместо реакции Манту является пробирочный тест исследования цельной крови на способность лимфоцитов пациента выделять гамма-интерферон при добавлении антигена микобактерий туберкулеза (МБТ). Метод называется QuantiFERON-TB Gold, QFT или IGRA.

Что такое QuantiFERON-TB Gold?

QuantiFERON-TB Gold (QFT ), как анализ на туберкулез вместо Манту, представляет собой простой анализ крови, который помогает в обнаружении микобактерий туберкулеза , бактерий, вызывающих туберкулез (ТБ). QFT - это метод количественного определения освобождаемого лимфоцитами пациента гамма-интерферона (ИФН-у). Метод широко известный как IGRA и является современной альтернативой туберкулиновой кожной пробы (Манту). В отличие от Манту QFT представляет собой контролируемый лабораторный тест, который требует только одного визита пациента в лабораторию и не зависит от предыдущей вакцинации БЦЖ. QFT очень специфичный и чувствительный: положительный результат сильно предсказывает истинную инфекцию МБТ . Но, как и Манту QFT не может различать активного заболевания туберкулезом и латентной туберкулезной инфекции, и предназначен для использования оценки риска ТБ. Как и любой другой диагностический тест, QFT не может заменить клиническое заключение.

Как работает QFT?

QFT, как анализ на туберкулез вместо Манту, непрямой тест на инфекцию МБТ. Он основан на измерении клеточного иммунного ответа. Смесь из 3 -х микобактеральных белков (ESAT-6, CFP-10, и 7,7 ТБ) стимулирует Т-клетки пациента в пробирке и они освобождают гамма-интерферон, который затем измеряют с использованием технологии твердофазного иммуноферментного анализа. Тест обнаруживает инфекции микобактериального комплекса (включая инфекции микобактерии туберкулеза, М. Bovis и М. Africanum ). Штаммы ВЦЖ и большинства других нетуберкулезных микобактерий не содержат ESAT-6, CFP-10 и ТБ 7,7 белки. Таким образом, пациенты вакцинированные БЦЖ или инфицированные нетуберкулезными микобактериями показывают отрицательные результаты. Результаты всегда должны интерпретироваться в сочетании с другими клиническими и лабораторными данными.

Испытание проводят путем взятия цельной крови (1 мл) в три специальные пробирки. Пробирки слева направо: ноль пробирка (отрицательный контроль), пробирка с TB антигеном и пробирка с митогеном (положительный контроль). Пробирка с антигеном ТБ оценивает гамма-ИФН ответ на специфический антиген ТБ. Пробирка с митогеном отражает иммунный статус пациента, правильное обращение с кровью и инкубацию. Пробирка ноль настраивается фон ИФН-гамма. Схема QFTотражена на рис.

Интерпретация результатов QFT

Ответ на специфический антиген

Отрицательный контроль ,ОК (МЕ/мл)

Контроль с митогеном

Каковы преимущества QuantiFERON Gold как реакции на туберкулез вместо Манту

В отличие от реакции Манту, QFT контролируемый лабораторный тест, который требует только одного визита пациента и не зависит от предыдущей вакцинации БЦЖ. QFT является весьма точным, экономически эффективным решением тестирования. QFT имеет уникальные пробирки с покрытием на внутренней поверхности для сбора крови (рис), что позволяет быстро подвергать лимфоциты крови пациента действию высоко-специфических антигенов ТБ и контрольных испытаний . Пробирка Nil (отрицательный контроль) регулирует фон гамма-интерферона (IFN-γ).

Пробиркам с митогеном служит в качестве положительного контроля и может быть полезной для отражения правильной обработки пробы и инкубации, а также иммунного статуса пациента.

Таким образом, в QGT как анализ га туберкулез вместо Манту имеет такие преимущества

• Улучшенная специфичность
• Результаты не подвержены предвзятости учитываемого пробу
• Точность не зависит от предварительной вакцинации БЦЖ (бацилла Кальметта-Жерена)
• Требуется только 1 визит пациента (2-4 требуется для Манту)
• Экономия от сокращения рабочего времени и избежания ненужного последующего тестирования и лечения
• Тест исключает возможные осложнения при проведениипробы Манту

Зачем использовать QFT вместо Манту?

QFT имеет хорошо доказанную клиническую полезность и является наиболее проверен клинически. QFT - это

• Объективные и воспроизводимые результаты
• Удобная технология ИФА с объективным программным обеспечением для анализа
• QFT является идеальным решением для точной идентификации туберкулезной инфекции, которая необходима для эффективной профилактики заболевания.

Конкретные рекомендации

QFT (IGRA) может быть использован вместо реакции Манту (а не в дополнение к нему) во всех ситуациях, в которых рекомендуется реакция Манту в качестве вспомогательного средства при диагностике M. туберкулезной инфекции.
IGRA является предпочтительным для тестирования лиц, получивших БЦЖ (в качестве вакцины или для лечения рака).
QFT может быть использован вместо реакции Манту (без предпочтения), чтобы проверить недавние контакты лиц с туберкулезной инфекцией. При исследовании контактов, отрицательные результаты, полученные до 8 недель, как правило, должны быть подтверждены повторным тестированием через 8-10 недель после окончания контакта с МТБ.

Туберкулез – опасное инфекционное заболевание, способное длительно протекать бессимптомно. Для выявления инфицирования туберкулезными микобактериями проводят тест на туберкулез.

Туберкулиновые пробы

Заражение выявляют с помощью введения под кожу препарата с названием Туберкулин, который впервые был получен в 1890 г. Робертом Кохом из культуры возбудителей туберкулеза.

В состав Туберкулина входят низкомолекулярные белки, нуклеиновые кислоты, липиды, полисахариды, получившиеся при разрушении микобактерий.

Препарат не содержит живых бактерий и не может вызвать заражения.

Диагностические туберкулиновые пробы проводят всем, кроме новорожденных, перед введением вакцины БЦЖ. При положительном результате прививку БЦЖ не делают из-за риска осложнений.

Первоначально Туберкулин вводили подкожно под лопатку. Для получения результата должно было пройти 48-72 часа. В месте укола за это время появлялась папула, а у пациента повышалась температура, ухудшалось самочувствие.

Если организм бурно реагировал на подкожную пробу, то предполагалось, что человек заражен палочкой Коха (микобактериями). При отсутствии реакции человек считался здоровым.

В 1907 г. врачом К. Пирке был предложен скарификационный метод. Для его проведения использовалась вытяжка из сухого очищенного туберкулина.

При проведении исследования:

• кожу предплечья обрабатывают карболовой кислотой;
• наносят царапину глубиной 5 мм;
• капают раствор туберкулина.

Оценка теста проводится через 2-3 суток. Положительный результат пробы у детей до 3 лет означает активную стадию болезни. После 3 лет положительная накожная проба указывает на первичное заражение микобактерией.

Усовершенствовал пробу Пирке в 1908 г. доктор Ш. Манту. Пробу Манту ставят на предплечье, Туберкулин вводят внутрь кожи, что позволило исключить возможность воспаления накожной царапины.

В месте введения развивается воспаление, появляется покраснение участка кожи.

По величине папулы делают вывод о состоянии противотуберкулезного иммунитета.

Для детей, которые проходили вакцинацию БЦЖ меньше года назад, нормальным считается положительный результат пробы Манту.

Тесты на основе белков туберкулезных бактерий

Стратегия ВОЗ по туберкулезу направлена на снижение смертности от него к 2035 г. на 95%. Условием снижения смертности является ранняя диагностика инфицирования. С этой целью созданы новые точные методы определения присутствия туберкулезных микобактерий в организме человека.

Созданы способы выявления инфекции с помощью Диаскинтеста, Квантиферона, Тубинферона.

Эти методы позволяют выявить белки CFP-10, ESAT-6, которые синтезируются только опасными для человека M. Tuberculosis.

Диаскинтест и Тубинферон вводятся внутрь кожи. Для проведения квантиферонового теста берут кровь пациента и проводят исследование в пробирке.

Квантифероновый метод и Диаскинтест отличаются более высокой чувствительностью к микобактериям, чем туберкулиновые пробы при тестировании детей и взрослых, вакцинированных БЦЖ.

При отсутствии вакцинации БЦЖ более точным оказывается туберкулиновая проба Манту.

Прогноз болезни улучшается при диагностике на стадии ранних симптомов болезни с помощью экспресс-тестов на туберкулез. В аптеке можно приобрести ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс и, следуя инструкции, выполнить его в домашних условиях самостоятельно.

При сомнительной реакции пройдите его повторно, а если получен положительный результат, нужно пройти обследование в противотуберкулезном диспансере.

Точным способом выявления туберкулеза является Диаскинтест. При проведении пробы вместо туберкулина внутрикожно вводят смесь из белков CFP-10, ESAT-6.

Исследование назначают для уточнения результатов пробы Манту. Результаты проверяют через 3 суток.

Положительный результат указывает на стадию первых признаков заражения или активной фазы болезни. Диаскинтест редко дает ошибочные результаты, так как отличается высокой специфичностью к M. tuberculosis.

Тубинфероновый метод разработан в России. Под кожу вводится смесь очищенного туберкулина и белков CFP-10, ESAT-6. С помощью тубинферонового теста можно выявить заражение туберкулезом.

Тубинферон чувствительнее, чем другие методы при выявлении скрытой туберкулезной инфекции, что важно для улучшения прогноза заболевания.

Чем раньше будет начато лечение такими сильными антибиотиками, как Рифампицин, Диоксидин, Изониазид, тем выше вероятность полного выздоровления.

Проводится квантифероновый тест на туберкулез вне организма и позволяет обнаружить заболевание, протекающее в скрытой и активной форме. Главное его преимущество – незначительный риск ложноположительных результатов и отсутствие их у людей, вакцинированных БЦЖ.

Для исследования необходима цельная кровь, в которой есть T-лимфоциты. Если пациент был инфицирован туберкулезом, то T-лимфоциты при встрече с белками микобактерии начинают активно выделять гамма-интерферон. По количеству выделенного гамма-интерферона определяют тяжесть инфекции.

Чтобы провести гамма-интерфероновый тест на туберкулез:

• берут кровь из вены;
• добавляют образцы в 3 пробирки с белками CFP-10, ESAT-6;
• ожидают реакцию T-лимфоцитов;
• определяют количество синтезированного гамма-интерферона в пробирке.

С использованием квантиферонового теста диагностика туберкулеза достигает точности 99,1%. А проведение исследования вне организма исключает риск побочных эффектов и аллергической реакции.

Выбирая, какой способ диагностики надежнее, нельзя забывать о доступности метода по цене:

1. Пробу Манту можно сделать за 400-700 руб.
2. Цена Квантиферона составляет 1900-3500 руб.
3. Экспресс-тест на туберкулез ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс стоит 400 руб.

К положительным сторонам Квантиферона относится отсутствие противопоказаний, высокая специфичность и отсутствие зависимости от календаря детских прививок.

Метод можно использовать для проверки на туберкулез у детей, которым противопоказано проведение туберкулиновой пробы.

Вне организма можно проводить диагностику туберкулезного инфицирования Хайн-тестом. Этот метод выявляет ДНК микобактерии в мокроте. Недостаток исследования в отсутствии различий между живыми и погибшими палочками Коха, что не позволяет использовать Хайн-тест для контроля лечения.

Для определения активной формы заболевания используются иммунохроматографический экспресс-тест SD BIOLINE для выявления белка MPT64, который вырабатывается микобактериями. Иммунологический способ диагностики позволяет идентифицировать микобактерии туберкулеза с точностью 98,5-100%.

Несмотря на высокую специфичность тестов, основанных на выявлении белков микобактерий, окончательный диагноз ставит фтизиатр, основываясь на результатах нескольких видов лабораторных исследований крови, мочи и мокроты.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Плеханова М. А., Мордык А. В., Пацула Ю. И.

С целью определения уровня ИФН-γ спонтанного и индуцированного проведено настоящее исследование для диагностики туберкулезной инфекции у 116 детей , больных туберкулезом, инфицированных микобактериями туберкулеза (МБТ) и не инфицированных. Определение уровня ИФН-γ имеет диагностическое значение только при стимуляции туберкулином для оценки активности специфического процесса, а определение уровня пролиферации лимфоцитов туберкулином позволяет оценить уровень напряженности специфического клеточного иммунного ответа, что дает возможность специфические иммунологические тесты использовать как дополнительные в ранней диагностике туберкулезной инфекции у детей .

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Плеханова М. А., Мордык А. В., Пацула Ю. И.

We studied 116 children with tuberculosis disease, infected and not infected by mycobacterium tuberculosis by detecting spontaneous and inductive INF-γ level. Level of the INF-γ is diagnostically significant for specific process only after tuberculin stimulation. The rate of lymphocytes proliferation after tuberculin estimates the intensity of specific cell immune response. The specific immunological tests may be used as additional tests in early tuberculosis infection diagnostics in children

ГАММА-ИНТЕРФЕРОН В ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ

ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ

М. А. Плеханова, А.В. Мордык, Ю.И. Пацула

Омская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.И .

Новиков; кафедра фтизиатрии и фтизиохирургии, зав. - д.м.н., проф. А. В.

Лысов, Городская детская клиническая больница № 2 им. В.П. Бисяриной,

Омск, гл. врач - С.В. Быструшкин.

Резюме. С целью определения уровня ИФН-g спонтанного и индуцированного проведено настоящее исследование для диагностики туберкулезной инфекции у 116 детей, больных туберкулезом, инфицированных микобактериями туберкулеза (МБТ) и не инфицированных. Определение уровня ИФН-g имеет диагностическое значение только при стимуляции туберкулином для оценки активности специфического процесса, а определение уровня пролиферации лимфоцитов туберкулином позволяет оценить уровень напряженности специфического клеточного иммунного ответа, что дает возможность специфические иммунологические тесты использовать как дополнительные в ранней диагностике туберкулезной инфекции у детей.

Ключевые слова: туберкулезная инфекция, специфические иммунологические тесты, дети.

Плеханова Мария Александровна - к.м.н., доцент каф. фтизиатрии и фтизиохирургии ОмГМА; e-mail: [email protected].

Мордык Анна Владимировна- д.м.н., проф. каф. фтизиатрии и фтизиохирургии ОмГМА; e-mail: amordik@mail. ru.

Пацула Юрий Иванович - врач иммунологической лаборатории, Городская детская клиническая больница № 2 им. В.П. Бисяриной; e-mail:

Применение в диагностике туберкулеза у детей современных иммунологических тестов в комплексе с уже имеющимися методами позволяет адекватно оценить активность туберкулезной инфекции [1, 2, 7]. Согласно современным данным, одним из маркеров функционального состояния иммунокомпетентных клеток является цитокиновый спектр [5, 6, 7]. Среди Т-цитокинов важное значение имеет гамма-интерферон (ИФН-у), стимулирующий макрофаги, а также способствующий презентации антигена, что ведет к накоплению СБ4+-Т-лимфоцитов и/или цитотоксических Т-лимфоцитов [5]. Данные о высоком содержании ИФН-у-продуцирующих лимфоцитов у больных активным туберкулезом позволяют считать, что количество ИФН-у-продуцирующих клеток может являться мерой микобактериальной нагрузки и использоваться для диагностики туберкулеза.

С целью определения уровня ИФН-у спонтанного и индуцированного проведено настоящее исследование для диагностики туберкулезной инфекции у детей.

Материалы и методы

Специфический иммунный ответ оценивали модифицированной реакцией бластной трансформации лимфоцитов при стимуляции туберкулином с использованием микрокультур цельной крови без выделения лимфоцитов [3]. У всех детей проводили оценку спонтанного уровня ИФН-у в контроле и уровня ИФН-у после стимуляции лимфоцитов туберкулином [4].

Для анализа и оценки полученных данных были использованы методы описательной статистики. Проводили расчет среднего значения и стандартную ошибку среднего, дисперсионный анализ. Достоверность различий между группами определяли с помощью критерия Стьюдента и непараметрическими методами. Различия считали достоверными при р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

По результатам специфического иммунологического исследования у детей, не вакцинированных БЦЖ и не инфицированных МБТ (4-я группа сравнения) установили наиболее низкие показатели. В мРБТЛ с ППД-Л не выражена пролиферация лимфоцитов на туберкулин, средний уровень показателя составил 229,3±45,7 имп/мин, индекс стимуляции был на уровне 1,4±0,1, что подтверждало отсутствие стимуляции специфическим митогеном и был достоверно ниже, чем в группах сравнения (с 1-й группой р=0,001; с 2-й группой р=0,000; с 3-й группой р=0,000). При оценке ИФН-у установили одинаковый уровень показателя при стимуляции и без стимуляции туберкулином, что также подтверждало отсутствие туберкулезной инфекции,

при этом уровень ИФН-g с ППД-Л был достоверно ниже, чем во всех группах сравнения, так ИФН-g спонтанный составил 87,8±23,3 пг/мл, с туберкулином -79,9±10,7 пг/мл, индекс стимуляции ИФН-g с ППД-Л - 1,15±0,1

(доверительный интервал 0,8-1,5) (с 1-й группой р=0,036; с 2-й группой р=0,007; с 3-й группой р=0,002).

Определение уровня ИФН-g имеет диагностическое значение только при стимуляции туберкулином для оценки активности специфического процесса, при этом определение уровня пролиферации лимфоцитов туберкулином позволяет оценить уровень напряженности специфического клеточного иммунного ответа, что дает возможность данные специфические иммунологические тесты использовать как дополнительные в ранней диагностике туберкулезной инфекции.

INTERFERON-GAMMA IN DIAGNOSTICS OF TUBERCULOSIS IN

М. A. Plehanova, А. V. Mordyk, U.I. Pacula Omsk state medical academy, the rector,

The Omsk City children's hospital № 2 of V.P. Bisjarinoj Abstract. We studied 116 children with tuberculosis disease, infected and not infected by mycobacterium tuberculosis by detecting spontaneous and inductive INF-g level. Level of the INF-g is diagnostically significant for specific process only after tuberculin stimulation. The rate of lymphocytes proliferation after tuberculin estimates the intensity of specific cell immune response. The specific immunological tests may be used as additional tests in early tuberculosis infection diagnostics in children

Key words: tuberculosis infection, specific immunological tests, children.

1. Ефремова С. Н. Оценка уровня специфической сенсибилизации организма ребенка и других показателей иммунитета у детей в период лечения туберкулеза внутригрудных лимфатических узлов / С.Н. Ефремова, И.Ф. Довгалюк, И.Я. Сахарова // Пробл. туберкулеза и болезней легких. - 2007. - № 12. - С. 22-26.

2. Ефремова С.Н. Показатели иммунного статуса при оценке активности специфического процесса у инфицированных микобактериями туберкулеза детей и больных туберкулезом внутригрудных лимфатических узлов / С.Н. Ефремова, И.Ф. Довгалюк, И.Я. Сахарова // Пробл. туберкулеза и болезней легких. - 2009. - № 1. -С. 48-51.

3. Способ ранней диагностики туберкулезной инфекции у детей / Л.И. Веремеевич, А.В. Лысов, Ю.И. Пацула, М.А. Плеханова, Н.В. Соботюк // Патент на изобретение № 2315315. - № 2005110511/15. - Бюл. 2. - 3 с.

4. Приоритетная справка 2011 110 673 от 21.03.11 г. Пат. Способ оценки активности туберкулеза у детей и подростков / А.В. Мордык, М.А. Плеханова, Ю.И. Пацула.

5. Тюлькова Т.Е. Особенности функционирования иммунной системы при туберкулезной инфекции / Т.Е. Тюлькова, Ю.П. Чугаев, Э.А. Кашуба [и др.] // Пробл. туберкулеза. - 2002. - № 11. - С. 48-55.

6. Тюлькова Т.Е. Изменения иммунной системы детей старшей возрастной группы при первичных и вторичных формах туберкулезной инфекции / Т.Е. Тюлькова, Ю.П. Чугаев, Э.А. Кашуба и др. // Пробл. туберкулеза и болезней легких. - 2009. - № 1. - С. 51-55.

7. Хасанова Р.Р. Роль цитокинов в модуляции субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких / Р.Р. Хасанова, О.В. Воронкова, О.И. Уразова и др. // Пробл. туберкулеза и болезней легких. - 2008. - № 3. - С. 31-35.