Пцр тест на туберкулез стоимость
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — современный диагностический способ исследования инфекционных заболеваний методами генной инженерии. Она разработана американским биохимиком Кэри Бэнкс Муллис в 1983 году. При туберкулезе анализ ПЦР дает ответ о наличии возбудителя в крови пациента за несколько часов, имея малое количество материала.
Суть метода
Основа метода заключается в том, что во время анализа, используя полимеразную цепную реакцию, из биологического материала больного выделяют частицы ДНК возбудителя, классифицируя его затем по виду микроорганизмов.
Биологическим материалом могут быть:
- кровь;
- экскременты в виде мочи, кала;
- мокрота;
- ликвор и другое.
Также возможно оценить стадию заболевания, определить восприимчивость возбудителя к тому или иному медицинскому препарату и назначить эффективное лечение.
Альтернатива Манту
В Российской Федерации при массовой проверки детских коллективов на микобактерии туберкулеза делают пробы Манту. К сожалению, она имеет ряд недостатков:
- может дать положительную реакцию не только у больных, но и привитых детей;
- спровоцировать приступ аллергической реакции.
Поэтому встала необходимость проводить другие анализы на туберкулез, особенно детям, вместо Манту. Сейчас, с 2009 года, диагностика туберкулеза у детей и взрослых насчитывает несколько современных способов, один из них — тест ПЦР.
Достоинства
ПЦР диагностика туберкулеза имеет ряд достоинств:
- Биологическая проба определяет от десяти до ста клеток, достоверность сто процентная;
- Исследование длится не более пяти часов;
- Возможность выявления туберкулеза легких, в то время, как другие методы не всегда эффективны;
- Возможность выявления фрагмента, соответствующего конкретному возбудителю.
Назначение
Направление на этот анализ могут дать следующие врачи: пульмонологи, фтизиатры, терапевты, у детей — педиатры. Показания к диагностике:
- присутствует основная симптоматика туберкулеза;
- длительно протекающее заболевание дыхательных путей;
- присутствует контакт с туберкулезными больными;
- при возникновении сомнения у врача после снимка рентгена.
Подготовка
За три дня до того, как сделать ПЦР анализ, для достоверности полученных данных пациент не должен курить, употреблять алкоголь и лекарственные средства. Если материалом для пробы является мокрота, не рекомендуется чистить зубы, особенно зубными пастами, которые содержат бактерицидные вещества.
Разрешается полоскание рта чистой водой. За день до процедуры необходимо исключить из рациона жирные продукты, а также продукты, вызывающие аллергию.
Забор материала осуществляется утром натощак, спустя четыре-пять часов после последнего приема пищи.
Этапы проведения
ПЦР на туберкулез основан на методе термоциклирования и включает в себя следующие этапы:
- Забор биологического материала: крови, мокроты, промывной жидкости бронхов и т.п.
- Для разрушения первоначальных цепочек ДНК микобактерии, материал для анализа держат под воздействием высокой температуры на протяжении нескольких минут (денатурация).
- Снижение температуры для того, чтобы праймеры ДНК соединились с отсоединенной в процессе денатурации цепи ДНК (отжиг).
- Копирование целевых участков ДНК (элонгация).
Чтобы получить необходимое количество копий ДНК микобактерии, осуществляется двадцать пять- тридцать циклов.
Ошибки в результатах
Ложный результат может быть в том случае, если в период забора материала пациент принимал медикаменты, а также, если тест проводился у лиц, прошедших противотуберкулезное терапевтическое лечение.
Ошибки возможны вследствие:
- Приема таких препаратов, как Гепарин, и других медикаментов локального действия, способных ингибировать полимеразную реакцию, делая её бессмысленной.
- Приема антибиотиков, так как они снижают число бактерий, и обнаружить правильное количество ДНК микроорганизмов становится невозможно.
- Неправильного хранения материала, когда емкость с собранной биологической жидкостью была не закрыта, и в нее из внешней среды попали чужеродные микроорганизмы.
Недостатки
На современном этапе в России этим диагнозом пользуются редко в силу ряда причин:
- Высокая стоимость анализа, нет в наличии во многих поликлиниках;
- При лечении метод может дать ошибочную информацию;
- Не всегда возможно применение у пациентов с сильным легочным поражением, страдающих иммунодефицитом, а также при внелегочном поражении.
Поэтому, при подозрении на туберкулез более информативно будет провести комплексное обследование, включающее: диаскинтест, анализ крови на туберкулез, проба Манту, компьютерную томографию и другие методы.
Стоимость
Тест ПЦР является достаточно дорогостоящим, что делает его недоступным для большинства людей. Однако при диагностике туберкулеза важность и эффективность данного метода превышает его затраты, поскольку раннее выявление данного заболевания будет способствовать благоприятному исходу, а также предупреждению развития осложнений. Цена на анализ сильно разнится. Стоимость находится в диапазоне от 350 до 2000 рублей.
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).
К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).
Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.
Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
- Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
- Период карантина в детских коллективах.
У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.
Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции
Параметр | Проба Манту | Диаскинтест® | Квантифероновый тест |
---|---|---|---|
Метод исследования | Кожный тест | Кожный тест | Исследование крови |
Побочные реакции | Возможны | Возможны | Нет |
Противопоказания | Есть | Есть | Нет |
Специфичность | Низкая | Высокая | Высокая |
Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ | Да | Нет | Нет |
Зависимость от сроков проведения профилактических прививок | Да (не ранее чем через месяц) | Да (не ранее чем через месяц) | Нет |
Интерпретация результатов | Субъективна | Субъективна | Объективна |
Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
- высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).
Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
- Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
- Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
- Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
- Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
- Обследование иммигрантов.
Пример результата исследования и интерпретация:
Параметр | Результат | Критерии оценки результатов |
---|---|---|
Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) | 0,05 | До 8,00 |
Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) | 0,09 | Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL) |
Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) | 9,56 | От 0,50 |
Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) | Отрицательный | Отрицательный |
Интерпретация результата исследования
Положительный результат | Сомнительный результат | Отрицательный результат | |||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
|
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт. Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020 ! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.
КомментарииПеречисленные Вами методы анализа не информативны для тех целей, из-за которых проводится туберкулинодиагностика. Альтернативой Манту и Диаскинтесту могут служить только Квантифероновый тест или T.SPOT-TB. То, что Вы перечислили, это методы ПЦР и ИФА. Метод ПЦР используется для диагностики заболевания туберкулёзом и абсолютно не подходит для выявления инфицирования. С помощью ПЦР ищут ДНК туб. палочек в биологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов или желудка, моче, операционном материале, отделяемом свищей и пр. ПЦР крови во фтизиатрии не применяется, т. к. туб. палочка в кровеносном русле может находится очень кратковременно при генерализации процесса. Поэтому берегите свои деньги и никогда не ведитесь на анализ "ПЦР крови на туберкулез". ИФА метод предполагает определение антител к туб. палочке. Даже при активной форме туберкулеза чувствительность этого метода не более 75%. Часто пациенты с активной формой туберкулёза, подтвержденной другими методами обследования, приносят отрицательный результат анализа, сделанный методом ИФА. Поэтому методы ПЦР и ИФА являются лишь дополнительными методами диагностики туберкулеза. Но в любом случае нужно помнить, что проба Манту, Диаскинтест, Квантифероновый тест, T-SPOT.TB являются лишь скрининговыми методами диагностики у детей. Их цель - выявить тех лиц, которых необходимо дообследовать дальше на туберкулез, а при отсутствии заболевания решить вопрос с профилактикой его возникновения в будущем. То, что Вы перечислили, это методы ПЦР и ИФА. Метод ПЦР используется для диагностики заболевания туберкулёзом и абсолютно не подходит для выявления инфицирования. С помощью ПЦР ищут ДНК туб. палочек в биологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов или желудка, моче, операционном материале, отделяемом свищей и пр. ПЦР крови во фтизиатрии не применяется, т. к. туб. палочка в кровеносном русле может находится очень кратковременно при генерализации процесса. Поэтому берегите свои деньги и никогда не ведитесь на анализ "ПЦР крови на туберкулез". ИФА метод предполагает определение антител к туб. палочке. Даже при активной форме туберкулеза чувствительность этого метода не более 75%. Часто пациенты с активной формой туберкулёза, подтвержденной другими методами обследования, приносят отрицательный результат анализа, сделанный методом ИФА. Поэтому методы ПЦР и ИФА являются лишь дополнительными методами диагностики туберкулеза. Ольга, Вы большая молодец, что у вас дошли руки почитать эти приказы. Вот сижу сейчас и думаю, чтобы нас никто не обломал сейчас фразой, типа все это является лишь дополнительными методами диагностики ТБ. Вот, к примеру в 109 приказе от 2003 года, есть такая хрень: С целью быстрой идентификации микобактерий туберкулезного комплекса в качестве дополнительных допускается использование методов, основанных на амплификации фрагментов генома микобактерий (полимеразная цепная реакция - ПЦР), других молекулярно-биологических методов. ПЦР-анализ может быть применен для исследования материала от больного (мокроты, промывных вод бронхов, мочи и спинномозговой жидкости), а также культур микроорганизмов." Наталья, вот. Держите. Это я только 2 пункта разжевывала. А теперь подробнее. - с впервые выявленной положительной реакцией (папула 5 мм и более), не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза; - с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более); - с нарастанием чувствительности к туберкулину у туберкулиноположительных детей - увеличение инфильтрата на 6 мм и более; - увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более; - с гиперреакцией на туберкулин - инфильтрат 17 мм и более; - при везикуло-некротической реакции и лимфангите. 5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер (почему они направлены описано в пункте 5.6), родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту (опять 25! Манту то не ставили) заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации. Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась (это походу те 5%, которые не отказались, но у них медицинские противопоказания для постановки манту) допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутствии заболевания. Елена, Внимание! Человеческая просьба не писать вопросы в ЛС к автору темы. Все необходимые образцы отказов, а также советы и пути ведения диалогов имеются в теме и группе. Наиболее интересующие нас пункты: V и VI 5.1. В целях раннего выявления туберкулеза у детей туберкулинодиагностика проводится вакцинированным против туберкулеза детям с 12-месячного возраста и до достижения возраста 18 лет. Внутрикожную аллергическую пробу с туберкулином (далее - проба Манту) ставят 1 раз в год, независимо от результата предыдущих проб. Ежегодный охват пробой Манту детей до 14 лет включительно должен составлять не менее 95%. В обязательном порядке обследуются дети из социально неблагополучных семей и проживающие на территории Российской Федерации дети иностранных граждан, прибывшие из неблагополучных по туберкулезу стран. 5.2. Проба Манту проводится 2 раза в год: - детям, не вакцинированным против туберкулеза по медицинским противопоказаниям, а также не привитым против туберкулеза по причине отказа родителей от иммунизации ребенка, до получения ребенком прививки против туберкулеза; - детям, больным хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания, желудочно-кишечного тракта, сахарным диабетом; - детям, получающим кортикостероидную, лучевую и цитостатическую терапию; 5.3. Постановка пробы Манту осуществляется средними медицинскими работниками детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций, прошедших обучение в противотуберкулезных медицинских организациях и имеющих справку- допуск. Средние медицинские работники детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций проходят обучение в противотуберкулезных медицинских организациях не реже 1 раза в 2 года. 5.4. Не допускается проведение пробы Манту на дому, а также в детских и подростковых организациях в период карантина по инфекционным заболеваниям. Постановка проб Манту проводится до профилактических прививок. 5.5. Интервал между профилактической прививкой, биологической диагностической пробой и пробой Манту должен быть не менее одного месяца. В день постановки туберкулиновых проб проводится медицинский осмотр детей. 5.6. В течение 6 дней с момента постановки пробы Манту направляются на консультацию в противотуберкулезный диспансер по месту жительства следующие категории детей: - с впервые выявленной положительной реакцией (папула 5 мм и более), не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза; - с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более); - с нарастанием чувствительности к туберкулину у туберкулиноположительных детей - увеличение инфильтрата на 6 мм и более; - увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более; - с гиперреакцией на туберкулин - инфильтрат 17 мм и более; - при везикуло-некротической реакции и лимфангите. 5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер, родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации. Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась, допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутс Одним их эффективных диагностических методов является метод ПЦР на туберкулез (полимеразная цепная реакция). Анализ представляет собой метод обнаружения возбудителя при помощи ДНК и РНК в организме человека. Анализ высокочастотный, поэтому позволяет выявить микроорганизмы, которые являются возбудителями болезни, даже если они находятся в малом количестве. Для этого достаточно наличия единичного клеточного элемента. Анализ проводится при помощи полимеразы, специфического фермента. В каких случаях необходим ПЦРТуберкулез – распространенное заболевание инфекционного происхождения, возбудитель которого – палочка Коха. К основным симптомам патологии относится кашель с выделением мокроты в течение длительного периода, кровохарканье, которое присоединяется на более поздних стадиях болезни, повышенная температура тела, постоянная слабость, потливость в ночное время, резкое похудение. Туберкулез может поражать не только легкие, но и головной мозг, систему пищеварения, суставы, позвоночник, кожные покровы, мочеполовую систему. Болеют как взрослые, так и дети. Каждый год заболевают около 10 млн человек, из которых около 2 млн погибают. Патология передается воздушно-капельным путем, через органы пищеварения, быстро образует устойчивость ко многим медикаментозным средствам.
Метод ПЦР для выявления туберкулеза полностью безопасный и применяется без ограничений. Проводится по направлению от фтизиатра, педиатра, терапевта или пульмонолога. В некоторых ситуациях ПЦР является единственным диагностическим методом, часто назначается:
Другие методы также продолжают применяться в случаях, когда нет возможности провести ПЦР, – это туберкулинодиагностика или Манту, флюорографическое исследование, рентгенография легких. Данные обследования бесплатные, в отличие от ПЦР, но имеют свои недостатки. ПЦР диагностика туберкулеза у детей – менее вредная процедура, чем рентген, при котором ребенок получит лишнюю и не нужную дозу облучения. Тест на туберкулез может вызвать проявление аллергической реакции у ребенка. Бактериологический анализ долго исследуется, результата можно ждать только через месяц. Поэтому при возможности проведения ПЦР ребенку лучше использовать его. Противопоказаний для данного вида диагностики практически нет, можно использовать при простудных и других заболеваниях. Не рекомендуется проводить исследование сразу после прививки и курса противотуберкулезной терапии, т.к. остаточные микроорганизмы могут находиться некоторое время в крови и влияют на диагностику туберкулеза. Преимущества и недостатки анализаДиагностика туберкулеза данным методом – распространенная процедура, она имеет ряд преимуществ:
Виды анализаВыбор того или иного биологического материала на исследование туберкулеза назначается индивидуально, это может быть кровь, мазок слюны, мокрота, моча. Анализ крови на туберкулез назначают в случае невозможности проведения других исследований. Кроме того, он более безвреден для тех людей, которым рентгенографическое обследование способно принести вред. Для того чтобы увидеть полную картину, иногда требуется сделать несколько снимков, а это лишнее облучение организма. Кровь может исследоваться и при получении сомнительных результатов флюорографии. Анализ ПЦР на туберкулез слюны не такой информативный, как исследование крови, потому что туберкулезная инфекция не действует на слюнные железы. В результате ответ почти всегда отрицательный. Тем не менее ПЦР-тест слюны может выявить легочные и внелегочные формы протекания заболевания. Анализ мокроты на туберкулез берется на исследование 3 раза во избежание неточного результата. При начальной стадии инфицирования мокрота будет выделяться в малом количестве, при запущенной патологии будут присутствовать кровянистые включения. При подозрении на туберкулез костей или нервной системы данное исследование информативным не будет. Анализ мочи помогает выявить туберкулез внелегочной формы – мочеполовых органов. При поражении легких данное исследование не информативно. Сдача ПЦР мочи на туберкулез требует подготовки. Накануне процедуры нужно исключить прием лекарственных препаратов, сексуальные контакты. Брать материал следует в утренние часы, стараться за несколько дней до проведения процедуры не употреблять в пищу продукты, которые могут окрасить мочу в различные цвета. Подготовка к процедуреВо избежание получения ложного или не информативного результата рекомендовано придерживаться следующих правил:
При невозможности взятия мокроты на исследование применяют смыв из области бронхов, он не требует специальной подготовки. Проводится путем вливания пациенту в трахею раствора натрия хлорида, который провоцирует кашель с жидкостью. Она и используется для дальнейшего исследования. Повлиять на точность результата могут некоторые лекарственные препараты, особенно антибиотики и гепарин. По этой причине за 3 дня до проведения процедуры следует исключить их применение. Как производится забор кровиПроцедура проходит с использованием амплификатора, исследование состоит из 4 этапов. Для анализа берутся участки ДНК, в которых начинается процесс синтезирования молекул, нуклеотидов, полимеразанов. Образцы прогреваются до температуры 98°С для того, чтобы разрушилась первичная структура ДНК-цепочки.
После 25-30 идентичных циклов образуется некоторое число копий ДНК вирусов, по которым уже и определяется возбудитель болезни. Этот анализ может заменять Манту ребенку. Результат исследования может быть положительным в течение некоторого времени, т. к. анализ ПЦР не идентифицирует мертвые микобактерии от живых. Расшифровка результатовСрок проведения исследования на ПЦР при туберкулезе составляет 6-7 часов.
Сколько стоит анализАнализ крови ПЦР на туберкулез стоит от 240 до 365 руб., цена зависит от города. Самый дорогостоящий анализ в Москве, в остальных регионах цена на исследование примерно одинаковая. Читайте также:
|