Качественный анализ гепатита с и на антитела

РНК-вирус проникает в клетки печени и вызывает болезнь – гепатит С. Заболевание проходит в острой и хронической форме. Для него характерно протекание без видимых признаков. Такое течение объясняется высокой способностью вируса к мутации и появлению различных видов. Это помогает патогену приспосабливаться к организму хозяина и ускользать от иммунной защиты.

Исследования на ранних стадиях развития не дает результата. Качественный анализ ПЦР на гепатит С проводят, чтобы выявить патоген, и начать вовремя лечение.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое качественный анализ на гепатит С?

Гепатит С – серьезное заболевание, при хроническом развитии которого возникает цирроз и рак печени. Ученые длительное время не могут разработать вакцину от болезни, несмотря на изучение особенностей строения HCV. Многообразие видов патогена слабо поддается изучению.

Только с помощью лабораторных исследований можно обнаружить поражение органа, и предупредить инфицирование окружающих. С этой целью проводят качественный анализ ПЦР на гепатит С.

Носитель в течение многих лет может быть инфицирован и не подозревать о болезни. Качественный анализ предполагает проведение в лаборатории полимеразной цепной реакции крови пациента на наличие РНК вируса. Диагностика проводится на сверхчувствительном медицинском оборудовании, которое помогает его обнаружить.

Что показывает качественный анализ?

Качественное обследование с помощью ПЦР обладает достоинствами перед другими методами:

• даннй метод помогает выявить генетический материал патогена на ранних стадиях;
• показывает вид возбудителя;
• используется система тестов, нет необходимости высеивать материал в питательной среде;
• обладает высокой скоростью диагностики возбудителя: результат анализа будет готов через 5 часов;
• выявляет скрытую инфекцию.

Качественный анализ назначают при профилактическом осмотре, когда имеются показания на его проведение. Он проводится во время лечения, после выздоровления. С его помощью подтверждают наличие или отсутствие антител вируса гепатита С в крови.

• количественное содержание генотипа HCV;
• качественные характеристики вирусной РНК;
• генотипирование.

Диагностику проводят повторно для подтверждения результата с более чувствительным реагентом.

Показания к исследованию

Для проведения качественной ПЦР нужны предпосылки для ее назначения:

• сексуальная связь с лицом, который инфицирован вирусом гепатита;
• цирроз печени;
• обязательное обследование перед оперативным вмешательством;
• проведение вакцинации против вируса гепатита В;
• плановое обследование работников медицинских учреждений, садов, школ.

Если у пациента видны явные признаки гепатита:

• желтизна кожных покровов, белков глаз;
• боль в правом подреберье;
• усталость;
• увеличение в размерах печени;
• тошнота.

Вирус гепатита С проникает в клетки печени через кровеносные сосуды. Патоген может попасть при гемодиализе, при пользовании инфицированной иглой, при нанесении татуировки, в стоматологических и косметических кабинетах.

Возможна передача вируса новорожденному от инфицированной матери, если происходит травмирование кожи ребенка при родах. Качественный анализ выявляет вирус и указывает на второстепенные признаки: наличие в крови больного антител.

Расшифровка результатов

Врач-гепатолог или инфекционист проводит расшифровку результатов ПЦР и ИФА на гепатит С. Полученные данные подтверждаются комплексным обследованием:

• биохимическим анализом;
• УЗИ органа;
• биопсией печеночных тканей.

Опираясь на полученные данные, врач подтверждает или отрицает гепатит С.

Стандартная чувствительность теста на ПЦР колеблется в пределах 10-500 МЕ/мл. Анализ не дает результата, если она ниже указанного параметра.

Количественный анализ ПЦР показывает вирусную нагрузку: концентрацию патогена в человеческом организме (сколько фрагментов флававируса в 1 мл крови). Такой метод обследования назначают перед началом комплексной терапии и на 12 неделе заболевания. Он помогает:

1. Выявить степень болезни. Если концентрация вируса в крови пациента высокая, возможна передача инфекции другим лицам.
2. Назначить противовирусную терапию, выбрать нужный метод лечения.
3. Сделать прогноз выздоравления.

Важно определить генотип, так как патоген постоянно мутирует и приспосабливается к организму. Известно 11 типов, на территории РФ выявлены три: 1, 2, 3. Обследование покажет тип вирусной инфекции.

При расшифровке пишут:

• РНК обнаружено;
• РНК не обнаружено (болезнь не выявлена);
• тип флававируса;
• количественный состав (концентрацию в крови);
• название теста.

Если гепатит С обнаружен в биологическом материале пациента, врач назначает повторное исследование, чтобы исключить ошибку. Обследование биоматериала делают от 1 до 5 дней. Срок исполнения зависит от загруженности персонала.

Присутствие флававируса и антител к нему свидетельствует о продолжительном течении болезни, которая перешла в хроническую стадию. Ложные показания бывают у беременных женщин и у людей, имеющих другие инфекционные заболевания.

Качественный анализ не обнаружил гепатит С. Отрицательное значение означает, что в крови отсутствуют РНК вируса. Утомляемость и другие признаки возможно связаны с протеканием другой инфекции в организме и требуют дальнейшего изучения.

Что делать, если РНК вируса гепатита С обнаружено?

Если вирус обнаружен в крови, нельзя отчаиваться и впадать в панику. В 20 процентах болезнь излечивается самостоятельно. Антитела не всегда свидетельствует о том, что вы болеете гепатитом С. Случаются ошибки при лабораторных исследованиях. Доброкачественные и злокачественные опухоли, инфекционные очаги в организме, проведенная ранее вакцинация смазывают картину ПЦР.

Раннее обнаружение помогает вовремя остановить болезнь. Назначают противовирусную терапию. Препараты помогают вылечить хроническое заболевание в течение 3-6 месяцев.

Анализы на вирусный гепатит С – группа лабораторных исследований, по результатам которых определяют наличие вируса в организме, его генотип, фазу воспалительного процесса. При первичной диагностике делают тесты на маркеры инфицирования – антитела типа IgM и IgG к возбудителю и антигены, то есть саму вирусную РНК. Перед началом терапии выполняется обследование, в рамках которого определяют характер инфекционного процесса, генотип, интенсивность иммунного ответа. Дополнительно назначают УЗИ печени и печеночные пробы.

Анализ на антитела

Для выявления специфических маркеров вируса гепатита С (ВГС) выполняется анализ крови на антитела двух типов:

Они представляют собой иммуноглобулины (белковые компоненты крови), которые формируются в ответ на вторжение в организм инфекционных агентов – вирусов, простейших, бактерий. Их наличие в крови указывает на недавнее заражение гепатитом или уже перенесенную инфекцию.

Анализ на антитела класса M – диагностическое исследование, в ходе которого определяют стадию и форму гепатита, эффективность назначенного лечения.

Нормальные показатели анти-HCV IgM:

Возраст	Пол	Концентрация IgM, г/л
0-3 мес.	женский/мужской	0.06-0.21
3 мес. – 1 год	женский	0.17-1.5
	мужской	0.17-1.43
1-12 лет	женский	0.48-2.4
	мужской	0.4-1.84
от 12 лет	женский	0.3-2.93
	мужской	0.21-2.5

Если по результатам анализа показатели превышают референсные значения в 2 и более раз, это свидетельствует об остром гепатите или реактивации возбудителя при хронической форме болезни.

Антитела типа G образуются в крови больных гепатитом спустя 11-12 недель после заражения. Их уровень достигает максимальных значений через полгода. Все серологические анализы на гепатит С основаны на обнаружении иммуноглобулинов класса G. В отличие от анти-HCV IgM, IgG синтезируются только в остром периоде инфекции и ранней стадии реконвалесценции.

Нормальные показатели анти HCV IgG:

Возраст пациента	Пол	Концентрация IgG, г/л
0-1 мес.	женский	3.9-17.3
	мужской	3.97-17.6
1 мес. – 1 год	женский	2.03-9.3
	мужской	2.05-9.4
1- 2 года	женский	4.8-12.25
	мужской	4.75-12.1
2-80 лет	женский	5.51-16.3
	мужской	5.4-18.2

Не исключено искажение результатов анализа в случае неправильной подготовки к забору крови. Возможно повышение или понижение уровня иммуноглобулинов при приеме цитостатиков, гормональных лекарств, фенитоина.

Суммарные антитела – иммуноглобулины, которые синтезируются к нуклеокапсидному протеину C – core (anti-HCV IgG) и семи неструктурным элементам (NS). Они обнаруживаются в сыворотке крови только через 11 недель после заражения гепатитом.

Суммарный тест на антитела к ВГС (anti-HVC total) выполняется при первичной диагностике вирусного заболевания.

Каждый из типов иммуноглобулинов обладает уникальным диагностическим значением:

1. anti-HCV (core) – указывает на наличие контакта с возбудителем гепатита;
2. anti-HCV NS3 – свидетельствует об остром воспалении печени, чрезмерной вирусной нагрузке на организм;
3. anti-HCV NS4 – указывает на продолжительное течение гепатита;
4. anti-HCV NS5 – сигнализирует о наличии в крови вирусных частиц ВГС;
5. anti-HCV NS4 и anti-HCV – обнаруживаются на поздних сроках гепатита и свидетельствуют о ремиссии.

В случае полного выздоровления концентрация NS4 и NS5 понижается медленно – в течение 9-10 лет. Но наличие этих антител в крови не защищает от повторного заражения гепатитом.

ПЦР на гепатит С

Полимеразная цепная реакция – один из ключевых методов выявления гепатита, который считается золотым стандартом диагностики. ПЦР применяется для выявления РНК вируса в плазме крови задолго до образования в ней специфических иммуноглобулинов.

Для упрощения подсчетов:

Просто подставляйте результат вашего анализы, который стоит перед знаком умножить, и вы получите результат. Учтите, что единицы измерения могут отличаться (копий/мл, ме/мл).

Если затрудняетесь или есть вопросы по другим переменным анализов, вы всегда можете написать нашему дежурному врачу-инфекционисту (чат в правом нижнем углу экрана). Он бесплатно расшифрует ваши анализы.

Анализ дополнительно назначается при контроле лечения гепатита. Для оценки результативности терапии следует применять тест-системы с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл.

Количественный анализ ПЦР – лабораторный тест на вирусную нагрузку при гепатите С, во время которого определяют концентрацию вирионов в крови. Для этого лаборант подсчитывает количество вирусных РНК в определенном объеме плазмы – обычно в 1 см 3 .

Возможные результаты обследования:

1. референсные значения – 75-108 МЕ/мл;
2. отрицательный результат – менее 75 МЕ/мл;
3. положительный результат – более 108 МЕ/мл.

Показатель вирусной нагрузки указывает на эффективность медикаментозного лечения гепатита:

1. низкая – менее 400 МЕ/мл;
2. средняя – до 800 МЕ/мл;
3. высокая – выше 800 МЕ/мл.

Низкая нагрузка свидетельствует об эффективности терапии, а высокая – о необходимости скорректировать схему лечения.

Для определения генотипа ВГС прибегают к молекулярно-генетическому исследованию. В вирусологии различают 6 базовых генотипов HCV. Для анализа берут кровь из локтевой вены. В пределах СНГ применяется набор реагентов, посредством которого выявляют только самые распространенные генотипы HCV – 1a, 1b, 2, 3a и 4.

Печеночные пробы

Функциональные пробы печени – биохимический анализ крови, по результатам которого оценивают состояние воспаленного органа. При гепатите диагностическое значение имеет концентрация таких ферментов:

1. аланинаминотрансфераза (АЛТ);
2. аспартатаминотрансфераза (АСТ);
3. общий билирубин.

В случае необходимости дополнительно определяют содержание щелочной фосфатазы, альбумина.

АСТ содержится в клетках миокарда (миоцитах), а АЛТ – в гепатоцитах, то есть клетках печени. На фоне вирусного заболевания и те, и другие разрушаются, что ведет к высвобождению из них ферментов. По концентрации определяют степень повреждения органов. В случае поражения гепатоцитов уровень АЛТ повышает в 1.5-2 раза. Если разрушаются миоциты, содержание АСТ возрастает в 10 раз.

Референсные значения АЛТ и АСТ

Тип ферментов	Пол	Показатели, ед./л (максимальные)
АЛТ	мужчина	45
	женщина	34
АСТ	мужчина	41
	женщина	35
АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса)	общее	0.91-1.75

Билирубин – желчный пигмент, который образуется при расщеплении гемоглобина из красных кровяных телец. Содержание непрямого билирубина в крови составляет 96%, а прямого – только 4%. Процесс преобразования гемоглобина в желчный пигмент происходит в печени. У больных гепатитом гепатоциты разрушаются, поэтому содержание билирубина увеличивается в разы.

В норме концентрация общего билирубина составляет 3.4-21.0 мкмоль/л. При повреждении печени желчный пигмент просачиваются в кровь, что приводит к окрашиванию в желтый цвет слизистых оболочек, глазных яблок и кожи.

У пациентов с гепатитом С уровень общего билирубина достигает 35 мкмоль/л. В случае перехода воспаления в хроническую фазу показатель уменьшается.

Сколько стоит и как долго делается анализ

Сроки получения результатов обследования зависят от типа анализа. В случае подтверждения диагноза назначаются дополнительные тесты для контроля эффективности терапии.

Примерные сроки выполнения анализов:

1. маркеры гепатита С – до 3 дней;
2. суммарные антитела – 1 день;
3. печеночные пробы – 2 дня;
4. качественная ПЦР – до 2 недель;
5. количественная ПЦР (вирусная нагрузка) – до 2 недель.

При наличии стабильного вирусного ответа пациенты сдают анализ на антитела к возбудителю гепатита не чаще 1 раза в 6-12 месяцев. В случае ухудшения самочувствия – желтушности кожи, несварения – могут потребоваться дополнительные исследования.

Стоимость анализов в Москве при диагностике гепатита С:

Тип анализа	Цена в рублях
ПЦР качественный	700-1500
вирусная нагрузка	1200-3600
генотипирование РНК ВГС	600-2000
иммуноглобулин IgM	390-550
иммуноглобулин IgG	400-600
биохимические пробы печени	1300-1500

Сдача лабораторных анализов позволяет определить фазу воспаления в печени, генотип возбудителя инфекции, степень нарушения печеночных функций. В соответствии с результатами обследования разрабатывается эффективная схема терапии. Благодаря современным методам диагностики и лечения у больных гепатитом С существенно возросли шансы на полное выздоровление.

Нередко ВГС обнаруживается только в процессе сдачи анализов. Но если антитела к ВГС обнаружены — что это значит? Означает ли это, что инфицирование произошло? Бывают ли ложные положительные антитела на гепатит С? Ответы на все эти вопросы вы найдете в нашей статье.

Что такое антитела к гепатиту С?

После того, как в организм человека проникают инородные микроорганизмы и вирусы, иммунная система начинает вырабатывать особые белковые ферменты – иммуноглобулины. Появление специфических фракций белка свидетельствует об ответе иммунитета на сторонние раздражители. Именно эти фракции и являются антагонистами по отношению к антигенам патогена. Их наличие является маркером заражения определенным вирусом.

Но антитела гепатита С — что это такое? Это – иммуноглобулины, противостоящие именно антигенам ВГС. Антитела гепатита (АТ к ВГС) присутствуют в крови пациента. Именно поэтому основным методом диагностики гепатовируса является сдача образцов крови на специфическое обследование. Результаты анализов расшифровывают работники медицинских лабораторий и лечащий врач-гепатолог.

О чем говорят положительные антитела на гепатит С?

Положительный анализ на антитела гепатит С у многих пациентов вызывает панику. Им кажется, что страшный диагноз уже подтвержден, и впереди их ожидает длительное лечение сильнодействующими препаратами. Однако это не всегда так.

Если результат анализа на антитела на гепатит С положительный — что это значит? Результат расшифровки зависит от того, какие именно группы иммуноглобулинов удалось обнаружить:

• Anti—HVC IgG – проявляются одними из первых при заражении гепатовирусом. Фракции белков, говорящие об инфицировании пациента;
• Anti—HCV core IgM – второй тип антител гепатита С, свидетельствующий о заражении организма на ранних стадиях. Сохраняется в крови до полного выздоровления пациента;
• Белок NS3 – АТ к ВГС, наличие которого в плазме основной жидкости человеческого организма говорит о возможном переходе острой формы заболевания в хроническую;
• Белковые фракции NS4 и NS5 – соединения, свидетельствующие о развитии тяжелых осложнений текущего заболевания. Таковыми может быть фиброз, цирроз печени и даже онкологическая опухоль.

Если анализ на гепатит С антитела положительный, это еще не приговор. Обычно для однозначной постановки диагноза проводятся дополнительные обследования.

В противоположном случае возникает вопрос – если антитела к вирусу гепатита С не обнаружены, что это значит? К сожалению, это не является гарантией отсутствия гепатовируса в крови. Возможно, концентрация патогена настолько мала, что в настоящий момент его попросту невозможно выявить.

Что делать, если антитела к гепатиту С положительные?

Вероятнее всего, гепатолог даст направления на дополнительные обследования. Таковыми являются:

• Дополнительный анализ венозной крови пациента на определение генотипа вируса;
• Ультразвуковое обследование (УЗИ) поврежденного заболеванием органа с целью получения максимально подробной картины о масштабах поражения печени вирусом.

Все эти обследования необходимы для разработки будущего механизма лечения гепатовируса и подходящей терапевтической схемы. Также от результатов тестирований напрямую зависит длительность курса лечения и то, какие именно лекарства будут при этом использоваться.

Схемы лечения гепатовируса

Если в наличии такого диагноза, как ВГС, не возникает сомнений, больному назначается определенная схема лечения, которая зависит от следующих факторов:

• Возраст больного (к примеру, противовирусные препараты не рекомендуются детям до 12 лет);
• Общее состояние организма пациента, наличие других хронических болезней;
• Течение заболевания, наличие осложнений.

До недавнего времени использовалась только одна схема лечения гепатовируса – Рибавирин в совокупности с Интерфероном-альфа. У этого метода есть масса недостатков, в числе которых – множество серьезных побочных эффектов и слабая эффективность. Кроме того, из-за длительности терапии может возникнуть почечная недостаточность, а само сочетание лекарственных средств негативно сказывается на биохимии крови. Если резко повышается уровень лейкоцитов, лечение следует прекратить.

Схема Интерферон + Рибавирин значительно устарела, и используется только в тех случаях, когда лечение другими препаратами не допускается. Чаще всего при лечении вирусного заболевания рассматриваемого типа используются инновационные антивирусные лекарственные препараты индийского производства на основе оригинальной американской рецептуры.

В современных антивирусных схемах лечения обязательно присутствует Софосбувир – ингибитор вирусной РНК-полимеразы, и вещество, ингибирующее патогенный белок NS5A, в зависимости от генотипа ВГС:

• Ледипасвир – при 1, 4, 5 и 6 генотипах гепатовируса;
• Даклатасвир – применяется при 1, 2, 3 и 4 генотипах. Наиболее эффективен при терапии gen 3;
• Велпатасвир – универсальное вещество, которое применяется при лечении абсолютно всех генотипов патогена.

Курс лечения зависит от тяжести заболевания. Если течение болезни стандартное, терапевтический курс длится не более 12 недель. При повторной терапии, а также при наличии тяжелых осложнений, может назначаться 24-недельная терапевтическая схема. В этом случае к основным лекарствам могут прибавиться Рибавирин и различные гепатопротекторы.

Бывают ли ложноположительные результаты?

При получении положительного результата анализа на иммуноглобулины также следует учесть, что результат может быть ложноположительным. Подобное явление наблюдается в следующих случаях:

• Беременность на любом сроке из-за иммунных сбоев, характерных для данного периода жизни женщины;
• Формирование злокачественных и доброкачественных новообразований в печени и других органах пациента;
• Угнетение функций печени со значительным понижением АсТ и АлТ;
• Наличие других вирусно-инфекционных заболеваний (например, инфекции ВИЧ);
• Лечение препаратами из групп интерферонов и иммунодепрессантов;
• Неверная подготовка к сдаче анализов на обнаружение в крови антител гепатита С.

Таким образом, если белковые маркеры к ВГС положительные, это не всегда означает, что человек болен ВГС. Для подтверждения диагноза следует пройти ряд дополнительных обследований.

Какой анализ нужно сдавать на антитела гепатита?

• Качественный – позволяет выявить наличие или отсутствие иммуноглобулинов различных типов. В этом случае, если антитела ВГС обнаружены, в большинстве случаев можно говорить о заражении данного человека гепатовирусом;
• Количественный – тест, позволяющий выяснить уровень вирусной нагрузки на организм больного. Это тестирование проводится в том случае, если патоген ранее уже был обнаружен.

Анализ на белковые маркеры гепатовируса требует соблюдения особых нюансов, в частности:

• Полного отказа от жирной и перегружающей печень еды за 24 часа до обследования;
• Воздержание от употребления алкоголя и табакокурения за сутки до сдачи анализа;
• За 8 часов до явки в лабораторию не следует принимать пищу;
• Лучшее время для сдачи образцов крови – 8 часов утра.

Недостатком анализа ПЦР на АТ к ВГС является невозможность определения иммуноглобулинов при слишком низкой вирусной нагрузке. Но если антитела к вирусу гепатита С не обнаружены — что это значит? Это может означать, что человек полностью здоров. Однако отсутствие результата обследования на белковые маркеры ВГС положительного еще не говорит об отсутствии патогена в организме. Возможно, его концентрация слишком мала, что нередко наблюдается на начальных стадиях заболевания, либо при хроническом течении недуга.

Обнаруживаются ли маркеры ВГС после терапии?

Современные методы лечения ВГС являются весьма действенными. Но если после полноценного курса терапии обнаруживаются антитела гепатита С в крови — что это может обозначать? Далеко не всегда наличие иммуноглобулинов говорит о тщетности проведенных терапевтических манипуляций.

После медикаментозного курса у пациента в крови антитела гепатита С типа IgG являются нормой. Эти маркеры заболевания могут оставаться в организме пациента еще несколько лет. При чем, каждый случай индивидуален. Пациенту следует регулярно сдавать анализ крови и следить за количеством иммуноглобулинов. Если не появятся Anti—HCV core IgM, а уровень Anti—HCV core IgG начнет постепенно снижаться, болезнь можно считать побежденной.

Но если со временем терапии прошло достаточно много времени, а результат анализа на антитела на гепатит С положительный, что это значит? В этом случае велика вероятность рецидивного возвращения недуга.

В настоящее время заражение HCV-инфекцией приобретает масштабы эпидемии. Если раньше заболевание считали проблемой определенных социально неблагополучных категорий населения (наркоманов, женщин и мужчин, предоставляющих/пользующихся сексуальными услугами), сейчас заразиться можно во время эстетических манипуляций, в кабинете у стоматолога и т.д. Поэтому ранняя диагностика вируса, включая анализ на антитела к гепатиту С, приобретает все большее клиническое значение.

Патология опасна скрытым течением. При одном из самых распространенных генотипов HCV – 1b заболевание быстро переходит в хроническую форму, не проявляя при этом специфических симптомов. Лишь у небольшой части пациентов возникает астенический синдром, непереносимость физических нагрузок, возможно периодическое повышение температуры до субфебрильных цифр. Часто подобные признаки списывают на переутомление или ОРВИ.

Доктора нередко сталкиваются со случаями, когда положительные результаты анализов на вирус обнаруживаются в ходе профилактического скрининга (например, на этапе подготовки к беременности или постановке на учет в женской консультации, оформлении медицинских документов и т.д.).

Современные технологии позволяют выявить гепатит Ц на ранних стадиях, через несколько недель после заражения. Это улучшает прогноз развития заболевания, предупреждает поражение тканей печени и внутренних органов.

Специалисты рекомендуют регулярно проверяться на HCV. Сдать необходимые исследования можно либо по направлению от терапевта, либо в любой частной лаборатории. Одним из предлагаемых исследований является ИФА – иммуноферментный анализ, задача которого выявить специфические антитела (АТ) к вирусу гепатита С. Данный тест отличается высокой чувствительностью и служит основой для дальнейших диагностических мероприятий.

Что такое антитела к гепатиту С в крови?

Чтобы разобраться в вопросе, что это значит, антитела к вирусу гепатита С, следует кратко остановиться на механизме формирования иммунного ответа. Это соединения белковой структуры, которые при проникновении патогена в организм вырабатываются на поверхности определенного вида лимфоцитов и попадают в системный кровоток. Основная функция антител состоит в связывании с вирусом, препятствуя проникновению в клетку и последующей репликации.

У человека обнаружены пять групп антител (их также именуют иммуноглобулинами – Ig):

Для диагностики гепатита C решающую роль играет наличие антител класса М и G. Положительный анализ методом ИФА не означает 100% диагноза гепатита C. Определение суммарных антител (М + G) – начальный этап диагностического процесса. В дальнейшем для подтверждения инфицирования проверяют наличие и фактический уровень РНК HCV методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

По результатам анализа ИФА доктор может определить, является ли человек носителем вируса, либо заболевание прогрессирует и требует немедленной терапии. Случаи самоизлечения и отсутствие поражений печени является результатом полноценной работы иммунной системы и активной выработки АТ, которые останавливают развитие вирусной инфекции. Именно в таком случае антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный.

Подобную картину отмечают, если АТ обнаружены у ребенка. Обычно это происходит, если беременная женщина была инфицирована вирусом, либо получала соответствующую терапию до зачатия. При соблюдении необходимых мер профилактики и защиты от заражения, АТ исчезнут в 12–18 месяцев.

Виды антител

В клинической практике из всех разновидностей иммуноглобулинов у человека, значение имеют только два вида – IgM и IgG. Первые активно вырабатываются вскоре после проникновения патогена в клетки организма, вторые свидетельствуют о длительном, хроническом течении заболевания.

Однако современные методы диагностики позволили расширить спектр определяемых ИФА антител:

Anti-HCV IgG	Положительный результат свидетельствует о хроническом течении заболевания, при отрицательном ПЦР возможно самоизлечение
Core-Ag HCV	Core - часть структуры генома HCV. Появление АТ указывает на недавнее заражение и острое течение инфекции
Anti-HCV суммарный (total)	Указывает на общий уровень АТ в организме человека. Позитивный результат сохраняется на протяжении всей жизни вне зависимости от ответа на лечение
Anti-HCVNS(3, 4, 5)	Позволяет определить стадию и тяжесть патологии. АТ к NS3 выявляют сразу после заражения. АТ к NS4 указывает на тяжесть нарушений работы печени. АТ к NS 5 демонстрирует хроническое, упорное течение

Из перечисленных исследований на практике реально применяют только три: Anti-HCV IgG, Core Ag (антиген) и суммарный Anti-HCV. Последний анализ на антитела к структурным белкам финансово затратен, поэтому назначается только в критических случаях (например, необъяснимая резистентность к терапии, рецидив и т.д.).

Через какое время возможно выявление антител

Процесс выработки антител в значимых концентрациях в среднем занимает несколько недель. Однако в зависимости от того, какой обнаруживается маркер, возможно определение стадии и степени тяжести HCV-инфекции.

Предполагаемые сроки выявления АТ представлена в таблице:

Тип серологического исследования	Приблизительное время определения методом ИФА
Общий Anti–HCV	На 4–6 неделе после инфицирования
Core-Ag HCV	Может определяться уже через несколько дней после заражения (при высокой чувствительности тест-систем). Однако подобная методика не получила распространения из-за высокой стоимости. Чаще проводится в комплексе с выявлением IgG к гепатиту С
Anti-HCV IgG	На 9–12 неделе после проникновения вируса в организм
Антитела к структурным белкам	Можно выявить позже всех выделяющихся АТ

Тест, предполагающий выявление антител гепатита С, лучше проводить по назначению врача. В отличие от качественного ПЦР, в результатах которого указан однозначный вывод – обнаружен в организме HCV или нет, профессионально расшифровать данные серологического исследования может только специалист.

В зависимости от того, когда появляются те или иные антитела, доктор подбирает оптимальную схему терапии. Резистентные и хронические формы патологии часто требуют не только применения комбинации современных противовирусных препаратов, но и дополнительного назначения Рибавирина и/или Интерферонов пролонгированного действия (ПЕГ-ИФН).

Анализ ПЦР и ИФА: этапы диагностирования вируса

В настоящее время существуют два основных метода выявления HCV-инфекции:

• серологические анализы (ИФА) – выявление специфических антител к HCV (anti-hcv);
• молекулярно-биологические исследования, обнаруживающие РНК вируса (качественная и количественная ПЦР, генотипирование).

Двойная диагностика исключает риск ложноположительной, как и ложноотрицательной реакции. При выявлении anti-hcv с помощью ИФА доктор рекомендует исследование ПЦР (сначала качественное, затем количественное).

Но иногда результаты обследования являются противоречивыми, и ответ на вопрос, что значит, антитела к гепатиту С обнаружены, а ПЦР отрицательная, зависит от ряда факторов.

Методика расшифровки результатов ПЦР и ИФА приведена в таблице.

Данные Anti-HCV и HCV РНК	Предполагаемый диагноз
+/+	Острая или хроническая фаза HCV (требует дополнительной диагностики)
+/-	Острое течение HCV, когда произошло выделение АТ, но РНК вируса в крови не обнаруживается. Такие же результаты возможны в период после перенесенного острого гепатита С
-/+	Ранний период после заражения; хронический гепатит C на фоне иммунодефицита; ложноположительный результат ПЦР.
-/-	Отсутствие гепатита С

Первичная лабораторная диагностика HCV начинается с определения основного маркера инфицирования – антител к антигенам вируса гепатита С. Они начинают появляться практически сразу после заражения, но в терапевтически значимых концентрациях обнаруживаются спустя несколько недель. Наличие АТ свидетельствует о перенесенном или текущем вирусе (при положительном результате ПЦР).

ИФА проводится при помощи высокочувствительных современных, но в то же время финансово доступных тест-систем 2 и 3 поколения. Подобные наборы реагентов основаны на захвате специфических к HCV антител рекомбинантными белками, а затем определении вторичных АТ против IgG или IgM. Эти антитела помечены ферментами, катализирующими проведение реакции.

ИФА тест-системы II поколения помимо обнаружения основных АТ способны обнаружить антитела против эпитопов, полученных из участка core и неструктурных белков (NS3, NS4). Таким образом достигается высокая чувствительность исследования и низкая вероятность ложных результатов. При помощи таких тестов HCV можно обнаружить через 2,5 месяца после заражения.

ИФА – системы III поколения разработаны на основе антигена структурного протеина NS5 и высокоиммуногенного эпитопа NS3. Подобная методика позволяет существенно сократить время от попадания вируса в организм до выработки антител.

Вероятность ложноположительных результатов (впоследствии отмечают исчезновение АТ) возрастает при:

• беременности;
• аутоиммунных патологиях;
• положительных ревмопробах и др.

Возможность ложноотрицательных результатов присутствует при:

• регулярном проведении гемодиализа;
• ВИЧ;
• злокачественных поражениях системы кроветворения.

Считается, что при HCV-инфекции одного ИФА недостаточно, так как АТ появляются не сразу. Кроме того, всегда присутствует вероятность ложных результатов. Поэтому обязательным в диагностике гепатита С является дополнительное проведение качественной и количественной ПЦР.

Подобная ситуация возможна в нескольких случаях:

• пренатальный контакт с вирусом, АТ в крови ребенка сохраняются до 1,5–3 лет, затем отмечают, что они просто пропали;
• перенесенная острая форма HCV, которая либо проходит без симптомов, либо протекает с вариабельной клинической картиной.

В любом случае эта проблема требует постоянного наблюдения врача. Обязательна ПЦР, ее повторяют регулярно (раз в несколько месяцев) и проведение других диагностических мероприятий. Также необходимо исключить состояния, повышающие риск ложноположительного результата ИФА.

При проведении контрольных анализов после окончания противовирусной терапии многих пациентов интересует вопрос, когда исчезают АТ и надолго остаются ли антитела после лечения гепатита С. Доктора предупреждают, что IgG могут циркулировать в крови несколько лет, однако их уровень должен постепенно снижаться.

При проведении исследование методом ИФА на выявление суммарных антител, также возможен положительный результат. Но в таком случае требуется дифференцировать IgG и IgM. Обнаружение последних говорит в пользу рецидива заболевания и требует срочного начала дополнительного курса медикаментозного лечения оставшейся в организме инфекции.

В норме после лечения гепатита С остаются IgG.

Суммарные антитела

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С выявляет общее количество иммуноглобулинов без их дифференцировки – IgG + IgM. В бланках лабораторий такое исследование часто называют Anti-HCV Total. Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии заболевания (за исключением отдельных случаев). Положительный результат требует дальнейшей диагностики.

Пациенту назначают:

• ПЦР (сначала качественную, затем количественную);
• дифференцированную серодиагностику (анализ для выявления титров IgG и IgM по отдельности);
• ультразвуковое исследование печени;
• печеночные пробы;
• анализ на сопутствующие заболевания (ВИЧ, аутоиммунные патологии, расстройства кроветворения и иммунной функции).

Окончательный диагноз врач ставит только после получения всех результатов. Также обращают внимание на анамнез. Прохождение противовирусной терапии обязательно только после достоверного подтверждения наличия вируса в крови.

Если суммарное определение АТ к HCV не укладывается в общепринятые нормы показано дальнейшее обследование. Начало лечения без дополнительных исследований противопоказано.

Расшифровка результата анализа

Как правило, в бланке анализа на антитела к вирусу гепатита С приведены результаты и норма параметров. При некоторых типах исследований пишут титр АТ.

Расшифровкой показателей ИФА должен заниматься только врач. Самолечение по результатам одного или нескольких исследований противопоказано.

Пациенты из группы риска

Регулярно проводить серологическое исследование на выявление маркеров гепатита С необходимо определенной категории людей:

• работникам медицинских учреждений;
• с диагностированным ВИЧ;
• при подготовке и в период беременности;
• после полового акта с носителем вируса;
• больным с онкологическими патологиями крови;
• при неразборчивости в сексуальных контактах.

Также в категорию риска попадают люди, пристрастившиеся к инъекционным наркотическим препаратам, постоянно контактирующие с носителем вируса (например, муж/жена больны HCV). Но врачи-гепатологи обращают внимание пациентов на возможность ложных показателей исследования, что требует комплексной диагностики.