Онкобелок е7 вируса папилломы человека

Онкогенные типы ВПЧ вызывают рак шейки матки, но заболевают не все?!

Этот постулат верен, но как определить заболеет та или иная женщина раком шейки матки или нет. Всем известно, что онкогенные вирусы ВПЧ поражают шейку матки и вызывают злокачественное перерождение тканей, но при этом сложно определить, сколько пройдет времени между инфицированием и дисплазией-началом процесса малигнизации. И начнется ли предраковый процесс или все завершится самоочищением от ВПЧ?

Этот вопрос не столь важен для пациенток старшего возраста, так как уже малейшие изменения в шейке матки, выявленные при кольпоскопии или цитологическом исследовании, могут служить поводом к проведению радиоволновой эксцизии. Ведь единственным осложнением данной манипуляции может служить рубцовая деформация шейки матки, что абсолютно ни на что не влияет, если женщина не планирует детей.

К сожалению, рак шейки матки, болезнь молодых женщин, а в этом возрасте подобные изменения могут привести к невынашиванию беременности( что бывает редко, но все таки) , в том числе на поздних сроках и тяжелым разрывам шейки матки в родах. Поэтому данная агрессивная тактика не всегда оправдана у женщин репродуктивного возраста.

Кольпоскопия, цитология и гистологическое исследование после биопсии шейки матки могут помочь определить уже совершившиеся изменения, и гипотетически предположить ход дальнейшего течения болезни. Ведь процесс трансформации от начальных проявлений до рака может длиться годами и десятилетиями.

При наличии дисплазии степеней 2,3, тем более Ca in situ, дальнейшая тактика уже вопросом не является, в данной ситуации помогут только эксцизионные (методы иссечения патологических тканей) методы.

Сложнее дело обстоит с незначительными изменениями, например лейкоплакией или дисплазией 1.

Все это определяет необходимость поиска новых методов диагностики, которые позволили бы выявить, как долго у данной конкретной пациентки будет развиваться процесс трансформации здоровых клеток в раковые, для своевременного принятия решения о дальнейшей тактике- наблюдении или вмешательстве.

Онкобелки

В настоящее время выявлены структуры, которые сопровождают процесс озлокачествления, способные служить маркерами активности данного процесса. Самым важным из них на сегодняшний день является Онкобелок Е7.

Экспрессия белка Е7 играет ключевую роль в репликации ВПЧ.

В последние годы предпринимаются небезуспешные попытки создания противовирусных препаратов, направленных на подавление функций онкобелка Е7.

На сегодняшний день профилактику неопластических процессов шейки матки возможно проводить здоровым женщинам с наличием латентной формы ВПЧ-инфекции, особенно в тех случаях, когда в цервикальном материале определяется Е7, даже при отсутствии каких-либо изменений на шейке матки.

Наличие данного белка может свидетельствовать о том, что на биохимическом уровне процесс малигнизации запущен и требует "активной" тактики в отношении таких пациенток, а не “пассивного” наблюдения.

Еще одним важнейшим путем применения данной диагностики является контроль после лечения шейки матки.

При этом, оставшийся в тканях после применения деструктивных методов, ВПЧ, являясь сильнейшим канцерогеном, вновь может провоцировать развитие неопластических процессов в цервикальном эпителии путем интеграции в клетки и выработки онкобелков. Поэтому при наблюдении за женщинами, перенесшими хирургическое лечение, включая криотерапию и лазеровапоризацию по поводу диспластических процессов шейки матки, целесообразно определять концентрацию онкобелка Е7. Наличие Е7 должно являться показанием к проведению патогенетической противорецидивной терапии.

Некоторые вопросы о онкобелке Е7 и диагностике рака шейки матки

Вопрос: положительный Е7 у меня вот какая ситуация:впч 16 положительно в количестве 5,02 (это после лечения!) и онкобелок Е7 положительно. Дисплазии, говорят нет. А каким анализом определяется дисплазия? кольпоскопия тоже не показала изменений. биопсию не делали, потому что говорят: нет видимых изменений, не понятно, откуда брать биопсию. есть видимо эрозия. мне предлагают вырезать с помощью радиоволнового метода.мы хотели завести второго ребенка, но врач говорит, что нужно сначала операцию произвести..меня удивляет, что собираются резать, но при этом биопсию "взять не от куда". что вы думаете? неужели едиственный выход - операция?

Ответ: Здравствуйте. В любой спорной ситуации, тем более, когда речь идет о вмешательстве на уровне радиоволнового лечения, лучше подобные вопросы решать на очной консультации. Подтвердить или опровергнуть наличие дисплазии можно только путем биопсии с последующим гистологическим исследованием. Для определения места забора материала используется метод прицельной биопсии при расширенной видеокольпоскопии, если изменений нет, то ткани можно также забрать из различных участков шейки матки, есть методики, при которых травматизация шейки минимальна.

Онкобелок и ВПЧ говорят о наличии в организме условий для развития онкологических процессов в шейке матки, а не о их наличии, то есть предпосылки развития, а не сама болезнь.

Вопрос: У меня выворот шейки матки врожденный (это кажется называется эктропион). с такой шейкой я уже родила одного ребенка. но сейчас на фоне высокой активности ВПЧ16 и наличия Е7 врач говорит, что велика вероятность рака во время беременности. мне это очень сомнительно при том, что в норме кольпоскопия, флора и цитология. а если сделать радиоволновую эксцизию, то ведь насколько я понимаю и беременность можно будет планировать уже через месяц, и эксцизия будет считаться и прицельной биопсией, ведь так? или все-таки лучше сделать отдельно биопсию (разве радиоволновая хирургия не самая щадящая? так хорошо про нее пишут) и расширенную кольпоскопию (как я понимаю, эти две процедуры будут совмещены?). и при хороших результатах оставить шейку в покое до послеродов? и еще вопрос: могут ли быть изменения в шейки выше того места, куда дотягивается кольпоскоп? и как о них узнать? может УЗИ?

Ответ: Эксцизия-удаление значительной части шейки матки. Тактика и решение о деструкции может быть принято с учетом прицельной биопсии, данных кольпоскопии, цитологического и гистологического исследования. Процесс малигнизации длится годами.

Вопрос: Положительный Е7. подскажите пожалуйста, является ли положительный онкобелок Е 7 для ВПЧ 16 показанием для эксцизии? если кольпоскопия изменений в шейке не показывает, мазок в норме, цитология в норме (в связи с этим отказываются делать биопсию

Ответ: Здравствуйте. Не является. Наличие этого белка свидетельствует о высоком риске развития у вас рака шейки матки, но необходимо заметить, что даже от этапа дисплазии до рака шейки матки могут пройти годы или десятилетия. Если противовирусная терапия неэффективна, то в любом случае деструктивные методы вам показаны.

Вопрос когда, в репродуктивном возрасте особенно важно сохранить целостность шейки матки, так как это влияет на вынашивание беременности, поэтому предпочтение отдается малотравматичным методам или динамическому наблюдению. Эксцизия в данной ситуации самый простой способ, но и самый травматичный.

Если мы говорим о старшем возрасте, тогда желательно провести эксцизию, причем обширную, с обязательной противовирусной терапией и дальнейшим наблюдением.

В любом случае формально без какого-либо диагноза, а просто опираясь на лабораторные показатели, проводить то или иное вмешательство нельзя.

Определить наличие дисплазии, ее степени или тем более рака шейки матки можно только путем цитологического и гистологического исследований.

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Пестрикова Татьяна Юрьевна, Панфилова Юлия Олеговна

Проведен сравнительный анализ результатов общеклинического, гинекологического, а также лабораторно-диагностических методов обследования у 135 пациенток с хроническим цервицитом. Пациентки были распределены нами на 3 группы. В 1-ю группу вошли 49 женщин с хроническим цервицитом на фоне вируса папилломы человека 16 и 18-го типа в цервикальном канале. У 12 пациенток 1-й группы было выявлено наличие белка Е7. Вторую группу составили 32 пациентки с хроническим цервицитом и вирусом папилломы человека 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 6 и 11-го типов в цервикальном канале. В 3-ю группу вошли 54 пациентки с хроническим цервицитом без наличия папилломавирусной инфекции в цервикальном канале.

E7 oncoprotein as a marker for persistence of human papillomavirus infection in patients with chronic cervicitis

A comparative analysis of the results of clinical, gynecological and laboratory diagnostic methods of examination in 135 patients with chronic cervicitis. Patients were divided into 3 groups. Group 1 included 49 women with chronic cervicitis on the background of human papillomavirus types 16 and 18 in the cervical canal. In 12 patients of group I revealed the presence of E7 protein. Group 2 consisted of 32 patients with chronic cervicitis and human papillomavirus types 11 and 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 6 in the cervical canal. The group 3 included 54 patients with chronic cervicitis without the presence of human papillomavirus infection in the cervix.

Онкобелок Е7 - маркер персистенции папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим цервицитом

Т.ЮЛестрикова1, Ю.О.Панфилова1'2 'ГБОУ ВЛО Дальневосточный государственный медицинский университет Минздрава России, г. Хабаровск;

2КГБУЗ Городская больница, г. Уссурийск

Проведен сравнительный анализ результатов общеклинического, гинекологического, а также лабораторно-диагностических методов обследования у 135 пациенток с хроническим цервицитом. Пациентки были распределены нами на 3 группы. В 1-ю группу вошли 49 женщин с хроническим цервицитом на фоне вируса папилломы человека 16 и 18-го типа в цервикальном канале. У12 пациенток 1-й группы было выявлено наличие белка Е7. Вторую группу составили 32 пациентки с хроническим цервицитом и вирусом папилломы человека 31, 33,35,39,45,51,52,56,58,59,6 и 11-го типов в цервикальном канале. В 3-ю группу вошли 54 пациентки с хроническим цервицитом без наличия папилломавирусной инфекции в цервикальном канале.

Ключевые слова: хронический цервицит, вирус папилломы человека, онкобелокЕ7, кольпоскопия.

E7 oncoprotein as a marker for persistence of human papillomavirus infection in patients with chronic cervicitis

TYPestrikova, J.O. Panfilova

A comparative analysis of the results of clinical, gynecological and laboratory diagnostic methods of examination in 135 patients with chronic cervicitis. Patients were divided into 3 groups. Group 1 included 49 women with chronic cervicitis on the background of human papillomavirus types 16 and 18 in the cervical canal. In 12 patients of group I revealed the presence of E7 protein. Group 2 consisted of 32 patients with chronic cervicitis and human papillomavirus types 11 and 31,33,35,39,45,51,52,56,58,59, 6 in the cervical canal. The group 3 included 54 patients with chronic cervicitis without the presence of human papillomavirus infection in the cervix.

Key words: chronic cervicitis, human papilloma virus E7 oncoprotein colposcopy. Сведения об авторах

Пестрикова Татьяна Юрьевна - д-р мед. наук, проф., зав. каф. акушерства и гинекологии ГБОУВПО ДВГМУ

Панфилова Юлия Олеговна - аспирант каф. акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО ДВГМУ, врач акушер-гинеколог КГБУЗ Городская больница. E-mail: [email protected]

Важная роль в возникновении предраковых состояний принадлежит инфекционным агентам, среди которых первое место занимает вирус папилломы человека (ВПЧ). Большинство случаев инфицирования ВПЧ заканчиваются спонтанным выздоровлением, однако в некоторых случаях развивается персистирующая инфекция, которая способна запускать процессы клеточной трансформации [1, 2]. Для развития неоплазий необходимо встраивание вирусной ДНК ВПЧ в геном эпителиальной клетки, что сопровождается синтезом ранних белков ВПЧ - Е6 и Е7. Онкогены Е6 и Е7 всегда выявляются в опухолевых клетках, зараженных ВПЧ, в то время как другие фрагменты вирусного генома могут быть утеряны в процессе его длительной персистенции [3, 4]. Персистирую-щее течение папилломавирусной инфекции (ПВИ) уроге-нитального тракта сопровождается экспрессией онкобелка Е7 в 10,4 раза чаще, чем при транзиторном течении [5, 6]. Продолжительная продукция этих белков часто сопутствует переходу дисплазии в инвазивный цервикальный рак, что делает Е6 и Е7 наиболее привлекательными маркерами для определения риска развития рака шейки матки. Таким образом, можно считать, что онкобелок Е7 ВПЧ 16 и 18-го типов является важным фактором канцерогенеза. В качестве перспективного метода диагностики ПВИ рассматривают определение онкобелков Е6 и Е7 в соскобах шейки матки, что позволяет дифференцировать стадию вирусного процесса [7].

Цель работы - проведение анализа и оценка значимости онкобелка Е7 в течении ПВИ у женщин с хроническим цервицитом (ХЦ).

Материалы и методы

вошли 49 женщин с ХЦ и наличием ВПЧ 16 и 18-го типа в цервикальном канале, 2-ю группу составили 32 пациентки с ХЦ и наличием в цервикальном канале ВПЧ 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 6 и 11-го типов, в 3-ю группу вошли 54 пациентки с ХЦ без наличия ПВИ в цервикальном канале.

Для цитологического исследования материал забирали из цервикального канала, переходной зоны и эндоцер-викса с помощью одноразовой щеточки. Оценку результатов цитологического исследования производили согласно классификационной системе Папаниколау в соотношении с классификацией Бетесда. Диагностика ПВИ у женщин проводилась методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Осуществлялись типирование ВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 6 и 11-й типы) и определение клинически значимой концентрации 16 и 18-го типов ВПЧ в режиме реального времени для определения вирусной нагрузки (количество копий генетического материала вирусного патогена в анализируемом объеме). Для определения онкобелка Е7 у пациенток с ВПЧ 16 и 18-го типов с чувствительностью порядка 1 нг/мл использовали диагностические тест-системы иммуноферментного анализа (ИФА).

Осмотр шейки матки проводился при помощи зеркал и расширенной кольпоскопии. Расширенную кольпоскопию проводили по общепринятой методике на аппарате Olympus 500. Интерпретация кольпоскопической картины осуществлялась по Международной классификации кольпо-скопических терминов Рио-де-Жанейро (2011 г.). Это позволило выявить аномальные кольпоскопические картины (мозаика, пунктация, ацетобелый эпителий, атипичные сосуды) и другие образования (кондиломы, полипы) шейки матки. Гистологическое исследование проводилось по общепринятой методике.

Верификация диагноза у пациенток с ХЦ была основана на данных клинического, лабораторного (цитологического, ПЦР, ИФА-диагностики) обследования, а также данных кольпоскопии и результатах гистологического исследования. Полученные результаты свидетельствовали о том,

Таблица 1. Характеристика клинических симптомов у пациенток групп обследования

Жалобы 1-я группа 2-я группа 3-я группа

Нет 17 34,7±6,8*** 14 43,75±8,77 41 75,93±5,82

Бели 32 65,31±6,8*** 18 56,25±8,77 13 24,07±5,82

Боли 12 24,49±6,14 11 34,38±8,4 8 14,82±4,84

Зуд жжение 24 48,98±7,14*** 22 68,75±8,19 7 12,96±4,57

Контактные кровянистые выделения 7 14,29±4,5 3 9,38 - -

***р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Параметры 1-я группа 2-я группа 3-я группа

pH 4,5 1 2,04 1 3,13 5 9,26±3, 94

4,5 42 85,72±5,0*** 26 81,25±7,66* 30 55,56±6,76

Лейкорея 30 61,23±6,96** 17 53,13±8,82 18 33,34±6,42

Дрожжеподобные грибы 26 53,07±7,13 18 56,25±8,77 26 48,15±6,8

Здесь и в табл. 3, 4: *р Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

У пациенток 2-й группы с одинаковой частотой (3,13%,) встречались ВПЧ 39, 45, 58, 59-го типов. ВПЧ 33, 35-го типов был выявлен в 6,25% случаев, 56-го типа - в 9,38%, 31 и 52-го - в 12,50±5,84%. ВПЧ 51-го типа был определен у 15,63±6,42% пациенток. ВПЧ 6-го типа встречался у 4 (6,9±3,33%) пациенток, а 11-го - у 3 (5,17%).

Ассоциация нескольких типов ВПЧ составила 25,0±7,66%. Частота выявленного нами у пациенток ВПЧ

Таблица 4. Результаты кольпоскопического исследования у пациенток с ХЦ

1-я группа 2-я группа 3-я группа

'Нормальная кольпоскопическая картина: ЦЭ, ОПЖ, ЗПЖ б 10,21±4,32*** 1б 4б,88±8,82 34 б2,9б±б,б7

Аномальная кольпоскопическая картина 33 67,3б±б,7*** 10 31,2б±8,19 8 14,81±7,3б

Степень поражения CIN I 24 48,98±7,14*(***) 8 2б±7,бб 8 14,81±7,3б

Степень поражения CIN II 9 18,37±б,б3* 2 б,2б -

Кондиломы б 10,21±4,32 б 1б,63±б,42 - -

Подозрение на инвазию 4 8,1б±3,91 - - -

Полипы шейки матки 2 4,09 2 б,2б 4 7,41±3,бб

Примечание. ЦЭ - цервикальная эктопия; ОПЖ - открытые протоки желез; ЗПЖ - закрытые протоки желез.

Таблица 5. Результаты морфологического исследования биопсии шейки матки у пациенток с ХЦ

1-я группа 2-я группа 3-я группа

Эндоцервикоз 30 61,22±6,96 22 68,7б±8,19 1б 27,78±6,1

Лейкоплакия 3 6,12 2 б,2б 3 б,бб

Кондиломы 2 4,08 3 9,38 - -

CIN I 4 8,16±4,01 3 9,38 2 3,7

CIN II б 12,25±4,68 2 б,2б - -

Рак in situ 1 2,04 - - - -

Инвазивный рак 1 2,04 - - - -

Биопсия не проводилась - - - - 34 б2,9б±б,б7

16, 31, 52, 56-го типов совпадала с данными других исследований [8].

В 1-й группе у 12 (24,49±6,14%) пациенток при обследовании был выявлен онкобелок Е7. У всех пациенток 1-й группы с наличием онкобелка Е7 клинически значимая концентрация вируса была в пределах (3,6±0,3 до 6,8±0,1 lg копий).

При анализе результатов кольпоскопичекой картины (табл. 4) нормальная кольпоскопическая картина была выявлена у 5 (10,21±4,32%) пациенток 1-й группы, у 15 (46,88±8,82%) женщин 2-й группы, у 34 (62,96±6,57%) пациенток 3-й группы (p Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

9 (18,37±5,53%) пациенток - степени поражения II (p

Рак шейки матки – достаточно распространенное онкологическое заболевание женщин. Данное заболевание удерживает шестую позицию в мире в структуре всей онкопатологии женщин. В некоторых странах (Япония, Бразилия, Индия) рак шейки матки составляет до 80% от всей онкологической заболеваемости женской половой сферы. В России рак шейки матки (РШМ) встречается с частотой примерно 11 случаев на 100 тысяч населения, в США – около 13, в Японии – около 22, в Индии – около 43, в Бразилии – около 80 случаев.

В последние годы выявлены некоторые факторы риска, повышающие вероятность возникновения рака шейки матки:

Вирус папилломы человека (ВПЧ). Основную роль в возникновении рака шейки матки играет вирус папилломы человека (ВПЧ), 60% случаев заражения которой происходит уже при однократном половом контакте. Частота ВПЧ-инфекции зависит от сексуального поведения: она повышается при раннем начале половой жизни и весьма распространена у женщин, ведущих активную половую жизнь с частой сменой партнеров. При заражении ВПЧ риск заболеть раком шейки матки увеличивается в 250 раз.

В настоящее время идентифицировано более 100 типов ВПЧ, 80 из которых хорошо описаны. По степени злокачественности папилломавирусы подразделяют на 2 группы:

ВПЧ высокого онкогенного риска, из них наиболее распространенные в России 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы;
ВПЧ низкого онкогенного риска, к ним относятся 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81 и др. типы.

Однако инфекция ВПЧ не полностью объясняет причину развития рака шейки матки, так как не у всех женщин с такой инфекцией возникает рак.

Курение. При курении появляются канцерогенные вещества, повреждающие ДНК клеток шейки матки, что может способствовать развитию рака.

Дефицит иммунной системы. Иммунная система защищает нас от рака. Различные инфекционные заболевания делают иммунную систему женщины менее способной сопротивляться вирусу папилломы человека и раннему раку шейки матки.

Плохое питание с низким потреблением фруктов и овощей также повышает риск развития рака шейки матки.

Применение скрининговых программ обследования населения позволяет выявлять заболевание на стадии предрака или на начальной форме рака. Решающую роль в постановке точного диагноза имеет правильное проведение различных диагностических манипуляций.

Ведущим диагностическим скрининговым тестом при массовых обследованиях населения считается цитологическое исследование мазков с шейки матки и цервикального канала, позволяющее заподозрить патологические изменения на шейке матки у женщин любой возрастной группы (метод диагностики по Папаниколау – код по бланку 14.11.) – (см. статью Диагностика для предупреждения развития онкозаболеваний в гинекологии). Материал для цитологического исследования получают из зоны переходного эпителия таким образом, чтобы в нем оказались клетки не только поверхностного, но и глубоких слоев.

При выявлении патологии в цитологическом исследовании назначаются диагностические мероприятия, направленные на выявление папилломавирусной инфекции – генетическое тестирование на присутствие вирусов с определением их онкогенности и определение онкобелка Е7 в цервикальной слизи – код по бланку 8.16.

Очень чувствительной является ПЦР (полимеразная цепная реакция), позволяющая выявлять вирусные последовательности в геноме клеток опухолей шейки матки в 95–100% случаев, определить наличие высокоонкогенных типов ВПЧ. Однако знание о наличии мизерных количеств ДНК ВПЧ, полученное методом ПЦР в качественном исполнении, сегодня уже недостаточно для клинической практики, поскольку большинство женщин, особенно молодых, могут оказаться ВПЧ-позитивными. Кроме того, 70% вирусоносительства разрешается спонтанно, и сделать прогноз течения папилломавирусной инфекции на основе ПЦР невозможно. В последние годы разработаны методы, позволяющие определить активность ВПЧ и определить вирусную нагрузку.

Наличие онкобелка Е7 в цервикальных пробах может рассматриваться как однозначное свидетельство начавшегося процесса малигнизации эпителиальных клеток (перерождение в злокачественные), содержащих ВПЧ. Неоспоримым достоинством Е7 как онкомаркера является и то, что в норме этот белок в тканях не синтезируется. Его происхождение полностью связано с жизненным циклом интегративной формы ВПЧ-инфекции. Так же преимуществом метода является то, что берется материал непосредственно из органа-мишени.

В настоящее время внедрен метод, позволяющий определить вирусную нагрузку – ВПЧ Digene-тест – код по бланку 19.75, который имеет несомненные преимущества, так как позволяет не только выявить 13 высокоонкогенных типов ВПЧ, но и определить клинически значимую концентрацию ДНК в ткани, которая может служить прогностическим критерием развития заболевания и определить тактику врача в каждой конкретной ситуации.

Преимуществами ВПЧ Digene-теста являются его прогностическая ценность (99%), чувствительность (свыше 95%), высокая специфичность. ВПЧ Digene-тест единственный в мире лабораторный тест, позволяющий достоверно определить предрасположенность к раку шейки матки.

ООО "Лаборатория Гемотест" может помочь в полной ранней диагностике онкологического заболевания шейки матки.

Автор Заведующая отделом
общеклинических исследований КДЛ ООО "Лаборатория Гемотест"
Дубровская Г.Е.

8 495 532 13 13 - центральный офис
8 800 550 13 13 - бесплатный звонок

Определение экспрессии онкобелка р16 и Ki 67 на поверхности эпителиальных клеток для скрининга рака шейки матки с помощью иммуноцитохимического исследования.

Белок р16; p16 INK4a ; онкопротеин; иммуноцитохимическое исследование.

Синонимы английские

р16 protein; p16 INK4a ; oncoprotein; immunocytochemical study.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок смешанный из цервикального канала и поверхности шейки матки.

Общая информация об исследовании

Рак шейки матки занимает третье место среди всех злокачественных заболеваний у женщин в мире ипервое место в структуре онкологической заболеваемости женщин 15-40 лет в Российской Федерации. К факторам риска развития рака шейки матки относится инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ или HPV) онкогенных серотипов HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35 и другие, а также хронические воспалительные гинекологические заболевания, инфекции, семейный онкологический анамнез, случаи рака шейки матки у родственников, иммунодефициты, курение.

В настоящее время основным методом скрининга рака шейки матки и предраковых состояний является цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала по Папаниколау (мазок по Папаниколау, Рар-тест). Несмотря на общедоступность, надежность и широкое применение, данный метод имеет ряд недостатков: отсутствие стандартных методов взятия биоматериала для исследования, что может привести к ложноотрицательным результатам в 20-30 % случаев, вероятность ложноположительных результатов в 5-70 % случаев, проблемы, связанные с повторным взятием материала. Усовершенствованный метод получения мазков с помощью метода жидкостной цитологии позволяет частично преодолеть недостатки традиционного метода. Кроме того, жидкостная цитология дает возможность выполнять молекулярные виды исследования, одним из которых является иммуноцитохимическое исследование.

Иммуноцитохимический метод – это метод молекулярной иммунологической диагностики, позволяющий идентифицировать клеточные и тканевые молекулы-антигены в результате их связывания с антителами и формирования комплекса "антиген-антитело". Данный метод позволяет проводить иммунологический анализ цитологического материала в условиях сохранения морфологии клеток.

В современной диагностике рака шейки матки иммуноцитохимическое исследование позволяет выявлять белок р16 (p16 INK 4 a ), а точнее его экспрессию на поверхности эпителиальных клеток. Исследованию могут быть подвергнуты отдельные мазки из шеечного канала (эндоцервикса) или с наружной поверхности шейки матки (экзоцервикса) или смешанный мазок, полученный при нанесении на одно предметное стекло биоматериала из эндоцервикса и экзоцервикса.

Белок р16 – это клеточный протеин, участвующий в регуляции клеточного цикла и являющийся ингибитором активности циклинзависимой киназы CDK4/6. В норме киназа неактивна и клеточная пролиферация инактивирована за счет наличия прочной связи фактора транскрипции E2F с белком-супрессором рRb. Белок р16 осуществляет контроль разобщения комплекса E2F-Rb, не допуская пролиферации клетки. В нормально функционирующих клетках синтез р16 сдерживается по механизму обратной связи и, следовательно, концентрация данного белка в нормальной клетке чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией. Онкобелок Е7 ВПЧ с высоким онкогенным риском посредством внутриклеточных механизмов приводит к разобщению комплекса E2F-рRb, активации CDK4/6 киназы, а впоследствии стимулирует чрезмерную клеточную пролиферацию. При этом повышается экспрессия белка р16, что проявляется положительной иммуноцитохимической реакцией мазков клеток.

Иммуноцитохимическое исследование онкобелка р16 позволяет достоверно дифференцировать опухолевую и неопухолевую дисплазии, а также обладает высокой диагностической чувствительностью. Известно, что экспрессия данного белка связана со слабовыраженной (CINI), умеренной (CINII) и резковыраженной дисплазией (CINIII) и внутриэпителиальным раком шейки матки. Он практически не обнаруживается в клетках плоского эпителия без признаков дисплазии (0-2 % случаев).

Таким образом, выявление экспрессии белка р16 INK 4 a иммуноцитохимическим методом в дополнение к рутинному методу жидкостной цитологии и окраски мазков по Папаниколау позволяет повысить чувствительность теста, выявлять персистирующую папиллома-вирусную инфекцию до появления морфологических изменений, с наибольшей точностью обнаружить риск развития рака шейки матки, своевременно поставить диагноз и назначить требуемое лечение.

Ki-67 – антиген раковой опухоли, который можно обнаружить в клетке, когда она делится, но в фазе покоя клеточного цикла он не определяется. Эта особенность Ki-67-маркера служит полезным индикатором прогноза поведения злокачественной опухоли. Тест проводится на образце ткани, полученном из опухоли в результате биопсии или оперативным путем. Тест Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях. Но большая доля исследований по определению его значения как маркера опухоли приходится на этот вид рака. Высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.

Для чего используется исследование?

Для скрининговой диагностики рака шейки матки и предраковых состояний у женщин;
для наблюдения женщин после лечения рака шейки матки, предраковых состояний, цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Когда назначается исследование?

При профилактическом обследовании женщин в возрасте 21-65 лет с интервалом 3 года и в возрасте 30-65 лет с интервалом 5 лет;

при обследовании женщин с высоким риском онкологических заболеваний, наличием рака шейки матки у родственников, с хроническими воспалительными и инфекционными гинекологическими заболеваниями;

при обнаружении положительных результатов на инфицирование ВПЧ онкогенных серотипов;

каждые 6 месяцев первые два года после лечения рака шейки матки или цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Что означают результаты?

Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени тяжести – воспалительные изменения, характерные для инфекции ВПЧ, слабая дисплазия эпителия (CINI).

Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени тяжести – умеренная дисплазия эпителия (CINII).

Тяжелая дисплазия эпителия и внутриэпителиальный рак шейки матки (CINIII).

Отсутствие плоскоклеточных интраэпителиальных поражений, тяжелой дисплазии и плоскоклеточного рака шейки матки – иммуноцитохимическая реакция отрицательная.

12 Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
10 Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
69 Лабораторные маркеры рака шейки матки
41 Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала - окрашивание по Папаниколау (Рар-тест) (смешанный мазок)
49 Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала - окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, врач общей практики, онколог, уролог, инфекционист, терапевт.

Читайте также: