Серологическое исследование кала на ротавирусы что это
Комплексное молекулярно-генетическое исследование для выявления и дифференциации наиболее распространенных возбудителей острых кишечных инфекций (ОКИ) – ротавирусы группы А (Rotavirus), норовирусы 2 генотипа (Norovirus 2 генонотип), астровирусы (Astrovirus). Исследование позволяет выявить генетический материал (РНК) возбудителей в кале и установить этиологию заболевания. Данные патогены являются основной причиной наиболее тяжелого гастроэнтерита у детей грудного и раннего возраста, а также у взрослых.
Анализ качественный - по каждому виду инфекции выдается результат "обнаружено/не обнаружено".
Скрининг на кишечные инфекции: ротавирус, норовирус, астровирус.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
ПЦР в режиме реального времени.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
- Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
Общая информация об исследовании
Острые кишечные инфекции (ОКИ) – группа заболеваний, обусловленных вирусами, бактериями или паразитами, для которых характерен фекально-оральный механизм передачи. Общими для данных инфекций являются факторы передачи: пищевые продукты, вода, инфицированные бытовые предметы и грязные руки. Первые симптомы возникают через несколько часов или дней после инфицирования, начало резкое, с появлением частого жидкого стула, рвоты, боли в животе, признаков интоксикации (лихорадки, озноба, тошноты). Заболевание может носить групповой характер и проявиться у нескольких человек, употреблявших инфицированную пищу или воду.
Согласно официальной статистике, в России до 65-67% заболеваний этой группы составляют ОКИ неуточненной этиологии. Если возбудитель инфекции неизвестен, эффективность противоэпидемических мероприятий ограничивается. Соотношение частоты выявления вирусных и бактериальных патогенов варьируется в разных возрастах: у детей до 3 лет на долю вирусных агентов приходится 80-90% заболеваний, на долю бактериальных – 10-20%; среди взрослых пациентов доля вирусных возбудителей снижается до 30%.
Ротавирусная инфекция – это острое вирусное заболевание, передающееся фекально-оральным путем. Его возбудителями являются РНК-содержащие ротавирусы (Rotavirus). Источник инфекции – больной человек.
Для ротавирусов характерна сезонность: чаще всего ими заражаются в холодное время года. Инкубационный период длится от 15 часов до нескольких суток, начало заболевания острое, с тошнотой, рвотой, диареей, иногда лихорадкой. Если болезнь не лечить, к ним могут добавиться обезвоживание и нарушение электролитного и кислотно-щелочного баланса. Хотя иногда ротавирусная инфекция протекает бессимптомно. После перенесенного заболевания иммунитет нестойкий, поэтому возможен рецидив.
В соответствии с данными зарубежной литературы, норовирус – наиболее частый возбудитель вспышек ОКИ небактериальной этиологии. Эта особенность связана с низкой инфицирующей дозой и высокой устойчивостью в окружающей среде. ПЦР является "золотым стандартом" в клинической диагностике норовирусных инфекций.
Норовирус (Norovirus) – это РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Caliciviridae и приводящий к возникновению желудочно-кишечной инфекции в форме острого гастроэнтерита. Норовирусы классифицируются на шесть геногрупп: GI – GVI. В соответствии со сложившейся номенклатурой, известно около 38 генотипов данных вирусов. Для человека наиболее патогенными являются норовирусы GI, GII, GIV. По современным литературным данным, самой распространенной геногруппой в инфицировании человека является геногруппа GII. Она содержит до 19 генотипов и генотипы GII.3, GII.6, GII.12 ассоциированы с передачей инфекции через продукты питания. Норовирусная инфекция является высококонтагиозным заболеванием и может протекать в виде единичных случаев, групповых случаев и вспышек. Данный возбудитель является причиной возникновения более 90% небактериальной природы и около 50 % всех случаев гастроэнтеритов. К инфекции восприимчивы люди всех возрастных групп, но чаще описываются случаи заболевания у детей школьного возраста и взрослых.
Несмотря на несколько меньшую в сравнении с рота- и норовирусами распространенность, астровирусы составляют значительный пласт кишечных инфекций, у трети пациентов протекающий с явлениями колита. Ротавирусы группы А являются наиболее частой причиной спорадических заболеваний ОКИ у детей, а ДНК-содержащий аденовирус F (серотипы 40 и 41) нередко вызывает вспышки гастроэнтеритов у детей младшего возраста.
Астровирусная инфекция – это острое вирусное заболевание с фекально-оральным путем передачи. Его возбудителями являются РНК-содержащие астровирусы (Astrovirus). Пик заболеваемости приходится на холодное время года. Инкубационный период составляет 3-4 дня. Инфекция проявляется в виде острого гастроэнтерита (общее недомогание, головная боль, тошнота, диарея, небольшое повышение температуры, иногда рвота) и чаще развивается у детей (особенно в возрасте до 2 лет), однако может встречаться и у взрослых. Она напоминает ротовирусную инфекцию, однако протекает легче. Заболевание длится, как правило, не более 5 дней, специфического лечения не требует и заканчивается выздоровлением.
Нередко астровирусная инфекция протекает бессимптомно. Выделение вируса с калом происходит в течение 3 недель с момента заражения, поэтому выявление возбудителя методом ПЦР рекомендуется проводить именно в это время.
Для выявления и дифференциальной диагностики кишечных инфекций используются культуральные и молекулярно-генетические методы исследования генетического материала возбудителя в кале и определение концентрации специфических иммуноглобулинов в крови. ПЦР обладает преимуществом перед культуральными методами благодаря высокой специфичности и чувствительности исследования. Данный анализ позволяет со 100-процентной точностью определить возбудителя кишечного заболевания, а быстрая диагностика острых кишечных инфекций помогает избежать лишних процедур и оперативных вмешательств, своевременно начать лечение и ограничить очаг распространения инфекции.
Для чего используется исследование?
- Для установления этиологического фактора острой кишечной инфекции;
- для дифференциальной диагностики причин острого гастроэнтероколита (воспаления ЖКТ).
Когда назначается исследование?
- Установление этиологического фактора острой кишечной инфекции;
- дифференциальная диагностика причин острого гастроэнтерита;
- дифференциальная диагностика причин острой диареи;
- при симптомах вирусного гастроэнтерита (боли в животе, диарея, рвота, метеоризм, лихорадка);
- одновременное или последовательное развитие ОКИ у нескольких членов семьи, у детей в детском учреждении или пациентов в стационаре;
- "обострение" симптоматики ОКИ у госпитализированного с этим диагнозом пациента (внутрибольничная инфекция);
- по эпидемиологическим показаниям.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено.
Norovirus 2 генотип
Анализ результатов проводят с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР c детекцией в режиме "реального времени".
- инфекция вызвана соответствующим патогеном.
- отсутствие РНК возбудителя в исследуемом материале;
- уровень РНК в исследуемом материале ниже пределов детекции метода.
24 Острые кишечные инфекции, скрининг (Shigellaspp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 генотип, Astrovirus)
82 Yersinia pseudotuberculosis, ДНК [ПЦР]
11 Посев кала на условно-патогенную флору с определением чувствительности к антибиотикам
Кто назначает исследование?
Инфекционист, педиатр, гастроэнтеролог, эпидемиолог.
Ротавирусная инфекция относится к категории острых заболеваний, которая характеризуется наличием симптомов такой болезни, как гастроэнтерит. Болезнь передается фекально-оральным способом. Для максимально точного определения этого недуга необходимо провести соответствующие анализы. В данном случае медики существенную роль отдают анализу кала.
Ротавирусная инфекция: причины
Что такое ротавирусная инфекция: описания и причины
Ротавирусная инфекция наиболее часто развивается у детей. Это объясняется тем, что у них очень плохо развита иммунная система . возникновение заболевания у детей и взрослых наблюдается при паразитировании в их организме ротавируса, который характеризуется устойчивостью к воздействиям окружающей среды.
Наиболее часто заболевание фиксируется у детей от 6 месяцев до 12 лет. В возрасте постарше иммунитет ребенка достаточно хорошо выработан, что позволяет ему защищать организм от воздействия ротавирусов.
Ротавирусная инфекция относится к категории заболеваний, которые возникают в результате грязных рук.
После однократного перенесения ребенком болезни производится выработка иммунитета. Поэтому ребенку будет намного легче перенести последующее заболевание.
Основные симптомы заболевания
Ротавирусная инфекция характеризуется наличием инкубационного периода, длительность которого составляет всего лишь два дня. После этого наступает острый период, который продолжается 4 дня. Далее наблюдается протекание реконвалисценции, длительность которой составляет 7 дней. В общем заболевание длиться от 12 дней до двух недель.
При развитии этого недуга наиболее часто наблюдается лихорадка. У больных ротавирусной инфекцией наблюдают неукротимую рвоту.
Во время протекания данного недуга некоторые пациенты жалуются на появление многослойного водянистого стула, для которого характерно наличие кислого запаха.
В некоторой группы пациентов возникают самостоятельные спастические болевые ощущения в области живота, которые появляются во время акта дефекации.
У больного даже на большом расстоянии можно услышать урчания в животе. Определенная группа пациентов говорит о том, что у них появляется ощущение вздутия. Человек в период протекания болезни вообще не имеет аппетита, становится вялым. Основным признаком данного заболевания является недомогание.
К симптомам болезни также относят:
- Болевые ощущения в области горла
- Ринит
- Бледные и сухие слизистые оболочки
- Конъюктивное воспаление
При осмотре больного врачи замечают наличие специфического на языке. В очень частых случаях при развитии ротавирусной инфекции наблюдается воспалительный процесс в области миндалин.
Если заболевание приобретает тяжелый характер, то у больного теряется вес, западают глаза, отсутствуют слезы и т.д. При осмотре больного наблюдается тахикардия, понижение артериального давления. В этот период пациенты жалуются на появление сильной жажды и слабости. Симптоматика ротавирусной инфекции очень большая. Не заметить ее достаточно сложно. При появлении первых симптомов болезни пациенту необходимо в обязательном порядке обратиться за помощью к врачу.
Диагностика: анализ кала
Анализ кала на ротавирусную инфекцию: подготовка и сбор материала
Самым необходимым лабораторным тестом при развитии этой болезни является анализ кала. Его назначение делают при поносе, повышении температуры тела, рвоте, тошноте.
У маленьких детей во время протекания заболевания может наблюдаться сильная рвота и понос, что очень часто приводит к обезвоживанию организма. Если у пациента возникают подозрение на появление ротавирусной инфекции, то ему необходимо обратиться в медицинское учреждение для проведения соответствующих анализов.
Самое большое количества вирусов в кале больного наблюдается через три или пять дней после заражения ротавирусом. Далее наблюдается снижение его концентрации и выведение из организма больного. Перед проведением анализа кала проводить специальную подготовку не нужно.
Для обеспечения максимально правильных результатов не стоит собирать образцы после приема слабительных, использования клизм и ректальных свечей больным.
Во время сбора материала использование туалетной бумаги категорически запрещается. Кал, который будет сдаваться на анализы, не должен контактировать с уриной человека или унитазом. В противном случае полученные в результате исследования анализы не будут иметь положительного результата. Для того чтобы провести анализ хватит всего лишь 1-2 грамма материала.
Больше информации о ротавирусной инфекции можно узнать из видео.
После сбора кала производится его транспортировка в место сдачи анализов. С этой целью наиболее часто используют специальный контейнер, который изготовлен из пластика. Доставка материала в лабораторию должна производится в день его сбора. Если вы сможете отвезти материал только через несколько часов, тогда сохранить материал вы сможете в холодильнике. На контейнере должна быть специальная наклейка с фамилией больного и временем сбора материала.
Сбор образцов кала при ротавирусной инфекции производится достаточно просто. Выполнить это сможет любой пациент. При сборе материала необходимо быть максимально аккуратным, что обеспечит высокую точность результатов анализов.
Расшифровка анализов кала на ротавирусную инфекцию
Во время расшифровки результатов анализа выявляют антиген ротавирусов VP6, которые относятся к группе А. Для проведения анализов может использоваться один из нескольких наборов, которые характеризуются высокой результативностью.
При интерпретации результатов анализов в обязательном порядке производится с учетом симптоматики заболевания и особенностей его протекания. Во время обработки результатов возможно получение ложноположительного, положительного, ложноотрицательного и отрицательного результатов. При получении ложноположительного или ложноотрицательного результата пациенту необходимо обязательно пройти повторное исследование.
При отсутствии ротавирусной РНК результат – отрицательный, а при наличии – положительный.
Ложноположительным является тот результат, который имеется в результате расшифровки анализов, а на самом деле в организме пациента он отсутствует. Ложноотрицательным результатом является то понятие, при котором в организме пациента вирус отсутствует, а на самом деле он имеется в организме.
Расшифровка результатов анализов на ротавирусную инфекцию производится только медицинскими работниками с соответствующей квалификацией.
Анализ на ротавирусную инфекцию в ряде случаев не показывает ее наличие, но симптоматика заболевания у пациента все же имеется. Это говорит о том, что у него протекает другая болезнь, которая схожа с ротавирусной инфекцией по своим признакам. Очень часто при обыкновенной диареи, которая сочетается с ОРВИ, предварительно диагностируют данное заболевание.
Очень часто ротавирусную инфекцию путают с ангиной. Причиной этому может быть покраснение миндалин. При подозрение на наличие данного заболевания у пациента также может протекать острое респираторное заболевание, которое характеризуется отсутствием кашля и соплей. Резкое повышение температуры тела может объясняться протеканием у пациента инфекционного заболевания.
Данное заболевание является достаточно специфичным, которое наиболее часто протекает у детей. При появлении первых симптомов болезни необходимо сдать анализы кала. Это позволит медикам правильно поставить диагноз и назначить максимально рациональное лечение.
Стоимость услуги: | 650 руб.* 1300 руб. Заказать Срочно |
Условия подготовки определяются лечащим врачом.
Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов.
Кал собирается после естественной дефекации на чистый лист бумаги или в чистую ёмкость (ёмкость предварительно вымыть с мылом, обдать кипятком, и высушить). Нельзя отбирать пробу из унитаза. Испражнения собираются специальной лопаточкой из разных мест, вмонтированной в крышку контейнера, в объёме примерно с грецкий орех.
Для исследований предпочтительно использовать утреннюю порцию фекалий. Следует избегать попадания кусочков непереваренной пищи и мочи. Крышку контейнера плотно закрутить.
Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.
Метод исследования: иммунохроматографический экспресс-тест.
Ротавирусы (Rotavirus) из семейства Реовирусов (Reoviridae), распространенная во всем мире инфекция, является причиной развития диарейного синдрома у детей. Начинается, как правило остро; однократной рвотой, диареей с внезапными частыми позывами по типу императивных, повышением температуры (в 20-30% случаев, температура редко превышает субфебрильные цифры). Стул имеет выраженный энтеритный характер (жидкий, водянистый, зловонный, пенистый) иногда зеленоватого или желто-зеленого цвета. При легких формах ротавирусной инфекции стул может быть кашицеобразным, 1-2 раза в сутки, при тяжелых формах – холероподобный. В начале инфекции появляются признаки поражения респираторного тракта, при осмотре можно отметить покраснения в горле, пациенты жалуются на боли при глотании, насморке. Как и при многих других вирусных инфекциях развивается интоксикация, пациенты отмечают отсутствие сил, слабость, вялость, плохой аппетит. Заболеванию подвержены не только маленькие дети до 3-4 лет, заразиться ротавирусом могут дети старшего возраста, подростки и взрослые. Благодаря более эффективной работе иммунитета, большему количеству иммуноглобулинов А, более низкому pH желудочного сока, инфекция у взрослых может протекать в виде слабого кишечного расстройства. Заболевание обычно протекает благоприятно, редко продолжается более 5-7 дней. Опасность поражения ротавирусом у маленьких детей, стариков и людей с плохим иммунитетом, заключается в риске развития тяжелого дегидратационного синдрома и летальным исходом.
Чувствительность и специфичность.
- Чувствительность >99%
- Специфичность >98%
Показания к исследованию
- первичная диагностика инфекции, особенно среди детей с наличием диарейного синдрома;
- скрининговое исследование в местах вспышек ОКИ;
- обследование взрослых с диарейным синдромом.
Интерпретация результатов
Пример результата (вариант нормы):
Параметр | Референсные значения |
---|---|
Ротавирус (Rotavirus), качественное определение антигена (иммунохроматографический экспресс-метод) | Не обнаружено |
Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.
" ["serv_cost"]=> string(3) "650" ["cito_price"]=> string(4) "1300" ["parent"]=> string(2) "25" [10]=> string(1) "1" ["limit"]=> NULL ["bmats"]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) "Y" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(6) "Кал" > > >
Тип | В офисе |
---|---|
Кал |
Условия подготовки определяются лечащим врачом.
Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов.
Кал собирается после естественной дефекации на чистый лист бумаги или в чистую ёмкость (ёмкость предварительно вымыть с мылом, обдать кипятком, и высушить). Нельзя отбирать пробу из унитаза. Испражнения собираются специальной лопаточкой из разных мест, вмонтированной в крышку контейнера, в объёме примерно с грецкий орех.
Для исследований предпочтительно использовать утреннюю порцию фекалий. Следует избегать попадания кусочков непереваренной пищи и мочи. Крышку контейнера плотно закрутить.
Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.
Метод исследования: иммунохроматографический экспресс-тест.
Ротавирусы (Rotavirus) из семейства Реовирусов (Reoviridae), распространенная во всем мире инфекция, является причиной развития диарейного синдрома у детей. Начинается, как правило остро; однократной рвотой, диареей с внезапными частыми позывами по типу императивных, повышением температуры (в 20-30% случаев, температура редко превышает субфебрильные цифры). Стул имеет выраженный энтеритный характер (жидкий, водянистый, зловонный, пенистый) иногда зеленоватого или желто-зеленого цвета. При легких формах ротавирусной инфекции стул может быть кашицеобразным, 1-2 раза в сутки, при тяжелых формах – холероподобный. В начале инфекции появляются признаки поражения респираторного тракта, при осмотре можно отметить покраснения в горле, пациенты жалуются на боли при глотании, насморке. Как и при многих других вирусных инфекциях развивается интоксикация, пациенты отмечают отсутствие сил, слабость, вялость, плохой аппетит. Заболеванию подвержены не только маленькие дети до 3-4 лет, заразиться ротавирусом могут дети старшего возраста, подростки и взрослые. Благодаря более эффективной работе иммунитета, большему количеству иммуноглобулинов А, более низкому pH желудочного сока, инфекция у взрослых может протекать в виде слабого кишечного расстройства. Заболевание обычно протекает благоприятно, редко продолжается более 5-7 дней. Опасность поражения ротавирусом у маленьких детей, стариков и людей с плохим иммунитетом, заключается в риске развития тяжелого дегидратационного синдрома и летальным исходом.
Чувствительность и специфичность.
- Чувствительность >99%
- Специфичность >98%
Показания к исследованию
- первичная диагностика инфекции, особенно среди детей с наличием диарейного синдрома;
- скрининговое исследование в местах вспышек ОКИ;
- обследование взрослых с диарейным синдромом.
Интерпретация результатов
Пример результата (вариант нормы):
Параметр | Референсные значения |
---|---|
Ротавирус (Rotavirus), качественное определение антигена (иммунохроматографический экспресс-метод) | Не обнаружено |
Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.
Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 - 2020
! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.
Ротавирус предается через грязные руки фекально-оральным путем. Его без затруднений можно обнаружить в кале у детей. Паразитирует исключительно в эпителии тонкого кишечника. Источник инфекции – человек.
Клинико-диагностический метод
Диагноз ротавирусной инфекции поставить по симптомам невозможно. Можно только предположить о развитии этого заболевания. В определении развития любой инфекционной болезни важен сбор анамнеза (опрос). Врач обязан подробно выяснить, как развивалась болезнь у ребенка:
- когда родители впервые заметили ухудшение состояния малыша;
- какими были первые признаки, этиология – острое начало или постепенное развитие;
- выяснение вероятного источника инфекции, механизм заражения и пути передачи инфекции.
Правильный сбор эпидемиологических данных позволит предположить зарождение и развитие инфекции.
Признаки, характерные для ротавируса:
- в 95% случаев болеют дети от 6 месяцев до 2 лет;
- инкубационный период до 4 дней;
- начало болезни – однократная рвота и незначительное повышение температуры
- затем развивается очень жидкий, водянистый стул;
- в каловых массах никогда не содержатся примеси крови.
Правила забора кала на ротавирусную инфекцию
Для того чтобы результаты исследования были максимально достоверными, необходимо собрать каловые массы следуя определенным правилам. У грудничков кал на ротавирус собирают из подгузника после опорожнения кишечника.
Если ребенок уже пользуется горшком, то перед тем как усадить малыша, нужно провести дезинфекцию. Для этого горшок обдают кипятком несколько раз. На его стенках не должно остаться следов синтетических моющих и обеззараживающих средств.
Кал необходимо собрать сразу после дефекации чистым шпателем, если стул жидкий, можно просто вылить содержимое горшка в емкость для отправки в лабораторию. Общий объем каловых масс не должен превышать 20-30 мл. Тара для биологического материала должна плотно закрываться крышкой.
Для исследования необходимо забирать ту часть кала, где больше всего содержится патологических примесей – слизь, фибриновые пленки, гной, подозрительные частицы. Чем быстрее собрать анализ кала на ротавирус и отправить его в лабораторию, тем достовернее будет результат.
Методы исследования каловых масс на ротавирус
Ротавирусную инфекцию диагностируют несколькими способами. Их цель – определение самого вируса, антигенов к нему, обнаружение вирусной РНК. Серологические методы позволяют поставить точный диагноз за один день.
Это вид серологической диагностики, который широко применяют при инфекционных болезнях. Основан на реакции антиген-антитело. Для этого применяют специальный антиген, который представлен взвесью микроорганизмов, чувствительных эритроцитов и частиц латекса. При взаимодействии взвеси с антителами образуется комплекс, который выпадает в осадок, что свидетельствует о наличии ротавирусной инфекции.
Анализ на реакцию антиген-антитело состоит из двух этапов. Сначала происходит ферментативная реакция, затем – иммунный ответ. Принцип метода – связывание антитела с антигеном.
На специальном устройстве сорбируются антитела. Затем с ними связываются целевые антигены. Это все промывается специальным раствором. Затем наносятся антитела, помеченные специфическим ферментом. Делают еще одну промывку. Формируется комплекс из антигена и двух антител. Затем содержимое окрашивают. Чем интенсивнее цвет в образце, тем большее количество ротавируса находится в каловых массах.
Это реакция нейтрализации вирусов, которая проводится для их идентификации, а также для серологической диагностики вирусных инфекций. Принцип такого тестирования основан на развитии в организме иммунных реакций при заражении.
Для оценки клеточных реакций проводят тесты клеточной токсичности лимфоцитов относительно инфекционных агентов. Определяют способности лимфоцитов на ответную реакцию. Так идентифицируются противовирусные антитела. Реакция делается путем смешивания неизвестного вируса с антисывороткой.
Выбор методов диагностики зависит от каждого конкретного случая. Для лабораторных исследований забирают кал и кровь. Основные диагностические способы определения инфекции:
- РДП – реакция диффузной преципитации.
- Твердообразная реакция коагглютинации.
- РПГ – реакция пассивной агглютинации.
- Иммунофлюоресцентный анализ.
- Радиоиммуный анализ.
- Выделение вируса в культуре клеток.
- ПЦР – полимеразная цепная реакция.
- Электрофорез ротавирусной РНК.
- Метод точечной гибридизации.
- РТГА – реакция торможения гемагглютинации.
- РНГА – реакция непрямой гемагглютинации.
Дифференциальный тест на ротавирусную инфекцию проводят тем пациентам, у которых есть другие острые кишечные инфекции (бактериальные и вирусные). Такая диагностика показана тогда, когда в симптоматике на первый план выходят признаки гастроэнтерита:
- пищевые токсикоинфекции;
- холера;
- острая дизентерия;
- вирусная диарея – аденовирус, астровирус, энтеровирусы ЕСНО и коксаки, вирус норфолк;
- сальмонеллез;
- эшерихиоз.
Определение ротавирусной инфекции в домашних условиях
Если нужно сделать срочный анализ или провести диагностику самостоятельно (в случае если состояние ребенка удовлетворительное и не требует госпитализации), делают тест на ротавирус в домашних условиях. Он не трудоемкий и требует минимальных временных затрат. С его помощью можно 100% определить наличие патогенного микроорганизма в каловых массах.
Иммунохроматографический экспресс-тест на ротавирус основан на применении моноклональных и поликлональных мышиных антител к вирусному антигену. Антитела соединены с красителем и расположены на мембране тестовой кассеты. Тест имеет высокую степень специфичности и чувствительности.
Что входит в состав тест-системы:
- кассеты для теста – 20 шт.;
- одноразовые пипетки – 20 шт.;
- пластиковые пробирки, содержащие по 2 мл экстрагента, – 20 шт.;
- аппликаторы для забора материала – 20 шт.;
- инструкция по использованию тест-системы.
Нельзя использовать систему, если нарушена целостность ее упаковки или истек срок годности. Во время проведения теста пользоваться одноразовыми перчатками.
Кал для исследования берется только после проявления симптомов болезни. Наиболее точные результаты исследования бывают на 3-5 день заболевания.
Приготовление экстрагированной пробы: открыть пластмассовую пробирку и с помощью аппликатора внести в нее кал размером с горошину, затем плотно закрыть и встряхивать до полного растворения кала в экстрагенте. Затем пробирка должна отстояться до того времени, пока крупные частицы не осядут на дно. Для проведения теста реагент должен быть комнатной температуры.
Как проводится тест: достать из упаковки кассету, открыть пробирку с биоматериалом. С помощью пипетки в лунку для проб капнуть 6 полных капель, постепенно давая впитываться каждой предыдущей капле. Максимальное время, сколько готовится результат, составляет 10 минут.
- одна полоска в районе контрольной зоны (С) – результат отрицательный, кал не содержит ротавирус;
- одна цветная полоска в контрольной зоне и одна полоска (четко различимая) в тестовой зоне – результат положительный, в пробе содержится ротавирус;
- если в контрольной зоне отсутствует полоса – тест неопределенный, выполнен некачественно, с нарушением инструкции, необходимо провести повторный анализ с использованием другой тест-кассеты.
Тест подходит только для определения ротавирусной инфекции в каловых массах. Если в испражнениях содержится кровь, это может дать ложноположительный результат.
Ротавирусной инфекцией болеет 100% населения в детском возрасте. Опасность эта патология представляет только для младенцев и детей до 3 лет. Для ребенка она опасна такими осложнениями, как сильное обезвоживание и поражение нервной системы – судороги, вплоть до остановки дыхания. Поэтому важна своевременная и точная диагностика ротавируса, ее дифференциация с другими инфекционными болезнями.
Читайте также:
- Вирус папилломы человека это венерологическое заболевание или нет
- Для чего принимают противовирусные препараты
- Защита от вирусов и программных закладок
- Защита html от вируса
- Лечение от сетевого вируса