Пцр анализ боткина гепатит с
Вирусный гепатит С относится к наиболее опасным и тяжело диагностируемым заболеваниям. Проблема в том, что нередко эта болезнь обнаруживается только на поздних стадиях ввиду того, что основной ее формой является хроническая, а ХГС проходит бессимптомно. Однако именно ранняя диагностика позволяет подобрать наиболее подходящее лечение, которое поможет навсегда забыть о вирусном воспалении печени.
Одним из самых универсальных способов определения ВГС является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Но что такое анализ ПЦР при гепатите С? В чем особенности этого тестирования? Чем анализ ПЦР на гепатит С качественный отличается от количественного? Как расшифровывается результат тестирования? Ответы на каждый из этих вопросов вы сможете найти в нашей статье.
Диагностика ВГС методом ПЦР
Полимеразная цепная реакция относится к наиболее распространенным и точным методам диагностики ВГС. Но что показывает ПЦР анализ на гепатит С? Результаты тестирования позволяют определить наличие флававируса в организме носителя, а также степень вирусной нагрузки в его организме.
Для анализа используется проба венозной крови пациента, взятой в день проведения исследования. Сдача ПЦР-теста на гепатит С рекомендуется следующим категориям лиц:
- Пациентам с обнаруженными иммуноглобулинами к антигенам возбудителя ВГС
- Женщинам в период беременности
- Работникам медицинских учреждений, постоянно контактирующим с инфицированными биологическими жидкостями
- Пациентам, в анамнезе которых числился ранее вылеченный вирусный гепатит
- Больным с явными симптомами поражения печени
Тест на гепатит С ПЦР может быть качественным или количественным. Оба метода активно используются при диагностике ВГС. Рассмотрим подробнее особенности качественного и количественного анализа ПЦР на гепатит С.
Качественная реакция проводится в том случае, если предварительно установленный диагноз ВГС требует подтверждения. Результаты тестирования бывают положительными и отрицательными. Положительная реакция указывает на наличие возбудителя инфекции в организме обследуемого. В свою очередь, отрицательный результат указывает либо на отсутствие патогена, либо на его несущественную концентрацию.
Что такое ПЦР при гепатите (анализ качественного типа)? Это тестирование, помогающее окончательно определить диагноз. Стоимость его проведения в Москве, в зависимости от клиники, варьируется в пределах от 1800 до 3000 рублей.
Кровь на количественную полимеразную цепную реакцию сдается в том случае, если диагноз уже установлен. Анализ позволяет определить патогенную нагрузку в организме больного на текущий момент. Таким образом, лечащий врач получает информацию о том, какая площадь печени поражена флававирусом и может подобрать необходимую в конкретном случае терапевтическую схему.
Чем выше показатели патогена в крови обследуемого, тем более серьезную стадию заболевания придется лечить. Стоимость количественной полимеразной цепной реакции в московских клиниках колеблется в пределах от 1800 до 4000 рублей в зависимости от выбора медучреждения.
Подготовка к тесту на гепатит С ПЦР
- За несколько суток до явки в лабораторию полностью отказаться от фаст-фуда и другой тяжелой и жирной пищи
- В течение 24 часа до сдачи анализа ПЦР на гепатит С не употреблять спиртные напитки и воздерживаться от курения
- В течение 8 часов до диагностики не принимать пищу
- В целях собственной безопасности, перед введением в вену инъекционной иглы проследить за тем, чтобы медработник использовал исключительно стерильный одноразовый шприц
Крови для полимеразной цепной реакции берется совсем немного. Поэтому после процедуры пациенту реабилитация не требуется. Поэтому сразу же после процедуры больной отправляется домой. Диагностика проводится в утренние часы.
Расшифровка анализа ПЦР
Расшифровка ПЦР-теста на гепатит С проводится в условиях медицинской лаборатории. Погрешность в итоговых результатах зависит от компетентности медработников, а также от того, насколько обследуемый следовал правилам подготовки к тестированию.
В случае расшифровки анализа ПЦР на гепатит С качественного, важно учитывать порог чувствительности реагентов, колеблющийся в пределах 10-500 МЕ/мл. У качественной полимеразной цепной реакции может быть только 2 результата:
- Положительный. Диагноз вирусный гепатит С подтверждается за счет обнаружения флававируса в крови больного. Концентрация патогена в плазме крови достаточна для постановки диагноза. Если диагностика проводилась после лечения, такой результат указывает на неэффективность терапии.
- Отрицательный. Патоген отсутствует, либо концентрация его в крови до крайности мала. Подобный результат не всегда указывает на отсутсвие инфекции. Обследуемому рекомендуется сдать дополнительные тесты на чувствительность к реагентам.
Чтобы выяснить, что показывает ПЦР анализ на гепатит С при количественном тестировании, необходимо отталкиваться от серединного показателя, равного 8х10^5 МЕ/мл (800 000 МЕ/мл).
Если уровень патогенной нагрузки ниже или равен среднему, больному назначается медикаментозная терапия на основе препаратов прямого противовирусного действия. Если же показатель выше 800 000 единиц, лечащему врачу придется подумать о более серьезных мерах борьбы с ВГС. Возможно, больному понадобится трансплантация печени.
Определение вирусного гепатита С методом ПЦР проводится во многих медучреждениях столицы. При этом пройти тестирование можно как в стационарных, так и в амбулаторных условиях.
Гепатит А коварен тем, что заразившийся представляет угрозу для окружающих последние пять дней инкубационного периода, когда заболевание протекает в скрытой форме. Люди с хорошим иммунитетом переносят болезнь Боткина легко, без желтушности, при этом так же активно высевают вирус, по нескольку миллиардов в сутки, для заражения хватит 100 особей.
По симптомам заболевания печени схожи с проявлениями ОРВИ, поэтому присутствие в крови патогена заподозрить всё-таки можно, особенно если был контакт с выявленным больным, или человек находился в зоне возможного поражения. Вирус гепатита А живуч, длительное время живет на поверхностях, к которым прикасался больной, в воде он спокойно существует до 10 месяцев.
Показатели крови меняются, если печень поражена. Выявить присутствие патогена помогает анализ на гепатит А. По результатам несложно установить факт заражения. Специальные маркеры определяют в крови вирусы гепатита А, антигены к заболеванию, их концентрацию. Исследования проводятся в диагностических и профилактических целях, в первую очередь обследуют людей группы риска.
О чем я узнаю? Содержание статьи.
Какие анализы крови сдаются на гепатит А?
На нарушения работы печени указывают отклонения некоторых показателей от нормы общего анализа крови, когда кровь берут из пальца. При воспалительном процессе любой этиологии изменяется скорость осаждения эритроцитов.
Развернутую картину состояния здоровья позволяют получить биохимические исследования проб, взятых из вены. Например, билирубин: по его концентрации судят о присутствии патологических изменений в паренхиме. На заболевание указывают сразу несколько показателей. Но установить факт заражения по биохимическому анализу нельзя.
Вирус гепатита А выявляется по ферментам, которые организм начинает выделять, когда патоген попадает в гепатоциты. С большой точностью определяют гепатит А анализы:
- Anti-HAV-IgG на наличие анител класса IgG, они появляются в крови когда организм начинает противостоять вирусу гепатита А и после прививок, когда вырабатывается иммунитет;
- Anti-HAV-IgM выявляет антитела класса IgM, их количество возрастает в период заболевания, резко снижается при выздоровлении;
- тест на РНК-вирус, этот генетический анализ проводится методом ПЦР (полимеразная цепная реакция), исследуется сыворотка крови.
Кому необходимо сдавать анализы?
Существует утвержденный Минздравом список лиц, которые регулярно проходят обследования, это:
- сотрудники медицинских учреждений;
- кадровый состав и учащиеся образовательных учреждений (детских садов, школ, специализированных учебных заведений);
- специалисты, контактирующие с неорганизованными детьми в группах их дневного пребывания;
- работники интернатов;
- люди, занятые в сфере торговли, общепита, переработки продуктов питания;
- военнослужащие и гражданские лица, служащие в исправительных учреждениях.
Кровь на гепатит А сдают:
- беженцы;
- лица, находящиеся в очаге возможного заражения (когда выявляются случаи заболевания, обследуют родственников заразившегося, соседей, коллег по работе или учебе);
- люди, устраивающиеся на работу в детские учреждения, школы, другие предприятия, где требуется санитарная книжка;
- сотрудники, выезжающие в командировки в страны с высоким уровнем заболеваемости гепатитом;
- туристы, посещающие страны Ближнего востока, Африки;
- люди, проживающие в районах, где канализационные стоки попали в питьевой водоем, вышла из строя система хозпитьевого водоснабжения.
В группе риска находятся и другие категории граждан, которым рекомендуется анализ крови на гепатит:
- люди, пренебрегающие правилами личной гигиены;
- любители орального секса, гомосексуалисты;
- асоциальные элементы, проживающие в антисанитарных условиях;
- жильцы общежитий, сотрудники учреждений, контактирующие с большим числом посетителей.
ИФА на гепатит А
От болезни Боткина нет лекарственных средств, больному снимают интоксикацию, поддерживают защитные функции организма. Иммунитет самостоятельно вырабатывает антитела или они вводятся в процессе вакцинации. Они бывают двух типов, сначала появляются антивирусы IgM, затем IgG. Определяются они иммуноферментным анализом Anti-HAV.
Как оцениваются результаты исследований:
- при отсутствии возбудителя в крови не обнаруживаются АНТИ-HAV IgM, АНТИ-HAV IgG;
- когда вырабатывается иммунитет, у человека отрицательный результат теста АНТИ-HAV IgM, положительный на присутствие IgG-антител;
- если в крови одновременно есть антигены IgM и IgG, организм заражен вирусом гепатита А.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Качественную и количественную оценку вируса гепатита А позволяет получить анализ методом ПЦР. Ген в специальной питательной среде с содержанием особых ферментов заставляют искусственно размножаться, чтобы затем определить генотип вируса: 1а, 1b или 1с. Существует два типа анализа ПЦР:
- качественный определяет наличие штамма в крови, положительный ПЦР говорит о заболевании,
- отрицательный ПЦР у здоровых людей;
- количественный анализ позволяет определить концентрацию вируса, этот показатель характеризует степень опасности инфицированного для окружающих.
Метод ПЦР выявляет заболевание на ранних стадия, когда нет внешних проявлений желтухи. Когда гепатит А протекает в латентной форме, вовремя выявить вирус гепатита А очень важно, распространение болезни происходит молниеносно, особенно в контактных группах. Изолировав больного, можно предотвратить эпидемию.
Общий (клинический) анализ крови
Результаты помогают в постановке предварительного анализа, у больного снижается уровень гемоглобина, меняется показатель свертываемости – уровень тромбоцитов падает, количество эритроцитов увеличивается, лейкоциты, наоборот, быстро разрушаются.
Каких-то характерных изменений при гепатите А в анализе не выявляется. Можно судить только об интоксикации, ухудшении состояния здоровья зараженного. Такая клиническая картина характерна для многих заболеваний.
Отклонения от норм являются поводом проводить дальнейшие исследования. Какие показатели общего анализа крови при гепатите А считаются нормальными, указано в таблице.
Результаты ОАК при гепатите А
Показатель
(концентрация стандартная, указанная в бланках)
дети до 3 лет
дети от 3 до 12 лет
Возрастная группа:
лица, старше 12 лет
Биохимический анализ крови
Венозная кровь исследуется после проведения общего анализа крови или одновременно с ним. При попадании вируса меняется белковый состав крови, концентрация микроэлементов. По биохимии можно судить о патологических процессах в печени, есть показатели, отклонение от нормы которых характерны только для пораженной паренхимы.
На что обращают внимание в анализе на гепатит А (расшифровка показателей):
- Концентрация билирубина (нормой считается 20,5 мкмоль/л), он утилизируется здоровыми клетками печени. Если орган работает не в полной мере, вещество накапливается в крови, в результате у человека желтеют склеры, глазные яблоки, кожа.
- Показатель АЛТ, (у здорового человека он в пределах 500 МЕ/л), при заболевании печени концентрация достигает 3000 МЕ/л, чем больше степень поражения паренхимы, тем выше концентрация белка АЛТ или АЛаТ.
- Уровень АСТ (норма 34-41 МЕ/л), когда этот белок хуже выводится из организма, концентрация его в крови возрастает. Одной из причин плохой утилизации является инфекционное поражение печени.
- Общий белок (у взрослых людей его должно быть не меньше 65 г/л, не больше 84 г/л), отклонение от нормы в любую сторону говорят о патологии, при воспалительных процессах в организме, в том числе и в печени, норма общего белка превышена.
- Альбумин (нормой считается концентрация в диапазоне 35–50 г/л), он ферментируется печенью, если паренхима поражена, уровень альбумина падает. Этот показатель очень характерен для гепатита А, так как вирус гепатита А заселяется в гепатоциты, уничтожает их. Некротические клетки в дальнейшем вызывают воспаление. По снижению альбумина можно заподозрить заболевание на ранних стадиях и при латентной форме течения.
Как сдавать анализы на гепатиты?
Точность исследований напрямую зависит от подготовки пациента к взятию проб. Речь идет не только сдаче анализа на голодный желудок. За сутки до забора крови людям с подозрениями на гепатит А не рекомендуется:
- употреблять жирную пищу;
- есть консервации и салаты с большим содержанием уксуса;
- исключить специи, особенно с желчегонными свойствами;
- отказаться от употребления спитросодержащих напитков любой крепости;
- снизить по минимума прием медикаментов, исключить БАДы, витаминные комплексы, на лекарства от диабета, гипертонии, сердечных заболеваний запрет не распространяется.
За 8 часов до анализов необходимо полностью отказаться от еды. При выполнении этих правил пациентом результаты исследований будут отражать реальную картину состояния его здоровья.
Сколько делается анализ на гепатит А?
Существуют специальные правила забора крови, ее транспортировки в лабораторию, в них же указывается, сколько времени делают анализ на гепатит А. Для проведения общего анализа крови требуется до 2 рабочих дня, превышение этого срока считается нарушением. Обычно результаты готовы уже к вечеру. Для проведения биохимического анализа отводится неделя.
Методы, требующие предварительной подготовки биологических жидкостей, оттягивают процесс получения результатов, сроки их получения могут затягиваться 10 дней.
Существуют методы экспресс-тестирования, когда забор крови производится для определения одного из показателей.
Гепатиты представляют собой серьезные заболевания, которые при неблагоприятном стечении обстоятельств могут приводить к раку печени, циррозу или печеночной недостаточности. В основе патологии лежат воспалительные процессы, обусловленные инфекционными или токсическими поражениями печени. Распространению гепатитов в обществе способствуют наркомания, алкоголизм, беспорядочные половые связи и низкое качество медицинских услуг.
Ключевым фактором в успешном лечении заболевания является его ранняя и точная диагностика при помощи лабораторных исследований крови. Рассмотрим основные виды анализов, которые необходимо сдать, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие гепатита.
Какой анализ сдать? Маркёры вирусных гепатитов
Анализ может сдать любой желающий. Также пройти обследование рекомендуется лицам, у которых наблюдаются желтушность, изменение цвета экскрементов, слабость, тошнота, утрата аппетита, лихорадочные состояния, суставно-мышечные боли, тяжесть в правом подреберье. Если клинические симптомы вирусного гепатита отсутствуют, основанием для анализов являются повышенные концентрации внутриклеточных ферментов АсАт и АлАт, холестаз (уменьшение выделения желчи в двенадцатиперстную кишку) и контактирование с инфицированными гражданами. Обязательно сдавать кровь должны сотрудники медицинских учреждений, больные, которым предстоят операции, доноры крови и беременные женщины.
Гепатит A (болезнь Боткина) передается через жидкости организма, продукты питания, воду и предметы быта. Патология может протекать в острой, подострой и субклинической (бессимптомной) формах. Она считается самой доброкачественной из всех форм инфекции и практически не вызывает хронических поражений печени. Смертность составляет менее 0,4%. Чаще всего симптомы патологии исчезают за 2 недели, а период восстановления функций печени не превышает 1,5 месяцев. Заболеваемость в странах СНГ составляет 20–50 человек на 100 000 населения.
Для диагностики проводятся следующие качественные методы исследования сыворотки крови:
- определение специфичных участков РНК вируса в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени – обеспечивает 100% точность результата;
- иммуноглобулины класса М–IgM обнаруживаются при первых клинических симптомах и далее 90–180 дней вплоть до полного выздоровления;
- антитела класса G–IgG начинают вырабатываться во время болезни и остаются в организме навсегда. Исследование сыворотки крови на данные маркёры гепатита А может проводиться в целях контроля проведенной вакцинации, поскольку эти антитела показывают наличие иммунитета к заболеванию.
Гепатит B вызывается вирусом Hepadnaviridae, передается половым путем или через кровь. Протекает в острой и хронической формах. Он приводит к значительному поражению печени, а нередко – к циррозу или раку. В данный момент около 300 млн людей на планете являются носителями этой инфекции. Для уточнения диагноза следует сделать такие тесты:
- качественные или количественные анализы на антиген HBsAg, а также антитела Anti-HBc IgG, которые есть у больных, выздоровевших лиц и здоровых носителей. Содержание HBsAg в плазме крови у здорового человека не превышает 0,05 МЕ/мл;
- качественные тесты на белок HBeAg и антитела Anti-HBc IgM, свидетельствующие об остром течении болезни;
- определение ДНК вируса методом ПЦР в режиме реального времени.
Гепатит C считается самым распространенным и наиболее опасным среди всех разновидностей заболевания. Часто он протекает бессимптомно на начальных стадиях и обнаруживается только при появлении таких серьезных осложнений, как цирроз или карцинома. Вирус передается преимущественно через жидкости организма и плохо поддается лечению. Его носителями в настоящее время считаются 500 млн людей.
Положительный анализ на гепатит С предполагает наличие соответствующего РНК-вируса в крови больного. Присутствие Anti-HCV и HCV IgG в организме, выявляемое качественными методами тестирования, говорит об острой стадии болезни. Количественные методы определения РНК методом ПЦР используются для оценки результативности терапии. Для генотипирования вируса и выбора тактики лечения необходимо исследование на интерлейкин-28-бета. Для проверки скрининговых анализов при положительном результате используется тест на антитела – рекомбинантный иммуноблот для выявления IgG-антител к различным антигенам вируса гепатита С.
Гепатиты D, G . Активность вируса гепатита D зависит от наличия в организме вируса типа B. Заболевание протекает очень тяжело. Если заражение двумя типами вируса происходит одновременно, то у больного диагностируется патология в острой стадии, если же дельта-вирус (гепатит D) развивается на фоне уже имеющейся печеночной инфекции, то отмечается обострение заболевания. Гепатит G предположительно активизируется при наличии других типов инфекции, сам же он не вызывает активную форму болезни.
Лабораторное тестирование предусматривает выявление РНК-цепочек вирусов, а также выявление антител класса IgM, позволяющих отличить острую форму заболевания от хронической. Эти исследования являются качественными.
Гепатит E по своему течению имеет сходство с вирусом типа А. Он передается через жидкости организма, сопровождается выраженным болевым синдромом и может принимать молниеносные формы. Эта патология особенно опасна для беременных женщин. У них болезнь может осложниться острой печеночной недостаточностью и энцефалопатией. В 20–30% случаев заболевание заканчивается смертью беременной. Если при лабораторном тестировании у пациента обнаруживаются антитела класса IgG и IgM, то это свидетельствует о патологии в острой стадии.
Биоматериал необходимо сдавать строго натощак. Также в течение суток перед посещением лаборатории следует воздерживаться от употребления жирной пищи и алкоголя. Результаты качественных тестов в большинстве случаев готовы уже через четыре часа после забора крови. На проведение количественного исследования может уйти до одного рабочего дня, не считая дня сдачи анализов.
Особенности расшифровки ответов зависят от типа исследования. Качественный тест позволяет установить факт наличия или отсутствия инфекции, а количественный дает возможность определить конкретную концентрацию исследуемого вещества. В некоторых случаях позитивным знаком является полное отсутствие антигена или белка, а в некоторых – содержание вещества в количестве ниже установленного уровня.
Если результаты оказались положительными, то пациенту рекомендуется повторно пройти обследование, так как в некоторых случаях ложноположительный ответ может объясняться нарушением техники проведения тестирования, некачественными реактивами, неправильной подготовкой к процедуре (проведением теста после приема пищи), чувствительностью и специфичностью метода исследования, точностью анализаторов. Позитивный результат также может наблюдаться у человека, который некоторое время назад переболел острой формой вируса или является его здоровым носителем.
Согласно постановлениям Главного государственного санврача РФ от 22.10.2013 г. № 58 и от 28.02.2008 г. № 14, а также приказу Управления Роспотребнадзора по г. Москве от 01.10.2008 г. № 122 сведения о положительных результатах исследований на маркёры вирусных гепатитов передаются в ОРУИБ центров Госсанэпиднадзора.
Для того чтобы пройти обследование, нужно предъявить сотруднику диагностической лаборатории паспорт или документ, заменяющий его. Документ должен содержать информацию об адресе регистрации больного, а также его фотографию. При желании пациент может пройти тестирование анонимно, но подобные результаты не принимаются для оказания медпомощи.
При получении положительного ответа больной должен обратиться к врачу-инфекционисту, который назначит дополнительные исследования с целью подтверждения диагноза. Во время терапии тестирование может проводиться раз в 3 дня с целью отслеживания динамики состояния больного и эффективности лечения. При хроническом гепатите анализы сдаются каждые 6 месяцев с целью контроля состояния пациента.
Полное излечение возможно при своевременном проведении и правильно выбранной тактике терапии. Эффективность лечения зависит от конкретной инфекции, стадии болезни и общего состояния больного. Необходимость госпитализации определяется индивидуального для каждого пациента, в зависимости от тяжести его состояния. После выздоровления у человека сохраняются антитела, обеспечивающие ему пожизненный иммунитет либо устойчивый иммунный ответ на несколько лет, что зависит от многих факторов: возраста, индивидуальных особенностей организма и других.
Ошибочные результаты нередко фиксируются при использовании некачественных реактивов, проведении исследования на устаревшем оборудовании или нарушении технологии тестирования. Иногда точность метода исследования предполагает определенный процент ошибки. Ложноотрицательный ответ возможен при тестировании на слишком ранней стадии заболевания, когда антитела еще не начали вырабатываться в нужном количестве, ложноположительный – на последней стадии острого гепатита, в период выздоровления.
В государственных клиниках по направлению врача можно сдать анализ на гепатит бесплатно. Исследование на платной основе проводится в большинстве крупных городов страны. Цена зависит от конкретной лаборатории, используемого оборудования, сроков проведения, типа теста, региона и ряда других факторов.
Качественный тест на антитела к РНК- и ДНК-вирусу можно сделать в Москве и Санкт-Петербурге по цене 550–900 рублей. Стоимость количественного исследования варьируется в пределах 1200–10 000 рублей в зависимости от конкретного антигена, метода исследования, класса медицинского оборудования. Например, оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени, необходимая для определения эффективности лечения гепатита С, обойдется в 17 000–22 000 рублей. Выявление антигенов качественным методом в таких городах, как Новосибирск, Мурманск, Кострома, Махачкала, Симферополь будет стоить 300–800 рублей.
Сдача анализа на гепатит позволяет оперативно выявить заболевание и начать его лечение. А своевременно проведенная терапия в большинстве случаев обеспечивает полное выздоровление пациента или подавление активности вируса. Одним из главных способов профилактики гепатита B (наряду с соблюдением правил гигиены, а также с избеганием беспорядочных половых связей и отказом от приема наркотиков) является вакцинация. Ее обязательно нужно проводить тем, кто находится на гемодиализе, часто меняет сексуальных партнеров, работает с кровью или проживает в одной квартире с лицами, страдающими хронической формой болезни. Самые эффективные вакцины – отечественные. Они прицельно рассчитаны на те штаммы (генотипы) вируса, которые преобладают в нашей стране. Кроме того, современные российские вакцины производят без консерванта, в основе которого содержится ртуть.
Если клинические симптомы указывают на функциональные нарушения печени, но исследование сыворотки крови на вирусные гепатиты дало отрицательный результат, дополнительно следует пройти УЗИ печени и желчевыводящих путей, а также сдать анализы на внутриклеточные ферменты АлАт и АсАт. Вы должны исключить не только инфекционную, но механическую природу повреждения печени, например, гепатозы различной этиологии.
Причина развития вирусного гепатита C – инфицирование возбудителем, который относится к семейству Flaviviridae. Между заражением и началом выработки антител выявляется длительный временной промежуток, что не позволяет своевременно диагностировать заболевание посредством иммуноферментного исследования крови.
Анализ ПЦР на гепатит C, биохимия, ОАК, печеночные пробы проводятся при подозрении на заражение. Путем полимеразной цепной реакции можно выявить вирус в крови даже на первой неделе инфицирования, что выступает доминирующим преимуществом метода.
Количественный и качественный анализ на гепатит C и особенности исследования, как нужно подготавливаться, бывают ли ошибки, расшифровка – рассмотрим подробно.
Что такое метод полимеразной цепной реакции?
Полимеразная цепная реакция – методика молекулярного исследования для определения генетического материала вирусного агента с первых дней инфицирования. Анализ характеризуется высокой степенью достоверности, специфичностью, точностью. Благодаря нему не только выявляют отсутствие/наличие вируса, но и вирусную нагрузку (количественное значение), генотип.
Для исследования необходима кровь больного, в которой предположительно находится РНК вирусной инфекции. В лабораторных условиях в биологическую жидкость добавляют праймеры – это синтезированные искусственным образом фрагменты искомого гена малой длины. Плюс РНК-полимеразу – специализированный фермент, многократно увеличивающий концентрацию искомого материала.
Далее кровь с добавлением компонентов нагревают и охлаждают несколько раз в специальном приборе. После идет анализ полученных результатов, сопоставление с известными генами вирусного агента. На основе этого делают заключение о заболевании.
Анализ на гепатит C ПЦР проводится в лаборатории с добавлением нужных реагентов, имеет три разновидности с отличительными характеристиками:
- Качественный ПЦР анализ на гепатит C является первым этапом исследования. Посредством него обнаруживают генетический материал возбудителя в сыворотке крови.
- Количественное исследование позволяет оценить вирусную нагрузку – это содержание вирусного материала в 1 мл крови больного. Проводится перед началом курса лечения, а потом после 1-4-12 недели терапии. Когда курс продолжительный, то исследование необходимо провести после 24 недели терапии, чтобы оценить результативность.
- Генотипирование. Заразное заболевание развивается стремительно, вирус имеет свойство мутировать. Поэтому необходимо выявить генотип вируса.
Ученые выявили 7 генотипов вируса. В РФ большую распространенность получили 1-2-3 виды.
Каждый из генотипов характеризуется устойчивостью к лечению.
Например, при 1-м типе результативность терапии около 60%, на фоне 2-3 вида показатель достигает 85%.
Чтобы подобрать нужные лекарства, продолжительность лечения, требуется выявить не только сам факт заражения, но и концентрацию вируса, его генотип.
Маркеры на гепатиты, ПЦР и ИФА, другие исследования имеют определенные медицинские показания:
- Когда в анамнезе больного ВИЧ-инфекция, СПИД.
- Контакт с зараженным человеком, поскольку вирусный гепатит отличается высокой степенью контагиозности.
- Симптоматика циррозного поражения печени – гепатомегалия, увеличение размеров селезенки, на животе проявился венозный рисунок и пр.
- Клиника функционального нарушения печени – периодическая/постоянная боль в области правого подреберья, пожелтение кожного покрова, тошнота.
- Высокие значения АСТ и АЛТ в биохимии крови.
- При беременности, когда плохие показатели печеночных проб.
- Перед началом противовирусного курса, чтобы определить вирусную нагрузку.
- Для контроля результативности проводимой терапии.
- После терапии, чтобы предупредить рецидив вирусной инфекции.
ПЦР проводится при подтвержденном диагнозе гепатита B, чтобы исключить смешанный вид поражения печени.
Как готовиться к анализу, расскажет доктор. Чтобы получить точный результат, пациенту рекомендуется подготовка. Она состоит в следующих рекомендациях:
- Анализ нужно сдавать утром, натощак. Допускается перед забором крови пить только чистую, негазированную воду. Последний прием пищи – за 8 часов до забора.
- Если не получается сдать анализ в утренние часы, это можно сделать вечером или в обед, главное – через 5-6 часов после приема пищи, не раньше.
- За 48 часов до исследования отказаться от алкогольной продукции, кофеинсодержащих напитков, соков.
- За 2 суток нужно соблюдать диету, исключив все вредные продукты. Однако некоторые врачи полагают, что жирная, жареная еда не сказывается на точности ПЦР исследования.
За 24 часа до медицинской манипуляции не принимать лекарства. Если это невозможно, сообщить лечащему врачу. Анализ не рекомендуется выполнять сразу же после УЗИ, КТ, массажа и др. физиотерапевтических процедур.
Забор крови происходит следующем образом:
- Посредством специального жгута, который затягивается на предплечье пациента, медик останавливает венозный кровоток. Вены становятся более заметными, что облегает процедуру введения иглы, последующего забора крови.
- Участок кожи перед введением стерильной иглы обрабатывают спиртосодержащей жидкостью.
- В вену вводят иглу, после к ней прикрепляют пробирку, в которую поступает кровь.
- После введения иглы жгут снимают. Набирают необходимое количество крови, извлекают иглу.
- К месту укола прикладывают ватку, смоченную в спирте.
Чтобы предупредить формирование синяка в месте введения иглы, необходимо ватный тампон достаточно сильно прижать к травмированной области, согнуть руку и держать в таком положении 3-4 минуты.
Если больной принимает лекарства, способствующие разжижению крови (Аспирин, Варфарин), могут быть определенные проблемы с остановкой кровотечения.
Преимущества ПЦР перед другими анализами
У метода полимеразной цепной реакции имеются определенные преимущества в сравнении с другими диагностическими методиками.
Плюсы исследования представлены в таблице:
Прямая диагностика возбудителя патологии | Другие исследования позволяют дать ответ – есть ли возбудитель в организме или нет. Но с помощью ПЦР методики можно конкретно установить вид вирусного агента. |
Специфичность исследования | ПЦР определяет уникальный фрагмент ДНК, который соответствует только одной разновидности вирусного агента. Это позволяет свести к минимуму вероятность ошибки. |
Высокая степень чувствительности | Можно выявить даже мизерную концентрацию вируса в крови. |
Определение всех возбудителей | Во время исследования можно обнаружить всех патогенных агентов. |
Скрыто протекающие инфекции | Кроме вирусного возбудителя можно выявить инфекции, которые имеют латентное течение, отличаются высокой антигенной активностью. |
Когда пациент получает положительный результат, это будет означать, что в биологической жидкости был обнаружен генетический материал возбудителя гепатита. Отрицательный итог – следы вируса отсутствуют.
Расшифровка результатов
Расшифровывать результаты должен доктор на основании заключения, которое пациент получает в лаборатории. Анализировать данные необходимо в совокупности с показателями биохимии, ОАК, УЗИ.
Качественное исследование будет показывать наличие либо отсутствие возбудителя вирусного заболевания в крови человека. Вариантов может быть два – отрицательный (норма) либо положительный результат.
В бланке иногда написано: обнаружено или не обнаружено.
Положительный результат – лаборант выявил в крови больного генетический материал вирусного агента, заражение подтверждено. Отрицательное заключение – заражения нет, фрагменты РНК вируса находятся ниже пределов чувствительности.
Количественный анализ подразумевает несколько вариантов результатов. Для удобства ознакомления представим их в виде таблицы.
Результат | Расшифровка |
Отрицательно | Это норма для здорового человека. Значит, в исследуемом биологическом материале нет РНК вирусного гепатита, либо содержание меньше порогов восприимчивости. |
До 1,8*10^2 МЕ/мл | Говорит о том, что содержание РНК меньше диапазона количественного определения. Интерпретировать такой результат надо осторожно, потому что он считается спорным. Дополнительно проводятся другие исследования для последующего сопоставления. Также проводят повторно ПЦР-тест. |
До 8*10^5 МЕ/мл | Низкая вирусная нагрузка. Как правило, такой результат значит, что проводимое лечение эффективно. |
От 8*10^5 МЕ/мл | Высокая вирусная нагрузка. Незамедлительно требуется терапия (если не проводится), либо необходима коррекция медикаментозных назначений. |
2,4*10^7 МЕ/мл | РНК больше верхнего максимума количественного определения. На фоне такого результата о вирусной нагрузке не судят. Требуется повторное исследование с разведением образца биологической жидкости. |
Результат – обнаружена рибонуклеиновая кислота конкретного генотипа. Дополнительно указывают генотип и подтип, лаборант кодирует заключение латинскими буквами и цифрами. Например, генотип 1a. Всего выделяют 7 генотипов, 67 подтипов.
Результат – обнаружена РНК вирусного гепатита C – это ДНК редкого генотипа, который нельзя отнести к распространенным вирусным агентам, поэтому требуется провести дополнительную диагностику.
Расшифровывает заключение лаборанта гепатолог либо инфекционист. Всегда есть риск получения ложноотрицательного или ложноположительного результата. Иногда бывает, что ПЦР отрицательно, а ИФА положительно.
Это означает, что в данный момент вируса в крови больного нет, однако заболевание в острой форме им перенесено. Принято считать, что ИФА показывает антитела, которые продуцируются иммунной системой после вторжения в организм возбудителя.
ИФА в сравнении с ПЦР отличается малой надежностью и достоверностью, поэтому используется в качестве первичного скрининга. При диагностике вирусного гепатита без полимеразной цепной реакции не обойтись.
Стоимость исследования на гепатит С
Сдать анализы можно в больнице, где больной наблюдается, если там имеется своя лаборатория, либо обратиться в частный центр на платной основе.
В короткие сроки получить результат можно в лабораторных центрах как Гемотест, Инвитро, Хеликс.
Стоимость исследования в зависимости от лаборатории:
Название лабораторной службы | Ценовая политика |
Хеликс | · Стоимость забора биологического материала – 170 рублей.
· Качественное + количественное исследование методом ПЦР – 3990 рублей. · Выявление антител вирусной болезни – 1500 рублей (срок 2-3 дня). · Проверка активности вируса перед началом курса терапии – 4090 рублей. |
Инвитро | · Количественное выявление РНК вируса гепатита C посредством ПЦР – 3140 рублей.
· Забор биологического материала (венозной крови) – 199 рублей. · Оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени – 18 000 рублей. · Качественный ультрачувствительный тест – от 3000 рублей. · Проведение генотипирования – от 1250 рублей. |
Гемотест | · Цена количественного исследования 2200 рублей.
· Качественная диагностика от 700 рублей. · Определение РНК возбудителя – от 4000 рублей. · Забор крови из вены около 150 рублей. |
Срок проведения исследования в среднем 2-3 дня. В некоторых лабораториях имеется услуга как срочный анализ, его стоимость в 1,5-2 раза выше. Также есть возможность вызвать медицинского специалиста домой, чтобы сдать кровь, а результаты получить по электронной почте либо лично при обращении в лабораторию.
Читайте также: