Напряженность иммунитета на ящур

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Диев Вячеслав Иванович, Старов Сергей Константинович, Аноятбеков Музаффарбек Косимбекович, Константинов Алексей Владимирович, Басова Дарья Константиновна

Проведены исследования напряженности иммунитета у овец против ящура типа О после иммунизации вакциной против ящура А, О, Азия-1. Установлена возможность оценки иммунитета после заражения овец 10 4 ИД 50/см 3 адаптированным вирусом ящура типа О определением индекса защиты и по титрам вируснейтрализующих антител в крови вакцинированных животных.

Results of Testing Postvaccinal Type O FMD Immunity Stress in Sheep Using Different Methods

Tests of Type O FMD immunity stress in sheep following immunization with Type A, O, Asia-1 FMD vaccine were performed. It was determined that the immunity following sheep immunization with 10 4 ID 50/cm 3 of adapted Type O FMD virus was possible to be estimated by means of protective index determination and by virus neutralizing antibody titer in blood of vaccinated animals.

Ключевые слова: вирус ящура, поствакцинальный иммунитет, вируснейтрализующие антитела, индекс защиты, инфекционный титр

Key words: FMD virus, postvaccinal immunity, virus neutralizing antibody, protective index, infectious titer

Диев В. И., Старов С. К., Аноятбеков М. А., Константинов А. В., Басова Д. К.

результаты КОНТРОЛЯ НАПРЯЖЕННОСТИ поствакцинального иммунитета у овец против ящура типа о различными методами

RESULTS OF TESTING POSTVACCINAL TYPE О FMD IMMUNITY STRESS IN SHEEP USING DIFFERENT METHODS

2 Research and Production Enterprise "Biological Preparations" of the Tajik Academy of Agricultural Science Address: Republic of Tajikistan, Dushanbe, Giprozemgorodok

Диев Вячеслав Иванович, д. в .н., проф.1. E-mail: diev@arriah.ru

Аннотация. Проведены исследования напряженности иммунитета у овец против ящура типа О после иммунизации вакциной против ящура А, О, Азия-1. Установлена возможность оценки иммунитета после заражения овец 104 ИД50/см3 адаптированным вирусом ящура типа О определением индекса защиты и по титрам вируснейтрали-зующих антител в крови вакцинированных животных.

Summary. Tests of Type О FMD immunity stress in sheep following immunization with Type A, O, Asia-1 FMD vaccine were performed. It was determined that the immunity following sheep immunization with 104 ID50/cm3 of adapted Type О FMD virus was possible to be estimated by means of protective index determination and by virus neutralizing antibody titer in blood of vaccinated animals.

По данным МЭБ, эпизоотическая ситуация по ящуру в различных странах мира, вызванная антигенно измененными штаммами вируса различных типов, остается напряженной. Особенно это касается государств Восточной Азии, где ящуром болели все виды домашних животных, в том числе овцы и козы. В последние годы о заболева-

нии мелкого рогатого скота ящуром сообщали Северная и Южная Корея, Япония, Китай, Монголия и др. [1, 3, 4]. По данным МЭБ, в течение 2012-2013 гг. в 23 из 56 неблагополучных в мире стран болели ящуром овцы и козы. Некоторые исследователи сообщают о том, что ящур у мелкого рогатого скота протекал в легкой форме и бессимптомно. Однако в других случаях отмечалась злокачествен-

ная форма с гибелью 50-100 % заболевших животных, с поражением сердечной мышцы, кровоизлияниями в легких, желудке и кишечнике. Нередко ягнята и козлята погибали от ящура без видимых симптомов болезни [1, 6].

Мелкий рогатый скот является опасным источником инфекции, особенно при отгонном ведении животноводства, когда перегоняемые на летние пастбища стада овец пользуются одними перегонными трассами и поэтому играют решающую роль в возникновении и распространении ящура среди восприимчивых животных.

Опыт борьбы с ящуром показывает, что путем иммунизации всех восприимчивых животных можно добиться относительной стабильности эпизоотической обстановки.

Напряженность иммунитета у крупного рогатого скота и свиней оценивают по результатам заражения вирулентным вирусом. В этих случаях животное считается иммунным, если у него отсутствуют клинические проявления генерализованной ящурной инфекции [2, 5].

При разработке методов профилактической вакцинации овец и коз против ящура предложены различные способы оценки иммунного состояния животных, однако достаточно достоверных критериев пока нет.

У овец и коз оценка иммунного состояния затруднена из-за отсутствия вируса, адаптированного к организму этих видов животных. Некоторыми исследователями предлагались различные методы контроля иммунитета, в том числе определением виремии после заражения вирулентным вирусом, изучением гуморального иммунитета, а также по индексу защиты [1, 5, 6, 7].

Отсутствие единого мнения об объективности оценки иммунного состояния овец послужило основанием для проведения исследований в этом направлении с использованием вируса ящура типа О, адаптированного к организму овец, определением титра вируснейтрализующих антител и индекса защиты.

Материалы и методы

Для иммунизации овец применяли поливалентную вакцину против ящура типов

А, О, Азия-1 из вируса, выращенного с использованием культуры клеток ВНК-21 (почка сирийского хомячка), которую вводили овцам, размещенным в 2 группах по 4 головы в каждой, подкожно в области внутренней поверхности бедра в дозах по 0,33 и 0,11 см3 соответственно. Контролями служили 2 неиммунные овцы. Через 21 день после вакцинации всех животных заражали вирусом ящура типа О штамм 1618, прошедший 10 пассажей на овцах, вводя по 0,1 см3 вирусной суспензии в 10 точек слизистой языка в дозе 104 ИД50/см3. Перед заражением от всех вакцинированных овец отбирали пробы крови для получения сыворотки, которую исследовали в реакции нейтрализации в культуре клеток ВНК-21 на наличие противоя-щурных антител по общепринятой методике. Результаты заражения овец вирусом ящура учитывали по наличию первичных и вторичных афт.

После определения устойчивости вакцинированных овец к ящуру проведены исследования по определению индекса защиты на 6 овцах, размещенных в 2 группах по 3 в каждой, иммунизированных в тех же дозах, как указано ранее. Контролями служили 2 неиммунные овцы.

С этой целью через 21 день после вакцинации готовили десятикратные разведения суспензии вируса ящура типа О, адаптированного к организму овец, с 102 по 105 включительно и вводили каждое разведение вакцинированным и контрольным овцам под слизистую оболочку языка по 0,1 см3 в 4 точки. Через 24 часа после инокуляции разведений вируса по образованию первичных афт на слизистой оболочке языка определяли инфекционный титр вируса. Рассчитывали индекс защиты, который представлял разницу инфекционных титров вируса, выраженных в ИД50/см3 на контрольных неиммунных и вакцинированных овцах. Перед введением разведений вируса ящура от всех вакцинированных овец брали пробы крови для получения сыворотки, которую исследовали на наличие антител в реакции нейтрализации в культуре клеток ВНК-21. Титр антител выражали в log2.

Результаты и обсуждение

Было установлено, что все овцы, иммунизированные в дозах 0,33 и 0,11 см3, были устойчивы к заболеванию генерализованной формой ящура, в то время как контрольные заболели с генерализацией процесса с образованием первичных и вторичных афт на конечностях. Все вакцинированные животные реагировали на введение вируса образованием первичных афт на слизистой оболочке языка. Повышение температуры тела до 40,5 и 41,0 °С отмечено только у контрольных овец.

Выявлена зависимость специфической активности сыворотки крови от дозы введенной вакцины. Титр антител в крови животных, которым вводили вакцину по 0,33 см3, был в пределах 4,0-5,33 1о§2, а в дозе 0,11 см3 - 2,76-4,76 1о§2, а средние титры антител соответствовали 4,48±0,02 и 3,88±0,30 1о§2 (табл. 1).

При анализе результатов, полученных при изучении напряженности иммунитета методом определения индекса защиты, установлена разница между титрами инфекционного вируса у неиммунных и вакцинированных животных (табл. 2).

Устойчивость вакцинированных овец к вирусу ящура типа О

№ группы № животных Доза введен- Титр антител, log2 Наличие афт

животных ной вакцины, см3 индивидуальный средний первичных вторичных

I 1 0,33 4,0 4,48±0,02 + -

II 5 0,11 4,76 3,88±0,30 + -

III 9 контроль (без 0 + 1

10 вакцинации) 0 + 1

№ группы животных № животных Доза введенной вакцины, см3 Титр антител, l0g2 Титр вируса, lg ИД50/см3 Индекс защиты

индивиду -альный средний индивидуальный средний индивиду -альный средний

I 1 0,33 4,66 4,88±0,41 2,88 2,84±0,12 1,60 1,63±0,11

II 4 0,11 4,48 4,68±0,43 3,33 3,21±0,22 1,17 1,28±0,21

III 7 контроль (без вакцинации) 0 4,37 4,50±0,20

Результаты изучения поствакцинального иммунитета против ящура типа О по титрам вируснейтрализующих антител в крови овец и индексу защиты

Титр вируса на овцах, привитых вакциной в дозе 0,33 и 0,11, колебался в пределах 2,66-3,43 ^ ИД50/см3, а средний титр соответствовал 2,84±0,12 ^ ИД50/см3, титр вируса на контрольных овцах был 4,37 и 4,73, а средний - 4,50±0,20 ^ ИД50/см3. Индекс защиты, рассчитанный для каждого животного, колебался в пределах 1,17-1,80, а средний - 1,28±0,21-1,63±0,11 ^ ИД50/см3.

Титр антител в крови всех овец был в пределах 4,23-5,50, а средний - практически на одном уровне 4,68±0,43-4,88±0,41 и не зависел от прививной дозы, что свидетельствует о высокой иммуногенной активности использованной вакцины.

1. С использованием адаптированного вируса ящура типа О установлена возможность изучения напряженности поствакцинального иммунитета у овец методом введения 1,0 см3 суспензии в 10 точек под слизистую оболочку языка по 104 ИД50/см3 и определением индекса защиты по разнице инфекционной активности вируса на слизистой оболочке языка вакцинированных и неиммунных овец.

2. В зависимости от дозы введенной вакцины титр вируснейтрализующих антител

в крови овец колебался в пределах 2,76-5,33 log2. При наличии такого уровня антител все животные были устойчивы к заболеванию генерализованной формой ящура.

1. Бурдов, А. Н. Ящур / А. Н. Бурдов, А. И. Дудников, П. В. Малярец [и др.]; под ред. А. Н. Бурдова -М. : Агропромиздат, 1990. - 320 с.

2. Диев, В. И. Зависимость клинических проявлений ящура А22 у овец от степени адаптации вируса и заражения различными методами / В. И. Диев, С. А. Ашуров, А. В. Константинов, Д. К. Басова // Ветеринария и кормление. - 2013. - № 5. - С. 14-16.

3. МЭБ. Кодекс здоровья наземных животных. Т. 2. - 22-е изд. - Париж, 2013. - 433-756 с.

4. Рахманов, А. М. Программа совместных действий государств - участников СНГ по профилактике и борьбе ящуром / А. М. Рахманов // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2011. - Т. IX. - С. 29-46.

5. Madhanmohan, S. M. Immune response in goats to different payloads of FMDV monovalent vaccine: protection against virulent challenge and development of carrier status / S. M. Madhanmohan, S. B. Nagendrakumar, P. Santhakumar [et. al.] // Indian J. of Microbiology. -2011. - Vol. 51, № 1. - P. 88-93.

6. Rohrer, H. Maul-und-Klauenseuche / H. Rohrer, A. F. Olechnowitz. - Jena : Fisher, 1980. - P. 409.

7. Rout, M. Serosurveillance of foot-and-mouth disease in sheep and goat population of India / M. Rout, M. R. Senapati, J. K. Mohapatra [et al.] // Preventive Veterinary Medicine. - 2014. - Vol. 113. - P. 273-277.

Ветеринарное Дерматологическое Общество стран СНГ Российский ветеринарный журнал Журнал JSAP /Российское издание реклама

Уважаемые коллеги! Представляем вашему вниманию Российскую версию официального издания Европейского Общества Ветеринарной Дерматологии, Американской Академии Ветеринарной Дерматологии, Всемирной Ассоциации Ветеринарной Дерматологии -

Продолжительность иммунитета у животных, переболевших ящуром, составляет 8-12 мес, у свиней - 10-12, у овец - около 18 мес. Отдельные животные-реконвалесценты приобретают некоторую устойчивость против гетерологических типов вируса. При ящуре возникает тканевый и гуморальный иммунитет. Местный иммунитет формируется раньше, чем гуморальный, но он короче. Поэтому при реинфекции через 4-7 мес на месте введения вируса образуются афты, но генерализации процесса не происходит. Установлено, что при ящуре комплекс защитных реакций организма начинает действовать с момента контакта возбудителя со слизистыми оболочками, обусловливая определенную закономерность в развитии специфического местного иммунитета. На белых мышах ВАЬВ/с и морских свинках, иммунизированных одинаковыми дозами антигена ВЯ нескольких штаммов типа SАТ-1, продемонстрирована связь показателей тестов бласттрансформации, ИФА и сероредукции, которая определялась статистически значимыми коэффициентами корреляции. Эффективность первичной иммунной реакции организма на клеточном уровне может количественно детерминировать развитие гуморального фактора иммунитета. Для обеспечения устойчивого благополучия страны по ящуру в РФ реализуется система мероприятий, приоритетными в которой являются предупреждение заноса ВЯ на территорию, а в районах высокой степени риска - вакцинопрофилактика с централизованным обеспечением регионов вакцинами за счет федеральных противоэпизоотических средств.

При парентеральной вакцинации КРС противоящурной вакциной уровень местного иммунитета в большей степени, чем гуморального, зависит от концентрации иммунизирующего антигена вируса и количества адъюванта в прививной дозе. Ревакцинация животных даже меньшим, чем прививаемая доза, объемом вакцины способствует усилению местного иммунитета, в то время как уровень ВНА остается неизменным. Эго, видимо, указывает на относительную автономность местного иммунитета у КРС при профилактической вакцинации. К концу 1-й нед вырабатываются ВНА, а спустя еще несколько дней - КСА и затем ПА. ВНА сохраняются в течение нескольких месяцев, а КСА и ПА - 2-3 мес.

У животных-реконвалесцентов в отличие от привитых инактивированной вакциной отсутствуют АТ к вирусиндуцированной полимеразе.

Иммунитет обычно длится около года и даже дольше. Он еще сохраняется после исчезновения ВНА и зависит от свойств инфицирующего штамма вируса, а также от реактивности животного и всегда направлен против гомологичного типа вируса.

Доказана возможность пассивной передачи поствакцинального клеточного иммунитета. Показано участие цитотоксических лимфоцитов в ранние сроки формирования противоящурного иммунитета. Клеточный иммунитет связан с функционированием лимфоцитов, рецепторного аппарата и соединения их с антигеном. За клеточный иммунитет отвечают Т-клетки.

В Российской Федерации и странах СНГ для специфической профилактики ящура применяют гидроокисьалюминиевую вакцину, которую готовят из инактивированного вируса, культивируемого в переживающей ткани слизистой оболочки языка не иммунного к ящуру КРС (метод Френкеля), а также из вируса, полученного в суспензионной культуре клеток ВНК-21/13. Вакцины содержат инактивированный формалином вирус и сообщают иммунитет взрослым животным до 4 мес.

Вирус в производственных условиях концентрируют ультрафильтрацией, полиэтиленгликолем или полиэтиленоксидом, что дает возможность повысить концентрацию антигена в десятки и сотни раз.

Первая инактивированная вакцина была предложена Вальдманом и Кобе в 1938 г. В дальнейшем эта вакцина была модифицирована в различных вариантах. В настоящее время для крупного и мелкого рогатого скота, как правило, применяют сорбированные, а для свиней - эмульгированные вакцины. Трехвалентная ГОА-формолвакцина из ВЯ типа А №550, О №1618 и С №564 авирулентна, безвредна, стерильна и отличается выраженной иммуногенной активностью.

Выраженный иммунитет у привитых животных наступает на 10-14-й день и достигает максимума через 3-4 нед. Иммунитет у взрослых животных длится 6-12 мес. КРС обычно ревакцинируют 1 раз, свиней - 2 раза в год. ВНА в сыворотке крови появляются уже к концу 1-й нед, достигают максимального титра в 3-5 нед, затем их концентрация постепенно снижается. При систематической иммунизации взрослых животных против ящура инактивированными моновакцинами у них поддерживается стабильный уровень АТ не ниже 4,5 1оg2 на протяжении 6 мес. В течение последующих 3 мес идет медленное снижение титров АТ до 3,5-3,7 1оg2 к концу 6-го мес, что может служить основанием для уточнения схемы вакцинации молодняка этого возраста.

Колостральный иммунитет хорошо выражен, однако телята, не получавшие молозиво, не имеют сывороточных АТ, несмотря на то, что коровы были иммунизированы. После приема молозива титр АТ в сыворотке телят больше, чем в сыворотке матерей. АТ у телят сохраняются в течение 5 мес, хотя пассивная защита продолжается до 3-х мес. Продолжительность колострального иммунитета также зависит от типа вируса. Материнские АТ могут мешать образованию иммунитета у потомства.

Замена традиционных моновалентных инактивированных вакцин на би- и трехвалентные вакцины, приготовленные из очищенного концентрированного и инактивированного вируса типов А22, О1 и Азия1, формирует у привитых животных напряженный и продолжительный иммунитет более 12 мес после однократной прививки, в т. ч. у молодняка КРС на фоне колострального иммунитета.Универсальная эмульсионная вакцина создает достаточно напряженный иммунитет у супоросных свиноматок и обеспечивает их защиту от экспериментального ящура в первые дни после опороса при двукратной прививке. Поросята, родившиеся от 2-кратно привитых свиноматок, в большинстве своем не заболевали и оставались живы при контакте с зараженными матками. Введение таким поросятам инактивированной вакцины в 3-дневном возрасте сопровождается накоплением активных противоящурных АТ.

Молодняк, родившийся от иммунных животных, получает пассивно антитела с молозивом. Молодняк, полученный от многократно вакцинированных коров, имеет достаточно напряженный иммунитет в течение 4 мес.В настоящее время вакцинология переживает этап своего бурного развития. Так, для борьбы с ящуром на смену традиционным инактивированным вакцинам, отличающимся высокой профилактической эффективностью при их систематическом и массовом применении, разрабатываются новые препараты. Главная проблема при этом состоит в том, что современная технология изготовления вакцин не обеспечивает иммунного ответа адекватного по напряженности с иммунным ответом при естественной ящурной инфекции. Быстрая защита от ящура супоросных и подсосных свиноматок обеспечивается препаратом из культурального ВЯ, инактивированного димером ЭИ, очищенного и концентрированного ПЭГ. Стерильный антиген вводили животным внутримышечно за ухом. Контрольное заражение проводили свиным афтозным вирусом в дозе 10 4 ИД5о/0,2 мл под слизистую языка или венчик. В настоящее время в качестве инактивантов используют ацетилэтиленимин (АЭИ) и бинарный этиленимин (БЭИ, диэтиленимин), поскольку они в отличие от формалина позволяют готовить более авирулентные вакцины, а АЭИ менее токсичен, чем БЭИ.

Кроме обычно применяемых методов инактивации ВЯ формальдегидом, предложен оригинальный метод инактивации его собственной эндонуклеазой. Для этого вирусную суспензию смешивают с 0,5М и 0,1М трис-буферным р-ром, рН смеси доводят до 8,5, после чего ее фильтруют через мембранный фильтр (0,45 мкм) и инкубируют при температуре 26 или 37°С. Через 4-5 ч инкубации при 37°С инфекционная активность вируса полностью подавляется. Для такой инактивации вируса при меньшей температуре необходимо более длительное время инкубации. РНК вируса в этих условиях полностью разрушается. В отличие от формолвакцины в инактивированной эндонуклеазой вакцине полностью сохраняются эпитопы протективного АГ вируса. Установлено, что иммуногенность инактивированной вакцины в значительной степени зависит от наличия и вида адъюванта. Включение ГОА в состав вакцины увеличивает ее активность в десятки раз. Для крупного и мелкого рогатого скота в качестве адъюванта применяют ГОА с сапонином.

Для свиней применяют инактивированные вакцины. Естественный иммунодефицит у свиней удалось преодолеть благодаря применению масляных адъювантов. Напряженный и продолжительный иммунитет у свиней наступал после 2-кратной вакцинации. Свиней прививают начиная с 2-мес возраста и ревакцинируют спустя 4 мес. Колостральные АТ подавляют вакцинальный иммунитет, особенно если поросят прививают в первые 30 дн жизни. Вакцины с масляным адъювантом создавали и у телят более выраженный и продолжительный иммунитет, чем ГОА-вакцина. Оказалась возможной одновременная вакцинация КРС против ящура и чумы. Если инактивированную поливалентную ГОА-вакцину против ящура и живую - против чумы вводить одновременно подкожно в область шеи с разных сторон, то образуется такой же иммунитет, как и при раздельной вакцинации против каждого заболевания. Живые вакцины против ящура не разработаны. Многочисленные попытки в этой области не дали положительных результатов. Аттенуированные штаммы, как правило, оказывались или слабоиммуногенными или же реверсибельными.

Разработан метод оценки активности противоящурной вакцины по уровню ВНА. Установлена зависимость от активности вакцины уровня ВНА которая выражена графически. На основании этой зависимости составлены вспомогательные таблицы, позволяющие по установленному уровню ВНА определить иммуногенную активность вакцины.

Оценка поствакцинального иммунитета. Максимальные титры (в РН) поствакцинальных АТ обычно отмечаются на 28-й день после вакцинации; их уровень не зависит от разведения вакцины (в диапазоне 1:1-1:16) и прямо коррелирует со специфическим протективным иммунитетом. На модели морских свинок показано, что иммуногенность противоящурной вакцины может быть оценена в реакции сероредукции бляшек без контрольного заражения животных. Эта оценка позволяет определить необходимую дозу испытуемой вакцины для обеспечения гарантированного иммунитета.

Показана коррелятивная связь между первичным иммунным ответом на клеточном уровне (тест бласттрансформации) и степенью развития гуморальной иммунной реакции (тесты иммуноферментной сероредукции). Реакция гиперчувствительности замедленного типа позволяет изучить in vitro развитие противоящурного иммунитета в ранний период после вакцинации. Показано, что у взрослого КРС в зоне высокого радиоактивного заражения после иммунизации концентрированной противоящурной вакциной образуются специфические АТ, однако иммунитет при этом менее напряженный и более короткий по сравнению с необлученными животными.

Профилактика. Профилактику осуществляют в соответствии с действующей инструкцией: строгий карантин, изоляция эпизоотического очага, установление границ неблагополучного пункта и запрет перемещения животных, вывоза продуктов и сырья животного происхождения, необезжиренного молока; изоляция и лечение больных животных, установление границы угрожаемой зоны, вакцинация восприимчивых животных, дезинфекция помещений, одежды, предметов ухода, транспорта; обезвреживание навоза; уничтожение трупов животных. Карантин снимают через 3 нед после выздоровления последнего заболевшего животного, заключительной дезинфекции (с контролем её качества). Ограничения на ввоз и вывоз животных, использование пастбищ и скотопрогонных пунктов сохраняется в течение 1 года после снятия карантина.

Введение. Ящур является одной из экономически значимых трансграничных инфекций животных. Трансграничные болезни животных - это те болезни, которые представляют существенную важность для экономики, торговли и/или безопасности продуктов питания для значительного ряда стран; которые могут легко распространяться на другие страны и достигать размеров эпизоотий; при которых контроль (борьба), включая профилактику, требует сотрудничества нескольких стран [20].

Анализ материалов МЭБ и сообщений СМИ свидетельствуют о том, что эпизоотическая ситуация по ящуру в сопредельных с Российской Федерацией азиатских странах в течение последних десяти лет остается напряженной, что представляет постоянную угрозу заноса вируса на территорию России [5]. В Российской Федерации в соответствии с планом противоэпизоотических мероприятий в субъектах, граничащих с Китаем, Монголией, Казахстаном, Азербайджаном и Грузией, функционирует противоящурная буферная зона. На территории этих субъектов осуществляется систематическая профилактическая вакцинация от ящура всего крупного и мелкого рогатого скота, проводятся эпизоо-тологические обследования хозяйств и клинический осмотр животных, а также мониторинговые исследования сывороток крови на наличие поствакцинальных антител и контроль передвижения животных и продукции животноводства.

При контроле эффективности вакцины и программы вакцинации в популяции иммунизированных животных проводится оценка уровня популяционного иммунитета - определение доли животных со специфическим уровнем антител.

Определение популяционного иммунитета, нацеленное на обеспечение защиты посредством вакцинации, является основой поствакцинального мониторинга, так как оно является ключевым показателем того, насколько хорошо проведена вакцинация и возможна ли защита животных от инфицирования.

Для проведения профилактической иммунизации в буферной зоне применяется вакцина ящурная культуральная моно- и поливалентная сорбированная инактивированная типов А, О, Азия-1. Молодняк иммунизируют после достижения 4-месячного возраста, а затем прививают через каждые три месяца до достижения 18-месячного возраста (8,9). Результаты эпизоотологического обследования очагов ящура, зарегистрированных на территории России в 2013-2014 годы, и данные серологических исследований свидетельствуют о низкой превалентности колостральных антител у телят до 4-месячного возраста [8, 15]. У крупного рогатого скота шестислойная плацента защищает плод от внешних воздействий, поэтому во время стельности не отмечается перехода иммуноглобулинов от матери плоду, и в крови новорожденных телят, не принявших молозиво, отсутствуют антитела. Отсутствие собственных антител у новорожденных телят компенсируется поступлением их с молозивом вакцинированных матерей, которое в естественных условиях является единственным источником иммуноглобулинов и других протективных факторов. Уровень колостральных антител зависит от их уровня в крови коров-матерей, времени приема, количества и качества поступившего новорожденным телятам молозива [3, 4, 8]. При экспериментальном изучении колострального иммунитета было установлено, что 3 из 4 телят 1,5-2-месячного возраста, полученных от коров, вакцинированных за 3 месяца до отела, заболели ящуром. Однако, колостральные антитела угнетают образование активного иммунитета при однократном введении противоящурной сорбированной вакцины.

Грузинские ветеринарные специалисты рекомендовали вакцинировать против ящура телят с 2,5-месячного возраста, так как они были потенциальным объектом вспышек ящура из-за недостаточной защищенности материнскими антителами, что неоднократно было подтверждено при ящуре в Грузии [8]. При выяснении причин возникновения заболевания было установлено, что напряженность колострального иммунитета у телят, полученных от вакцинированных коров-матерей, зависела в основном от сроков иммунизации коров перед отелом. У телят, полученных от коров, вакцинированных на 2-4 месяце стельности, был очень низкий уровень превалентности колостральных антител. Экспериментально доказано, что напряженность колострального иммунитета у телят, полученных от вакцинированных коров-матерей, зависела в основном от сроков иммунизации коров перед отелом [4].

Все вышеприведенные данные свидетельствуют о необходимости пересмотра схемы противоящурной вакцинации новорожденных телят.

Этот вывод подтвержден результатами исследований индийских, иранских и аргентинских исследователей [14, 16, 18, 19]. Ряд исследователей для проведения мониторинга использовали сыворотки крови от взрослого крупного рогатого скота [5, 11, 12, 13]. Данные этих опытов не всегда совпадали с результатами эпизоотологического обследования очагов ящура.

Данные эпизоотологических обследований очагов ящура, проведенных в 2010-2018 годах в различных регионах Российской Федерации (Амурская область, Хабаровский и Забайкальский края, Карачаево-Черкесская Республика, Кабардино-Балкарская Республика), свидетельствуют, что первые случаи заболевания, как правило, были зарегистрированы у молодняка до 18-месячного возраста [13, 15]. Работами многих исследователей показано, что в системе вакцинопрофилактики ящура самым уязвимым звеном является защита молодняка [16].

Для выявления причин заболевания молодняка ящуром был приведен анализ данных исследований сывороток крови молодняка крупного рогатого скота (возрастом 5-18 месяцев) из буферной зоны на наличие поствакцинальных противоящурных антител.

Материалы и методы исследований. Для анализа были использованы данные, любезно представленные руководителями ветеринарных служб субъектов, входящих в противоящурную зону иммунизации Российской Федерации. Наряду с этим были учтены материалы проведенного авторами статьи эпизоотологического обследования очагов ящура, зарегистрированные в 2010-2018 годах.

Результаты исследований и их обсуждение. При обследовании животноводческих хозяйств из противоящурной зоны иммунизации было предположено, что одной из причин неоднородного поствакцинального иммунного ответа была вакцинация телят разного возраста.

Это связано с тем, что в субъекты поступает противоящурная вакцина, расфасованная по 200 см3 (100 прививных доз для крупного рогатого скота) и ветеринарные специалисты в целях недопущения перерасхода препарата выбирают условный средний возраст для вакцинации молодняка. В этом случае экономические и административные аспекты проблемы вакцинопрофилактики преобладают над иммунобиологическими показателями, что при заносе вируса может привести к заболеванию животных ящуром. Все это приводит к тому, что в стадах остается большое количество неиммунных животных. В таблице 1 показаны данные исследований 1 711 сывороток крови, отобранной от вакцинированного против ящура молодняка крупного рогатого скота в 137 хозяйствах, расположенных в зоне профилактической вакцинации против ящура. Приведенные в таблице результаты исследований сывороток крови молодняка свидетельствует о низкой превалентности поствакцинальных противоящурных антител у молодняка крупного рогатого скота. В сыворотках крови, отобранной через 14-89 дней после вакцинации крупного рогатого скота, противоящурные антитела были обнаружены только у 56-64% проб.

Таблица 1. Данные исследований сывороток крови молодняка (5-17 месяцев) крупного рогатого скота на наличие противоящурных поствакцинальных антител

Срок после вакцинации, дни

Превалентность (%) антител к вирусу ящура типов

Из данных, приведенных в таблице 1, видно, что в сыворотках крови 25-89-дневного молодняка крупного рогатого скота поствакцинальные противоящурные антитела выявлены только в 47,0-63,5% проб. Отмечена разница в уровнях превалентности антител к разным типам вируса ящура. Наиболее высокий уровень превалентности антител был обнаружен к вирусу ящура типа Азия-1.

Представленные данные свидетельствуют о необходимости обязательного учета этой возрастной группы животных при проведении мониторинговых исследований в противоящурной буферной зоне.

Известно, что полевая эффективность противоящурных вакцин не всегда соответствует характеристике, полученной при проведении контроля качества на предприятии-изготовителе препарата [8]. О низком уровне или полном отсутствии поствакцинальных противоящурных антител у ранее вакцинированного крупного рогатого скота в ряде хозяйств Забайкальского края сообщает ТУ Россельхознадзора по Забайкальскому краю и Амурской области 23 июня 2016 года. Первостепенную роль в системе мер борьбы и профилактики ящура играет использование для иммунизации крупного рогатого скота вакцин, отвечающих требованиям (критериям), изложенным в соответствующих документах МЭБ и Европейской фармакопеи.

Данные клинического осмотра животных в очагах ящура, патологоанатомические изменения, выявленные у трупов вынужденно убитого при ликвидации методом стемпинг-аут крупного рогатого скота, свидетельствуют о том, что наиболее подвержен заболеванию молодняк до 18-месячного возраста, косвенно подтверждающиеся результатами мониторинговых исследований сывороток крови. Результаты иммунологических исследований, проведенных сотрудниками ВНИЯИ (ВНИИЗЖ), свидетельствуют о том, что поддержание защитного уровня специфического иммунитета достигается путем первоначального двукратного введения вакцины с последующей ревакцинацией.

Установлено, что сорбированные вакцины не обеспечивают развитие активного иммунитета у животных на фоне колострального иммунитета [4]. Результаты исследований иммунитета, проведенных индийскими исследователями, свидетельствуют о необходимости иммунизации против ящура новорожденных телят, полученных от вакцинированных коров, в двухмесячном возрасте [16]. Аргентинские исследователи рекомендуют новорожденных телят, полученных от вакцинированных коров, иммунизировать эмульсионной вакциной в 30-дневном возрасте [18, 19].

Для сравнения, в Иране первый раз телят, родившихся от вакцинированных коров, вакцинируют в 2,5-месячном возрасте с последующей ревакцинацией через 14 дней [14]. Все это позволяет заключить, что используемая в России схема превентивной иммунизации молодняка крупного рогатого скота до 18-месячного возраста против ящура не позволяет создать напряженный и длительный иммунитет и требует уточнения, так как на эту возрастную группу приходится наибольший процент заболевших животных.

Заключение. Данные эпизоотологических обследований очагов ящура, зарегистрированных в 2004-2018 годах в различных регионах Российской Федерации, входящих в буферную зону, показывают, что первые случаи заболевания были выявлены у молодняка крупного рогатого скота до 18-месячного возраста. Проводимый иммуномониторинг уровня противоящурных поствакцинальных антител был ориентирован на исследование сывороток крови взрослого крупного рогатого скота.

Результаты исследований сывороток крови молодняка свидетельствует о низкой превалентности поствакцинальных противоящурных антител у молодняка крупного рогатого скота.

Все это свидетельствуют о необходимости проведения комплексных эпизоотологических и иммунологических исследований по уточнению схемы превентивной иммунизации против ящура молодняка крупного рогатого скота до 18-месячного возраста, а также учета разных возрастных групп животных при проведении мониторинговых исследований.

Первостепенную роль в системе мер борьбы и профилактики ящура играет использование для иммунизации крупного рогатого скота вакцин, отвечающих требованиям (критериям), изложенным в соответствующих документах МЭБ и Европейской фармакопеи.

Резюме. Ящур является одной из экономически значимых трансграничных инфекций животных. Анализ материалов МЭБ и сообщений СМИ свидетельствуют о том, что эпизоотическая ситуация по ящуру в сопредельных с Российской Федерацией азиатских странах в течение последних десяти лет остается напряженной, что представляет постоянную угрозу заноса вируса на территорию России. Для выявления причин заболевания молодняка ящуром авторами приведен анализ данных исследований сывороток крови молодняка крупного рогатого скота (возрастом 5-18 месяцев) из буферной зоны на наличие поствакцинальных противоящурных антител. Результаты эпизоотологических обследований, проведенных в 2004-2018 годах в очагах ящура, возникших у вакцинированного крупного рогатого скота, свидетельствующие о том, что чаще всего первые очаги заболевания ящуром были зарегистрированы у молодняка до 17-месячного возраста. В Российской Федерации противоящурная вакцинация проводится в защитной зоне (зоне профилактической вакцинации). При контроле эффективности вакцины и программы вакцинации в популяции иммунизированных животных проводится оценка уровня популяционного иммунитета - определение доли животных со специфическим уровнем антител. Определение популяционного иммунитета, нацеленное на обеспечение защиты посредством вакцинации, является основой поствакцинального мониторинга, так как оно является ключевым показателем того, насколько хорошо проведена вакцинация и возможна ли защита животных от инфицирования. Для выяснения причин заболевания ящуром был проведен анализ данных исследований сывороток крови, отобранной в 2004-2018 годах от вакцинированного против ящура молодняка крупного рогатого скота. В сыворотках крови животных, отобранных через 25-89 дней после вакцинации, противоящурные антитела были выявлены в 54-64% проб. Полученные данные свидетельствуют о необходимости пересмотра схемы вакцинации против ящура молодняка крупного рогатого скота и учета этой группы животных при проведении мониторинговых исследований сывороток на наличие поствакцинальных антител.

Ключевые слова: ящур, крупный рогатый скот, молодняк, противоящурная вакцинация, сыворотка крови, противоящурная буферная зона, колостральные антитела, плацента, превалентность противоящурных антител, популяционный иммунитет.

Читайте также: